目的:通过益气化瘀中药黄芪、水蛭有效成分对脂多糖诱导增生的系膜细胞(MCs)的作用,研究益气化瘀中药对系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)治疗作用的可能机制。方法:用脂多糖刺激MCs增生,再加入黄芪多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、水蛭素处理后...目的:通过益气化瘀中药黄芪、水蛭有效成分对脂多糖诱导增生的系膜细胞(MCs)的作用,研究益气化瘀中药对系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)治疗作用的可能机制。方法:用脂多糖刺激MCs增生,再加入黄芪多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、水蛭素处理后,用RT-PCR法及免疫荧光法检测各组细胞中NF-κB、MMP-2、M M P-9的转录水平及蛋白水平的表达情况。结果:脂多糖刺激后,M C s明显增生,用药后,各给药组NF-κB、MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白的表达水平(除黄芪多糖组及毛蕊异黄酮组的NF-κB外)较模型组均下调(P<0.05)。结论:黄芪、水蛭有效组分作用于增生的MCs,可以延缓肾小球纤维化的进程,其机制可能与NF-κB被抑制后引起MMP-2、MMP-9的表达下降,导致细胞外基质沉积减少有关。展开更多
目的研究黄芪、水蛭及其配方含药血清干预系膜增生性肾小球肾炎的可能作用机制。方法 20只SD大鼠随机分为黄芪高血清组、水蛭高血清组、黄芪高水蛭高血清组、黄芪低水蛭高血清组,每组5只。大鼠给药量5 g/(kg·d)为低浓度,2倍剂量为...目的研究黄芪、水蛭及其配方含药血清干预系膜增生性肾小球肾炎的可能作用机制。方法 20只SD大鼠随机分为黄芪高血清组、水蛭高血清组、黄芪高水蛭高血清组、黄芪低水蛭高血清组,每组5只。大鼠给药量5 g/(kg·d)为低浓度,2倍剂量为高浓度,各组均配成0.5 g/ml混悬液,每天早晚各灌胃1次,连续灌胃5天,末次灌胃1.5 h后制备含药血清。检测各组不同浓度(10%、20%、40%、80%)的含药血清对大鼠系膜细胞增殖的影响,计算细胞存活率,筛选出各组最佳浓度。系膜细胞以1×105个/孔接种于6孔板中,每孔2 ml,分为正常组、模型组、黄芪高血清组、水蛭高血清组、黄芪高水蛭高血清组、黄芪低水蛭高血清组,除正常组外其余各组加入脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖,再分别加入筛选出的不同浓度的含药血清进行干预,检测各组系膜细胞中核转录因子(NF-кB)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、Fas、Fas L mRNA转录水平。结果黄芪高血清组、水蛭高血清组、黄芪高水蛭高血清组、黄芪低水蛭高血清组含药血清最佳浓度分别为10%、20%、40%、20%。与正常组比较,模型组系膜细胞中NF-кB、MMP-2、Fas、Fas L mRNA表达明显升高(P<0.05),而各含药血清组NF-кB、MMP-2、Fas、Fas L mRNA表达较模型组显著降低(P<0.01)。结论黄芪、水蛭及其配方含药血清可抑制大鼠系膜细胞增殖,其作用机制可能与下调NF-кB、MMP-2、Fas、Fas L mRNA表达水平有关。展开更多
目的观察三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对TNF-α诱导的小鼠肾小球系膜细胞SV40 MES 13增殖及基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制物(MMPs/TIMPs)表达的影响。方法采用TNF-α诱导SV40 MES 13细胞增殖,x CELLigence RTCA...目的观察三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对TNF-α诱导的小鼠肾小球系膜细胞SV40 MES 13增殖及基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制物(MMPs/TIMPs)表达的影响。方法采用TNF-α诱导SV40 MES 13细胞增殖,x CELLigence RTCA DP实时细胞分析系统记录120 h细胞指数(cell index,CI),实时荧光定量PCR法检测96 h SV40MES 13细胞MMP-2、TIMP-2m RNA表达,ELISA法检测96 h SV40 MES 13细胞上清MMP-9、TIMP-1表达。结果 PNS3个剂量组均能抑制TNF-α诱导的SV40 MES 13增殖,其中96 h效果最明显;PNS高、中剂量组能提高MMP-2/TIMP-2比值和MMP-9/TIMP-1比值,与TNF-α组比较差异显著(P<0.05)。结论 PNS能减轻TNF-α诱导的系膜细胞增殖,其机制可能与改善MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1平衡有关。展开更多
文摘目的:通过益气化瘀中药黄芪、水蛭有效成分对脂多糖诱导增生的系膜细胞(MCs)的作用,研究益气化瘀中药对系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)治疗作用的可能机制。方法:用脂多糖刺激MCs增生,再加入黄芪多糖、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮、水蛭素处理后,用RT-PCR法及免疫荧光法检测各组细胞中NF-κB、MMP-2、M M P-9的转录水平及蛋白水平的表达情况。结果:脂多糖刺激后,M C s明显增生,用药后,各给药组NF-κB、MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白的表达水平(除黄芪多糖组及毛蕊异黄酮组的NF-κB外)较模型组均下调(P<0.05)。结论:黄芪、水蛭有效组分作用于增生的MCs,可以延缓肾小球纤维化的进程,其机制可能与NF-κB被抑制后引起MMP-2、MMP-9的表达下降,导致细胞外基质沉积减少有关。
文摘目的研究黄芪、水蛭及其配方含药血清干预系膜增生性肾小球肾炎的可能作用机制。方法 20只SD大鼠随机分为黄芪高血清组、水蛭高血清组、黄芪高水蛭高血清组、黄芪低水蛭高血清组,每组5只。大鼠给药量5 g/(kg·d)为低浓度,2倍剂量为高浓度,各组均配成0.5 g/ml混悬液,每天早晚各灌胃1次,连续灌胃5天,末次灌胃1.5 h后制备含药血清。检测各组不同浓度(10%、20%、40%、80%)的含药血清对大鼠系膜细胞增殖的影响,计算细胞存活率,筛选出各组最佳浓度。系膜细胞以1×105个/孔接种于6孔板中,每孔2 ml,分为正常组、模型组、黄芪高血清组、水蛭高血清组、黄芪高水蛭高血清组、黄芪低水蛭高血清组,除正常组外其余各组加入脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖,再分别加入筛选出的不同浓度的含药血清进行干预,检测各组系膜细胞中核转录因子(NF-кB)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、Fas、Fas L mRNA转录水平。结果黄芪高血清组、水蛭高血清组、黄芪高水蛭高血清组、黄芪低水蛭高血清组含药血清最佳浓度分别为10%、20%、40%、20%。与正常组比较,模型组系膜细胞中NF-кB、MMP-2、Fas、Fas L mRNA表达明显升高(P<0.05),而各含药血清组NF-кB、MMP-2、Fas、Fas L mRNA表达较模型组显著降低(P<0.01)。结论黄芪、水蛭及其配方含药血清可抑制大鼠系膜细胞增殖,其作用机制可能与下调NF-кB、MMP-2、Fas、Fas L mRNA表达水平有关。
文摘目的观察三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对TNF-α诱导的小鼠肾小球系膜细胞SV40 MES 13增殖及基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制物(MMPs/TIMPs)表达的影响。方法采用TNF-α诱导SV40 MES 13细胞增殖,x CELLigence RTCA DP实时细胞分析系统记录120 h细胞指数(cell index,CI),实时荧光定量PCR法检测96 h SV40MES 13细胞MMP-2、TIMP-2m RNA表达,ELISA法检测96 h SV40 MES 13细胞上清MMP-9、TIMP-1表达。结果 PNS3个剂量组均能抑制TNF-α诱导的SV40 MES 13增殖,其中96 h效果最明显;PNS高、中剂量组能提高MMP-2/TIMP-2比值和MMP-9/TIMP-1比值,与TNF-α组比较差异显著(P<0.05)。结论 PNS能减轻TNF-α诱导的系膜细胞增殖,其机制可能与改善MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1平衡有关。
