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全长转录组测序技术在非模式植物转录组学研究中的应用 被引量:21
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作者 王瑞娴 李川 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期502-508,共7页
转录组连接基因组遗传信息与蛋白质组,也是基因功能研究的基础和出发点。单分子测序技术是近年逐渐成熟的新一代测序技术,也称为第三代测序技术,在转录组学研究方面较前代测序技术具有独到优势,应用前景广阔。在非模式植物的功能基因组... 转录组连接基因组遗传信息与蛋白质组,也是基因功能研究的基础和出发点。单分子测序技术是近年逐渐成熟的新一代测序技术,也称为第三代测序技术,在转录组学研究方面较前代测序技术具有独到优势,应用前景广阔。在非模式植物的功能基因组学研究中,全长转录本的获得可有力地推进相应基础研究水平,而第三代测序技术为此提供了较好的解决方案。本研究就目前技术较为成熟且应用较广泛的SMRT等单分子测序技术原理进行了介绍,综述了该技术在非模式植物转录组学研究中的应用现状,对其应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 单分子测序 全长转录组 SMRT 非模式植物
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日粮中添加富硒桑叶粉对陕南白山羊屠宰性状和肌肉脂肪酸的影响 被引量:1
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作者 陈玲 杨竞贤 +8 位作者 成温玉 宋渊博 王月曦 贺志芹 周月亭 楚渠 彭云武 陈正余 刘强 《畜牧与饲料科学》 2023年第1期54-59,共6页
[目的]研究日粮中添加富硒蛋白桑叶粉对陕南白山羊屠宰性状指标、肌肉理化特性指标及肌肉脂肪酸和硒含量的影响。[方法]将30只3月龄陕南白山羊羯羊随机分为对照组和富硒桑叶组,每组15只;对照组饲喂基础日粮,富硒桑叶组在基础日粮中添加... [目的]研究日粮中添加富硒蛋白桑叶粉对陕南白山羊屠宰性状指标、肌肉理化特性指标及肌肉脂肪酸和硒含量的影响。[方法]将30只3月龄陕南白山羊羯羊随机分为对照组和富硒桑叶组,每组15只;对照组饲喂基础日粮,富硒桑叶组在基础日粮中添加15%的富硒蛋白桑叶粉;试验期为60 d,预饲期15 d,正饲期45 d;试验结束时进行屠宰试验,测定屠宰性状及肌肉理化特性指标;采集试验羊背最长肌,测定肌肉脂肪酸含量和硒含量。[结果]日粮中添加15%的富硒蛋白桑叶粉可显著(P<0.05)提高陕南白山羊肌肉pH1 h值和失水率;富硒桑叶组的眼肌面积和胴体重大于对照组,但差异不显著(P>0.05)。在2组山羊的背最长肌中检测到19种脂肪酸,其中饱和脂肪酸5种,不饱和脂肪酸14种;2组山羊肌肉中饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸及多不饱和脂肪酸含量占脂肪酸总含量的比例相似,分别约为28%、67%、5%;富硒桑叶组肌肉中的γ-亚麻酸含量显著(P<0.05)高于对照组,但脂肪酸总含量低于对照组。与对照组相比,富硒桑叶组肌肉中硒含量有所升高,但差异不显著(P>0.05);富硒桑叶组(0.0713 mg/kg)和对照组(0.0660 mg/kg)背最长肌硒含量均达到陕西省含硒肉类食品标准。[结论]在陕南白山羊日粮中添加15%桑叶粉可在一定程度上改善产肉量、促进硒在肌肉中的富集、减少胴体脂肪沉积,但由于肌肉失水率显著升高,需在储存和运输过程中尽量避免水分丢失。 展开更多
关键词 蛋白桑 陕南白山羊 屠宰性状 肌肉脂肪酸
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非洲猪瘟病毒拮抗宿主cGAS-STING信号通路的研究进展
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作者 赵鸿远 刘强 成温玉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期109-117,共9页
非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)拥有多种逃逸宿主免疫应答的策略,造成病毒难以被宿主清除。cGAS-STING信号通路介导的天然免疫在抗ASFV感染中发挥了重要作用,然而病毒编码的多个蛋白靶向该通路中的不同分子以拮抗宿主的... 非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)拥有多种逃逸宿主免疫应答的策略,造成病毒难以被宿主清除。cGAS-STING信号通路介导的天然免疫在抗ASFV感染中发挥了重要作用,然而病毒编码的多个蛋白靶向该通路中的不同分子以拮抗宿主的I型干扰素应答。利用基因编辑技术敲除这些病毒基因后,ASFV对宿主的致病性降低,成为基因缺失疫苗的研制潜在靶点。本文对目前已知参与调控宿主cGAS-STING信号通路的病毒蛋白进行总结,旨在阐明这些蛋白免疫逃逸cGAS-STING信号通路的分子机制,加深对ASFV免疫逃逸策略的理解,以期为ASFV致病机制研究与疫苗创制提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 天然免疫 cGAS-STING信号通路 免疫逃逸
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冲泡条件对桑叶茶重要生物活性物质溶出的影响 被引量:6
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作者 杨金宏 陈正余 +1 位作者 梁嘉俊 孔卫青 《山东农业科学》 2020年第9期132-136,共5页
分别采用高效液相色谱法(HPLC)、分光光度法和电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定桑叶茶的1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)、总黄酮和硒含量,并进一步研究不同冲泡条件下各成分的溶出情况。结果表明,桑叶茶的黄酮、1-DNJ和硒含量分别为8. 9120、... 分别采用高效液相色谱法(HPLC)、分光光度法和电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定桑叶茶的1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)、总黄酮和硒含量,并进一步研究不同冲泡条件下各成分的溶出情况。结果表明,桑叶茶的黄酮、1-DNJ和硒含量分别为8. 9120、3. 5516 mg/g、0. 2166 mg/kg。三种生物活性物质的溶出均与冲泡温度呈正相关,随温度的升高而增加。随冲泡时间的延长,黄酮的溶出呈线性增长,1-DNJ和硒的溶出与时间为对数相关,12 min的溶出率分别为84. 49%、9. 36%和32. 85%。 展开更多
关键词 桑叶茶 1-脱氧野尻霉素 总黄酮 冲泡条件
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不同品种桑树根与毛状根总黄酮含量比较 被引量:6
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作者 孔卫青 《山西农业科学》 2015年第7期828-830,876,共4页
为比较桑树毛状根与不同品种桑树根总黄酮含量的差异,以芦丁为标准品,用分光光度法(波长选择510 nm),以Na NO2-Al(NO3)3-Na OH显色法,对毛状根和陕桑305、湖桑32、沙2、蒙桑4个桑树品种的桑树根总黄酮含量进行了测定。结果发现,桑树毛... 为比较桑树毛状根与不同品种桑树根总黄酮含量的差异,以芦丁为标准品,用分光光度法(波长选择510 nm),以Na NO2-Al(NO3)3-Na OH显色法,对毛状根和陕桑305、湖桑32、沙2、蒙桑4个桑树品种的桑树根总黄酮含量进行了测定。结果发现,桑树毛状根的总黄酮含量最高,为3.28%,其由高到低依次为毛状根>蒙桑根>沙2根>湖桑32根>陕桑305根;差异显著性检验发现,除湖桑32和陕桑305之间差异不显著外,其他样品之间差异均达显著水平。 展开更多
关键词 桑树 毛状根 总黄酮
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抗菌肽SAAP-148对家蚕细菌性肠道病病原细菌的抗性分析 被引量:1
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作者 王珏 沈东旭 +3 位作者 彭云武 钱荷英 赵巧玲 陈安利 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期736-746,共11页
【目的】细菌性肠道病是家蚕Bombyx mori主要病害之一。本研究旨在探究广谱性抗菌肽SAAP-148对家蚕细菌性肠道病病原细菌的抑制效果,为进一步采用抗菌肽替代抗生素预防家蚕细菌病提供参考。【方法】采用qRT-PCR检测家蚕抗菌肽基因在健... 【目的】细菌性肠道病是家蚕Bombyx mori主要病害之一。本研究旨在探究广谱性抗菌肽SAAP-148对家蚕细菌性肠道病病原细菌的抑制效果,为进一步采用抗菌肽替代抗生素预防家蚕细菌病提供参考。【方法】采用qRT-PCR检测家蚕抗菌肽基因在健康和感染细菌性肠道病5龄第4天幼虫中肠中的表达量;分离感染细菌性肠道病家蚕5龄第4天幼虫中肠中的菌群,采用最大似然法构建系统发育树;采用添食法(1×10^(10)和1×10^(14)CFU/mL菌悬液)和穿刺法(2×10^(8)和2×10^(9)CFU/mL菌悬液)检测分离的8种细菌及4种常见细菌病病原细菌粪肠球菌Enterococcus faecalis、黑胸败血芽孢杆菌Bacillus bombyseptieus、苏云金芽孢杆菌B.thuringiensis和灵杆菌Serratia marcescens对5龄健康家蚕幼虫的致病性;采用琼脂平板扩散法分析抗菌肽SAAP-148对分离的肠道病病原细菌和黑胸败血芽孢杆菌等其他常见细菌病病原细菌的抑制效果。【结果】测定的家蚕抗菌肽基因的表达量在感染细菌性肠道病的家蚕5龄第4天幼虫中肠中较健康个体中均显著上调,表明家蚕自身抗菌肽在抵抗细菌性肠道病的过程中发挥了一定的作用;感染细菌性肠道病的家蚕5龄第4天幼虫中肠中共分离出8种病原细菌,即松鼠葡萄球菌Mammaliicoccus sciuri、嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila、生癌肠杆菌Enterobacter cancerogenus、布甘氏肠杆菌E.bugandensis、霍氏肠杆菌E.hormaechei、弗劳地枸橼酸杆菌Citrobacter freundii、肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae和变栖克雷伯菌K.variicola;穿刺结果显示8种细菌均具有致病性,其中松鼠葡萄球菌、嗜水气单胞菌、生癌肠杆菌和布甘氏肠杆菌致病性较强,霍氏肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯菌和变栖克雷伯菌致病性较弱。抗菌肽SAAP-148对分离出的8种病原细菌和家蚕其他4种常见细菌病病原细菌均具有体外抑制效果,且抑制效果随SAAP-14 展开更多
关键词 家蚕 抗菌肽 细菌性肠道病 qRT-PCR SAAP-148 抑菌效果
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野桑蚕基因组Survey分析及线粒体基因组注释 被引量:3
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作者 孟刚 王瑞娴 楚渠 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期2505-2512,共8页
为制定野桑蚕全基因组denovo测序策略及分析不同地理来源的野桑蚕(Bombyx mandarina)、家蚕(Bombyx mori)之间的亲缘关系,利用Illumina Hiseq 2500测序平台对单只雌性秦巴山区野桑蚕基因组进行Survey调研,分析基因组大小、杂合度、GC含... 为制定野桑蚕全基因组denovo测序策略及分析不同地理来源的野桑蚕(Bombyx mandarina)、家蚕(Bombyx mori)之间的亲缘关系,利用Illumina Hiseq 2500测序平台对单只雌性秦巴山区野桑蚕基因组进行Survey调研,分析基因组大小、杂合度、GC含量等基本信息,对基因组进行初步组装;从测序数据中提取并组装线粒体基因组,基于其分析家蚕、野桑蚕的系统进化关系。结果获得测序clean data 25.8 Gb,基因组预估大小为456.5 Mb,杂合率为1.94%;基因组预组装结果Scaffold N50为1792 bp,Scaffold数量为737055;Contig N50为587 bp,Contig数量为1477268。线粒体组装和注释表明,野桑蚕线粒体长度为15662 bp,包含基因37个,没有发生基因重排;系统进化分析表明,中国野桑蚕总体上可构成2个以地理来源区分的南北群体,其中北方野桑蚕群体与家蚕亲缘关系最为接近。本研究表明,野桑蚕基因组杂合率较高,后续需综合利用第二代、三代测序方法,辅以Hi-C技术,才能组装获得高质量的野桑蚕基因组图谱,同时本研究支持了家蚕驯化起源于中国北方的观点,表明陕南秦巴山区可能是家蚕的驯化起源地之一。 展开更多
关键词 野桑蚕 基因组大小 线粒体 杂合率
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桑花叶萎缩类病毒基因组结构特征及聚类分析 被引量:4
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作者 孔卫青 杨金宏 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期4334-4339,共6页
桑花叶萎缩类病毒(Mulberry mosaic dwarf viroid, MMDVd)是近些年发现的桑花叶型萎缩病的病原物,本研究利用Mfold等软件和保守序列分析了MMDVd的二级结构及其中存在的核酶,并进一步对类病毒和卫星RNA进行了聚类分析,以期解决其分类... 桑花叶萎缩类病毒(Mulberry mosaic dwarf viroid, MMDVd)是近些年发现的桑花叶型萎缩病的病原物,本研究利用Mfold等软件和保守序列分析了MMDVd的二级结构及其中存在的核酶,并进一步对类病毒和卫星RNA进行了聚类分析,以期解决其分类和进化地位。结果表明MMDVd的正链存在典型的锤头型核酶结构,自切割位点为AUC,负链存在有疑似发夹型核酶的二级结构,是目前发现的第四个发夹核酶。聚类分析研究中,Pospiviroidae科类病毒单独形成一分支,Avsunviroidae科PLMVd和CChMVd首先与v LTSV聚合,而本研究MMDVd首先与卫星RNA s TRSV、s ArMV聚合,结合MMDVd正负链不同于已知Avsunviroidae科的两个锤头型核酶的结构,表明MMDVd应为一个新的未分类属,对于其核酶的自切割活性及其复制机制,则需要进一步的实验研究来验证。 展开更多
关键词 桑花叶萎缩类病毒 锤头型核酶 发夹型核酶 聚类分析
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桑花叶型萎缩病病原的检测与序列分析 被引量:3
9
作者 孔卫青 杨金宏 《中国农学通报》 CSCD 2012年第36期237-240,共4页
旨在获得安康地区桑花叶萎缩病病原序列,为桑花叶萎缩病的防治提供更多的信息。用RT-PCR技术对安康地区染花叶型萎缩病病株的病原进行了分离,克隆测序并在Mfold网站预测其二级结构。该病的病原为桑花叶萎缩类病毒MMDVd-201110151(GenBan... 旨在获得安康地区桑花叶萎缩病病原序列,为桑花叶萎缩病的防治提供更多的信息。用RT-PCR技术对安康地区染花叶型萎缩病病株的病原进行了分离,克隆测序并在Mfold网站预测其二级结构。该病的病原为桑花叶萎缩类病毒MMDVd-201110151(GenBank登录号:JQ809700),核苷酸长度357bp,GC含量50.7%,219bp后38个碱基与樱桃小圆形类病毒样核糖核酸具有约85%的一致性。Mfold网站预测二级结构有58.3%的碱基配对,两端为分枝状结构。成功分离到安康地区桑花叶型萎缩病病原。 展开更多
关键词 桑花叶型萎缩病 类病毒 序列分析 二级结构
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桑树毛状根生长动力学研究 被引量:3
10
作者 杨金宏 《中国农学通报》 CSCD 2013年第1期53-55,共3页
为建立桑树毛状根的高效培养体系,采用液体摇瓶培养法,以培养30天的毛状根湿重为指标,对桑树毛状根的培养基及培养条件进行研究。结果表明,桑树毛状根的最佳培养基是pH6.0的MS培养基,最优培养条件为26℃,130r/min,暗培养。桑树毛状根的... 为建立桑树毛状根的高效培养体系,采用液体摇瓶培养法,以培养30天的毛状根湿重为指标,对桑树毛状根的培养基及培养条件进行研究。结果表明,桑树毛状根的最佳培养基是pH6.0的MS培养基,最优培养条件为26℃,130r/min,暗培养。桑树毛状根的生长表现为"慢—快—慢"的趋势,呈"S"型曲线,生长21天左右进入稳定期。 展开更多
关键词 桑树 毛状根 生长动力学
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草甘膦致桑树药害的安全风险评价分析 被引量:3
11
作者 王代钢 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第6期476-479,共4页
草甘膦有导致桑树发生药害的重大风险,风险程度因受害器官不同而有差异。模拟药害试验结果表明:叶芽受药害风险最高,其次是新梢绿茎部位;茎干药害对新芽产生轻微影响,对树体发生药害的风险低;桑根发生药害的风险极低。使用有定向喷头的... 草甘膦有导致桑树发生药害的重大风险,风险程度因受害器官不同而有差异。模拟药害试验结果表明:叶芽受药害风险最高,其次是新梢绿茎部位;茎干药害对新芽产生轻微影响,对树体发生药害的风险低;桑根发生药害的风险极低。使用有定向喷头的低压喷雾器、药液浓度适当偏稀、不添加其他助剂,能够降低药害风险,保障除草作业安全。 展开更多
关键词 桑树 草甘膦 药害 安全 风险
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桑花叶萎缩类病毒的检测与序列多态性分析 被引量:3
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作者 孔卫青 杨金宏 +2 位作者 王蓓 朱晓东 雷晓强 《中国农学通报》 CSCD 2014年第28期306-309,共4页
为调查桑花叶萎缩类病毒的多态性,通过RT-PCR技术分离了安康地区桑花叶型萎缩类病毒,并对其基因组进行了克隆测序和序列分析。结果获得4个MMDVd变体,核苷酸长度为356 nt或357 nt,GC含量均约51%,Mfold网站预测二级结构两端为分枝状结构,... 为调查桑花叶萎缩类病毒的多态性,通过RT-PCR技术分离了安康地区桑花叶型萎缩类病毒,并对其基因组进行了克隆测序和序列分析。结果获得4个MMDVd变体,核苷酸长度为356 nt或357 nt,GC含量均约51%,Mfold网站预测二级结构两端为分枝状结构,其中约有58%的碱基配对。 展开更多
关键词 桑花叶萎缩类病毒 检测 序列多态性 二级结构
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基于16SrRNA测序研究蒙桑根际细菌多样性 被引量:3
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作者 杨金宏 孔卫青 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2161-2168,共8页
根际细菌丰富多样,对植物的生长发育有重要影响。为更好的了解野生蒙桑和移植栽培蒙桑根际细菌的多样性组成和差异,本研究提取了两样本的宏基因组DNA,利用Roche 454 GS FLX测序技术对样本菌群的16S r RNA基因的V1~V3区域进行测序。测序... 根际细菌丰富多样,对植物的生长发育有重要影响。为更好的了解野生蒙桑和移植栽培蒙桑根际细菌的多样性组成和差异,本研究提取了两样本的宏基因组DNA,利用Roche 454 GS FLX测序技术对样本菌群的16S r RNA基因的V1~V3区域进行测序。测序结果表明:野生蒙桑根际细菌的主导类群为变形菌门(31.62%)和酸酐菌门(19.8%);栽培蒙桑的主导类群为厚壁菌门(89.07%),两样本的沙浓指数分别为5.8和1.33。栽培蒙桑样本OTU498的基因序列数占总样本的78.9%,其最相近菌属为苏云金芽孢杆菌;野生蒙桑OTU656、OTU556、OTU568和OTU665占总样本的8.17%,最相近菌属是丝状共生菌。进化分析发现两样本菌群具有各自的特异性,大都来源于同一菌门的不同菌属,分别聚类。本研究表明移栽后蒙桑根际细菌的多样性降低,主导类群也发生了变化,基于16S r RNA测序可以揭示根际细菌的组成结构。 展开更多
关键词 蒙桑 根际细菌 16S RRNA 多样性
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桑花叶萎缩类病毒滚环扩增检测技术体系的建立 被引量:2
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作者 杨金宏 孔卫青 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期898-902,共5页
为建立一种快速、灵敏、简单的检测类病毒的方法,以桑花叶萎缩类病毒为研究对象,根据其基因组设计了1条特异性连接环化的寡核苷酸链探针和2条PCR扩增检测引物,对收集到的6份桑花叶型萎缩类病毒样品进行了滚环扩增。结果所有样品的RCA扩... 为建立一种快速、灵敏、简单的检测类病毒的方法,以桑花叶萎缩类病毒为研究对象,根据其基因组设计了1条特异性连接环化的寡核苷酸链探针和2条PCR扩增检测引物,对收集到的6份桑花叶型萎缩类病毒样品进行了滚环扩增。结果所有样品的RCA扩增产物的核酸电泳,条带呈阶梯状分布,但大部分聚集于上样孔附近,与理论分析相符,表明该方法适用于桑花叶萎缩类病毒的快速检测。进一步利用人工合成的模拟DNA分子测试该检测方法的灵敏度,研究显示,利用RCA技术可以成功检测到10~3拷贝的模式DNA分子。 展开更多
关键词 滚环扩增 桑花叶萎缩类病毒 寡核苷酸探针
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中国蚕丝业主体纷争与主体演变趋势研究
15
作者 王代钢 胡鸿晓 +1 位作者 黎欢吉 余谦 《丝绸》 CAS 北大核心 2014年第9期72-77,共6页
应用主体结构研究法,解析了中国蚕丝业发生主体纷争和主体演变的主要原因,认为在由计划向市场转换过程中,产业链结构改变是诱发主体纷争的主因,主体结构中的非蚕业经济功效干涉了主体演变趋向,使蚕丝业主体承载出现尴尬状态。提出了以... 应用主体结构研究法,解析了中国蚕丝业发生主体纷争和主体演变的主要原因,认为在由计划向市场转换过程中,产业链结构改变是诱发主体纷争的主因,主体结构中的非蚕业经济功效干涉了主体演变趋向,使蚕丝业主体承载出现尴尬状态。提出了以主体结构要素(即蚕农)的"主体性本质"属性还原主体结构本质,促成农村社会体系与蚕丝业体系有效分离,选择适合的主体结构构型,构建本质化环节主体,引导蚕丝业主体演变趋向,最终解决主体纷争和主体演变问题的路径和方法。对完善市场主导下中国蚕丝业的主体结构和发展理论具有探索作用。 展开更多
关键词 蚕丝业 主体 产业链结构 主体性本质 生产方式 发展方式
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超声波处理后蜂蜜中蛋白质和硒含量变化
16
作者 郭文久 凌君 周云 《食品科技》 CAS 北大核心 2018年第12期95-98,共4页
超声波处理可以对蜂蜜中的花粉进行破壁,从而释放花粉中的营养,研究旨在研究超声波处理后蜂蜜中蛋白质和硒含量的变化。蜂蜜经过超声波处理后再经200目尼龙布过滤,采用国标GB 5009.5—2016测定蜂蜜溶液中的蛋白质含量,用盐酸-硝酸-高氯... 超声波处理可以对蜂蜜中的花粉进行破壁,从而释放花粉中的营养,研究旨在研究超声波处理后蜂蜜中蛋白质和硒含量的变化。蜂蜜经过超声波处理后再经200目尼龙布过滤,采用国标GB 5009.5—2016测定蜂蜜溶液中的蛋白质含量,用盐酸-硝酸-高氯酸三酸消煮后采用氢化物-原子荧光法测定硒含量。结果表明,经过超声波处理后的蜂蜜溶液中蛋白质含量提高了4倍,硒含量提高了近10倍。 展开更多
关键词 超声波 蜂蜜 蛋白质含量 硒含量 氢化物-原子荧光法
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不同家蚕品种添食NPV的抗性分析 被引量:1
17
作者 黎欢吉 王代钢 《山东农业科学》 2015年第10期99-101,共3页
用5×106个/m L的NPV病毒液饲喂家蚕品种,二龄起蚕添食,调查三龄第二天发病率。结果表明,不同家蚕品种发病率差别较大,其中菁松×皓月发病率较高(平均66.67%),桂蚕一号发病率较低(平均14.44%)。SPSS方差分析表明,桂蚕一号抗性较... 用5×106个/m L的NPV病毒液饲喂家蚕品种,二龄起蚕添食,调查三龄第二天发病率。结果表明,不同家蚕品种发病率差别较大,其中菁松×皓月发病率较高(平均66.67%),桂蚕一号发病率较低(平均14.44%)。SPSS方差分析表明,桂蚕一号抗性较强,除两广二号外与其他品种都存在显著差异。菁松×皓月抗性较差,发病率远高于其他品种,差异显著。 展开更多
关键词 家蚕品种
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桑青枯雷尔氏菌鞭毛蛋白flic基因的克隆和序列分析
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作者 杨金宏 陈冰洁 +1 位作者 程煜 孔卫青 《湖南农业科学》 2013年第6期4-5,8,共3页
以桑青枯雷尔氏菌MR111为材料,对MR111的鞭毛蛋白基因flic的部分序列进行了PCR扩增和测序。结果表明:获得了flic基因400 bp的序列,序列编码蛋白有典型的鞭毛蛋白N-末端的螺旋区。NCBI在线BLAST分析表明,该序列与其他青枯雷尔氏菌菌株的... 以桑青枯雷尔氏菌MR111为材料,对MR111的鞭毛蛋白基因flic的部分序列进行了PCR扩增和测序。结果表明:获得了flic基因400 bp的序列,序列编码蛋白有典型的鞭毛蛋白N-末端的螺旋区。NCBI在线BLAST分析表明,该序列与其他青枯雷尔氏菌菌株的鞭毛蛋白基因的同源性在97%以上。 展开更多
关键词 青枯雷尔氏菌 鞭毛蛋白基因 克隆 序列分析
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桑青枯雷尔氏菌MR111的腺苷酸激酶adk基因的克隆和序列分析
19
作者 孔卫青 程煜 陈冰洁 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期143-145,共3页
腺苷酸激酶是广泛存在的一种重要的核苷酸激酶。进行PCR扩增和克隆测序获得桑青枯雷尔氏菌MR111的腺苷酸激酶adk基因长502 bp的序列,NCBI在线BLAST分析其与大肠杆菌、流感嗜血杆菌同源基因的相似性在80%以上,序列编码蛋白有腺苷酸激酶... 腺苷酸激酶是广泛存在的一种重要的核苷酸激酶。进行PCR扩增和克隆测序获得桑青枯雷尔氏菌MR111的腺苷酸激酶adk基因长502 bp的序列,NCBI在线BLAST分析其与大肠杆菌、流感嗜血杆菌同源基因的相似性在80%以上,序列编码蛋白有腺苷酸激酶保守的AMP结合结构域和LID结构域,为长型腺苷酸激酶。聚类分析结果表明,该基因与其他细菌的同源基因聚合在同一分支。 展开更多
关键词 桑青枯雷尔氏菌MR111 腺苷酸激酶 克隆 序列分析
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桑花叶萎缩类病毒基因组核酶活性及其对桑树侵染性的研究
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作者 杨金宏 江微 +1 位作者 凌君 孔卫青 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期705-713,共9页
桑花叶萎缩类病毒(Mulberry mosaic dwarf viroid,MMDVd)基因组由单链环状小分子RNA组成,根据预测二级结构可能存在锤头核酶(Hammerhead ribozyme,HH)和疑似发夹核酶(Hairpin ribozyme,HP),但目前还缺乏对核酶活性的研究。本研究使用体... 桑花叶萎缩类病毒(Mulberry mosaic dwarf viroid,MMDVd)基因组由单链环状小分子RNA组成,根据预测二级结构可能存在锤头核酶(Hammerhead ribozyme,HH)和疑似发夹核酶(Hairpin ribozyme,HP),但目前还缺乏对核酶活性的研究。本研究使用体外自切割和2,3-环磷酸基测序对核酶活性及自切割位点进行了鉴定,并在发夹核酶Loop1增加一对碱基设计合成了突变核酶MMDVd-HP’,比较了其与MMDVd-HP的活性差异,分析了MMDVd对正常未染病和桑花叶卷叶病相关病毒(Mulberry mosaic leaf roll-associated virus,MMLRaV)阳性桑树的侵染。体外自切割结果显示,所有核酶均成功自切割产生了相应的单体,均有核酶活性。2,3-环磷酸基测序结果显示,腺苷化接头分别连接于第7位的C和302位的A之后,MMDVd-HH的切割位点位于AUC↑处,MMDVd-HP切割位点位于ACA↓处。定量PCR结果显示反应体系中的MMDVd-HP多于MMDVd-HP’,表明MMDVd-HP’更多的发生了切割,活性高于MMDVd-HP。侵染性实验结果显示,桑树(-)没有检测到MMDVd,而所有桑树(MMLRaV)样本均检测到了MMDVd,说明MMDVd能侵染桑树(MMLRaV),与satRNA的特征相似。 展开更多
关键词 桑花叶萎缩类病毒 锤头核酶 发夹核酶 2 3-环磷酸基 切割位点 侵染性
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