摘要
目的 在单个细胞水平 ,观测亚溶破补体膜攻击复合物 (MAC)诱导的血管内皮细胞 [Ca2 + ]i的动态变化。方法将原代培养的人脐静脉内皮细胞 ,以Fluo 4 /AM(1～ 6 μmol/L)和 0 .0 2 %PluronicF 12 7进行细胞钙荧光指示剂负载后 ,于 0℃组装亚溶破剂量的MAC。在 37℃条件下 ,以LSCM实时监测MAC沉积引起的胞浆钙荧光强度的变化。结果 MAC沉积后 ,多数细胞的钙荧光强度迅速增强 ,以后随时间的推移 ,升高的钙荧光逐渐下降 ,直至恢复至静息水平。定量分析选定的胞浆区域钙荧光强度的变化发现 ,不同细胞在 [Ca2 + ]i 的变化高度、持续时间和胞内钙振荡的特征等方面存在异质性。结论 MAC沉积到内皮细胞表面后 ,可诱导胞浆游离钙离子的浓度增高 ,且不同细胞 [Ca2 + ]i
Aim To invesgate the change of cytosolic free calcium ion concentration (\[Ca 2+ \] i ) of human umbilical vein vascular endothelial cells (HUVECs) in response to the stimulation of complement membrane attack complex(MAC)by using LSCM. Methods After deposition of sublytic MAC on fluo 4 loaded HUVECs, the dynamics of \[Ca 2+ \] i change was analysed with cofocal laser scanning microscope. Results In most of the cells, calcium fluorescence intensity increased ripidly upon complement deposition and decreased to the resting level after a while. Quantitative analyses showed that \[Ca 2+ \] i response to MAC attack was heterogeneous in the extent,duration and the oscillation pattern. Conclusion The \[Ca 2+ \] i in HUVECs rises after MAC attack with a heterogeneous pattern.
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第4期342-344,共3页
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology
基金
国家自然科学基金资助
No.3 97890 10
国家重点基础研究"973"项目资助
No .19990 5 42 0 0
关键词
补体膜攻击复合物
血管内皮细胞
游离钙
激光共聚焦显微镜
membrane attack complex
vasular endothelial cells
free calcium ion
laser scanning confocal microscope
