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单细胞克隆小鼠胚胎干细胞系的建立 被引量：11
1
作者 彭红梅 陈贵安 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期431-434,共4页
目的 :建立胚胎干细胞的培养系统及培养方法。方法 :用免疫溶解法 (immunosurgery)分离 3.5d的 1 2 9SvJ系小鼠囊胚内细胞团 ,在γ射线照射的胎鼠成纤维细胞饲养层上培养 ,胰酶消化传代。用组织化学法、免疫组织化学方法识别细胞表面标... 目的 :建立胚胎干细胞的培养系统及培养方法。方法 :用免疫溶解法 (immunosurgery)分离 3.5d的 1 2 9SvJ系小鼠囊胚内细胞团 ,在γ射线照射的胎鼠成纤维细胞饲养层上培养 ,胰酶消化传代。用组织化学法、免疫组织化学方法识别细胞表面标志 ,常规G带法行染色体核型分析 ,在体、离体分别观察细胞的多向分化能力。结果 :得到一个单细胞克隆 1 2 9系小鼠胚胎干细胞系G1 1 ,能长期稳定增殖不分化 ,具有正常 4 0XY核型 ,碱性磷酸酶阳性、SSEA 1阳性 ,在体和离体条件下可分化为多种细胞。结论 展开更多
关键词 单细胞克隆 小鼠 胚胎干细胞系 细胞培养
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人参培养细胞单细胞克隆的条件培养 被引量：13
2
作者 罗建平 郑光植 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期58-62,共5页
来自细胞悬浮培养物的条件培养基能显著地促进人参培养细胞的单细胞在较低植板密度培养时的克隆形成。每毫升含３×１０＾３个细胞时，条件培养的植板率是普通培养的４倍。细胞悬浮培养１２－１６天时所制备的条件培养基活性最大，... 来自细胞悬浮培养物的条件培养基能显著地促进人参培养细胞的单细胞在较低植板密度培养时的克隆形成。每毫升含３×１０＾３个细胞时，条件培养的植板率是普通培养的４倍。细胞悬浮培养１２－１６天时所制备的条件培养基活性最大，在一定浓度范围内随条件培养基浓度增加，细胞克隆植板率随之增加。条件培养基具有一定的生理作用专一性。看护培养和条件增大的比较，表明前者在细胞密度较低时能更有效地促进细胞克隆的形成和生长。 展开更多
关键词 人参 单细胞克隆 条件培养 条件培养基 植板率
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红豆杉单细胞克隆的建立 被引量：12
3
作者 李家儒 唐晓红 +1 位作者 黄鲲 王君健 《生物技术》 CAS CSCD 1996年第3期8-10,共3页
本文报道了红豆杉单细胞克隆的建立过程。在红豆杉细胞克隆中使用悬浮培养１０—１５天的细胞培养物分离单细胞进行看护培养的效果最好。
关键词 红豆杉 单细胞克隆 细胞培养
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提高成年大鼠神经干细胞单克隆形成率的方法 被引量：8
4
作者 黄镇 金国华 +3 位作者 张新化 田美玲 秦建兵 徐慧君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期594-598,共5页
目的　探索提高神经干细胞单克隆形成率的方法并证实所分离培养的神经干细胞仍具有多分化潜能。　方法　对神经干细胞单克隆方法进行改良 ,即在单克隆培养液中加入 1 2原代克隆培养液。将所得到的单细胞克隆球消化、分离、增殖成大量的... 目的　探索提高神经干细胞单克隆形成率的方法并证实所分离培养的神经干细胞仍具有多分化潜能。　方法　对神经干细胞单克隆方法进行改良 ,即在单克隆培养液中加入 1 2原代克隆培养液。将所得到的单细胞克隆球消化、分离、增殖成大量的神经干细胞球 ,用含血清的DMEM分化培养液促其分化。 14d后 ,分别用神经元和胶质细胞的特异性标记物MAP 2标记神经元、GFAP标记星形胶质细胞和CNP标记少突胶质细胞。　结果平均每块含 1 2原代克隆培养液的 96孔培养板中有 2～ 3只孔可形成克隆球 ,而含纯新鲜培养液的培养板中仅 0 5～ 1 0只孔可形成克隆球。这些单细胞克隆球增殖后得到的大量亚细胞系克隆球分化后分别呈MAP 2、GFAP和CNP免疫荧光阳性。　结论　单细胞克隆实验中加入 1 2原代克隆培养液可提高神经干细胞的单克隆形成率 ,单克隆球增殖后得到的大量亚细胞系克隆球亦具有多分化潜能。 展开更多
关键词 成年大鼠 神经干细胞 单细胞克隆 细胞分化 细胞培养
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银杏单细胞克隆研究 被引量：9
5
作者 戴均贵 朱蔚华 +2 位作者 吴蕴祺 胡秋 张大勇 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期593-597,共5页
目的 :利用银杏单细胞克隆系 ,探索银杏内酯生产的稳定性与细胞均一性之间的关系。方法 :利用植物细胞平板技术培养。结果 :L 谷氨酰胺能大大促进银杏细胞的植板率 ;植板率在 0 .5～ 5 .0× 10 4 cell·ml-1随密度的增加而升高... 目的 :利用银杏单细胞克隆系 ,探索银杏内酯生产的稳定性与细胞均一性之间的关系。方法 :利用植物细胞平板技术培养。结果 :L 谷氨酰胺能大大促进银杏细胞的植板率 ;植板率在 0 .5～ 5 .0× 10 4 cell·ml-1随密度的增加而升高。获得的 48个克隆株系中G 2 2株系银杏内酯B(GKB)含量高达 0 .0 99% ,且大部分克隆株系在继代培养过程中能保持相对稳定。结论 :在银杏组织培养过程中 ,利用单细胞克隆技术可在一定程度上解决银杏内酯生产不稳定性的问题。 展开更多
关键词 银杏 单细胞克隆 银杏内酯B
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高产紫杉醇红豆杉细胞系的紫外诱变筛选 被引量：6
6
作者 梅兴国 潘学武 +1 位作者 董妍玲 柯铁 《华中科技大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第S1期48-51,共4页
紫外辐射能明显地增加红豆杉细胞的异质性 ,紫外诱变单细胞使其植板率下降为原来的 1/ 3左右 .平板克隆培养 6 0d ,挑取克隆连续转接 4次 ,淘汰大部分后共得 78个克隆系 ,其中克隆系C4 2 B 0 9的生长速率和紫杉醇含量都较高 .生长速率... 紫外辐射能明显地增加红豆杉细胞的异质性 ,紫外诱变单细胞使其植板率下降为原来的 1/ 3左右 .平板克隆培养 6 0d ,挑取克隆连续转接 4次 ,淘汰大部分后共得 78个克隆系 ,其中克隆系C4 2 B 0 9的生长速率和紫杉醇含量都较高 .生长速率和紫杉醇含量分别为亲本的 1.13倍和 6 .2 5倍左右 。 展开更多
关键词 红豆杉 紫外诱变 单细胞克隆 细胞系 紫杉醇
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单细胞克隆人胚胎干细胞系的建立及其生物学特性的鉴定 被引量：7
7
作者 彭红梅 陈贵安 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期521-524,共4页
目的建立单细胞克隆人胚胎干细胞系,并对其生物学特性进行鉴定。方法采取分离自人囊胚内细胞团并传代20代的细胞,用胰酶消化将细胞分散成单细胞悬液,将单个细胞接种至96孔板,生长出的细胞集落用胶原酶消化传代,采用细胞化学法和免疫荧... 目的建立单细胞克隆人胚胎干细胞系,并对其生物学特性进行鉴定。方法采取分离自人囊胚内细胞团并传代20代的细胞,用胰酶消化将细胞分散成单细胞悬液,将单个细胞接种至96孔板,生长出的细胞集落用胶原酶消化传代,采用细胞化学法和免疫荧光法检测细胞表面标志物;采用常规G带法分析细胞染色体核型;将细胞接种至严重联合免疫缺陷小鼠后腿肌肉内,观察细胞多向分化潜能。结果接种的96个细胞生长出2个细胞集落,扩增建立了2个单细胞克隆人胚胎干细胞系,稳定增殖了12个月,传代48代。细胞呈集落状生长,细胞核大、核仁明显;具有稳定的46XX核型;细胞的碱性磷酸酶、阶段特异性胚胎抗原(SSEA)4、肿瘤识别抗原(TRA)1-60、TRA-1-81等特征性细胞表面标志物呈阳性;接种至严重联合免疫缺陷小鼠后腿肌肉内的细胞,形成了包含神经组织、软骨组织、鳞状上皮组织及柱状上皮组织等来源于3个胚层组织细胞的畸胎瘤。结论本研究成功建立了单细胞克隆人胚胎干细胞系,其生物学特性稳定。 展开更多
关键词 人 胚胎干细胞 单细胞克隆 生物学特性 人胚胎干细胞系 严重联合免疫缺陷小鼠 鉴定 细胞表面标志物 染色体核型 细胞接种 细胞集落
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红花单细胞克隆的建立 被引量：8
8
作者 周平 郑光植 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1989年第9期661-667,共7页
KT,2,4-D 及 NAA 能提高红花(Cathamus tinctorius)细胞克隆平板培养的植板率。这三种激素对细胞生长的最佳搭配是2,4-D2.0mg/l,KT0.3mg/l,NAA 0.5mg/1。红花细胞悬浮继代培养代数不同,其植板率相差甚远,用悬浮培养第三代的细胞做材料最... KT,2,4-D 及 NAA 能提高红花(Cathamus tinctorius)细胞克隆平板培养的植板率。这三种激素对细胞生长的最佳搭配是2,4-D2.0mg/l,KT0.3mg/l,NAA 0.5mg/1。红花细胞悬浮继代培养代数不同,其植板率相差甚远,用悬浮培养第三代的细胞做材料最好,其植板率是第一代悬浮培养细胞做材料的8.5倍。红花细胞克隆的条件培养的植板率是普通平板培养的3.6倍。固-液双层培养的植板率是普通平板培养的4.7倍。对已建立的红花细胞克隆进行生长速率的比较表明,生长最漫的克隆的生长速率为3.08g/g/35天,生长最决的克隆的生长速率高达23.33g/g/35天。 展开更多
关键词 红花 单细胞克隆 平板培养
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食管癌Eca109单克隆细胞株的干细胞特性研究 被引量：7
9
作者 赵生霞 黄燕燕 慕晓玲 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2013年第2期197-201,共5页
为分离及鉴定食管癌Eca109肿瘤干细胞。将购买上海生命科学研究院的食管癌Eca109细胞株采用有限稀释法进行单克隆培养并进行HE染色;应用免疫细胞化学技术检测Eca109单克隆细胞株中P75NTR、Oct-4的表达;MTT法和平板克隆实验检测细胞体外... 为分离及鉴定食管癌Eca109肿瘤干细胞。将购买上海生命科学研究院的食管癌Eca109细胞株采用有限稀释法进行单克隆培养并进行HE染色;应用免疫细胞化学技术检测Eca109单克隆细胞株中P75NTR、Oct-4的表达;MTT法和平板克隆实验检测细胞体外增殖情况。Transwell小室法检测各细胞株侵袭能力。结果显示,HE染色示细胞形态有圆形、核大和短梭形、核小两种;在Eca109单克隆的细胞中P75NTR强表达、Oct-4表达相对较弱,且在圆细胞株中表达定位于胞核;MTT法测增殖示圆细胞株增殖率明显高于其他细胞株,差异有统计学意义(P<0.001);平板克隆实验示圆细胞株形成克隆团数高于其他细胞株且细胞团大;Transwell法结果示各细胞株侵袭能力相当。由此可知,Eca109细胞中P75NTR、Oct-4核表达阳性的圆细胞有可能为食管癌干细胞。 展开更多
关键词 食管癌 肿瘤干细胞 单细胞克隆 干细胞特性
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鸡胚胎干细胞分离培养和单细胞克隆的制备 被引量：7
10
作者 吴信生 何先红 +4 位作者 戴建明 田智泉 杨海燕 徐琪 李碧春 《中国家禽》 北大核心 2008年第22期30-34,共5页
从鸡第X期胚胎中分离胚盘,以鸡成纤维细胞为饲养层,用添加了10%的胎牛血清、2%的鸡血清、2mmol/LL-谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10-5mmol/Lβ-巯基乙醇、10μL/mL非必需氨基酸、以及含1000U/mLLIF、10ng/mLbFGF和5ng/mLSCF的高... 从鸡第X期胚胎中分离胚盘,以鸡成纤维细胞为饲养层,用添加了10%的胎牛血清、2%的鸡血清、2mmol/LL-谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10-5mmol/Lβ-巯基乙醇、10μL/mL非必需氨基酸、以及含1000U/mLLIF、10ng/mLbFGF和5ng/mLSCF的高糖DMEM对细胞进行培养和传代。利用鸡第Ⅹ期的胚胎干细胞,采用口吸管法、细胞稀释法和克隆环法3种方法,制备单细胞克隆,采用细胞化学法和免疫荧光法检测细胞表面标志物。结果显示,可获得传至5～6代的鸡胚胎干细胞。通过对传代培养后的鸡ES细胞进行AKP染色鉴定和SSEA-1的鉴定,证实细胞未发生分化,具有胚胎干细胞的特征。通过不同分离胚盘方法和不同消化时间的比较得出药勺法提取胚盘简单易行,原代消化5～8min的ES细胞适合于传代培养。口吸管法、细胞稀释法和克隆环法单细胞克隆形成率分别为0、4.2%和1.0%。经AKP活性和SSEA-1免疫荧光鉴定均呈阳性,扩增出的克隆能稳定增殖不分化。结果表明,细胞稀释法操作简单易行,试验时间短,对细胞伤害小,为鸡ES单细胞克隆进一步建系提供了可行的方法。 展开更多
关键词 鸡 胚胎干细胞 分离 培养 单细胞克隆
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人参培养细胞的单细胞克隆 被引量：4
11
作者 罗建平 郑光植 甘烦远 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期337-341,共5页
培养基组成成分能影响人参培养细胞单细胞克隆的植板率。ＭＳ培养基中２，４－Ｄ和ＫＴ需要一个适合的浓度比才能有效地促进细胞克隆的形成，其最佳浓度组合是２，４－Ｄ１．５ｍｇ／Ｌ和ＫＴ ０．５ｍｇ／Ｌ。适合人参细胞克隆形成的... 培养基组成成分能影响人参培养细胞单细胞克隆的植板率。ＭＳ培养基中２，４－Ｄ和ＫＴ需要一个适合的浓度比才能有效地促进细胞克隆的形成，其最佳浓度组合是２，４－Ｄ１．５ｍｇ／Ｌ和ＫＴ ０．５ｍｇ／Ｌ。适合人参细胞克隆形成的ＮＨ４ＮＯ３浓度是４０ｍｇ／Ｌ，ＣａＣｌ２·２Ｈ２Ｏ浓度是７５０ｍｇ／Ｌ。向培养基中补加适量的琥珀酸、精氨酸和维生素等都能明显提高植板率。通过优化培养基的组成成分。 展开更多
关键词 人参 单细胞克隆 平板培养 细胞
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基于热发泡技术的高通量单细胞打印
12
作者 周钦 王琨 +5 位作者 关一民 黄鹏 朱莉莎 王秋实 金文最 刘德盟 《微纳电子技术》 CAS 北大核心 2023年第10期1669-1676,共8页
传统单细胞分离技术包含流式细胞术、激光捕获法和显微操作法等。然而,流式细胞术需要大量样本,且仪器体积庞大,价格昂贵;激光捕获法和显微操作法则耗时长,并且单细胞获取效率和通量较低。将热发泡喷墨技术应用于单细胞打印。利用热发... 传统单细胞分离技术包含流式细胞术、激光捕获法和显微操作法等。然而,流式细胞术需要大量样本,且仪器体积庞大,价格昂贵;激光捕获法和显微操作法则耗时长,并且单细胞获取效率和通量较低。将热发泡喷墨技术应用于单细胞打印。利用热发泡喷嘴驱动细胞悬液,因此无需外接注射泵,并在芯片上集成大量喷嘴,实现高通量单细胞打印。首先通过Open CV算法分割喷嘴图像,然后通过卷积神经网络(CNN)对带有单细胞的喷嘴图像进行训练和识别,最后控制喷嘴实现单细胞打印。实现了对浓度1×10^(6)cells/m L的CHO-K1+CDCHO和CHO-K1+DMEM/F12+FBS两种细胞悬液的16块96孔板单细胞打印,单个96孔板分选在5 min内完成。两种细胞悬液即时细胞活性损耗分别为9.1%和8.3%,单细胞打印率分别达到86.7%和87.3%,单细胞克隆率分别达到44.5%和36.9%。 展开更多
关键词 微流控 热发泡技术 单细胞打印 图像算法 单细胞克隆
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人物
13
《康复》 2023年第4期4-5,共2页
乔治斯·克勒:单克隆抗体之父1946年4月,乔治斯·克勒出生于德国。1976年至1984年,克勒在巴塞尔免疫学研究所工作,研究了免疫系统并发现了产生单细胞克隆抗体的原理,他因此获得了1984年诺贝尔生理学或医学奖。克勒和米尔斯坦发... 乔治斯·克勒:单克隆抗体之父1946年4月,乔治斯·克勒出生于德国。1976年至1984年,克勒在巴塞尔免疫学研究所工作,研究了免疫系统并发现了产生单细胞克隆抗体的原理,他因此获得了1984年诺贝尔生理学或医学奖。克勒和米尔斯坦发现,能够产生抗体的B淋巴细胞在体外环境下就失去了作用,而骨髓瘤细胞在体外培养下却能不断增殖、保持活性。 展开更多
关键词 诺贝尔生理学或医学奖 米尔斯坦 骨髓瘤细胞 克勒 单克隆抗体 B淋巴细胞 免疫系统 单细胞克隆
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山羊乳腺上皮细胞单细胞克隆的制备与鉴定 被引量：4
14
作者 邵桃玉 韩庆广 +1 位作者 李融 赵国琦 《上海畜牧兽医通讯》 2008年第4期24-26,共3页
本研究旨在探索乳腺上皮细胞单细胞克隆制备的实际操作的可能性,并对其生物学特性进行鉴定。本试验从泌乳中期的徐淮山羊乳腺提取乳腺上皮细胞,纯化传至第3代,采用三种不同的方法(口吸管法、细胞稀释法以及克隆环法)将细胞接种至96孔板... 本研究旨在探索乳腺上皮细胞单细胞克隆制备的实际操作的可能性,并对其生物学特性进行鉴定。本试验从泌乳中期的徐淮山羊乳腺提取乳腺上皮细胞,纯化传至第3代,采用三种不同的方法(口吸管法、细胞稀释法以及克隆环法)将细胞接种至96孔板,采用细胞形态学与免疫组化鉴定。结果显示:口吸管法克隆形成率为0,克隆环法克隆形成率为5.9%,细胞稀释法克隆形成率为3.5%。克隆环法细胞克隆率最高,但是操作很难熟练进行,易导致克隆细胞的不纯。细胞稀释法操作简单易行,对细胞伤害小,克隆率较高。细胞形态学与细胞角蛋白18鉴定为乳腺腺泡上皮细胞。 展开更多
关键词 山羊乳腺上皮细胞 单细胞克隆 细胞形态学 皮细胞
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筛选草珊瑚黄酮高产细胞克隆系的研究 被引量：3
15
作者 涂艺声 吴笑臣 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期276-279,共4页
关键词 单细胞克隆 草珊瑚 黄酮 筛选 细胞培养系统 工业化生产 20世纪 细胞工程 次级代谢 基金资助
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红豆杉细胞植板方法的研究 被引量：3
16
作者 鲁明波 林岚 +1 位作者 余斐 洪琦 《华中理工大学学报》 CSCD 北大核心 1999年第1期93-96,共4页
在红豆杉细胞植板中，适宜的培养基是优化的ＭＳ培养基，其中ＮＡＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ，６ＢＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ；培养细胞生长周期约４０ｄ；培养基中最优碳源浓度是：蔗糖３０ｇ／Ｌ、葡萄糖１０ｇ／Ｌ．无机盐最佳浓度是：Ｎ... 在红豆杉细胞植板中，适宜的培养基是优化的ＭＳ培养基，其中ＮＡＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ，６ＢＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ；培养细胞生长周期约４０ｄ；培养基中最优碳源浓度是：蔗糖３０ｇ／Ｌ、葡萄糖１０ｇ／Ｌ．无机盐最佳浓度是：ＮＨ＋４１０ｍｍｏｌ／Ｌ，ＮＯ－３４０ｍｍｏｌ／Ｌ，ＰＯ３－４１．２５ｍｍｏｌ／Ｌ．研究表明，培养基的ｐＨ值与植板率密切相关．氨基酸及维生素等有机成分能明显促进细胞生长． 展开更多
关键词 红豆杉 单细胞克隆 平板培养 细胞培养 组织培养
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草珊瑚单细胞克隆的平板培养 被引量：2
17
作者 涂艺声 江洪如 《江西科学》 1996年第2期97-101,共5页
在草珊瑚细胞克隆的平板培养中，很多因素能影响其植板率。ＫＴ，２，４—Ｄ及ＮＡＡ能提高草珊瑚细胞克隆的植板率，这三种激素对细胞生长的最佳搭配是ＫＴ０．４ｍｇ／１，２，４－Ｄ０．８ｍｇ／ｌ，ＮＡＡ０．２ｍｇ／ｌ；草珊瑚细... 在草珊瑚细胞克隆的平板培养中，很多因素能影响其植板率。ＫＴ，２，４—Ｄ及ＮＡＡ能提高草珊瑚细胞克隆的植板率，这三种激素对细胞生长的最佳搭配是ＫＴ０．４ｍｇ／１，２，４－Ｄ０．８ｍｇ／ｌ，ＮＡＡ０．２ｍｇ／ｌ；草珊瑚细胞悬浮继代数不同，其植板率相差甚远，用悬浮培养第２代的细胞做材料最好；最适细胞克隆生长的培养基ｐＨ值为５．８；细胞植板密度低于每毫升５００个细胞时，几乎没有克隆形成。 展开更多
关键词 草珊瑚 单细胞克隆 平板培养 组织培养
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粉叶小檗愈伤组织单细胞克隆
18
作者 查宏波 李启任 +1 位作者 王东 陈敏 《生物技术通讯》 CAS 2003年第4期291-293,共3页
以粉叶小檗愈伤组织为材料,用B5液体培养基进行悬浮培养建立悬浮细胞系。经3～4次继代培养即可得到悬浮的单细胞。悬浮细胞通过细胞平板克隆(一般B5培养基平板克隆、优化培养基平板克隆和条件培养基平板克隆),经5代连续继代培养观察和... 以粉叶小檗愈伤组织为材料,用B5液体培养基进行悬浮培养建立悬浮细胞系。经3～4次继代培养即可得到悬浮的单细胞。悬浮细胞通过细胞平板克隆(一般B5培养基平板克隆、优化培养基平板克隆和条件培养基平板克隆),经5代连续继代培养观察和薄板层析-分光光度法分析,发现用优化培养基进行平板克隆植板率最高,且克隆最易成功,并且还筛选到一株小檗碱产率高且稳定的克隆CV-57,其平均生长速率为每天14.412mg/L,为原始株系的1.91倍,平均小檗碱含量为干重的2.17%,是原始株系的2.26倍。 展开更多
关键词 粉叶小檗 愈伤组织 单细胞克隆 克隆系 平板克隆 小檗碱
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黄芩单细胞克隆愈伤组织生物量积累变化曲线的建立与分析 被引量：2
19
作者 林立东 张东向 陈妲 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第19期10072-10074,共3页
[目的]筛选黄芩单细胞克隆优良品系。[方法]选取第10代黄芩单细胞克隆(HQSC)6个品系的愈伤组织作为试验材料,并以黄芩根亲本细胞愈伤组织(0号)为对照(CK),继代后比较不同样本的净增长量。[结果]1～30d培养期内,HQSC各品系愈伤组织生物... [目的]筛选黄芩单细胞克隆优良品系。[方法]选取第10代黄芩单细胞克隆(HQSC)6个品系的愈伤组织作为试验材料,并以黄芩根亲本细胞愈伤组织(0号)为对照(CK),继代后比较不同样本的净增长量。[结果]1～30d培养期内,HQSC各品系愈伤组织生物量积累均呈"S"形曲线变化,其中7、7S号愈伤组织生物量积累速度较快;HQSC各品系愈伤组织延迟增长期为培养后5～8d,对数增长期为培养后9～23d,稳定期为培养后24～30d;在对数增长期内,7S号HQSC愈伤组织的增长量最大,1号HQSC愈伤组织的增长量最小;在稳定增长期内,7号HQSC愈伤组织的增长量最大,1号HQSC愈伤组织的增长量最小。[结论]7、7S号HQSC愈伤组织的增长速度较快。 展开更多
关键词 黄芩 单细胞克隆 愈伤组织 生物量积累 拟合曲线
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成年绒山羊皮肤干细胞克隆定向诱导分化为成骨细胞 被引量：1
20
作者 刘迎春 周欢敏 高峰 《细胞生物学杂志》 CSCD 2007年第2期257-261,共5页
成年绒山羊皮肤经0.02%中性蛋白酶4℃过夜消化,分离表皮,37℃消化30min,经100μg/mlIV型胶原处理的培养皿黏附10min筛选干细胞,培养到第二代时采用有限稀释法进行单细胞克隆纯化,角蛋白15、角蛋白19免疫荧光染色部分细胞强阳性,添加成... 成年绒山羊皮肤经0.02%中性蛋白酶4℃过夜消化,分离表皮,37℃消化30min,经100μg/mlIV型胶原处理的培养皿黏附10min筛选干细胞,培养到第二代时采用有限稀释法进行单细胞克隆纯化,角蛋白15、角蛋白19免疫荧光染色部分细胞强阳性,添加成骨细胞诱导液定向诱导分化,经碱性磷酸酶、茜素红染色鉴定为阳性,表明分离的细胞是皮肤干细胞且有能力诱导分化为成骨细胞。 展开更多
关键词 成年绒山羊 皮肤干细胞 单细胞克隆 诱导 成骨细胞
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