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一株分离自免疫猪场的伪狂犬病病毒的鉴定与变异分析 被引量:12
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作者 王一鹏 王亚文 +3 位作者 徐瑞涛 林依丹 李潭清 宋勤叶 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2070-2078,共9页
为了明确河北某伪狂犬病疫苗免疫猪场的哺乳仔猪出现神经症状和死亡的病因,作者对发病仔猪进行研究时从脑组织中分离到1株病毒,通过PCR、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)、动物试验以及基因序列分析等试验,证明所分离的病毒为伪狂犬病病毒... 为了明确河北某伪狂犬病疫苗免疫猪场的哺乳仔猪出现神经症状和死亡的病因,作者对发病仔猪进行研究时从脑组织中分离到1株病毒,通过PCR、免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)、动物试验以及基因序列分析等试验,证明所分离的病毒为伪狂犬病病毒(PRV),命名为HBXT-2018株。皮下接种该病毒后24h,家兔开始啃咬病毒接种部位皮肤,在44~68h内全部死亡。抗PRVBartha-K61株的血清对分离株的中和抗体效价低于1∶8,而抗PRV变异株血清的中和抗体效价为1∶58.9。与Bartha株比较,HBXT-2018株的gB和gC的核苷酸和氨基酸序列多处发生单个或连续几个碱基(或氨基酸)置换、插入和缺失突变,预测的gB和gC上的潜在抗原表位也发生了改变。基于gB、gC和TK的系统进化分析表明,HBXT-2018株与国内流行毒株尤其与2011年之后的流行毒株处于同一个进化分支,而与Bartha株及其他欧美毒株处于不同的进化分支。上述结果表明,分离的PRVHBXT-2018株为致病毒株,其与当前国内流行的PRV变异株具有相同的遗传特征,与Bartha株为代表的欧美流行株的遗传关系远。Bartha-K61株抗血清对分离株的中和作用不明显,提示gB与gC的突变可能与该毒株免疫逃逸、继而导致仔猪发病有关。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 Bartha-K61 HBXT-2018 血清中和作用 变异分析
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猪瘟兔化弱毒抗体对不同野毒株体内外中和保护试验的相关性研究 被引量:8
2
作者 宋立 王琴 +6 位作者 涂长春 宁宜宝 王在时 赵耘 范学政 张广川 沈青春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期113-115,共3页
将猪瘟兔化弱毒疫苗阳性血清与猪瘟野毒株HeBZJK1.95、GZGD1.95、HeBHH2.95、BJXC1.95、HeNBY1.96、BJCY1.96、BJSY2.96、BGTX3.96、HeNXH2.98、FJFQ1.99、JL1.94和标准石门株在PK-15单层细胞上进行中和试验,测定了猪瘟病毒抗体在体外... 将猪瘟兔化弱毒疫苗阳性血清与猪瘟野毒株HeBZJK1.95、GZGD1.95、HeBHH2.95、BJXC1.95、HeNBY1.96、BJCY1.96、BJSY2.96、BGTX3.96、HeNXH2.98、FJFQ1.99、JL1.94和标准石门株在PK-15单层细胞上进行中和试验,测定了猪瘟病毒抗体在体外对野毒株的中和作用能力.结果表明,阳性血清对HeBZJK1.95、GZGD1.95、B.JSY2.96、JL1.94和石门株的中和效价为1:256,对BGTX3.96株为1:128,对HeBHH2.95、BJCY1.96、HeNXH2.98株为1:64,对BJXC1.95株为1:16,对FJFQ1.99株为1:8,对HeNBY1.96株为1:4.由此表明,对不同毒株血清中和效价不同.另外测定了猪体内免疫抗体与免疫保护力的关系.采用1头份猪瘟兔化弱毒疫苗主动免疫没有母源抗体的猪,免疫后14 d和192 d抗体滴度<1:16,攻击野毒HeNXH2.98株,仔猪能够完全保护.采食初乳的2组仔猪,母源抗体滴度为<1:16~1:64,分别免疫2头份和4头份猪瘟兔化弱毒疫苗,免疫后抗体滴度均下降1~2个滴度(1头母源抗体滴度低的仔猪,免疫4头份后由<1:16达到1:16).攻击野毒HeNXH2.98株后,免疫2头份的仔猪,不管免疫后抗体水平多高(<1:16~1:64),均不完全保护;免疫4头份的仔猪,免疫后抗体滴度较低(1:8)时,不完全保护;抗体滴度≥1:16时,能够完全保护.动物免疫保护试验表明,1头份疫苗免疫抗体水平能起到良好攻毒保护作用,但母源抗体会影响疫苗免疫抗体水平和攻毒保护效果. 展开更多
关键词 猪瘟 兔化弱毒疫苗 阳性血清 中和试验 免疫保护 相关性 野毒株
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鸭甲型肝炎病毒的遗传和抗原稳定性分析 被引量:5
3
作者 马秀丽 黄兵 +6 位作者 李玉峰 于可响 刘存霞 胡峰 亓丽红 宋敏训 艾武 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第6期48-52,共5页
本研究测定了实验室保存的25株(2000年~2017年)鸭甲型肝炎病毒1型(DHAV-1)和32株(2008年~2017年)鸭甲型肝炎病毒3型(DHAV-3)的VP1基因序列,利用生物信息学软件对其以及Genbank中下载的DHAV的VP1基因进行遗传进化关系分析,并选取代表... 本研究测定了实验室保存的25株(2000年~2017年)鸭甲型肝炎病毒1型(DHAV-1)和32株(2008年~2017年)鸭甲型肝炎病毒3型(DHAV-3)的VP1基因序列,利用生物信息学软件对其以及Genbank中下载的DHAV的VP1基因进行遗传进化关系分析,并选取代表毒株进行血清中和试验,分析DHAV-1或DHAV-3的遗传和抗原稳定性。结果表明,DHAV-1进化为2个遗传分支,2016年~2017年的分离毒株分布在同一分支上;DHAV-3进化为2个不同的分支,2008年~2017年分离毒株集中在相同分支上,又进一步进化为不同的亚分支;DHAV-1或DHAV-3毒株之间无明显的地理分布差异。血清交叉中和试验结果表明,DHAV-1或DHAV-3同一血清型之间具有较好的交叉保护,表明同一血清型的DHAV未发生抗原变异。本研究揭示了DHAV-1或DHAV-3的遗传进化特点和相同血清型之间的抗原稳定性。 展开更多
关键词 鸭甲型肝炎病毒 遗传抗原稳定性 血清中和试验 血清型
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柯萨奇病毒A组16型多克隆抗体的制备及其在检定中的应用 被引量:3
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作者 谢天宏 杨婷 +8 位作者 宋霞 李华 岳磊 刘正玲 龙润乡 杨蓉 罗芳宇 朱凡丽 谢忠平 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2017年第7期497-500,共4页
目的评价CV-A16-K168免疫血清对CV-A16不同毒株的中和抗体效价,确定完全中和不同病毒量所需的最低血清量,为CV-A16疫苗毒种检定中的鉴别试验和病毒外源因子检查提供参考。方法将CVA16病毒抗原辅以弗氏佐剂以皮下多点注射方式免疫新西兰... 目的评价CV-A16-K168免疫血清对CV-A16不同毒株的中和抗体效价,确定完全中和不同病毒量所需的最低血清量,为CV-A16疫苗毒种检定中的鉴别试验和病毒外源因子检查提供参考。方法将CVA16病毒抗原辅以弗氏佐剂以皮下多点注射方式免疫新西兰大白兔,多次免疫后取血清,采用微量细胞病变法进行中和抗体效价检测和对15株不同CV-A16毒株的中和效价检测,并用CV-A16-4V和CV-A16-10R两个毒株分析中和不同量病毒所需的抗体量。结果浓缩抗原作为免疫原获得的兔抗CV-A16血清中和抗体效价可达1∶2 048;该免疫血清对15株CV-A16不同毒株的几何平均滴度(genomic mean titer,GMT)为1∶3 118;完全中和7.5lgCCID50/ml CV-A16病毒所需的最低血清量为128U,当病毒量在4.0~7.0lgCCID50/ml时,完全中和所需的最低血清量为48U,当病毒量低于4.0lgCCID50/ml时,1U的血清即可完全中和本病毒。结论 CV-A16-K168株作为免疫原可获得高效价的抗血清;用不同毒株检测得到的抗体效价存在差异;完全中和病毒所需的最低血清量与病毒量呈正相关;病毒量与测得的血清中和效价呈负相关。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16型 免疫血清 中和能力 疫苗检定
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鸭肝炎病毒Ⅰ型、新型二价精制卵黄抗体在SPF雏鸭体内的代谢规律研究 被引量:1
5
作者 宋扬 李建华 +3 位作者 藏玉婷 孙德君 孙晓峰 武啸 《广东畜牧兽医科技》 2016年第3期32-34,共3页
采用实验室试制的二价抗体接种5日龄SPF雏鸭,分别在注射抗体后24、48、72、96、120、144和168 h进行采血及分离血清。采用鸭胚中和试验,进行Ⅰ型和新型鸭肝炎病毒抗体效价的测定。结果表明,抗体注射24~72 h,血清中Ⅰ型和新型鸭肝炎病毒... 采用实验室试制的二价抗体接种5日龄SPF雏鸭,分别在注射抗体后24、48、72、96、120、144和168 h进行采血及分离血清。采用鸭胚中和试验,进行Ⅰ型和新型鸭肝炎病毒抗体效价的测定。结果表明,抗体注射24~72 h,血清中Ⅰ型和新型鸭肝炎病毒抗体效价基本稳定在峰值,从96 h开始缓慢下降但仍在保护效价(1:32)以上,至144 h抗体下降至保护效价以下,即抗体的被动保护期在5 d以内。 展开更多
关键词 卵黄抗体 血清效价 雏鸭 中和试验
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高效价腮腺炎病毒抗血清的制备及检定 被引量:1
6
作者 张安宁 刘晓琳 +3 位作者 李淑云 陈晓梅 于立芹 史晓莉 《微生物学免疫学进展》 2016年第4期26-30,共5页
目的制备高效价腮腺炎病毒抗血清,用于麻腮、麻腮风、麻腮风水痘联合疫苗的病毒滴定及鉴别试验等指标的检定。方法将腮腺炎病毒ME株接种于SPF鸡胚尿囊腔中,优化病毒制备工艺条件,收获高滴度病毒原液,制备免疫抗原;采用皮下多点注射法免... 目的制备高效价腮腺炎病毒抗血清,用于麻腮、麻腮风、麻腮风水痘联合疫苗的病毒滴定及鉴别试验等指标的检定。方法将腮腺炎病毒ME株接种于SPF鸡胚尿囊腔中,优化病毒制备工艺条件,收获高滴度病毒原液,制备免疫抗原;采用皮下多点注射法免疫SPF豚鼠,制备抗血清并对其进行中和效价、中和能力以及特异性干扰试验的检定。结果 ME株腮腺炎病毒以102倍稀释接种鸡胚尿囊腔,培养5 d经-20℃预冷1 h后,收获的尿囊液病毒滴度最高;以其免疫豚鼠所制备的抗血清平均中和效价达1∶3 276,高于鸡抗腮腺炎病毒血清;当豚鼠抗腮腺炎病毒血清稀释度为1∶320时,可完全中和1 000 CCID50/m L的腮腺炎病毒;豚鼠抗腮腺炎病毒血清对Vero细胞、RK-13细胞及2BS细胞的生长,均未见干扰及细胞毒性作用;豚鼠抗腮腺炎病毒血清对异种病毒(麻疹病毒、风疹病毒和水痘病毒)滴度的干扰试验显示,各病毒滴度其试验组与对照组的差值均<0.50 lg CCID50/m L,表明豚鼠抗腮腺炎病毒血清对麻疹病毒、风疹病毒和水痘病毒的滴度均无干扰;豚鼠抗腮腺炎病毒血清及鸡抗腮腺炎病毒血清对麻腮风水痘联合疫苗各病毒滴度均无干扰,且两种抗血清之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用优化后的病毒制备工艺条件及免疫方法,可获得较高效价的抗腮腺炎病毒血清,经检定和验证,均符合含腮腺炎成分疫苗检定抗血清使用要求。 展开更多
关键词 腮腺炎病毒 免疫血清 联合疫苗 中和效价 鉴别试验
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Bluetongue Virus (BTV) Serological Survey and Evidence of Emergent BTV-8 Serotype in Morocco
7
作者 Kamar Drif Chafika Loutfi +3 位作者 Ouafaa Fassi Fihri Ghizlane Sebbar Moulay Mustapha Ennaji MehdiElHarrak 《Journal of Agricultural Science and Technology(A)》 2014年第4期353-358,共6页
Bluetongue (BT) is an infectious, non-contagious arthropod-borne disease that infects all ruminants, including sheep, cattle, deer, goats and camelids. Bluetongue virus (BTV) belonged to Reoviridae is ARN genome o... Bluetongue (BT) is an infectious, non-contagious arthropod-borne disease that infects all ruminants, including sheep, cattle, deer, goats and camelids. Bluetongue virus (BTV) belonged to Reoviridae is ARN genome of 19 Kb. Twenty-six BTV serotypes have long been recognized, to be associated with severe disease in certain breeds of sheep, whereas cattle and goats are usually sub-clinically affected. Before 2004, BT was considered an exotic disease in Morocco, however, the first outbreak was observed in 2004 in sheep. This outbreak was caused by the isolated BTV-4. Two years later a BTV-1 emerged in Morocco. Both serotype 1 and serotype 4 circulated after 2007 across the country. The aims of the present work was to perform a serological study on sheep from different regions in Morocco in order to clarify the current BTV epidemiological situation and its evolution from 2009 to 2012, to determine the co-infection rate, and to confirm the possible circulation of other BTV Serotype mainly the BTV-8. All of 436 sera were tested by serum neutralization using reference strains. Results confirm the presence of BTV-4, BTV-1 and BTV-8. However, the present study report for the first time the emerging BTV-8 circulation in Morocco. Moreover, the founding reveal as well a higher co-infection rate in cattle compared to sheep. 展开更多
关键词 BT BTV serological survey epidemiological situation emerging BTV-8 CO-INFECTION serum neutralization.
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鸡血清异种凝集素的应用研究
8
作者 蔡锐波 《法医学杂志》 CAS CSCD 1994年第2期61-63,70,共4页
通过实验研究,证明家养鸡血清小含有“抗A”、“抗B”及“抗H”三种异种凝集素。鸡血清中“H”凝集素能应用于体液班(唾液斑、精燃)H物质的检测。我们已在教学及检案实践小使用,效果良好。
关键词 鸡血清 异种凝集素 体液班 H物质 检测
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犬瘟热病毒抗体检测方法的比较研究 被引量:33
9
作者 乔贵林 夏咸柱 +4 位作者 王度林 贾补年 袁书智 林庆年 王允海 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期26-29,共4页
用犬瘟热(CD)弱毒和自制的高免犬血清,建立了检测犬瘟热病毒(CDV)抗体的中和(SN)试验、间接荧光抗体技术(IFAT)和间接免疫酶染色法。这3种方法对38份CD弱毒疫苗免疫犬血清抗体效价的测定结果表明,当被检血清... 用犬瘟热(CD)弱毒和自制的高免犬血清,建立了检测犬瘟热病毒(CDV)抗体的中和(SN)试验、间接荧光抗体技术(IFAT)和间接免疫酶染色法。这3种方法对38份CD弱毒疫苗免疫犬血清抗体效价的测定结果表明,当被检血清稀释度为1∶100时,SN试验、IFAT和间接免疫酶染色法测定时的阳性血清数分别为29,7和31份,IFAT和间接免疫酶染色法测定结果相对于SN试验结果的符合率分别为42.1%和94.7%。同时发现,当SN试验测定的血清效价在1∶100以上时,IFAT测定结果总是在1∶25以上,间接免疫酶染色法测定结果总是在1∶100以上。3种方法以各自初步确定的CDV血清抗体效价完全保护值指标计算所测血清的完全保护率,SN试验为76.3%,IFAT为78.9%,间接免疫酶染色法为81.6%。据此认为,IFAT和间接免疫酶染色法均可部分代替SN试验用于CD疫苗免疫效果的评价。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 抗体 间接荧光抗体 间接免疫酶染色
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人狂犬病免疫球蛋白使用效果观察 被引量:39
10
作者 李振平 王玉琳 +2 位作者 刘燕 常娅莉 程夷 《微生物学免疫学进展》 2004年第2期32-34,共3页
为了解人狂犬病免疫球蛋白的作用效果 ,我们将观察对象随机分成了A、B、C三组 ,分别采用三种措施进行狂犬病的预防治疗 ,即 :A组联合使用狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白 ;B组联合使用狂犬病疫苗与抗狂犬病血清 (马源 ) ;C组仅注射狂犬... 为了解人狂犬病免疫球蛋白的作用效果 ,我们将观察对象随机分成了A、B、C三组 ,分别采用三种措施进行狂犬病的预防治疗 ,即 :A组联合使用狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白 ;B组联合使用狂犬病疫苗与抗狂犬病血清 (马源 ) ;C组仅注射狂犬病疫苗 ,并采用小鼠中和试验对这三组成员在免疫后 3、7、14、4 5天及 1年时的中和抗体水平进行检测。结果表明 :狂犬病疫苗与人狂犬病免疫球蛋白或抗狂犬病血清联合使用 ,可使体内更早出现抗狂犬病的中和抗体。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 狂犬病疫苗 抗狂犬病血清 中和试验
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乳胶凝集试验与血清中和试验检测猪伪狂犬病血清抗体的比较 被引量:18
11
作者 邱德新 陈焕春 +3 位作者 何启盖 方六荣 吴斌 周锐 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第4期302-305,共4页
应用血清中和试验 (SNT)和伪狂犬病乳胶凝集试验 (LAT)诊断试剂盒对两种伪狂犬病标准阳性血清、伪狂犬病病毒 (PRV)高免血清及 6 0份被检猪血清进行了PRV抗体效价测定和相关性分析 ,两种方法测得的抗体效价之间呈强相关性 (r=0 .96 ) ,... 应用血清中和试验 (SNT)和伪狂犬病乳胶凝集试验 (LAT)诊断试剂盒对两种伪狂犬病标准阳性血清、伪狂犬病病毒 (PRV)高免血清及 6 0份被检猪血清进行了PRV抗体效价测定和相关性分析 ,两种方法测得的抗体效价之间呈强相关性 (r=0 .96 ) ,且LAT效价比SNT一般高出一个滴度 ;对来自 35个猪场的 414份猪血清进行了PRV抗体检测 ,并与SNT检测结果进行了对比 ,结果在SNT检测为阳性的 171份血清中 ,LAT检出阳性 16 8份 ,阳性符合率为 98.2 % (16 8/ 171) ,在SNT检测为阴性的 2 43份血清中 ,LAT检出 5 2份血清为PRV抗体阳性 ;对猪瘟、口蹄疫 (O型 )、猪细小病毒、猪衣原体四种标准阳性血清和来自无伪狂犬病猪场的 18头健康猪血清进行检测 ,检测结果均为阴性 ,其符合率为 10 0 % (2 2 / 2 2 )。结果表明 ,两种方法检测结果符合率高 ,特异性强 ,LAT比SNT敏感、快速简便和实用。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 抗体检测 SNT LAT
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犬瘟热弱毒疫苗免疫犬抗体消长规律及影响因素 被引量:9
12
作者 乔贵林 夏咸柱 +4 位作者 王度林 贾补年 袁书智 林庆年 王允海 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期440-443,共4页
应用犬瘟热病毒(CDV)血清中和试验,对从日本引进的犬瘟热弱毒疫苗免疫犬的血清中和抗体效价进行了检测,探讨了免疫剂量、免疫程序和犬的年龄对抗体效价的影响。结果表明,试验犬于第1次免疫后14d左右产生1∶9以上的血清中... 应用犬瘟热病毒(CDV)血清中和试验,对从日本引进的犬瘟热弱毒疫苗免疫犬的血清中和抗体效价进行了检测,探讨了免疫剂量、免疫程序和犬的年龄对抗体效价的影响。结果表明,试验犬于第1次免疫后14d左右产生1∶9以上的血清中和抗体,随后抗体水平迅速升高,35d时78.38%的免疫犬抗体效价超过1∶100,60d达到高峰,6个月试验结束时,血清中和抗体效价仍维持在1∶100以上。该犬瘟热弱毒疫苗的最低免疫剂量为103.0TCID50,以2周或3周间隔连续免疫3次均可使免疫犬获得完全保护。 展开更多
关键词 犬瘟热 疫苗 血清中和抗体 犬病
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牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定 被引量:11
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作者 牛国辉 季新成 +1 位作者 段晓东 晁群芳 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期986-991,共6页
【目的】为了解牛病毒性腹泻/黏膜病在新疆的流行现状,对疑似该病病料进行地方毒株的分离,并对其进行鉴定。【方法】将采自新疆不同地区疑似牛病毒性腹泻的病料接种MDBK细胞,并盲传2-4代;对分离株进行毒力测定及中和试验,应用RT-PCR方... 【目的】为了解牛病毒性腹泻/黏膜病在新疆的流行现状,对疑似该病病料进行地方毒株的分离,并对其进行鉴定。【方法】将采自新疆不同地区疑似牛病毒性腹泻的病料接种MDBK细胞,并盲传2-4代;对分离株进行毒力测定及中和试验,应用RT-PCR方法扩增分离株的5’UTR基因片段并克隆测序分析。【结果】分离到的8株病毒可发生细胞病变,在MDBK细胞上的TCID50为103-106。毒株血清中和实验结果,RT-PCR反应结果,克隆后重组质粒经BamHI、HindIII双酶切鉴定、重组质粒PCR鉴定结果均得到预计扩增片段。重组质粒测序结果与GenBank中已发表的牛病毒性腹泻病毒NADL株序列同源性为82.0%-94.8%。【结论】证实所分离到的病毒为BVDV,命名为B-S-1、B-S-2、B-S-3、B-S-4、B-S-5、B-S-6、B-G-1和B-G-2。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 血清中和试验 RT-PCR 基因序列分析
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Protectivity of Freeze Dried Inactivated Rift Valley Fever Vaccine
14
作者 Diana M. Abulmagd Mohamed Hassan Atwa +2 位作者 Noha Ezz Aldin Marwa Yehia Hammad Taradi Abdel Fattah Said 《Open Journal of Veterinary Medicine》 CAS 2024年第2期21-37,共17页
Background: Vaccinations for animals are crucial for food production, animal welfare, public health, and animal health. They are an affordable way to stop animal sickness, increase food production efficiency, and less... Background: Vaccinations for animals are crucial for food production, animal welfare, public health, and animal health. They are an affordable way to stop animal sickness, increase food production efficiency, and lessen or stop the spread of zoonotic diseases to humans. Animal vaccines that are both safe and efficacious are vital to modern culture. The vaccine should induce a strong, protective and prolonged immune response against the antigenic factor. In order to achieve these goals, novel vaccination techniques and an efficient adjuvant are required to render the vaccine immunogenically protective and trigger a strong immune response. Aim: Our study aims to promote and enhance the immunogenicity against RVF virus disease through lyophilized inactivated RVF vaccine through induction of early cellular, high and prolonged humeral immunity in vaccinated animals using cabopol as stabilizer and Saponin or normal saline as a diluent at time of vaccination. Moreover, manufacturing of these vaccines is easy to be done. Results: The gained results revealed that RVF freeze-dried vaccine with Carbopol that reconstituted using Saponin elicited better immune response than that reconstituted using normal saline (NaCl). The cell mediated immune response as represented by lymphocyte blastogenesis and phagocytic activity were markedly increased with high levels when we used Saponin as a diluent than that in group vaccinated with vaccine diluted with NaCl, on the other side the humeral immune response in group vaccinated using the Saponin as diluent is more detected and stayed within the protective level till the end of 11<sup>th</sup> month post vaccination (1.5 TCID<sub>50</sub>) while the immune response induced after using normal saline as a diluent stayed within the protective level till the end of 10<sup>th</sup> month post vaccination (1.8 TCID<sub>50</sub>). Conclusion: The use of Saponin as a diluent for reconstitution of the freeze dried RVF vaccine is preferable than the use of normal saline enhancing both sheep cellu 展开更多
关键词 Rift Valley Fever SAPONIN Cabopol Binary Ethylenemine serum neutralization Test
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Evaluation of purified recombinant spike fragments forassessment of the presence of serum neutralizing antibodiesagainst a variant strain of porcine epidemic diarrhea virus 被引量:5
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作者 Jianwei Hao Yun Zhang +4 位作者 Shengkun Fang Zhifen Wen Xiangbin Zhang Chunyi Xue Yongchang Cao 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2017年第4期307-316,共10页
Since 2010, variant strains of porcine epidemic diarrhea virus(PEDV) have caused disasters in the pork industry. The spike(S) protein, as the major immunity-eliciting antigen, has previously been used for serological ... Since 2010, variant strains of porcine epidemic diarrhea virus(PEDV) have caused disasters in the pork industry. The spike(S) protein, as the major immunity-eliciting antigen, has previously been used for serological testing and has been found to correlate significantly with the results of the serum neutralization(SN) test. However, further evaluation of this method is needed as new epidemic strains of PEDV emerge. Hence, the main objective of this study was to assess sow sera and determine the correlation between enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) results(involving a newly isolated GDS01 virus-based ELISA and ELISAs based on seven recombinant fragments comprising overlapping S1 and partial S2 sequences) and SN titers. Furthermore, we determined the reliability of the ELISAs based on receiver operating characteristics(ROC) curve analyses. For the most promising ELISA, i.e., the SP4 ELISA, the correlation coefficient(r) and the area under curve(AUC) were determined to be 0.6113 and 0.8538, respectively. In addition, we analyzed the homology of the SP4 sequences obtained from different strains(including vaccine strains) and found that various strains showed a high degree of homology in this region. Thus, we conclude that SP4 is a promising serological testing protein for use in the field. 展开更多
关键词 Porcine epidemic DIARRHEA virus (PEDV) SPIKE protein enzyme-linkedimmunosorbent assay serum neutralization test
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牛病毒性腹泻病毒地方株的分离与鉴定 被引量:4
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作者 张光辉 李祥瑞 +1 位作者 李建丽 常红涛 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2005年第3期71-73,共3页
从河南省不同地区规模化肉牛场牛病毒性腹泻 (BVD)疑似病例中采集病料 ,将处理好的 6份病料接种MDBK细胞 ,并盲传 4代 ,得到了 2株可产生细胞病变的病毒。 2株病毒的TCID50 分别为 10 - 5.59和 10 - 5.51;琼脂扩散试验表明 ,2株病毒均... 从河南省不同地区规模化肉牛场牛病毒性腹泻 (BVD)疑似病例中采集病料 ,将处理好的 6份病料接种MDBK细胞 ,并盲传 4代 ,得到了 2株可产生细胞病变的病毒。 2株病毒的TCID50 分别为 10 - 5.59和 10 - 5.51;琼脂扩散试验表明 ,2株病毒均能与牛病毒性腹泻病毒 (BVDV)OregonC2 4 标准阳性血清反应 ,出现沉淀线 ;中和试验表明 ,2株病毒均能被BVDV标准阳性血清中和 ,中和指数分别为 10 3.30 和 10 3.16 ;电镜观察到圆形 ,直径为 4 0~ 6 0nm ,有囊膜 ,囊膜表面有突起的病毒粒子 ,与BVDV颗粒基本一致。因此 ,确定分离的 2株病毒均为BVDV ,分别将其命名为HN - 1株和HN - 2株。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 血清中和试验 琼脂扩散试验 分离 鉴定
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应用琼脂免疫扩散试验检测猪伪狂犬病抗体的研究 被引量:3
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作者 孙刚 杜宗沛 +4 位作者 高忠信 姜玉娴 颜世波 孙建 蒋淑英 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2000年第4期8-9,共2页
建立了AGID用于猪伪狂犬病 (Pseudorabies ,Pr)的诊断。对 98份被检血清的AGID结果与SN结果比较 ,当SN滴度大于 1:8时两者的阳性检出符合率为 10 0 %,SN滴度小于或等于 1:8时 ,两者的阳性检出符合率为 87.5 %,AGID和SN总的阳性符合率为 ... 建立了AGID用于猪伪狂犬病 (Pseudorabies ,Pr)的诊断。对 98份被检血清的AGID结果与SN结果比较 ,当SN滴度大于 1:8时两者的阳性检出符合率为 10 0 %,SN滴度小于或等于 1:8时 ,两者的阳性检出符合率为 87.5 %,AGID和SN总的阳性符合率为 94.4%。结果表明 ,AGID对Pr可进行特异性诊断 。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 琼脂免疫扩散试验 抗体检测
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猪伪狂犬病高免血清的制作与初步应用 被引量:5
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作者 孔令达 符芳 +3 位作者 于辉 崔尚金 仇华吉 韩英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期359-362,共4页
用伪狂犬病抗体阴性健康猪,以不同剂量、间隔一定时间、多次免疫接种伪狂犬病强毒S株,制备伪狂犬病病毒高免血清,试验表明,用本方法制备的伪狂犬病病毒高免血清特异性强、抗体效价高达256倍以上,完全符合诊断用血清标准要求。并将高免... 用伪狂犬病抗体阴性健康猪,以不同剂量、间隔一定时间、多次免疫接种伪狂犬病强毒S株,制备伪狂犬病病毒高免血清,试验表明,用本方法制备的伪狂犬病病毒高免血清特异性强、抗体效价高达256倍以上,完全符合诊断用血清标准要求。并将高免血清在中和试验、ELISA、免疫胶体金等进行了对比试验。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 高免血清 ELISA 中和试验 免疫胶体金
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两种ELISA试剂盒与血清中和试验检测牛赤羽病的比较 被引量:4
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作者 肖妍 赵祥平 +5 位作者 董志珍 张永年 王勤 张俊哲 赵丹 王建华 《中国动物检疫》 CAS 2017年第12期81-83,共3页
为比较两种商品化赤羽病抗体ELISA试剂盒的敏感性和特异性,以及ELISA和微量血清中和试验(SNT)的符合率,采用两种ELISA试剂盒和血清中和试验,对690份澳大利亚纯种荷斯坦奶牛血清进行牛赤羽病检测。试验结果显示:法国某公司生产的赤羽病EL... 为比较两种商品化赤羽病抗体ELISA试剂盒的敏感性和特异性,以及ELISA和微量血清中和试验(SNT)的符合率,采用两种ELISA试剂盒和血清中和试验,对690份澳大利亚纯种荷斯坦奶牛血清进行牛赤羽病检测。试验结果显示:法国某公司生产的赤羽病ELISA试剂盒敏感性为93.42%,特异性为81.23%,与SNT间的Kappa值为0.615,为高度符合;日本某公司生产的赤羽病ELISA试剂盒敏感性为39.47%,特异性为96.1%,与SNT间的Kappa值为0.427,为中度符合。比较结果表明:日本某公司生产的试剂盒敏感性较低,容易漏检,不适合用于牛赤羽病初筛;在出入境检疫中,可以采用高通量、半自动化、敏感性高的ELISA方法,对血清样本进行筛选,再采用特异性强的SNT试验进行辅助验证。 展开更多
关键词 赤羽病 ELISA 微量血清中和试验 比较试验
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PRV变异株gB和gC基因分子特征及抗原差异性分析 被引量:4
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作者 万曾培 王征帆 +4 位作者 庞旋飞 王凤求 王贵平 李中圣 白挨泉 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1454-1460,共7页
对3株(GD1406、FS2015、FJFZ株)变异伪狂犬病病毒(PRV)的gB和gC全基因进行扩增、测序及生物信息学分析,应用微量交叉中和试验分析抗原差异性。基因序列比对结果显示,3株PRV变异株之间gB、gC基因核苷酸和氨基酸同源性分别为99.7%~100.0%... 对3株(GD1406、FS2015、FJFZ株)变异伪狂犬病病毒(PRV)的gB和gC全基因进行扩增、测序及生物信息学分析,应用微量交叉中和试验分析抗原差异性。基因序列比对结果显示,3株PRV变异株之间gB、gC基因核苷酸和氨基酸同源性分别为99.7%~100.0%和99.6%~100.0%,100.0%和99.0%~100.0%;gB和gC基因系统进化树遗传进化分析显示:系统进化树分为2大支,其中一个大支为国内经典毒株群、2011年后分离的变异毒株群2个小分支所占据的中国毒株群;另一个大支为欧洲分离株和美洲分离株组成的欧美毒株群。微量交叉中和试验结果显示,PRV-Bartha K61高免血清中和PRV-GD1406和PRV-Bartha K61的效价分别为22和53,PRV-GD1406高免血清中和PRV-GD1406和PRV-Bartha K61的效价分别为37和44;PRV-GD1406毒株异源血清中和效价/同源血清中和效价约为0.83,PRV-Bartha K61毒株异源血清中和效价/同源血清中和效价约为0.59;2个毒株(PRV-GD1406、PRV-Bartha K61)间交叉反应程度相关系数R=0.72。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 GB基因 GC基因 血清交叉中和试验 抗原差异性
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