摘要
[目的]探讨 C反应蛋白（CRP）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人外周血单核细胞分泌妊娠相关血浆蛋白-A （PAPP-A）的影响。[方法]采用密度梯度离心法分离及培养人外周血单核细胞，超敏ELISA法测定CRP或rhTNF-α刺激单核细胞后细胞上清液中PAPP-A的含量，Trans AMTM 技术检测CRP或rhTNF-α对单核细胞NF-κB活性的影响，并与空白对照组比较。同时观察给予核因子-κB （NF-κB）抑制剂 BAY11-70682预处理后，CRP 或 rhTNF-α对单核细胞合成分泌PAPP-A的影响。[结果]与空白对照组细胞上清液中PAPP-A含量（1．1＆#177;0．1） mIU/L相比，CRP（20 mg/L）刺激单核细胞2h后，PAPP-A含量开始显著增加（2．2＆#177;0．2）mIU/L，在24h达最高值（9．8＆#177;0．5）mIU/L（P ＜0．05），呈时间依赖性。给予rhTNF-α（100 ng/mL）刺激后，细胞上清液中PAPP-A含量在8 h达到高峰（14．5＆#177;1．1） mIU/L（ P ＜0．05），24h（11．7＆#177;0．9）mIU/L仍高于空白对照组（ P ＜0．05）。CRP和 rhTNF-α均呈剂量依赖性增加细胞上清液 PAPP-A 含量。CRP和rhTNF-α可增加单核细胞的磷酸化 NF-κB p65水平[分别为（0．88＆#177;0．06） mg/L、（1．06＆#177;0．12） mg/L]，显著高于对照组（0．35＆#177;0．04） mg/L（ P ＜0．05）。给予BAY11-70682预处理后，CRP和 rhTNF-α诱导单核细胞 NF-κB活性增加和分泌PAPP-A的作用受到抑制。[结论]CRP和TNF-α能促进人外周血单核细胞合成分泌PAPP-A ，其作用与NF-κB信号通路的激活有关。这可能是急性冠脉综合征患者血清PA PP-A升高的机制。
[Objective]To explore the effect of C-reactive protein（CRP） and tumor necrosis factor-α（TNF-α） on pregnancy associated plasma protein-A （PAPP-A ） secreted by human peripheral blood monocytes .[Methods] Human peripheral blood monocytes were isolated and cultured by using density gradient centrifugation .After monocytes were stimulated by CRP or rhTNF-α,supersensitive enzyme linked immunosorbent assay （ELISA） was used to detect the level of PAPP-A in supernatants . The effect of CRP or rhTNF-αon nuclear factor-κB（NF-κB） in monocytes was measured by TransAMTM technique ,and com-pared with control group .Meanwhile ,the effect of CRP or rhTNF-αon PAPP-A secreted by monocytes after NF-κB inhibitor BAY11-70682 treatment was observed .[Results]Compared with control group（1 .1 ＆#177; 0 .1mIU/L） ,PAPP-A level in culture su-pernatantsaftermonocytesstimulatedwithCRP（20mg/L）for2hbegantoincreasesignificantly（2.2＆#177;0.2mIU/L）andupto the peak value（9 .8 ＆#177; 0 .5mIU/L） after 24h in a time-dependent manner（ P ＆lt;0 .05） .After rhTNF-α（100ng/mL） stimulation , PAPP-A level increased up to the peak value（14 .5 ＆#177; 1 .1mIU/L） at 8h（ P ＆lt;0 .05） and the value（11 .7 ＆#177; 0 .9mIU/L） at 24h , which was still higher than that in control group （ P＆lt;0 .05） .CRP and rhTNF-αcould elevate PAPP level in supernatants in a dose-dependent manner .CRP and rhTNF-αcould increase phosphorylation NF-κB p65 level in monocytes[（0 .88 ＆#177; 0 .06mg/L） and （1 .06 ＆#177; 0 .12mg/L） ,respectively] ,which were higher than those in control group（0 .35 ＆#177; 0 .04mg/L）（ P ＆lt;0 .05） .After BAY11-70682 pretreatment ,the increasing of NF-κB activity and the secretion of PAPP-A in monocytes induced by CRP and rhTNF-αwere inhibited .[Conclusion]CRP and TNF-αcan promote the synthesis and secretion of PAPP-A in human peripheral blood monocytes ,which is related with the activation of NF-κB signal transduction and may be the mechanism of th
出处
《医学临床研究》
CAS
2013年第11期2084-2087,共4页
Journal of Clinical Research
基金
北京市自然科学基金资助项目(No7092093)；首都医科大学基础-临床科研合作基金(No 12JL37)；北京市卫生系统高层次卫生技术人才资助项目
