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阻滞和非阻滞品系小鼠体外发育2-细胞胚基因表达水平的比较
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作者 林翠英 史河秀 +3 位作者 张燕琴 姜雨飞 初晨凤 王世鄂 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期48-52,共5页
检测阻滞品系昆明小鼠和非阻滞品系B6C3F1小鼠体外发育2-细胞胚内基因表达水平的差异,探讨昆明小鼠植入前胚体外发育阻滞与哪些基因表达调控有关。方法:分别收集昆明小鼠和B6C3F1小鼠体外培养2-细胞胚,运用基因芯片分析和Real-timePC... 检测阻滞品系昆明小鼠和非阻滞品系B6C3F1小鼠体外发育2-细胞胚内基因表达水平的差异,探讨昆明小鼠植入前胚体外发育阻滞与哪些基因表达调控有关。方法:分别收集昆明小鼠和B6C3F1小鼠体外培养2-细胞胚,运用基因芯片分析和Real-timePCR验证。结果:基因芯片检测共筛出差异表达基因303个,其中昆明小鼠2-细胞胚表达上调基因有168个;下调基因有135个。昆明小鼠2-细胞胚表达上调的基因以信号转导、细胞周期、细胞结构和运动、细胞增殖和分化以及发育进程等为主;而下调基因与电子转移、蛋白质代谢和修饰、氨基酸代谢以及蛋白质靶向运输和定位等相关。结论:胚内能量供应不足和蛋白质合成障碍可能是昆明小鼠植入前胚体外发育出现2-细胞阻滞的重要原因。 展开更多
关键词 植入前胚 2-细胞阻滞 体外培养 小鼠 基因表达
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维生素E对附植前小鼠胚胎发育与一氧化氮生成的影响 被引量:3
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作者 杨青 薛立群 +2 位作者 刘斌 刘扬 袁安文 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期288-290,共3页
为了探讨维生素E对一氧化氮(NO)的产生及其对早期胚胎发育的影响,用Griess试剂法检测了附植前小鼠胚胎中一氧化氮的生成情况.结果表明,附植前胚胎中有NO的产生,且从第1天到第3天有逐渐上升的趋势,第4天有所下降.用抗氧化剂维生素E处理后... 为了探讨维生素E对一氧化氮(NO)的产生及其对早期胚胎发育的影响,用Griess试剂法检测了附植前小鼠胚胎中一氧化氮的生成情况.结果表明,附植前胚胎中有NO的产生,且从第1天到第3天有逐渐上升的趋势,第4天有所下降.用抗氧化剂维生素E处理后,NO的生成量下降,表明在附植前小鼠胚胎发育中维生素E对NO的产生可能起到一定的抑制作用. 展开更多
关键词 小鼠 附植前胚胎 维生素E 自由基 一氧化氮
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哺乳动物附植前胚胎细胞凋亡的研究进展 被引量:5
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作者 罗婷 蒙丽娜 +3 位作者 刘晓华 孙洪亮 陆凤花 石德顺 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第11期125-128,共4页
细胞凋亡是细胞为维持内环境稳定,更好地适应生存环境而主动形成的一种自我死亡过程,它涉及一系列基因的激活、表达及调控等作用。附植前的胚胎就已经观察到凋亡的发生,研究认为超出一程度的凋亡不利于胚胎的发育。作者主要对哺乳动物... 细胞凋亡是细胞为维持内环境稳定,更好地适应生存环境而主动形成的一种自我死亡过程,它涉及一系列基因的激活、表达及调控等作用。附植前的胚胎就已经观察到凋亡的发生,研究认为超出一程度的凋亡不利于胚胎的发育。作者主要对哺乳动物附植前胚胎发生凋亡的研究进行阐述,为改进体外培养体系、提高胚胎质量提供一定的理论依据。 展开更多
关键词 附植前胚胎 凋亡 研究进展
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热应激对奶牛卵母细胞及早期胚胎发育潜能的影响研究进展 被引量:1
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作者 徐竞宏 王少华 +1 位作者 李爽 张坤 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1-7,共7页
热应激是影响奶牛繁殖效率的重要因素之一,同时会导致奶牛产奶量下降,给全球奶业造成巨大的经济损失。随着全球气候变暖加剧,热应激影响奶牛繁殖率的问题日益凸显。目前热应激导致奶牛繁殖性能下降的具体机制尚不清楚,且缺乏热应激条件... 热应激是影响奶牛繁殖效率的重要因素之一,同时会导致奶牛产奶量下降,给全球奶业造成巨大的经济损失。随着全球气候变暖加剧,热应激影响奶牛繁殖率的问题日益凸显。目前热应激导致奶牛繁殖性能下降的具体机制尚不清楚,且缺乏热应激条件下提高母牛繁殖率的有效措施。有研究发现热应激会造成奶牛生理环境紊乱,损害卵母细胞的发育潜能,影响着床前胚胎的发育。本文综述了热应激影响奶牛卵泡生理环境、卵母细胞和着床前胚胎发育潜能的相关研究进展,为进一步探索热应激影响奶牛繁殖效率的机制以及研发相关的策略手段以减少热应激带来的经济损失提供参考。 展开更多
关键词 热应激 奶牛 繁殖性能 卵母细胞 着床前胚胎
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小鼠胚着床前线粒体的分布和超微结构变化 被引量:2
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作者 韩贻仁 赵晖 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期303-306,I017,共5页
为了解小鼠胚着床前细胞中线粒体的分布和超微结构的变化规律,观察了2细胞胚、4细胞胚、8细胞胚、桑椹胚、早期囊胚和晚期囊胚。2细胞期和桑椹胚期,线粒体绕胞核密集,在挤紧的8细胞胚中,线粒体在细胞接触面处的胞质边缘密集。... 为了解小鼠胚着床前细胞中线粒体的分布和超微结构的变化规律,观察了2细胞胚、4细胞胚、8细胞胚、桑椹胚、早期囊胚和晚期囊胚。2细胞期和桑椹胚期,线粒体绕胞核密集,在挤紧的8细胞胚中,线粒体在细胞接触面处的胞质边缘密集。囊胚期,滋养层细胞的线粒体在胞核周围较宽的区域中分布。囊胚经罗丹明123染色后,在荧光显微镜下显现为颗粒状。挤紧的8细胞胚,经秋水仙素(10mg/L)处理后,线粒体在胞质中变为弥散分布。电镜下可见从受精卵至4细胞期,线粒体呈球形、无嵴、中央有低电子密度区。8细胞期,线粒体呈球形或圆形,内部出现嵴。桑椹期至囊胚期,线粒体变长,呈杆状。 展开更多
关键词 线粒体 着床前胚 小鼠 胚胎发育 超微结构
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克服小鼠早期胚胎体外培养发育阻滞的研究 被引量:3
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作者 山灵 王勇胜 +2 位作者 高立功 丛银峰 张涌 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期4-7,共4页
为探讨不同培养基及共培养对克服小鼠早期胚胎体外发育阻滞的影响,用不同成分组成的5种常用培养液对小鼠早期胚胎进行体外培养,后以KSOM作为基础培养基,KSOMFBS为对照,分别与小鼠输卵管上皮细胞(MOEC)和卵丘细胞(CC)进行共培养... 为探讨不同培养基及共培养对克服小鼠早期胚胎体外发育阻滞的影响,用不同成分组成的5种常用培养液对小鼠早期胚胎进行体外培养,后以KSOM作为基础培养基,KSOMFBS为对照,分别与小鼠输卵管上皮细胞(MOEC)和卵丘细胞(CC)进行共培养,观察从2细胞发育到4细胞的胚胎数和囊胚数的变化。结果发现5种培养液中从2-细胞发育到4-细胞的胚胎率为30.5%~43.5%,差异不显著。KSOM组囊胚率为40.9%,显著高于其他各组(27.9%~30.0%)。共培养后,各组中克服发育阻滞的胚胎数和囊胚数均有显著提高,其中添加胎牛血清组4细胞胚胎数和囊胚数显著高于不添加组,输卵管上皮细胞组显著高于卵丘细胞组。结果显示共培养对克服小鼠2-细胞发育阻滞作用明显,添加胎牛血清效果明显好于不添加,输卵管上皮细胞共培养效果好于卵丘细胞。 展开更多
关键词 小鼠 早期胚胎 体外培养 发育阻滞
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性未成熟雌性小鼠孕前砷暴露导致植入前胚胎体外发育阻滞 被引量:4
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作者 张传领 刘春梅 +1 位作者 陆彩玲 马旭 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期841-846,共6页
目前研究发现妊娠期环境砷暴露可以导致其后代发育异常如不孕不育、流产、早产、胎儿生长受限、子代先天畸形及性别比例失调等生殖健康问题,而对孕前砷暴露对植入前胚胎发育的影响的研究还不充分.我们选用3~5周龄性未成熟雌性小鼠,按8m... 目前研究发现妊娠期环境砷暴露可以导致其后代发育异常如不孕不育、流产、早产、胎儿生长受限、子代先天畸形及性别比例失调等生殖健康问题,而对孕前砷暴露对植入前胚胎发育的影响的研究还不充分.我们选用3~5周龄性未成熟雌性小鼠,按8mg/kg亚砷酸钠(NaAsO2)剂量隔日腹腔注射1次,共注射8次.结果显示:孕前砷暴露导致小鼠植入前胚胎大部分阻滞在1-2细胞期.同时发现,这些阻滞的胚胎活性氧(ROS)水平明显升高,细胞色素C明显释放,细胞凋亡率明显升高.这些结果说明,孕前砷暴露通过氧化应激诱发胚胎凋亡导致植入前胚胎的发育阻滞,这也预示着孕前砷暴露将有可能导致育龄妇女受孕困难. 展开更多
关键词 植入前胚胎 体外受精 发育 凋亡
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氨基酸浓度对昆明小鼠胚胎体外发育的影响(英文) 被引量:1
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作者 邓星 王爽 +10 位作者 黄吴键 刘求真 谢卫兵 张庆凌 方唯意 刘腾飞 韩春 杜莎莎 吴丽莎 丁彦青 姚开泰 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期241-245,共5页
目的探讨培养液中氨基酸成分对植入前昆明小白鼠胚胎发育的影响,摸索植入前胚胎体外培养氨基酸的最佳浓度。方法从超排昆明小鼠输卵管中取出的630枚受精卵均分为7组,分别在经添加不同浓度Eagle's氨基酸的去牛血清白蛋白KSOM培养液(m... 目的探讨培养液中氨基酸成分对植入前昆明小白鼠胚胎发育的影响,摸索植入前胚胎体外培养氨基酸的最佳浓度。方法从超排昆明小鼠输卵管中取出的630枚受精卵均分为7组,分别在经添加不同浓度Eagle's氨基酸的去牛血清白蛋白KSOM培养液(mKSOM、mKSOM+1/16AA、mKSOM+1/8AA、mKSOM+1/4AA、mKSOM+1/2AA、mKSOM+ AA、mKSOM+2AA)中培养,对比观察各组胚胎体外发育的过程。用卡方检验分析添加各浓度氨基酸的培养液培养效率的差别,并将8细胞发育率和囊胚发育率分别与相应的氨基酸浓度进行曲线拟合分析。结果与未添加氨基酸组对比,添加氨基酸组胚胎发育率高,8细胞胚和囊胚的形成率与培养液中氨基酸的浓度关系均符合三次模型,在氨基酸为1/2浓度时8细胞胚和囊胚的形成率均达到最高。结论氨基酸对胚胎的体外发育有促进作用,但含有高浓度氨基酸的培养液培养效果反而有所下降,可能是由于高浓度的氨基酸影响胚胎的代谢和渗透压的改变,且氨基酸分解及胚胎代谢所产生的铵对胚胎有毒性作用。 展开更多
关键词 小鼠 植入前胚胎 发育 氨基酸
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Molecules and mechanisms controlling the active DNA demethylation of the mammalian zygotic genome 被引量:1
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作者 Jun-Yu Ma Teng Zhang +2 位作者 Wei Shen Heide Schatten Qing Yuan Sun 《Protein & Cell》 SCIE CAS CSCD 2014年第11期827-836,共10页
The active DNA demethylation in early embryos is essential for subsequent development. Although the zygotic genome is globally demethylated, the DNA methylation of imprinted regions, part of repeat sequences and some ... The active DNA demethylation in early embryos is essential for subsequent development. Although the zygotic genome is globally demethylated, the DNA methylation of imprinted regions, part of repeat sequences and some gamete-specific regions are maintained. Recent evidence has shown that multiple proteins and biological pathways participate in the regulation of active DNA demethylation, such as TET proteins, DNA repair pathways and DNA methyltransferases. Here we review the recent understanding regarding proteins associated with active DNA demethylation and the regulatory networks controlling the active DNA demethylation in early embryos. 展开更多
关键词 active DNA demethylation ZYGOTE 5-hmC5-mC preimplantation embryo TET proteins
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成纤维细胞生长因子受体-1、2和3在昆明小鼠卵母细胞和植入前胚中的表达与分布 被引量:3
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作者 吕俊杰 张卫玉 +4 位作者 林翠英 谢美容 王建新 王章敬 王世鄂 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期296-298,332,F0002,共5页
目的:观察成纤维细胞生长因子受体(FGFR)-1、2和3在昆明小鼠卵母细胞和植入前胚中的表达和分布,为进一步探讨成纤维细胞生长因子(FGF)对昆明小鼠卵母细胞和植入前胚发育的影响提供实验依据。方法:逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR... 目的:观察成纤维细胞生长因子受体(FGFR)-1、2和3在昆明小鼠卵母细胞和植入前胚中的表达和分布,为进一步探讨成纤维细胞生长因子(FGF)对昆明小鼠卵母细胞和植入前胚发育的影响提供实验依据。方法:逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫荧光细胞化学显色和共聚焦扫描显微镜观察。结果:RT-PCR检测显示,FGFR1、FGFR2和FGFR3mRNA在昆明小鼠卵母细胞和植入前胚均有表达;免疫荧光细胞化学显色、共聚焦扫描显微镜观察显示FGFR1、FGFR3免疫阳性反应见于卵母细胞和植入前胚胞质周边,靠近细胞膜;FGFR2阳性反应较均匀分布于卵母细胞和植入前胚的胞质。结论:FGFR1、FGFR2、FGFR3在小鼠卵母细胞和植入前胚发育的不同阶段都有表达,可能介导FGF调节小鼠卵母细胞和植入前胚的发育。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子受体 卵母细胞 植入前胚 小鼠
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GRIM-19在小鼠植入前胚胎中的表达及其作用 被引量:3
11
作者 崔文娟 邓晓惠 +5 位作者 晁岚 沈彦军 杨芳 冯文娟 徐静 陈红蕾 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期97-101,共5页
目的通过研究干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因(GRIM-19)在小鼠植入前胚胎中的表达及其与胚胎质量之间的相关性,探讨GRIM-19在小鼠植入前胚胎发育中的作用。方法采用实时定量PCR,检测小鼠植入前胚胎(2-细胞期、4-细胞期、8-... 目的通过研究干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因(GRIM-19)在小鼠植入前胚胎中的表达及其与胚胎质量之间的相关性,探讨GRIM-19在小鼠植入前胚胎发育中的作用。方法采用实时定量PCR,检测小鼠植入前胚胎(2-细胞期、4-细胞期、8-细胞期、桑葚胚和囊胚)中GRIM-19 mRNA水平(n=16);将小鼠8-细胞期胚胎按卵裂球大小、形态、透明带、胞质碎片分为优胚组和非优胚组,分别检测两组胚胎GRIM-19mRNA水平,并分析其相关性(n=13);制作假孕鼠(23只),并随机分为A组(12只)和B组(11只),采用移植器将优质和非优质8-细胞期胚胎移入假孕鼠的子宫内,观察两组雌鼠妊娠率及产仔率。结果 GRIM-19在小鼠植入前各期胚胎中均有表达,其mRNA水平从2-细胞期逐渐增高,至8-细胞期达高峰,随后呈下降趋势。优质8-细胞胚胎的GRIM-19 mRNA水平明显高于非优胚组(P<0.05)。两组8-细胞胚胎移植后,A组雌鼠妊娠率及产仔率显著高于B组雌鼠(P<0.05)。结论小鼠植入前胚胎中GRIM-19的表达量随发育时程的改变而变化,且与胚胎质量密切相关。 展开更多
关键词 干扰素 维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因 植入前胚胎 线粒体 实时定量PCR 小鼠
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牦牛卵母细胞及体外受精胚胎早期发育基因差异表达的研究 被引量:2
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作者 郭宪 丁学智 +2 位作者 王宏博 包鹏甲 阎萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1576-1581,共6页
旨在了解牦牛卵母细胞、早期胚胎不同发育阶段相关基因mRNA表达规律,为早期胚胎发育基因表达的调控机制提供分子依据。应用mRNA差异显示技术选取表达量存在差异的基因条带,进行测序和同源性分析,并利用RT-PCR技术检测差异基因在卵母细胞... 旨在了解牦牛卵母细胞、早期胚胎不同发育阶段相关基因mRNA表达规律,为早期胚胎发育基因表达的调控机制提供分子依据。应用mRNA差异显示技术选取表达量存在差异的基因条带,进行测序和同源性分析,并利用RT-PCR技术检测差异基因在卵母细胞、2-细胞、8-细胞和囊胚中的相对表达水平。结果表明:4条差异条带中,除桑椹胚期1个基因在GenBank中未检测到同源性外,其余3个基因分别与锌指MYND11(ZMYND11)、核小体组装蛋白1样1(NAP1L1)、核糖体蛋白L27(RPL27A)高度同源。ZMYND11基因在成熟卵母细胞、2-细胞、8-细胞、囊胚阶段其表达量呈上升趋势,但无显著性差异。NAP1L1基因在成熟卵母细胞、2-细胞、囊胚阶段其表达量相对较低,而在8-细胞表达量急剧升高(P<0.05)。RPL27A基因从成熟卵母细胞经2-细胞到8-细胞随胚胎发育进程表达量逐渐降低,到囊胚期表达量显著升高(P<0.05)。基因ZMYND11、RPL27A和NAP1L1在牦牛卵母细胞和早期胚胎发育过程中mRNA表达量存在时间性差异,可能与早期胚胎的正常发育及不同的生理活动有关。 展开更多
关键词 牦牛 早期胚胎 胚胎发育 基因表达
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Insulin-like Growth Factor-I (IGF-I) in Reproduction System of Female Bovine
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作者 QI Meiyu ZviRoth LIU Di 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2011年第4期84-87,共4页
Insulin-like growth factor-I (IGF-I) plays a key role in female reproduction, because it has the effect of anti-apoptosis improving cell proliferation, transformation and differentiation. This paper reviewed the eff... Insulin-like growth factor-I (IGF-I) plays a key role in female reproduction, because it has the effect of anti-apoptosis improving cell proliferation, transformation and differentiation. This paper reviewed the effects of IGF-I on ovary, follicle growth, acquisition of oocyte competence and preimplantation embryo viability, and then summarized different points about IGF-1 for reproduction system 展开更多
关键词 IGF-1 BOVINE reproduction system OVARY follicle OOCYTE preimplantation embryo
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葡萄糖代谢对卵母细胞成熟和植入前胚胎发育的影响 被引量:2
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作者 邵淑敏 张玲 《生殖医学杂志》 CAS 2013年第5期379-382,共4页
葡萄糖主要通过糖酵解途径、磷酸戊糖途径、己糖胺生物合成途径和多元醇途径进行代谢,在卵母细胞发育成熟及植入前胚胎发育过程中起重要作用。葡萄糖代谢异常,可导致卵母细胞成熟障碍和胚胎发育异常。本文对上述四条葡萄糖代谢途径在卵... 葡萄糖主要通过糖酵解途径、磷酸戊糖途径、己糖胺生物合成途径和多元醇途径进行代谢,在卵母细胞发育成熟及植入前胚胎发育过程中起重要作用。葡萄糖代谢异常,可导致卵母细胞成熟障碍和胚胎发育异常。本文对上述四条葡萄糖代谢途径在卵母细胞和植入前胚胎发育过程中的作用进行综述。进一步研究卵母细胞成熟和植入前胚胎发育过程中葡萄糖代谢途径的调控机制,有利于改善卵母细胞体外成熟和胚胎的培养条件,提高体外培养的卵母细胞和胚胎的发育能力。 展开更多
关键词 葡萄糖代谢 卵母细胞 植入前胚胎 发育能力
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热应激对小鼠卵母细胞和附植前胚胎及其生长内环境氧化损伤的影响 被引量:2
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作者 李辉辉 田文儒 +2 位作者 张志宏 张启耀 高善颂 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期2244-2249,共6页
【目的】研究热应激对机体(肝脏)以及生殖系统氧化、卵母细胞和附植前胚胎氧化及发育能力的影响,探讨热应激影响卵母细胞及附植前胚胎发育能力的机制。【方法】分别用总谷胱甘肽和微量丙二醛测定试剂盒检测热应激后小鼠卵母细胞、附植... 【目的】研究热应激对机体(肝脏)以及生殖系统氧化、卵母细胞和附植前胚胎氧化及发育能力的影响,探讨热应激影响卵母细胞及附植前胚胎发育能力的机制。【方法】分别用总谷胱甘肽和微量丙二醛测定试剂盒检测热应激后小鼠卵母细胞、附植前胚胎和组织器官内总谷胱甘肽(totalGlutathione,TGSH)、丙二醛(MDA)的含量,并且观察后续胚胎的发育情况。【结果】母体经35℃处理6和12h后,其体内的卵母细胞(6h)和发育至1~3d的胚胎(桑椹胚前期,12h)的后续胚胎发育率显著降低,胚胎中TGSH含量下降(P<0.01)、MDA含量升高(P<0.01),卵母细胞中二者的含量未有变化;发育至第4天、第5天的胚胎(桑椹胚和囊胚)中TGSH和MDA的含量及胚胎发育率均未有变化(P>0.05);发育至第1~5天的体外培养的胚胎分别经39℃处理12h后,胚胎中TGSH和MDA及其发育率均未有变化(P>0.05);随着热应激温度升高和时间的延长,肝脏和输卵管中TGSH显著降低、MDA显著升高;当温度达到41℃时,卵巢和子宫中TGSH显著降低、MDA显著升高。【结论】桑椹胚以前的胚胎遭受母体热应激后,发育能力降低,这与热应激所诱导的氧化损伤密切相关,但是母体热应激后卵母细胞后续胚胎的发育能力降低与氧化损伤无关。体外培养的胚胎经39℃处理12h后,对附植前胚胎氧化损伤和孵出率均无影响。 展开更多
关键词 热应激 卵母细胞 附植前胚胎 氧化损伤 发育能力
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小鼠植入前胚胎紧密化相关基因Crg1的克隆
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作者 李汶 卢光琇 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第3期246-250,共5页
从已获得的运用抑制消减杂交技术 (SuppressionSubtractiveHybridization ,SSH)分离、克隆和筛选代表 8 细胞早期胚胎和紧密化 8 细胞胚胎差别表达基因的ESTs片段 (GenBank登录号 :BQ740 2 63、BQ740 2 51)入手 ,经比较二者的同源性发... 从已获得的运用抑制消减杂交技术 (SuppressionSubtractiveHybridization ,SSH)分离、克隆和筛选代表 8 细胞早期胚胎和紧密化 8 细胞胚胎差别表达基因的ESTs片段 (GenBank登录号 :BQ740 2 63、BQ740 2 51)入手 ,经比较二者的同源性发现这两个EST末端反向互补 ,拼接成一个cDNA片段 ,经分析此序列包含一个完整的阅读框 ,提交给GenBank ,登录号为AY13 4 859。根据此序列设计引物从小鼠 8 细胞紧密化胚胎cDNA中经PCR扩增出目的片段 ,克隆入pUCm T载体后测序而获得全长cDNA ,为小鼠植入前胚胎紧密化相关基因Crg1,分析比较证明Crg1基因与AY13 4 859基本吻合。Crg1基因的cDNA全长为 810bp ,只有一个外显子 ,编码由 150个氨基酸组成 ,分子量理论值为 17 67kD的蛋白质。与最新的小鼠基因组工作草图进行电子杂交 ,该基因被定位在小鼠的 14号染色体上。RT PCR实验证明在小鼠植入前各个时期的胚胎、小鼠胚胎干细胞中均有表达 ,在小鼠胚胎成纤维细胞中没有表达。半定量RT PCR实验证明Crg1基因在紧密化胚胎中表达较 8 细胞胚胎高。采用Northern blot手段分析Crg1基因在成年小鼠的 8种组织中的表达情况 ,结果表明该基因只在小鼠卵巢中有微弱的表达 ,转录本大小为 1 2kb ,而在成年小鼠的脑、心脏、肾、睾丸、肝脏、肺、 展开更多
关键词 基因克隆 植入前胚胎 紧密化 RT—PCR
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FGF10对小鼠植入前胚体外发育及2-细胞胚内G蛋白偶联受体30表达的影响 被引量:2
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作者 逄丽丽 刘玥 +5 位作者 许颂华 程霄翔 连秀丽 徐渝婷 林凌 王世鄂 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期299-303,共5页
目的观察成纤维细胞生长因子10(FGF10)对小鼠受精卵体外发育和2-细胞胚内G蛋白偶联受体30(GPR30)水平的影响,为进一步探讨FGF10在小鼠植入前胚体外发育中的作用提供依据。方法以M16培养液为对照组,M16中分别添加不同浓度的FGF10为实验组... 目的观察成纤维细胞生长因子10(FGF10)对小鼠受精卵体外发育和2-细胞胚内G蛋白偶联受体30(GPR30)水平的影响,为进一步探讨FGF10在小鼠植入前胚体外发育中的作用提供依据。方法以M16培养液为对照组,M16中分别添加不同浓度的FGF10为实验组,收集昆明(KM)雌性小鼠与KM雄性小鼠交配所得的受精卵,分别观察各组受精卵体外发育情况。收集KM小鼠受精卵,分别置于M16和含不同浓度FGF10的M16培养液中培养,获取体外发育的2-细胞胚,采用免疫荧光染色结合激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内GPR30水平。结果添加FGF10实验组发育到4-细胞胚、桑葚胚和囊胚的比率明显高于对照组,其中以添加浓度为10ng/ml的FGF10实验组的效果最明显。免疫荧光染色结果显示,10ng/ml的FGF10实验组体外发育2-细胞胚内GPR30免疫荧光染色强度明显高于对照组。结论 FGF10可促进KM小鼠植入前胚的体外发育,其作用可能与上调2-细胞胚内GPR30有关。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子10 植入前胚 体外发育 小鼠 G蛋白偶联受体30
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Gas6在猪卵母细胞及早期胚胎中表达模式与功能的初步研究 被引量:1
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作者 李志鹏 雷小灿 +4 位作者 陆杏蓉 朱鹏 崔奎青 石德顺 刘庆友 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期869-876,共8页
该研究通过免疫组化和QRT-PCR等方法系统分析了Gas6(growth arrest-special gene 6)基因在猪卵泡发生及早期胚胎发育过程中的表达规律,并提出了一种改良猪卵母细胞体外成熟系统的方法。研究结果显示,Gas6基因表达于猪卵巢中的卵母细胞... 该研究通过免疫组化和QRT-PCR等方法系统分析了Gas6(growth arrest-special gene 6)基因在猪卵泡发生及早期胚胎发育过程中的表达规律,并提出了一种改良猪卵母细胞体外成熟系统的方法。研究结果显示,Gas6基因表达于猪卵巢中的卵母细胞细胞核及其周围的卵丘细胞,在卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育过程中始终有表达,且在囊胚中表达最高。Gas6 mRNA在卵母细胞成熟过程中始终存在,但在孤雌激活后迅速消失,直到发育到囊胚时再次出现。在猪卵母细胞体外培养系统中添加不同浓度的Gas6重组蛋白培养卵母细胞,发现添加Gas6重组蛋白对卵母细胞的极体率无显著影响;但是当添加浓度为100 ng/mL时,培养的卵母细胞孤雌激活后分裂率、囊胚率及囊胚细胞数都显著增高。Gas6可能是通过改善卵母细胞细胞质的成熟质量提高卵母细胞的发育潜能,从而获得了更多、更好的胚胎。 展开更多
关键词 GAS6 卵泡发生 早期胚胎
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WY14643对附植前小鼠胚胎体外发育及活性氧的影响 被引量:1
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作者 胡德宝 庄利利 +3 位作者 张日欣 张也 李钟淑 方南洙 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期167-171,共5页
为研究人工合成的过氧化物酶体增值物激活受体α特异性受体激活剂(WY14643)对附植前小鼠胚胎体外发育的影响,以及WY14643对附植前小鼠胚胎内部活性氧的影响,通过H2O2诱导建立胚胎氧化损伤模型,添加不同浓度WY14643对胚胎进行体外培养,利... 为研究人工合成的过氧化物酶体增值物激活受体α特异性受体激活剂(WY14643)对附植前小鼠胚胎体外发育的影响,以及WY14643对附植前小鼠胚胎内部活性氧的影响,通过H2O2诱导建立胚胎氧化损伤模型,添加不同浓度WY14643对胚胎进行体外培养,利用2’7’二氯荧光素二乙酸盐(DCHFDA)测定胚胎内部H2O2含量。结果表明:不同浓度WY14643处理2 h后,0.1μmol/L WY14643处理组4-细胞发育率、囊胚率显著高于其他各组(P<0.05);经0.1μmol/L WY14643和H2O2联合处理后,其胚胎发育率显著高于单独H2O2处理组和对照组(P<0.05);DCHFDA荧光检测发现,WY14643添加组胚胎内部各时期H2O2水平显著低于其他各组(P<0.05),并且胚胎内部H2O2呈一定的变化规律。说明适宜浓度的WY14643能够增加体外发育胚胎的发育率,减少胚胎内部活性氧水平,并且胚胎内部H2O2水平在4-细胞时期达到最高,囊胚时期显著下降。 展开更多
关键词 WY14643 H2O2 早期胚胎 发育能力
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KDM2B在小鼠卵母细胞及早期胚胎发育过程中的表达分析 被引量:1
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作者 杨显英 熊显荣 +4 位作者 韩杰 黄向月 王艳 阿果约达 李键 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期86-93,共8页
本研究旨在分析KDM2B在小鼠卵母细胞和早期胚胎中的表达规律,为KDM2B在卵母细胞减数分裂及胚胎发育过程中的生物学作用奠定基础。选择20只6~8周龄小鼠为试验动物,收集GV期、MⅡ期卵母细胞、2-细胞、4-细胞、8-细胞、囊胚各阶段胚胎,根... 本研究旨在分析KDM2B在小鼠卵母细胞和早期胚胎中的表达规律,为KDM2B在卵母细胞减数分裂及胚胎发育过程中的生物学作用奠定基础。选择20只6~8周龄小鼠为试验动物,收集GV期、MⅡ期卵母细胞、2-细胞、4-细胞、8-细胞、囊胚各阶段胚胎,根据GenBank上已公布的小鼠(Mus musculus)KDM2B序列设计引物,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测KDM2B在胚胎各阶段mRNA的表达水平;通过免疫荧光染色定位KDM2B蛋白在胚胎各阶段的分布。结果显示,GV期卵母细胞KDM2B mRNA的表达量极显著高于MⅡ期(P<0.01);在2-细胞、4-细胞和8-细胞mRNA表达量较低,囊胚期其表达量极显著升高(P<0.01);卵母细胞成熟过程中,KDM2B在GV期主要表达于细胞核中,MⅡ期卵母细胞核中的荧光信号极显著减弱(P<0.01),早期胚胎发育过程中,KDM2B蛋白在2-细胞、4-细胞、8-细胞胚胎中均不表达,囊胚期重新表达于细胞核。综上表明,本研究成功建立KDM2B在小鼠卵母细胞及胚胎细胞中的时空及时序表达模式,关于KDM2B参与调控减数分裂与胚胎发育过程具体的作用机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 KDM2B 卵母细胞 着床前胚胎 表达谱
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