Serrin B和Nodosin对HL60、SGC7901、LOVO、U87、AGZY细胞株的毒性作用 被引量：3

1

作者 海广范 张慧 +1 位作者 郭兰青 白素平 《新乡医学院学报》 CAS 2013年第5期345-346,352,共3页

目的探讨天然药物Serrin B和Nodosin对人早幼粒白血病细胞株HL60、人胃腺癌细胞株SGC7901、人结肠癌细胞株LOVO、人胶质瘤细胞株U87、人肺腺癌细胞株AGZY的毒性作用。方法将对数期生长的HL60、SGC7901、LOVO、U87、AGZY细胞株接种于96... 目的探讨天然药物Serrin B和Nodosin对人早幼粒白血病细胞株HL60、人胃腺癌细胞株SGC7901、人结肠癌细胞株LOVO、人胶质瘤细胞株U87、人肺腺癌细胞株AGZY的毒性作用。方法将对数期生长的HL60、SGC7901、LOVO、U87、AGZY细胞株接种于96孔板中,细胞贴壁后,分别加入Serrin B或Nodosin,使药物的终浓度分别为0.00、1.25、2.50、5.00、10.00、20.00μmol.L-1,24 h后用四甲基偶氮唑盐法检测细胞株的死亡率。结果 Serrin B对HL60、SGC7901、LOVO、U87和AGZY细胞株均有较强的毒性作用(P<0.01),且其毒性作用呈现剂量-效应关系。Nodosin对HL60、SGC7901、LOVO、U87细胞株具有较强的毒性作用(P<0.05,P<0.01),而对AGZY细胞株无明显毒性作用。结论 Serrin B和Nodosin是中药溪黄草抗癌作用的有效成分,为人类多种肿瘤治疗的新药研究开发提供新的思路。 展开更多

关键词 溪黄草 HL60细胞株 SGC7901细胞株 LOVO细胞株 u87细胞株 AGZY细胞株

下载PDF 职称材料

miR-206靶向MAPK-1通路增强胶质瘤细胞放射敏感性 被引量：3

2

作者 闻公灵 张保朝 +6 位作者 万里新 温昌明 王旸 张凯 饶石磊 张敬伟 刘扬帆 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第7期759-763,共5页

目的 研究miR-206对胶质瘤细胞放射敏感可能作用的信号通路,为深入研究其调控机理奠定基础。方法 将miR-206模拟剂或miR-206抑制剂转染到胶质瘤U87细胞中,使用抑制剂PD98059抑制MAPK通路活性并照射处理细胞,MTT和克隆形成实验检测细胞... 目的 研究miR-206对胶质瘤细胞放射敏感可能作用的信号通路,为深入研究其调控机理奠定基础。方法 将miR-206模拟剂或miR-206抑制剂转染到胶质瘤U87细胞中,使用抑制剂PD98059抑制MAPK通路活性并照射处理细胞,MTT和克隆形成实验检测细胞放射敏感性变化。分别用qRT-PCR和蛋白印迹法检测miR-206和MAPK1的表达变化,TargetScan软件预测和双荧光素酶报告实验验证miR-206和MAPK1的相互作用。结果 胶质瘤细胞放射处理后miR-206表达下调,MAPK1表达上调。miR-206模拟剂过表达miR-206,细胞增殖和克隆形成能力下降,放射敏感性增高;转染抑制剂抑制miR-206表达,细胞增殖和克隆形成能力加强,放射敏感性降低。使用TargetScan软件查找发现MAPK1可能是miR-206的靶基因,双荧光素酶报告实验进一步验证了miR-206和MAPK1具有相互作用。过表达或降低miR-206表达,MAPK1与miR-206呈相反变化趋势。使用抑制剂抑制MAPK信号通路,胶质瘤细胞放射敏感性升高。结论 miR-206可能靶向MAPK1,通过抑制MAPK信号通路活性调节胶质瘤细胞的放射敏感性。 展开更多

关键词 miR-206基因 MAPK1通路 u87细胞系 放射敏感性

原文传递

乐果对U87细胞HSP70表达及AChE活性的影响 被引量：1

3

作者 谢芳 周志俊 +1 位作者 吴强恩 吴同俊 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2005年第2期105-108,共4页

[目的]研究乐果对神经胶质瘤细胞U87热应激蛋白70 (HSP70 )表达的影响规律,比较HSP70与乙酰胆碱酯酶(AChE)对乐果的敏感性。[方法]以不同浓度乐果(10 0、10、1、0 .1、0 .0 1、0 μmol/L)对体外培养的U87细胞分别进行2、4、8、16和2 4h... [目的]研究乐果对神经胶质瘤细胞U87热应激蛋白70 (HSP70 )表达的影响规律,比较HSP70与乙酰胆碱酯酶(AChE)对乐果的敏感性。[方法]以不同浓度乐果(10 0、10、1、0 .1、0 .0 1、0 μmol/L)对体外培养的U87细胞分别进行2、4、8、16和2 4h染毒,再分别用Western blot法和DTNB法检测各组细胞HSP70表达和AChE活性的变化,比较这两个指标变化的幅度以及引起此变化所需乐果浓度和染毒时间的差异。[结果]乐果染毒2h即可引起HSP70表达的显著增高(P <0 .0 1) ,这一变化在染毒4h时出现于各剂量组,并可持续至染毒16h。在染毒2h和4h ,HSP70表达的变化与乐果剂量之间存在相关关系(Pearson相关系数分别为0 .916和0 .989,P <0 .0 1)。AChE活性的显著降低出现在染毒4h ,且仅出现在剂量较高的3个组,变化幅度也较小。[结论]乐果可以在相对较短时间内以较低剂量引起U87细胞HSP70表达的显著变化,并存在一定的剂量 反应关系。HSP70比AChE对乐果更为敏感。 展开更多

关键词 ACHE活性 乐果 热应激蛋白70(HSP70) WESTERN-BLOT法 HSP70表达 表达及 神经胶质瘤细胞 剂量一反应关系 乙酰胆碱酯酶 DTNB法 不同浓度 体外培养 染毒时间 指标变化 相关系数 相关关系 敏感性 24h 组细胞 出现 低剂量 幅度

下载PDF 职称材料

恶性脑胶质瘤U87细胞系肿瘤干细胞放疗敏感性的体外实验研究 被引量：2

4

作者 赵红宇 徐东 +4 位作者 李帅 王倩 刘海君 金辉 刘云会 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第25期12-14,共3页

目的探讨脑胶质瘤细胞系U87细胞及其肿瘤干细胞(CSCs)对体外放疗的敏感性。方法应用神经干细胞(NSCs)培养基分离培养形成细胞球克隆,检测细胞球细胞的NSCs特性。采用不同剂量放射线照射U87细胞及其CSCs,应用集落形成实验和生存曲线检测... 目的探讨脑胶质瘤细胞系U87细胞及其肿瘤干细胞(CSCs)对体外放疗的敏感性。方法应用神经干细胞(NSCs)培养基分离培养形成细胞球克隆,检测细胞球细胞的NSCs特性。采用不同剂量放射线照射U87细胞及其CSCs,应用集落形成实验和生存曲线检测其生存情况。结果 U87细胞在NSCs培养基中形成悬浮的细胞球克隆,具有自我更新和多向分化能力,表达CD133、Nestin;两种细胞的存活率均随照射剂量增加而下降,且CSCs的存活率明显高于U87细胞(P<0.01)。结论在体外条件下,CSCs的放射敏感性明显低于U87细胞,其可能是恶性脑胶质瘤放疗抵抗的主要原因。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 恶性 u87细胞系 肿瘤干细胞 放疗敏感性

下载PDF 职称材料

荧光素酶表达的脑胶质瘤小鼠模型的建立 被引量：2

5

作者 李雨莹 罗凯伦 +2 位作者 邹宗幸 刘滨磊 汪洋 《湖北工业大学学报》 2020年第5期75-77,87,共4页

运用PiggyBac转座子系统,通过嘌呤霉素筛选构建稳定表达荧光素酶的U87MG细胞株(U87MG-FLUC)。通过流式细胞术检测U87MG-FLUC细胞株纯度达到100%。该细胞系传代后能稳定表达荧光素酶,且生物发光的强度与细胞个数成正比。将该稳定表达荧... 运用PiggyBac转座子系统,通过嘌呤霉素筛选构建稳定表达荧光素酶的U87MG细胞株(U87MG-FLUC)。通过流式细胞术检测U87MG-FLUC细胞株纯度达到100%。该细胞系传代后能稳定表达荧光素酶,且生物发光的强度与细胞个数成正比。将该稳定表达荧光素酶的细胞接种于免疫缺陷型小鼠的颅内,肿瘤接种后的7 d,利用活体成像仪对植瘤小鼠进行检测,确定肿瘤的大小以及位置。结果表明:接种了U87MG-FLUC细胞的裸鼠,均长出肿瘤;成功构建了表达荧光素酶的U87MG细胞株,且人脑胶质瘤细胞系的裸鼠肿瘤模型构建成功。 展开更多

关键词 u87MG 荧光素酶 生物发光 细胞株

下载PDF 职称材料

HSP70在乐果染毒U87细胞中的保护作用

6

作者 谢芳 吴同俊 +1 位作者 吴强恩 周志俊 《职业卫生与应急救援》 2005年第4期171-174,共4页

目的研究HSP70在乐果染毒U87细胞中的保护作用。方法预先给予细胞43℃热应激1 h,然后以浓度为100μmol/L的乐果对细胞分别进行4、8、16 h染毒,染毒结束测AChE和SOD活性并与未经热应激诱导组比较。结果在不同染毒时间,预先经热应激处理... 目的研究HSP70在乐果染毒U87细胞中的保护作用。方法预先给予细胞43℃热应激1 h,然后以浓度为100μmol/L的乐果对细胞分别进行4、8、16 h染毒,染毒结束测AChE和SOD活性并与未经热应激诱导组比较。结果在不同染毒时间,预先经热应激处理的试验组,其AChE及SOD活性都较直接染毒的对照组高,差异有非常显著性(P<0.01),酶活性的变化率在不同时间组间的差异也具有非常显著性(P<0.01)。结论预先进行热应激诱导对乐果染毒U87细胞具有保护作用。 展开更多

关键词 HSP70 乐果 u87细胞 细胞保护

下载PDF 职称材料

伊马替尼与顺铂联用对人胶质母细胞瘤U87细胞株及其裸鼠移植瘤作用的实验研究

7

作者 李晓明 朱廷准 +2 位作者 曹鹏 王婷婷 梁国标 《实用药物与临床》 CAS 2013年第9期771-774,共4页

目的探讨伊马替尼与顺铂联合对胶质母细胞瘤细胞株U87细胞凋亡及其裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,为临床治疗提供实验依据。方法 SubG1法检测U87细胞株在伊马替尼及顺铂单药处理和联合处理时各组细胞的凋亡率;观察不同治疗对U87荷瘤裸鼠移... 目的探讨伊马替尼与顺铂联合对胶质母细胞瘤细胞株U87细胞凋亡及其裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,为临床治疗提供实验依据。方法 SubG1法检测U87细胞株在伊马替尼及顺铂单药处理和联合处理时各组细胞的凋亡率;观察不同治疗对U87荷瘤裸鼠移植瘤的抑制作用,绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率及Q值;测量各组裸鼠体质量变化,评价药物的毒副作用。结果伊马替尼与顺铂联合处理对U87细胞凋亡诱导率显著高于相同剂量的各单药处理组;联合治疗组与相同剂量的各单药治疗组比较,抑瘤率差异有统计学意义(P<0.05),Q值为1.264;与顺铂高剂量组比较,抑瘤率差异无统计学意义(P>0.05)。结论伊马替尼与顺铂联用有协同效应,二者联用可降低顺铂使用剂量,减轻对裸鼠的毒副作用。 展开更多

关键词 伊马替尼 顺铂 u87细胞 裸鼠

下载PDF 职称材料

mIDH1真核表达载体的构建及其对U87细胞增殖的影响

8

作者 段景怡 王举波 《山西医科大学学报》 CAS 2017年第9期913-917,共5页

目的构建人mIDH1基因的真核表达载体及U87稳转细胞系,观察mIDH1对胶质瘤U87细胞体内外增殖的影响。方法以IDH1-cDNA为模板,采用PCR方法扩增IDH1片段,IDH1片段经双酶切、连接重组至真核表达载体p-EGFP-C1,构建IDH1野生型(w IDH1)重组质粒... 目的构建人mIDH1基因的真核表达载体及U87稳转细胞系,观察mIDH1对胶质瘤U87细胞体内外增殖的影响。方法以IDH1-cDNA为模板,采用PCR方法扩增IDH1片段,IDH1片段经双酶切、连接重组至真核表达载体p-EGFP-C1,构建IDH1野生型(w IDH1)重组质粒,利用点突变技术通过IDH1真核表达载体构建突变型IDH1(mIDH1)真核表达载体,并通过双酶切产物明胶电泳及DNA测序鉴定该重组质粒。Lip2000脂质体介导突变型IDH1转染U87胶质瘤细胞,利用G418筛选构建稳定转染p-EGFP-mIDH1真核表达载体的单克隆细胞株,构建稳转细胞系,CCK-8法检测U87细胞体外增殖能力,裸鼠成瘤实验检测mIDH1细胞系与对照U87细胞系的体内增殖。结果 mIDH1重组质粒经双酶切及测序鉴定证明mIDH1重组质粒构建成功,顺利转染U87胶质瘤细胞并高效表达,体外可抑制胶质瘤细胞的增殖,体内可减缓裸鼠皮下成瘤速度。结论 p-EGFP-mIDH1真核表达载体可在U87胶质瘤细胞系中稳定表达,并可抑制胶质瘤细胞的增殖。 展开更多

关键词 真核表达载体 胶质瘤 u87细胞 IDH1基因 稳转细胞系 细胞增殖

下载PDF 职称材料

胶质瘤细胞中β-TrCP和Bmi-1之间可能的调节关系

9

作者 倪卫娟 王超 +1 位作者 倪殿军 李归宿 《遵义医科大学学报》 2020年第4期477-481,共5页

目的分析胶质瘤细胞β-转导重复相容蛋白(β-TrCP)和B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1蛋白(Bmi-1)之间可能的调节关系。方法收集胶质瘤临床样本,对样品进行级别统计及β-TRCP1和Bmi-1基因检测。采用胶质细胞瘤U87细胞进行细胞验... 目的分析胶质瘤细胞β-转导重复相容蛋白(β-TrCP)和B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1蛋白(Bmi-1)之间可能的调节关系。方法收集胶质瘤临床样本,对样品进行级别统计及β-TRCP1和Bmi-1基因检测。采用胶质细胞瘤U87细胞进行细胞验证实验,分别转染β-TrCP过表达腺病毒(ad-β-TrCP1组)及靶向β-TrCP mRNA的siRNA(si-β-TrCP1组)。使用蛋白免疫印迹(Western blot)法分别检测各组细胞中β-TRCP1和Bmi-1的蛋白表达水平。结果与非肿瘤组织相比,不同级别的脑胶质瘤临床样本中β-TrCP基因表达水平显著降低,Bmi-1则呈现高表达趋势(P<0.05)。其中,WHO3~4级脑胶质瘤样本中β-TrCP的表达水平显著低于WHO1~2级脑胶质瘤,而Bmi-1的基因表达水平则显著高于WHO1~2级肿瘤组织样本。在细胞实验中,胶质细胞瘤U87细胞中过表达β-TrCP1后Bmi-1蛋白表达显著降低,敲低β-TrCP1基因表达后Bmi-1的蛋白表达水平则显著提高。结论在临床脑胶质细胞瘤组织样品中β-TrCP基因表达显著低于正常组织,而Bmi-1基因则具有高表达特性,β-TrCP1和Bmi-1可能存在上下游调控关系,共同参与并影响神经胶质母细胞瘤的发生发展。 展开更多

关键词 β-TrCP BMI-1 胶质细胞瘤 u87细胞系

下载PDF 职称材料

肿瘤干细胞中受H3K9me2调控的干性基因的筛选

10

作者 陶虹 张绍平 +2 位作者 张琳娜 张漫 扈启宽 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期195-202,共8页

为了分析比较甲基转移酶G9a和组蛋白H3K9me2修饰在胶质瘤干细胞与非干细胞中存在的差异,筛选出维持胶质瘤干细胞干性的相关基因。通过G9a抑制剂促进U87细胞成球和过表达G9a促进U87细胞分化的方法,培养了成球的胶质瘤干细胞和贴壁的非干... 为了分析比较甲基转移酶G9a和组蛋白H3K9me2修饰在胶质瘤干细胞与非干细胞中存在的差异,筛选出维持胶质瘤干细胞干性的相关基因。通过G9a抑制剂促进U87细胞成球和过表达G9a促进U87细胞分化的方法,培养了成球的胶质瘤干细胞和贴壁的非干细胞,这两种细胞的CD133表达差异明显。再利用H3K9me2抗体通过Ch IP-seq技术比较H3K9me2修饰在干细胞组与非干细胞组中的差异,在存在差异的基因中,对TSS±2 000 bp范围内的基因进行了GO分析,并随机选出10个转录因子进行QPCR验证,结果与Ch IP-seq实验基本一致。 展开更多

关键词 CHIP-SEQ G9a H3K9me2 Bix01294 u87细胞株

下载PDF 职称材料

格列卫诱导癌蛋白半乳凝集素-3通过溶酶体降解并促进胶质母细胞瘤U87细胞的凋亡

11

作者 李晓明 陶英群 +1 位作者 朱廷准 梁国标 《实用药物与临床》 CAS 2013年第10期886-889,共4页

目的探讨格列卫诱导胶质母细胞瘤细胞株U87细胞凋亡及其促进癌蛋白半乳凝集素-3(Gal-3)降解的分子机制。方法利用细胞免疫染色法和提取细胞溶酶体的方法观察格列卫处理细胞后溶酶体中Gal-3蛋白量的变化;U87细胞分别用格列卫和/或STS及... 目的探讨格列卫诱导胶质母细胞瘤细胞株U87细胞凋亡及其促进癌蛋白半乳凝集素-3(Gal-3)降解的分子机制。方法利用细胞免疫染色法和提取细胞溶酶体的方法观察格列卫处理细胞后溶酶体中Gal-3蛋白量的变化;U87细胞分别用格列卫和/或STS及溶酶体抑制剂ConA处理后,用Western blot方法检测细胞中Gal-3蛋白量的改变;SubG1法检测U87细胞在格列卫及STS单药处理和联合处理时各组细胞凋亡率。结果格列卫处理U87细胞使Gal-3蛋白进入溶酶体并发生蛋白的降解;格列卫能够诱导U87细胞发生凋亡,与STS联合使用有协同诱导U87细胞凋亡的作用。结论格列卫能够诱导U87细胞株中Gal-3通过溶酶体降解,并使肿瘤细胞对凋亡诱导剂的敏感性增加。 展开更多

关键词 格列卫 半乳糖凝集素-3 u87细胞 溶酶体

下载PDF 职称材料

RNA干扰Fascin1表达抑制胶质瘤细胞U87MG的侵袭、转移能力 被引量：17

12

作者 李培栋 王新军 +2 位作者 单峤 吴跃辉 王振 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期764-768,共5页

目的:本研究运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术特异性抑制肌动蛋白结合的细胞骨架蛋白Fascin1的表达,并探讨其对胶质瘤细胞U87 MG的侵袭和转移能力的影响及相关分子机制。方法:将针对Fascin1的小干扰RNA(Fascin1-si RNA)和阴性对... 目的:本研究运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术特异性抑制肌动蛋白结合的细胞骨架蛋白Fascin1的表达,并探讨其对胶质瘤细胞U87 MG的侵袭和转移能力的影响及相关分子机制。方法:将针对Fascin1的小干扰RNA(Fascin1-si RNA)和阴性对照si RNA(Negative-si RNA)转染至人胶质瘤细胞株U87 MG中。实验分为3组:空白对照组(未转染的细胞)、阴性对照组(转染neg-si RNA的细胞)、实验组(转染Fascin1-si RNA的细胞)。用transwell小室法检测Fascin1对U87MG细胞的侵袭和转移能力的影响,蛋白印迹法(Western blot)检测U87 MG细胞中Fascin1、p AKT及p STAT3等蛋白的表达。通过添加针对PI3K通路的抑制剂LY294002和针对STAT3通路的抑制剂JSI-124,证实了这两条信号通路在胶质瘤细胞U87MG侵袭、转移方面的作用。结果:相比空白对照组和阴性对照组,实验组细胞的转移能力降低了约(49±5.8)%及(46±5.4)%(P<0.05),侵袭能力降低了约(42±4.9)%和(43±4.8)%(P<0.05);且相关的PI3K/AKT及STAT3等信号通路的磷酸化减少;添加相应的信号通路抑制剂后,细胞的侵袭、转移能力显著降低(P<0.05)。结论:RNAi抑制Fascin1表达能够降低胶质瘤细胞U87 MG的侵袭及转移能力,并可抑制PI3K/AKT和STAT3信号激活,在一定程度上可逆转胶质瘤细胞的转移和侵袭等肿瘤特性。 展开更多

关键词 RNA干扰 Fascin1 胶质瘤 u87 MG 侵袭转移

下载PDF 职称材料

miR-577对胶质瘤细胞上皮-间质转化的调控作用及机制 被引量：6

13

作者 郭梦 石瑞 毛维 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第12期1158-1161,共4页

目的探讨miR-577调控胶质瘤细胞上皮-间质转化活性的机制。方法将人源性胶质瘤细胞U87细胞分为miR-577类似物组、miR-577抑制物组和空白对照组,分别转染miR-577mimic、miR-577inhibitor和miR577-NC。转染24h后,采用划痕实验检测各组细... 目的探讨miR-577调控胶质瘤细胞上皮-间质转化活性的机制。方法将人源性胶质瘤细胞U87细胞分为miR-577类似物组、miR-577抑制物组和空白对照组,分别转染miR-577mimic、miR-577inhibitor和miR577-NC。转染24h后,采用划痕实验检测各组细胞迁移距离,采用Transwell小室实验检测各组细胞侵袭细胞数,采用反转录PCR法检测各组细胞β-catenin mRNA表达水平,采用Western blot法检测各组细胞vimentin、E-cadherin蛋白相对表达量。结果miR-577抑制物组、空白对照组、miR-577类似物组细胞迁移距离[(3.44±0.55)、(2.13±0.21)、(1.04±0.14)mm]、侵袭细胞数[(128.50±8.11)、(84.60±4.20)、(39.80±6.01)个]、细胞β-catenin mRNA相对表达量(0.80±0.06、0.61±0.04、0.45±0.06)和vimentin蛋白相对表达量(0.82±0.06、0.67±0.08、0.31±0.02)均依次降低(P<0.05),E-cadherin蛋白相对表达量(0.44±0.04、0.76±0.05、0.89±0.08)依次增高(P<0.05)。结论miR-577可能作为抑癌基因,通过阻断Wnt/β-catenin信号通路的活性,降低人源性胶质瘤U87细胞上皮-间质转化活性,从而抑制肿瘤发展。 展开更多

关键词 胶质瘤 miR-577 WNT/Β-CATENIN 人源性胶质瘤u87细胞 上皮-间质转化

原文传递

新候选肿瘤抑制基因溶质载体8号家族中的2号成员基因对胶质瘤细胞株U87的侵袭迁移能力和裸鼠致瘤性的影响 被引量：3

14

作者 余聚 屈鸣麒 +2 位作者 刘泓渊 兰青 步星耀 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1796-1799,共4页

目的 探讨溶质载体8号家族中的2号成员基因（SLC8A2）对胶质瘤细胞U87的迁移侵袭能力和裸鼠移植瘤生长的影响及其机制.方法 构建稳定表达SLC8A2基因的U87-SLC8A2细胞株（实验组）和稳定表达GFP的U87-NC细胞株（阴性对照组）.Transwell... 目的 探讨溶质载体8号家族中的2号成员基因（SLC8A2）对胶质瘤细胞U87的迁移侵袭能力和裸鼠移植瘤生长的影响及其机制.方法 构建稳定表达SLC8A2基因的U87-SLC8A2细胞株（实验组）和稳定表达GFP的U87-NC细胞株（阴性对照组）.Transwell小室及预铺50μl Matrigel基质胶的Transwell小室检测SLC8A2对U87细胞侵袭和迁移能力的影响,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测转染该基因后肿瘤细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9及MT1-MMP转录水平的变化,明胶酶谱法检测分泌至细胞培养基中MMP-2酶活性的变化；裸鼠皮下移植瘤实验（5只/组）检测SLC8A2对U87细胞致瘤性的影响.结果 U87-NC和U87-SLC8A2穿过Transwell小室基膜的细胞数分别为（279.70±17.50）个及（4.30±0.58）个,而穿过预铺Matrigel基质胶的Transwell小室基膜的细胞数分别为（274.0±21.3）个和（12.7±1.2）个,差异有统计学意义（P＜0.01）；与U87-NC比较,U87-SLC8A2细胞中MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MTl-MMP的转录水平分别下降了（55.4±3.2）％、（78.7±5.3）％、（79.7±4.6）％、（53.9±3.2）％及（70.9±4.4）％（P＜0.01）,且U87-SLC8A2细胞分泌的MMP-2酶活性较U87-NC下降了（93.2±5.1）％（P＜0.01）；接种U87-SLC8A2细胞的裸鼠全都不致瘤,而接种对照组细胞的裸鼠全部致瘤成功.结论 SLC8A2可下调MMP的活性而抑制胶质瘤细胞U87的侵袭迁移能力,并能显著抑制U87细胞在裸鼠体内的生长及增殖. 展开更多

关键词 溶质载体8号家族中的2号成员基因 u87胶质瘤细胞 侵袭 迁移 致瘤性

原文传递

神经调节因子Neuregulin-1(Nrg1)调节U87-MG细胞的黏附分子L1表达及促迁移作用 被引量：2

15

作者 赵炜疆 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第7期829-833,共5页

目的研究神经调节因子Neuregulin-1(Nrg1)对人胶质母细胞瘤U87-MG细胞中细胞黏附分子L1表达及细胞迁移的影响。方法给予U87-MG细胞重组Nrg1α(rNrg1α,2.5 nmol/L)24和48 h,RT-PCR观察L1 mRNA表达;给予细胞rNrg1α或rNrg1β(2.5 nmol/L)... 目的研究神经调节因子Neuregulin-1(Nrg1)对人胶质母细胞瘤U87-MG细胞中细胞黏附分子L1表达及细胞迁移的影响。方法给予U87-MG细胞重组Nrg1α(rNrg1α,2.5 nmol/L)24和48 h,RT-PCR观察L1 mRNA表达;给予细胞rNrg1α或rNrg1β(2.5 nmol/L)48 h,Western blot检测L1蛋白水平。用Nrg1 siRNA处理细胞,Western blot观察L1蛋白水平,用细胞划伤实验观察细胞迁移。结果 Nrg1α可促进L1 mRNA表达;与0 nmol/L组相比,Nrg1α及Nrg1β(2.5 nmol/L)均可显著增加L1蛋白水平(P<0.01,P<0.05)。与对照siRNA相比,Nrg1 siRNA明显降低Nrg1表达,并伴有L1表达下降。Nrg1 siRNA处理细胞划伤16 h,划伤边缘细胞Nrg1α、Nrg1β及L1荧光信号降低,细胞迁移减弱。结论 Nrg1可调节U87-MG细胞L1表达,其参与细胞迁移可能与提高L1表达有关。 展开更多

关键词 神经调节因子 细胞黏附分子L1 u87-MG细胞系 细胞迁移

下载PDF 职称材料

沉默lncRNA HOTAIR上调miR-17-5p表达增加U87R细胞放射敏感性 被引量：1

16

作者 原高明 孟晓锋 +3 位作者 郭孝龙 程小兵 郝晓伟 史保中 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第1期90-94,共5页

目的探讨lncRNA HOTAIR对胶质瘤U87R细胞和移植瘤放射敏感性影响及潜在作用机制。方法将阴性对照质粒、沉默HOTAIR质粒、过表达miR-NC质粒、过表达miR-17-5p质粒分别转染到U87R细胞中,记为沉默对照组、沉默HOTAIR组、过表达miR-NC组、... 目的探讨lncRNA HOTAIR对胶质瘤U87R细胞和移植瘤放射敏感性影响及潜在作用机制。方法将阴性对照质粒、沉默HOTAIR质粒、过表达miR-NC质粒、过表达miR-17-5p质粒分别转染到U87R细胞中,记为沉默对照组、沉默HOTAIR组、过表达miR-NC组、过表达miR-17-5p组;以上各组细胞分别用4Gy照射,记为沉默对照+4Gy组、沉默HOTAIR+4Gy组、过表达miR-NC+4Gy组、过表达miR-17-5p+4Gy组;将沉默HOTAIR质粒分别与抑制表达miR-NC质粒、抑制表达miR-17-5p质粒共转染到U87R细胞中,记为沉默HOTAIR+抑制miR-NC组、沉默HOTAIR+抑制miR-17-5p组,转染均用脂质体法。采用qRT-PCR检测miR-17-5p和HOTAIR的表达;细胞克隆形成实验检测瘤细胞放射敏感性影响;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果HOTAIR在放射抵抗的细胞中高表达;沉默HOTAIR和过表达miR-17-5p可增加U87R细胞放射敏感性且促进放射照射诱导的凋亡。HOTAIR可靶向调节miR-17-5p表达,抑制miR-17-5p逆转了沉默HOTAIR对U87R细胞放射增敏和促进放射诱导的凋亡。结论沉默lncRNA HOTAIR对胶质瘤细胞具有放射增敏和促放射诱导的凋亡作用,其机制可能与调控miR-17-5p有关。 展开更多

关键词 HOX转录物反义基因 miR-17-5p基因 放射敏感性 u87R细胞系

原文传递

siRNA干扰半乳凝集素-3对恶性胶质瘤细胞株U87MG细胞凋亡及增殖的影响

17

作者 李晓明 朱廷准 梁国标 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2012年第22期7233-7237,共5页

目的研究抑制半乳凝集素-3(Gal3)的表达对恶性胶质瘤细胞株U87MG细胞凋亡及增殖的影响。方法构建Gal3siRNA表达载体,转染U87MG细胞,并筛选出单克隆细胞株U87MG/Gal3 RNAi;用RT-PCR方法检测该稳定细胞株中Gal3的mRNA表达,用Western blot... 目的研究抑制半乳凝集素-3(Gal3)的表达对恶性胶质瘤细胞株U87MG细胞凋亡及增殖的影响。方法构建Gal3siRNA表达载体,转染U87MG细胞,并筛选出单克隆细胞株U87MG/Gal3 RNAi;用RT-PCR方法检测该稳定细胞株中Gal3的mRNA表达,用Western blot检测其蛋白表达;通过流式细胞技术和MTT法检测Gal3对肿瘤细胞凋亡及增殖的影响。结果 U87MG野生型细胞株、U87MG/空载体稳定细胞株和U87MG/Gal3 RNAi稳定细胞株的Gal3 mRNA表达值分别为1.28±0.0431,1.31±0.0278和0.38±0.0506;Gal3蛋白表达值分别为0.56±0.0479,0.54±0.0351和0.12±0.0418,U87MG/Gal3 RNAi稳定细胞株的Gal3 mRNA及蛋白表达显著低于对照组细胞(P<0.05);三种细胞株对凋亡诱导剂CDDP所诱导的细胞凋亡率分别为(30.83±0.13)%、(30.82±0.159)%和(54.56±0.12)%,U87MG/Gal3 RNAi稳定细胞株凋亡率显著高于对照组细胞(P<0.05);U87MG/Gal3 RNAi稳定细胞株细胞增殖率在不同时间点均显著低于对照组细胞(P<0.05)。结论抑制Gal3基因的表达能够促进该肿瘤细胞的凋亡,并抑制细胞的增殖。Gal3可以成为治疗恶性胶质瘤的有效的靶基因。 展开更多

关键词 RNA干扰 细胞凋亡 细胞增殖 单克隆稳定细胞株 恶性胶质瘤细胞u87MG

原文传递

ADC患者体内HIV-1gp120基因的变异及其对U87细胞合成PDGF-BB与MCP-1的影响

18

作者 秦泽明 刘建伟 +6 位作者 苏祥 李昕 杨奕 温红玲 宋艳艳 黄涛 赵丽 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2016年第6期-,共5页

目的 探讨HIV-1gp120在HIV-1入侵中枢神经系统(CNS)机制中的作用.方法 扩增1例艾滋病痴呆综合征(ADC)患者外周主动脉周淋巴结(PL)和CNS颞叶灰白质连接处(TGWJ)、脑室周围组织(PV)的HIV-1 gp120基因,测序并进行序列分析;构建真核表达载体... 目的 探讨HIV-1gp120在HIV-1入侵中枢神经系统(CNS)机制中的作用.方法 扩增1例艾滋病痴呆综合征(ADC)患者外周主动脉周淋巴结(PL)和CNS颞叶灰白质连接处(TGWJ)、脑室周围组织(PV)的HIV-1 gp120基因,测序并进行序列分析;构建真核表达载体pEGFP-gp120,在U87细胞中表达gp120蛋白,观察绿色荧光蛋白荧光强弱判断gp120表达;同时用免疫组化方法检测蛋白的表达,ELISA法检测U87细胞中血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量.结果 gp120基因序列分析结果显示,3个部位的HIV-1均为巨噬细胞嗜性,CNS来源的TGWJ和PV的HIV-1使用CCR5受体,与神经致病性有关.成功构建pEGFP-gp120表达载体,并在U87细胞中表达了gp120蛋白,转染后48 h蛋白表达量最高.ADC患者不同部位来源的gp120蛋白对U87细胞PDGF-BB水平无影响(P＞0.05),但能增强其MCP-1的分泌水平,且来自外周PL的gp120对MCP-1的升高作用较CNS更显著(P＜0.05).结论 ADC患者CNS gp120的变异提高了其对CNS环境的适应能力,与HIV的神经致病性有关;gp120蛋白可刺激U87细胞分泌MCP-1,而且外周来源的gp120作用较强,利于HIV-1入侵CNS. 展开更多

关键词 艾滋病痴呆综合征 HIV-1 GP120 血小板衍生生长因子BB 单核细胞趋化蛋白-1 胶质瘤细胞u87

原文传递

人脑胶质母细胞瘤细胞系U87的单克隆细胞构建及异质性研究

19

作者 蒋迎娣 殷莹 +7 位作者 浦浙宁 张博 龚玲丽 胡亚玲 纪丽 汪京京 张真豪 邹健 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第11期1150-1157,共8页

目的人胶质母细胞瘤细胞细胞系U87被作为胶质母细胞瘤(GBM)异质性研究的模型,但从基因水平探讨其异质性来源的研究较少。文章旨在构建人胶质母细胞瘤细胞系U87单克隆细胞株,检测不同单克隆细胞株的表型和遗传背景差异,并探讨产生表型差... 目的人胶质母细胞瘤细胞细胞系U87被作为胶质母细胞瘤(GBM)异质性研究的模型,但从基因水平探讨其异质性来源的研究较少。文章旨在构建人胶质母细胞瘤细胞系U87单克隆细胞株,检测不同单克隆细胞株的表型和遗传背景差异,并探讨产生表型差异的分子机制。方法利用小分子荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)作为筛选标记,有限稀释法构建U87单克隆细胞株,并挑选具有典型形态特征的2株单克隆化细胞,经短串联重复序列(STR)鉴定后进行后续研究。采用CCK-8、EdU掺入法增殖实验和和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;肿瘤干细胞成球实验检测细胞成球能力;免疫荧光和CCK-8法黏附实验检测细胞黏附能力;3D侵袭实验检测细胞侵袭能力;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞对化疗药物的敏感性;转录组测序(RNA-seq)对细胞进行测序及生物信息学分析;qRT-PCR验证富集通路中代表性差异基因mRNA表达量。结果构建了形态较为均一U87单克隆细胞株CF5和G11。其中CF5小而短粗,G11大而细长。CCK-8增殖实验结果显示,CF5细胞增殖能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.001)。EdU掺入法增殖实验结果显示,CF5 EdU阳性细胞比例(0.54±0.05)较G11细胞(0.35±0.03)、U87(0.44±0.03)明显增加,U87较G11明显增强(P<0.01)。肿瘤干细胞成球实验显示,CF5干细胞成球能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.01)。免疫荧光法黏附实验显示,黏附1 h后G11黏附面积较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.001)。3D培养侵袭实验结果显示,G11细胞侵袭能力较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.05)。交互分析发现CF5相对G11和U87均下调的基因159个,均上调的基因303个;G11相对CF5和U87均下调的基因有281个,上调的基因则有116个;通路富集分析显示CF5和G11在细胞外基质相关的通路有最高的富集度,细胞外基质相关通� 展开更多

关键词 胶质母细胞瘤 人脑胶质母细胞瘤细胞系u87 单克隆细胞株 肿瘤异质性 表型 转录组测序

下载PDF 职称材料

免疫球蛋白G促进胶质瘤细胞系U87MG中PCNAP-ERK及P-SRC的表达

20

作者 王丽 滕晓梅 +2 位作者 权翠侠 霍美凤 胡书群 《检验医学与临床》 CAS 2013年第8期936-937,939,共3页

目的了解在体外培养条件下人源性免疫球蛋白G(IgG)刺激人胶质瘤细胞系U87MG后,对增殖细胞核抗原(PCNA)、激活的细胞外信号调节激酶(P-ERK)及激活的非受体酪氨酸激酶(P-SRC)表达的影响。方法用不同浓度的IgG(0.01、0.1、1μg/mL)刺激U87M... 目的了解在体外培养条件下人源性免疫球蛋白G(IgG)刺激人胶质瘤细胞系U87MG后,对增殖细胞核抗原(PCNA)、激活的细胞外信号调节激酶(P-ERK)及激活的非受体酪氨酸激酶(P-SRC)表达的影响。方法用不同浓度的IgG(0.01、0.1、1μg/mL)刺激U87MG,24h后采用Western blot方法检测PCNA、ERK及P-ERK、SRC及P-SRC的表达变化情况。结果 IgG直接作用于体外培养的胶质瘤U87MG后,相对于对照组而言PCNA、P-ERK及P-SRC表达有明显的升高,并且表达呈现出一定的剂量依赖性。结论 IgG可能与神经系统癌症有关联。 展开更多

关键词 胶质瘤细胞系u87MG 免疫球蛋白G 增殖细胞核抗原 激活的非受体酪氨酸激酶 激活的细胞外信号调节激酶

下载PDF 职称材料