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用花粉管通道法将bar基因导入水稻获得可遗传的转基因植株 被引量:24
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作者 王才林 赵凌 +6 位作者 宗寿余 吕川根 邹江石 朱卫民 何小兰 黄骏麒 龚蓁蓁 《江苏农业学报》 CSCD 2002年第3期129-133,共5页
利用花粉管通道法将抗Basta除草剂的bar基因导入水稻品系“E32” ,获得转基因植株。抗性鉴定表明 ,转基因植株能充分表达对Basta除草剂的抗性 ;通过对转基因植株后代进行PCR分析 ,证实bar基因已整合到受体植株的基因组中。遗传分析表明 ... 利用花粉管通道法将抗Basta除草剂的bar基因导入水稻品系“E32” ,获得转基因植株。抗性鉴定表明 ,转基因植株能充分表达对Basta除草剂的抗性 ;通过对转基因植株后代进行PCR分析 ,证实bar基因已整合到受体植株的基因组中。遗传分析表明 ,bar基因能在有性生殖过程中传递给后代 ,并在T3 展开更多
关键词 水稻 花粉管通道法 BAR基因 转基因植株 基因转化
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花粉管通道法转基因育种研究进展 被引量:14
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作者 简纯平 李开绵 欧文军 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2012年第5期956-961,共6页
介绍花粉管通道法的创立与发展、转化方法与转化机理,综述应用此方法在主要农作物育种中所取得的最新研究进展,并探讨该技术在运用中存在的主要问题和应用前景。
关键词 花粉管通道法 育种 研究进展
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花粉管通道法转化影响因素的分析 被引量:12
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作者 刘明 杨君 安利佳 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第12期3483-3483,3523,共2页
花粉管通道法转化过程中外源基因转化途径、转化受体细胞、转化时间是重要的影响因素;结合大豆花粉管通道形成与受精过程,突出受体细胞的感受态的获得,对转化操作要点加以分析,为花粉管通道法的进一步研究指明方向。
关键词 花粉管通道法 转化途径 转化受体细胞 转化时间 受体细胞感受态
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五种常用的植物转基因技术 被引量:10
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作者 汪由 吴禹 +2 位作者 王岩 李兆波 王光霞 《杂粮作物》 CAS 2010年第3期186-189,共4页
从原理、基本步骤和优缺点等几个方面对农杆菌介导法、基因枪法、超声波介导法、子房注射法和花粉管通道法等5种常用的植物转基因技术进行了简要介绍。
关键词 农杆菌介导法 基因枪法 超声波介导法 子房注射法 花粉管通道法 原理 基本步骤 优缺点
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利用反义RNA技术分析春化相关基因VER17在冬小麦花发育过程中的功能 被引量:8
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作者 徐文忠 雍伟东 +6 位作者 徐云远 梁铁兵 白薇 种康 谭克辉 许智宏 朱至清 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期71-77,共7页
为了研究小麦春化相关基因VER17的功能,应 用反义RNA技术,将VER17基因的反义片段构建到载 体pBI121上,通过花粉管通道法获取转基因小麦。对 T0代转基因植株GUS染色以及PCR等分子鉴定,得到 14株含反义VER17基因片段的阳性转基因植株。对... 为了研究小麦春化相关基因VER17的功能,应 用反义RNA技术,将VER17基因的反义片段构建到载 体pBI121上,通过花粉管通道法获取转基因小麦。对 T0代转基因植株GUS染色以及PCR等分子鉴定,得到 14株含反义VER17基因片段的阳性转基因植株。对T0 代和T1代的表型观察结果显示,VER17反义转基因植 株开花时间延迟,并且穗的顶部和基部小花出现明显 的退化。表明春化相关基因VER17在小麦发育过程中 可能起到促进植物开花以及穗顶端和基部花发育的作 用,减少小花退化,同时对雄蕊的发育也有影响。 展开更多
关键词 春化作用 反义转基因小麦 花粉管通道法 VER17
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用花粉管通道法将慈姑蛋白酶抑制剂基因(API)导入水稻获得转基因植株 被引量:5
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作者 王才林 朱镇 +8 位作者 赵凌 张亚东 林静 张所兵 陈涛 刘贤进 王冬兰 黄骏麒 龚蓁蓁 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期245-248,共4页
采用花粉管通道法遗传转化技术,将慈姑蛋白酶抑制剂基因(API)导入水稻品系9311中,获得了转基因植株。抗虫性鉴定结果表明:部分转基因植株对水稻螟虫的抗性比对照明显提高;PCR扩增获得了与引物扩增片段长度相同的DNA片段,证实API基因已... 采用花粉管通道法遗传转化技术,将慈姑蛋白酶抑制剂基因(API)导入水稻品系9311中,获得了转基因植株。抗虫性鉴定结果表明:部分转基因植株对水稻螟虫的抗性比对照明显提高;PCR扩增获得了与引物扩增片段长度相同的DNA片段,证实API基因已整合到受体植株的基因组中。遗传分析表明,API基因能在有性生殖过程中传递给后代,并于T4代分离出抗性纯合的株系。 展开更多
关键词 水稻 抗虫 慈姑蛋白酶抑制剂基因 转基因植株 花粉管通道法
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转基因抗早衰棉的获得 被引量:10
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作者 李静 沈法富 +1 位作者 于东海 韩秀兰 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第8期1419-1423,共5页
利用花粉管通道技术将含有抑制衰老嵌合基因PCSAG12-ipt的pBG121质粒转入早衰型陆地棉品种中棉所10号中,通过对T1代植株进行卡那霉素田间筛选、PCR检测及GUS组织化学染色,获得了12株转基因棉花.在棉花发育进入衰老时期,对转基因植株进... 利用花粉管通道技术将含有抑制衰老嵌合基因PCSAG12-ipt的pBG121质粒转入早衰型陆地棉品种中棉所10号中,通过对T1代植株进行卡那霉素田间筛选、PCR检测及GUS组织化学染色,获得了12株转基因棉花.在棉花发育进入衰老时期,对转基因植株进行叶绿素和细胞分裂素含量的测定及形态观察,结果表明转基因植株的衰老得到延迟. 展开更多
关键词 棉花 花粉管通道法 异戊烯基转移酶 抗早衰
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Analyses of Protein and Oil of Maize Offsprings Plants Introducing Soybean DNA 被引量:8
8
作者 张慧英 田夏红 +1 位作者 冯锐 刘爱花 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第6期74-77,共4页
[Objective] The experiment was aimed to explore character variation between different families after DNA introduction and select variant plants with good stability. [Method] The method of pollen-tube-pathway was used ... [Objective] The experiment was aimed to explore character variation between different families after DNA introduction and select variant plants with good stability. [Method] The method of pollen-tube-pathway was used to introduce total DNA of soybean into normal maize inbred line 7313 for selecting generation by generation. When field characters of maize, grain colors, grain traits and panicle axis colors were stable, the crude protein, gliadin, glutelin and oil content of grains which were selected from variant strains were detected and compared. [Result] The grain crude protein, gliadin, glutelin and oil content of line 26h-4-3 were significantly different from these of control treatment. The increments of D3 and D4 generation were 10.34% and 26.70%, 6.58% and 6.28%, 15.09% and 70.34%, 55.82% and 51.52% respectively. All indexes of line 26h-3-1 were also higher than these of control treatment and the increments of D3 and D4 generation were 5.67% and 21.63%,1.91% and 2.31%, 10.85% and 62.27%,22.49% and 9.67%. [Conclusion] The crude protein, gliadin, glutelin and oil content of variant line 26h-4-3 and 26h-3-1 were stable, so variant line 26h-4-3 and 26h-3-1 were excellent variant strains which satisfied the requirement of high protein breeding. 展开更多
关键词 SOYBEAN DNA method of pollen-tube-pathway MAIZE INBRED line Protein OIL
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小麦花粉管途径转化及高效筛选体系的建立 被引量:6
9
作者 黄益洪 刘春光 +5 位作者 马鸿翔 刘根齐 周淼平 孙勇如 余桂红 陆维忠 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第6期777-782,共6页
本文报道了一种从大量花粉管途径转化处理后代中快速有效地筛选到转基因植株的方法。转化质粒为含bar筛选标记基因的天麻抗真菌蛋白(GAFP)与兔防御素(NP-1)双价抗病基因植物表达载体(pBI35S-gafp-NP1-bar),受体小麦品种为扬麦158和Alon... 本文报道了一种从大量花粉管途径转化处理后代中快速有效地筛选到转基因植株的方法。转化质粒为含bar筛选标记基因的天麻抗真菌蛋白(GAFP)与兔防御素(NP-1)双价抗病基因植物表达载体(pBI35S-gafp-NP1-bar),受体小麦品种为扬麦158和Alondra。对花粉管途径转化处理获得的种子分3步进行筛选鉴定:首先,转化处理种子密播于塑料盘中,待小苗长到3叶期时,用浓度为120mg/L的Basta除草剂弥雾喷施筛选,约10d后绝大部分小苗变黄枯死,只有约1%的高抗Basta除草剂的T0小苗存活;然后对其Basta抗性植株用gafp基因引物进行PCR检测,其中62.5%的Basta抗性植株为PCR阳性;最后将T0代PCR阳性植株后代种子(T1)分别发芽并按株系混合取样提取DNA,分别用gafp和bar基因引物进行PCR检测验证,结果均为阳性。表明外源基因已整合入小麦基因组并由T0代植株稳定遗传到T1代,同时证明该筛选方法是可靠有效的。 展开更多
关键词 小麦 花粉管途径 基因转化 筛选体系 天麻抗真菌蛋白基因 兔防御素基因 BAR基因
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花粉管介导的转抗冻蛋白基因(AFP)水稻 被引量:6
10
作者 赵凌 王才林 +4 位作者 张亚东 朱镇 杨杰 黄骏麒 龚蓁蓁 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期315-317,共3页
低温和冷害在世界范围内广泛发生,对水稻的产量和品质造成严重影响。创造和培育具有强耐低温特性的水稻品种,对提高水稻产量具有重要的意义。本研究将从胡萝卜中克隆的抗冻蛋白基因(AFP)构建到植物表达载体pB I121(pB I121∶AFP)后,利... 低温和冷害在世界范围内广泛发生,对水稻的产量和品质造成严重影响。创造和培育具有强耐低温特性的水稻品种,对提高水稻产量具有重要的意义。本研究将从胡萝卜中克隆的抗冻蛋白基因(AFP)构建到植物表达载体pB I121(pB I121∶AFP)后,利用花粉管通道法将其转入籼稻品种NR158,获得了转基因后代。对T3代和T4代转基因植株的苗期耐冷性鉴定和PCR鉴定结果表明,部分转基因植株后代已经整合并且AFP基因得到了表达,获得了不同程度的耐低温性。 展开更多
关键词 水稻(Oryza SATIVA L) 花粉管通道法 耐低温性 抗冻蛋白基因(AFP) 转基因植株
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花粉管通道法验证花生Oleosin基因启动子的特异性表达 被引量:8
11
作者 范乾程 谭玲玲 +3 位作者 王亚 乔利仙 王晶珊 隋炯明 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第12期52-56,共5页
油体蛋白(Oleosin)是一类覆盖在油体表面且仅在种子中特异表达的低分子质量蛋白,能维护油体的稳定性。研究利用花生Oleosin基因的启动子替换了pCAMBIA1301的35S启动子,构建了重组表达载体pCAMBIA1301-Oleosin-pro,并利用花粉管通道法导... 油体蛋白(Oleosin)是一类覆盖在油体表面且仅在种子中特异表达的低分子质量蛋白,能维护油体的稳定性。研究利用花生Oleosin基因的启动子替换了pCAMBIA1301的35S启动子,构建了重组表达载体pCAMBIA1301-Oleosin-pro,并利用花粉管通道法导入花生。对T0代转基因植株进行了PCR鉴定和GUS组织化学染色,结果显示:50株转基因植株有9株能扩增出目的条带,阳性率为18%,9株阳性转基因植株中有5株的子叶能被GUS染色。对GUS染色成阳性的转基因植株的子叶进行切片观察,结果显示Oleosin基因启动子驱动的GUS基因在油体蛋白中能够表达。 展开更多
关键词 花生 Oleosin基因 特异性表达 花粉管通道法 遗传转化 GUS染色
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外源DNA直接导入甜玉米自交系后代性状变异 被引量:4
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作者 张慧英 冯锐 +2 位作者 吕平 庾韦花 郝小琴 《中国农学通报》 CSCD 2006年第9期186-188,共3页
提取糯质玉米DNA利用花粉管通道法导入甜玉米自交系,其后代植株产生了变异,主要表现在株高、穗位高、叶面积等性状上的差异。经三代种植观察,D3代各变异性状趋向稳定。经品质分析,可溶性糖含量基本保持不变,蛋白质,淀粉含量有所提高。... 提取糯质玉米DNA利用花粉管通道法导入甜玉米自交系,其后代植株产生了变异,主要表现在株高、穗位高、叶面积等性状上的差异。经三代种植观察,D3代各变异性状趋向稳定。经品质分析,可溶性糖含量基本保持不变,蛋白质,淀粉含量有所提高。从而为今后玉米不同种之间的DNA导入创造新的变异品系,提供可参考的理论依据。 展开更多
关键词 外源DNA 花粉管通道法 玉米自交系 性状变异
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利用花粉管通道法将外源DNA导入玉米的研究进展 被引量:4
13
作者 周旭梅 高旭东 何晶 《辽宁农业科学》 2008年第1期36-38,共3页
综述了外源DNA通过花粉管通道导入玉米的研究进展。详细阐述了利用花粉管通道法将外源DNA导入玉米中的转化方式、导入后代的变异以及变异机理;介绍了利用花粉管通道法将外源总DNA和目的基因导入到玉米中的研究现状;提出了利用花粉管通... 综述了外源DNA通过花粉管通道导入玉米的研究进展。详细阐述了利用花粉管通道法将外源DNA导入玉米中的转化方式、导入后代的变异以及变异机理;介绍了利用花粉管通道法将外源总DNA和目的基因导入到玉米中的研究现状;提出了利用花粉管通道法导入外源DNA应注意的问题,以及今后的研究方向。 展开更多
关键词 花粉管通道法 玉米 转化方式 变异 总DNA 目的基因
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转录因子基因ZmDREB3转化玉米的研究 被引量:6
14
作者 王源 黄丛林 +3 位作者 张秀海 吴忠义 魏凤菊 王冬梅 《作物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期58-61,共4页
利用玉米转录因子ZmDREB3基因(Gene ID:EU964828.1)构建了Ubiquitin启动子驱动的植物表达载体PGM0229-ZmDREB3-EP-SPS,以EPSPS基因为抗性筛选标记,通过花粉管通道法将农杆菌EHA105介导的植物表达载体转化到玉米自交系吉444、Mo17中,通... 利用玉米转录因子ZmDREB3基因(Gene ID:EU964828.1)构建了Ubiquitin启动子驱动的植物表达载体PGM0229-ZmDREB3-EP-SPS,以EPSPS基因为抗性筛选标记,通过花粉管通道法将农杆菌EHA105介导的植物表达载体转化到玉米自交系吉444、Mo17中,通过喷洒350mg/L草甘膦除草剂筛选,得到7株草甘膦抗性植株,用PCR检测得到2个同时整合EPSPS标记基因和ZmDREB3目的基因的转基因株系,用PCR-Southern进一步验证,结果呈阳性。以上结果证明外源基因已经被整合到玉米基因组中。 展开更多
关键词 玉米 ZmDREB3基因 转化 花粉管通道法
原文传递
甘蔗DNA导入玉米自交系性状变异的研究 被引量:6
15
作者 张慧英 刘爱花 薛艳霞 《湖北农业科学》 北大核心 2008年第5期498-500,共3页
采用花粉管通道法将甘蔗DNA导入普通玉米自交系,获得了变异植株,从中选出优良变异株,经3代自交观察,在D3代各农艺性状趋于稳定。对其主要农艺性状进行方差分析和D3代植株的叶绿素含量等生理生化分析,从中选出优良株系20-500①和20-500②... 采用花粉管通道法将甘蔗DNA导入普通玉米自交系,获得了变异植株,从中选出优良变异株,经3代自交观察,在D3代各农艺性状趋于稳定。对其主要农艺性状进行方差分析和D3代植株的叶绿素含量等生理生化分析,从中选出优良株系20-500①和20-500②,其叶绿素、可溶性糖、蛋白质含量均比对照提高,可为今后玉米杂交育种提供中间材料。 展开更多
关键词 花粉管通道法 甘蔗DNA 变异植株 农艺性状
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Transgenic Wheat Plants Obtained With Pollen-Tube Pathway Method 被引量:1
16
作者 曾君祉 王东江 +4 位作者 吴有强 张健 周文娟 朱小平 徐乃正 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1994年第3期319-325,386,共8页
β-glucuronidase (GUS) gene (carried by pBI121 plasmid) has been introduced into hexaploid wheat c. v. Xiaoshan No. 3 with the pollen-tube pathway method. Five transgenic plants are selected from 106 T0 plants. All of... β-glucuronidase (GUS) gene (carried by pBI121 plasmid) has been introduced into hexaploid wheat c. v. Xiaoshan No. 3 with the pollen-tube pathway method. Five transgenic plants are selected from 106 T0 plants. All of these plants are identified by the Southern hybridization, and the GUS activity can be detected by using fluorogenic assay and histochemical stain. 展开更多
关键词 WHEAT pollen-tube pathway method GUS gene TRANSGENIC WHEAT plants.
原文传递
转基因河套蜜瓜新品系育种过程的方法及其生态适应性 被引量:4
17
作者 秦伟闻 哈斯阿古拉 潮洛蒙 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2005年第F12期119-121,共3页
1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(ACS)是高等植物中乙烯合成的关键酶。以成熟河套蜜瓜果实的RNA为模板,经反转录和PCR扩增合成和克隆了河套蜜瓜ACS基因cDNA片断(627 bp),将ACS基因cDNA反向构建到植物表达载体pGA643,配制成DNA溶液后用花粉管... 1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶(ACS)是高等植物中乙烯合成的关键酶。以成熟河套蜜瓜果实的RNA为模板,经反转录和PCR扩增合成和克隆了河套蜜瓜ACS基因cDNA片断(627 bp),将ACS基因cDNA反向构建到植物表达载体pGA643,配制成DNA溶液后用花粉管通道法导入外源基因,对转基因河套蜜瓜的叶片用CTAB法提取总DNA,PCR扩增检测,结果表明某些果实的部分种子已整合外源基因。目前,该转基因新品系正在进行生态适应性研究及“环境释放”和“生产性试验”的安全性评价。 展开更多
关键词 ACS基因 PCR扩增技术 花粉管通道法 CTAB法 生态适应性
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CspB基因植物表达载体的构建及转化玉米自交系的研究 被引量:4
18
作者 陈丽娟 黄从林 +2 位作者 张秀海 吴忠义 杨德光 《作物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期70-74,共5页
利用来自Bacillus subtilis细菌的CspB基因(Gene ID:936224)构建了Ubiquitin启动子驱动的CspB基因植物表达载体PBPC-CspB-bar,以bar基因为抗性筛选标记,通过花粉管通道法将构建的表达载体转化到玉米自交系京501、京517和吉444,通过喷洒... 利用来自Bacillus subtilis细菌的CspB基因(Gene ID:936224)构建了Ubiquitin启动子驱动的CspB基因植物表达载体PBPC-CspB-bar,以bar基因为抗性筛选标记,通过花粉管通道法将构建的表达载体转化到玉米自交系京501、京517和吉444,通过喷洒除草剂筛选得到60株草丁膦抗性植株,用PCR检测得到48株bar基因阳性植株,将获得的转基因植株进行CspB基因PCR鉴定,获得13株同时整合CspB和bar的转基因株系。 展开更多
关键词 转基因玉米 CspB基因 花粉管通道法
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花粉管通道法转化外源DNA的转基因技术 被引量:3
19
作者 刘永巍 田红刚 +3 位作者 李春光 程芳艳 孟昭河 杜金岭 《北方水稻》 CAS 2014年第1期74-77,80,共5页
介绍了花粉管通道法的产生、分类及影响因素,阐述了花粉管通道法转基因技术的分子验证过程,列举了花粉管通道法在各作物育种上的应用,提出花粉管通道法应选择最佳导入方法与时期,从而提高外源DNA导入效率和遗传信息转化率,提高性状的变... 介绍了花粉管通道法的产生、分类及影响因素,阐述了花粉管通道法转基因技术的分子验证过程,列举了花粉管通道法在各作物育种上的应用,提出花粉管通道法应选择最佳导入方法与时期,从而提高外源DNA导入效率和遗传信息转化率,提高性状的变异频率,获得广泛的变异,提供丰富的变异材料。 展开更多
关键词 花粉管通道法 转基因技术 变异 应用
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韭菜花粉管通道法转基因技术 被引量:1
20
作者 张伟 刘宏敏 +4 位作者 杨宛玉 乔保建 张明 王利亚 李延龙 《山东农业科学》 2010年第3期8-10,共3页
花粉管通道法介导韭菜转基因尚处于研究阶段,它是基因工程技术与常规杂交育种相结合的育种方法。本文详尽介绍了外源DNA片段在韭菜基因组中整合的理论基础和受精过程转化的理论基础,韭菜利用花粉管通道法转基因的操作程序、影响因素及... 花粉管通道法介导韭菜转基因尚处于研究阶段,它是基因工程技术与常规杂交育种相结合的育种方法。本文详尽介绍了外源DNA片段在韭菜基因组中整合的理论基础和受精过程转化的理论基础,韭菜利用花粉管通道法转基因的操作程序、影响因素及优缺点和前景。 展开更多
关键词 花粉管通道法 韭菜 转基因育种
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