摘要
为了制备抗猪血红蛋白的单克隆抗体,试验用猪血红蛋白纯品为抗原,直接免疫雌性BALB/c小鼠;待血清检测为阳性后,将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与免疫后小鼠脾细胞融合;用间接ELISA法和有限稀释法进行阳性单克隆杂交瘤细胞株的筛选,并对其中效价较高的一株杂交瘤细胞株进行特性分析。采用辛酸-硫酸铵方法纯化抗体,用间接ELISA法测定亲和力常数。结果表明:该方法能得到稳定分泌抗猪血红蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株并制备腹水,获得了效价为1∶800 000的抗猪血红蛋白单克隆抗体,该单克隆抗体的亚型为lgG1,亲和力常数为2. 8×10^8L/mol,且该单克隆抗体与牛、人血红蛋白交差反应率均小于0. 1%。说明该单克隆抗体特性良好,可以作为后续试验原料,进一步用于猪血红蛋白检测试剂盒的研制中。
出处
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018年第22期185-188,共4页
Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine
基金
河北省财政预算项目(17308)
石家庄市财政预算项目(171491182A)