摘要
目的探讨骨形态发生蛋白2(BMP-2)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导成脂分化后BMSCs细胞形态学的影响,确定BMP-2抑制BMSCs成脂分化的优选浓度。方法抽取大鼠的骨髓,体外用贴壁培养法获得原代BMSCs,流式细胞仪检测P2细胞表面抗原标志物;实验取第二、三代细胞,设计5个实验组及1个对照组:实验组第一阶段用成脂诱导液诱导3d,第二阶段在成脂诱导液中分别添加BMP-2 0.5、5.0、50.0、100.0、200.0ng·mL^(-1)继续诱导14d;而对照组始终用BMSCs培养基培养。各组经诱导后第17天用油红O染色,观察细胞脂滴染色情况及检测细胞成脂OD值,显微镜下观察细胞形态的变化。结果流式细胞术结果显示P2细胞表达CD44、HLA-ABC、CD105分别为95.5%、96.8%和92.0%,而阴性抗原CD34、CD45表达分别为0.683%和0.377%。油红O染色图片显示:BMP-2在0.5~50.0ng·mL^(-1)的质量浓度下脂滴数呈现增多趋势,而在100.0~200.0ng·mL^(-1)的质量浓度下脂滴数呈下降趋势。实验组BMP-2 50.0ng·mL^(-1)的脂肪定量OD值>BMP-2 0.5ng·mL^(-1)的脂肪定量OD值,而BMP-2 200.0ng·mL^(-1)的脂肪定量OD值<BMP-2 100ng·mL^(-1)的脂肪定量OD值(均P<0.05)。实验组BMP-2质量浓度在50.0~100.0ng·mL^(-1),脂肪定量OD值分析变化不大(P>0.05)。结论通过贴壁培养可获得高纯度BMSCs。BMP-2质量浓度低于100ng·mL^(-1)时,具有诱导BMSCs成脂分化的能力;BMP-2质量浓度超过100ng·mL^(-1),则可以抑制BMSCs成脂分化,从而减少大鼠脂肪细胞的形成。
出处
《南昌大学学报（医学版）》
CAS
2017年第4期17-20,F0003,共5页
Journal of Nanchang University：Medical Sciences
基金
江西省教育厅科技计划课题(GJJ14030)
