caspase-6基因诱导成骨肉瘤细胞凋亡 被引量：5

1

作者 丁勇 范清宇 +2 位作者 崔大祥 张殿忠 殷剑宁 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第4期261-264,共4页

目的:探讨caspase-6对成骨肉瘤细胞株的凋亡诱导作用。方法:应用RT-PCR方法检测成骨肉瘤细胞株SOSP-9607中caspase-6基因的表达水平。以腺病毒adv5作载体,构建含caspase-6基因的转基因载体,用脂质体包裹法转染SOSP-9607细胞株,用RT-PCR... 目的:探讨caspase-6对成骨肉瘤细胞株的凋亡诱导作用。方法:应用RT-PCR方法检测成骨肉瘤细胞株SOSP-9607中caspase-6基因的表达水平。以腺病毒adv5作载体,构建含caspase-6基因的转基因载体,用脂质体包裹法转染SOSP-9607细胞株,用RT-PCR方法检测转染后SOSP-9607细胞中caspase-6基因的表达。用MTF法检测转染caspase-6对SOSP-9607细胞株生长的影响。结果:成骨肉瘤细胞株SOSP-9607中未检出caspase-6表达。RT-PCR法证实转染。caspase-6后SOSP-9607中caspase-6表达显著增强,MTT检测显示对SOSP-9607细胞的生长有抑制作用,形态学观察及DNA电泳证实转染后的细胞株存在细胞凋亡特征。结论:caspase-6对成骨肉瘤细胞的生长有抑制作用,并可诱导成骨肉瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 成骨肉瘤细胞 细胞凋亡 基因转染 caspase-6基因

下载PDF 职称材料

肝硬变患者血清胃动素,肽YY,IgG和铁蛋白的变化 被引量：3

2

作者 李陕区 闫小君 张康泰 《第四军医大学学报》 1999年第7期616-618,共3页

目的：探讨肝硬变患者血清胃动素（ Ｍ Ｔ Ｌ），肽 Ｙ Ｙ（ Ｐ Ｙ Ｙ）， Ｉｇ Ｇ 和铁蛋白（ Ｆ Ｒ Ｔ）在肝硬变时的变化及其临床意义． 方法：临床确诊的肝硬变患者３５（男２８，女 ７）例，平均年龄（４２±７）岁，其中乙... 目的：探讨肝硬变患者血清胃动素（ Ｍ Ｔ Ｌ），肽 Ｙ Ｙ（ Ｐ Ｙ Ｙ）， Ｉｇ Ｇ 和铁蛋白（ Ｆ Ｒ Ｔ）在肝硬变时的变化及其临床意义． 方法：临床确诊的肝硬变患者３５（男２８，女 ７）例，平均年龄（４２±７）岁，其中乙型肝炎后（ Ｈ Ｂｓ Ａｇ 阳性）３１ 例，酒精性 １例和原因不明３ 例． 伴消化道出血１９ 例，伴腹水２７ 例，伴肝性脑病９ 例和肝肾综合征４ 例．按肝功能级别（ Ｃｈｉｌｄ 分级）分为 Ａ 级１３ 例， Ｂ级１９ 例和 Ｃ级３ 例． 健康对照３２（男２４，女）８ 例，平均年龄（４１±９）岁． Ｍ Ｔ Ｌ， Ｐ Ｙ Ｙ， Ｉｇ Ｇ 和 Ｆ Ｒ Ｔ用放射免疫法测定． 结果：与对照比较，肝硬变患者血清 Ｍ Ｔ Ｌ （２０７±９８） ｎｇ／ Ｌ ｖｓ （３ １２６±１００） ｎｇ／ Ｌ，（ Ｐ＜ ０．０１）， Ｐ Ｙ Ｙ （１．１±０６） ｐｍ ｏｌ／ Ｌ ｖｓ （１．６±０．８） ｐｍ ｏｌ／ Ｌ，（ Ｐ＜ ０． ０５） 和 Ｉｇ Ｇ（１３１±７０） ｇ／ Ｌ ｖｓ （２３．６±１０．２）ｇ／ Ｌ，（ Ｐ＜ ０．０１）明显升高，而 Ｆ Ｒ Ｔ （１８７±８５） μｇ／ Ｌ ｖｓ （９８±４１） μｇ／ Ｌ，（ Ｐ＜ ０．０１）明显升高，血清 Ｍ Ｔ Ｌ升高与 Ｐ Ｙ Ｙ 升高呈正相关 ? 展开更多

关键词 肝硬变 放射免疫法 胃动素 肽YY 免疫球蛋白G

下载PDF 职称材料

大鼠肠粘膜不同状态下转化生长因子的表达 被引量：2

3

作者 姚文柱 胡家露 +1 位作者 吴开春 崔大祥 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第5期422-423,共2页

目的　动态观察转化生长因子 (TGF)在不同肠粘膜病理状态下的表达 ,探讨 TGF在肠粘膜损伤后修复过程中所起的作用 .方法　以巴西日圆线虫 (N ippostrongylus bras-iliensis,N b)感染大鼠建立肠粘膜损伤修复模型 ,手术取出不同感染阶段... 目的　动态观察转化生长因子 (TGF)在不同肠粘膜病理状态下的表达 ,探讨 TGF在肠粘膜损伤后修复过程中所起的作用 .方法　以巴西日圆线虫 (N ippostrongylus bras-iliensis,N b)感染大鼠建立肠粘膜损伤修复模型 ,手术取出不同感染阶段大鼠小肠肠段 ,标本冰冻保存 ,切片 .应用免疫组织化学染色方法检测 TGF的表达 .结果　在大鼠肠粘膜感染 N b后发生的损伤至修复过程中 ,TGFα,TGFβ1的表达发生了明显的规律性的变化 ,即 TGFα先是表达于肠绒毛隐窝区域的上部 ,接着逐渐向肠绒毛的顶端区域转移 ;而 TGFβ1先是主要表达于肠绒毛的顶端部位及隐窝区域的上部 ,随之顶端部位的表达逐渐减少 ,最后主要定位表达于隐窝区域的上部 .固有膜内 TGFα,TGFβ1也有表达 ,但粘膜损伤前后及修复过程中 ,其表达强度及部位无明显变化 .结论　 TGFα,TGFβ1在粘膜损伤后可能通过在粘膜上皮细胞表达部位的变化 ,促进细胞分化、迁移和增殖 。 展开更多

关键词 转化生长因子 肠粘膜损伤 修复 抗体 表达

下载PDF 职称材料

鼠源抗胃癌抗体轻链可变区基因克隆及其结构分析 被引量：3

4

作者 李陕区 张康泰 闫小君 《第四军医大学学报》 2000年第5期S095-S097,共3页

目的　扩增与人胃癌细胞特异结合的鼠源性抗体轻链可变区基因 ,并对其基因序列进行分析 .方法　用 RT-PCR方法从分泌鼠源抗人胃癌抗体的杂交瘤细胞扩增出抗体轻链可变区基因 ,克隆到 p GEM- T载体 ,测序仪测定其基因序列并对其结构进行... 目的　扩增与人胃癌细胞特异结合的鼠源性抗体轻链可变区基因 ,并对其基因序列进行分析 .方法　用 RT-PCR方法从分泌鼠源抗人胃癌抗体的杂交瘤细胞扩增出抗体轻链可变区基因 ,克隆到 p GEM- T载体 ,测序仪测定其基因序列并对其结构进行分析 .结果　所获得的基因由 35 4bp组成 ,编码 118个氨基酸 ,序列分析证实该基因可变区序列符合小鼠 Ig轻链可变区的氨基酸序列特征 .结论　获得的鼠源抗胃癌抗体轻链可变区基因为κ 家族 。 展开更多

关键词 胃肿瘤 抗体 杂交瘤细胞 克隆

下载PDF 职称材料

热盐水所致大鼠萎缩性胃炎胃黏膜组织细胞p53和ras表达的实验研究 被引量：4

5

作者 徐俊荣 张沥 +5 位作者 张玲霞 崔大祥 贾长河 江梅 张宁霞 曹广周 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期373-374,共2页

关键词 萎缩性胃炎 胃黏膜 P53基因 RAS基因 食物热度 食物咸度

原文传递

PCR法从痰液中快速检测结核分枝杆菌 被引量：3

6

作者 赵锦荣 闫小君 +1 位作者 郭晏海 苏成芝 《第四军医大学学报》 1999年第4期307-308,共2页

目的：建立一种从痰液中检测结核分枝杆菌简便、快速且灵敏的方法．方法：用碱液化、水洗和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００热裂解法从痰液中制备结核分枝杆菌ＤＮＡ，进行ＰＣＲ反应，并将该方法同其它几种方法进行比较．结果：该方法同抗酸性... 目的：建立一种从痰液中检测结核分枝杆菌简便、快速且灵敏的方法．方法：用碱液化、水洗和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００热裂解法从痰液中制备结核分枝杆菌ＤＮＡ，进行ＰＣＲ反应，并将该方法同其它几种方法进行比较．结果：该方法同抗酸性染色镜检法有显著差异，同酚／氯仿法具有相似的灵敏度．结论：用该方法从痰液中检测结核分枝杆菌具有灵敏、简便和快速等特点． 展开更多

关键词 结核杆菌 DNA 聚合酶链反应 结核病 诊断

下载PDF 职称材料

荧光偏振方法快速检测HPV16 E7第29位密码子点突变 被引量：4

7

作者 陈中灿 张菊 +3 位作者 高艳娥 夏琳 白玉杰 阎小君 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2004年第15期1403-1406,共4页

目的 :通过TDI FP方法检测宫颈病变组织中HPV1 6E7基因第 2 9位密码子突变 (A→G)并探讨其与宫颈癌的相关性 ,同时建立一种HPV点突变检测的新方法 .方法 :以 5 3例HPV1 6阳性宫颈组织为研究对象 .首先PCR扩增含待检测位点的靶基因片段 ... 目的 :通过TDI FP方法检测宫颈病变组织中HPV1 6E7基因第 2 9位密码子突变 (A→G)并探讨其与宫颈癌的相关性 ,同时建立一种HPV点突变检测的新方法 .方法 :以 5 3例HPV1 6阳性宫颈组织为研究对象 .首先PCR扩增含待检测位点的靶基因片段 ,然后用TDI FP方法检测荧光素碱基的掺入情况 ,判断所研究位点的基因型 .结果 :宫颈浸润癌组织中HPV1 6E7第 2 9位密码子的突变率为 4 3.4 8%(1 0 / 2 3) ,对照组为 1 0 .0 0 % (2 / 2 0 ) ,病例组为 39.39% (1 3/33) ,组间突变率差异有显著性 (P <0 .0 5 ) .该法与随机抽查标本测序结果一致率为 1 0 0 % .结论 :本研究中HPV1 6病毒发生E7第 2 9位密码子突变的情况与其他地区相比存在差异 ;HPV点突变TDI FP检测方法是一种快速简便。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 突变 宫颈癌 荧光偏振

下载PDF 职称材料

信息化、网络化、高通量实时生物安全检测系统整体解决方案 被引量：3

8

作者 朱文伟 阎小君 《医疗卫生装备》 CAS 2005年第10期33-34,共2页

为了保障国家的生物安全,本文设计了一套信息化、网络化、高通量的生物安全应急与管理系统,系统由3部分组成:终端实验室、基因检测在线以及管理中心。该系统能够及时准确地把各地的生物安全状况上报管理中心,管理中心也可以远程调用各... 为了保障国家的生物安全,本文设计了一套信息化、网络化、高通量的生物安全应急与管理系统,系统由3部分组成:终端实验室、基因检测在线以及管理中心。该系统能够及时准确地把各地的生物安全状况上报管理中心,管理中心也可以远程调用各实验室的数据,实时地对各地的实验室进行质控和监督,各实验室也可利用该系统向管理中心进行远程技术咨询和人员培训。 展开更多

关键词 终端实验室 基因检测 管理中心 实时生物安全检测系统

下载PDF 职称材料

TNFα基因-863位点单核苷酸多态性与宫颈癌以及HPV感染的关系 被引量：3

9

作者 尉春艳 吴静 +2 位作者 张熙 张菊 高艳娥 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期225-228,243,共5页

目的探讨TNFα基因-863位点的单核苷酸多态性与宫颈癌以及HPV感染的关系。方法采用模板介导的染料终止物掺入一荧光偏振检测（TDI-FP）的方法对59例宫颈癌以及22例对照进行TNFα基因一863位点的单核苷酸多态性检测。结果宫颈癌组的TNF... 目的探讨TNFα基因-863位点的单核苷酸多态性与宫颈癌以及HPV感染的关系。方法采用模板介导的染料终止物掺入一荧光偏振检测（TDI-FP）的方法对59例宫颈癌以及22例对照进行TNFα基因一863位点的单核苷酸多态性检测。结果宫颈癌组的TNFα基因-863位点A等位基因频率（39．0％）较对照组（14．6％）明显升高（P〈0．01，OR=2．673，95％CI：1．300～5．497）；AA基因型在宫颈癌组和对照组中分别为15．3％和0，差异显著（P〈0．05）；CA基因型在两组中分别为47．5％和29．2％，差异显著（P〈O．05）；A等位基因频率在HPV阳性者与HPV阴性者之间没有显著性差异（P〉0．05，OR：1．950，95％CI：0．840～4．527），但是在HPV阳性者中具有增高趋势（37．5％），高于HPV阴性者（19．2％）。结论TNFα基因863位点A等位基因以及CA、AA基因型与宫颈癌的危险性升高有关，与HPV感染危险性无关。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子Α 宫颈肿瘤 人乳头瘤病毒 单核苷酸多态性 荧光偏振

下载PDF 职称材料

TNF-α基因-238位点单核苷酸多态性与宫颈癌以及HPV感染的关系 被引量：2

10

作者 尉春艳 彭慧霞 +3 位作者 张熙 孙学军 张菊 高艳娥 《山西医科大学学报》 CAS 2014年第6期468-471,共4页

目的探讨TNF-α基因-238位点的单核苷酸多态性与宫颈癌以及HPV感染的关系。方法采用TDI-FP的方法对58例宫颈癌以及22例对照进行TNF-α基因-238位点的单核苷酸多态性检测。宫颈癌患者进行HPV感染检测。结果TNF-α基因-238位点三种基因型... 目的探讨TNF-α基因-238位点的单核苷酸多态性与宫颈癌以及HPV感染的关系。方法采用TDI-FP的方法对58例宫颈癌以及22例对照进行TNF-α基因-238位点的单核苷酸多态性检测。宫颈癌患者进行HPV感染检测。结果TNF-α基因-238位点三种基因型(GG、GA、AA)及两种等位基因(G、A)的分布在宫颈癌和对照组之间没有统计学差异(P>0.05),TNF-α基因-238位点各等位基因的分布在HPV感染组与HPV感染阴性组之间无显著差异(P>0.05)。结论TNF-α基因-238位点A等位基因以及GA、AA基因型与宫颈癌的危险性升高及HPV感染危险性无明显相关性。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子Α 宫颈癌 人乳头瘤病毒 单核苷酸多态性 荧光偏振

下载PDF 职称材料

抗HBV逆转录酶杂交瘤细胞系的建立及其单克隆抗体鉴定 被引量：1

11

作者 李陕区 张惠中 《第四军医大学学报》 2000年第4期446-448,共3页

目的　建立抗乙型肝炎病毒逆转录酶单克隆抗体杂交瘤并研究杂交瘤细胞及抗体特性 .方法　用经原核表达的乙型肝炎病毒逆转录酶蛋白 (HBV- RT)免疫 BAL B/ c小鼠 ,取其脾细胞与骨髓瘤细胞 Sp2 / 0融合 ,经筛选和克隆化制备杂交瘤细胞系 ... 目的　建立抗乙型肝炎病毒逆转录酶单克隆抗体杂交瘤并研究杂交瘤细胞及抗体特性 .方法　用经原核表达的乙型肝炎病毒逆转录酶蛋白 (HBV- RT)免疫 BAL B/ c小鼠 ,取其脾细胞与骨髓瘤细胞 Sp2 / 0融合 ,经筛选和克隆化制备杂交瘤细胞系 ,然后用 EL ISA法筛选出阳性克隆 .最后用免疫组化 ABC方法研究杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体特性 .结果　 2株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系 ,其杂交瘤细胞经过 10 0 d连续培养 ,单克隆抗体分泌稳定、特异性强、腹水抗体效价免疫组化 ABC法 1∶ 10 0 0 .免疫组化检测显示其相应抗原在肝炎及肝硬变组织中呈高表达 (73% ) ,正常肝组织中未见阳性反应 ;其抗原主要分布于细胞质内 .结论　此2株抗乙型肝炎病毒逆转录酶杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体具有特异亲合性 ,它们的成功制备为研究 展开更多

关键词 HBV 逆转录酶 杂交瘤 单克隆抗体 免疫组织化学 乙型肝炎

下载PDF 职称材料

β-射线治疗阴囊血管角皮瘤6例疗效观察 被引量：2

12

作者 李陕区 闫小君 +3 位作者 郭晏海 候瑜 段杰 韩锋产 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2001年第1期23-24,共2页

关键词 阴囊肿瘤 血管角皮瘤 β-射线 治疗 疗效 放射疗法

下载PDF 职称材料

陕西省不同肝炎患者及献血者中SENV-H DNA的检测 被引量：1

13

作者 陈蕤 穆士杰 +1 位作者 李丁 张献清 《临床输血与检验》 CAS 2006年第4期280-282,共3页

目的探讨SEN病毒H亚型在陕西省不同肝炎患者和献血者中的感染情况。方法采用巢式聚合酶链反应方法对收集的健康献血者和各型肝炎患者的血样(包括甲肝、乙肝、丙肝和非甲-非戊型肝炎患者)共计754份,进行SENV-H亚型DNA检测。结果SENV-H感... 目的探讨SEN病毒H亚型在陕西省不同肝炎患者和献血者中的感染情况。方法采用巢式聚合酶链反应方法对收集的健康献血者和各型肝炎患者的血样(包括甲肝、乙肝、丙肝和非甲-非戊型肝炎患者)共计754份,进行SENV-H亚型DNA检测。结果SENV-H感染率在无偿献血者中为24.4%,在急性甲肝、慢性乙肝、慢性丙肝和非甲-非戊型肝炎患者中分别为32.7%、45.2%、65.0%和43.9%。结论SENV与HCV等经血传播病毒有相似的传播途径。 展开更多

关键词 SENV-H亚型 流行病学 巢式聚合酶链反应

下载PDF 职称材料

胃癌高表达基因gcys-18的部分cDNA克隆 被引量：1

14

作者 崔大祥 闫小君 苏成芝 《第四军医大学学报》 1999年第9期740-742,共3页

目的：分离克隆测序胃癌高表达基因ｇｃｙｓ１８ 的部分ｃ Ｄ Ｎ Ａ． 方法：采用ｍ Ｒ Ｎ Ａ 差异展示技术从胃癌 Ｇ Ｃ７９０１ 与胃粘膜 Ｇ Ｅ Ｓ１ 细胞株中分离出一差异表达基因片段，对其命名，并进行克隆、测序及 Ｇｅｎ ... 目的：分离克隆测序胃癌高表达基因ｇｃｙｓ１８ 的部分ｃ Ｄ Ｎ Ａ． 方法：采用ｍ Ｒ Ｎ Ａ 差异展示技术从胃癌 Ｇ Ｃ７９０１ 与胃粘膜 Ｇ Ｅ Ｓ１ 细胞株中分离出一差异表达基因片段，对其命名，并进行克隆、测序及 Ｇｅｎ Ｂａｎｋ 检索；以此片段作探针与细胞株总 Ｒ Ｎ Ａ 进行打点杂交． 结果：从差示 Ｐ Ｃ Ｒ 电泳凝胶中分离出大小为４１６ ｂｐ 的差异表达片段，命名为ｇｃｙｓ１８； Ｒ Ｎ Ａ 打点杂交证实ｇｃｙｓ１８ 在 Ｇ Ｃ７９０１ 中呈高表达，在 Ｇ Ｅ Ｓ１ 中呈低表达，表明ｇｃｙｓ１８ 是真正差异表达片段；对ｇｃｙｓ１８ 进行了序列分析及 Ｇｅｎ Ｂａｎｋ 检索，示其为新序列后递交给 Ｇｅｎ Ｂａｎｋ，它的 Ｇｅｎ Ｂａｎｋ 接受号为 Ａ Ｆ０７１０５７． 结论：分离并克隆了胃癌高表达基因ｇｃｙｓ１８ 的部分ｃ Ｄ Ｎ Ａ，此基因可能与胃癌发生发展有关． 展开更多

关键词 胃肿瘤 基因表达 克隆分子 序列分析

下载PDF 职称材料

TDI-FP法检测宫颈癌组织中HPV16E7基因647位点突变

15

作者 樊江波 曲群 +3 位作者 吴静 张菊 高艳娥 张格林 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2006年第17期1584-1587,共4页

目的人乳头瘤病毒(HPV)16型E6E7基因的变异可能和HPV的致癌能力直接相关,E7647位点的突变可能增强了致癌能力.本课题通过应用TDI-FP法检测宫颈癌HPV16阳性标本中E7647位点突变情况,可以对确定高危人群、恶性病变的预警筛查、辅助诊断、... 目的人乳头瘤病毒(HPV)16型E6E7基因的变异可能和HPV的致癌能力直接相关,E7647位点的突变可能增强了致癌能力.本课题通过应用TDI-FP法检测宫颈癌HPV16阳性标本中E7647位点突变情况,可以对确定高危人群、恶性病变的预警筛查、辅助诊断、疗效判定及预后提供临床价值,并可以为宫颈癌及其癌前病变的基因治疗、疫苗治疗和预防提供分子水平方面的重要依据.方法TDI-FP技术是一种在聚合酶链反应的基础上具备液相探针杂交和碱基掺入三重特异反应的检测新方法,具有极高的特异性和敏感性.本课题实验在TDI-FP方法的基础上检测宫颈癌患者HPV16E7基因647位点突变情况,以进一步明确这些位点突变与宫颈癌变的相关性.结果应用TDI-FP法检测宫颈癌组织中HPV16型E7647位突变率为32.35%,HPV16型E7647位突变与对照组相比具有统计学差异(χ2=12.437,P<0.001).结论本实验初步提示宫颈癌患者中HPV16型E7647位突变可能是HPV致癌的一个高危因素. 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 基因分型 宫颈肿瘤 荧光偏振 基因突变

下载PDF 职称材料

人类乳头瘤病毒16型早期基因178位(T→G)突变分析

16

作者 樊江波 吴静 +3 位作者 高艳娥 张菊 张格林 曲群 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期773-777,共5页

目的检测宫颈癌患者高危型人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型阳性标本中早期基因(E6基因)178位(T→G)点突变情况。方法应用模板指导的染料终止子掺入-荧光偏振检测技术(TDI-FP)方法检测宫颈癌患者高危HPV16型E6基因178位点... 目的检测宫颈癌患者高危型人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型阳性标本中早期基因(E6基因)178位(T→G)点突变情况。方法应用模板指导的染料终止子掺入-荧光偏振检测技术(TDI-FP)方法检测宫颈癌患者高危HPV16型E6基因178位点突变情况,以进一步明确此基因位点突变与宫颈癌变的相关性。结果应用TDI-FP法检测宫颈癌组织中高危HPV16型E6基因178位突变率为32.5%,与癌前病变及慢性宫颈炎患者相比,差异具有统计学意义(χ2=20.623,P<0.01)。结论宫颈癌患者HPV16型E6基因178位(T→G)突变率较高,可能是HPV致癌的一个高危因素。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 宫颈癌 荧光偏振 基因突变

下载PDF 职称材料

TDI-FP法检测宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16、18型别感染

17

作者 樊江波 吴静 +3 位作者 曲群 高艳娥 张菊 张格林 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期178-180,189,共4页

目的通过模板介导的染料终止子掺入-荧光偏振技术(TDI-FP)检测宫颈癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)16、18感染情况,以初步探讨本地区HPV流行特点。方法基于TDI-FP的基本原理,以HPV16、18 L1克隆重组质粒为模板,用HPV通用引物GP5+/6+PCR扩增,... 目的通过模板介导的染料终止子掺入-荧光偏振技术(TDI-FP)检测宫颈癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)16、18感染情况,以初步探讨本地区HPV流行特点。方法基于TDI-FP的基本原理,以HPV16、18 L1克隆重组质粒为模板,用HPV通用引物GP5+/6+PCR扩增,再通过检测探针杂交后掺入的特异荧光素标记碱基的不同来判断病毒的类型。结果在宫颈癌组织中HPV16和18型阳性率分别为61.8%及32.7%,高危型HPV占宫颈癌HPV的98.1%,宫颈癌组高危型HPV阳性率显著高于癌前病变组和慢性宫颈炎组。结论初步提示宫颈癌患者HPV感染以高危型为主,其中有超过一半的患者以HPV16型感染为主。TDI-FP是一新兴的高通量基因检测技术,快速、可靠、敏感、特异并且操作简便,更适合于大规模临床筛查及在临床上广泛推广应用。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 基因分型 宫颈癌 荧光偏振

下载PDF 职称材料

幽门螺杆菌vac A基因毒性相关片段原核表达载体的构建和表达 被引量：1

18

作者 江红 阎小君 +3 位作者 韩锋产 冯永强 侯瑜 苏成芝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期237-240,共4页

目的构建幽门螺杆菌(Hp)vacA基因片段原核表达载体并进行表达。方法采用PCR技术,扩增HpvacA基因的1个片段B,并克隆入pGEM-3Zf(-)质粒。测序正确后,再克隆入质粒pRSETA中,构建重组表达载体pRSE-TA-B。结果经过转化E.coliBL21DE3(plysS)后... 目的构建幽门螺杆菌(Hp)vacA基因片段原核表达载体并进行表达。方法采用PCR技术,扩增HpvacA基因的1个片段B,并克隆入pGEM-3Zf(-)质粒。测序正确后,再克隆入质粒pRSETA中,构建重组表达载体pRSE-TA-B。结果经过转化E.coliBL21DE3(plysS)后,诱导表达出相对分子质量(Mr)为33000的蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达量占全菌总蛋白质的47.8%,上清中目的蛋白占全菌总蛋白的10.9%。ELISA和Westernblot分析表明,表达蛋白能与兔抗VacA多抗结合。结论成功地构建原核表达载体pRSETA-B,为进一步探讨该片段的生物学活性,以及临床上通过检测患者血清预测Hp的感染提供了实验依据。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 VAC A基因 原核表达载体 活性测定 构建 表达 胃疾病

下载PDF 职称材料

多肽转移电泳时间探讨

19

作者 张延凤 张晓楠 刘智广 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期497-498,共2页

关键词 多肽 转移电泳 时间

下载PDF 职称材料

荧光偏振法检测高危HPV16型E6基因350位(T→G)突变

20

作者 樊江波 吴静 +3 位作者 高艳娥 张菊 张格林 曲群 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第7期1331-1333,共3页

目的:检测宫颈癌人类乳头瘤病毒(HPV)16 E6基因350位(T→G)点突变情况。方法:应用TDI-FP方法检测宫颈癌患者HPV16E6基因350位(T→G)点突变情况。TDI-FP技术是一种在聚合酶链反应的基础上具备液相探针杂交和碱基掺入三重特异反应的检测... 目的:检测宫颈癌人类乳头瘤病毒(HPV)16 E6基因350位(T→G)点突变情况。方法:应用TDI-FP方法检测宫颈癌患者HPV16E6基因350位(T→G)点突变情况。TDI-FP技术是一种在聚合酶链反应的基础上具备液相探针杂交和碱基掺入三重特异反应的检测新方法,具有极高的特异性和敏感性。结果:应用TDI-FP法检测宫颈癌组织中HPV16型E6基因350位(T→G)突变率为6.06%,HPV16 E6基因350位突变与对照组相比无统计学差异(P=0.603,P>0.05)。结论:本地区宫颈癌患者中HPV16型E6 350位(T→G)很少发生突变,有别于欧洲的HPV16型E6 350位(T→G)高突变。 展开更多

关键词 荧光偏振 人乳头瘤病毒 宫颈癌 基因突变

下载PDF 职称材料