中华鳖(Pelodiscus sinensis)摩氏摩根菌(Morganella morganii)的鉴定及致病性研究 被引量：25

1

作者 孔蕾 朱凝瑜 +2 位作者 贝亦江 丁雪燕 陈健舜 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期722-727,共6页

从3只患有头面部疖疮中华鳖(Pelodiscus sinensis)的肝脏、肾脏、头面部病灶干酪样组织,分离得到12株细菌。综合菌落形态观察、16S rRNA序列分析与生化特性分析方法,所有分离株均为摩氏摩根菌(Morganella morganii)。稚鳖和小鼠感染试... 从3只患有头面部疖疮中华鳖(Pelodiscus sinensis)的肝脏、肾脏、头面部病灶干酪样组织,分离得到12株细菌。综合菌落形态观察、16S rRNA序列分析与生化特性分析方法,所有分离株均为摩氏摩根菌(Morganella morganii)。稚鳖和小鼠感染试验提示该菌具有较强的致病力,其对小鼠的半数致死量(LD50)为107.24。同时采用常规琼脂扩散(K-B)法进行8类14种常用药物的抗菌敏感性测定,结果表明,分离株对氨基糖苷类、β-内酰胺类、四环素类、林可酰胺类、多肽类、喹诺酮类、磺胺类等中的8种药物耐药,对氨曲南、氟苯尼考、头孢哌酮则较为敏感。本研究为中华鳖以头面部疖疮为主要临床特征的摩氏摩根菌病的首例报道,旨在为该病的确诊与防治提供科学依据和参考。 展开更多

关键词 中华鳖 摩氏摩根菌 鉴定 致病力 耐药性

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浙江省南美白对虾苗种五种流行病病原检测与分析 被引量：14

2

作者 郑晓叶 许俊榆 +2 位作者 郑天伦 朱凝瑜 曹飞飞 《中国动物检疫》 CAS 2018年第8期17-22,共6页

为了解浙江省南美白对虾主产区苗种主要病原的携带情况,对杭州、宁波、嘉兴和绍兴4个地区的苗种场开展了病原检测。129批次样品的检测结果显示:有4种病原检出阳性,阳性检出率分别为南美白对虾白斑综合症病毒(WSSV)1.55%、传染性皮下及... 为了解浙江省南美白对虾主产区苗种主要病原的携带情况,对杭州、宁波、嘉兴和绍兴4个地区的苗种场开展了病原检测。129批次样品的检测结果显示:有4种病原检出阳性,阳性检出率分别为南美白对虾白斑综合症病毒(WSSV)1.55%、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)20.93%、虾肝肠胞虫(EHP)31.78%、虾血细胞虹彩病毒(SHIV)37.21%,而桃拉综合症病毒(TSV)未有阳性检出。结果表明,SHIV、EHP、IHHNV是浙江省对虾苗种携带的主要病原,需要重点加以防范。从整体分布看,宁波市南美白对虾苗中携带的病原种类最多,且携带率较高,提示宁波市需要加强防控。从苗种来源看,来自福建省虾苗的IHHNV携带率最高,为38.10%;来自海南省和广东省虾苗中存在WSSV感染,检出率分别为2.17%和2.27%;来自广东省虾苗的EHP和SHIV携带率最高,分别为43.48%和41.30%。由于浙江省南美白对虾苗种主要依靠外地输入,而这些输出地区的苗种病原感染率较高,因此浙江省需要加强从这些地区引入苗种的检疫工作。 展开更多

关键词 南美白对虾 虾苗 对虾白斑综合症病毒 传染性皮下及造血组织坏死病毒 虾肝肠胞虫 虾血细胞虹彩病毒 桃拉综合症病毒 浙江省

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凡纳滨对虾细菌性红体病病原的分子特征与耐药性 被引量：11

3

作者 陈健舜 朱凝瑜 +3 位作者 孔蕾 丁雪燕 郑天伦 杜建明 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1891-1900,共10页

为探明引起凡纳滨对虾细菌性红体病的病原,从病虾肝胰脏分离得到10株优势菌,经回归感染实验证实其为引起此次红体病的病原菌。Vitek与16S rRNA序列分析显示,分离株均为副溶血弧菌。基于dnaE-gyrB-recA-dtdS-pntA-pyrC-tnaA的多位点序列... 为探明引起凡纳滨对虾细菌性红体病的病原,从病虾肝胰脏分离得到10株优势菌,经回归感染实验证实其为引起此次红体病的病原菌。Vitek与16S rRNA序列分析显示,分离株均为副溶血弧菌。基于dnaE-gyrB-recA-dtdS-pntA-pyrC-tnaA的多位点序列分型(multilocus sequencetyping,MLST)表明,这些菌株形成3个新序列型(ST),其中1株为ST413,7株为ST414,2株为ST415;ST413包含新等位基因型recA-166与tnaA-121,ST414则含有新等位基因型gyrB-219。MLST结果提示,这些副溶血弧菌分离株并非来自单一克隆,呈现出一定水平的分子多样性。但这些菌株均含有大流行群(PG)的分子标记toxRS与VPA1168,并具有相同的毒力基因构成(tlh+tdh-trh-T3SS1+T3SS2-)与耐药谱,其tdh与trh的缺失并未影响细菌对凡纳滨对虾的致病力。综上所述,引起此次凡纳滨对虾红体病的10株副溶血弧菌可能为PG的不同变异株。 展开更多

关键词 凡纳滨对虾 副溶血弧菌 分子特征 耐药性

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2014—2016年浙江省大黄鱼养殖病害测报及防治建议 被引量：10

4

作者 曹飞飞 朱凝瑜 郑晓叶 《浙江农业科学》 2017年第6期1043-1047,共5页

根据2014—2016年来浙江省大黄鱼养殖病害测报数据及耐药性普查结果,对浙江省大黄鱼养殖病害的发病情况、病害种类、耐药情况等进行了整理分析,探讨了发病原因并提出相应的防治建议。

关键词 大黄鱼 病害测报 耐药性

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嗜血支原体(附红细胞体)病原学研究进展 被引量：5

5

作者 严丽华 袁聪俐 +1 位作者 朱凝瑜 华修国 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2009年第2期177-180,共4页

嗜血支原体病作为一种新发人兽共患病正日益得到兽医学界与相关部门的关注。该病原主要寄生于人和动物的红细胞表面、血浆及骨髓中,以贫血、黄疸、发热等为主要临床症状。并有隐性感染、慢性迁延、条件致病、急性发病时致死率高的特征;... 嗜血支原体病作为一种新发人兽共患病正日益得到兽医学界与相关部门的关注。该病原主要寄生于人和动物的红细胞表面、血浆及骨髓中,以贫血、黄疸、发热等为主要临床症状。并有隐性感染、慢性迁延、条件致病、急性发病时致死率高的特征;最初猪嗜血支原体命名为附红细胞体,并将其归为立克次氏体目。而后在其16SrRNA基因序列鉴定后将其重新分类为支原体类微生物。但是该分类还存在异议。研究报道证实人类也可感染嗜血支原体微生物,病人以低热、乏力、嗜睡、反复上呼吸道感染、腹泻腹痛、肝脾肿大,红细胞、血红蛋白血小板减少、胆红素增高为特征。然而,该病在临床医师中尚未引起足够重视。 展开更多

关键词 嗜血支原体 形态学 流行特点 致病性

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猪附红细胞体双抗夹心ELISA检测方法的建立 被引量：4

6

作者 朱凝瑜 袁聪俐 +1 位作者 杨志彪 华修国 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2010年第2期97-101,共5页

实验通过纯化猪附红细胞体后免疫小鼠及家兔制备阳性血清,建立了猪附红细胞体双抗夹心ELISA检测方法。实验结果表明,以鼠阳性血清1:200稀释后作为捕获抗体,4℃包被过夜,1%明胶溶液37℃封闭1h,兔阳性血清1:400稀释后作为检测抗体,辣根过... 实验通过纯化猪附红细胞体后免疫小鼠及家兔制备阳性血清,建立了猪附红细胞体双抗夹心ELISA检测方法。实验结果表明,以鼠阳性血清1:200稀释后作为捕获抗体,4℃包被过夜,1%明胶溶液37℃封闭1h,兔阳性血清1:400稀释后作为检测抗体,辣根过氧化物酶标羊抗兔IgG抗体1:8000稀释,37℃显色10min为最佳反应条件。同时进行特异性、敏感性、重复性实验。该方法对猪附红细胞体最低检出量为3.812μg·mL-1,具有良好的特异性、敏感性和重复性,有望作为群体检测方法。 展开更多

关键词 附红细胞体 双抗夹心ELISA 检测

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浙江省海产品中副溶血性弧菌污染情况分析 被引量：7

7

作者 朱凝瑜 孔蕾 郑天伦 《浙江农业科学》 2013年第8期1013-1015,共3页

2011-2012年对浙江省11个市的消费市场中的缢蛏、海带、花蛤、泥蚶、蛤蜊等海产品,参照GB/T 4789.7—200方法进行副溶血性弧菌分离,并用双重PCR法确定该菌的携带情况。230批次样品检测结果显示,有85批次检出副溶血性弧菌,平均检出率为36... 2011-2012年对浙江省11个市的消费市场中的缢蛏、海带、花蛤、泥蚶、蛤蜊等海产品,参照GB/T 4789.7—200方法进行副溶血性弧菌分离,并用双重PCR法确定该菌的携带情况。230批次样品检测结果显示,有85批次检出副溶血性弧菌,平均检出率为36.96%。 展开更多

关键词 海产品 副溶血性弧菌 浙江

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鳖源嗜水气单胞菌的耐药性研究 被引量：7

8

作者 朱凝瑜 郑晓叶 +2 位作者 曹飞飞 李杨阳 郑天伦 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1445-1450,共6页

对10株分离自患病中华鳖的嗜水气单胞菌进行了耐药性研究。药敏试验结果表明,这10株嗜水气单胞菌呈现相近的耐药谱,对阿米卡星、新霉素、头孢哌酮、氨曲南、多西环素、诺氟沙星、恩诺沙星等7种药物均敏感,对青霉素G、林可霉素、万古霉... 对10株分离自患病中华鳖的嗜水气单胞菌进行了耐药性研究。药敏试验结果表明,这10株嗜水气单胞菌呈现相近的耐药谱,对阿米卡星、新霉素、头孢哌酮、氨曲南、多西环素、诺氟沙星、恩诺沙星等7种药物均敏感,对青霉素G、林可霉素、万古霉素、甲氧嘧啶等4种药物耐药,对氟苯尼考、四环素、复方新诺明产生了不同的耐药性。同时对qnr A、qnr B、qep A等17种耐药基因进行检测,10株菌均检测到了2~11种耐药基因,检出率最高的耐药基因为qnr A与cat 1,达到了100%,而qep A、aph(3')、sulⅡ、sulⅢ、OXA等5个基因未检出。同种细菌不同分离株表现出不同的耐药性,提示用药时有必要针对病原进行药敏试验,筛选敏感药物进行疾病防治。 展开更多

关键词 中华鳖 嗜水气单胞菌 药敏试验 耐药基因

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中华鳖(Pelodiscus sinensis)迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)的分离鉴定与药物敏感性分析 被引量：6

9

作者 朱凝瑜 曹飞飞 +1 位作者 郑晓叶 郑天伦 《中国渔业质量与标准》 2018年第4期65-71,共7页

目前,细菌性疾病是中华鳖养殖中的常见疾病。实验采用常规方法从呈白底板症状的中华鳖(Pelodiscus sinensis)肝脏、脾脏、肾脏、胃积液等中分离纯化病原菌,经形态观察、生理生化鉴定和16S r RNA序列分析确定其种属,通过回归感染实验判... 目前,细菌性疾病是中华鳖养殖中的常见疾病。实验采用常规方法从呈白底板症状的中华鳖(Pelodiscus sinensis)肝脏、脾脏、肾脏、胃积液等中分离纯化病原菌,经形态观察、生理生化鉴定和16S r RNA序列分析确定其种属,通过回归感染实验判断分离菌株致病性,并以纸片扩散法测定其药物敏感性。结果显示:自病鳖中分离可得到一种优势菌落,其表面湿润光滑、微隆起、半透明,呈灰黄色;基于VITEK 2的64个生化反应的分析提示,分离菌理化特性与迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)基本一致;16S rRNA序列分析显示,其与迟缓爱德华氏菌同源性达98%以上。腹腔注射回归感染实验引起稚鳖死亡,且细菌分离能再次得到相同分离株,表明分离到的迟缓爱德华氏菌具有致病性。药敏试验表明该菌对庆大霉素、阿米卡星、新霉素、头孢哌酮、氨曲南等5种抗生素较为敏感。本研究可为中华鳖病害的正确诊断和科学防治提供参考。 展开更多

关键词 中华鳖 白底板病 迟缓爱德华氏菌 分离鉴定 药敏实验 系统进化树 生理生化鉴定

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2019年浙江省水生动物病原菌耐药情况分析 被引量：6

10

作者 梁倩蓉 朱凝瑜 +4 位作者 郑晓叶 陈小明 丁雪燕 周凡 马文君 《安徽农业科学》 CAS 2021年第3期95-99,共5页

为规范浙江省水产养殖用药和保障水产品质量安全,2019年对杭州、湖州、嘉兴、宁波、温州等地区部分养殖点患病中华鳖、大口黑鲈、大黄鱼等主养品种中分离的病原菌进行恩诺沙星、硫酸新霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、盐酸多西环素、氟甲喹... 为规范浙江省水产养殖用药和保障水产品质量安全,2019年对杭州、湖州、嘉兴、宁波、温州等地区部分养殖点患病中华鳖、大口黑鲈、大黄鱼等主养品种中分离的病原菌进行恩诺沙星、硫酸新霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、盐酸多西环素、氟甲喹、磺胺间甲氧嘧啶钠、磺胺甲噁唑+甲氧苄啶等抗生素最低抑菌浓度(MIC值)测定,比较各药物对菌株最小抑菌浓度的中位值(MIC 50)。结果表明,淡水品种中华鳖、大口黑鲈体内分离的143株病原菌中以气单胞菌(62.2%)为主,海水品种大黄鱼体内分离的56株病原菌以假单胞菌(55.4%)和哈维氏弧菌(17.9%)为主,均对恩诺沙星、盐酸多西环素、硫酸新霉素等药物的耐受浓度较低,而对磺胺类、氟甲喹、甲砜霉素等药物的耐受浓度较高;但在氟苯尼考药物上呈现不同的耐受性。淡水养殖地区间病原菌的耐药性一致,海水养殖宁波地区病原菌耐药性高于温州地区。总体而言,2019年浙江地区绝大部分水生动物病原菌对恩诺沙星、盐酸多西环素、硫酸新霉素等药物较为敏感,可作为多数病原菌用药首选,但必须严格按照药敏试验结果和药代动力学原理确定剂量和药程。 展开更多

关键词 中华鳖 大口黑鲈 大黄鱼 病原菌耐药 MIC值 规范用药

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2013年浙江省南美白对虾虾苗病毒携带情况分析 被引量：6

11

作者 朱凝瑜 孔蕾 郑天伦 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第5期756-760,共5页

病毒病频发是导致对虾养殖失败的最重要原因之一,为摸清浙江省南美白对虾虾苗病毒携带情况(白斑病毒、桃拉病毒、传染性皮下及造血组织坏死病毒),进一步提高水产苗种质量安全水平,于2013年对浙江省主要的南美白对虾虾苗场进行了病毒携... 病毒病频发是导致对虾养殖失败的最重要原因之一,为摸清浙江省南美白对虾虾苗病毒携带情况(白斑病毒、桃拉病毒、传染性皮下及造血组织坏死病毒),进一步提高水产苗种质量安全水平,于2013年对浙江省主要的南美白对虾虾苗场进行了病毒携带情况调查,并结合虾苗来源进行分析。检测方法采用国标、行标中的PCR或RT-PCR方法。结果显示,113份南美白对虾苗种来源均为外省,其中福建省58批次,广东省、海南省各26批次,其他地区3批次,共有68份检出病毒,总阳性率为60.18%,其中传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)阳性59份,占52.21%;白斑病毒(WSSV)阳性18份,占15.93%;桃拉病毒(TSV)阳性1份,占0.88%,WSSV和IHHNV同时阳性的10份,占8.85%。 展开更多

关键词 南美白对虾 虾苗 病毒检测

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饲料中添加蝇蛆蛋白对中华鳖肝和血清免疫代谢应答的影响 被引量：4

12

作者 梁倩蓉 郑天伦 +6 位作者 陈小明 朱凝瑜 郑晓叶 何润真 曹飞飞 薛辉利 丁雪燕 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第10期2172-2181,共10页

为评估蝇蛆蛋白对提高中华鳖免疫代谢的作用效果,设置2个中华鳖饲料组,分别含有质量分数5%和10%蝇蛆蛋白,以投喂常规饲料为对照。投喂3个月后,统计鳖存活率并测量体增重,测定血清中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(S... 为评估蝇蛆蛋白对提高中华鳖免疫代谢的作用效果,设置2个中华鳖饲料组,分别含有质量分数5%和10%蝇蛆蛋白,以投喂常规饲料为对照。投喂3个月后,统计鳖存活率并测量体增重,测定血清中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、过氧化氢酶(CAT)、溶菌酶(LZM)等指标,并利用转录组测序技术比较不同组中华鳖的基因表达谱。结果表明,添加蝇蛆蛋白组中华鳖较常规饲料组的养殖存活率和平均体增重率均有所升高,血清指标中除了GPX活性降低,其他5种酶活性均升高。转录组测序比较显示,添加蝇蛆蛋白组与常规饲料组间、不同添加量组间均存在显著差异表达基因。KEGG通路富集分析提示,蝇蛆蛋白添加组和常规饲料组差异基因均主要富集于吞噬体、补体与凝血级联两种免疫通路;此外,10%添加组和5%添加组、10%添加组和常规饲料组的差异基因富集于细胞因子-细胞因子受体相互作用,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,维生素消化与吸收等免疫和代谢通路。综上表明,饲料中添加蝇蛆蛋白具有增强中华鳖免疫和代谢活性的作用,以添加10%效果最佳,其潜在作用机理与吞噬体,补体和凝血级联,细胞因子-细胞因子受体相互作用,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢和维生素消化与吸收等通路密切相关。研究结果可对蝇蛆蛋白作为中华鳖饲料添加剂的有效性评价提供参考。 展开更多

关键词 中华鳖 蝇蛆蛋白 免疫与代谢调节 转录组测序

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浙江地区异育银鲫内脏携带细菌多样性与毒力基因分析 被引量：5

13

作者 林溪 田国明 +2 位作者 朱凝瑜 孔蕾 陈健舜 《水产科学》 CAS 北大核心 2014年第12期785-789,共5页

以浙江省6个异育银鲫规模化养殖场为监控点,于2013年6—7月与9—10月分别对每个养殖场进行采样与检测,所采样品均为表观健康个体。通过细菌分离、鉴定及毒力基因测定,对其肝、脾、肾携带细菌进行多样性分析。12个批次共检出7种细菌,均... 以浙江省6个异育银鲫规模化养殖场为监控点,于2013年6—7月与9—10月分别对每个养殖场进行采样与检测,所采样品均为表观健康个体。通过细菌分离、鉴定及毒力基因测定,对其肝、脾、肾携带细菌进行多样性分析。12个批次共检出7种细菌,均为人、兽、鱼共患病原菌。气单胞菌的检出率占据首位,气溶素、细胞毒性肠毒素、不耐热细胞紧张性肠毒素、耐热性细胞紧张性肠毒素为其主要毒力基因型,提示其可能具有致病性。鲁氏不动杆菌、保科爱德华菌、类志贺邻单胞菌、腐败希瓦氏菌、嗜麦芽窄食单胞菌、大肠埃希氏菌的检出率则在各批次间存在较大差异。异育银鲫携带的细菌种类及致病性气单胞菌的高携带率对水产养殖与公共卫生造成极大的隐患。研究结果为建立水产养殖细菌性病原(尤其是气单胞菌)监测体系提供参考依据。 展开更多

关键词 异育银鲫 细菌多样性 气单胞菌 毒力基因型 浙江

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重组酶聚合酶扩增结合CRISPR-Cas12a快速检测十足目虹彩病毒1方法的建立 被引量：5

14

作者 张徐俞 黄俊 +6 位作者 杨稳 付媛媛 陈正伟 郑晓叶 朱凝瑜 李业 俞晓平 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期4980-4988,共9页

【背景】十足目虹彩病毒1 (Decapod Iridescent Virus 1,DIV1)可感染南美白对虾、中国对虾和日本对虾等,是危害对虾养殖业的主要病毒之一。当前高效、快速、简便地检测对虾是否感染DIV1是减少其发生和危害的重要途径。【目的】将成簇的... 【背景】十足目虹彩病毒1 (Decapod Iridescent Virus 1,DIV1)可感染南美白对虾、中国对虾和日本对虾等,是危害对虾养殖业的主要病毒之一。当前高效、快速、简便地检测对虾是否感染DIV1是减少其发生和危害的重要途径。【目的】将成簇的规律间隔短回文重复序列(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats,CRISPR)及其相关蛋白12a (CRISPR Associated Protein 12a,Cas12a),即CRISPR-Cas12a系统,与重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)技术相结合,建立快速检测DIV1的方法(RPA-Cas12a),并探讨该方法在实际样本检验中的应用价值。【方法】通过提取DIV1DNA,设计其RPA引物、crRNA及报告探针,优化并建立RPA结合CRISPR-Cas12a的快速检测方法,进一步分析该方法检测DIV1的灵敏度与特异性,并比较建立的方法与qPCR法的一致性。【结果】建立的RPA-Cas12a快速检测方法可在40min内实现对虾样本DNA中DIV1的检测,检测限为10 copies/reaction。用该方法分别对对虾白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus,IHHNV)、虾肝肠胞虫(Enterocytozoon Hepatopenaei,EHP)及DIV1进行检测,结果仅DIV1发生特异性反应,而WSSV、IHHNV和EHP的检测结果均为阴性。采用RPA-Cas12a检测61份实际样本,结果均与qPCR检测法的阳性检出率一致。【结论】建立的RPA-Cas12a方法检测十足目虹彩病毒1具有快速、简便、灵敏度高且特异性强的特点,为十足目虹彩病毒1的快速检测提供了新的工具。 展开更多

关键词 CRISPR-Cas12a 重组酶聚合酶扩增 十足目虹彩病毒1 快速检测

原文传递

水产养殖用水质底质改良剂在生产和使用中存在的问题及建议 被引量：4

15

作者 贝亦江 周凡 +2 位作者 朱凝瑜 马文君 丁雪燕 《现代农业科技》 2019年第14期212-214,共3页

明确了水产养殖用水质底质改良剂的分类,梳理了其和渔药的关系,剖析了其在生产和使用中存在的问题,并提出了建议,以期为水产养殖用水质底质改良剂的科学生产和使用提供参考。

关键词 水产养殖 水质底质改良剂 分类 生产 使用

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传染性脾肾坏死病毒灭活疫苗对鳜肠道微生物的影响研究

16

作者 何润真 朱凝瑜 +4 位作者 梁倩蓉 郑晓叶 陈小明 姚高华 丁雪燕 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期862-870,共9页

为探究接种传染性脾肾坏死病毒灭活疫苗对鳜肠道微生物的组成结构及相关功能基因的影响,对体质量(20±1.8) g的鳜进行腹腔注射传染性脾肾坏死病毒灭活疫苗,对照组注射等体积无菌生理盐水。对照组和免疫组放入用纱网隔开的同一池塘... 为探究接种传染性脾肾坏死病毒灭活疫苗对鳜肠道微生物的组成结构及相关功能基因的影响,对体质量(20±1.8) g的鳜进行腹腔注射传染性脾肾坏死病毒灭活疫苗,对照组注射等体积无菌生理盐水。对照组和免疫组放入用纱网隔开的同一池塘中养殖,28 d后每组各采集10尾肠道粪便样本,用高通量测序,构建文库。高通量测序共获得9669条序列,平均长度为543 bp。Alpha多样性分析结果显示,Chao1指数在对照组中更高,香农指数和辛普森指数在免疫组中更高,表明免疫后肠道微生物的多样性和丰度增加。在门水平上,对照组肠道微生物以变形菌门为优势菌门,相对丰度为72.23%;免疫组以变形菌门和衣原体门为优势菌门,相对丰度分别为28.57%和11.13%。在属水平上,对照组以气单胞菌属为主要优势属,相对丰度高达71.73%;免疫组以衣原体属和埃希氏杆菌属为主要优势属,相对丰度分别为11.57%和8.7%。免疫组与对照组相比,共筛选到9656个差异丰度基因,其中有840个基因高丰度,8816个基因低丰度。差异基因主要富集在双组分系统、ABC转运子、嘌呤代谢、群体感应、细菌趋药性、鞭毛组装和细菌分泌系统等通路,通路中的绝大部分基因的丰度在免疫组中均降低。上述结果表明,传染性脾肾坏死病毒灭活疫苗免疫后鳜肠道微生物的组成和功能基因变化明显,可引起致病菌维氏气单胞菌和嗜水气单胞菌比例的减少,同时引起乳酸菌属、芽孢杆菌属和类芽孢杆菌属等有益细菌比例增加,这可为了解疫苗的作用机制提供新思路。 展开更多

关键词 鳜 传染性脾肾坏死病毒 灭活疫苗 肠道微生物 宏基因组

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高效液相色谱-串联质谱法检测鱼肉中5种头孢类药物 被引量：4

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作者 贝亦江 王扬 +4 位作者 朱凝瑜 柯庆青 陈小芳 李诗言 周凡 《肉类研究》 北大核心 2018年第2期28-32,共5页

建立高效液相色谱-串联质谱法同时检测鱼肉中5种头孢类抗生素(头孢氨苄、头孢洛宁、头孢匹林、头孢喹肟和头孢唑啉)残留的检测方法。鱼肉基质经乙腈提取,Prime HLB(6 m L,200 mg)固相萃取小柱净化。采用AB-4500 Qtrap液相色谱-串联质谱... 建立高效液相色谱-串联质谱法同时检测鱼肉中5种头孢类抗生素(头孢氨苄、头孢洛宁、头孢匹林、头孢喹肟和头孢唑啉)残留的检测方法。鱼肉基质经乙腈提取,Prime HLB(6 m L,200 mg)固相萃取小柱净化。采用AB-4500 Qtrap液相色谱-串联质谱仪,Accucore C18 RP-MS色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7 μm),以乙腈和体积分数0.1%的乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 m L/min,柱温30℃。采用电喷雾离子源,正离子扫描,多反应监测模式,外标法定量。结果表明:5种头孢类药物在0~75 μg/kg范围内线性良好,且在8 min内完全分离;5种头孢类药物的检出限均为0.5 μg/kg,定量限为2.0 μg/kg;在10、25、40 μg/kg加标水平下,5种头孢类药物的批内平均加标回收率为81.0%~111.0%,相对标准偏差为0.41%~10.50%,批间平均加标回收率为84.7%~106.0%,相对标准偏差为0.88%~8.71%。 展开更多

关键词 鱼肉 高效液相色谱-串联质谱法 头孢类药物

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2003-2012年浙江省水产养殖病害测报分析 被引量：4

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作者 郑天伦 孔蕾 朱凝瑜 《浙江农业科学》 2014年第3期412-416,共5页

基于近10年来浙江省水产养殖病害测报数据,对浙江省水产养殖病害的发病特点以及时间、地区、品种分布规律等进行了分析,探讨了发病原因以及相应的防治对策,并提出了今后水产养殖病害测报的研究方向。

关键词 水产养殖 病害测报 浙江

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不同密度青蛤养殖塘异养细菌和弧菌的数量变化 被引量：4

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作者 郑晓叶 郑天伦 +3 位作者 曹飞飞 朱凝瑜 丁理法 王国良 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期1647-1654,共8页

研究了青蛤(Cyclina sinensis)养殖环境中异养细菌数量和弧菌数量的动态变化,以探讨其与养殖密度的相关性和样本间相关性。结果表明:实验周期内各养殖塘水体中异养细菌总数呈现不同的变化趋势且差异不显著(P> 0. 05),而弧菌数量变化... 研究了青蛤(Cyclina sinensis)养殖环境中异养细菌数量和弧菌数量的动态变化,以探讨其与养殖密度的相关性和样本间相关性。结果表明:实验周期内各养殖塘水体中异养细菌总数呈现不同的变化趋势且差异不显著(P> 0. 05),而弧菌数量变化趋势较为一致,9月份与其他月份水样中弧菌数量差异较为显著(P<0. 05)。各塘底泥中异养细菌总数变化和弧菌数量变化差异均不显著,而不同密度养殖塘底泥中弧菌数量变化差异显著(P <0. 05)。不同采样时间同一塘的青蛤腔液异养细菌总数差异极显著(P <0. 01),而弧菌数量差异较为显著(P <0. 05)。样本间、样本与养殖密度间相关性分析发现,水体中异养细菌总数变化与弧菌数量变化呈显著正相关(r=0. 335,P <0. 05);底泥中异养细菌总数变化与弧菌数量变化呈正相关且相关性极显著(r=0. 587,P <0. 01);底泥和水体中异养细菌总数和弧菌数量变化与养殖密度相关性均不显著(P>0. 05);青蛤腔液异养细菌总数变化与养殖密度相关性极显著(r=-0. 189,P <0. 01),弧菌数量变化与养殖密度相关性极显著(r=-0. 123,P <0. 01)。 展开更多

关键词 青蛤 细菌数量 弧菌

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一例中华鳖腮腺炎的诊断与防治

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作者 周秀娟 梁倩蓉 +2 位作者 朱凝瑜 丁雪燕 朱斐 《安徽农业科学》 CAS 2023年第18期82-86,共5页

2021年5月,浙江诸暨某中华鳖养殖场中华鳖脖子肿胀、伸长,底板出现多处血点,并伴随大量死亡,经解剖可见腮部糜烂、充血明显,内脏呈现不同程度病变。从病鳖腮、肝、脾、肾、肠等组织分离纯化病原菌,经形态观察、生化鉴定确定其种属,并采... 2021年5月,浙江诸暨某中华鳖养殖场中华鳖脖子肿胀、伸长,底板出现多处血点,并伴随大量死亡,经解剖可见腮部糜烂、充血明显,内脏呈现不同程度病变。从病鳖腮、肝、脾、肾、肠等组织分离纯化病原菌,经形态观察、生化鉴定确定其种属,并采用微量肉汤连续稀释法确定8种国标渔药对其最低抑菌浓度;同时,利用PCR方法检验是否存在病毒感染。结果显示:自有典型临床症状的中华鳖组织中分离到嗜水气单胞菌。药敏试验结果表明,该菌对恩诺沙星、硫酸新霉素和盐酸多西环素3种抗菌药物敏感。同时,在患病中华鳖内脏中检测到一种病毒,通过测序与构建系统进化树发现该病毒与中华鳖出血性综合征病毒同源性最高且聚为一支。病原回归感染试验结果表明,分离的嗜水气单胞菌与病毒均可引起中华鳖不同程度死亡。该例中华鳖腮腺炎为嗜水气单胞菌与出血性综合征病毒混合感染所致。该研究可为中华鳖腮腺炎的科学诊断与防控提供理论依据。 展开更多

关键词 中华鳖 腮腺炎 出血性综合征病毒 嗜水气单胞菌

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