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耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌临床分离株的流行病学与耐药机制研究 被引量：22
1
作者 张广慧 曹雪萍 +2 位作者 俞静 刘瑛 葛艳 《检验医学》 CAS 2015年第1期53-57,共5页
目的了解耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍曼不动杆菌流行病学情况以及耐药机制,帮助临床合理使用抗菌药物,为控制医院感染提供依据。方法收集耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍曼不动杆菌110株及敏感株6株,进行来源病区和标本种类的统计分析;应用重复... 目的了解耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍曼不动杆菌流行病学情况以及耐药机制,帮助临床合理使用抗菌药物,为控制医院感染提供依据。方法收集耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍曼不动杆菌110株及敏感株6株,进行来源病区和标本种类的统计分析;应用重复序列聚合酶链反应(REP-PCR)进行基因型分型;使用PCR检测β-内酰胺酶基因(OXA、IMP、VIM等)及外排泵编码基因(ade A、ade B、ade C、ade J、ade G)的携带情况;采用实时荧光定量PCR对比耐药菌株与敏感菌株的外排泵基因表达量的差异。结果 110株菌株主要来自痰标本,重症监护病房(ICU)分离率最高;所有菌株REP-PCR电泳图谱分为A^G 7型,110株耐药菌株均为A型,且均被检测到含有OXA-23、OXA-51基因,均未检测到含有OXA-24、OXA-58、IMP-1、IMP-2、VIM-1、VIM-2基因;外排泵编码基因ade A、ade B、ade C、ade J及ade G的阳性率均为100%;耐药菌株外排泵编码基因ade A、ade B、ade C表达量明显高于敏感菌株。结论耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的流行型别基本相同,均为A型,应引起临床医护人员的高度重视;β-内酰胺酶基因(OXA-23、OXA-51)的表达以及外排泵基因(ade A、ade B、ade C)的过度表达与其对碳青霉烯类抗菌药物的耐药性有关。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 Β-内酰胺酶 外排泵 重复序列聚合酶链反应 实时荧光定量聚合酶链反应
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实时荧光定量PCR快速诊断肺炎链球菌 被引量：15
2
作者 颜善活 孙雷 +4 位作者 符可鹏 卓永光 杨善业 樊祖茜 黄永霞 《检验医学》 CAS 2013年第3期221-224,共4页
目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(PCR),用于肺炎链球菌检测和流行病学调查。方法以肺炎链球菌自溶素(lyt)和溶血素(ply)的基因为目的序列分别设计引物和探针,将其分别与10株肺炎链球菌、13株非肺炎链球菌DNA以及不同浓度梯度的肺炎链... 目的建立实时荧光定量聚合酶链反应(PCR),用于肺炎链球菌检测和流行病学调查。方法以肺炎链球菌自溶素(lyt)和溶血素(ply)的基因为目的序列分别设计引物和探针,将其分别与10株肺炎链球菌、13株非肺炎链球菌DNA以及不同浓度梯度的肺炎链球菌DNA进行荧光定量PCR,并将引物和探针应用于200例临床标本检测,同时通过传统的微生物培养鉴定的方法来验证荧光定量PCR的特异性和敏感性。结果 10株肺炎链球菌均获得了明显的扩增产物,13株非肺炎链球菌DNA无明显的扩增信号,其检测敏感性可达100 fg;200例临床标本,实时荧光定量PCR检测出42例肺炎链球菌阳性(阳性率为21%),而培养法阳性16例(阳性率为8%)。结论实时荧光定量PCR是一种敏感、特异、快速的检测肺炎链球菌方法,可用于肺炎链球菌的诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 实时荧光定量聚合酶链反应 TAQMAN探针
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血清miR-598-3p与CA153联合检测在乳腺癌诊断中的意义 被引量：12
3
作者 苏谦 陈文举 +1 位作者 王攀 李招云 《检验医学》 CAS 2017年第6期457-460,共4页
目的探讨血清微小RNA-598-3p(miR-598-3p)检测及miR-598-3p与糖类抗原153(CA153)联合检测在乳腺癌诊断中的意义。方法收集2013年1月—2014年9月在台州市中心医院确诊的100例乳腺癌患者、45例乳腺良性疾病患者及40名健康对照者血清标本,... 目的探讨血清微小RNA-598-3p(miR-598-3p)检测及miR-598-3p与糖类抗原153(CA153)联合检测在乳腺癌诊断中的意义。方法收集2013年1月—2014年9月在台州市中心医院确诊的100例乳腺癌患者、45例乳腺良性疾病患者及40名健康对照者血清标本,应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测血清miR-598-3p的表达水平,应用化学发光法检测血清CA153水平,应用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-598-3p、CA153及二者联合检测对乳腺癌诊断的敏感性和特异性。结果乳腺癌患者血清miR-598-3p的表达水平下调,CA153水平升高,与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。miR-598-3p的表达量与乳腺癌TNM分期无相关性(P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-598-3p诊断乳腺癌的敏感性和特异性分别为95.0%、85.0%;CA153诊断乳腺癌的敏感性和特异性分别为66.0%、65.0%。二者联合检测诊断乳腺癌的敏感性和特异性分别为96.0%、70.0%。结论 miR-598-3p对乳腺癌的诊断具有良好的敏感性和特异性,联合CA153检测可以提高对乳腺癌的诊断效能。 展开更多
关键词 微小RNA-598-3p 实时荧光定量聚合酶链反应 乳腺癌
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血清miR-765和CA153联合检测对乳腺癌的诊断价值 被引量：10
4
作者 洪宏 袁建芬 喻海忠 《现代检验医学杂志》 CAS 2018年第3期92-94,共3页
目的探讨血清miR-765与CA153联合检测对乳腺癌的诊断价值。方法收集乳腺癌患者58例,乳腺良性疾病患者28例及体检健康者30例,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-765的表达水平,受试者工作特征曲线分析单一和联合检测对早期乳腺癌... 目的探讨血清miR-765与CA153联合检测对乳腺癌的诊断价值。方法收集乳腺癌患者58例,乳腺良性疾病患者28例及体检健康者30例,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-765的表达水平,受试者工作特征曲线分析单一和联合检测对早期乳腺癌的诊断价值。结果乳腺癌患者血清miR-765相对表达量均显著低于乳腺良性疾病患者和健康对照者(F=35.97,均P<0.01);单独检测miR-765的ROC曲线下AUC为0.843(95%CI:0.767~0.919),灵敏度为87.9%,特异度为81.0%;miR-765与CA153联合检测的ROC曲线下AUC为0.903(95%CI:0.844~0.962),灵敏度为89.7%,特异度为86.2%;CA153<25U/ml的乳腺癌患者血清miR-765的ROC曲线下AUC为0.840(95%CI:0.746~0.934),灵敏度为87.5%,特异度为82.4%。结论 miR-765对乳腺癌的诊断具有一定价值,与CA153联合检测可为临床提供一种潜在的辅助方法。 展开更多
关键词 微小RNA-765 实时荧光定量聚合酶链反应 乳腺癌
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PMA-qPCR定量检测畜禽肉类中沙门菌活菌的研究 被引量：10
5
作者 於颖 王文静 陆晔 《检验医学》 CAS 2015年第5期500-506,共7页
目的将叠氮溴化丙锭(PMA)与实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)相结合定量检测畜禽肉类中活的沙门菌。方法通过优化光反应时间、PMA浓度等PMA作用条件,建立PMA-q PCR方法,构建重组质粒建立标准曲线,考察该方法的灵敏性、特异性,并将该方... 目的将叠氮溴化丙锭(PMA)与实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)相结合定量检测畜禽肉类中活的沙门菌。方法通过优化光反应时间、PMA浓度等PMA作用条件,建立PMA-q PCR方法,构建重组质粒建立标准曲线,考察该方法的灵敏性、特异性,并将该方法用于定量检测未经增菌培养的畜禽肉类样品中的沙门菌。结果在PMA浓度为15μg/m L、曝光5 min的条件下可完全抑制样品中死菌DNA的扩增。建立的定量标准曲线循环阈值(Ct值)与质粒标准品模板的拷贝数呈良好线性关系(r2=0.997 9),最低可检出10拷贝/反应体系。所建立的PMAq PCR方法最低可检出21拷贝/μL沙门菌。采用PMA-q PCR检测人工染菌鸡肉样品,最低可检出103CFU/m L沙门菌。结论用PMA-q PCR方法可实现定量检测畜禽肉类样品中活的沙门菌,从而达到快速检测的目的。 展开更多
关键词 沙门菌 活菌 叠氮溴化丙啶 荧光定量聚合酶链反应 畜禽肉类
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GeneXpert实时荧光定量PCR快速检测艰难梭菌的临床评估 被引量：9
6
作者 陈旭 董丹凤 +1 位作者 韩立中 倪语星 《检验医学》 CAS 2014年第6期590-592,580,共3页
目的对GeneXpert实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)在快速检测临床粪便标本中艰难梭菌的应用进行评估。方法采用双拭子蘸取临床未成形粪便标本,一支拭子用于GeneXpert实时荧光定量PCR检测艰难梭菌毒素基因tcdB,另一支用于常规厌氧菌培养检... 目的对GeneXpert实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)在快速检测临床粪便标本中艰难梭菌的应用进行评估。方法采用双拭子蘸取临床未成形粪便标本,一支拭子用于GeneXpert实时荧光定量PCR检测艰难梭菌毒素基因tcdB,另一支用于常规厌氧菌培养检测;对GeneXpert实时荧光定量PCR检测结果与常规厌氧菌培养结果的一致性进行统计学分析,并计算GeneXpert实时荧光定量PCR的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值等参数。结果临床收集到141例未成形粪便标本,GeneXpert实时荧光定量PCR检出艰难梭菌毒素基因tcdB阳性42例,其中常规厌氧菌培养阳性34例,两者一致性较好(Kappa=0.775 0,P<0.01),GeneXpert实时荧光定量PCR的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为87.2%、92.2%、81.0%和94.9%。结论 GeneXpert实时荧光定量PCR直接检测粪便标本中的艰难梭菌具有检测快速、操作简便等优点,有重要的临床应用价值。 展开更多
关键词 艰难梭菌 快速检测 实时荧光定量聚合酶链反应
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实时荧光定量PCR快速检测脑膜炎奈瑟菌的临床价值 被引量：5
7
作者 王崇义 史训忠 孙正林 《检验医学》 CAS 2018年第4期339-342,共4页
目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)快速检测流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)病原菌脑膜炎奈瑟菌(Nm)的临床价值。方法收集70例疑似流脑病例的双份脑脊液标本,1份采用细菌培养法进行检测,另1份采用实时荧光定量PCR进行检测,比较2种方法... 目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)快速检测流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)病原菌脑膜炎奈瑟菌(Nm)的临床价值。方法收集70例疑似流脑病例的双份脑脊液标本,1份采用细菌培养法进行检测,另1份采用实时荧光定量PCR进行检测,比较2种方法的检出阳性率以及敏感性和特异性。结果采用细菌培养法检出Nm阳性49例,阳性率为70.00%;实时荧光定量PCR检出Nm阳性67例,阳性率为95.71%,二者阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测结果与细菌培养法阳性符合率为70.00%,其中有18例细菌培养法为阴性而实时荧光定量PCR为阳性。实时荧光定量PCR检测Nm的特异性为100%,无假阴性结果,阳性预测值为73.13%,阴性预测值为0.00%,检测下限为103拷贝/m L,线性范围为2×103~2×107拷贝/m L。结论实时荧光定量PCR检测Nm敏感性高、特异性强,且快速简便,为流脑流行病学调查提供了一种快速、简便的病原学诊断手段。 展开更多
关键词 脑膜炎奈瑟菌 流行性脑脊髓膜炎 实时荧光定量聚合酶链反应
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2013—2017年大理州手足口病患儿病原学分析 被引量：5
8
作者 段飞云 陈晓明 陈冉 《检验医学》 CAS 2019年第7期583-586,共4页
目的了解2013—2017年大理州手足口病患儿病原学特征,为手足口病防控提供依据。方法收集2013—2017年大理州各医疗机构手足口病患儿的流行病学数据及其咽拭或粪便样本2 873份,按照年度、样本类型、患儿性别及年龄和检出地区及月份分组... 目的了解2013—2017年大理州手足口病患儿病原学特征,为手足口病防控提供依据。方法收集2013—2017年大理州各医疗机构手足口病患儿的流行病学数据及其咽拭或粪便样本2 873份,按照年度、样本类型、患儿性别及年龄和检出地区及月份分组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测临床样本中的肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A16型(CoxA16)及其他肠道病毒(EV)。结果2 873份临床样本中,各组EV71、CoxA16、其他EV比较差异均有统计学意义(χ2值分别为893.68、121.18、41.07、354.25、240.33,P<0.05)。3~5岁组EV71和CoxA16检出率最高,分别为25.1%和23.3%。EV71主要在春季被检出,而CoxA16、其他EV则集中在夏季被检出;男性与女性患儿之间其他EV、EV71和CoxA16检出率差异均无统计学意义(χ2=2.66,P>0.05)。结论强化病原监测是防控手足口病的科学手段。 展开更多
关键词 手足口病 实时荧光定量聚合酶链反应 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A16型
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探针荧光定量PCR在肺炎链球菌检测中的应用 被引量：4
9
作者 曹东林 胡亮杉 +3 位作者 林茂锐 王婷 黄基伟 田军章 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第7期102-104,共3页
目的建立探针荧光定量PCR检测肺炎链球菌的方法。方法针对肺炎链球菌种属特异性基因lytA,设计合成了特异引物和探针,研究引物和探针的灵敏度和特异性,确定循环阈值(cycle threshold,ct)的临界值(cut-off value)。将荧光定量PCR和细菌培... 目的建立探针荧光定量PCR检测肺炎链球菌的方法。方法针对肺炎链球菌种属特异性基因lytA,设计合成了特异引物和探针,研究引物和探针的灵敏度和特异性,确定循环阈值(cycle threshold,ct)的临界值(cut-off value)。将荧光定量PCR和细菌培养法进行比较,同时检测158份肺炎患者痰液标本加以验证。结果针对LytA基因所设计的引物和探针能灵敏地检出常见致病的血清型肺炎链球菌株,检测灵敏度为每个反应100个基因组DNA拷贝。通过荧光量PCR方法,35株肺炎链球菌中检测结果为阳性有34株,检测结果为阴性的有1株;15株非肺炎链球菌全部为阴性。通过荧光定量PCR方法,158份痰液标本中共检测出34份肺炎链球菌阳性,其中10份培养出相应的病原菌。肺炎链球菌阳性患者的白细胞数量和住院时间均显著高于阴性患者(P<0.05)。肺炎链球菌阳性患者住院时间均显著长于阴性患者(P<0.05)。结论探针荧光定量PCR方法能特异地检测肺炎链球菌,具有很高的灵敏度,能提高临床肺炎链球菌感染患者标本的阳性检出率。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 聚合酶链反应 荧光探针
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乳腺癌患者血清miR-765,miR-200b水平检测及与临床病理学相关研究 被引量：4
10
作者 洪宏 袁建芬 喻海忠 《现代检验医学杂志》 CAS 2018年第6期55-58,共4页
目的探讨乳腺癌患者血清miR-765与miR-200b的表达及其临床应用价值。方法选取乳腺癌患者58例,乳腺良性疾病患者28例及体检健康者30例,应用实时荧光定量PCR技术检测血清miR-765和miR-200b的表达水平,评价指标的诊断价值,并分析与乳腺癌... 目的探讨乳腺癌患者血清miR-765与miR-200b的表达及其临床应用价值。方法选取乳腺癌患者58例,乳腺良性疾病患者28例及体检健康者30例,应用实时荧光定量PCR技术检测血清miR-765和miR-200b的表达水平,评价指标的诊断价值,并分析与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果乳腺癌患者血清miR-765和miR-200b相对表达量均显著性低于乳腺良性疾病患者(t=3.955,2.657,P<0.05)和健康对照者(t=4.465,3.518,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-765在乳腺癌诊断中的AUC为0.843(95%CI:0.767～0.919),miR-200b在乳腺癌诊断中的AUC为0.897(95%CI:0837～0.957)。miR-765联合miR-200b在乳腺癌诊断中的AUC为0.952(95%CI:0.941～0.990),两者联合优于单一检测miR-765或miR-200b。在乳腺癌患者中血清miR-765相对表达量与临床分期相关(t=3.222,P<0.05);miR-200b相对表达量与临床分期、淋巴结转移相关(t=1.855,3.987,P均<0.05)。结论乳腺癌患者血清miR-765与miR-200b表达水平显著降低,并与乳腺癌临床病理特征明显相关,血清miR-765与miR-200b联合检测具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 微小RNA-765 微小RNA-200b 实时荧光定量聚合酶链反应 乳腺癌
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社区源性艰难梭菌检测与毒素基因分析 被引量：2
11
作者 汪一萍 鲁勇 +3 位作者 郑瑞兵 梅冬 张建样 高燕 《中国卫生检验杂志》 CAS 2020年第22期2692-2694,共3页
目的了解社区来源粪便标本中艰难梭菌检出率和毒力基因情况。方法收集2016年4月-10月527份腹泻就诊人员非重复粪便标本,厌氧培养后,采用极速实时荧光定量方法对菌株直接进行毒素基因A、B(tcd A、tcd B基因)及二元毒素cdt AB基因扩增检测... 目的了解社区来源粪便标本中艰难梭菌检出率和毒力基因情况。方法收集2016年4月-10月527份腹泻就诊人员非重复粪便标本,厌氧培养后,采用极速实时荧光定量方法对菌株直接进行毒素基因A、B(tcd A、tcd B基因)及二元毒素cdt AB基因扩增检测;并对阳性菌株相对应粪便标本进行细菌DNA提取后,也进行上述3种基因扩增。结果 527份标本培养出26株(4.93%)艰难梭菌。检测发现其中25株A、B毒素基因均阳性,二元毒素均阴性;剩余的6号菌株B毒素基因和二元毒素基因阳性,A毒素基因阴性;另26份粪便标本核酸提取样本,扩增后发现有3份标本B毒素基因检测为阴性结果,二元毒素阳性的6号菌株对应粪便标本其B毒素基因也为阴性。结论本地区社区患者艰难梭菌携带率正常,极速荧光定量PCR技术直接检测粪便标本中的艰难梭菌毒力基因具有操作简单、准确快速等优势。 展开更多
关键词 艰难梭菌 毒素基因 社区 实时荧光定量聚合酶链反应
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实时荧光定量PCR在快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中的评价与应用 被引量：2
12
作者 乔昀 赵英妹 +2 位作者 仲俊 张珏 龚捷文 《检验医学》 CAS 2014年第7期745-749,共5页
目的评价实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)在快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的临床应用价值。方法经培养鉴定的70例已知细菌中22例为MRSA,48例为非MRSA,对已知细菌用实时荧光定量PCR进行检测,了解该方法的特异性和敏感性。对临... 目的评价实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)在快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中的临床应用价值。方法经培养鉴定的70例已知细菌中22例为MRSA,48例为非MRSA,对已知细菌用实时荧光定量PCR进行检测,了解该方法的特异性和敏感性。对临床88例医护人员和患者的鼻拭子进行实时荧光定量PCR检测,了解医院内MRSA的携带情况。结果培养为MRSA,实时荧光定量PCR检测结果均为MRSA,敏感性为100%;培养为非MRSA,实时荧光定量PCR检测结果均为非MRSA,特异性为100%。实时荧光定量PCR检测MRSA的敏感性可确定为1×103cfu/mL。48例患者的鼻拭子mecA耐药基因阳性26例,金黄色葡萄球菌阳性28例,两者同时阳性(即为MRSA)20例,MRSA阳性检出率为41.6%;40例医护人员鼻拭子mecA耐药基因阳性12例,金黄色葡萄球菌阳性13例,两者同时阳性(即为MRSA)9例,MRSA阳性检出率为22.5%。结论实时荧光定量PCR可用于临床对MRSA的快速检测。 展开更多
关键词 实时荧光定量聚合酶链反应 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 快速检测
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人腺病毒-B55实时荧光定量PCR扩增方法的建立
13
作者 董磊 刘娟 +3 位作者 艾现印 马红雨 全首祯 姜涛 《检验医学》 CAS 2019年第3期259-262,共4页
目的构建人腺病毒(HAdV)-B55的实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)扩增方法,并验证其检测性能。方法采用Beacon Designer 7软件设计针对HAdV-B55 Hexon基因序列的特异性引物,建立HAdV-B55的实时荧光定量PCR扩增方法,并评估其敏感性及特异性... 目的构建人腺病毒(HAdV)-B55的实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)扩增方法,并验证其检测性能。方法采用Beacon Designer 7软件设计针对HAdV-B55 Hexon基因序列的特异性引物,建立HAdV-B55的实时荧光定量PCR扩增方法,并评估其敏感性及特异性。结果建立了检测HAdV-B55的实时荧光定量PCR扩增方法,反应敏感性为0.08 PFU/反应体系,且特异性良好,与相关HAdV B组病毒均未检测到交叉反应。结论成功建立了针对我国HAdV-B55的特异性实时荧光定量PCR检测方法,为HAdV-B55的快速检测及防控提供了有力的支持。 展开更多
关键词 人腺病毒 实时荧光定量聚合酶链反应 快速检测
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实时荧光定量聚合酶链反应在检测大肠埃希菌引起血流感染中的应用
14
作者 张志明 朱建伟 李建平 《新乡医学院学报》 CAS 2011年第1期1-3,共3页
目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)在检测大肠埃希菌引起血流感染中的应用。方法从血培养阳性瓶中提取细菌基因组DNA,以大肠埃希菌特异性引物应用实时荧光定量,扩增16S rRNA靶片段,同期进行细菌培养鉴定,对比实验结果。结果通... 目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)在检测大肠埃希菌引起血流感染中的应用。方法从血培养阳性瓶中提取细菌基因组DNA,以大肠埃希菌特异性引物应用实时荧光定量,扩增16S rRNA靶片段,同期进行细菌培养鉴定,对比实验结果。结果通过对实时FQ-PCR体系特异性、敏感度、稳定性验证,结果表明具有较好的特异性、稳定性,最低检测限为106copies.L-1,相当于105CFU.L-1,并且整个实验可在2 h完成。结论实时FQ-PCR法可直接用于血培养阳性瓶的快速检测,也可用于分离菌株的鉴定,对诊断大肠埃希菌引起血流感染具有较好的应用价值。 展开更多
关键词 16S RRNA 大肠埃希菌 血流感染 实时荧光定量聚合酶链反应
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重症急性胰腺炎不同病程的细菌移位及肠道菌群组成结构的变化研究 被引量：18
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作者 满意 常加伟 汤亲青 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期71-76,共6页
目的探究重症急性胰腺炎(severe acte pancreatitis,SAP)大鼠肠道菌群结构、细菌移位随病程延长发生的改变。方法随机情况下将健康SD大鼠分为对照组(Control组n=10)、SAP组(n=30)。其中SAP组又分为6、12、24 h亚组(每亚组分别为10只大鼠... 目的探究重症急性胰腺炎(severe acte pancreatitis,SAP)大鼠肠道菌群结构、细菌移位随病程延长发生的改变。方法随机情况下将健康SD大鼠分为对照组(Control组n=10)、SAP组(n=30)。其中SAP组又分为6、12、24 h亚组(每亚组分别为10只大鼠)。按比例配置5%牛磺胆酸钠试剂,采用胰胆管逆行注射制作SAP模型。模型制备成功后分别于6、12、24 h后处死大鼠,检测血清淀粉酶、内毒素水平,观察胰腺及肠黏膜病理改变,用细菌培养法检测腹腔及脏器细菌移位率并用质谱仪鉴定培养出的阳性菌株,16S rDNA、实时荧光定量-聚合酶链式反应(real time-PCR)进行肠腔细菌定量分析。结果SAP组6、12、24 h亚组大鼠血清淀粉酶较对照组升高明显,且>3倍以上(U/L:2086±686 vs.8707±1672,9012±1505,8797±1298;P﹤0.01),胰腺组织及小肠黏膜出现明显病理损伤;随着病程延长,SAP组大鼠肠腔内大肠埃希菌不断增殖(×10^-5:4.53±1.26 vs.10.07±2.57,16.18±3.51,19.45±4.70;P﹤0.01),乳酸杆菌不断减少(×10^-3:23.12±4.46 vs.11.43±2.68,5.20±2.07.2.02±0.94;P﹤0.01),同样双歧杆菌也不断减少(×10^-5:23.30±6.00 vs.17.61±3.94,13.21±2.84,9.49±3.41;P﹤0.01);血清内毒素检测阳性率、肠系膜淋巴结及腹腔脏器细菌移位率均不断升高(血清内毒素:0 vs.30%,50%,60%;肝脏:0 vs.20%,50%,70%;胰腺:0 vs.30%,40%,60%;肠系膜淋巴结:0 vs.40%,70%,80%;P﹤0.01)。结论SAP大鼠肠道黏膜屏障受损,肠道菌群紊乱,肠腔内需氧菌与厌氧菌比例倒置,随着病程延长,以大肠埃希菌为主的条件致病菌不断增值,乳酸杆菌、双歧杆菌等厌氧益生菌不断减少,致使肠腔细菌及内毒素移位,其与SAP并发的胰腺及全身感染存在一定关系,且随着病程延长不断加重。 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎(SAP) 肠黏膜屏障 肠道微生态 16SrDNA 实时荧光定量-聚合酶链式反应(real time-PCR)
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红参中精氨酸双糖苷对小鼠的抗疲劳作用 被引量：13
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作者 黄宝亮 丁传波 +4 位作者 王佳奇 郑毅男 刘文丛 张晶 徐晓华 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期897-902,共6页
目的:观察小鼠强迫性游泳诱发的疲劳现象,探讨红参中非皂苷类物质——精氨酸双糖苷(AFG)对小鼠的抗疲劳作用及其初步机制。方法:从红参中分离出AFG提取物,将80只ICR小鼠分为空白对照组,低、中和高剂量(100、200和400mg·kg^(-1))AFG... 目的:观察小鼠强迫性游泳诱发的疲劳现象,探讨红参中非皂苷类物质——精氨酸双糖苷(AFG)对小鼠的抗疲劳作用及其初步机制。方法:从红参中分离出AFG提取物,将80只ICR小鼠分为空白对照组,低、中和高剂量(100、200和400mg·kg^(-1))AFG组,每组20只,连续灌胃给药28d后对小鼠进行强迫性游泳实验,检测各组小鼠体质量,脏器指数,强迫性游泳时间,乳酸(LD)、尿素氮(BUN)、肝糖原(Gly)水平及腓肠肌中PGC-1α基因表达水平。结果:与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠的体质量和脏器指数差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠强迫性游泳时间、Gly水平和PGC-1αmRNA基因表达水平均明显增加(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性;与空白对照组比较,低、中和高剂量AFG组小鼠血清中的LD和BUN水平明显降低(P<0.01)。结论:AFG对小鼠有抗疲劳作用,其机制可能与能量代谢有关。 展开更多
关键词 红参 精氨酸双糖苷 力竭性游泳 实时荧光定量聚合酶链反应 免疫印迹法
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不同中药复方对慢性心衰大鼠MMP-2、TIMP-2的影响 被引量：11
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作者 张艳 廖佳丹 王彩玲 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期409-412,I0002,共5页
目的研究基质金属蛋白酶2(MMP-2)及内源性基质金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP-2)在慢性心衰中的作用,从分子生物学角度探讨中药不同配伍对慢性心衰心室重构的影响,并进一步阐明其作用机理。方法以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等方法造... 目的研究基质金属蛋白酶2(MMP-2)及内源性基质金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP-2)在慢性心衰中的作用,从分子生物学角度探讨中药不同配伍对慢性心衰心室重构的影响,并进一步阐明其作用机理。方法以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等方法造成大鼠慢性心衰动物模型,分成模型组、西药组、益气中药组、活血中药组、益气活血中药组、益气活血利水中药组和正常组。利用实时荧光定量PCR技术及SABC免疫组化法检测慢性心衰大鼠MMP-2、TIMP-2表达的变化情况。结果慢性心衰动物模型组大鼠心肌MMP-2表达明显升高,TIMP-2表达降低,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.01);经过治疗,各用药组大鼠心肌组织MMP-2表达明显降低,TIMP-2表达升高,其中益气活血组、益气活血利水组与西药组比较,差异无统计学意义(P>0.05),且益气活血利水组疗效明显优于益气活血组(P<0.01)。结论益气活血利水中药作用于心肌组织,通过影响MMP-2、TIMP-2的表达,抑制或逆转心室重构的过程,从而达到治疗慢性心衰的目的。 展开更多
关键词 益气活血利水 实时荧光定量PCR 免疫组化法 基质金属白酶-2 基质金属蛋白酶组织抵 制剂-2 大鼠
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2020-2022年北京市通州区呼吸道感染患者呼吸道病原体流行特征分析 被引量：10
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作者 邹林 高翔 +6 位作者 张冲 佟玲 王建国 郗璐 张建明 刘永红 彭晓旻 《疾病监测》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期799-805,共7页
目的调查2020—2022年北京市通州区呼吸道传染病病原体的流行特征,为临床呼吸道感染疾病的诊断治疗和疫情防控提供参考依据。方法按照呼吸道感染病例纳入标准,收集2020年1月至2022年12月,到首都医科大学附属北京潞河医院就诊的1176例呼... 目的调查2020—2022年北京市通州区呼吸道传染病病原体的流行特征,为临床呼吸道感染疾病的诊断治疗和疫情防控提供参考依据。方法按照呼吸道感染病例纳入标准,收集2020年1月至2022年12月,到首都医科大学附属北京潞河医院就诊的1176例呼吸道感染患者的呼吸道样本,应用多重实时荧光聚合酶链式反应技术,对29种呼吸道感染病原体的核酸进行检测和数据分析。结果1176例样本中,检出26种呼吸道传染病病原体核酸阳性,病毒和细菌总检出率34.86%(410/1176),其中单一感染病毒类病原体98例(23.90%,98/410),单一感染细菌类病原体185例(45.12%,185/410),检出大于1种病原体的混合感染127例(30.98%,127/410),其中病毒+细菌混合感染39例(9.51%,39/410)、细菌+细菌混合感染88例(21.46%,88/410);<5、5~17、18~44、45~64、≥65岁年龄组检出率分别为30.77%(24/78)、35.59(42/118)、29.06%(120/413)、36.28%(78/215)、41.48%(146/352);上呼吸道和下呼吸道样本检出率分别为25.97%(195/751)和50.59%(215/425);按样本采集时间分组,检出率前2位的月份组分别是2020年1月,检出率84.00%(21/25),2021年12月,检出率59.78%(55/92)。结论2020年1月至2022年12月北京市通州区呼吸道传染病感染病毒情况明显减少,病原体以细菌类多见,混合感染情况占比较高,混合感染主要以细菌类混合感染为主,其中重症肺炎病例混合感染情况更加复杂多样,感染率最高的细菌类病原体是铜绿假单胞菌,老年人为易感人群且男性更易感染;春秋季节为感染的高发期。 展开更多
关键词 呼吸道感染 流行特征 多种病原体 实时荧光定量聚合酶链式反应
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荧光标志技术与PCR检验技术相结合在高危型人乳头瘤病毒诊断中的应用研究 被引量：11
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作者 时秀云 于欣 马苏琳 《中国现代药物应用》 2019年第19期6-8,共3页
目的探讨荧光标志技术与聚合酶链式反应(PCR)检验技术相结合(实时荧光定量PCR在高危型人乳头瘤病毒(HPV)诊断中的应用价值。方法 224例高危型HPV感染患者为研究对象,均分别进行实时荧光定量PCR检验与第二代杂交俘获试验(HC-Ⅱ)检测。比... 目的探讨荧光标志技术与聚合酶链式反应(PCR)检验技术相结合(实时荧光定量PCR在高危型人乳头瘤病毒(HPV)诊断中的应用价值。方法 224例高危型HPV感染患者为研究对象,均分别进行实时荧光定量PCR检验与第二代杂交俘获试验(HC-Ⅱ)检测。比较不同程度宫颈病变患者HPV检出情况;比较两种检测方法的HPV阳性检出率分析两种检测方法的一致性。结果 224例高危型HPV感染患者中, 76例患者存在不同程度的宫颈上皮内瘤变(CIN),其中CINⅠ级41例, CINⅡ级23例,CINⅢ级12例;72例患者为鳞状上皮病变和慢性宫颈炎。CIN各期患者的实时荧光定量PCR HPV检出率与HC-ⅡHPV检出率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);鳞状上皮病变和慢性宫颈炎患者的实时荧光定量PCR HPV检出率为62.5%,高于HC-Ⅱ的33.3%,差异具有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测的HPV阳性检出率为75.4%, HC-Ⅱ检测的HPV阳性检出率为62.9%,实时荧光定量PCR检测的HPV阳性检出率高于HC-Ⅱ检测,差异具有统计学意义(χ2=8.210, P<0.05)。两种检测方法的符合率为83.0%(186/224),一致性检验结果显示,两种检测方法的Kappa值为0.67,提示虽然阳性检出率存在差异,但两种检测方法仍具有较高的一致性。结论实时荧光定量PCR检测高危型HPV具有较高的特异性和灵敏度,临床诊断价值明显,在实验条件允许的情况下,可做为首选的HPV检验方法加以推广和应用。 展开更多
关键词 实时荧光定量聚合酶链式反应 高危型人乳头瘤病毒 第二代杂交俘获试验 诊断价值
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实时荧光定量PCR检测肝癌细胞多药耐药相关蛋白MRP2、MRP3及MRP5 mRNA的表达 被引量：9
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作者 张磊 方驰华 范应方 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期219-221,224,共4页
目的研究多药耐药相关蛋白2(MRP2)基因及MRP3、MRP5基因在正常肝脏细胞系L-02、肝癌细胞系BEL及肝癌耐药细胞系BEL/ADM的表达差异,并探讨其在肝癌耐药中的意义。方法分别提取L-02、BEL及BEL/ADM细胞的总RNA,利用实时荧光定量PCR法检测M... 目的研究多药耐药相关蛋白2(MRP2)基因及MRP3、MRP5基因在正常肝脏细胞系L-02、肝癌细胞系BEL及肝癌耐药细胞系BEL/ADM的表达差异,并探讨其在肝癌耐药中的意义。方法分别提取L-02、BEL及BEL/ADM细胞的总RNA,利用实时荧光定量PCR法检测MRP2、MRP3、MRP5基因的表达水平。结果MRP2基因在BEL/ADM细胞中的表达量明显高于在L-02、BEL细胞中的表达(P=0.000),而其在L-02、BEL两种细胞中的表达没有显著性差异(P=0.468);MRP3、MRP5基因表达量在L-02、BEL、BEL/ADM三种细胞中均有显著性差异(P=0.000)。结论MRP2可能参与了肝癌的内在性耐药,而MRP3、MRP5可能与肝癌的获得性耐药有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 多药耐药相关蛋白 实时荧光定量PCR
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