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实时荧光PCR检测肠致泻性大肠杆菌在腹泻人群中的分布 被引量:13
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作者 陈爱平 吴旭辰 +5 位作者 熊美琴 李海丹 杨劲松 林仲 阙少聪 严延生 《海峡预防医学杂志》 CAS 2012年第2期1-3,共3页
目的调查致泻性大肠杆菌(DEC)在福建省腹泻人群中的分布情况,为做好防治工作提供本底资料。方法对监测医院腹泻患者的粪便样本提取增菌液的DNA,再用实时荧光PCR(RT-PCR)技术进行相关病原菌检测,以了解5种病原菌在腹泻人群中的分布情况... 目的调查致泻性大肠杆菌(DEC)在福建省腹泻人群中的分布情况,为做好防治工作提供本底资料。方法对监测医院腹泻患者的粪便样本提取增菌液的DNA,再用实时荧光PCR(RT-PCR)技术进行相关病原菌检测,以了解5种病原菌在腹泻人群中的分布情况。结果检测206份样本,DEC总检出率为18.9%,各相关病原菌检出率:肠致病性大肠杆菌(EPEC)为8.3%,均为不典型肠致病性大肠杆菌;肠产毒性大肠杆菌(ETEC)为1.5%,均为产耐热肠毒素-SL阴性、不耐热型肠毒素-LT阳性;肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)为1.9%,肠黏附性大肠杆菌(EAEC)为7.3%,肠出血性大肠杆菌(EHEC)未检出。结论 DEC相关病原菌以EPEC和EAEC为主,其次为EIEC和ETEC,未检出EHEC,与20世纪80年代相比,病原谱发生了变化。 展开更多
关键词 肠致泻性大肠杆菌 实时荧光pcr(rt-pcr) 腹泻
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实时荧光PCR法快速检测肉类中貉源性成分 被引量:7
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作者 钱云开 王海洋 +5 位作者 崔宗岩 高飞 吴曦 肖艳霞 张进杰 曹彦忠 《中国食品卫生杂志》 2016年第5期602-605,共4页
目的建立貉源性成分的实时荧光PCR快速检测手段。方法根据貉的线粒体Cytb基因序列设计引物和探针,通过优化扩增反应体系进行实时荧光PCR(RT-PCR)扩增,产物进行快速检测。结果此方法特异性良好,灵敏度可达到10^(-4)ng貉源性DNA的量。在... 目的建立貉源性成分的实时荧光PCR快速检测手段。方法根据貉的线粒体Cytb基因序列设计引物和探针,通过优化扩增反应体系进行实时荧光PCR(RT-PCR)扩增,产物进行快速检测。结果此方法特异性良好,灵敏度可达到10^(-4)ng貉源性DNA的量。在混合或纯肉样品以及常见的肉制品中均可检测。结论本方法可以满足实际工作中肉类掺假检测的要求。 展开更多
关键词 实时荧光pcr(rt-pcr) 毛皮动物 肉类 掺假 食品安全 检测 鉴定
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福建省某规模化猪场三种病毒性疫病抗体监测和病原检测分析
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作者 骆钰 《福建畜牧兽医》 2022年第4期13-16,共4页
为监测和评估福建省某规模化猪场猪群健康状况,进一步完善该猪场的疫苗免疫程序,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别对20日龄、40日龄、60日龄猪的血清进行猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、伪狂犬病(PR)和猪瘟(CSF)抗体监测及采用实时荧光PCR/R... 为监测和评估福建省某规模化猪场猪群健康状况,进一步完善该猪场的疫苗免疫程序,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别对20日龄、40日龄、60日龄猪的血清进行猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、伪狂犬病(PR)和猪瘟(CSF)抗体监测及采用实时荧光PCR/RT-PCR试验对患猪组织进行病原检测。该猪场20日龄、40日龄、60日龄血清PR gE抗体阳性率均为0.00%;20日龄、40日龄血清PR gB抗体阳性率均为100.00%,60日龄血清PR g B抗体阳性率降为0.00%;20日龄、40日龄、60日龄血清CSF抗体阳性率分别为60.00%、60.00%、100.00%;对患猪不同组织分别进行PRRSV、PRV和CSFV病原检测,实时荧光PCR/RT-PCR结果显示PRRSV阳性,PRV和CSFV阴性。试验结果表明,该猪场PR和CSF的疫苗免疫效果较好,但存在较严重PRRSV野毒株感染的情况,建议今后继续加强猪场PR和CSF疫苗免疫,于40~60日龄时提早对猪群进行PR疫苗加强免疫,同时在该猪群中已存在PRRSV野毒感染,为达疫病净化,应淘汰阳性猪只,做好猪舍消毒,引进阴性猪,长期进行抗体监测。 展开更多
关键词 免疫程序 酶联免疫吸附试验 实时荧光pcr/rt-pcr 抗体 病原
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食管癌和良性食管疾病患者血浆miRNA-21和miRNA-143检测的临床应用研究 被引量:10
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作者 肖小平 张熊 秦光明 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第4期72-75,139,共5页
目的探讨血浆微小RNA(microRNA,miRNA)-21,miRNA-143水平在鉴别早期食管癌和良性食管疾病中的临床应用。方法收集27例早期食管癌患者(食管癌组)和25例良性食管疾病患者(良性食管疾病组)的血液及临床资料,并设立健康对照组,采用实时荧光... 目的探讨血浆微小RNA(microRNA,miRNA)-21,miRNA-143水平在鉴别早期食管癌和良性食管疾病中的临床应用。方法收集27例早期食管癌患者(食管癌组)和25例良性食管疾病患者(良性食管疾病组)的血液及临床资料,并设立健康对照组,采用实时荧光定量PCR(real-time-PCR,RT-PCR)技术检测研究对象血浆miRNA-21,miRNA-143水平的表达,采用电化学发光技术检测血浆CEA和CA72-4水平,探讨两标志物的变化与食管癌和良性食管疾病之间的关系。结果食管癌组血浆miRNA-21,miRNA-143的表达量分别为0.93±0.17和0.27±0.05;两标志物在良性食管疾病组的表达量分别为0.25±0.03和0.99±0.15;两标志物在对照组的表达量分别为0.23±0.03和1.02±0.15。食管癌组miRNA-21,miRNA-143表达量分别与良性食管疾病组比较呈现上调、下调,差异有统计学意义(t=10.87,11.55,均P<0.01),与对照组比较呈现上调、下调,差异有统计学意义(t=9.20,9.07,均P<0.01)。良性食管疾病组血浆miRNA-21,miRNA-143表达量与对照组比较差异则无统计学意义(t=1.39,1.19,均P>0.05)。血浆miRNA-21,miRNA-143分别在食管癌组、良性食管疾病组和对照组的阳性率分别为81.5%(22/27),4.0%(1/25),0(0/24);85.2%(23/27),4.0%(1/25),0(0/24)。食管癌组miRNA-21,miRNA-143阳性率分别与良性食管疾病组和对照组比较增高,差异有统计学意义(X^2=31.59,34.39,均p<0.01;x^2=34.42,37.23,均P<0.01),良性食管疾病组两标志物水平与对照组比较差异则无统计学意义(X^2=0.980,0.980,均p<0.01)。血浆miRNA-21,miRNA-143诊断早期食管癌的敏感度及特异度分别为81.4%,97.9%;85.1%,97.9%。食管癌组miRNA-21,miRNA-143的灵敏度分别与CEA和CA72-4比较明显增高,差异有统计学意义(X^2=12.79,P<0.01;x^2=5.33,P<0.05;X^2=15.03,P<0.01;X^2=6.95,P<0.05)。食管癌组miRNA-21,miRNA-143的特异度分别与CEA和CA72-4比较,差异无统计学意义(X^2=1.043,0.000,均P>0.05,X^2=1.043,0.000,均P>0.05)。采用Spearman相关性分析 展开更多
关键词 食管癌 良性食管疾病 实时荧光定量pcr(rt-pcr) MIRNA-21 miRNA-143
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济宁地区无偿献血者人细小病毒B19感染的相关研究 被引量:5
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作者 王志效 周贝贝 +1 位作者 张娜 黄海燕 《公共卫生与预防医学》 2015年第3期4-7,共4页
目的为了解济宁地区献血人群中人细小病毒B19(human parvovirus B19,简称HPV B19)感染情况,探讨血浆合并对其检出率的影响情况,降低临床输血风险提供一定依据。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量PCR(RTPCR)法对采集的960份... 目的为了解济宁地区献血人群中人细小病毒B19(human parvovirus B19,简称HPV B19)感染情况,探讨血浆合并对其检出率的影响情况,降低临床输血风险提供一定依据。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时荧光定量PCR(RTPCR)法对采集的960份献血员血液样本进行单人份及随机8人份血浆合并样本进行HPV B19-Ig G、Ig M抗体及DNA检测。结果单人份血浆与随机8人份血浆合并样本HPV B19 Ig G抗体、Ig M抗体阳性率分别为36.15%、5.94%、35.83%、12.50%,抗体阳性标本中单人份及血浆合并样本DNA阳性率分别为0.83%、5.00%。其中Ig M抗体阳性组B19 DNA检出率明显高于Ig G阳性组。结论献血人群中存在较高的HPV B19感染率,血浆合并后Ig M抗体及DNA检出率较高,未提示其传播风险降低,应对儿童、老年人、孕妇等免疫功能低下者选择性输注B19-Ig G抗体滴度较高的血液制品。 展开更多
关键词 无偿献血者 人细小病毒B19 血浆合并 实时荧光定量pcr(rt-pcr)
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3种检测方法在出血热病原检测中的应用效果比较 被引量:1
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作者 魏卓超 张巍 +2 位作者 隋丹 邓晓丽 王盛 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2020年第6期556-559,共4页
目的探究3种检测方法在出血热病原检测中的实际应用效果,为出血热防控提供科学准确的检测数据。方法参照《全国肾综合征出血热监测方案(试行)》中的检测方法,以免疫荧光法(IFA)、酶联免疫吸附实验(ELISA)法、实时荧光定量PCR(RT-PCR)法... 目的探究3种检测方法在出血热病原检测中的实际应用效果,为出血热防控提供科学准确的检测数据。方法参照《全国肾综合征出血热监测方案(试行)》中的检测方法,以免疫荧光法(IFA)、酶联免疫吸附实验(ELISA)法、实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对2018—2019年鞍山市国家级监测点采集的宿主动物标本进行检测。结果利用IFA法在400份鼠肺标本中共检出30份鼠肺抗原阳性,带毒率为7.5%;用ELISA法在400份鼠血标本中共检出41份鼠血总抗体阳性,鼠感染率为10.25%;用RT-PCR法检测400份鼠肺标本,检出22株出血热阳性,4份灰区,PCR法阳性率为5.5%;3种方法两两配对卡方检验,对IFA法和ELISA法结果进行比较,差异无统计学意义(χa^2=3.70,P>0.05),将PCR法分别与IFA法和ELISA法的结果比较,差异有统计学意义(χb^2=4.08,χc^2=12.96,P<0.05);对3种方法进行筛选试验,RT-PCR法灵敏度和特异度更高。结论 3种方法各有特点,IFA法适合初步筛查性工作,ELISA法检测时间较短,RT-PCR方法较为精准。 展开更多
关键词 出血热 免疫荧光 酶联免疫吸附实验(ELISA) 实时荧光定量pcr(rt-pcr)
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蒙古绵羊大卵泡内颗粒细胞ghrelin mRNA的表达
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作者 宋艳华 刘剑郁 曹贵方 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第9期39-41,共3页
为了探索ghrelin在绵羊卵母细胞成熟过程中的潜在作用,试验采用实时荧光定量PCR(RT—PCR)技术对大卵泡(3乙箩咖)的壁层颗粒细胞和卵丘颗粒细胞ghrelinmRNA相对表达量进行分析。结果表明:壁层颗粒细胞和卵丘颗粒细胞ghrelinmRNA表... 为了探索ghrelin在绵羊卵母细胞成熟过程中的潜在作用,试验采用实时荧光定量PCR(RT—PCR)技术对大卵泡(3乙箩咖)的壁层颗粒细胞和卵丘颗粒细胞ghrelinmRNA相对表达量进行分析。结果表明:壁层颗粒细胞和卵丘颗粒细胞ghrelinmRNA表达水平差异不显著(P〉0.05),ghrelin mRNA的相对表达量在排卵前无明显变化。 展开更多
关键词 蒙古绵羊 卵母细胞 颗粒细胞 实时荧光定量pcr(rt-pcr) GHRELIN
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