目的:建立基于三交联(three-way junction,TWJ)DNA纳米结构及LED光催化作用的可视化生物传感方法快速超灵敏检测microRNA-21(miRNA-21)。方法:将生物素标记的miRNA-21捕获探针固定于亲和素化的96孔板上,捕获探针能够有效的结合靶物质miR...目的:建立基于三交联(three-way junction,TWJ)DNA纳米结构及LED光催化作用的可视化生物传感方法快速超灵敏检测microRNA-21(miRNA-21)。方法:将生物素标记的miRNA-21捕获探针固定于亲和素化的96孔板上,捕获探针能够有效的结合靶物质miRNA-21,随后加入DNA检测探针P1、P2、P3,使其自组装形成TWJ DNA纳米结构。加入SYBR Green I后,dsDNA-SYBR Green I复合物在LED光照射下可催化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)产生显色反应,其吸光度与miRNA-21浓度成明显比例关系,从而可对miRNA-21浓度进行定量检测。结果:在最佳反应条件下,该方法最低检测限可达5.49pmol/L,充分说明该方法具有良好的灵敏度。考察方法的精密度,相对标准偏差RSD均在7.3%以下。该方法的回收率在79.8~128.8%之间,说明该方法具有良好的精密度和回收率。结论:本研究建立了一种基于TWJ DNA纳米结构及LED光催化作用的可视化生物传感分析方法,能够快速、超灵敏检测miRNA-21。该方法为miRNA的检测提供了新思路。展开更多
文摘目的:建立基于三交联(three-way junction,TWJ)DNA纳米结构及LED光催化作用的可视化生物传感方法快速超灵敏检测microRNA-21(miRNA-21)。方法:将生物素标记的miRNA-21捕获探针固定于亲和素化的96孔板上,捕获探针能够有效的结合靶物质miRNA-21,随后加入DNA检测探针P1、P2、P3,使其自组装形成TWJ DNA纳米结构。加入SYBR Green I后,dsDNA-SYBR Green I复合物在LED光照射下可催化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)产生显色反应,其吸光度与miRNA-21浓度成明显比例关系,从而可对miRNA-21浓度进行定量检测。结果:在最佳反应条件下,该方法最低检测限可达5.49pmol/L,充分说明该方法具有良好的灵敏度。考察方法的精密度,相对标准偏差RSD均在7.3%以下。该方法的回收率在79.8~128.8%之间,说明该方法具有良好的精密度和回收率。结论:本研究建立了一种基于TWJ DNA纳米结构及LED光催化作用的可视化生物传感分析方法,能够快速、超灵敏检测miRNA-21。该方法为miRNA的检测提供了新思路。
