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葛根素减轻部分由过氧亚硝基阴离子导致的糖尿病大鼠晶状体上皮细胞凋亡(英文) 被引量:17
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作者 郝丽娜 凌毅群 +4 位作者 罗秀梅 毛宇湘 毛绮妍 何守志 凌亦凌 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期584-592,共9页
本研究观察葛根素是否减轻部分由过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO^-)导致的糖尿病大鼠晶状体上皮细胞(lens epithelium cell,LEC)凋亡。采用大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法建立糖尿病动物模型。36只... 本研究观察葛根素是否减轻部分由过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO^-)导致的糖尿病大鼠晶状体上皮细胞(lens epithelium cell,LEC)凋亡。采用大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法建立糖尿病动物模型。36只大鼠作为对照组,腹腔注射生理盐水;其他72只大鼠腹腔注射STZ(45mg/kg)后分为STZ组和STZ+葛根素组,每组36只。STZ注射3d后,STZ+葛根素组大鼠每天腹腔注射葛根素(140mg/kg)。于实验开始后第20、40和60天用裂隙灯检查晶状体的形态学变化后处死动物。用流式细胞仪检测LEC凋亡,用免疫组化方法检测晶状体中ONOO^-的标志物——硝基酪氨酸(nitrotyrosine,NT)的表达,用基因芯片分析技术检测LEC凋亡相关基因iNOS等的表达。结果发现,对照组大鼠晶状体均透明,各项指标基本正常;STZ组大鼠第20天时即出现晶状体混浊,40-60d期间混浊不断加重;STZ+葛根素组大鼠20-40d时晶状体混浊呈加重趋势,但40-60d以后明显减轻。对照组LEC轻度凋亡,而STZ组凋亡细胞呈持续性增长,STZ+葛根素组大鼠20-40d时细胞凋亡呈增长趋势,但40-60d以后明显下降。对照组大鼠晶状体NT未见明显表达;STZ组大鼠NT表达明显加强;STZ+葛根素组大鼠20-40d时NT表达呈增长趋势,但40-60d以后明显下降。对照组凋亡相关基因未见明显变化,STZ组凋亡相关基因iNOS表达明显上调。其他凋亡相关基因如BCL-2、SOD表达明显下调,但NF-κB和TNFR1-FADD-caspase信号转导途径明显上调;STZ+葛根素组凋亡相关基因表达则呈相反改变。上述结果表明,在糖尿病大鼠晶状体中有ONOO^-的标志物NT表达,证明糖尿病大鼠LEC凋亡部分由ONOO^-诱导,这可能是氧化损伤导致白内障形成的新途径。葛根素能够部分逆转ONOO^-对LEC的致凋亡作用,提示葛根素可能是治疗糖尿病性白内障的有效药物, 展开更多
关键词 葛根素 晶状体上皮细胞 糖尿病 白内障
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MRG15的克隆及其在正常和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达 被引量:7
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作者 刘燕 周健 +3 位作者 刘新平 药立波 苏景宽 惠延年 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2005年第3期228-231,共4页
目的克隆死亡因子相关基因15(MRG15)并研究其在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达,比较二者的差异。方法用改良的消减杂交法克隆死亡因子相关基因15,地高辛标记MRG15cDNA片断制作探针,用原位杂交法研究其在晶状体前... 目的克隆死亡因子相关基因15(MRG15)并研究其在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达,比较二者的差异。方法用改良的消减杂交法克隆死亡因子相关基因15,地高辛标记MRG15cDNA片断制作探针,用原位杂交法研究其在晶状体前囊膜切片上的表达,并作统计学处理。结果克隆到了死亡因子相关基因15的cDNA片断,长约639bp,死亡因子相关基因15在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中均有表达;经统计分析,其在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中的表达高于其在正常晶状体上皮细胞中的表达。结论MRG15在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中均有表达;在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中,其表达较正常晶状体增高,提示其可能在白内障的发生中起重要作用。 展开更多
关键词 死亡因子相关基因15 MRNA 年龄相关性白内障 晶状体上皮细胞
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Msx2 plays a critical role in lens epithelium cell cycle control 被引量:3
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作者 Jiang-Yue Zhao Feng-Feng Zhuang +2 位作者 Hong-Yan Wang Di Wu Jin-Song Zhang 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2013年第3期276-279,共4页
AIM: To investigate the effects of Msx2 on lens epithelium cell cycle, and evaluate the changes of the proliferation, apoptosis of lens epithelium cells. METHODS: Mice lens epithelium cells were cultured and transfect... AIM: To investigate the effects of Msx2 on lens epithelium cell cycle, and evaluate the changes of the proliferation, apoptosis of lens epithelium cells. METHODS: Mice lens epithelium cells were cultured and transfected with pEGFP-Msx2 and control. Msx2-deficient mice (Msx2(-/-)) lens tissue were isolated. Lens tissue and transfected cells were prepared for mRNA extraction using Trizol reagent. CyclinD1 and Prox1 expression were evaluated by real-time RT-PCR. BrdU incorporation and apoptosis rate were investigated by immunofluorescence and flow cytometry analysis. RESULTS: After transfected with pEGFP-Msx2, lens epithelium cells failed to incorporate BrdU and anti - phospho-histone-3 immunofluorescence failed to detect cell nuclei which GFP were positive. Msx2 over expression resulted in increasing apoptosis rate in lens epithelium cells. CyclinD1 and Prox1 expression increased significantly in Msx2 knockout mice by real time RT-PCR quantization and CyclinD1 expression decreased significantly in Msx2overexpressed cell. CONCLUSION: Msx2 has the effect of inhibiting proliferation and differentiation, triggering apoptosis on mice lens epithelium cells. 展开更多
关键词 Msx2 lens epithelium cell cell cycle
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晶体上皮细胞单克隆抗体的动物实验研究第一部分晶体上皮细胞的培养 被引量:5
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作者 汤欣 袁佳琴 《眼科研究》 CSCD 1994年第3期145-147,F003,共4页
试图以免疫学方法制备特异性晶体上皮细胞膜单克隆抗体来抑制晶体上皮细胞的生长,以探索防止后发障的发生。共分四部分:1.晶体上皮细胞的培养;2.晶体上皮细胞膜单克隆抗体的制备;3.抗体的免疫学检测;4.所制备的单克隆抗体... 试图以免疫学方法制备特异性晶体上皮细胞膜单克隆抗体来抑制晶体上皮细胞的生长,以探索防止后发障的发生。共分四部分:1.晶体上皮细胞的培养;2.晶体上皮细胞膜单克隆抗体的制备;3.抗体的免疫学检测;4.所制备的单克隆抗体对动物和人的晶体上皮细胞的抑制作用。报告家兔晶体上皮细胞的原代和继代培养的方法并进行讨论。 展开更多
关键词 晶体上皮细胞 单克隆抗体 细胞培养
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Human lens epithelial cell apoptosis and epithelial to mesenchymal transition in femtosecond laser-assisted cataract surgery 被引量:3
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作者 Wei Sun Jia Liu +5 位作者 Jing Li Di Wu Jing Wang Ming-Wu Wang Jin-Song Zhang Jiang-Yue Zhao 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2018年第3期401-407,共7页
AIM: To evaluate human lens epithelium cell apoptosis and epithelial to mesenchymal transition (EMT) induced by femtosecond laser in femtosecond laser assisted cataract surgery (FLACS). METHODS: Sixty cataract ... AIM: To evaluate human lens epithelium cell apoptosis and epithelial to mesenchymal transition (EMT) induced by femtosecond laser in femtosecond laser assisted cataract surgery (FLACS). METHODS: Sixty cataract patients with N2 to N3 stage according to the LOCS III were enrolled in this study and divided into three groups randomly: FLACSl group (cataract surgery by FLACS with LenSx), FLACS2 group (cataract surgery by FLACS with LensAR) and manual group (cataract surgery by phacoemulsification). Patients in two FLACS groups performed anterior capsulotomy by LenSx or LensAR laser system. Patients in the manual group were performed continuous curvilinear capsulorrhexis (CCC) manually. The anterior capsules were fixed right after moved out of eye. Hematoxylin-eosine staining, immunofluorescence staining and real-time PCR were performed in order to observe human lens epithelium cells changes after cataract surgery. RESULTS: The capsule cutting edge was shown irregularity and roughness in two FLACS groups and smooth edge in manual capsulotomy by pathologic staining. Irregularities of the cell configuration with partly swollen and destroyed nuclei were observed in two FLACS groups. Femtosecond laser could induce a significantly higher cell apoptosis in human lens epithelium cell than manually performed CCC (P〈0.05). Lens epithelium cells apoptosis were correlated with femtosecond laser duration according to Pearson correlation analysis. Decreased N-cadherin expression, alpha-SMA and FSP-1 level in two FLACS groups showed the inhibition of cell EMT. CONCLUSION: Femtosecond laser may affect the apoptosis and EMT of lens epithelium cells which are under the peeled central lens capsule. 展开更多
关键词 femtosecond lasers assisted cataract surgery lens epithelium cell APOPTOSIS epithelial mesenchymal transition
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晶状体上皮细胞中骨连蛋白的研究 被引量:2
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作者 白晶 张劲松 +1 位作者 夏泉 郭莲英 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第2期149-152,共4页
目的对比骨连蛋白(SPARC)在不同年龄白内障及正常人晶状体中的表达,并对人晶状体上皮细胞(LECs)进行热应激、氧化损伤等预处理后检测其骨连蛋白表达的变化,以探讨其在白内障发病机制中的作用。方法将80例不同年龄白内障患者平均分为4组(... 目的对比骨连蛋白(SPARC)在不同年龄白内障及正常人晶状体中的表达,并对人晶状体上皮细胞(LECs)进行热应激、氧化损伤等预处理后检测其骨连蛋白表达的变化,以探讨其在白内障发病机制中的作用。方法将80例不同年龄白内障患者平均分为4组(<50岁组,50~65岁组,66~80岁组,>80岁组),于白内障超声乳化手术中环行撕囊后取晶状体的前囊膜,对照组取6例角膜移植手术供体眼的晶状体前囊膜。常规蛋白印迹法检测样品中SPARC的含量。将永生化人LECs SRA01/04解冻,传代培养。分为正常对照组、氧化损伤组、热应激处理组,蛋白印迹法观察各组SPARC的表达情况。结果组织样本对照组未检出SPARC表达,白内障组可见明确SPARC表达,并有随着年龄增长表达增加的趋势。细胞样本正常对照组未见明确SPARC表达,氧化损伤组、热应激处理组均可见SPARC表达上调。结论白内障患者LECs中SPARC较正常人表达增高,且随年龄的增长表达逐渐增高。氧化损伤及热应激可使LECs中SPARC表达上调,提示SPARC在白内障的发生发展中可能起一定的作用。 展开更多
关键词 骨连蛋白 晶状体上皮细胞 白内障
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骨连蛋白对人晶状体上皮细胞在人工晶状体上黏附的影响 被引量:1
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作者 白晶 张劲松 郭莲英 《眼科新进展》 CAS 2008年第5期340-343,共4页
目的通过观察骨连蛋白的微量加入对晶状体上皮细胞黏附于人工晶状体表面的数目及形态特征的影响,探讨骨连蛋白有效抑制晶状体上皮细胞黏附的可行性。方法传代培养永生化的人晶状体上皮细胞系SRA01/04,分别制备含0mg·L-1、0.2mg... 目的通过观察骨连蛋白的微量加入对晶状体上皮细胞黏附于人工晶状体表面的数目及形态特征的影响,探讨骨连蛋白有效抑制晶状体上皮细胞黏附的可行性。方法传代培养永生化的人晶状体上皮细胞系SRA01/04,分别制备含0mg·L-1、0.2mg·L-1、1.0mg·L-1、5.0mg·L-1的骨连蛋白完全培养液,然后滴加到嵌入琼脂板的人工晶状体上,在CO2培养箱中连续培养。分别于培养1d、3d、7d后,在倒置显微镜下观察细胞变化,并用血小板计数法计数人工晶状体表面黏附的细胞数,进行比较。结果浓度为0.2mg·L-1时骨连蛋白[作用1d、3d、7d后黏附的细胞数分别为(266.25±4.97)mm-2、(270.82±7.47)mm-2、(241.44±17.14)mm-2]有抑制黏附的趋势,但与0mg·L-1浓度组[作用1d、3d、7d后黏附的细胞数分别为(274.63±6.67)mm-2、(277.78±7·37)mm-2、(261.71±13.23)mm-2]相比差异无统计学意义(P>0.05);1.0mg·L-1骨连蛋白[作用1d、3d、7d后黏附的细胞数分别为(199.86±5.91)mm-2,(162.12±6.11)mm-2、(156.94±4.90)mm-2]即可见明确的抑制作用(P<0·01);5.0mg·L-1骨连蛋白[作用1d、3d、7d后黏附的细胞数分别为(180.30±7.37)mm-2,(141.16±10.83)mm-2,(130.41±13.50)mm-2]作用更加明显(P=0.00)。作用1d时各浓度组未见明确改变(P>0.05),3d、7d时可见明确的抑制作用(P<0·01)。结论骨连蛋白可以抑制晶状体上皮细胞在人工晶状体表面黏附,其作用浓度及作用时间呈现正相关性。 展开更多
关键词 骨连蛋白 人晶状体上皮细胞 人工晶状体 细胞黏附
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茶多酚对高糖条件下大鼠晶状体上皮细胞死亡率及线粒体膜电位的影响 被引量:1
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作者 毕宏生 解孝锋 +2 位作者 吴建峰 崔彦 于同利 《眼科》 CAS 2009年第2期104-107,共4页
目的探讨茶多酚对高糖条件下培养的大鼠晶状体上皮细胞死亡率(CDR)及线粒体膜电位(MMP)的影响,阐明糖尿病性白内障的发生机制及茶多酚干预的疗效及机制。设计实验研究。研究对象体外培养的大鼠晶状体上皮细胞。方法体外培养大鼠晶状体... 目的探讨茶多酚对高糖条件下培养的大鼠晶状体上皮细胞死亡率(CDR)及线粒体膜电位(MMP)的影响,阐明糖尿病性白内障的发生机制及茶多酚干预的疗效及机制。设计实验研究。研究对象体外培养的大鼠晶状体上皮细胞。方法体外培养大鼠晶状体上皮细胞,培养基中葡萄糖浓度分别为5、30mmol/L(L1组和L2组),另在30mmol/L葡萄糖浓度培养基中加入0.1μM和0.3μM的茶多酚进行干预(L3组和L4组)。流式细胞仪检测各条件下大鼠晶状体上皮细胞MMP和CDR的变化。主要指标大鼠晶状体上皮细胞CDR及MMP。结果L1、L2、L3、L4组大鼠晶状体上皮细胞CDR分别为(0.68±0.32)%、(13.50±4.48)%、(0.64±0.48)%、(0.50±0.30)%,L1与L2组比较、L2与L3组比较差异均有统计学意义(P=0.04,P=0.04),L3与L4组比较差异无统计学意义(P=0.99)。L1、L2、L3、L4组大鼠晶状体上皮细胞MMP分别为95.53±4.61、37.38±3.56、110.02±8.04、102.63±9.48,L1与L2组比较、L2与L3组比较差异均有统计学意义(P=0.01,P=0.01),L3与L4组比较差异无统计学意义(P=1.00)。结论高糖条件下培养的大鼠晶状体上皮细胞线粒体膜电位降低、细胞死亡率明显升高。茶多酚具有稳定线粒体膜电位的作用,可延缓细胞凋亡,降低细胞死亡率。 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 细胞培养技术 茶多酚 线粒体膜电位 细胞死产率
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复制衰老在眼部衰老改变中的研究进展
9
作者 柯屹峰 陈松 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第3期234-237,共4页
复制衰老最早是在体外培养的3个月人胚肺二倍体细胞中发现的一种细胞状态,它不同于细胞死亡和凋亡,被认为是体内许多年龄相关性疾病的病因。复制衰老与体外培养的细胞衰老改变有密切关系,但复制衰老与眼部组织的关系尚未明了。就复制衰... 复制衰老最早是在体外培养的3个月人胚肺二倍体细胞中发现的一种细胞状态,它不同于细胞死亡和凋亡,被认为是体内许多年龄相关性疾病的病因。复制衰老与体外培养的细胞衰老改变有密切关系,但复制衰老与眼部组织的关系尚未明了。就复制衰老与角膜、晶状体上皮细胞(LECs)、视网膜色素上皮(RPE)细胞关系的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 复制衰老 晶状体上皮细胞 视网膜色素上皮细胞 端粒酶 Β-半乳糖苷酶
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电场暴露抑制晶状体上皮伤口的愈合 被引量:1
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作者 王恩普 王恩彤 《眼科》 CAS 2006年第4期274-276,共3页
目的探讨电场暴露对晶状体上皮伤口愈合的作用。设计实验研究。研究对象原代培养的牛晶状体上皮细胞。方法钝头玻璃针戳刺原代培养的牛晶状体上皮细胞单层形成圆形微伤口,暴露于场强为200mV/mm的直流电场2h(n=37),未受电场暴露的伤口作... 目的探讨电场暴露对晶状体上皮伤口愈合的作用。设计实验研究。研究对象原代培养的牛晶状体上皮细胞。方法钝头玻璃针戳刺原代培养的牛晶状体上皮细胞单层形成圆形微伤口,暴露于场强为200mV/mm的直流电场2h(n=37),未受电场暴露的伤口作为对照(n=29),由Leica图像分析系统测量伤后0h、1h和2h的伤口面积。用抗F-actin荧光抗体染色观察伤口细胞微丝骨架。主要指标伤口面积及细胞微丝骨架的排列。结果与对照伤口比较,电场暴露伤口愈合延迟,电场暴露伤口伤后2h的平均面积(19106μm2±2167μm2)明显大于未接受电场暴露的对照伤口(8555μm2±1911μm2)(t=2.942,P=0.0045)。对照伤口细胞微丝骨架呈向心性排列,电场暴露伤口细胞微丝骨架则沿伤缘呈“索状”排列。结论生理强度的外源性电场可抑制晶状体上皮伤口的愈合。 展开更多
关键词 电场 晶状体上皮 细胞运动 伤口愈合
原文传递
基质金属蛋白酶在白内障中的研究进展 被引量:1
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作者 胡启迪 周伟 《当代医学》 2011年第10期1-3,共3页
基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一类结构和功能类似的金属依赖性蛋白水解酶家族,是降解细胞外基质(extracelluar matrix,ECM)成分的主要酶类。MMPs在细胞迁移分化和组织修复重建中均发挥重要作用,参与体内多种组织... 基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一类结构和功能类似的金属依赖性蛋白水解酶家族,是降解细胞外基质(extracelluar matrix,ECM)成分的主要酶类。MMPs在细胞迁移分化和组织修复重建中均发挥重要作用,参与体内多种组织器官的生理及病理过程。近年来研究发现,晶状体中MMPs表达水平的变化与多种类型白内障的发生发展有密切联系,因此,对MMPs结构和功能的深入了解有助于阐明白内障的发病机制,并为白内障的预防和治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶 白内障 细胞外基质 晶状体上皮细胞
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半乳糖对离体晶状体上皮细胞游离钙影响的实验研究
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作者 王凤翔 何守志 李楠 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2004年第2期152-155,共4页
目的 观察高浓度半乳糖诱导正常离体晶状体上皮细胞中游离钙的变化以及钙离子阻滞剂维拉帕米对它的阻滞作用。方法 钙离子指示剂fluo 3与离体的正常晶状体上皮细胞中游离钙螯合后 ,用激光扫描共聚焦显微镜观察 3 5mmol/L半乳糖在不同... 目的 观察高浓度半乳糖诱导正常离体晶状体上皮细胞中游离钙的变化以及钙离子阻滞剂维拉帕米对它的阻滞作用。方法 钙离子指示剂fluo 3与离体的正常晶状体上皮细胞中游离钙螯合后 ,用激光扫描共聚焦显微镜观察 3 5mmol/L半乳糖在不同条件下致细胞内荧光强度的变化。结果  3 5mmol半乳糖作用于离体晶状体上皮细胞后可见细胞内与钙离子的荧光强度呈持续上升趋势 ,各个细胞上升的幅度及反应的速度有细微差别 ,但 10 0s左右均出现上升趋势。先加 2mg/mL的维拉帕米 ,2min后加半乳糖溶液至终浓度为 3 5mmol,观察 5min只见基本正常的钙波动 ,未见明显的钙上升或下降改变。结论 半乳糖溶液能致离体晶状体上皮细胞中游离钙升高 ,维拉帕米能有效地抑制此过程。 展开更多
关键词 半乳糖 离体晶状体上皮细胞 游离钙 实验研究 维拉帕米
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基质金属蛋白酶3在晶状体上皮细胞中的表达及其意义 被引量:1
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作者 杨晶晶 何湘珍 +3 位作者 向浩天 周晓敏 王云 蔡素萍 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期510-514,共5页
背景后发性白内障是现代白内障囊外摘出术后导致视力下降的常见并发症。基质金属蛋白酶(MMPs)是参与降解除多糖以外全部细胞外基质(ECM)的重要蛋白酶,探讨MMP-3对后发性白内障的基因治疗一直是研究热点,而纤连蛋白(FN)是MMP-3... 背景后发性白内障是现代白内障囊外摘出术后导致视力下降的常见并发症。基质金属蛋白酶(MMPs)是参与降解除多糖以外全部细胞外基质(ECM)的重要蛋白酶,探讨MMP-3对后发性白内障的基因治疗一直是研究热点,而纤连蛋白(FN)是MMP-3的主要降解底物,能间接反映MMP-3的表达情况。目的构建pEGFP—N1-MMP-3真核重组质粒并转染晶状体上皮细胞(LECs),观察MMP-3在LECs中的表达,探讨后发性白内障基因治疗的可能性。方法取6只新鲜猪晶状体,将囊膜用组织块法进行原代培养,获得LECs。用E.coli DH5α MMP-3和E.coli DH5α pEGFP—N1质粒构建MMP-3的真核表达重组质粒pEGFP—N1-MMP-3,通过双酶切,DNA测序分析鉴定人MMP-3片段的准确性。将构建的pEGFP—N1-MMP-3转染至猪LECs中,通过绿色荧光蛋白(GFP)间接观察MMP-3在猪LECs中的表达,用Westernb lot法检测pEGFP—N1-MMP-3真核重组质粒转染后LECs表达产物FN的相对表达量,间接评估MMP-3的表达量。结果双酶切鉴定结果符合质粒pEGFP—N1及目的片段MMP-3大小。软件分析测序结果表明,重组质粒pEGFP—N1-MMP-3中的MMP-3基因与GenBank中的人MMP基因序列相似性达99.6%,表示目的片段已正确插入pEGFP—N1载体。原代培养猪LECs,将重组质粒pEGFP—N1-MMP-3转染人猪LECs,荧光显微镜下可见明显的GFP绿色荧光。Western blot检测表明,FN在pEGFP—N1-MMP-3真核重组质粒转染组的表达量为0.666±0.008,空质粒转染组FN的表达量为0.326±0.071,差异有统计学意义(P=0.000)。结论成功构建了pEGFP—N1-MMP-3质粒,并能够在猪LECs中表达,为进一步研究该蛋白在LECs中的表达与功能奠定了基础。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶3 晶状体上皮细胞 后发性白内障 转染 基因疗法
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TiO_2纳米光催化剂薄膜对牛晶状体上皮细胞黏附及移行的影响
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作者 单玫 翁景宁 苏文悦 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1073-1076,共4页
目的观察经光激发后TiO2纳米光催化剂薄膜对体外培养的牛晶状体上皮细胞(LECs)黏附及移行的影响。方法采用溶胶-凝胶法在载玻片表面制备TiO2光催化剂薄膜,对载玻片行接触角测量。体外培养牛LECs爬片生长于此薄膜上。未经TiO2纳米光催化... 目的观察经光激发后TiO2纳米光催化剂薄膜对体外培养的牛晶状体上皮细胞(LECs)黏附及移行的影响。方法采用溶胶-凝胶法在载玻片表面制备TiO2光催化剂薄膜,对载玻片行接触角测量。体外培养牛LECs爬片生长于此薄膜上。未经TiO2纳米光催化剂薄膜修饰的载玻片设为对照。进行细胞黏附和迁移实验,测定并比较牛LECs在TiO2薄膜修饰载玻片与对照载玻片表面的生长、移行情况。结果对TiO2薄膜组和对照组载玻片行接触角测量:对照组载玻片接触角为18.825°±2.342°,TiO2镀膜组载玻片接触角为0°±2°,TiO2镀膜组载玻片的接触角明显小于对照组。通过细胞黏附实验,TiO2镀膜组载玻片表面细胞黏附数平均为36.60±11.20,对照组细胞黏附数平均为96.40±19.67,差异有统计学意义(P=0.000)。细胞迁移实验(划痕法)中,对照组细胞移行距离平均为0.951mm,TiO2镀膜组细胞平均移行距离为0.640mm,差异有统计学意义(P=0.000)。结论TiO2纳米光催化剂薄膜具有超亲水性,能够明显抑制牛LECs在其表面的黏附和移行。 展开更多
关键词 晶状体上皮细胞 后发性白内障 二氧化钛 光催化剂膜
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Prolif erative Inhibition of Rabbit Lens Epithelial Cell——Preliminary Investigation for Prevention of After Cataract
15
作者 Xiaobo Su,Shaozhen Li,Jianliang ZhengZhongshan Ophthalmic Center, Sun Yat-sen University of Medical Sciences Guangzhou 510060, China 《眼科学报》 1995年第1期32-36,共5页
Purpose:To study the ability of Homoharringtonine(Hh),5-Fluorouracil(5-Fu).and Adriamycin(ADM)on inhibiting the proliferation of rabbit lens epitthelium,Methods.Whole rabbit lenses were removed from freshly enucleated... Purpose:To study the ability of Homoharringtonine(Hh),5-Fluorouracil(5-Fu).and Adriamycin(ADM)on inhibiting the proliferation of rabbit lens epitthelium,Methods.Whole rabbit lenses were removed from freshly enucleated eyes under sterile condition.The rabbit lens eptithlia(RLE)were isolated and culatured:(1)The passage RLE were placed in 24-well tissue culture plates and incubated for 48hours.then exposed to different concentrations of Hh,5-Fu,and ADMfor 24and 72hours;(2)The passage RLEandHh(0.084μg/ml).5-Fu(0.058μg/ml),ADM(0.45ng/ml)were placed and cultured for 24hours;(3)The morphological changes of RLE exposed to different concentrations of Hh,5-Fu and ADM were studied under light microscope.Results:The ID50 of Hh,5-Fu and ADMexposed to RLEfor 24hours were 0.84μg/ml, 0.58μg/ml and4.50ng/ml,respectively,and those for 72hous were0.49μg/ml,0.33μg/ml and3.85ng/ml.The attachment rate of RLE after being cu-latured for 24hours with Hh,5-Fu and ADM were respectinely83.6%,89.1%and 87.3%,The morphological changes of RLE demonstrated that obvious changes in the cell membran e and cytoplasm were found even in lower concentra-tion ,but changes in the nuclei could only be found in higher concentation of these drugs.Conclusion:Hh can not only inhibit the proliferation of RLE but also reduce the number of attached cells.It is suggested that Hh may be more useful for the pre-vention of after cataract than 5-Fu and ADM. 展开更多
关键词 晶状体 上皮细胞 增生性抑制 后天性白内障 预防 动物实验
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新基因c24的克隆及其在正常及白内障晶状体上皮细胞中的表达
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作者 刘燕 周健 +2 位作者 刘新平 药立波 惠延年 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第11期801-804,共4页
目的克隆新基因c24并研究其在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞(LECs)中的表达,并比较二者表达的差异。方法用改良的消减杂交法克隆新基因c24,地高辛标记c24cDNA片断制作探针,用原位杂交法研究其在晶状体前囊膜切片上的表达... 目的克隆新基因c24并研究其在正常晶状体和年龄相关性白内障晶状体上皮细胞(LECs)中的表达,并比较二者表达的差异。方法用改良的消减杂交法克隆新基因c24,地高辛标记c24cDNA片断制作探针,用原位杂交法研究其在晶状体前囊膜切片上的表达,并进行统计学处理。结果克隆到了新基因c24的cDNA片断,长约532bp,c24在正常晶状体和年龄相关性白内障LECs中均有表达;其在年龄相关性白内障LECs中的表达高于其在正常LECs的表达。结论c24在正常晶状体和年龄相关性白内障LECs中均有表达;在年龄相关性白内障LECs中,其表达较正常晶状体增高,提示其可能在白内障的发生中起一定的作用。 展开更多
关键词 新基因c24 年龄相关性白内障 晶状体上皮细胞
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红景天苷对H_2O_2诱导的人晶状体上皮细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量:7
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作者 刘礼婷 郑文韬 +1 位作者 刘平 张丽娟 《国际眼科杂志》 CAS 2017年第10期1834-1836,共3页
目的:探讨不同浓度红景天苷对H_2O_2诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelium cells,HLEC)氧化损伤的影响。方法:HLEC传代培养,分为4组:对照组:以正常培养液培养;氧化损伤组:100μmol/L的H_2O_2作用12h;红景天苷低浓度组:10μmol/... 目的:探讨不同浓度红景天苷对H_2O_2诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelium cells,HLEC)氧化损伤的影响。方法:HLEC传代培养,分为4组:对照组:以正常培养液培养;氧化损伤组:100μmol/L的H_2O_2作用12h;红景天苷低浓度组:10μmol/L红景天苷预处理24h后,加入H_2O_2作用12h;红景天苷高浓度组:100μmol/L红景天苷预处理24h后,加入H_2O_2作用12h。应用MTT法观察红景天苷对HLEC细胞活力的影响;倒置显微镜下观察并记录各组细胞形态变化;DCFH-DA荧光探针检测胞内ROS含量的变化;分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶(superoxid dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathion peroxidase,GSH-Px)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。结果:红景天苷能明显抑制H_2O_2诱导的HLEC细胞活力下降,抑制细胞内ROS生成,引起HLEC内SOD、GSH-P水平的升高及MDA水平的下降。结论:红景天苷通过降低细胞内MDA产生,提高细胞内SOD、GSH-Px含量抑制H_2O_2诱导的HLEC损伤,提示红景天苷可能在HLEC损伤的治疗中具有保护作用。 展开更多
关键词 红景天苷 过氧化氢 晶状体上皮细胞 保护
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人晶状体上皮细胞系细胞膜Ca^(2+)-ATPase同工异构体2的表达
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作者 杨晖 曾骏文 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2005年第1期8-11,共4页
 目的 检测人晶状体上皮细胞系B 3(HLEB 3)中,细胞膜钙ATP酶(PMCA)的同工异构体之一,PMCA2的表达情况。 方法 细胞培养HLEB 3,当细胞培养达 90%融合时,提取其总mRNA,用PMCA2特异性引物,用反向聚合酶链反应(RT PCR)法检测PMCA2在mRNA...  目的 检测人晶状体上皮细胞系B 3(HLEB 3)中,细胞膜钙ATP酶(PMCA)的同工异构体之一,PMCA2的表达情况。 方法 细胞培养HLEB 3,当细胞培养达 90%融合时,提取其总mRNA,用PMCA2特异性引物,用反向聚合酶链反应(RT PCR)法检测PMCA2在mRNA水平上的表达。提取细胞膜蛋白,经SDS PAGE电泳以及蛋白免疫印记法(Westernblot),用抗 PMCA2的特异抗体检测其在蛋白质水平上的表达。 结果 RT PCR显示PMCA2特异性引物在HLEB 3细胞扩增出唯一 550bp的片段。蛋白免疫印记法证实PMCA2的表达,相对分子质量约为126 000。 结论 HLEB 3细胞中,在mRNA水平以及蛋白质水平均有PMCA2的表达。并有可能在HLEB 3细胞的钙离子平衡调节中发挥重要作用。 展开更多
关键词 人品状体上皮细胞 细胞膜Ca^2+-ATPase 同工异构体
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脂质体介导的反义寡核苷酸转染对体外培养人晶状体上皮细胞转分化的抑制效应 被引量:1
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作者 庄华 徐国兴 《临床眼科杂志》 2012年第6期552-555,共4页
目的通过脂质体介导转染,研究结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸对体外培养人晶状体上皮细胞(HLECs)向纤维组织转分化的影响。方法评估脂质体介导转染对体外培养HLECs的转染率;通过脂质体转染CTGF反义寡核苷酸,测定第3代HLECs细胞生... 目的通过脂质体介导转染,研究结缔组织生长因子(CTGF)反义寡核苷酸对体外培养人晶状体上皮细胞(HLECs)向纤维组织转分化的影响。方法评估脂质体介导转染对体外培养HLECs的转染率;通过脂质体转染CTGF反义寡核苷酸,测定第3代HLECs细胞生长曲线;采用RT-PCR检测细胞CTGF和α-平滑肌动蛋白(α-SMA)mRNA水平。结果脂质体转染法细胞导入反义核酸阳性率高,脂质体转染24 h后,转化生长因子(TGF-β1)能显著增加CTGF以及α-SMA mRNA的表达,CTGF反义寡核苷酸能抑制这种效应。结论脂质体介导的CTGF反义寡核苷酸转染能有效抑制HLECs TGF-β1诱导的CTGF与α-SMA mRNA表达上调。 展开更多
关键词 结缔组织生长因子 晶状体上皮细胞 反义寡核苷酸 脂质体
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电场暴露抑制晶状体上皮细胞的增殖 被引量:1
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作者 王恩彤 王恩普 李丹 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第6期568-571,共4页
目的 观察外源性电场对晶状体上皮细胞增殖行为的影响并研究其作用机制。方法 将培养的晶状体上皮细胞暴露于场强为 2 0 0mV/mm的直流电场 48h ,未受电场暴露的细胞作为对照。以细胞的密度、生长率和分裂指数评价其增殖能力 ,并通过... 目的 观察外源性电场对晶状体上皮细胞增殖行为的影响并研究其作用机制。方法 将培养的晶状体上皮细胞暴露于场强为 2 0 0mV/mm的直流电场 48h ,未受电场暴露的细胞作为对照。以细胞的密度、生长率和分裂指数评价其增殖能力 ,并通过流式细胞仪进行细胞周期分析和蛋白印记分析检测细胞周期调节蛋白的表达。结果 细胞的增殖在电场中受到明显抑制 ,表现为细胞密度、生长率及分裂指数明显下降。电场暴露抑制细胞周期由G1期向S期的过渡 ,导致G1期阻滞。电场暴露细胞的cyclin E表达明显降低 ,但Cdk2的表达不受影响 ,而cyclin E/Cdk2复合物的抑制蛋白p2 7kip1的表达明显增加。结论 电场抑制晶状体上皮细胞的增殖 ,阻止细胞周期G1/S期的过渡使细胞周期休止于G1期 ,这一作用是藉增加p2 7kip1的表达和减少cyclin 展开更多
关键词 电场 晶状体上皮 细胞增殖 细胞周期
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