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不同剂量放射线对大鼠腮腺中SSB1表达的影响 被引量：3
1
作者 义彬玲 王代友 《临床口腔医学杂志》 2017年第2期75-77,共3页
目的:研究不同剂量60Coγ照射大鼠腮腺组织后SSB1蛋白及基因的表达变化情况。方法:选取SD大鼠60只,随机分成6组,每组10只。对照组(未照射组)和实验组(3 Gy、6 Gy、9 Gy、12 Gy、15 Gy组),实验组于放射后6 h处死大鼠。处死后收集大鼠腮... 目的:研究不同剂量60Coγ照射大鼠腮腺组织后SSB1蛋白及基因的表达变化情况。方法:选取SD大鼠60只,随机分成6组,每组10只。对照组(未照射组)和实验组(3 Gy、6 Gy、9 Gy、12 Gy、15 Gy组),实验组于放射后6 h处死大鼠。处死后收集大鼠腮腺组织,免疫组化法检测不同剂量放射线照射后SSB1蛋白在大鼠腮腺组织中的表达情况及实时荧光定量PCR法检测不同剂量放射线照射后SSB1基因在大鼠腮腺组织中的表达情况。结果:放射后大鼠的腮腺组织中的SSB1的表达量随着放射剂量不同而变化,并且在12 Gy达到最高,实验组和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:大鼠腮腺组织中SSB1蛋白及基因的表达无剂量依赖性,其表达量随放射剂量的增加先增加后降低。 展开更多
关键词 SSB1 大鼠腮腺 dna双链断裂 放射损伤修复
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^(60)Coγ射线照射大鼠涎腺组织后Mrell蛋白表达的初步研究 被引量：2
2
作者 沈洁 王代友 +2 位作者 曹阳 林丹 陈超梅 《临床口腔医学杂志》 2012年第3期144-149,共6页
目的:检测Mre11基因及其蛋白在放疗后的大鼠腮腺和颌下腺组织中的表达变化。方法:选取近交系雄性Wistar大鼠60只,按单次照射0 Gy,3 Gy、6 Gy、9 Gy、12 Gy、15 Gy剂量分成6组,用60Coγ射线照射大鼠头颈部,2h后收集大鼠两侧腮腺和颌下腺... 目的:检测Mre11基因及其蛋白在放疗后的大鼠腮腺和颌下腺组织中的表达变化。方法:选取近交系雄性Wistar大鼠60只,按单次照射0 Gy,3 Gy、6 Gy、9 Gy、12 Gy、15 Gy剂量分成6组,用60Coγ射线照射大鼠头颈部,2h后收集大鼠两侧腮腺和颌下腺组织。用透射电镜观察涎腺上皮细胞超微结构变化;用RT-PCR检测Mre11的基因表达情况;用免疫组化检测Mre11蛋白表达情况。结果:透射电镜显示:放射后大鼠腮腺腺泡细胞胞质和胞膜均出现不同程度的损坏,随着剂量的增加,这种损坏逐渐加剧,未见到再生、恢复的变化。颌下腺和导管变化不明显。RT-PCR检测Mre11mRNA表达无统计学差异。免疫组化检测Mre11蛋白表达有统计学差异。结论:治疗剂量的60Coγ照射对正常涎腺组织呈不可逆的损伤,损伤的程度具有剂量依赖性;大鼠涎腺细胞Mre11mRNA的表达无剂量依赖性;大鼠涎腺细胞Mre11蛋白的表达与辐射剂量以及组织类型有关,随剂量的增加先增强后减弱。 展开更多
关键词 Mre11蛋白 大鼠涎腺细胞 放射敏感性 dna双链断裂
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^(60)Coγ射线照射后大鼠涎腺中Mre11蛋白的表达与细胞凋亡的初步观察 被引量：2
3
作者 谢诚 王代友 +4 位作者 麦华明 曹阳 杨亦萍 卿海云 欧剑波 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期15-18,共4页
目的:观察60Coγ射线照射对大鼠腮腺和下颌下腺Mre11蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法:取近交系Wistar成年大鼠60只,分为正常对照组(10只)及放射组(50只),放射组用60Coγ射线照射大鼠头颈部,总吸收剂量为15 Gy,每次照射3Gy,1次/d。照射3... 目的:观察60Coγ射线照射对大鼠腮腺和下颌下腺Mre11蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法:取近交系Wistar成年大鼠60只,分为正常对照组(10只)及放射组(50只),放射组用60Coγ射线照射大鼠头颈部,总吸收剂量为15 Gy,每次照射3Gy,1次/d。照射3、6、9、12、15 Gy后2 h分别随机处死10只大鼠,用Western blotting法检测Mre11蛋白的表达;TUNEL法检测照射后细胞凋亡情况。结果:照射后唾液腺组织中Mre11蛋白的表达水平和细胞凋亡率均随放射剂量的增大而增高,Mre11蛋白的表达水平在腮腺照射9 Gy后和下颌下腺照射6 Gy后到达最大值,细胞凋亡率在腮腺照射9 Gy后和下颌下腺照射12Gy后到达最大值,之后开始逐渐减小,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:治疗量60Coγ射线照射后大鼠唾液腺组织中Mre11蛋白的表达水平和细胞凋亡率与放射剂量及唾液腺类型有关。 展开更多
关键词 Mre11蛋白 大鼠唾液腺 放射敏感性 dna双链断裂
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X射线照射对MRE11在鼻咽癌细胞株CNE1中表达的影响 被引量：1
4
作者 王靖淞 王慧 +1 位作者 谢敏 王若雨 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2014年第22期111-115,共5页
目的 研究X射线照射后肿瘤细胞中MRE11基因及其蛋白表达的规律,并探讨其与肿瘤放疗失败的相关性,为提高肿瘤放射治疗疗效开辟新途径,提供新的靶点。方法 选取人鼻咽癌CNE1细胞株进行体外培养及X线照射。按单次照射0 Gy、2 Gy、4 Gy、6... 目的 研究X射线照射后肿瘤细胞中MRE11基因及其蛋白表达的规律,并探讨其与肿瘤放疗失败的相关性,为提高肿瘤放射治疗疗效开辟新途径,提供新的靶点。方法 选取人鼻咽癌CNE1细胞株进行体外培养及X线照射。按单次照射0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy剂量分组,照射后4 h收集,利用RT-PCR技术检测MRE11 m RNA的表达;CNE1细胞株单次照射4 Gy于0 h、1.5 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h时间点收集固定,利用免疫荧光技术检测MRE11蛋白的表达,并采用Image-Pro Plus 5.0软件分析测定各组荧光的平均光密度值(m OD)。结果 RT-PCR检测CNE1细胞株分别经0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8 Gy X线照射后4 h,各组之间MRE11 m RNA表达无统计学差异。免疫荧光技术检测CNE1细胞株经4 Gy X线照射后0 h、1.5 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h时间点MRE11蛋白的表达,荧光强度先增强后减弱,4 h荧光强度最强。结论 CNE1细胞株MRE11 m RNA的表达与X线照射剂量递增无相关性。但CNE1细胞株经X线照射后MRE11蛋白的表达随时间的延长先增强后减弱,且在照射4 h表达最强,24 h后恢复到未照射水平。 展开更多
关键词 X线照射 CNE1细胞 dna双链损伤 MRE11基因
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8-氯腺苷诱导的组蛋白H3K79双甲基化促进NBS1和p21的基因转录激活 被引量：1
5
作者 刘畅 李文娟 +5 位作者 陈瑜 丁卫 安国顺 李淑艳 倪菊华 贾弘禔 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1035-1040,共6页
组蛋白H3第79位赖氨酸甲基化(H3K79me)修饰有单甲基、双甲基及三甲基3种形式,是常染色质的标志.然而,对于组蛋白H3K79三种甲基化各自在基因转录、DNA损伤修复中所起的作用尚不十分清楚.本研究以8-氯腺苷(8-Cl-Ado)为DNA双链断裂(DNAdoub... 组蛋白H3第79位赖氨酸甲基化(H3K79me)修饰有单甲基、双甲基及三甲基3种形式,是常染色质的标志.然而,对于组蛋白H3K79三种甲基化各自在基因转录、DNA损伤修复中所起的作用尚不十分清楚.本研究以8-氯腺苷(8-Cl-Ado)为DNA双链断裂(DNAdouble-stranded breaks,DSB)诱导剂,采用Western印迹,在人肺癌细胞H1299检测出了DNA修复分子NBS1、细胞周期检验点相关分子p21,并发现H3K79me1、H3K79me2和H3K79me3三种甲基化修饰的组蛋白明显增加;染色质免疫共沉淀结合实时定量PCR实验显示,只有H3K79me2与DNA损伤检验点分子p21、DNA修复分子NBS1的启动子区域相结合,说明H3K79双甲基化修饰与这些基因的转录激活有关.结果提示,在8-氯腺苷引起DSB时,是H3K79me2、而不是H3K79me1和H3K79me3参与NBS1和p21基因转录激活时的染色质重塑.8-氯腺苷诱导H3K79双甲基化增强、促进H3K79me2所在染色质区域的NBS1和p21基因转录激活可能是8-Cl-Ado抑制肿瘤细胞生长作用机制之一. 展开更多
关键词 8-氯腺苷 dna双链断裂 H3K79甲基化 NBS1 P21 表观遗传调控
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细胞周期末期促进复合物亚基CDC16Hs与DNA双链断端修复蛋白Ku80相互作用
6
作者 余垚 丁志杰 +2 位作者 马俊豪 吕红 李育阳 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期135-140,共6页
CDC16Hs是细胞周期末期促进复合物 (APC)的亚基 .利用基于LexA的酵母双杂交系统 ,把它作为诱饵蛋白筛选人胎脑文库 ,发现它与DNA双链断端修复蛋白Ku80的羧基端相互作用 .CDC16Hs和全长Ku80的结合通过 pulldown实验在体外得到验证 .
关键词 CDC16Hs KU80 dna双链断端 酵母双杂交
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DNA同源重组修复与乳腺癌的研究进展 被引量：7
7
作者 邱宇凡 胡蕴慧 张瑾 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期910-914,共5页
双链断裂是真核细胞最严重的DNA损伤类型,主要依赖同源重组途径进行修复。BRCA1/2是该修复通路中的关键因子,以其为核心组成的BRCA肿瘤抑制因子网络中多种致病性突变均可损伤基因组完整性和稳定性,增高乳腺癌易感性。该文结合最新研究进... 双链断裂是真核细胞最严重的DNA损伤类型,主要依赖同源重组途径进行修复。BRCA1/2是该修复通路中的关键因子,以其为核心组成的BRCA肿瘤抑制因子网络中多种致病性突变均可损伤基因组完整性和稳定性,增高乳腺癌易感性。该文结合最新研究进展,对DNA同源重组修复网络中关键基因突变与乳腺癌易感性及个体化治疗策略进行综述,旨在促进相关突变携带者的乳腺癌早期预防、分子诊断和精准治疗。 展开更多
关键词 dna双链断裂 同源重组修复 乳腺肿瘤 易感基因 抑癌基因 BRCA 化疗
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单细胞凝胶电泳检测DNA辐射损伤的剂量-效应关系研究 被引量：16
8
作者 刘强 姜恩海 +4 位作者 李进 唐卫生 王知权 赵永成 樊飞跃 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期573-576,共4页
目的探索新的简便、快捷的辐射生物剂量学方法,用于急性辐射事故早期生物剂量估算。方法用中性单细胞凝胶电泳技术检测辐射诱导的DNA双链断裂,CASP软件分析彗星图像,主要观察彗星头部DNA%(HDNA%)、尾部DNA%(TDNA%)、彗星全长(CL)、尾长(... 目的探索新的简便、快捷的辐射生物剂量学方法,用于急性辐射事故早期生物剂量估算。方法用中性单细胞凝胶电泳技术检测辐射诱导的DNA双链断裂,CASP软件分析彗星图像,主要观察彗星头部DNA%(HDNA%)、尾部DNA%(TDNA%)、彗星全长(CL)、尾长(TL)、尾矩(TM)和Olive尾矩(OTM)等指标,SPSS12·0软件拟合剂量-效应曲线。结果上述指标均呈显著剂量-效应关系,以OTM指标的拟合优度最佳。结论中性单细胞凝胶电泳技术结合CASP软件的应用,有望成为新一代辐射生物剂量计。 展开更多
关键词 单细胞凝胶电泳 辐射生物剂量计 dna双链断裂 辐射事故
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DNA双链断裂损伤修复系统研究进展 被引量：13
9
作者 黄敏 缪泽鸿 丁健 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期295-300,共6页
多种内源或外源因素都能造成细胞基因组DNA损伤,细胞内建立了复杂的修复系统来应对不同形式的损伤。其中DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)作为最严重的损伤形式,主要激活同源重组修复(Homologous recombination repair)和非... 多种内源或外源因素都能造成细胞基因组DNA损伤,细胞内建立了复杂的修复系统来应对不同形式的损伤。其中DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)作为最严重的损伤形式,主要激活同源重组修复(Homologous recombination repair)和非同源末端连接(Non-homologous end joining)通路。这两条通路都是由多个修复元件参与、经过多步反应的复杂过程。两者各具特点、协同作用,共同维护细胞基因组的稳定性。对其分子机制的阐明为肿瘤放化疗的辅助治疗提供了潜在的作用靶点。 展开更多
关键词 dna双链断裂 修复通路 同源重组修复 非同源末端连接
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单细胞凝胶电泳检测外照射诱导DNA单链断裂和双链断裂 被引量：9
10
作者 张军宁 洪承皎 朱寿彭 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期220-224,共5页
分别应用中性单细胞凝胶电泳、碱性单细胞凝胶电泳技术检测了不同剂量γ射线外照射对小鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤。结果表明 ,γ射线外照射对小鼠外周血淋巴细胞DNA具有明显的损伤作用 ,彗星细胞百分率显著增加 ,DNA电泳迁移 。
关键词 检测 中性单细胞凝胶电泳 dna双链断裂 碱性单细胞凝胶电泳 dna单链断裂 淋巴细胞 Γ射线照射 放射生物学 损伤效应
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单细胞凝胶电泳技术对离体和整体照射致细胞DNA断裂的一致性研究 被引量：13
11
作者 刘强 姜恩海 +4 位作者 李进 唐卫生 王知权 赵永成 樊飞跃 《中国辐射卫生》 北大核心 2006年第2期153-155,共3页
目的探讨整体照射与离体照射导致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂的一致性,作为单细胞凝胶电泳技术应用于辐射生物剂量学的前期研究。方法采用双层铺胶法进行中性单细胞凝胶电泳,观察小鼠淋巴细胞整体与离体照射后的DNA双链断裂,用CASP软件分... 目的探讨整体照射与离体照射导致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂的一致性,作为单细胞凝胶电泳技术应用于辐射生物剂量学的前期研究。方法采用双层铺胶法进行中性单细胞凝胶电泳,观察小鼠淋巴细胞整体与离体照射后的DNA双链断裂,用CASP软件分析彗星图像,SPSS12.0进行数据的统计学分析。结果彗星头部DNA%(HDNA%)、尾部DNA%(TDNA%)、彗星全长(CL)、尾长(TL)、尾矩(TM)和Olive尾矩(OTM)在整体照射和离体照射组之间的差别均无显著性。结论离体血γ射线照后即刻进行中性单细胞凝胶电泳,可以客观准确地反映整体照射的淋巴细胞DNA双链断裂损伤。 展开更多
关键词 单细胞凝胶电泳 dna双链断裂 整体照射 离体照射
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哺乳动物细胞DNA非同源末端连接及其生物学意义 被引量：8
12
作者 严雨倩 周平坤 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期69-72,共4页
DNA双链断裂是发生在哺乳动物细胞基因组水平上最严重的损伤。双链断裂得不到修复,细胞将会死亡或发生染色体断裂、丢失,若是错误修复将导致基因突变或基因组不稳定,增加癌症的风险度。哺乳动物细胞有两种重要的DNA双链断裂修复方式:非... DNA双链断裂是发生在哺乳动物细胞基因组水平上最严重的损伤。双链断裂得不到修复,细胞将会死亡或发生染色体断裂、丢失,若是错误修复将导致基因突变或基因组不稳定,增加癌症的风险度。哺乳动物细胞有两种重要的DNA双链断裂修复方式:非同源末端连接和同源重组。非同源末端连接途径除了在DNA双链断裂修复中起重要作用外,在V(D)J重组、HIV-1病毒整合宿主基因,以及假基因和重复序列的插入上也起着重要作用。由于非同源末端连接参与了机体许多重要的生理过程,因而其研究受到极大关注,并取得突破性的进展。 展开更多
关键词 dna双链断裂 非同源末端连接 dna依赖蛋白激酶 端粒 病毒整合
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枯草芽孢杆菌耐辐射菌株对紫外线的耐受性及其机理初探 被引量：10
13
作者 周莉薇 陈晓明 +2 位作者 张建国 柳芳 张根发 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2009年第3期182-186,共5页
为探讨枯草芽孢杆菌对紫外线的耐受性,以枯草芽孢杆菌耐辐射菌株及其来源菌株枯草芽孢杆菌黑色变种为研究材料,以不同剂量紫外线辐照处理。采用平板计数法比较两种菌株的存活率,通过脉冲场凝胶电泳分析两种菌的DNA双链断裂(Double stran... 为探讨枯草芽孢杆菌对紫外线的耐受性,以枯草芽孢杆菌耐辐射菌株及其来源菌株枯草芽孢杆菌黑色变种为研究材料,以不同剂量紫外线辐照处理。采用平板计数法比较两种菌株的存活率,通过脉冲场凝胶电泳分析两种菌的DNA双链断裂(Double strand breaks,DSBs)。发现,对数期耐辐射菌株对紫外线的耐受性明显大于原菌株,耐辐射菌株DSBs水平小于对应的原菌样品。耐辐射菌株对紫外线的耐受性较强,其DNA双链断裂程度与辐照剂量及辐照样品密切相关。 展开更多
关键词 紫外线辐照 枯草芽孢杆菌 dna双链断裂 菌体存活率
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电离辐射诱发小鼠脾细胞DNA链断裂及修复 被引量：8
14
作者 王芹 岳井银 +2 位作者 李进 穆传杰 樊飞跃 《中国辐射卫生》 北大核心 2007年第1期17-20,共4页
目的通过观察γ射线照射后IRM-2辐射抗性小鼠DNA链的断裂及修复,探讨IRM-2小鼠辐射抗性产生的可能机理。方法采用脉冲场凝胶电泳法,测定不同剂量γ射线诱发IRM-2小鼠及其亲本ICR/JCL和615小鼠脾细胞DNA单、双链断裂及照射后不同时间DNA... 目的通过观察γ射线照射后IRM-2辐射抗性小鼠DNA链的断裂及修复,探讨IRM-2小鼠辐射抗性产生的可能机理。方法采用脉冲场凝胶电泳法,测定不同剂量γ射线诱发IRM-2小鼠及其亲本ICR/JCL和615小鼠脾细胞DNA单、双链断裂及照射后不同时间DNA链断裂的修复动力学。结果对照组IRM-2小鼠本底DNA损伤较低,即ssb和dsb的数目低于未照射的亲本ICR和615小鼠(P<0.01)。不同剂量(1、2、4和8Gy)照射后,IRM-2小鼠ssb和dsb的数量均明显低于经相同剂量照射的亲本ICR和615小鼠(P<0.05和P<0.01)。在较低剂量2Gy时,IRM-2小鼠与亲本小鼠相比,dsb和ssb修复无统计学差异;当分别接受4、8Gy大剂量照射后,IRM-2小鼠表现出较高的修复效率,即IRM-2小鼠0.5h和1hdsb、ssb修复速率比亲本小鼠快(P<0.05和P<0.01),而且修复后剩余的损伤远低于亲本小鼠。结论电离辐射后IRM-2小鼠DNA链断裂量较低,DNA链断裂的修复速率比亲本小鼠快,因此能及时快速地抵抗辐射造成的损伤,具有较强的辐射抗性。 展开更多
关键词 电离辐射 dna单链断裂 dna双链断裂 dna修复 脉冲场凝胶电泳
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快中子辐照对枯草芽孢杆菌DNA损伤研究 被引量：7
15
作者 陈晓明 谭碧生 +4 位作者 郑春 张建国 王丹 楚士晋 任正隆 《高能物理与核物理》 CSCD 北大核心 2007年第10期972-977,共6页
采用脉冲场凝胶电泳技术检测并定量分析了CFBR-Ⅱ快中子脉冲堆产生的快中子在不同剂量和剂量率条件下,对枯草芽孢杆菌黑色变种(ATCC 9372)DNA双链断裂的诱导.通过DNA释放百分比PR值、DNA断裂水平L值、断裂DN A平均分子量和DNA片段分布... 采用脉冲场凝胶电泳技术检测并定量分析了CFBR-Ⅱ快中子脉冲堆产生的快中子在不同剂量和剂量率条件下,对枯草芽孢杆菌黑色变种(ATCC 9372)DNA双链断裂的诱导.通过DNA释放百分比PR值、DNA断裂水平L值、断裂DN A平均分子量和DNA片段分布等指标的分析,结果表明:在不同的辐射条件下,DNA片段均明显分布于两个区域,表明枯草芽孢杆菌黑色变种DNA分子上可能存在对中子辐射较为敏感的位点;并且随着中子辐射剂量和剂量率的变化,DNA释放百分比PR值、DNA断裂水平L值和各片段区双链断裂的含量也会发生一定规律性的变化. 展开更多
关键词 dna双链断裂 脉冲场凝胶电泳 枯草芽孢杆菌黑色变种 CFBR-Ⅱ快中子脉冲堆 辐照 热点
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精准序列替换基因组编辑技术研究进展 被引量：1
16
作者 许永汉 齐泽宇 +2 位作者 李文静 赵啊慧 武德传 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期162-175,共14页
利用基因组编辑技术可以对微生物、动植物和人类细胞系基因组进行精准的序列替换,加速生物育种进程和遗传性疾病治疗,从而在农业生产和医疗上取得突破。基因组序列替换策略主要分为2种:第1种依赖DNA双链断裂,包括将CRISPR-Cas分别与同... 利用基因组编辑技术可以对微生物、动植物和人类细胞系基因组进行精准的序列替换,加速生物育种进程和遗传性疾病治疗,从而在农业生产和医疗上取得突破。基因组序列替换策略主要分为2种:第1种依赖DNA双链断裂,包括将CRISPR-Cas分别与同源重组、单链退火、微同源末端连接等DNA修复途径相结合,或由位点特异性重组系统介导,实现精准的序列替换;第2种依赖DNA单链断裂,主要包括引导编辑、碱基编辑器等技术。本研究综述了不同精准序列替换策略和技术及相关研究进展,理清各策略和技术的优缺点,有助于根据基因组编辑的目的,选择适合的技术和方法实现精准高效的序列替换。 展开更多
关键词 基因组编辑 序列替换 dna双链断裂 dna单链断裂 dna修复
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HCV NS3/4A基因外来表达对Huh7细胞凋亡及DNA损伤应答的影响 被引量：8
17
作者 任来峰 唐子执 +4 位作者 吴惠文 许宁 刘刚 曾鸣 郭莲娣 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1110-1115,共6页
NS3/4A是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)编码的丝氨酸蛋白酶复合体,是病毒完成自身复制周期的必要成分。该研究为调查NS3/4A对细胞凋亡及DNA损伤应答(DNA-damage response,DDR)的影响,在Huh7细胞中表达了外来NS3/4A基因。通过DAP... NS3/4A是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)编码的丝氨酸蛋白酶复合体,是病毒完成自身复制周期的必要成分。该研究为调查NS3/4A对细胞凋亡及DNA损伤应答(DNA-damage response,DDR)的影响,在Huh7细胞中表达了外来NS3/4A基因。通过DAPI染色和MTT分析显示,外来表达NS3/4A显著诱导细胞的凋亡和增殖活力的下降。免疫荧光检测结果表明,NS3/4A可明显增加细胞内源性DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs)损伤(γH2AX灶点升高);而进一步用X-ray诱导细胞外源性DSBs损伤后,外来表达NS3/4A的细胞显示出明显的DSBs损伤修复缺陷(减缓的γH2AX灶点消退)。免疫印迹法检测结果显示,NS3/4A可抑制喜树碱(Camptothecin,CPT)诱导的ATM第1 981位丝氨酸的磷酸化(pATM1 981)。以上结果提示,NS3/4A基因外来表达可引起细胞DNA损伤,抑制ATM介导的DSBs损伤修复信号,诱导细胞凋亡通路的活化。 展开更多
关键词 dna损伤 丙型肝炎病毒 dna双链断裂 非结构蛋白3 4A
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DNA损伤标志物γ-H2AX及其在毒性测试应用中的研究进展 被引量：8
18
作者 瞿敏敏 陈佳 +2 位作者 郭磊 徐华 谢剑炜 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期401-411,共11页
当DNA受到攻击尤其是发生DNA双链断裂(DSB)后,组蛋白H2AX的139位丝氨酸迅速磷酸化,生成磷酸化H2AX即γ-H2AX。γ-H2AX在DSB位点大量聚集并形成焦点,参与DNA的损伤修复,且γ-H2AX焦点数与DSB数量成正比。目前研究表明,γ-H2AX是表征DNA... 当DNA受到攻击尤其是发生DNA双链断裂(DSB)后,组蛋白H2AX的139位丝氨酸迅速磷酸化,生成磷酸化H2AX即γ-H2AX。γ-H2AX在DSB位点大量聚集并形成焦点,参与DNA的损伤修复,且γ-H2AX焦点数与DSB数量成正比。目前研究表明,γ-H2AX是表征DNA损伤的特异性生物标志物,可作为基因毒性的特异性效应指标。旨在检测γ-H2AX的试验(简称γ-H2AX试验)已被应用于众多与DNA损伤相关的基础研究和医学诊断中。本文介绍γ-H2AX的生成及生物学意义,论述基于免疫化学技术及质谱技术的γ-H2AX试验在体外基因毒性评价中的应用、γ-H2AX试验与其他基因毒性试验的性能对比及γ-H2AX与其他毒性终点标志物的互补性,并对γ-H2AX试验在基因毒性风险评估中的应用前景予以展望。 展开更多
关键词 dna双链断裂 组蛋白H2AX γ-H2AX试验 基因毒性
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γ-H2AX与DNA双链断裂关系的研究进展 被引量：7
19
作者 宾萍 郑玉新 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期520-522,共3页
H2AX是组蛋白的一个种类,普遍存在于整个基因组中。据报道,DNA双链断裂后可诱导位于丝氨酸-139位C-端保守区域内的H2AX磷酸化形成γ-H2AX,在荧光显微镜下形成可见的γ-H2AX焦点。用特异性抗体的免疫荧光法检测γ-H2AX已成为测定DSB的金... H2AX是组蛋白的一个种类,普遍存在于整个基因组中。据报道,DNA双链断裂后可诱导位于丝氨酸-139位C-端保守区域内的H2AX磷酸化形成γ-H2AX,在荧光显微镜下形成可见的γ-H2AX焦点。用特异性抗体的免疫荧光法检测γ-H2AX已成为测定DSB的金标准。目前,多种物理性、化学性和生物性的因素都能诱导形成γ-H2AX焦点。本文综述了不同因素诱导形成γ-H2AX的机制及其与DNA双链断裂之间的关系的研究进展。 展开更多
关键词 dna损伤 Γ-H2AX dna双链断裂
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沉默PeroxiredoxinⅠ基因对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响 被引量：7
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作者 郭启帅 黄曦 李少林 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1119-1123,共5页
目的探讨PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)沉默后对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及其作用机制。方法将稳定表达PrxⅠshRNA的pGPU6-PrxⅠ和阴性对照pGPU6-HK细胞接种于裸鼠皮下,建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型。实验共分为4组:pGPU6-HK组、pGPU6-... 目的探讨PeroxiredoxinⅠ(PrxⅠ)沉默后对乳腺癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及其作用机制。方法将稳定表达PrxⅠshRNA的pGPU6-PrxⅠ和阴性对照pGPU6-HK细胞接种于裸鼠皮下,建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型。实验共分为4组:pGPU6-HK组、pGPU6-PrxⅠ组、pGPU6-HK+照射(ionizing radiation,IR)组、pGPU6-PrxⅠ+IR组。用6MVX线照射裸鼠瘤组织,测量肿瘤体积,称取肿瘤质量,计算抑瘤率;免疫组化检测肿瘤组织中PrxⅠ和Caspase3蛋白表达;电镜观察肿瘤细胞超微结构,Western blot测定肿瘤组织中γ-H2AX和Rad51蛋白表达。结果成功构建了裸鼠移植瘤模型,pGPU6-PrxⅠ+IR组裸鼠移植瘤生长肿瘤明显迟缓,体积较小,抑瘤率为79.76%,与pGPU6-PrxⅠ(34.92%)和pGPU6-HK+IR(56.94%)比较差异具有显著性(P<0.05);给予pGPU6-PrxⅠ及IR处理后,肿瘤细胞凋亡和坏死增多,PrxⅠ和Rad51蛋白表达减少,而Caspase3和γ-H2AX蛋白表达增加,以pGPU6-PrxⅠ+IR组更为显著,其Rad51蛋白下降了84.8%,γ-H2AX蛋白表达升高5.6倍(P<0.05)。结论沉默PrxⅠ表达可提高乳腺癌移植瘤的放射敏感性,其作用机制与DNA双链断裂增加、DNA损伤后修复能力降低有关。PrxⅠ可能是一个理想的乳腺癌放射增敏分子靶点。 展开更多
关键词 PEROXIREDOXIN Ⅰ 放射敏感性 dna双链断裂 dna损伤修复 乳腺癌
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