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荷花花瓣着色过程实时荧光定量PCR内参基因的筛选及验证 被引量：19
1
作者 王彦杰 陈叶清 +3 位作者 薛泽云 周华 金奇江 徐迎春 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期408-415,共8页
[目的]选择稳定的内参基因是准确分析实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果的重要前提,本文旨在筛选荷花花瓣着色过程中稳定的内参基因,使目标基因的定量更加准确。[方法]以荷花4种不同花色(红、黄、粉、白)品种、不同花发育期(蕾期、初花期、... [目的]选择稳定的内参基因是准确分析实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果的重要前提,本文旨在筛选荷花花瓣着色过程中稳定的内参基因,使目标基因的定量更加准确。[方法]以荷花4种不同花色(红、黄、粉、白)品种、不同花发育期(蕾期、初花期、盛花期、末花期)的花瓣为试材,利用RT-qPCR技术检测8个常用看家基因(ACT、EF1α、GAPDH、FPGS、TUA、LEU、CUL和TRY)的表达水平,并结合geNorm、NormFinder和BestKeeper软件对其表达稳定性进行评价。为了进一步验证8个候选基因的稳定性,分别以它们作为内参基因,检测目的基因查耳酮合成酶基因(CHS)的表达。[结果]geNorm软件分析表明,不同荷花花色品种及不同花发育期间,EF1α和ACT表达稳定性最好。NormFinder和BestKeeper软件显示在不同花色品种中,EF1a和ACT的表达均较稳定;在不同花发育期间,NormFinder软件分析显示ACT表达最稳定,EF1α稳定性也相对较高,而BestKeeper软件分析显示EF1α表达最稳定,但ACT稳定性较差。同时研究发现,GAPDH和TRY在所有样品中稳定性都较差。不同软件之间结果的差异可能是由算法不同造成。拟定EF1α和ACT为最适的内参基因,进一步利用CHS的表达分析验证了EF1α和ACT的稳定性。[结论]在荷花不同花色品种及不同花发育期间,使用EF1α和ACT 2个表达最稳定的基因组合,即可获得更为精确的基因表达结果。本研究结果对荷花花瓣着色过程中关键基因表达的RT-qPCR分析具有重要的实用价值。 展开更多
关键词 花色 荷花 实时荧光定量PCR 内参基因
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南方红豆杉bHLH基因克隆与序列分析 被引量：10
2
作者 周华 朱祺 +3 位作者 杨艳芳 刘洪伟 余发新 邱德有 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期52-59,共8页
以南方红豆杉为试材,利用RT-PCR方法从南方红豆杉c DNA中克隆了一个b HLH转录因子——Tc MYC,Gen Bank注册号为KC878013。通过生物信息学分析,发现该基因全长1 959 bp,编码一个650个氨基酸残基的亲水蛋白;Tc MYC相对分子量为71.4 k D,... 以南方红豆杉为试材,利用RT-PCR方法从南方红豆杉c DNA中克隆了一个b HLH转录因子——Tc MYC,Gen Bank注册号为KC878013。通过生物信息学分析,发现该基因全长1 959 bp,编码一个650个氨基酸残基的亲水蛋白;Tc MYC相对分子量为71.4 k D,等电点p I为4.87。推测所克隆Tc MYC基因编码的蛋白定位于细胞核中,含有一个螺旋—环—螺旋结构,与东北红豆杉、葡萄和烟草的MYC基因编码的蛋白序列一致性分别为98%、45%和44%,进化树分析表明同科属植物的MYC转录因子归为一类,红豆杉的MYC与其他草本被子植物的MYC转录因子亲缘关系都较远。在茉莉酸甲酯诱导的红豆杉细胞中,Tc MYC基因表达呈现略微下降趋势,推测Tc MYC可能负向调控紫杉醇生物合成,为利用分子手段调控紫杉醇的生物合成提供了理论基础。 展开更多
关键词 红豆杉属 BHLH 基因克隆 序列分析 紫杉醇
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四倍体刺槐扦插不定根发生的酶活性变化 被引量：9
3
作者 王小玲 高柱 +2 位作者 郑健 刘腾云 余发新 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期19-22,89,共5页
以四倍体刺槐当年生硬枝和半木质化嫩枝插条为材料,探讨不定根发生过程中吲哚乙酸氧化酶(IAAO)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性的变化及其与扦插生根之间的关系,揭示四倍体刺槐扦插生根机理。结果表明:IAAO和PPO是影响四倍体刺... 以四倍体刺槐当年生硬枝和半木质化嫩枝插条为材料,探讨不定根发生过程中吲哚乙酸氧化酶(IAAO)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性的变化及其与扦插生根之间的关系,揭示四倍体刺槐扦插生根机理。结果表明:IAAO和PPO是影响四倍体刺槐扦插不定根发生的2种关键酶。IAAO通过调节内源IAA(吲哚乙酸)水平来影响生根;在不定根形成过程中,硬枝插穗IAAO活性高于嫩枝;IBA处理的硬枝插穗IAAO活性高于对照,IBA处理的嫩枝插穗IAAO活性低于对照,证明內源IAA对四倍体刺槐插穗不定根的发生具有双重作用。PPO活性与插穗不定根的发生呈正相关;IBA处理可以显著提高插穗PPO活性,促进生根;不定根表达期,硬枝插穗PPO活性升高,是抑制硬枝插穗不定根发生的主要原因之一。POD活性与插穗不定根发生呈弱相关。 展开更多
关键词 四倍体刺槐 IAAO活性 POD活性 PPO活性
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柳叶马鞭草繁殖技术研究初报 被引量：5
4
作者 陈华玲 彭玉辅 +7 位作者 赵华 彭火辉 管帮富 高柱 彭华 王小玲 黎小萍 谢小群 《江西农业学报》 CAS 2014年第12期54-58,共5页
为丰富柳叶马鞭草繁殖方法,采用赤霉素处理种子、ABT生根粉处理插穗及筛选出组培快繁阶段培养基配方,结果表明:(1)赤霉素能提高柳叶马鞭草种子活力,3种柳叶马鞭草发芽指数、活力指数均高于对照,不同品种间促进效果存在差异;(2)ABT生根... 为丰富柳叶马鞭草繁殖方法,采用赤霉素处理种子、ABT生根粉处理插穗及筛选出组培快繁阶段培养基配方,结果表明:(1)赤霉素能提高柳叶马鞭草种子活力,3种柳叶马鞭草发芽指数、活力指数均高于对照,不同品种间促进效果存在差异;(2)ABT生根粉对柳叶马鞭草扦插成活率影响不显著,但对插穗发根数和平均根长有显著促进作用,其中以500mg/L ABT浓度处理最佳;(3)组培不同阶段采用的营养基配方存在差异,诱导培养基为MS+6-BA 0.6 mg/L,增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,生根培养基为MS+IBA 0.4 mg/L,生根率最高可达93%,增殖系数达4.2。 展开更多
关键词 柳叶马鞭草 播种繁殖 扦插 组培快繁
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基于SketchUp的杂种马褂木年轮形态模拟技术
5
作者 李彦强 刘腾云 +2 位作者 周华 孙小艳 余发新 《江西科学》 2014年第1期32-34,45,共4页
以9年生落叶阔叶用材树种杂种马褂木的胸径处圆盘为研究对象,采用圆盘处理后数码拍照,导入SketchUp软件进行模拟树干生长规律的方法用SketchUp一系列工具构建树木生长模型原件。它可作为构建整个树干生长基础构建,为进一步构建动态生长... 以9年生落叶阔叶用材树种杂种马褂木的胸径处圆盘为研究对象,采用圆盘处理后数码拍照,导入SketchUp软件进行模拟树干生长规律的方法用SketchUp一系列工具构建树木生长模型原件。它可作为构建整个树干生长基础构建,为进一步构建动态生长模型及3D构型打印和人工林林分3D群体模型提供建模依据。 展开更多
关键词 SKETCHUP 年轮 形态 kS拟
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