牛血中SOD的提取技术研究 被引量：19

1

作者 张波 庞第 王全林 《宁夏大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第1期69-70,共2页

提出了以牛血为原料分离纯化SOD的方法 ,分离产率约为 6 0 % ,提纯倍数达 90 0倍 .与经典的J.M .McCord方法相比 ,该法不仅降低了制备成本、简化了工艺 。

关键词 牛血 SOD 提取技术 超氧化物歧化酶 分离 纯化 酶活力 活力回收 酶比活

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固定化胰蛋白酶的制备 被引量：4

2

作者 孙晓丰 余蓉 +1 位作者 曾蓉 杨继虞 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期176-178,共3页

目的　制备一种高活力的固定化胰蛋白酶 ,通过优化其制备条件提高活力回收。方法　将壳聚糖敷涂在硅胶的表面制成载体 ,以戊二醛为交联剂 ,通过交联反应将胰蛋白酶固定至载体上制得。对固定化后的滤液做回收再利用实验。结果　优化后制... 目的　制备一种高活力的固定化胰蛋白酶 ,通过优化其制备条件提高活力回收。方法　将壳聚糖敷涂在硅胶的表面制成载体 ,以戊二醛为交联剂 ,通过交联反应将胰蛋白酶固定至载体上制得。对固定化后的滤液做回收再利用实验。结果　优化后制得的固定化胰蛋白酶的活力单位 (AU)高达 6 84 8.4U·g-1 ,活力回收 (AR)为 2 1 .8%。回收再利用实验得到的固定化胰蛋白酶活力单位仍高达 5 90 7.2 0U·g-1 。结论　制备的固定化胰蛋白酶活力单位高 ,活力回收也较高 。 展开更多

关键词 固定化胰蛋白酶 壳聚糖 戊二醛 活力单位 活力回收

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NAD(P)依赖型氧化还原酶分离纯化技术进展 被引量：2

3

作者 徐小琳 徐岩 穆晓清 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期49-54,共6页

NAD(P)依赖型的氧化还原酶是一类重要的生物催化剂,在生物合成中被广泛应用。以亲和技术为基础的分离纯化方法与其它分离制备方法相比具有高选择性、高活力回收等优点。本文着重讨论亲和色谱技术在NAD(P)依赖型的氧化还原酶的分离纯化... NAD(P)依赖型的氧化还原酶是一类重要的生物催化剂,在生物合成中被广泛应用。以亲和技术为基础的分离纯化方法与其它分离制备方法相比具有高选择性、高活力回收等优点。本文着重讨论亲和色谱技术在NAD(P)依赖型的氧化还原酶的分离纯化及制备中的研究进展。 展开更多

关键词 依赖型 NAD 氧化还原酶 分离纯化技术 活力回收 研究进展 分离纯化方法 分离制备 生物合成 生物催化剂

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桔皮超氧化物歧化酶的纯化和部分性质研究

4

作者 林国平 戴春秀 +1 位作者 李斌元 容小朋 《美国中华临床医学杂志》 2005年第1期51-52,70,共3页

目的从桔皮中分离纯化超氧化物歧化酶，并对其理化性质进行研究。方法采用磷酸盐缓冲液提取，经丙酮去杂蛋白、丙酮沉淀、G-100纯化等步骤，得纯化的超氧化物歧化酶。并对超氧化物歧化酶的部分性质进行鉴定和分析。结果以200g新鲜桔皮... 目的从桔皮中分离纯化超氧化物歧化酶，并对其理化性质进行研究。方法采用磷酸盐缓冲液提取，经丙酮去杂蛋白、丙酮沉淀、G-100纯化等步骤，得纯化的超氧化物歧化酶。并对超氧化物歧化酶的部分性质进行鉴定和分析。结果以200g新鲜桔皮为起始材料，提取超氧化物歧化酶，粗提液的总活力为45112U，经纯化后最终总活力为23368U，活力回收约51．8％；起始活力为120．3U／mL，纯化后的比活力为973．7U／ml，纯化倍数为8．1倍。结论从枯皮中可以提取得到超氧化物歧化酶。本研究具有重要的实际意义和应用价值。 展开更多

关键词 超氧化物歧化酶 性质研究 桔皮 磷酸盐缓冲液 分离纯化 理化性质 活力回收 纯化倍数 应用价值 提取 杂蛋白 比活力 丙酮 起始

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葡萄糖氧化酶的固定化方法与改进 被引量：4

5

作者 李丽霞 鲁格 +1 位作者 陈长治 俞耀庭 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS 1987年第6期562-567,共6页

本文在固定化葡葡糖氧化酶方面,对几种固定化载体和方法做了最佳条件摸索和比较。改进了戊二醛偶联法,尝试用二乙醇胺先保护戊二醛一端,另一端与载体偶联,然后脱去保护基再偶联酶,效果较好。用该法制得固定化酶在所研究的三种方法中效... 本文在固定化葡葡糖氧化酶方面,对几种固定化载体和方法做了最佳条件摸索和比较。改进了戊二醛偶联法,尝试用二乙醇胺先保护戊二醛一端,另一端与载体偶联,然后脱去保护基再偶联酶,效果较好。用该法制得固定化酶在所研究的三种方法中效果最好。固定化酶活力回收率比用聚丙烯酰胺包埋法高出一倍多,比用重氮盐共价键合法高出10%左右。 展开更多

关键词 二乙醇胺 重氮盐 偶联法 葡糖氧化酶 葡萄糖氧化 固定化载体 固定化酶 活力回收率

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离子液体双水相体系分离辣木叶凝乳酶 被引量：5

6

作者 施娅楠 沐剑蓉 +1 位作者 黄子玉 黄艾祥 《食品科技》 CAS 北大核心 2018年第11期240-245,共6页

采用[C_4mim]Br/K_2HPO_4双水相抽提技术从辣木叶蛋白中分离凝乳酶,研究双水相参数[C_4mim]Br浓度、K_2HPO_4浓度、粗酶浓度、体系pH对凝乳酶活力和分离效果的影响,并与传统的硫酸铵三步盐析法相比较。结果表明:1.3 g/mL的[C_4mim]Br,2.... 采用[C_4mim]Br/K_2HPO_4双水相抽提技术从辣木叶蛋白中分离凝乳酶,研究双水相参数[C_4mim]Br浓度、K_2HPO_4浓度、粗酶浓度、体系pH对凝乳酶活力和分离效果的影响,并与传统的硫酸铵三步盐析法相比较。结果表明:1.3 g/mL的[C_4mim]Br,2.2 g/mL的K_2HPO_4,粗酶添加量为20 mg/mL,pH7.5可达最佳凝乳酶萃取效果,此条件下辣木叶凝乳酶的酶活性回收率达到85.5%,纯化因子达1.49。与三步盐析法相比,较强的疏水相互作用提高了酶的分离效果,且分离步骤少可有效降低酶活力损失。根据电泳结果,分相后的辣木叶凝乳酶分子量为(55~60)ku存在于上层的富离子液体相,部分杂蛋白的分子量为(25~40)ku保持在富盐底部。 展开更多

关键词 辣木叶 凝乳酶 离子液体双水相体系 萃取 凝乳活力回收率

原文传递

粪产碱杆菌青霉素G酰化酶的分离提取 被引量：3

7

作者 孙健 杨志建 +1 位作者 许国旺 袁中一 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期11-15,共5页

比较研究了几种破碎大肠杆菌细胞的方法,如渗透压法、超声波法、玻珠震碎法、玻珠研磨法、有机溶剂法、冻融法以及盐酸胍/EDTA法等,以确定出一种简单、快速、高效的破碎重组大肠杆菌细胞的方法获得粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)用于... 比较研究了几种破碎大肠杆菌细胞的方法,如渗透压法、超声波法、玻珠震碎法、玻珠研磨法、有机溶剂法、冻融法以及盐酸胍/EDTA法等,以确定出一种简单、快速、高效的破碎重组大肠杆菌细胞的方法获得粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)用于后续试验。结果表明玻珠震碎法、超声波法和渗透压法是较优的细胞破碎方法,活力回收率分别为99.7%、78.4%、60.7%,其他方法均低于22%。而比活力以渗透压法为最高,达到4.40 U/mg。 展开更多

关键词 大肠杆菌 细胞破碎 活力回收率 比活力

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改性陶粒固定化酶的研究 被引量：3

8

作者 陈亚 林波 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1462-1465,共4页

探索了以改性陶粒为载体固定化木瓜蛋白酶,通过对比实验确定了偶联剂种类和最佳固定化方案:采用硅烷(KH-570)和戊二醛共同偶联固定化酶。通过正交实验确定了各因素浓度的最优组合:盐酸浓度为0.20 mol/L、硅烷质量分数为0.392%、戊二醛... 探索了以改性陶粒为载体固定化木瓜蛋白酶,通过对比实验确定了偶联剂种类和最佳固定化方案:采用硅烷(KH-570)和戊二醛共同偶联固定化酶。通过正交实验确定了各因素浓度的最优组合:盐酸浓度为0.20 mol/L、硅烷质量分数为0.392%、戊二醛质量分数为0.25%。同时,测得该活化条件下固定化酶的活力回收和相对活力分别为7.16%和9.90%。 展开更多

关键词 改性陶粒 偶联剂 固定化酶 活力回收率 相对活力

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丝素固定化凝血酶的工艺研究 被引量：3

9

作者 苗艳丽 余广仁 +3 位作者 徐银龙 刘义峰 黄慰凤 陈绍红 《中国药师》 CAS 2016年第4期671-674,共4页

目的:考察家蚕丝素对凝血酶的固定化作用。方法:以家蚕丝素为载体,戊二醛为交联剂制备固定化凝血酶。以固定化凝血酶的活力回收率(AR)为考察指标,采用正交试验确定丝素固定化凝血酶的最佳工艺条件。结果:丝素固定化凝血酶的最佳工艺条件... 目的:考察家蚕丝素对凝血酶的固定化作用。方法:以家蚕丝素为载体,戊二醛为交联剂制备固定化凝血酶。以固定化凝血酶的活力回收率(AR)为考察指标,采用正交试验确定丝素固定化凝血酶的最佳工艺条件。结果:丝素固定化凝血酶的最佳工艺条件为:固定时间为6 h,加酶量为2 400 NIH·g^(-1)载体,温度为25℃,p H为7.6。固定化凝血酶的回收率(AR)达67.22%。结论:丝素对凝血酶有良好的固定化作用。 展开更多

关键词 丝素 凝血酶 固定化 活力回收率

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TiO_2吸附及超滤法部分纯化果菠萝蛋白酶的研究 被引量：1

10

作者 李兴 林哲甫 《贵州大学学报（自然科学版）》 2000年第4期282-284,264,共4页

果汁量 4%的TiO2 作为吸附剂 ,能够吸附菠萝榨汁中 96 %的果菠萝蛋白酶活力 ,然后以 0 4M pH6 6的柠檬酸缓冲液可有效地进行洗脱 ,洗脱液先用截留值 2万的超滤膜超滤 ,流出液再用截留值为 5万的超滤膜超滤 ,最后所得截留液中果菠萝蛋... 果汁量 4%的TiO2 作为吸附剂 ,能够吸附菠萝榨汁中 96 %的果菠萝蛋白酶活力 ,然后以 0 4M pH6 6的柠檬酸缓冲液可有效地进行洗脱 ,洗脱液先用截留值 2万的超滤膜超滤 ,流出液再用截留值为 5万的超滤膜超滤 ,最后所得截留液中果菠萝蛋白酶比活力达 91 1单位 /毫克蛋白 ,活力回收率为 5 4% ,纯化倍数 7 9,蛋白质溶液浓缩 1 展开更多

关键词 二氧化钛 纯化 超滤法 果菠萝蛋白酶 吸附 超滤膜 活力回收率

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一步法快速从脱脂豆粉中三相分离脂肪氧合酶 被引量：2

11

作者 蔡燕 田丹 +4 位作者 严鑫 李百裕 李宇杰 于丽娟 吴锦明 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期149-153,共5页

首次报道了一步分离纯化大豆脂肪氧合酶(lipoxygenases,LOXs)的三相分离法。考察了溶剂、温度、pH值、(NH 4)2SO 4饱和度等参数对纯化倍数和活力回收率的影响。优化后的体系条件为:粗酶液与叔丁醇的体积比为1∶2.5、(NH 4)2SO 4饱和度为... 首次报道了一步分离纯化大豆脂肪氧合酶(lipoxygenases,LOXs)的三相分离法。考察了溶剂、温度、pH值、(NH 4)2SO 4饱和度等参数对纯化倍数和活力回收率的影响。优化后的体系条件为:粗酶液与叔丁醇的体积比为1∶2.5、(NH 4)2SO 4饱和度为60%,pH值为8、温度为20℃、反应时间为60 min,其纯化倍数为8.2倍,活力回收率为78.2%。由三相法部分纯化的LOXs的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析显示,其分子质量约为95 kDa。结果表明三相分离法是从脱脂豆粉中部分纯化LOXs的有效方法。 展开更多

关键词 三相分离 脂肪氧合酶 叔丁醇 纯化倍数 活力回收率

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固定化胰蛋白酶活力的测定方法探讨 被引量：2

12

作者 库汉生 姚晓玲 +1 位作者 张婷 刘丹松 《氨基酸和生物资源》 CAS 2007年第2期33-35,共3页

对自制的固定化胰蛋白酶(Immobilization Trypsin,ITP)分别经过冷冻干燥、真空干燥后定量测定其酶活力,与由湿态直接定量法(DQA)测定的活力进行比较。试验表明,直接定量方法测定的酶活力比前两者高,而且操作简单。

关键词 固定化 胰蛋白酶 活力回收率

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壳聚糖/聚乙烯醇微球固定化酯酶的研究 被引量：1

13

作者 秦胜利 于建生 孙谧 《中国酿造》 CAS 北大核心 2011年第9期125-129,共5页

利用吸附、交联的原理,以壳聚糖、聚乙烯醇(PVA)、戊二醛等为材料,通过冻干技术制备了冻干-PVA-壳聚糖固定化酯酶。并通过单因素优化实验,确定了固定化酶生产的适宜条件:壳聚糖浓度3%、PVA浓度3g/L、酶液固定化载体体积质量比5∶2(mL∶... 利用吸附、交联的原理,以壳聚糖、聚乙烯醇(PVA)、戊二醛等为材料,通过冻干技术制备了冻干-PVA-壳聚糖固定化酯酶。并通过单因素优化实验,确定了固定化酶生产的适宜条件:壳聚糖浓度3%、PVA浓度3g/L、酶液固定化载体体积质量比5∶2(mL∶g),戊二醛浓度0.4%,交联时间30min,此时固定化酶活力回收率为73.8%。固定化酶在60℃,pH值为7.0的反应体系中活性最大,使用5次后,固定化酶载体形状基本没变化,活性保留了71%,表明冻干-PVA-壳聚糖固定化酶具有良好的操作稳定性。 展开更多

关键词 固定化酶:壳聚糖 冻干 活力回收率 酯酶

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响应曲面法优化β-葡萄糖苷酶固定化的研究 被引量：1

14

作者 马慧玲 李笑梅 《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第3期357-362,共6页

以黑曲霉β-葡萄糖苷酶作为研究对像,采用交联-包埋的试验方法,以酶活力回收率作为评价的指标,选取海藻酸钠、壳聚糖、海藻酸钠-壳聚糖为载体,对β-葡萄糖苷酶固定化效果进行比较,结果显示海藻酸钠-壳聚糖固定化效果最好.再进行固定化... 以黑曲霉β-葡萄糖苷酶作为研究对像,采用交联-包埋的试验方法,以酶活力回收率作为评价的指标,选取海藻酸钠、壳聚糖、海藻酸钠-壳聚糖为载体,对β-葡萄糖苷酶固定化效果进行比较,结果显示海藻酸钠-壳聚糖固定化效果最好.再进行固定化条件单因素响应曲面试验,得到的最优条件为,海藻酸钠-壳聚糖的混合载体中海藻酸钠溶液的质量分数为1.91%、壳聚糖-醋酸溶液的质量分数为1.94%,温度为40.20℃,交联时间为0.98 h.此时酶活力为112 400 IU/m L,酶活力回收率为66.18%.经过三次回收试验,酶活力回收率分别为65.61%、64.48%、64.16%. 展开更多

关键词 Β-葡萄糖苷酶 固定化 酶活力回收率 海藻酸钠 壳聚糖

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钝顶螺旋藻Fe—SOD的纯化及性质

15

《药物生物技术》 CAS CSCD 2005年第1期14-14,共1页

以螺旋藻中分离纯化的Fe—SOD平均比活为4576U／mg，总活力回收率50％，纯度达电泳纯，瓣PAGE测定纯化的Fe—SOD亚基相对分子质量为21ku，每分子亚基含0．7个Fe原子；在Tris—盐到缓冲液中的最适pH为8．2，最适温度为25℃，在紫外区279n... 以螺旋藻中分离纯化的Fe—SOD平均比活为4576U／mg，总活力回收率50％，纯度达电泳纯，瓣PAGE测定纯化的Fe—SOD亚基相对分子质量为21ku，每分子亚基含0．7个Fe原子；在Tris—盐到缓冲液中的最适pH为8．2，最适温度为25℃，在紫外区279nm有最大光吸收，酶的pH稳定范围为6～11，65℃以上迅速的失活，该酶对H2O2敏感。在5mmol／LH2O2中迅速失活。而在ψ=0．1的乙腈和5mmol／L叠氮化钠中稳定。 展开更多

关键词 SOD 纯化 缓冲液 活力回收 亚基 电泳 钝顶螺旋藻 LH2 最适PH 最适温度

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酶转化法及微生物发酵法生产L-苹果酸的研究进展探讨 被引量：1

16

作者 汪阳 《内江科技》 2016年第6期41-41,共1页

本文对L-苹果酸及其应用领域进行介绍,并对酶转化法和微生物发酵法生产L-苹果酸的研究进展进行了讨论,从生产材料与成本预估分析了这两种方法。

关键词 L-苹果酸 微生物发酵法 酶转化 应用领域 生产材料 产氨短杆菌 延胡索酸酶 酸乳发酵 三羧酸循环 活力回收率

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