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谷氨酰胺对断奶仔猪生长性能、营养物质表观消化率、空肠碱性磷酸酶活性及与肠道健康相关因子基因表达的影响 被引量：39
1
作者 肖英平 洪奇华 +4 位作者 刘秀婷 刘锐钢 赵许可 陈安国 杨彩梅 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1438-1446,共9页
本研究的目的是探讨饲粮中添加谷氨酰胺对断奶仔猪生长性能、营养物质表观消化率、空肠碱性磷酸酶活性及与肠道健康相关因子基因表达的影响。将128头21日龄断奶的"杜×长×大"三元杂交仔猪按照体重、性别一致的原则... 本研究的目的是探讨饲粮中添加谷氨酰胺对断奶仔猪生长性能、营养物质表观消化率、空肠碱性磷酸酶活性及与肠道健康相关因子基因表达的影响。将128头21日龄断奶的"杜×长×大"三元杂交仔猪按照体重、性别一致的原则随机分成2组,分别为对照组和添加1.00%谷氨酰胺组,每组4个重复,每个重复16头仔猪。在仔猪断奶后第10天和第30天,分别从每个重复中采集新鲜粪便样本,然后选择1头接近平均体重的仔猪进行屠宰,取空肠,刮取黏膜。试验期为30 d。结果表明:在断奶后第10天,与对照组相比,谷氨酰胺组平均日增重、干物质、粗蛋白质表观消化率和表观代谢能分别显著提高了19.05%、9.06%、4.77%和7.02%(P<0.05),大多数必需氨基酸和非必需氨基酸表观消化率均有显著的提高(P<0.05);在断奶后第30天,谷氨酰胺组干物质、粗蛋白质表观消化率和表观代谢能分别显著提高了5.90%、2.80%和6.43%(P<0.05)。在断奶后第10天和第30天,谷氨酰胺组仔猪空肠刷状缘碱性磷酸酶活性比对照组分别提高了30.09%(P<0.05)和5.98%(P>0.05)。谷氨酰胺组空肠过氧化物酶体增殖体激活受体-γ和丙酮酸激酶基因mRNA表达水平在断奶后第10天比对照组分别下降了10.00%和30.00%(P>0.05);在断奶后第30天比对照组分别显著下降了42.22%和44.52%(P<0.05)。在断奶后第10天和第30天,谷氨酰胺组空肠雷帕霉素靶蛋白基因mRNA表达水平分别比对照组提高了22.00%(P>0.05)和22.38%(P<0.05)。以上结果提示,谷氨酰胺通过提高空肠碱性磷酸酶活性和调控与肠道健康相关因子基因表达水平来提高断奶仔猪的生长性能和营养物质表观消化率。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 断奶仔猪 表观消化率 碱性磷酸酶 基因表达
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化肥和有机肥配施生物炭对土壤磷酸酶活性和微生物群落的影响 被引量：37
2
作者 杨文娜 余泺 +5 位作者 罗东海 熊子怡 王蓥燕 徐曼 王子芳 高明 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第1期540-549,共10页
研究化肥和有机肥配施生物炭处理下植株根际、非根际土壤磷酸酶活性和phoC、phoD基因微生物群落多样性变化的规律,可为土壤磷库中难溶性磷素向植物根系可吸收的无机态磷酸根离子转化提供一定的理论指导,同时也为土壤中磷素有效性的提高... 研究化肥和有机肥配施生物炭处理下植株根际、非根际土壤磷酸酶活性和phoC、phoD基因微生物群落多样性变化的规律,可为土壤磷库中难溶性磷素向植物根系可吸收的无机态磷酸根离子转化提供一定的理论指导,同时也为土壤中磷素有效性的提高和生物炭的农业利用提供一定的试验依据.本研究以玉米秸秆和稻壳秸秆为供试材料,采用盆栽试验的方法,设置对照(CK)、传统施肥(F)、化肥+20 t·hm^(-2)稻壳生物炭(FP)、化肥+10t·hm^(-2)稻壳生物炭+10 t·hm^(-2)玉米生物炭(FPM)、有机肥+20t·hm^(-2)稻壳生物炭(PP)和新鲜有机肥+20t·hm^(-2)稻壳生物炭(NPP)这6个处理,通过测定根际、非根际土壤酸性磷酸酶(ACP)活性、碱性磷酸酶(ALP)活性和采用T-RFLP技术解析phoC和phoD基因的多样性,阐明生物炭对植物-土壤-微生物三者形成的微生态系统的影响.结果表明:(1)非根际土壤中各处理ALP和ACP活性较CK均有降低,根际土壤中,化肥和有机肥配施生物炭后ALP活性显著增加,根际土壤的ACP活性高于非根际土壤;(2)化肥和有机肥配施生物炭显著增加了根际、非根际土壤中phoC和phoD基因群落的多样性(P<0.05),根际土壤中微生物群落的多样性和丰富度高于非根际;(3)ACP活性与phoC基因微生物群落呈负相关关系,绝大多数处理ALP活性与phoD微生物群落呈正相关关系.化肥和有机肥配施生物炭可增加果园植株根际土壤的酶活性以及根际和非根际土壤中phoC和phoD基因的多样性. 展开更多
关键词 生物炭 磷酸酶 phoC基因 phoD基因 微生物群落
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杨树人工林连作与轮作对土壤解磷微生物类群的影响 被引量：12
3
作者 马雪松 王文波 +2 位作者 王延平 王华田 伊文慧 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1877-1885,共9页
采用宏基因组测序技术,研究了杨树人工林Ⅰ代林地和连作Ⅱ代林地根际土和非根际土、Ⅱ代林地主伐后轮作花生地和轮荒地土壤中解磷微生物类群特征及磷酸酶基因丰度变化.结果表明:参与磷循环微生物共9属,芽孢杆菌属和假单胞菌属为优势菌群... 采用宏基因组测序技术,研究了杨树人工林Ⅰ代林地和连作Ⅱ代林地根际土和非根际土、Ⅱ代林地主伐后轮作花生地和轮荒地土壤中解磷微生物类群特征及磷酸酶基因丰度变化.结果表明:参与磷循环微生物共9属,芽孢杆菌属和假单胞菌属为优势菌群.土壤解磷微生物丰度大小顺序为轮荒地>轮作花生地>Ⅱ代林地>Ⅰ代林地;主伐更新后轮作花生地和轮荒地芽孢杆菌属和假单胞菌属丰度显著升高,节杆菌属、慢生根瘤菌属、链霉菌属丰度显著降低;但在人工林根际土壤中,与Ⅰ代林根际相比,Ⅱ代林根际土壤与此规律相反.在根际与非根际土壤中,芽孢杆菌属和假单胞菌属丰度为根际小于非根际,节杆菌属、慢生根瘤菌属、链霉菌属丰度为根际大于非根际.磷酸酶基因总丰度为Ⅰ代林地>轮荒地>Ⅱ代林地>轮作花生地,且在Ⅰ、Ⅱ代林中根际效应明显,但Ⅱ代林根际与非根际差异缩小且部分磷酸酶基因的根际丰度低于非根际丰度.解磷微生物数量与酚酸含量呈显著负相关,与p H值呈正相关. 展开更多
关键词 连作人工林 酚酸 宏基因组测序 解磷微生物 磷酸酶基因
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基因转移载体脂质体和重组腺病毒介导碱性磷酸酶基因在B16F1细胞中的表达比较 被引量：8
4
作者 刘金辉 Glenn Larsen 《江西医学院学报》 2002年第2期15-18,共4页
目的 :探讨两种基因转移载体脂质体转染的和重组腺病毒收集并转导的SEAP基因在B16F1细胞中的表达动态。方法 :脂质体和质粒DNA复合后 ,转染 10 6 B16F1细胞 ,连续 5d收集并换细胞培养液 ,并检测其中的SEAP酶活性。将重组腺病毒以 10 0 0... 目的 :探讨两种基因转移载体脂质体转染的和重组腺病毒收集并转导的SEAP基因在B16F1细胞中的表达动态。方法 :脂质体和质粒DNA复合后 ,转染 10 6 B16F1细胞 ,连续 5d收集并换细胞培养液 ,并检测其中的SEAP酶活性。将重组腺病毒以 10 0 0m .o .i、2 0 0 0m .o .i、3 0 0 0m .o .i、4 0 0 0m .o .i接种B16F1细胞 ,连续 5d收集并换细胞培养液 ,并检测其中SEAP的含量。结果 :随着时间的推移 ,脂质体转染的SEAP的表达逐渐下降 ,由第 1天的 82 1.6μUnit/ml下降到第 5天的 2 75 .2 μUnit/ml。腺病毒转导的SEAP的表达却是逐渐上升。并随接种毒量的增加而上升。且第三、四天表达达最高后 ,能保持较稳定的水平。接种 4 0 0 0m .o .i组 ,SEAP的表达由第 1天的93 .9μUnit/ml上升到第 3天 12 81.1μUnit/ml。到第 5天仍为 12 4 0 .4 μUnit/ml。结论 :脂质体和重组腺病毒作为不同的基因转移载体都能有效地介导外源基因的转移入靶细胞 ,并使外源基因在靶细胞内获得有效地表达。 展开更多
关键词 脂质体 重组腺病毒 碱性磷酸酶 基因转移 基因表达 B16F1细胞 载体
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模拟失重条件下骨形态发生蛋白-2对大鼠骨肉瘤成骨样细胞基因表达的影响 被引量：9
5
作者 王冰 张舒 吴兴裕 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期176-179,共4页
目的观察回转器模拟失重条件下骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )对大鼠骨肉瘤成骨样细胞 (ROS1 7/ 2 .8)基因表达的影响。方法在 1G和回转器模拟失重条件下对ROS1 7/ 2 .8细胞进行培养 ,培养液中含5 0 0ng/ml的BMP 2。在实验的 2 4、48和 72h... 目的观察回转器模拟失重条件下骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )对大鼠骨肉瘤成骨样细胞 (ROS1 7/ 2 .8)基因表达的影响。方法在 1G和回转器模拟失重条件下对ROS1 7/ 2 .8细胞进行培养 ,培养液中含5 0 0ng/ml的BMP 2。在实验的 2 4、48和 72h提取细胞总RNA ,进行反转录PCR ,检测Ⅰ型胶原α1链(COL Ⅰα1 )及碱性磷酸酶 (ALP)mRNA的表达 ,并计算与内参照 β -肌动蛋白 ( β actin)mRNA水平的比值。结果BMP 2诱导组的COL Ⅰα1mRNA表达在 2 4h和 48h显著高于无BMP 2组 (P <0 .0 1 ) ,ALPmRNA水平在 48h和 72h显著高于无BMP 2组 (分别为P <0 .0 1 ,P <0 .0 5 ) ;BMP 2诱导 48h后模拟失重组的COL Ⅰα1mRNA水平显著低于 1G对照组 (P <0 .0 1 ) ,模拟失重 48h和 72h后ALPmRNA表达显著低于 1G对照组 (P <0 .0 1 )。结论BMP 2可促进大鼠骨肉瘤成骨样细胞的分化相关基因的表达 ,在模拟失重条件下细胞对BMP 2的促分化作用的反应性下降。 展开更多
关键词 失重模拟 骨肉瘤成骨样细胞 Ⅰ型胶原α1链 碱性磷树酸酶 基因表达
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毛叶苕子磷获取特征及根际特性的基因型差异 被引量：1
6
作者 常单娜 陈子英 +6 位作者 韩梅 李正鹏 严清彪 吕帅磊 周国朋 孙小凤 曹卫东 《草业学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期122-134,共13页
毛叶苕子是我国重要的肥饲兼用绿肥作物,研究毛叶苕子磷获取特征及根际特性的基因型差异,为毛叶苕子磷高效利用提供理论支撑。在青海西宁开展盆栽试验,设置毛叶苕子品种和磷肥种类双因素,毛叶苕子品种为大田试验筛选的磷高效及磷低效品... 毛叶苕子是我国重要的肥饲兼用绿肥作物,研究毛叶苕子磷获取特征及根际特性的基因型差异,为毛叶苕子磷高效利用提供理论支撑。在青海西宁开展盆栽试验,设置毛叶苕子品种和磷肥种类双因素,毛叶苕子品种为大田试验筛选的磷高效及磷低效品种(系)各2个,磷肥种类为过磷酸钙和磷矿粉,设置不施磷肥对照,共12个处理。盛花期测定分析毛叶苕子磷素积累量、土壤磷组分、土壤有机酸、根系酸性磷酸酶(RACP)、土壤酸性及碱性磷酸酶活性(ACP、ALP)、土壤酸性及碱性磷酸酶(phoC、phoD)基因丰度。结果显示,不同磷效率毛叶苕子品种(系)总磷吸收量和磷肥利用率分别为7.45~46.07 mg·盆^(-1)和7.12%~22.49%;磷高效品种(系)总磷吸收量和磷肥利用率均显著高于磷低效品种(系),增幅分别为0.91%~61.20%和12.52%~60.25%。相比磷低效品种(系),磷高效品种(系)提高了活性磷(labile P)和中等活性磷(moderately labile P)的比例,降低了稳定性磷(stable P)的比例,后者的活性磷和中等活性磷的比例分别是前者的6.14~26.14倍和1.04~1.54倍,前者的稳定性磷库比例是后者的2.92~7.91倍。磷高效品种(系)土壤总有机酸(TOA)、草酸(OXA)含量、RACP、ACP、ALP活性均显著高于磷低效品种(系),分别提高117.45%~254.60%、19.40%~50.75%、16.37%~146.40%、6.19%~104.19%和6.16%~35.06%。磷高效品种(系)phoC和phoD丰度分别是磷低效品种(系)的1.07~2.58倍和1.46~3.64倍。线性回归分析表明,土壤TOA、OXA、RACP、ACP与活性磷均呈显著或极显著正相关,决定系数分别为0.40、0.46、0.13、0.19;与stable P均呈显著或极显著负相关,决定系数分别为0.75、0.58、0.41和0.49。综上,磷高效毛叶苕子品种(系)活化难溶性磷的能力较强,具有更高的磷素积累量和磷肥利用率。其主要通过增加有机酸(主要是草酸)含量、磷酸酶活性、phoC和phoD基因丰度活化难溶性磷,提高土壤中活性磷� 展开更多
关键词 毛叶苕子品种(系) 土壤磷组分 有机酸 磷酸酶活性 磷酸酶基因
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芪仙汤对哮喘模型小鼠的治疗作用及其机制 被引量：7
7
作者 孙莉 陈清阁 +2 位作者 倪振华 赖一鸣 王雄彪 《医药导报》 CAS 2017年第1期16-21,共6页
目的观察芪仙汤对哮喘模型小鼠的作用,探讨芪仙汤促进磷酸酶基因(PTEN)表达的机制。方法健康雌性BALB/c小鼠28只,随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、芪仙汤组和地塞米松组,每组7只。以卵清蛋白(OVA)致敏法建立哮喘模型小鼠,造模... 目的观察芪仙汤对哮喘模型小鼠的作用,探讨芪仙汤促进磷酸酶基因(PTEN)表达的机制。方法健康雌性BALB/c小鼠28只,随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、芪仙汤组和地塞米松组,每组7只。以卵清蛋白(OVA)致敏法建立哮喘模型小鼠,造模成功后给予药物处理2周,采用肺组织苏木精-伊红(HE)染色评价小鼠肺部炎症,过碘酸-希夫(PAS)染色检测气道黏液分泌情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清免疫球蛋白Ig E浓度,实时定量聚合酶链反应检测小鼠肺组织中白细胞介素(IL)-5和IL^(-1)3的基因表达变化,Western blotting法检测小鼠肺组织PTEN、SIRT1的表达。结果与正常对照组比较,模型对照组小鼠肺组织呈明显炎症细胞浸润,气道黏液分泌显著增加(P<0.01);与模型对照组比较,芪仙汤组上述指标明显缓解。模型对照组、正常对照组、芪仙汤组和地塞米松组小鼠血清Ig E含量分别为(6.67±2.59),(0.27±0.05),(3.52±1.44),(2.03±1.24)pg·m L^(-1)。模型对照组小鼠肺组织PTEN和SIRT1的表达量显著低于正常对照组,芪仙汤组则显著高于模型对照组(P<0.05)。芪仙汤组IL-5、IL^(-1)3 mRNA水平显著下降(P<0.05)。结论芪仙汤能显著抑制哮喘模型小鼠气道炎症反应,对Ig E、IL-5、IL^(-1)3具有调节作用;上调SIRT1可能是上调PTEN表达的机制之一。 展开更多
关键词 芪仙汤 哮喘 磷酸酶基因
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植物磷匮乏下的根系、代谢和分子响应研究进展 被引量：7
8
作者 惠乾龙 叶文彬 +2 位作者 郭晋隆 袁照年 许莉萍 《中国糖料》 2021年第3期34-42,共9页
磷是植物正常生长发育所必需的大量元素之一。由于多数土壤条件下可获得的有效磷不足,因此土壤中的磷会影响作物产量潜力的表现。了解植物对低磷胁迫或磷匮乏的响应机制是至关重要的,相关研究已经取得一系列的进展。本文回顾了植物磷匮... 磷是植物正常生长发育所必需的大量元素之一。由于多数土壤条件下可获得的有效磷不足,因此土壤中的磷会影响作物产量潜力的表现。了解植物对低磷胁迫或磷匮乏的响应机制是至关重要的,相关研究已经取得一系列的进展。本文回顾了植物磷匮乏条件下根系统的响应,因为外部土壤中磷的供应状态会影响根构型,评述了植物激素和磷酸酶对磷匮乏的响应,并聚焦植物适应磷匮乏的分子机制,重点总结了植物体内磷转运蛋白基因、含SPX结构蛋白基因、转录因子基因以及microRNA在植物磷匮乏中的响应。本研究可为通过培育磷高效利用作物品种来提高磷吸收和利用提供最新的发现和途径。 展开更多
关键词 磷匮乏 根系统 植物激素 酸性磷酸酶 基因 磷转运蛋白 转录因子 小RNA
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骨髓间充质干细胞成骨分化过程中碱性磷酸酶基因表达含量的变化 被引量：7
9
作者 洪亮 焦根龙 《中国医学物理学杂志》 CSCD 2017年第8期825-828,共4页
目的:提取鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行成骨诱导并对BMSCs成骨分化过程中碱性磷酸酶(ALP)的表达量进行定量监测,揭示BMSCs在成骨分化过程中活性的变化。方法:采用全骨髓贴壁法提取鼠BMSCs,培育、扩增至第3代时,以地塞米松、β-甘油磷... 目的:提取鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行成骨诱导并对BMSCs成骨分化过程中碱性磷酸酶(ALP)的表达量进行定量监测,揭示BMSCs在成骨分化过程中活性的变化。方法:采用全骨髓贴壁法提取鼠BMSCs,培育、扩增至第3代时,以地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C为主要成分配制诱导培养基进行成骨诱导3周。在成骨诱导过程中,通过实时荧光定量(qRT-PCR)探针法对目标细胞的ALP表达量进行实时监测。结果:成骨诱导BMSCs,经显微镜观察、ALP染色、矿化结节染色等检测方法证实诱导成功。qRT-PCR实时检测的ALP表达量在1周后快速上升并维持1周的高值,2周后快速下降至初始值。结论:采用全骨髓贴壁法提取、培养的BMSCs,利用经典的成骨诱导方法可分化为成骨细胞。成骨分化过程中,目标细胞的成骨活性1周后开始快速增强,并可在高水平维持1周,2周后活性开始下降。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 成骨分化 碱性磷酸酶 基因表达 实时荧光定量聚合酶链反应
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阿魏酸对大鼠成骨细胞增殖、碱性磷酸酶活性及骨保护素与骨活素mRNA表达的影响 被引量：7
10
作者 杨雷 郭岱琦 +2 位作者 柳海峰 刘建全 黄勇江 《中国中医药科技》 CAS 2016年第4期428-430,共3页
目的:观察阿魏酸对体外培养大鼠成骨细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)、骨保护素(OPG)及骨活素(OA)表达的影响,探讨阿魏酸在骨折后骨愈合中的作用。方法:以培养基为空白对照,MTT法检测阿魏酸200、20、2μg/L培养后0、1、2、3、4、5、6 d成骨... 目的:观察阿魏酸对体外培养大鼠成骨细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)、骨保护素(OPG)及骨活素(OA)表达的影响,探讨阿魏酸在骨折后骨愈合中的作用。方法:以培养基为空白对照,MTT法检测阿魏酸200、20、2μg/L培养后0、1、2、3、4、5、6 d成骨细胞增殖的变化,给药后6 d,ELISA法检测细胞上清液ALP活性,RT-PCR检测OPG mRNA和OA mRNA表达的变化。结果:阿魏酸可剂量依赖性促进体外培养大鼠成骨细胞的增殖,显著性增加ALP的活性、OPG mRNA和OA mRNA的表达(P<0.05)。结论:阿魏酸具有骨形成促进效应,其机制可能与其促进成骨细胞增殖与分化、改善骨代谢有关,适用于临床骨折的辅助治疗。 展开更多
关键词 阿魏酸 成骨细胞 @细胞增殖 碱性磷酸酶 @骨保护素 @骨活素 基因表达 体外研究
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生存素和磷酸酶基因在胃癌中的表达 被引量：7
11
作者 叶新青 覃思繁 陈发龙 《中国基层医药》 CAS 2010年第12期1587-1589,共3页
目的 探讨生存素（Survivin）和磷酸酶基因（PETN）与胃癌的关系及两者的相关性.方法 采用免疫组化的方法检测105例胃癌病理标本中Survivin、PETN的表达情况,并与98例阴性胃黏膜组织中Sur-vivin、PETN的表达情况比较.结果 胃癌组织标本... 目的 探讨生存素（Survivin）和磷酸酶基因（PETN）与胃癌的关系及两者的相关性.方法 采用免疫组化的方法检测105例胃癌病理标本中Survivin、PETN的表达情况,并与98例阴性胃黏膜组织中Sur-vivin、PETN的表达情况比较.结果 胃癌组织标本中Survivin表达阳性率为82.9%（87/105）,非胃癌组织标本中Survivin表达阳性率为6.1%（6/98）,两者差异有统计学意义（P〈0.01）;胃癌组织标本中PETN表达阳性率为34.3%（36/105）,非胃癌组织标本中PETN表达阳性率为99.0%（97/98）,两者差异有统计学意义（P〈0.01）.胃癌组织中Survivin、PETN的表达与患者的性别无关（P〉0.05）,而与肿瘤细胞分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处脏器转移及TNM分期有关（P〈0.05）.Survivin与PETN呈负相关（r=-0.23.P〈0.05）.结论 胃癌的发生与Survivin的异常高水平表达及PTEN的表达缺失有关;胃癌组织中Survivin、PEIN的表达情况与患者的性别无关,而与肿瘤细胞的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处脏器转移及TNM分期有关;Survivin与PETN的表达呈负相关关系. 展开更多
关键词 胃肿瘤 生存素 磷酸酶基因
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水体细菌碱性磷酸酶及其编码基因研究进展 被引量：7
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作者 戴江玉 高光 +5 位作者 吴时强 吴修锋 周杰 薛万云 杨倩倩 陈丹 《湖泊科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1153-1166,共14页
水体溶解性反应磷是浮游植物可直接利用的主要磷营养形式,细菌碱性磷酸酶催化的有机磷矿化过程则是维持溶解性反应磷供给的重要途径.通过总结细菌碱性磷酸酶的种类与分布特征,发现主要包括Pho A、Pho X和Pho D 3种类型细菌碱性磷酸酶,... 水体溶解性反应磷是浮游植物可直接利用的主要磷营养形式,细菌碱性磷酸酶催化的有机磷矿化过程则是维持溶解性反应磷供给的重要途径.通过总结细菌碱性磷酸酶的种类与分布特征,发现主要包括Pho A、Pho X和Pho D 3种类型细菌碱性磷酸酶,其中超过50%的Pho X分布于细菌细胞的外部环境,对溶解性反应磷的循环再生尤为重要.综述水体产碱性磷酸酶细菌群落组成的研究进展,以及影响编码基因表达的环境因素,对比分析产碱性磷酸酶细菌群落鉴定方法的特点及发展趋势.细菌碱性磷酸酶编码基因的研究多关注寡营养海洋生态系统,对于同样存在磷限制问题的富营养化湖泊生态系统鲜有涉及,而构建针对典型富营养化湖泊生态系统的细菌宏基因组数据库,则可为建立淡水生态系统细菌碱性磷酸酶及其编码基因的研究方法奠定基础,有助于认识湖泊水华频发的微生物学驱动机制. 展开更多
关键词 磷 细菌 碱性磷酸酶 编码基因 湖泊
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秸秆覆盖还田保护性耕作对黄土旱塬土壤磷素组分的影响
13
作者 李千雪 李春越 +5 位作者 张文婷 窦祥祥 薛英龙 寇钊阳 王益 党廷辉 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期368-377,共10页
为探究秸秆覆盖保护性耕作对黄土旱塬土壤磷素组分及碱性磷酸酶pho D基因的影响,本研究以陕西省咸阳市长武县境内的中国科学院长武黄土高原农业生态试验站为研究平台,设置无秸秆覆盖(CK)、每年7、8、9月高量秸秆覆盖(St_(90))、全生育... 为探究秸秆覆盖保护性耕作对黄土旱塬土壤磷素组分及碱性磷酸酶pho D基因的影响,本研究以陕西省咸阳市长武县境内的中国科学院长武黄土高原农业生态试验站为研究平台,设置无秸秆覆盖(CK)、每年7、8、9月高量秸秆覆盖(St_(90))、全生育期低量秸秆覆盖(S_(45))、全生育期高量秸秆覆盖(S_(90))4个处理,探讨不同秸秆覆盖模式下0~20 cm表层土壤基本理化性质、土壤磷素、有机磷组分、无机磷组分、碱性磷酸酶pho D基因拷贝数量特征及其影响机理。结果表明:相同覆盖时间下,全磷(TP)、速效磷(AP)、无机磷、Ca_(2)-P、中等活性有机磷(MLOP)含量均随着秸秆覆盖量的增加而显著增加;Ca_(10)-P是主要的无机磷组分,占比66.03%~72.34%,MLOP是主要的有机磷组分,占比70.70%~78.23%;秸秆覆盖使无机磷中的有效磷源Ca_(2)-P在无机磷中所占的比例显著增加,其他组分占比以及有机磷各组分占比并无显著变化。播种前后的短期覆盖相比于全年长期覆盖更有利于微生物的代谢,从而加快土壤有机磷的合成。不同秸秆覆盖处理土壤无机磷含量为985.33~1043.33 mg·kg^(-1),显著大于有机磷。冗余分析表明,土壤pH、全碳(TC)、有机碳(SOC)、含水率(SWC)与MLOP含量呈负相关关系,与高稳性有机磷(HSOP)呈正相关关系,Ca_(2)-P与SWC、SOC、pH、TP呈正相关关系,Ca_(10)-P与pH、NH_(4)^(+)-N呈正相关关系。秸秆覆盖可以提高碱性磷酸酶pho D基因拷贝数,但全生育期覆盖与高量秸秆覆盖的叠加作用,对碱性磷酸酶pho D基因有抑制作用。研究表明,秸秆覆盖可显著改变有机磷各组分含量,全生育期高量秸秆覆盖显著增加无机磷有效组分Ca_(2)-P含量,土壤有机磷与无机磷组分含量变化受土壤TC和pH的影响最大。 展开更多
关键词 黄土旱塬 农田生态系统 秸秆覆盖 磷素组分 磷酸酶基因
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基于生信分析评价前列腺癌TP53表达和第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因相关性
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作者 刘参军 彭阳 +2 位作者 张洁琳 徐琪卿 杨春华 《中华实验外科杂志》 CAS 2024年第7期1537-1540,共4页
目的基于生信分析评价前列腺癌(PCa)中TP53及第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)的表达水平及相关性。方法利用生物信息学方法, 挖掘公开数据库, 分析TP53基因在前列腺癌中的表达并分析其可能的调控机制。收集徐州... 目的基于生信分析评价前列腺癌(PCa)中TP53及第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)的表达水平及相关性。方法利用生物信息学方法, 挖掘公开数据库, 分析TP53基因在前列腺癌中的表达并分析其可能的调控机制。收集徐州医科大学附属医院泌尿科2022年3月至2022年8月间诊治的PCa 79例, 复阅病理切片并整理相关临床资料, 采用免疫组织化学SP染色法检测79例PCa中PTEN及TP53的蛋白表达水平。分类资料的组间比较采用卡方检验和Mann-WhitneyU检验, 应用Pearson相关分析前列腺癌患者中PTEN和TP53的相关性。结果通过TCGA数据库分析, TP53在前列腺癌组织中的表达水平明显高于正常组织(501个比52个, Z=8 874.5, P<0.05);TP53表达水平(低表达250例比高表达251例)与前列腺癌患者临床病理参数关系表明, TP53与患者年龄(χ^(2)=6.079, P>0.05)、T分期(χ^(2)=0.338, P>0.05)、N分期(χ^(2)=0.176, P>0.05)、PSA水平(χ^(2)=0.016, P>0.05)和Gleason评分(χ^(2)=3.999, P>0.05)在内的临床特征之间均无统计学意义;建立前列腺癌总体生存期(OS)预测列线图, 分析得出TP53不能作为OS的独立预后因素, PSA值与Gleason评分在前列腺有预后作用;免疫组织化学染色PTEN蛋白阳性(完整)者占73%, 阴性(缺失)者占27%;TP53蛋白染色呈野生型突变模式者占81%, 突变型表达模式者占19%。Pearson统计学分析, PTEN缺失与TP53突变型显著相关性(r=0.653, P<0.05)。结论 TP53联合PTEN对前列腺癌的进展有一定预测作用, 且为临床前列腺癌治疗提供参考。 展开更多
关键词 前列腺癌 磷酸酯酶基因 TP53 免疫组织化学
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糖磷酸酶的挖掘及其酶学性质研究
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作者 乔烨 张楠 +2 位作者 杨建花 张翠英 朱蕾蕾 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期299-306,共8页
【目的】在以淀粉或糊精为底物合成具有高附加值的单糖的多酶级联反应中,利用糖磷酸酶催化发生不可逆的脱磷反应可以高效拉动整个反应朝产物生成的方向进行。本研究旨在挖掘新的糖磷酸酶并对酶学性质进行鉴定。【方法】通过基因挖掘的... 【目的】在以淀粉或糊精为底物合成具有高附加值的单糖的多酶级联反应中,利用糖磷酸酶催化发生不可逆的脱磷反应可以高效拉动整个反应朝产物生成的方向进行。本研究旨在挖掘新的糖磷酸酶并对酶学性质进行鉴定。【方法】通过基因挖掘的手段筛选得到一种来源于嗜热菌Thermoproteus sp.CIS_19的未知功能的基因TsPase具有糖磷酸酶活性,在E.coli BL21(DE3)中实现异源可溶性表达及纯化,进一步对其酶学性质进行表征。【结果】最终确定糖磷酸酶TsPase的最适反应温度是70℃,T_(m)值为(80.3±1.3)℃,最适反应pH为4,金属离子Mg^(2+)对TsPase有较强的促进作用。针对底物为塔格糖6磷酸盐的动力学常数K_(m)为(2.40±0.98)mmol/L,催化常数k_(cat)为(102.50±8.60)min^(-1)。将TsPase应用于体外多酶合成体系中,以10 g/L麦芽糊精为底物,一锅法生产D-塔格糖,反应平衡体系中D-塔格糖产量为(4.26±0.03)g/L,转化率可达42.6%±0.3%。【结论】TsPase不仅具有较好的热稳定性和活性,在体外多酶合成体系中也具有优势,这些特征在以后的理论研究及工业生产中具有一定的科学价值。 展开更多
关键词 糖磷酸酶 酶学特性 热稳定性 基因挖掘
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产毒和非产毒拟柱孢藻的磷吸收转运通路基因比较及对低磷的响应表达特征分析
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作者 赖淑燕 陈志江 +3 位作者 刘威 陈子寒 雷腊梅 郭佳 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期673-684,共12页
拥有完整的磷吸收转运通路基因(Pho调节子)是蓝藻适应环境磷波动的分子基础,目前对这些基因在拟柱孢藻(Cylindrospermopsis raciborskii)中的响应表达特征还知之甚少。本研究在拟柱孢藻非产毒株N8前期工作的基础上,分析产拟柱孢藻毒素(c... 拥有完整的磷吸收转运通路基因(Pho调节子)是蓝藻适应环境磷波动的分子基础,目前对这些基因在拟柱孢藻(Cylindrospermopsis raciborskii)中的响应表达特征还知之甚少。本研究在拟柱孢藻非产毒株N8前期工作的基础上,分析产拟柱孢藻毒素(cylindrospermopsin, CYN)藻株QDH7中Pho调节子基因的组成,并比较两藻株在高磷和低磷下的生长、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性及8个Pho调节子基因的时序表达。结果表明, QDH7和N8的Pho调节子基因均很完整,主要在排列和少数基因的拷贝数上存在差异。低磷下两藻株的生长都受到明显抑制, ALP活性在第14~18天显著升高,而产毒和非产毒藻株在相同磷浓度下的生长趋势基本一致。基因的时序表达分析表明,低磷下两藻株的双组份系统基因phoB和phoR在第4~6天和第14~16天有显著的表达升高,而2个高亲和力无机磷结合蛋白基因中仅pstS1的表达显著升高, 2个ALP基因中phoA1的表达与酶活性的增加基本同步,表明pstS1和phoA1基因在对低磷的响应中起主要作用;低亲和力无机磷转运系统pit在低磷处理第16~18天的表达上调可能是QDH7和N8极度缺磷状态的指示。我们发现低磷下产毒株QDH7有6个基因的最高相对表达量高于非产毒株N8,这种差异在磷不足的环境中可能会影响共存于自然水体中的2种基因型藻株对磷的竞争和相对优势的形成。 展开更多
关键词 拟柱孢藻 产毒和非产毒株 磷吸收转运通路基因 碱性磷酸酶 基因表达
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乳腺癌组织中FMNL3、PTEN的表达及其与临床病理特征的关系 被引量：1
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作者 方新颜 顾颖慧 施艳琳 《中外医学研究》 2023年第9期118-122,共5页
目的:探讨乳腺癌组织中formin like-3(FMNL3)、磷酸酯酶基因(PTEN)表达与临床病理特征的关系。方法:选取2016年1月—2021年1月启东市中医院收治的101例乳腺癌患者,所有患者均于术中切取病灶,以距离肿瘤组织边缘>5 cm记为癌旁组织,组... 目的:探讨乳腺癌组织中formin like-3(FMNL3)、磷酸酯酶基因(PTEN)表达与临床病理特征的关系。方法:选取2016年1月—2021年1月启东市中医院收治的101例乳腺癌患者,所有患者均于术中切取病灶,以距离肿瘤组织边缘>5 cm记为癌旁组织,组织包含癌旁组织与癌组织,取出即刻送去病理科检测。采取免疫组化法检测乳腺癌组织和癌旁组织中FMNL3、PTEN表达情况,标本多聚甲醛固定、脱水、洗涤,通过二氨基联苯显色后,苏木素复染、脱水、封片。染色范围<5%、≥5%且<25%、≥25%且<75%、≥75%,分别记为0分、1分、2分、3分,结果为0分者记为阴性表达,否则记为阳性表达。对比乳腺癌组织、癌旁组织中FMNL3、PTEN表达情况,分析乳腺癌患者癌组织中FMNL3、PTEN表达情况与临床病理参数的关系。结果:乳腺癌组织FMNL3、PTEN阳性表达率均高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。低分化、病理分期Ⅰ期和Ⅱ期及发生淋巴结转移的患者FMNL3、PTEN蛋白表达阳性率均高于中高分化、病理分期Ⅲ期和Ⅳ期及未发生淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。FMNL3阳性、PTEN阳性分别与患者的低分化、病理分期Ⅰ期和Ⅱ期及发生淋巴结转移均呈正相关(P<0.05)。结论:乳腺癌患者癌组织中FMNL3、PTEN蛋白表达较高,且FMNL3、PTEN阳性蛋白表达与乳腺癌患者临床病理特征有关,后期在乳腺癌的诊断和治疗中,应加强对癌组织中FMNL3、PTEN蛋白的监测。 展开更多
关键词 乳腺癌 低分化 淋巴结转移 磷酸酯酶基因 病理分期 癌旁组织 癌组织
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珠江水体中细菌碱性磷酸酶基因phoD的多样性 被引量：5
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作者 赵丹丹 罗剑飞 +1 位作者 黄晓燕 林炜铁 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期722-728,共7页
碱性磷酸酶(APase)是最主要的有机磷水解酶,在无机磷匮乏的情况下,APase释放的无机磷供藻类利用,致使藻类大量繁殖,因此,对APase基因多样性的研究有利于揭示对水体富营养化有重要影响的微生物类群.基于此,本文以珠江水体为研究对象,构... 碱性磷酸酶(APase)是最主要的有机磷水解酶,在无机磷匮乏的情况下,APase释放的无机磷供藻类利用,致使藻类大量繁殖,因此,对APase基因多样性的研究有利于揭示对水体富营养化有重要影响的微生物类群.基于此,本文以珠江水体为研究对象,构建了珠江广州段穗石、坦尾和南沙3个点细菌的pho D基因克隆文库.限制性酶切片段多态性(RFLP)分析结果表明,上述3个点的pho D基因分别含有15、17、13个操作分类单元(Operational Taxa Unit,OTU),穗石点的多样性(Shannon指数和Simpson指数)均高于其他两个点;pho D基因序列系统发育分析表明,珠江水体中pho D基因主要来源于Plesiocystis、Limnohabitans、Pirellula等属的细菌,而Limnohabitans属的pho D基因在文库中含量最高,占文库的44%~50%.研究表明,珠江水体中细菌的pho D基因具有较高的多样性,这些基因编码的碱性磷酸酶可能在珠江水体的富营养化过程中有重要的作用. 展开更多
关键词 碱性磷酸酶 phoD基因 多样性 富营养化 珠江
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转化生长因子β3对成骨细胞增殖和成骨能力的影响 被引量：5
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作者 艾力麦尔旦•艾尼瓦尔 王玲 +3 位作者 古丽 迪丽达尔•塔西甫拉提 王珊 尹宏斌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第17期2664-2669,共6页
背景:转化生长因子β3对成骨细胞增殖和成骨能力的影响相关研究甚少。目的:观察不同质量浓度的转化生长因子β3对成骨细胞生长增殖和成骨能力的影响。方法:采用课题组前期方法改良酶消化法分离获得新西兰幼兔颅盖骨成骨细胞,差速贴壁法... 背景:转化生长因子β3对成骨细胞增殖和成骨能力的影响相关研究甚少。目的:观察不同质量浓度的转化生长因子β3对成骨细胞生长增殖和成骨能力的影响。方法:采用课题组前期方法改良酶消化法分离获得新西兰幼兔颅盖骨成骨细胞,差速贴壁法纯化并鉴定。将成骨细胞分为对照组和实验组,对照组为常规培养的成骨细胞,实验组为分别含0.1,1,10,100μg/L的转化生长因子β3培养。各组每天观察细胞生长情况;培养1,3,5,7,9,11,13 d采用MTT法检测各组细胞增殖情况并绘制细胞生长曲线;培养1,3,5,7,9,11,13,15 d检测各组碱性磷酸酶水平;培养第7,14天用RT-qPCR法检测各组胶原蛋白1A1、Runx-2和骨钙素基因表达情况;培养21d茜素红染色法检测各组细胞矿化能力。实验方案经新疆医科大学第一附属医院动物实验伦理委员会批准。结果与结论:①成功分离培养、纯化并鉴定成骨细胞;②10μg/L转化生长因子β3组细胞增殖活性明显高于对照组(P<0.05);10,100μg/L转化生长因子β3组碱性磷酸酶水平高于对照组(P<0.05);③10μg/L转化生长因子β3组胶原蛋白1A1、Runx-2和骨钙素基因表达量始终高于对照组(P<0.05),100μg/L转化生长因子β3组胶原蛋白1A1,Runx-2和骨钙素基因表达量在第7天时高于对照组(P<0.05);④10,100μg/L转化生长因子β3组矿化结节较对照组大且多,其中10μg/L转化生长因子β3组的矿化结节数明显多于对照组(P<0.05);⑤结果说明,转化生长因子β3在10-100μg/L范围内可促进成骨细胞的增殖和成骨能力,其中10μg/L质量浓度的转化生长因子β3效果最佳。 展开更多
关键词 骨 生长因子 成骨 成骨细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶 基因
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熊果酸干预骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化 被引量：5
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作者 刘耀辉 黄振明 +2 位作者 何精选 黄玲华 李建平 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2665-2671,共7页
背景:熊果酸可通过Wnt信号通路抑制破骨细胞增殖分化,对胶原诱导性关节炎模型大鼠有抗炎和骨保护作用,但是熊果酸对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、分化以及Wnt/β-catenin信号通路相关基因和蛋白表达的影响尚不明确。目的:探讨熊果酸对骨... 背景:熊果酸可通过Wnt信号通路抑制破骨细胞增殖分化,对胶原诱导性关节炎模型大鼠有抗炎和骨保护作用,但是熊果酸对大鼠骨髓间充质干细胞增殖、分化以及Wnt/β-catenin信号通路相关基因和蛋白表达的影响尚不明确。目的:探讨熊果酸对骨髓间充质干细胞增殖、分化及Wnt信号通路的影响。方法:采用全骨髓贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,不同浓度(1.0,2.5,5.0,10.0,20.0μmol/L)熊果酸作用骨髓间充质干细胞,以不含熊果酸的培养基为对照组,MTT法检测熊果酸对骨髓间充质干细胞增殖的影响。用含不同浓度(1.0,2.5,5.0μmol/L)熊果酸的成骨诱导液培养骨髓间充质干细胞,以不含熊果酸的成骨诱导液为对照组,在诱导后第7天和第14天采用ELISA法检测碱性磷酸酶活性和骨钙素水平,在诱导第14天采用RT-PCR检测成骨基因ALP、COL-I、OCN、OPN、RUNX2 mRNA表达水平,采用RT-PCR和Western blot法检测Wnt信号通路相关Wnt-3α、GSK-3β、β-catenin mRNA和蛋白表达。结果与结论:①不同浓度熊果酸均可促进骨髓间充质干细胞增殖,浓度为5.0μmol/L时增殖率最高;②骨髓间充质干细胞成骨诱导第7天和第14天时碱性磷酸酶活性和骨钙素水平均比对照组增高,差异有显著性意义(P<0.05),且诱导相同时间,随熊果酸浓度增加碱性磷酸酶活性增强,骨钙素水平升高(P<0.05);③诱导14d,熊果酸可促进骨髓间充质干细胞分化后成骨基因ALP、COL-I、OCN、OPN、RUNX2m RNA表达以及Wnt信号通路相关Wnt-3α、GSK-3β、β-cateninm RNA和蛋白表达,随熊果酸浓度增加其表达水平升高(P <0.05);④结果表明,熊果酸通过Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向分化。 展开更多
关键词 熊果酸 骨髓间充质干细胞 细胞增殖 成骨分化 碱性磷酸酶 骨钙素 成骨基因 WNT信号通路
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