急性单核细胞白血病的临床特点及预后分析 被引量：5

1

作者 吕国庆 张肖肖 +2 位作者 吴隼 刘宪凯 郁超 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第17期3199-3203,共5页

目的:探讨急性单核细胞白血病(AML-M5)的主要临床特点及预后影响因素。方法:回顾性分析2014年01月至2019年01月我院59例初诊AML-M5患者的临床资料,与癌症基因组图谱(TCGA)数据库22例患者的临床特点进行对比分析,并分析可能影响我院患者... 目的:探讨急性单核细胞白血病(AML-M5)的主要临床特点及预后影响因素。方法:回顾性分析2014年01月至2019年01月我院59例初诊AML-M5患者的临床资料,与癌症基因组图谱(TCGA)数据库22例患者的临床特点进行对比分析,并分析可能影响我院患者预后的重要因素。结果:与TCGA数据库相比,我院M5b亚型较多(78.0%vs 36.4%,P=0.000);中位骨髓原始细胞比例较低(69%vs 83%,P=0.006);我院NPM1突变较少(25.4%vs 54.5%,P=0.013),DNMT3A突变较少(8.5%vs 50%,P=0.000);我院患者与TCGA数据库单纯化疗患者OS差异无统计学意义(P=0.379);单因素分析显示年龄、白细胞计数、初次诱导缓解程度、FLT3-ITD突变、NPM1突变但不伴FLT3-ITD突变及预后危险分层与预后明显相关(P<0.05);多因素分析表明年龄、白细胞计数、初次诱导缓解程度及预后危险分层是影响预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:AML-M5的预后与年龄、白细胞计数、初次诱导缓解程度及预后危险分层相关。 展开更多

关键词 白血病 急性单核细胞白血病 年龄 预后危险分层

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Rho GTP酶激活蛋白9基因在急性髓细胞白血病中的作用机制 被引量：1

2

作者 吕国庆 魏秀丽 吴隼 《河南医学研究》 CAS 2021年第25期4609-4616,共8页

目的研究Rho GTP酶激活蛋白9(ARHGAP9)基因在急性髓细胞白血病(AML)中的作用机制。方法收集2016年1月至2018年12月在新乡医学院第一附属医院初诊的52例AML患者和48例健康者的骨髓液或外周血样本,分离骨髓液或外周血细胞,提取总RNA,用定... 目的研究Rho GTP酶激活蛋白9(ARHGAP9)基因在急性髓细胞白血病(AML)中的作用机制。方法收集2016年1月至2018年12月在新乡医学院第一附属医院初诊的52例AML患者和48例健康者的骨髓液或外周血样本,分离骨髓液或外周血细胞,提取总RNA,用定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测AML患者和健康者样本中ARHGAP9基因的表达水平;用ARHGAP9小干扰RNA转染AML细胞系SKNO-1、Kassumi-1细胞后,采用CCK-8法检测第0、24、48、72 h细胞增殖情况;分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中的AML和其他肿瘤的基因表达数据及临床数据,探讨ARHGAP9基因表达与预后的关系,基因集富集分析挖掘ARHGAP9基因的生物学功能与机制。结果AML患者样本中ARHGAP9基因表达水平较健康者升高(P<0.05),而且其高表达与不良预后相关(P<0.05)。在其他多种肿瘤如多形性胶质母细胞瘤、脑胶质瘤、肾嫌色细胞癌和葡萄膜黑色素瘤中,ARHGAP9基因的表达水平与患者的生存率呈负相关(P<0.05)。在AML患者临床样本中也发现ARHGAP9基因表达水平高于健康对照组(P<0.05)。对TCGA数据库中的AML数据进行分析,结果发现ARHGAP9基因低表达与FAB-M3、FAB-M5相关(P<0.001,P=0.029);高表达与FAB-M1相关(P=0.047)。在细胞遗传学方面,ARHGAP9基因的高表达与正常核型及复杂核型相关(P=0.045,P=0.038)。在预后分层方面,ARHGAP9基因的低表达与良好预后相关,ARHGAP9基因的高表达与中等预后相关。体外ARHGAP9小干扰RNA转染AML细胞系SKNO-1、Kassumi-1细胞后,ARHGAP9基因表达水平下降,细胞增殖受到抑制。基因集富集分析发现ARHGAP9基因与AML患者的细胞与细胞黏附、白细胞增殖、移动、分化等生物学功能呈正相关,与MAPK、VEGF、NOTCH、JAK-STAT信号通路呈正相关。结论ARHGAP9基因是AML患者的不良预后标志,可以作为AML靶向治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 急性髓细胞白血病 ARHGAP9基因 癌症基因组图谱

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甲状腺类器官模型的研究现状及应用前景

3

作者 侯梦琦 马子冬 李世杰 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期1875-1879,共5页

甲状腺疾病是全球性健康问题,传统研究方法可能无法准确还原甲状腺病理生理状态。类器官是源自干细胞的3D模型,能高度还原组织特性与异质性。已有研究成功利用人干细胞或原代甲状腺细胞培育甲状腺类器官,验证其用于模拟甲状腺疾病和药... 甲状腺疾病是全球性健康问题,传统研究方法可能无法准确还原甲状腺病理生理状态。类器官是源自干细胞的3D模型,能高度还原组织特性与异质性。已有研究成功利用人干细胞或原代甲状腺细胞培育甲状腺类器官,验证其用于模拟甲状腺疾病和药物筛选的可行性。类器官模型为研究甲状腺疾病和开发新的诊疗方法提供了较有前景的临床前模型。本文介绍并综述甲状腺类器官技术在疾病研究和治疗中的最新进展。 展开更多

关键词 类器官 甲状腺 精准医疗 干细胞

原文传递

人白介素10荧光定量PCR检测方法的建立及其在糖尿病肾病中的表达研究 被引量：10

4

作者 岳芳芳 倪文娟 +5 位作者 冷小敏 刘云 师晶晶 曹东东 郭明好 马东红 《现代检验医学杂志》 CAS 2019年第4期11-14,共4页

目的建立一种稳定、灵敏的人白介素-10(IL-10)荧光定量PCR的检测方法,比较白介素10在糖尿病肾病组和对照组中的表达差异。方法取糖尿病肾病Ⅳ期患者的外周静脉血淋巴细胞RNA标本,主要从模板浓度、引物筛选两方面进行探索,建立稳定、灵... 目的建立一种稳定、灵敏的人白介素-10(IL-10)荧光定量PCR的检测方法,比较白介素10在糖尿病肾病组和对照组中的表达差异。方法取糖尿病肾病Ⅳ期患者的外周静脉血淋巴细胞RNA标本,主要从模板浓度、引物筛选两方面进行探索,建立稳定、灵敏的实验方法;将建立的实验方法用于比较33例糖尿病肾病患者和35例正常健康组中血液白介素10的表达差异。结果①将475ng的总RNA逆转录成cDNA模板进行稀释,当模板浓度稀释范围在10~3倍以内,扩增引物为F:5’-GTGATGCCCCAAGCTGAGA-3’,R:5’-CACGGCCTTGCTCTTGTTTT-3’时可以获得白介素10荧光定量PCR检测的最佳条件。②与对照组相比,糖尿病肾病组患者外周血白介素10的表达水平明显下调(糖尿病肾病组16.21±1.84 vs对照组14.39±1.14),差异有统计学意义(t=7.049,P<0.01)。结论该研究建立了检测白介素10的稳定的荧光定量PCR方法;应用该检测方法发现,白介素10在糖尿病肾病组中的表达明显下降,为白介素10在糖尿病肾病中的功能研究和临床检测提供参考和借鉴。 展开更多

关键词 白介素10 实时荧光定量PCR 糖尿病肾病

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PD-1抗体增强奥沙利铂体内外抗结肠癌的效果 被引量：3

5

作者 钟根深 孙智洋 +5 位作者 陈亚楠 许芝山 杨如 吴敏娜 石焕 路平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期999-1005,共7页

目的:探讨奥沙利铂(oxaliplatin, OXA)联合PD-1抗体对结肠癌的抗肿瘤作用。方法:选用结肠癌细胞系HCT-116和HT-29,用流式细胞术检测细胞中PD-L1的表达。采用T细胞共培养的方法检测OXA预处理HCT-116细胞联合PD-1抗体作用后细胞因子分泌及... 目的:探讨奥沙利铂(oxaliplatin, OXA)联合PD-1抗体对结肠癌的抗肿瘤作用。方法:选用结肠癌细胞系HCT-116和HT-29,用流式细胞术检测细胞中PD-L1的表达。采用T细胞共培养的方法检测OXA预处理HCT-116细胞联合PD-1抗体作用后细胞因子分泌及CD4/CD8亚型变化。建立BALB/c小鼠的结肠癌细胞CT26移植瘤模型,用OXA联合PD-1抗体治疗,评估其抗肿瘤活性;同时采用CD8抗体清除小鼠CD8^+T细胞,评估CD8^+T细胞在OXA抗肿瘤中的作用。结果:OXA能够显著上调结肠癌细胞表面PD-L1的表达。OXA预处理后的结肠癌HCT-116细胞和T细胞共培养后,与单纯培养的T细胞相比,能降低其培养上清中IL-2、IFN-γ和TNF的水平(均P<0.05)及体系中CD4^+记忆性T细胞和CD8^+T_(EMRA)比率(P<0.05)、增加CD4^+(P>0.05)和CD8^+(P<0.05)初始T细胞比率;联合PD-1抗体后,与OXA预处理的HCT-116和T细胞共培养组相比,T细胞培养上清中IFN-γ和IL-10含量(P<0.05)以及CD8^+T_(CM)和T_(EMRA)比率增加(P>0.05)。体内抑瘤实验表明,OXA联合PD-1抗体可以增强其抗肿瘤活性,抑瘤率显著高于单用OXA组和αPD-1组(58.2%vs 25.6%、29.1%,均P<0.05);清除CD8^+T细胞后,OXA的抗肿瘤活性由68.4%下降到46.2%(P<0.05)。结论:OXA联合PD-1抗体具有联合增效的作用,同时CD8^+T细胞在OXA的抗肿瘤活性中具有重要作用。 展开更多

关键词 奥沙利铂 PD-1抗体 结肠癌 CD8^+T细胞

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过表达IL-18抑制人结直肠癌细胞HCT-116的增殖 被引量：4

6

作者 陈亚楠 杨如 +3 位作者 许芝山 吴敏娜 路平 钟根深 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期142-147,共6页

目的:研究过表达IL-18基因对人结直肠癌(colorectal cancer,CRC)HCT-116细胞体内外增殖的影响及其可能的机制。方法:构建含人IL-18基因片段的载体,采用慢病毒转染法获得稳定过表达人IL-18的CRC HCT-116细胞株HCT-116/IL-18,CCK-8法检测H... 目的:研究过表达IL-18基因对人结直肠癌(colorectal cancer,CRC)HCT-116细胞体内外增殖的影响及其可能的机制。方法:构建含人IL-18基因片段的载体,采用慢病毒转染法获得稳定过表达人IL-18的CRC HCT-116细胞株HCT-116/IL-18,CCK-8法检测HCT-116/IL-18细胞与野生型HCT-116细胞的增殖,Western blotting检测两组细胞内IL-18、Cyclin D1、增殖细胞核抗原(PCNA)、DNA损伤修复酶(PARP)蛋白的表达。将HCT-116、HCT-116/IL-18细胞分别接种于裸鼠左右两侧腋下,观察成瘤性及移植瘤的生长情况,免疫组化法检测移植瘤组织中IL-18及PCNA的表达。结果:IL-18基因在HCT-116细胞内过表达,可延缓HCT-116的增殖(P<0.05或P<0.01);与HCT-116细胞相比,HCT-116/IL-18细胞内PARP表达明显增强,PCNA、Cyclin D1表达减弱(P<0.01)。HCT-116/IL-18细胞系在裸鼠体内成瘤率明显降低,成瘤率为43%,与对照组比较其移植瘤成瘤时间晚、生长慢、肿块小,且HCT-116/IL-18异种移植瘤PCNA蛋白表达下调(P<0.01)。结论:过表达IL-18基因对HCT-116细胞生长增殖具有抑制作用,其机制可能与IL-18调控细胞周期和促进DNA损伤有关。 展开更多

关键词 结直肠癌 白介素-18 细胞增殖 移植瘤

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中老年颅内动脉粥样硬化性狭窄患者发生颅内动脉瘤的临床特点及其危险因素

7

作者 时志超 周文科 +2 位作者 张敏 李文超 蒲亚陆 《实用心脑肺血管病杂志》 2024年第12期70-74,79,共6页

目的探讨中老年颅内动脉粥样硬化性狭窄(ICAS)患者发生颅内动脉瘤(IA)的临床特点及其危险因素。方法回顾性收集2020—2021年新乡医学院第一附属医院神经外科收治的中老年ICAS患者161例为研究对象。收集患者的临床资料及影像学资料。采... 目的探讨中老年颅内动脉粥样硬化性狭窄(ICAS)患者发生颅内动脉瘤(IA)的临床特点及其危险因素。方法回顾性收集2020—2021年新乡医学院第一附属医院神经外科收治的中老年ICAS患者161例为研究对象。收集患者的临床资料及影像学资料。采用多因素Logistic回归分析探讨中老年ICAS患者发生IA的影响因素。结果161例中老年ICAS患者中发生IA 91例(56.5%),其中9例为多发IA,共观察到101个IA;IA位置:颈内动脉颅内段(55个,54.4%)、大脑中动脉(20个,19.8%)、大脑前动脉(15个,14.9%)、椎基底动脉(9个,8.9%)、大脑后动脉(2个,2.0%);颅内动脉粥样硬化斑块与IA的位置关系:斑块位于IA近心端55例(60.4%),斑块位于IA瘤壁上3例(3.2%),斑块位于IA远心端14例(15.3%),斑块在IA近、远心端均有分布19例(20.9%)。根据是否发生IA将患者分为IA组(n=91)和非IA组(n=70)。两组女性占比、有吸烟史者占比、有高血压史者占比、有高同型半胱氨酸血症史者占比、颅内动脉狭窄程度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,女性〔OR=1.922,95%CI(1.022~3.612)〕、有吸烟史〔OR=2.261,95%CI(1.055~4.844)〕、有高血压史〔OR=1.980,95%CI(1.023~3.832)〕、有高同型半胱氨酸血症史〔OR=2.098,95%CI(1.048~4.198)〕、中度狭窄及重度狭窄〔OR=2.851,95%CI(1.493~5.444)〕为中老年ICAS患者发生IA的独立危险因素(P<0.05)。结论中老年ICAS患者IA发生率较高,以颈内动脉颅内段IA及斑块位于IA近心端为主。女性、有吸烟史、有高血压史、有高同型半胱氨酸血症史、中度狭窄及重度狭窄为中老年ICAS患者发生IA的独立危险因素。 展开更多

关键词 颅动脉狭窄 颅内动脉瘤 危险因素

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大鼠颈上神经节中Ⅰ组代谢型谷氨酸受体表达及慢性间歇性低氧对其的影响 被引量：1

8

作者 魏茜茜 李超红 +2 位作者 赵晨露 唐家萍 刘玉珍 《解剖学报》 CAS CSCD 2024年第1期3-9,共7页

目的观察Ⅰ组代谢型谷氨酸受体(mGluR1/5)在大鼠颈上神经节(SCG)组织的表达、定位,及慢性间歇性低氧(CIH)对mGluR1/5蛋白水平的影响。方法12只雄性SD大鼠随机分为对照组(Ctrl)和CIH组(CIH),每组6只,模型制作6周。Western blotting检测CI... 目的观察Ⅰ组代谢型谷氨酸受体(mGluR1/5)在大鼠颈上神经节(SCG)组织的表达、定位,及慢性间歇性低氧(CIH)对mGluR1/5蛋白水平的影响。方法12只雄性SD大鼠随机分为对照组(Ctrl)和CIH组(CIH),每组6只,模型制作6周。Western blotting检测CIH对mGluR1/5蛋白水平的影响,免疫组织化学法和免疫荧光共定位染色检测大鼠SCG中mGluR1/5的表达及分布。结果mGluR1/5表达于大鼠SCG,mGluR1分布于神经元和小强荧光(SIF)细胞,而在卫星胶质细胞(SGCs)、神经纤维和血管不表达;mGluR5主要分布于神经纤维,少量分布于神经元,而在SIF细胞、SGCs及血管不表达;CIH上调mGluR1/5的蛋白水平(P<0.01)。结论mGluR1和mGluR5均表达于大鼠SCG,但其表达部位有所不同,两者蛋白水平的升高可能参与了CIH诱导的血压升高。 展开更多

关键词 Ⅰ组代谢型谷氨酸受体 颈上神经节 慢性间歇性低氧 高血压 免疫印迹法 大鼠

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甲泼尼龙对行新辅助化疗联合免疫治疗局部晚期食管癌患者术后肺部感染的预防效果

9

作者 谷城威 齐博 +3 位作者 唐家萍 霍书华 刘玉珍 赵宝生 《新乡医学院学报》 CAS 2024年第8期744-749,共6页

目的探讨甲泼尼龙对行辅助化疗联合免疫治疗的局部晚期食管癌患者术后肺部感染的预防效果。方法选择2022年1月至2023年12月新乡医学院第一附属医院收治的89例局部晚期食管癌患者为研究对象,所有患者行胸腹腔镜联合食管癌根治术。采用随... 目的探讨甲泼尼龙对行辅助化疗联合免疫治疗的局部晚期食管癌患者术后肺部感染的预防效果。方法选择2022年1月至2023年12月新乡医学院第一附属医院收治的89例局部晚期食管癌患者为研究对象,所有患者行胸腹腔镜联合食管癌根治术。采用随机数字表法将患者分为观察组(n=45)和对照组(n=44),观察组有1例术中中转开胸、2例胸腔广泛粘连、1例术前合并上呼吸道感染被排除,对照组有1例胸腔广泛粘连、1例术前合并上呼吸道感染被排除,本研究共纳入83例研究对象,观察组和对照组分别为41例和42例。术前2组患者均给予白蛋白结合型紫杉醇+奈达铂联合卡瑞利珠单抗新辅助治疗方案2周期。术后对照组患者接受抗感染常规治疗,观察组患者于术后第1天至第3天,每日静脉滴注甲泼尼龙1 mg·kg^(-1)。比较2组患者术后炎症指标、术后肺部感染发生率、吻合口瘘发生率、术后住院时间、住院总花费情况。结果术前,2组患者白细胞计数、中性粒细胞比例、降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和白细胞介素-6(IL-6)水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后1、4 d,观察组患者白细胞计数、中性粒细胞比例、PCT、hs-CRP和IL-6水平显著高于术前(P<0.05),术后4 d患者白细胞计数、中性粒细胞比例、PCT、hs-CRP和IL-6水平显著低于术后1 d(P<0.05)。术后1、4 d,对照组患者白细胞计数、中性粒细胞比例、PCT、hs-CRP和IL-6水平显著高于术前(P<0.05),术后4 d白细胞计数、中性粒细胞比例和hs-CRP水平显著低于术后1 d(P<0.05);术后4 d与术后1 d患者PCT和IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后1 d,观察组与对照组患者白细胞计数、中性粒细胞比例、PCT、hs-CRP和IL-6水平比较差异无统计学意义(P>0.05);术后4 d,观察组患者白细胞、中性粒细胞比例、PCT、hs-CRP和IL-6水平显著低于对照组(P<0.05)。对照组与观察组患� 展开更多

关键词 甲泼尼龙 食管癌 新辅助化疗 肺部感染 炎症因子 吻合口瘘

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基于SEER数据库预测食管癌患者生存

10

作者 钱河 赵宝生 +3 位作者 齐博 史文龙 刘振宇 刘玉珍 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第10期2351-2355,共5页

目的构建预测食管癌患者生存的Nomogram模型。方法下载1973~2015年美国国立癌症研究所的监测、流行病学和结果(SEER)数据库食管癌患者临床病理信息,按7∶3分为建模组与验证组,应用相关系数图评估多个变量间共线性情况,应用Lasso回归筛... 目的构建预测食管癌患者生存的Nomogram模型。方法下载1973~2015年美国国立癌症研究所的监测、流行病学和结果(SEER)数据库食管癌患者临床病理信息,按7∶3分为建模组与验证组,应用相关系数图评估多个变量间共线性情况,应用Lasso回归筛选有预测价值的变量,应用曲线拟合明确预测生存时间区间,据此,构建Nomogram预测模型,应用受试者工作特征(ROC)曲线、校准曲线评估模型可靠性,应用决策曲线分析(DCA)评估模型的临床应用价值。结果相关系数图显示多个变量间存在共线性情况,Lasso回归确定有预测价值的变量为Grade分级、T分期、N分期、M分期、手术,其中手术因素影响权重最大;ROC曲线提示模型具有较好区分度,校准曲线显示预测模型与理想模型拟合良好,DCA显示出临床净获益。结论基于Grade分级、T分期、N分期、M分期、手术因素构建的Nomogram模型具有可靠的预测性能及临床实用价值,对临床上实施个体化预测生存时间及制定治疗、护理方案具有重要参考意义。 展开更多

关键词 食管癌 预测 NOMOGRAM 美国国立癌症研究所的监测、流行病学和结果(SEER)

原文传递

miRNA-552-5p对结肠癌细胞增殖和转移活性的影响

11

作者 闫晨明 孔路科 赵金金 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2024年第12期114-118,共5页

对miR-552-5p在结肠癌细胞增殖与迁移中的作用及相关信号通路机制进行探究。方法 利用“edgeR”分析包对TCGA数据里结肠癌miRNA表达数据集展开分析,以此得到结肠癌组织中存在差异表达的miRNA。在UALCAN数据库中对目标miRNA的表达水平进... 对miR-552-5p在结肠癌细胞增殖与迁移中的作用及相关信号通路机制进行探究。方法 利用“edgeR”分析包对TCGA数据里结肠癌miRNA表达数据集展开分析,以此得到结肠癌组织中存在差异表达的miRNA。在UALCAN数据库中对目标miRNA的表达水平进行验证。此外,通过qPCR进一步检测miR-552-5p在人类正常结肠组织和结肠癌组织中的表达情况。结果 在针对结肠癌的研究中,我们发现存在52个差异表达的miRNA,其中癌组织中上调的有48个,下调的有4个。尤其需要注意的是,miR-552-5p在结肠癌组织中的表达明显升高,而且和正常组织相比,相较于NCM460细胞,HT29细胞中miR-552-5p的表达水平显著提高。结果 表明,在HT29细胞中,miR-552-5p的过度表达可显著提升细胞的增殖、迁移和侵袭能力,而对miR-552-5p加以抑制时,这些能力则会下降。进一步开展的GO和KEGG分析结果显示,miR-552-5p或许是通过对转录和蛋白结合过程的调节,作用于mTOR和FoxO信号通路中的关键分子,进而参与到结肠癌的发生与发展进程中。结论 miR-552-5p的高表达会促使结肠癌细胞的增殖能力和转移能力增强,这一特点使miR-552-5p有希望成为结肠癌治疗中潜在的新靶点,为结肠癌的治疗带来新的方向。 展开更多

关键词 结肠癌 微小RNA miR-552-5p

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敲低乙酰辅酶A羧化酶1对食管鳞状细胞癌KYSE450细胞迁移的影响及机制

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作者 刘富磊 刘丹辉 +2 位作者 唐家萍 刘玉珍 赵宝生 《新乡医学院学报》 CAS 2024年第5期407-411,共5页

目的探讨敲低乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)对食管鳞状细胞癌KYSE450细胞迁移能力的影响及机制。方法将对数生长期食管鳞状细胞癌KYSE450细胞随机分为shNC组、shACC1组、shNC+AEB071组及shACC1+AEB071组,shNC组KYSE450细胞转染空白质粒载体,sh... 目的探讨敲低乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)对食管鳞状细胞癌KYSE450细胞迁移能力的影响及机制。方法将对数生长期食管鳞状细胞癌KYSE450细胞随机分为shNC组、shACC1组、shNC+AEB071组及shACC1+AEB071组,shNC组KYSE450细胞转染空白质粒载体,shACC1组KYSE450细胞转染慢病毒质粒载体,shNC+AEB071组KYSE450细胞转染空白质粒载体后加入5μL浓度为2 mmoL·L^(-1)的蛋白激酶C抑制剂AEB071(终浓度为5μmoL·L^(-1)),shACC1+AEB071组KYSE450细胞转染慢病毒质粒载体后加入5μL浓度为2 mmoL·L^(-1)的蛋白激酶C抑制剂AEB071(终浓度为5μmoL·L^(-1))。Transwell法检测各组KYSE450细胞迁移能力;显微镜下观察各组KYSE450细胞形态学变化;Western blot检测4组KYSE450细胞中乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、组蛋白H3(H3)、乙酰化的组蛋白H3第9赖氨酸(H3K9Ac)及上皮-间质转化(EMT)标志物β-连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)以及锌指转录因子(Snail)等的表达。结果shACC1组KYSE450细胞迁移数显著高于shNC组(P<0.05);shNC+AEB071组与shNC组KYSE450细胞迁移数比较差异无统计学意义(P>0.05);shACC1+AEB071组KYSE450细胞迁移数显著低于shACC1组(P<0.05)。shNC组KYSE450细胞呈椭圆形上皮样细胞形态,shACC1组KYSE450细胞呈类似于梭形的间质样细胞形态,shNC+AEB071组和shACC1+AEB071组KYSE450细胞呈椭圆形上皮样细胞形态。shACC1组KYSE450细胞中ACC1相对表达量显著低于shNC组(P<0.05),β-catenin、Vimentin、Snail的相对表达量及H3K9Ac/H3比值显著高于shNC组(P<0.05);shNC+AEB071组与shNC组KYSE450细胞中ACC1、β-catenin、Vimentin、Snail相对表达量及H3K9Ac/H3比值比较差异无统计学意义(P>0.05);shACC1+AEB071组KYSE450细胞中β-catenin、Vimentin、Snail的相对表达量及H3K9Ac/H3比值显著低于shACC1组(P<0.05);shACC1+AEB071组与shACC1组KYSE450细胞中ACC1相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论敲低ACC1可促进食管鳞状细胞癌KYSE450细胞的迁移,从而 展开更多

关键词 乙酰辅酶A羧化酶1 蛋白激酶C 上皮-间质转化 细胞迁移

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低氧通过上调乙酰辅酶A羧化酶1促进肺腺癌A549细胞迁移 被引量：3

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作者 金家豪 赵宝生 +1 位作者 刘丹辉 刘玉珍 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期258-263,共6页

目的探讨低氧通过乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)促进人肺腺癌A549细胞迁移的机制。方法低氧(5%O2)处理肺腺癌A549细胞,应用Transwell迁移实验检测细胞迁移能力,Western blotting检测ACC1表达及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达水平。结果与常... 目的探讨低氧通过乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)促进人肺腺癌A549细胞迁移的机制。方法低氧(5%O2)处理肺腺癌A549细胞,应用Transwell迁移实验检测细胞迁移能力,Western blotting检测ACC1表达及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达水平。结果与常氧(对照组)相比,低氧处理促进了A549细胞的迁移(P<0.01),低氧处理后ACC1表达上调(P<0.01),同时波形蛋白(vimentin)表达增加(P<0.05),E-钙黏蛋白(Ecadherin)表达下降(P<0.01);敲除ACC1后与对照组相比,A549细胞的迁移能力减弱(P<0.05),vimentin表达下降(P<0.05),E-cadherin表达增加(P<0.01);敲除ACC1后A549细胞在常氧和5%O2条件下迁移数目及vimentin、E-cadherin表达变化无统计学意义(P>0.05);补充亚油酸(LA)恢复低氧对A549细胞的促迁移作用(P<0.05)。结论低氧通过上调ACC1的表达促进肺腺癌A549细胞迁移及EMT转化。 展开更多

关键词 低氧 肺腺癌 迁移 乙酰辅酶A羧化酶1 免疫印迹法

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乙酰辅酶A羧化酶1对胶质瘤细胞系U87细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：4

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作者 王阳 赵宝生 +1 位作者 李超红 刘玉珍 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期317-322,共6页

目的探讨乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)对人胶质瘤细胞系U87细胞增殖、迁移及侵袭的作用。方法Western blotting检测人胶质瘤细胞系U87、U251及U373中ACC1的表达;构建ACC1过表达质粒载体,将过表达ACC1质粒载体瞬时转染至U87细胞中;Western blo... 目的探讨乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)对人胶质瘤细胞系U87细胞增殖、迁移及侵袭的作用。方法Western blotting检测人胶质瘤细胞系U87、U251及U373中ACC1的表达;构建ACC1过表达质粒载体,将过表达ACC1质粒载体瞬时转染至U87细胞中;Western blotting检测转染后U87细胞中ACC1表达情况;MTT实验检测过表达ACC1对U87细胞增殖的影响;Transwell迁移和侵袭实验分别检测过表达ACC1对U87细胞迁移和侵袭的影响;划痕实验检测过表达ACC1对U87细胞划痕愈合能力的影响;Western blotting检测相关蛋白表达变化。结果与人胶质瘤细胞系U251和U373相比,U87细胞中ACC1表达较低;ACC1过表达抑制U87细胞增殖(P<0.01);ACC1过表达抑制U87细胞迁移、侵袭和划痕愈合能力(P<0.01);ACC1过表达迁移和侵袭相关蛋白波形蛋白(vimentin)、纤维连接蛋白(fibronectin)和尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)表达下调(P<0.01),凋亡抑制蛋白Bcl-2和细胞周期蛋白(cyclin)B、cyclin D表达下调(P<0.01),p-STAT3蛋白表达下调(P<0.01),细胞周期蛋白P21表达上调(P<0.01)。结论过表达ACC1可能通过抑制STAT3活性,抑制人胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 乙酰辅酶A羧化酶1 U87细胞 增殖 迁移 侵袭 免疫印迹法 人

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硝苯地平诱发儿童肝损伤的分子机制 被引量：4

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作者 王新启 贺轶博 +1 位作者 钱致远 赵国安 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期465-469,共5页

目的建立硝苯地平肝损伤的细胞分子模型，研究硝苯地平诱导儿童肝细胞损伤的分子机制。方法采用肝癌细胞系HepG2建立硝苯地平肝细胞损伤细胞模型，确定硝苯地平处理细胞的最佳浓度及时间。应用Western blot及实时定量PCR（RT－PCR）方... 目的建立硝苯地平肝损伤的细胞分子模型，研究硝苯地平诱导儿童肝细胞损伤的分子机制。方法采用肝癌细胞系HepG2建立硝苯地平肝细胞损伤细胞模型，确定硝苯地平处理细胞的最佳浓度及时间。应用Western blot及实时定量PCR（RT－PCR）方法检测细胞特异性肝功能蛋白水平[丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、γ－谷氨酰转肽酶（γ－GT）和碱性磷酸酶（ALP）]及其mRNA变化，利用流式细胞学技术及细胞克隆形成实验确定硝苯地平对细胞周期及其生长增殖的影响。结果1.硝苯地平体外致肝细胞损伤的最佳浓度为20 mg/L，最佳时间为21 d。2.Western blot结果：硝苯地平组细胞内ALT水平低于对照组，而硝苯地平处理组培养基内ALT、AST、γ－GT及ALP蛋白水平（3.55±0.05、4.91±0.06、3.51±0.05、3.08±0.08）均高于对照组（0.96±0.02、1.03±0.02、1.00±0.05、0.90±0.13），差异均有统计学意义（t＝－85.695、－117.582、－47.371、－33.260，均P〈0.05）。3.RT－PCR结果：硝苯地平组细胞内ALT、γ－GT及ALP mRNA水平（0.26±0.02、0.05±0.04、0.05±0.02）均低于对照组（1.13±0.21、0.94±0.10、1.03±0.06），差异均有统计学意义（t＝7.233、127.436、25.687，均P〈0.05）；而硝苯地平组培养基内mRNA水平（5.95±0.05、3.13±0.10、3.32±0.08）均高于对照组（1.01±0.08、1.00±0.05、1.00±0.05），差异均有统计学意义（t＝－92.339、－31.250、－43.007，均P〈0.05）。4.细胞流式检测结果：硝苯地平组G0/G1期细胞比例[（84.09±0.43）%]高于对照组[（30.93±0.32）%]，差异有统计学意义（t＝173.084，P＝0.000）。5.硝苯地平组细胞克隆形成率和细胞增殖速率[（38.56±1.51）%、（25.00±1.71）%]均低于对照组[（97.10±1.17） %、（56.37±2.06）%]，差异均有统计学意义（t＝92.088、20.285，均P＝0.000）。结论硝苯地平可能通过调节细胞周期相� 展开更多

关键词 硝苯地平 HEPG2 肝功能 细胞增殖

原文传递

LINC01600在结直肠癌临床诊断中的应用价值

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作者 李秀庚 王高翔 蒲亚陆 《中华实验外科杂志》 CAS 2024年第2期344-347,共4页

目的分析长链非编码RNA LINC01600在结直肠癌组织中的表达以及在临床结直肠癌诊断过程中的价值。方法选取2020年1月至2023年12月新乡医学院第一附属医院收治的37例结直肠癌患者的临床标本作为研究标本, 选择对应的癌旁组织作为对照样本... 目的分析长链非编码RNA LINC01600在结直肠癌组织中的表达以及在临床结直肠癌诊断过程中的价值。方法选取2020年1月至2023年12月新乡医学院第一附属医院收治的37例结直肠癌患者的临床标本作为研究标本, 选择对应的癌旁组织作为对照样本。提取癌旁组织和结直肠癌组织的总RNA, 采用转录组学技术分析癌组织和癌旁组织差异表达的长链非编码RNA。选取差异最为显著的长链非编码RNA LINC01600作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应技术检测结直肠癌组织和癌旁组织中LINC01600的表达水平。制作受试者工作特征曲线分析LINC01600对结直肠癌的临床诊断效能。采用单因素方差分析不同临床分期, 不同分化程度患者LINC01600表达水平。并分析LINC01600和患者预后的关系。结果结直肠癌和癌旁组织共检出39 123个长链非编码RNA, 其中包括2 018个新的长链非编码RNA。差异分析显示, 其中有1 626个差异表达的长链非编码RNA, 其中1 019个上调基因, 607个下调基因。长链非编码RNA主要富集于核糖体通路、柠檬酸循环通路和RNA剪接相关通路。本研究选取差异最为显著的上调长链非编码RNA LINC01600进行研究。癌旁组织长链非编码RNA LINC01600表达水平(0.85±0.10)明显低于结直肠癌组织(1.99±0.31), 差异有统计学意义(t=21.390, P<0.05), 中高分化患者肿瘤组织中长链非编码RNA LINC01600表达水平(1.70±0.11)显著低于低分化患者(2.19±0.24), 差异有统计学意义(t=7.510, P<0.05)。淋巴结转移患者结直肠癌组织长链非编码RNA LINC01600表达水平(2.24±0.23)显著高于结直肠癌组织(1.80±0.20), 差异有统计学意义(t=6.229, P<0.05)。Ⅲ期患者结直肠癌组织长链非编码RNA LINC01600表达水平(2.19±0.32)显著高于结直肠癌组织(1.92±0.27), 差异有统计学意义(t=2.796, P<0.05)。LINC01600高表达组结直肠癌患者中位生存时间(14个月)明显低于LINC0160 展开更多

关键词 长链非编码RNA 结直肠癌

原文传递

组蛋白去甲基化酶KDM2A在支气管哮喘大鼠气道炎症和气道重塑中的作用 被引量：3

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作者 王志霞 罗湘 +4 位作者 王利江 刘燕 郭春 杨洋 张志强 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第4期610-615,共6页

目的研究组蛋白去甲基化酶—赖氨酸特异性的去甲基化酶2A(KDM2A)在支气管哮喘大鼠气道炎症及气道重塑中的作用。方法通过腹腔注射鸡卵清蛋白(OVA)致敏雾化激发哮喘大鼠模型。将18只6~8周龄SPF级SD雌性大鼠随机分为3组:对照组、哮喘4周... 目的研究组蛋白去甲基化酶—赖氨酸特异性的去甲基化酶2A(KDM2A)在支气管哮喘大鼠气道炎症及气道重塑中的作用。方法通过腹腔注射鸡卵清蛋白(OVA)致敏雾化激发哮喘大鼠模型。将18只6~8周龄SPF级SD雌性大鼠随机分为3组:对照组、哮喘4周组、哮喘8周组。哮喘模型成功后,通过HE染色观察肺组织气管及血管周围炎性细胞浸润;PAS染色观察杯状细胞增生及黏液分泌;Masson染色观察气道壁纤维化;荧光免疫组织化学法观察气道平滑肌增殖情况;Western blot法检测KDM2A蛋白表达水平。结果哮喘4周组、哮喘8周组大鼠炎症评分、炎症细胞计数均高于对照组(P<0.01)。与对照组相比,哮喘组气道上皮中杯状细胞增生和黏液分泌、肺组织中胶原纤维沉积及气道平滑肌细胞增生均增加(P<0.01),随着OVA致敏时间延长,哮喘8周组较哮喘4周组气道炎症及气道重塑改变更严重。Western blot结果显示,哮喘4周组、哮喘8周组大鼠肺组织KDM2A表达高于对照组,哮喘8周组KDM2A表达亦高于哮喘4周组,差异均有统计学意义(P<0.01);各组大鼠肺组织KDM2A蛋白表达与气道炎症评分、炎症细胞总数、杯状细胞黏液分泌评分、肺组织纤维化比值及气道平滑肌增生面积呈正相关(P<0.01)。结论KDM2A可能在支气管哮喘气道炎症及气道重塑发病中起重要作用。 展开更多

关键词 支气管哮喘 KDM2A 气道炎症 气道重塑

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CD137/CD137L在食管癌中表达与预后的相关性分析 被引量：3

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作者 井贺楠 李静雅 +4 位作者 许芝山 杨如 路平 赵宝生 钟根深 《中国医药导报》 CAS 2017年第2期4-7,24,F0004,共6页

目的研究食管癌中CD137/CD137L的表达情况,并分析两者在食管癌中表达的意义及其与预后的关系。方法以购自上海芯超生物科技有限公司的食管癌组织芯片为研究对象,采用免疫组织化学方法检测组织芯片中87例食管癌组织及其相应的癌旁组织中C... 目的研究食管癌中CD137/CD137L的表达情况,并分析两者在食管癌中表达的意义及其与预后的关系。方法以购自上海芯超生物科技有限公司的食管癌组织芯片为研究对象,采用免疫组织化学方法检测组织芯片中87例食管癌组织及其相应的癌旁组织中CD137/CD137L的表达情况;采用χ~2检验或Fisher's精确检验的方法分析食管癌及癌旁组织中CD137/CD137L的表达与临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法分析CD137/CD137L的表达与食管癌患者预后的关系。结果在87例食管癌组织和相应的癌旁组织中CD137的阳性表达率分别为36.8%和72.4%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。在87例食管癌组织和相应的癌旁组织中CD137L的阳性表达率分别为57.5%和96.6%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。食管癌中CD137表达阳性率与浸润深度相关(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤部位、分化程度、临床分期均不相关(P>0.05)。食管癌中CD137L表达与临床分期相关(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤部位、分化程度、浸润深度均不相关(P>0.05)。CD137表达与食管癌患者的预后不相关(P=0.6301),CD137L表达与食管癌患者的预后相关(P=0.0368)。结论 CD137L的表达水平是影响食管癌患者预后的独立因素;CD137/CD137L可能在食管癌的抗肿瘤免疫中发挥重要作用。 展开更多

关键词 食管癌 CD137 CD137L 预后

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雷帕霉素对多囊卵巢综合征大鼠子宫内膜的作用及机制 被引量：2

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作者 许鑫 杨君 +3 位作者 赵金金 吴霏霏 张瑾 李柯欣 《新乡医学院学报》 CAS 2023年第9期818-823,共6页

目的探讨雷帕霉素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠子宫内膜的作用及机制。方法将30只Sprague Dawley雌性大鼠随机分为对照组、PCOS组、雷帕霉素组,每组10只。PCOS组和雷帕霉素组大鼠经颈背部皮下注射脱氢表雄酮(60 mg·kg^(-1))构建PCO... 目的探讨雷帕霉素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠子宫内膜的作用及机制。方法将30只Sprague Dawley雌性大鼠随机分为对照组、PCOS组、雷帕霉素组,每组10只。PCOS组和雷帕霉素组大鼠经颈背部皮下注射脱氢表雄酮(60 mg·kg^(-1))构建PCOS模型,每日1次,连续注射28 d;对照组大鼠每日注射等量生理盐水。造模成功后,雷帕霉素组大鼠每日腹腔注射雷帕霉素10 mg·kg^(-1),PCOS组和对照组大鼠每日腹腔注射等量生理盐水,连续注射28 d。于造模前、造模后和给药28 d后称各组大鼠体质量。给药28 d后,采用苏木精-伊红染色法观察各组大鼠子宫内膜病理学变化,采用Masson染色法检测大鼠子宫内膜纤维化情况,采用免疫组织化学法检测大鼠子宫内膜中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)及磷酸化p70核糖体蛋白S6(p-p70S6)表达,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记测定法检测大鼠子宫内膜细胞凋亡情况。结果造模前各组大鼠体质量比较差异无统计学意义(F=0.506,P>0.05);造模后,PCOS组、雷帕霉素组大鼠的体质量显著高于对照组(P<0.05);PCOS组与雷帕霉素组大鼠的体质量比较差异无统计学意义(P>0.05);给药28 d后,PCOS组大鼠的体质量显著高于对照组和雷帕霉素组,雷帕霉素组大鼠的体质量显著低于对照组(P<0.05)。给药28 d后,对照组大鼠子宫内膜腺体为多个腺体簇状排列,腺腔较大且迂曲较多;PCOS组大鼠子宫内膜腺体数目较对照组减少,为单个腺体分散排列,腺腔小且少有迂曲;雷帕霉素组大鼠子宫内膜腺体数目较多,呈簇状排列,但腺腔多小而直,部分可见到一些皱褶和分支。PCOS组和雷帕霉素组大鼠子宫内膜纤维化面积占比显著高于对照组(P<0.05);PCOS组与雷帕霉素组大鼠子宫内膜纤维化面积占比比较差异无统计学意义(P>0.05)。PCOS组大鼠子宫内膜� 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 子宫 脱氢表雄酮 雷帕霉素

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大鼠颈上神经节代谢型谷氨酸受体7,8的表达及慢性间歇性低氧对其的影响 被引量：1

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作者 魏茜茜 李超红 +2 位作者 赵晨露 赵宝生 刘玉珍 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1172-1178,共7页

目的研究大鼠颈上神经节(SCG)组织中III组代谢型谷氨酸受体7和8(mGluR7/8)的表达、定位,以及慢性间歇性低氧(CIH)对mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。方法选取8周龄雄性SD大鼠30只,免疫组织化学染色检测大鼠SCG组织中mGluR7和mGluR8的... 目的研究大鼠颈上神经节(SCG)组织中III组代谢型谷氨酸受体7和8(mGluR7/8)的表达、定位,以及慢性间歇性低氧(CIH)对mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。方法选取8周龄雄性SD大鼠30只,免疫组织化学染色检测大鼠SCG组织中mGluR7和mGluR8的表达。免疫荧光共定位染色检测mGluR7和mGluR8的分布。核浆分离蛋白进行Western blot检测mGluR7和mGluR8在细胞浆和细胞核的分布情况。构建6周CIH大鼠模型,CIH组放于低氧小室中:首先向小室内充入100%氮气,使氧浓度分数逐渐降低至6%并维持30 s,然后充入100%氧气,使氧浓度分数回升至21%,作用周期为4 min/次,8 h/d,对照组放于常氧环境中。通过尾动脉血压检测大鼠收缩压、舒张压和平均动脉压的变化。Western blot检测CIH对SCG中mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。结果大鼠SCG表达mGluR7和mGluR8。mGluR7分布于神经元和小荧光(SIF)细胞,上述细胞胞浆和胞核中均染色阳性,而在卫星胶质细胞(SGCs)、神经纤维和血管中不表达;mGluR8定位于神经元和SIF细胞的胞浆中,而在SGCs、神经纤维和血管中不表达。大鼠SCG核浆蛋白检测结果进一步证实mGluR7不仅存在于胞浆也存在于胞核蛋白中,而mGluR8仅存在于胞浆蛋白中。动物实验结果显示,与对照组相比,CIH升高大鼠的收缩压(P<0.0001)、舒张压(P<0.001)和平均动脉压(P<0.0001)。CIH增加mGluR7和mGluR8的蛋白表达量(P<0.05)。结论mGluR7和mGluR8均表达于大鼠SCG,但是细胞定位方式不同,CIH升高大鼠血压并增加mGluR7和mGluR8蛋白在SCG的表达水平。 展开更多

关键词 代谢型谷氨酸受体7 代谢型谷氨酸受体8 颈上神经节 慢性间歇性低氧 高血压

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