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非洲猪瘟病毒实时荧光PCR检测方法的建立 被引量:18
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作者 曾少灵 花群义 +9 位作者 杨俊兴 张彩虹 孙洁 阮周曦 吕建强 曹琛福 秦智锋 陈兵 陈书琨 杨云庆 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1173-1178,共6页
依据非洲猪瘟病毒(ASFV)的vp73基因保守序列,设计了特异性引物与TaqMan探针,扩增片段69bp,建立了ASFV实时荧光PCR检测方法。与OIE推荐用于检测ASFV的实时荧光PCR和普通PCR方法进行比对,结果显示,本文建立的方法与OIE两种检测方法的特异... 依据非洲猪瘟病毒(ASFV)的vp73基因保守序列,设计了特异性引物与TaqMan探针,扩增片段69bp,建立了ASFV实时荧光PCR检测方法。与OIE推荐用于检测ASFV的实时荧光PCR和普通PCR方法进行比对,结果显示,本文建立的方法与OIE两种检测方法的特异性相当,灵敏度与OIE荧光PCR方法相当,但比普通PCR方法高出至少10倍。标准定量曲线显示,本文方法最低检测限可达10 copies/μL病毒DNA(相关系数为0.993046)。重复性试验的批内CV值为0.61%~1.14%,批间CV值为1.37%~3.14%,表明本文方法的重复性和稳定性良好。可见,本文建立的基于vp73基因的ASFV实时荧光PCR检测方法具备快速、准确、灵敏的特点,将为检验检疫部门防御ASFV传入我国提供更多技术支持。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 实时荧光PCR 检测
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桔小实蝇线粒体基因组全序列及其分析 被引量:16
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作者 徐浪 余道坚 +4 位作者 张润杰 李建光 康林 陈志粦 焦懿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期755-761,共7页
桔小实蝇Bactrocera dorsalis线粒体基因组全序列对研究实蝇分子系统进化具有重要意义。本研究通过DNA测序和克隆技术,对桔小实蝇mtDNA全序列进行了测定和分析。结果表明:桔小实蝇线粒体基因组全长15915bp(GenBank序列号:DQ845759)。基... 桔小实蝇Bactrocera dorsalis线粒体基因组全序列对研究实蝇分子系统进化具有重要意义。本研究通过DNA测序和克隆技术,对桔小实蝇mtDNA全序列进行了测定和分析。结果表明:桔小实蝇线粒体基因组全长15915bp(GenBank序列号:DQ845759)。基因组碱基组成为39.3%A,16.2%C,10.2%G,34.3%T,由13个蛋白编码基因、22个tRNA基因、2个rRNA基因以及一个非编码的控制区域(A+T-rich区)组成。7个蛋白编码基因和13个tRNA基因从J链编码,其余6个蛋白编码基因和9个tRNA基因从N链编码。位于J链上的蛋白编码基因具有近似的A、T含量,而位于N链上的蛋白编码基因的A的含量明显高于T的含量。以mtDNACOⅠ基因为例,比较了桔小实蝇与其他14种实蝇的亲缘关系,结果显示其与同亚属(果实蝇亚属Bactrocera)内的其他近缘种相互间的同源性很高。 展开更多
关键词 双翅目 实蝇科 桔小实蝇 线粒体基因组
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锦鲤疱疹病毒病的研究进展 被引量:12
3
作者 刘宗晓 刘荭 江育林 《检验检疫科学》 2006年第4期77-80,共4页
关键词 疱疹病毒病 锦鲤 DNA聚合酶基因 膜蛋白基因 免疫交叉反应 衣壳蛋白基因 DNA病毒 螺旋酶基因
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从进口泰国莲雾上截获重要害虫杰克贝尔氏粉蚧 被引量:10
4
作者 焦懿 余道坚 +3 位作者 徐浪 陈志粦 娄定风 康林 《植物检疫》 北大核心 2011年第4期63-65,共3页
杰克贝尔氏粉蚧(Pseudococcus jackbeardsleyi Gimpel et Miller)在东南亚地区分布较广,寄主植物多达200余种,对寄主植物的为害十分严重。2009年4月,深圳检验检疫局从进口泰国莲雾中首次截获该虫。本文介绍了该虫的形态特征、分布、寄... 杰克贝尔氏粉蚧(Pseudococcus jackbeardsleyi Gimpel et Miller)在东南亚地区分布较广,寄主植物多达200余种,对寄主植物的为害十分严重。2009年4月,深圳检验检疫局从进口泰国莲雾中首次截获该虫。本文介绍了该虫的形态特征、分布、寄主及国内外截获情况。 展开更多
关键词 杰克贝尔氏粉蚧 形态特征 分布 寄主 截获
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发生在美国木材上几种长小蠹的检疫与鉴定 被引量:6
5
作者 陈志粦 《植物检疫》 2006年第5期298-299,F0002,共3页
长小蠹(platypusspp.)属蛀木害虫,从美国进口原木、板材检疫中经常截获有中对长小蠹,最近又新发现柱体长小蠹[platypusflavicornis(Fabricius)]。本文描述了长小蠹的危害及生物学特性。根据其危害症状采取相应检疫方法,并分别对在美国... 长小蠹(platypusspp.)属蛀木害虫,从美国进口原木、板材检疫中经常截获有中对长小蠹,最近又新发现柱体长小蠹[platypusflavicornis(Fabricius)]。本文描述了长小蠹的危害及生物学特性。根据其危害症状采取相应检疫方法,并分别对在美国原木发生的中对长小蠹、柱体长小蠹、组合长小蠹、四齿长小蠹主要形态特征进行描述。 展开更多
关键词 长小蠹 习性 检疫方法 形态特征
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存储虚拟化技术研究与比较分析 被引量:5
6
作者 覃志武 方凯彬 刘北卓 《信息与电脑》 2016年第8期53-54,共2页
个性化存储需求的发展,使得存储虚拟化技术不断发展。笔者在存储虚拟化定义的基础上探讨了存储虚拟化技术,并对存储虚拟化技术进行了比较分析,以期促进存储技术的发展,提供更好的个性化存储服务。
关键词 存储虚拟化技术 通道内虚拟 通道外虚拟
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从进口泰国、印度尼西亚和马来西亚山竹上截获重要害虫李比利氏灰粉蚧 被引量:5
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作者 焦懿 余道坚 +3 位作者 陈志粦 娄定风 徐浪 康林 《植物检疫》 北大核心 2011年第2期59-61,共3页
李比利氏灰粉蚧(Dysmicoccus lepelleyi(Betrem))寄主广泛,是灰粉蚧属为害较为严重的种类之一。本文将该虫的形态、分布、寄主等方面进行较为详细的描述,为各口岸检疫提供参考资料。
关键词 李比利氏灰粉蚧 形态特征 分布 寄主 截获
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鹅源性成分PCR检测方法的建立 被引量:4
8
作者 汪燕玲 宗卉 +1 位作者 阮周曦 张利平 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第24期11432-11434,共3页
[目的]建立一种检测鹅源性成分的PCR方法。[方法]以15种动物的DNA为模板,利用鹅的特异性引物进行PCR反应,PCR产物用1.4%的琼脂糖凝胶电泳检测并测序,检测引物的特异性和敏感性。[结果]通过PCR反应从鹅样品中扩增到了304 bp的目的片段,... [目的]建立一种检测鹅源性成分的PCR方法。[方法]以15种动物的DNA为模板,利用鹅的特异性引物进行PCR反应,PCR产物用1.4%的琼脂糖凝胶电泳检测并测序,检测引物的特异性和敏感性。[结果]通过PCR反应从鹅样品中扩增到了304 bp的目的片段,其他物种火鸡、鸭、鹌鹑、鸵鸟、鸽子、鸡、马、牛、羊、猪、狗、驴、猫、鱼和空白对照则无目的片段,表明该引物的特异性良好。鹅组织PCR产物的核苷酸序列与GenBank中检索到的相应序列基本符合,相似性为98%;PCR检测方法的检测灵敏度为0.01%。[结论]该PCR检测方法特异性强、准确性好、灵敏度高、可重复性好,为明确食品与饲料的成分和来源,预防禽流感的传播提供了有效的分子生物学检测方法。 展开更多
关键词 线粒体DNA 动物源性成分 聚合酶链式反应
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质检辐照处理对竹材颜色的影响研究 被引量:2
9
作者 赵丽霞 张瑞峰 +1 位作者 何静 余道坚 《林业科技通讯》 2015年第12期53-56,共4页
选取1年生的青皮竹(Bambusa textilis),分别在不同的Co^60射线(20、30、40、50、60、80Gy)下进行辐照处理,通过色差计测量各颜色指标后分析辐照处理工艺对青皮竹颜色的影响。结果表明:辐照处理对青皮竹颜色的明度L^*、红绿轴色度... 选取1年生的青皮竹(Bambusa textilis),分别在不同的Co^60射线(20、30、40、50、60、80Gy)下进行辐照处理,通过色差计测量各颜色指标后分析辐照处理工艺对青皮竹颜色的影响。结果表明:辐照处理对青皮竹颜色的明度L^*、红绿轴色度指数a^*和黄蓝轴色度指数b^*均有明显影响,青皮竹随着辐照剂量的增加色差差值逐渐升高,当辐照剂量达到40Gy时,色差差值显著增大,在40~60Gy辐照剂量范围内,色差值增大了5.69%。 展开更多
关键词 青皮竹 颜色 质检辐照处理
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PRRSV云南A06株ORF5和ORF7基因的克隆与序列分析 被引量:2
10
作者 曾少灵 林庆燕 +8 位作者 花群义 张彩虹 阮周曦 杨俊兴 孙洁 秦智锋 曹琛福 陈兵 吕建强 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第3期12-17,共6页
设计2对引物分别扩增PRRSV的ORF5和ORF7基因,对从云南某猪场分离到的毒株A06进行RT-PCR检测,得到2条特异性扩增带,克隆至pMD18-T载体并测序。将A06株的ORF5和ORF7基因及其推断氨基酸序列分别与PRRSV欧洲型代表株LV、美洲型代表株VR2332... 设计2对引物分别扩增PRRSV的ORF5和ORF7基因,对从云南某猪场分离到的毒株A06进行RT-PCR检测,得到2条特异性扩增带,克隆至pMD18-T载体并测序。将A06株的ORF5和ORF7基因及其推断氨基酸序列分别与PRRSV欧洲型代表株LV、美洲型代表株VR2332和7株中国分离的美洲型毒株相应基因进行核苷酸和氨基酸序列比对分析。结果显示,A06株属于美洲型,其ORF5和ORF7基因及推断氨基酸与我国2006年分离的4株HP-PRRSV代表株的相似性高达98%~99%,与欧洲型代表株LV的相似性只有56%~64%。分别构建了以上毒株ORF5和ORF7基因的亲缘关系图谱,反映了A06株ORF5和ORF7基因的进化位置,完成2个基因的遗传变异分析。 展开更多
关键词 PRRSV ORF5基因 ORF7基因 亲缘关系图谱
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国外引进种苗检疫审批现状及思考 被引量:2
11
作者 李一农 李芳荣 《植物检疫》 2006年第2期120-122,共3页
关键词 《中华人民共和国进出境动植物检疫法》 检疫审批 国外引种 种苗 引进 现状 国家质检总局 实施条例 国家林业局 检疫制度
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基于车载PDA的陆路口岸智能移动监管系统
12
作者 包先雨 张兵 +1 位作者 陈新 王洋 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期674-679,732,共7页
文章描述了基于Intel Atom Z530和TI MSP430F2350的车载PDA硬件实现,针对陆路口岸检验检疫工作"通道式管理"的特点,利用多无线基站、双工作频段、跳频通信等技术,提出了一种改进的基于车载PDA的自动报检通关模式,在此基础上... 文章描述了基于Intel Atom Z530和TI MSP430F2350的车载PDA硬件实现,针对陆路口岸检验检疫工作"通道式管理"的特点,利用多无线基站、双工作频段、跳频通信等技术,提出了一种改进的基于车载PDA的自动报检通关模式,在此基础上建立了一种陆路口岸智能移动监管系统。该系统在没有物理闸口的情况下,可以减少口岸报检环节,加快口岸通关效率。经现场测试,该系统运行稳定可靠,车辆采集识别率大于99.50%,响应时间小于1s。 展开更多
关键词 车载PDA 通道式管理 陆路口岸 移动监管系统 检验检疫
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辐照剂量对青皮竹竹材性能影响的研究
13
作者 王英飒 田雅洁 +2 位作者 张瑞峰 何静 余道坚 《林业科技通讯》 2016年第8期64-68,共5页
研究了辐照剂量对青皮竹(Bambusa textilis)竹材性能的影响。采用不同的Co60射线(20、30、40、50、60、80Gy)处理青皮竹,通过力学测定和光谱分析对辐照前后的青皮竹进行研究。结果表明:结合抑虫率实验结果,力学性能试验和光谱分析... 研究了辐照剂量对青皮竹(Bambusa textilis)竹材性能的影响。采用不同的Co60射线(20、30、40、50、60、80Gy)处理青皮竹,通过力学测定和光谱分析对辐照前后的青皮竹进行研究。结果表明:结合抑虫率实验结果,力学性能试验和光谱分析均表明青皮竹竹材发生了降解,50~60Gy降解不明显,80Gy以上降解显著。 展开更多
关键词 青皮竹 辐照剂量 青皮竹性能
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虚拟机技术在Oracle数据库中的探讨与应用研究
14
作者 覃志武 赵建峰 杨超宇 《电脑知识与技术(过刊)》 2016年第5X期3-4,共2页
在社会不断发展进步中,信息技术与时俱进,虚拟机技术逐步成熟。而虚拟技术在Oracle数据库中的应用具有较多的优势,它可以有效提高整体服务水平,还可以提高运行效率、降低成本,还能有效解决传统Oracle数据库运行过程中所存在的问题,因此... 在社会不断发展进步中,信息技术与时俱进,虚拟机技术逐步成熟。而虚拟技术在Oracle数据库中的应用具有较多的优势,它可以有效提高整体服务水平,还可以提高运行效率、降低成本,还能有效解决传统Oracle数据库运行过程中所存在的问题,因此虚拟技术在广泛的推广应用中不断趋于成熟。 展开更多
关键词 虚拟机技术 ORACLE数据库 应用研究
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抗H5亚型AIV血凝素单克隆抗体的制备及亚型鉴定
15
作者 詹爱军 王新卫 +2 位作者 陈枝楠 卢体康 花群义 《中国农学通报》 CSCD 2008年第6期8-11,共4页
制备抗H5亚型AIV血凝素单克隆抗体;依据淋巴细胞杂交瘤技术,用纯化的H5N1亚型AIV和重组噬菌体T4-H5HA免疫Balb/C小鼠,细胞融合后用ELISA方法筛选特异性单克隆抗体;获得6株抗H5亚型AIVHA的特异性单克隆抗体H5-01(1E6)、H5-02(2C2)、H5-03... 制备抗H5亚型AIV血凝素单克隆抗体;依据淋巴细胞杂交瘤技术,用纯化的H5N1亚型AIV和重组噬菌体T4-H5HA免疫Balb/C小鼠,细胞融合后用ELISA方法筛选特异性单克隆抗体;获得6株抗H5亚型AIVHA的特异性单克隆抗体H5-01(1E6)、H5-02(2C2)、H5-03(2A8)、H5-04(2G6)、H5-05(2E9)和H5-06(3F6)。各株单抗亚型测定的结果为:H5-01、H5-02为IgG1,H5-03、H5-04为IgG2a,H5-05、H5-06为IgG2b,轻链的亚型均为kappa链;经特异性和与同型病毒的反应谱检测,6株均是抗H5亚型AIVHA特异性单克隆抗体,为进一步分析H5N1亚型AIV的结构与功能以及建立监测该亚型AIV的试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 H5N1亚型AIV 单克隆抗体 亚型 鉴定
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根据线粒体基因的特异性鉴别检测饲料中的动物源性成分 被引量:23
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作者 杨宝华 宗卉 《饲料研究》 CAS 2002年第5期1-3,共3页
为了防止海绵状脑病疫区和痒病疫区的反刍动物源性饲料进入动物食物链, 继而进入人类消费的食物链,因而,非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定检测。我们运用聚合酶链反应技术(Polymerase Chain Reaction,PCR),以检... 为了防止海绵状脑病疫区和痒病疫区的反刍动物源性饲料进入动物食物链, 继而进入人类消费的食物链,因而,非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定检测。我们运用聚合酶链反应技术(Polymerase Chain Reaction,PCR),以检测不同种动物特异性线粒体基因片段为目标,分别建立了从动物源性饲料中鉴别检测猪、鸡、马成分的方法。该方法具有灵敏度高、快速和特异性强的优点,可作为动物源性饲料中猪、鸡、马源性成份鉴别检测的常规方法之一。 展开更多
关键词 线粒体基因 特异性 饲料 动物源性成分 饲料检测
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用分子生物学方法鉴别检测动物源性饲料中的牛羊源性成分 被引量:20
17
作者 杨宝华 宗卉 +1 位作者 林庆燕 俞火 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2002年第1期3-5,共3页
为了防止海绵状脑病疫区和痒病疫区反刍动物源性饲料进入我国 ,非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定检测。我们采用分子生物学方法从动物源性饲料中鉴别检测牛、羊特异性线粒体DNA的片段 ,并用限制性内切酶SspⅠ对PCR产物... 为了防止海绵状脑病疫区和痒病疫区反刍动物源性饲料进入我国 ,非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定检测。我们采用分子生物学方法从动物源性饲料中鉴别检测牛、羊特异性线粒体DNA的片段 ,并用限制性内切酶SspⅠ对PCR产物进行酶切鉴定及DNA序列测定。该方法的灵敏度可达 0 .12 5 % ,具有灵敏度高、快速和特异性强的优点。 展开更多
关键词 鉴别 检测 牛源性成分 羊源性成分 聚合酶链反应 动物源性饲料 海绵状脑病 绵羊 痒病 检疫
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鸭病毒性肝炎实验室诊断方法的研究 被引量:10
18
作者 秦智锋 李环玲 +1 位作者 贺东生 刘福安 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期310-313,共4页
将鸭病毒性肝炎病毒 (duckhepatitisvirusDHV) (ATCC株 )用鸡胚传一代后 ,测出此病毒的鸡胚半数致死量 (ELD50 )为10 -5.5。通过多次重复试验 ,建立了利用鸡胚中和试验和雏鸭中和试验检测鸭病毒性肝炎 (DVH)的诊断方法。 7株DHV毒株在... 将鸭病毒性肝炎病毒 (duckhepatitisvirusDHV) (ATCC株 )用鸡胚传一代后 ,测出此病毒的鸡胚半数致死量 (ELD50 )为10 -5.5。通过多次重复试验 ,建立了利用鸡胚中和试验和雏鸭中和试验检测鸭病毒性肝炎 (DVH)的诊断方法。 7株DHV毒株在鸡胚中和试验中的结果是 :胚传一代尿囊液死亡率为 2 / 8~ 5 / 8,1∶10血清中和保护率为 8/ 8,1∶10 0 0肝病料死亡率为 3/ 8~8/ 8,1∶10血清中和保护率为 8/ 8,正常对照全部存活。雏鸭中和试验的结果是 :2 4小时内 1∶10肝病料死亡率为 3/ 8~ 8/ 8,1∶5血清中和保护率为 8/ 8。 展开更多
关键词 鸭病毒性肝炎 鸡胚中和试验 雏鸭中和试验
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鱼病毒性神经坏死病病毒(VNNV)不同基因型鉴别方法的建立及在VNN检疫和监测中的应用 被引量:17
19
作者 刘荭 史秀杰 +3 位作者 高隆英 何俊强 江育林 陈焕春 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期695-702,共8页
从GenBank中查找出乙型野田村病毒组中海水鱼类各病毒的序列,并用Sequencher多重序列比较软件将其分到条纹神经坏死病毒(stripedjacknervousnecrosisvirus,SJNNV)组、条纹星鲽神经坏死病毒(barfinfloundernervousnecrosisvirus,BFNNV... 从GenBank中查找出乙型野田村病毒组中海水鱼类各病毒的序列,并用Sequencher多重序列比较软件将其分到条纹神经坏死病毒(stripedjacknervousnecrosisvirus,SJNNV)组、条纹星鲽神经坏死病毒(barfinfloundernervousnecrosisvirus,BFNNV)组、红点石斑鱼神经坏死病毒(redspottedgroupernervousnecrosisvirus,RGNNV)组和虎斑东方神经坏死病毒(tigerpuffernervousnecrosisvirus,TPNNV)组4个基因型的组别中。用DNAsis序列比较软件比较同一基因型各基因序列之间的同源性,均在85%以上;不同基因型之间序列的同源性,均在66%以下。结合Premier引物设计软件和Sequencher序列多重比较软件,设计了4对引物,采用逆转录聚合酶链式反应(RT PCR)来鉴别这4个不同的基因型。对从深圳口岸进境的产地为台湾的海水鱼苗和广东、福建两省养殖的主要海水鱼类进行检疫和监测,结果在进境的海水鱼苗中检出有RGNNV基因型的VNNV,在福建和广东省养殖的石斑鱼成鱼和鱼苗的病鱼体内均检测到RGNNV基因型的VNNV,对上述扩增产物基因序列进行比较,相似性均在96.5%以上,推导出的氨基酸序列与玛拉巴石斑鱼神经坏死病毒(MNNV)序列相似性均为100%。 展开更多
关键词 病毒性神经坏死病病毒 基因型 鉴别
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用基因芯片鉴别诊断四种水泡性疾病 被引量:13
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作者 秦智锋 钟安清 +1 位作者 杨宝华 叶奕优 《中国病毒学》 CSCD 2003年第2期174-177,F003,共5页
为了对临床上症状非常相似的四种水泡性动物疾病进行大批量、快速准确的检测,我们尝试用基因芯片技术来对这四种水泡性疾病进行快速鉴别诊断。用Qiaquick 96 plate Kit对扩增的39个基因目的片段进行纯化,TE调配浓度至0.36礸/礚,于GMS41... 为了对临床上症状非常相似的四种水泡性动物疾病进行大批量、快速准确的检测,我们尝试用基因芯片技术来对这四种水泡性疾病进行快速鉴别诊断。用Qiaquick 96 plate Kit对扩增的39个基因目的片段进行纯化,TE调配浓度至0.36礸/礚,于GMS417点样仪上按预选设计好的布阵方式点样,然后经紫外灯照射进行紫外交联等一系列处理。用Salmon进行非特异性杂交检测芯片点样的质量。大量抽提组织中FMDV和细胞上清液中的SVDV的总RNA,随机引物反转录的同时采用随机荧光标记法,标记FMDV和SVDV。标记好的cDNA超声波随机打断后进行特异性杂交,以最佳光扫描强度进行扫描,Imagene软件扫描结果,对两者信号进行对比,结合各病毒相对应的坐标,可鉴别诊断出四种动物的水泡性疾病病毒。本方法不但快速、灵敏、准确性高,而且可实现对大批量货物的集成化检测,满足我国快速通关的要求。 展开更多
关键词 水泡性疾病 鉴别诊断 基因芯片 口蹄疫病毒 猪水泡病病毒
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