REV3基因对结肠癌细胞遗传信息表达的影响 被引量：4

1

作者 隋御 李元杰 +1 位作者 金彩霞 徐方 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期467-472,共6页

利用RNA干扰技术降低REV3基因在人类结肠癌细胞(SW480)中的表达,以荧光实时定量PCR检测REV3表达量的降低情况,选择低表达效率具有统计学意义的细胞作为实验组细胞。运用细胞生长曲线、MTT、微核和姐妹染色单体交换等方法,对实验组和对... 利用RNA干扰技术降低REV3基因在人类结肠癌细胞(SW480)中的表达,以荧光实时定量PCR检测REV3表达量的降低情况,选择低表达效率具有统计学意义的细胞作为实验组细胞。运用细胞生长曲线、MTT、微核和姐妹染色单体交换等方法,对实验组和对照组细胞进行细胞生长周期、增殖变化情况和遗传信息表达等指标的检测。结果显示:REV3低表达的结肠癌实验组细胞在细胞增殖以及细胞的微核和姐妹染色单体交换等遗传信息表达均明显低于结肠癌对照组细胞,实验结果具有统计学意义(P<0.05);结肠癌的两对照组间(阴性和空白)的结果虽然有一定的差异,但没有统计学意义。研究结果提示,REV3低表达时,可能对结肠癌细胞(SW480)的生长与增殖产生影响,并对微核和姐妹染色单体交换等遗传不稳定现象的产生有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 REV3基因 RNA干扰 结肠癌细胞(SW480) 荧光实时定量pcr 遗传不稳定

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南移养殖仿刺参(Stichopus japonicus Selenka)铁蛋白基因的克隆及表达特征分析 被引量：3

2

作者 李成华 崔静 +3 位作者 李晔 周君 苏秀榕 李太武 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期567-572,共6页

采用cDNA文库、RACE、荧光定量PCR和Western blot技术,克隆了南移养殖仿刺参铁蛋白基因的全长序列,并对其表达特征进行了研究。结果表明,南移养殖仿刺参铁蛋白cDNA全长1222bp,包括187bp的5’UTR;513bp的3’UTR和编码173个氨基酸残基的52... 采用cDNA文库、RACE、荧光定量PCR和Western blot技术,克隆了南移养殖仿刺参铁蛋白基因的全长序列,并对其表达特征进行了研究。结果表明,南移养殖仿刺参铁蛋白cDNA全长1222bp,包括187bp的5’UTR;513bp的3’UTR和编码173个氨基酸残基的522bp的开放阅读框。诸如铁结合序列标签和铁调控元件等铁蛋白特征结构基元在南移刺参铁蛋白中也高度保守;养殖环境条件的改变影响了铁蛋白在某些组织的表达水平,南方养殖仿刺参肌肉带铁蛋白表达量近乎北方养殖仿刺参的2倍,而在呼吸树中两者表达水平没有明显差异。Western blot揭示本研究获得的铁蛋白多克隆抗体不仅与重组蛋白起强的特异性反应,而且还特异性识别肌肉中的天然蛋白,该抗体可用于仿刺参铁蛋白功能的后续研究。 展开更多

关键词 仿刺参 铁蛋白 荧光定量pcr 蛋白印迹Westernblot

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巨噬细胞集落刺激因子受体在子宫内膜异位症中的表达 被引量：3

3

作者 李宝艳 杜敏 +2 位作者 廖莳 卢建翔 石瑾秋 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2011年第21期3310-3312,共3页

目的:检测巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)在子宫内膜异位症(EMs)中的表达,探讨M-CSFR在EMs发病机制中的作用。方法:收集实验组(经腹腔镜手术且术后病理确诊为EMs)异位内膜标本30例、在位内膜标本15例;同时收集非内异症患者子宫内膜标... 目的:检测巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)在子宫内膜异位症(EMs)中的表达,探讨M-CSFR在EMs发病机制中的作用。方法:收集实验组(经腹腔镜手术且术后病理确诊为EMs)异位内膜标本30例、在位内膜标本15例;同时收集非内异症患者子宫内膜标本15例作为对照组,采用荧光实时定量PCR技术检测上述标本中M-CSFR mRNA含量,探讨M-CSFR在EMs发病机制中的作用。结果:EMs患者异位内膜、在位内膜标本M-CSFR水平分别为33.70±25.97、17.79±5.84,两者比较,差异具有统计学意义(P<0.05);对照组子宫内膜标本M-CSFR水平为5.52±2.44,明显低于实验组异位内膜、在位内膜M-CSFR水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:M-CSFR可能参与EMs的发生、发展。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 巨噬细胞集落刺激因子受体 荧光实时定量pcr

原文传递

TaqMan荧光定量PCR检测鸡产蛋下降综合征病毒方法的建立及应用 被引量：3

4

作者 马震原 李刚 +1 位作者 李文超 郭宇飞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期767-772,共6页

根据GenBank公布的鸡产蛋下降综合征病毒六邻体蛋白基因的高度保守序列,设计了2对特异性引物和1条TaqMan探针。以构建的阳性重组质粒为标准品,绘制标准曲线,建立了一种快速检测鸡产蛋下降综合征病毒的TaqMan荧光实时定量PCR方法。该方... 根据GenBank公布的鸡产蛋下降综合征病毒六邻体蛋白基因的高度保守序列,设计了2对特异性引物和1条TaqMan探针。以构建的阳性重组质粒为标准品,绘制标准曲线,建立了一种快速检测鸡产蛋下降综合征病毒的TaqMan荧光实时定量PCR方法。该方法最小检出量达10copies.μL-1,在1.0×102～1.0×108copies.μL-1检测范围间有良好的线性关系,特异性、稳定性和重复性也较好。用建立的本方法检测感染鸡产蛋下降综合征病毒鸡群的产蛋分离物,与普通PCR相比,该荧光实时定量PCR方法具有更高的敏感性,可更好地用于鸡产蛋下降综合征病毒的临床检测。 展开更多

关键词 鸡产蛋下降综合征病毒 TAQMAN探针 荧光实时定量pcr 临床检测

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REV3基因低表达对COLO-205细胞增殖的影响 被引量：2

5

作者 隋御 李元杰 +1 位作者 黄金娟 徐方 《宁夏医科大学学报》 2012年第6期572-575,F0003,共5页

目的检测REV3基因低表达后对COLO-205细胞增殖的影响情况。方法采用RNA干扰技术特异性的下调人类结肠癌细胞(COLO-205)中REV3基因的表达情况:实验组细胞加入的培养基中包含脂质体及降低REV3基因表达的质粒,阴性对照组细胞加入的培养基... 目的检测REV3基因低表达后对COLO-205细胞增殖的影响情况。方法采用RNA干扰技术特异性的下调人类结肠癌细胞(COLO-205)中REV3基因的表达情况:实验组细胞加入的培养基中包含脂质体及降低REV3基因表达的质粒,阴性对照组细胞加入的培养基中包含脂质体及空质粒,空白对照组细胞只加入培养基。实时荧光定量PCR技术检测不同细胞REV3基因的相对表达量,通过细胞计数和MTT检测,比较REV3基因表达量不同的细胞生长增殖情况。结果 REV3基因的表达量降低后,COLO-205实验组细胞的增殖速度与对照组细胞相比较明显降低,差别有统计学意义(P<0.05);而阴性对照组和空白对照组的细胞增殖情况虽然有一定的差异,但差别没有统计学意义。结论特异性的下调REV3基因在COLO-205中的表达量,可能对该细胞的生长与增殖均具有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 REV3基因 RNA干扰 结肠癌细胞(COLO-205) 荧光实时定量pcr 细胞增殖

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妊娠期关中奶山羊子宫中TLR4的定位和表达 被引量：2

6

作者 代盈盈 王文丽 +2 位作者 赵慧英 刘红改 王薇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期629-634,共6页

为了探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在妊娠期山羊子宫中的分布和表达变化规律,通过免疫组织化学SP法及荧光定量RT-PCR技术,分别对妊娠早期(1～30d)、妊娠中期(31～120d)和妊娠晚期(121～150d)关中奶山羊子宫中TLR4的分布及... 为了探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在妊娠期山羊子宫中的分布和表达变化规律,通过免疫组织化学SP法及荧光定量RT-PCR技术,分别对妊娠早期(1～30d)、妊娠中期(31～120d)和妊娠晚期(121～150d)关中奶山羊子宫中TLR4的分布及TLR4mRNA的表达量的变化进行研究。结果表明,TLR4免疫反应阳性产物在关中奶山羊子宫的子宫内膜、肌层和浆膜均有不同程度分布,其中在子宫内膜上皮和腺上皮中阳性细胞最多、着色最深,肌层和浆膜层中免疫细胞着色较浅;随妊娠时期推移子宫内膜上皮细胞着色逐渐变浅,固有层中子宫腺上皮细胞着色先显著增强,到妊娠晚期又有所减弱;妊娠期子宫中TLR4相对表达量在妊娠期子宫内膜呈低-高-低的规律性变化,妊娠中期表达量极显著高于妊娠早期和晚期(P<0.01),妊娠早期表达量最低且极显著低于妊娠中期和晚期(P<0.01);在妊娠各期山羊子宫中的TLR4mRNA的表达量变化规律与TLR4相对表达量一致。表明TLR4在妊娠期关中奶山羊子宫的分布和表达具有一定的规律,并可能参与子宫的免疫和分泌调节功能。 展开更多

关键词 妊娠子宫 TOLL样受体4 关中奶山羊 免疫组织化学SP法 荧光定量RT-pcr

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新疆黄萎病棉株内生细菌定量及其季节空间变化规律 被引量：1

7

作者 李雪艳 张涛 +10 位作者 杨红梅 楚敏 高雁 曾军 霍向东 张涛 林青 欧提库尔 李玉国 娄恺 史应武 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期2117-2120,共4页

【目的】本文研究了新疆棉花内生细菌定量在季节及空间上的变化规律,建立了棉花内生细菌的荧光定量PCR检测方法。【方法】利用内生细菌16S rDNA基因特异引物对新疆不同季节及空间的棉花总DNA进行扩增,随后将PCR产物纯化,得到内生细菌的... 【目的】本文研究了新疆棉花内生细菌定量在季节及空间上的变化规律,建立了棉花内生细菌的荧光定量PCR检测方法。【方法】利用内生细菌16S rDNA基因特异引物对新疆不同季节及空间的棉花总DNA进行扩增,随后将PCR产物纯化,得到内生细菌的部分16S rDNA序列(长度为370 bp)。以含该序列的重组质粒为标准品,建立标准曲线,并对新疆棉花不同季节和不同空间内生细菌定量。【结果】7个地区的苗期、蕾期、花期、吐絮期内生细菌数量呈现先增加再减小再增加再减小的规律。苗期精河达到最低值,平均值为2.32×10~7copies/g(FRW),蕾期图木舒克平均值最高,达1.35×10~8copies/g(FRW),花期石河子最低,平均值达1.267348×10~7copies/g(FRW),吐絮期库尔勒平均值最高,达2.31×10~8copies/g(FRW)。内生细菌数量在空间上整体为东疆最高,南疆相对较高,北疆最少。东疆哈密苗期最高,平均达3.96×10~8copies/g(FRW),南疆库尔勒吐絮期次之,平均达2.31×10~8copies/g(FRW)。【结论】棉花内生细菌的数量在不同的季节和空间存在差异,整体变化趋势明显。 展开更多

关键词 新疆黄萎病棉花 内生细菌 定量 季节变化规律 空间变化规律

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血清循环miR-103a-2在非酒精性脂肪性肝病中的表达及意义 被引量：1

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作者 王旭 李丹妮 +1 位作者 付俣萧 冯辉 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第5期346-348,共3页

目的探讨miR-103作为非侵袭性生物学标志物对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)代谢异常的筛查意义。方法以健康人群和NAFLD患者为研究对象,采集血清样本进行生化指标检测。采用Nucleo ZOL法分离血清miRNA,SYBR Green法对miR-103a-2进行相对定... 目的探讨miR-103作为非侵袭性生物学标志物对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)代谢异常的筛查意义。方法以健康人群和NAFLD患者为研究对象,采集血清样本进行生化指标检测。采用Nucleo ZOL法分离血清miRNA,SYBR Green法对miR-103a-2进行相对定量分析。Speraman法对miR-103a-2和生化指标进行相关性分析。结果血清学分析结果显示,与健康人对照组相比,NAFLD组TC(P<0.01)、TG(P<0.01)、ALT(P<0.01)和γ-GGT(P<0.01)水平均明显升高。与血脂正常NAFLD组相比,高脂血症NAFLD组中TC(P<0.01)、TG(P<0.01)和LDL-C(P<0.05)水平均明显升高,与健康人对照组相比,血脂正常NAFLD患者(P<0.05)和伴有高血脂症NAFLD患者(P<0.01)血清miR-103a-2表达水平均升高。血清miR-103a-2水平与血清TC水平呈正相关(r=0.495,P=0.001)。结论血清miR-103a-2较血脂更为敏感,可能成为NAFLD无创性筛查指标。 展开更多

关键词 非酒精性脂肪肝 高脂血症 MIRNA miR-103a 荧光实时定量pcr

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催青温度对家蚕二化性品种丙酮酸脱氢酶激酶基因(BmPDK)表达的影响

9

作者 宋海韬 王力刚 +2 位作者 黄勇 赵巧玲 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期914-919,共6页

丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)在生物体的新陈代谢中具有重要的生理功能。为了探讨家蚕(Bombyx mori)PDK基因的表达特性,用蛾区半分法将二化性家蚕品种的活化越年卵(丙2期)分别以常温(25℃)光照和低温(15℃)黑暗催青,通过实时荧光定量PCR技术... 丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)在生物体的新陈代谢中具有重要的生理功能。为了探讨家蚕(Bombyx mori)PDK基因的表达特性,用蛾区半分法将二化性家蚕品种的活化越年卵(丙2期)分别以常温(25℃)光照和低温(15℃)黑暗催青,通过实时荧光定量PCR技术检测分析2种温度催青处理后家蚕不同发育阶段和不同组织的BmPDK表达水平。常温光照催青区BmP-DK的表达水平表现出发育时期和组织差异:胚胎发育阶段BmPDK在己4期的表达水平最高,其次是戊2、己3和己5期;幼虫发育阶段BmPDK的表达水平在蚁蚕期极显著高于其它龄期,5龄期在卵巢和精巢的表达水平高于其它组织;蛹期BmPDK的表达水平比其它发育时期低;成虫期的表达水平与胚胎发育末期相当,其中雌蛾的脂肪体和卵巢中BmPDK的表达水平较高。推测BmPDK在家蚕胚胎发育末期及产卵过程中有重要作用。催青温度影响BmPDK在家蚕各发育时期及卵巢组织中的表达水平:胚胎发育阶段戊2期BmPDK的表达水平为常温催青区显著高于低温催青区,己3～己5期常温催青区BmPDK的表达呈低-高-低的趋势,而低温催青区则呈上升趋势;蚁蚕期BmPDK表达水平为低温催青区极显著低于常温催青区;蛹期和成虫期卵巢中,常温催青区BmPDK的表达水平极显著高于低温催青区。催青温度对二化性家蚕BmPDK的表达的影响主要出现在胚胎戊2期、胚胎己3期～蚁蚕期、蛹期、成虫期。 展开更多

关键词 家蚕 丙酮酸脱氢酶激酶 基因表达 催青温度 荧光实时定量pcr

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玻璃化冷冻对绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的影响

10

作者 王静 林嘉鹏 +4 位作者 石庆华 陈博 汪立芹 赵云程 黄俊成 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1233-1238,共6页

为详细了解玻璃化冷冻对绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的影响,分别玻璃化冷冻GV期和IVM期(18、24h)绵羊卵母细胞,解冻后进行体外培养。GV期和IVM期卵母细胞经过冷冻-解冻后,卵裂率(10.37%、23.17%、33.07%)均极显著低于对照组(82.96... 为详细了解玻璃化冷冻对绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的影响,分别玻璃化冷冻GV期和IVM期(18、24h)绵羊卵母细胞,解冻后进行体外培养。GV期和IVM期卵母细胞经过冷冻-解冻后,卵裂率(10.37%、23.17%、33.07%)均极显著低于对照组(82.96%,P<0.01),且冷冻-解冻后的GV期卵母细胞卵裂率极显著低于冷冻-解冻后的IVM期卵母细胞(P<0.01)。本试验利用荧光实时定量PCR技术检测4种母源基因:Gdf9(生长分化因子-9)、Zar1(合子阻泄因子)、Mater(胚胎必要的母体抗原)、Dnmt1(DNA甲基化转移酶1)在不同处理后的绵羊卵母细胞中的mRNA含量。结果表明,4个基因的mRNA在GV期的表达量均高于IVM期的卵母细胞(P<0.01);经玻璃化冷冻处理后,4个基因的mRNA表达量升高,其中GV期含量最高(P<0.01)。结果提示,绵羊GV或IVM期卵母细胞玻璃化冷冻导致母源基因mRNA表达量升高,可能会对胚胎发育产生负面影响。 展开更多

关键词 母源基因 玻璃化冷冻 荧光实时定量pcr

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猪流行性腹泻病毒N基因克隆及实时荧光定量PCR检测方法的建立

11

作者 李丹 付强 +3 位作者 塞力克·杰恩斯 王万顺 刘芯怡 史慧君 《新疆农业大学学报》 CAS 2021年第5期361-366,共6页

猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染引起5~8周龄断奶仔猪出现顽固性腹泻,给养猪业造成巨大的经济损失。本研究基于PEDV核衣壳蛋白(N,nucleocapsid)基因建立实时荧光定量PCR检测方法,将为PEDV诊断提供重要的方... 猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染引起5~8周龄断奶仔猪出现顽固性腹泻,给养猪业造成巨大的经济损失。本研究基于PEDV核衣壳蛋白(N,nucleocapsid)基因建立实时荧光定量PCR检测方法,将为PEDV诊断提供重要的方法。采集猪流行性腹泻新鲜粪便样品,提取总RNA后反转录成cDNA,使用PCR扩增PEDV N基因,并克隆至pMD19-T载体,经测序后获得N基因序列,提交NCBI Blast完成基因序列分析和遗传进化树构建;设计实时荧光定量PCR引物,以pMD19-T-N质粒为模板,将其稀释成不同浓度,使用SYBR Green I实时荧光定量PCR测定Ct值,并建立标准曲线,分析其线性回归系数和扩增效率,确定最低检测下限。研究结果表明,成功克隆PEDV N基因,大小为750 bp,并成功构建pMD19-T-N载体,经测序后分析发现PEDV N基因与GenBank数据库中多个PEDV毒株同源性高达98%以上,其中与KU847996.1亲缘关系最近,高达98.93%,属于同一个遗传进化分支;基于N基因建立SYBR Green I实时荧光定量PCR,线性回归系数和扩增效率分别为0.994和97.57%,最低检测下限为10 copies/μL。综上表明成功克隆PEDV N基因,并基于N基因成功建立SYBR Green I实时荧光定量PCR检测PEDV方法,为今后PEDV的有效防控提供参考。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 N基因 遗传进化树 实时荧光定量pcr

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Taqman多重实时荧光PCR同步定量检测6种动物源性成分方法的建立 被引量：12

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作者 付理文 张宇 +2 位作者 依含 李雪 朱乃硕 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期48-59,共12页

旨在建立一种可同时检测猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅6种动物源性成分的六重实时荧光定量PCR方法。根据猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅细胞核基因组保守序列,参照序列比对结果选择差异位点设计6对特异性引物和6条以不同荧光素标记的Taqman探针。通过... 旨在建立一种可同时检测猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅6种动物源性成分的六重实时荧光定量PCR方法。根据猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅细胞核基因组保守序列,参照序列比对结果选择差异位点设计6对特异性引物和6条以不同荧光素标记的Taqman探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立能同步定量检测猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅源性成分的六重实时荧光PCR方法。应用此方法分别对18种不同源性动物DNA和200份不同来源样品进行猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅源性成分检测,结果表明,所建立的六重实时荧光PCR方法灵敏度高,对六种动物的最低核酸检测量分别为0.049ng、0.048ng、0.085ng、0.13ng、0.162ng、0.074ng(50μl体系);特异性强,对狗、兔、鼠、驴、马、骆驼等其他12种动物无特异性扩增;200份样品的检测结果表明六重qPCR检测方法敏感,同一反应体系下实现一次对6种动物快速定量检测,耗时短、效率高、适用性广,可用于肉品、奶品、皮毛和饲料等动物产品猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅源性成分单一或混合物种的鉴别诊断。 展开更多

关键词 核基因组保守序列 六重实时荧光pcr 动物源性成分

原文传递

放、化复合损伤性血虚证小鼠肾脏Epo、脾脏Epo受体及骨髓细胞GM-CSF mRNA表达量变化研究 被引量：10

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作者 黄晓芹 降央泽仁 祝彼得 《成都中医药大学学报》 2009年第3期56-58,共3页

目的:探究放、化复合损伤性血虚证小鼠造血调节因子及其受体水平改变,丰富血虚证实质研究内涵。方法:用荧光定量PCR检测放、化复合损伤性血虚证小鼠肾脏Epo、脾脏Epo受体、骨髓细胞GM-CSF mRNA表达量的变化。结果:放、化复合损伤性血虚... 目的:探究放、化复合损伤性血虚证小鼠造血调节因子及其受体水平改变,丰富血虚证实质研究内涵。方法:用荧光定量PCR检测放、化复合损伤性血虚证小鼠肾脏Epo、脾脏Epo受体、骨髓细胞GM-CSF mRNA表达量的变化。结果:放、化复合损伤性血虚证小鼠肾脏Epo、脾脏Epo受体mRNA表达量显著高于正常小鼠,骨髓GM-CSF mRNA表达量无显著改变。结论:放、化复合损伤性小鼠血虚模型的形成机制与肾脏Epo、脾脏Epo受体和骨髓细胞GM-CSF的减少无关。 展开更多

关键词 放、化复合损伤 血虚证 动物模型 造血调节因子 基因表达 荧光定量pcr

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温度选择对刺参群体在不同温度下生长及热休克蛋白表达的影响 被引量：3

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作者 刘广斌 杨红生 刘石林 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期49-53,共5页

高温(26℃)培育刺参(Apostichopus japonicus)幼体获得选择群体,生长至1.03 g±1.30 g,与对照组幼参在18、20、22和24℃温度下培育。二者的成活率随着温度升高而降低,而选择组幼参24℃的成活率显著高于对照群体(P<0.05)。不同温... 高温(26℃)培育刺参(Apostichopus japonicus)幼体获得选择群体,生长至1.03 g±1.30 g,与对照组幼参在18、20、22和24℃温度下培育。二者的成活率随着温度升高而降低,而选择组幼参24℃的成活率显著高于对照群体(P<0.05)。不同温度下的特定生长率之间没有差异。TRIzol法提取刺参总RNA,获得刺参HSP70片断基因序列,利用实时定量PCR方法检测,选择群体HSP70mRNA的表达量在正常温度和热激条件下都较对照组高,但表达量升高的倍数相近,选择组为1.99倍,对照组为2.07倍。 展开更多

关键词 刺参(Apostichopus japonicus) 特定生长率 选育 荧光实时定量pcr

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免标准曲线定量PCR技术的探讨

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作者 克丙申 陈英剑 +3 位作者 徐军 齐法莲 杜秀敏 卢兆莲 《实用医药杂志》 2007年第5期592-596,共5页

目的实际应用发现,传统的定量PCR方法误差较大不能满足科学研究以及临床精确定量的需要,本文拟探讨如何选择分析使用的技术资料以降低分析误差以及分析判断误差的主要来源。方法使用PCR动力学模型模拟实时定量PCR仪器跟踪测定资料,使用... 目的实际应用发现,传统的定量PCR方法误差较大不能满足科学研究以及临床精确定量的需要,本文拟探讨如何选择分析使用的技术资料以降低分析误差以及分析判断误差的主要来源。方法使用PCR动力学模型模拟实时定量PCR仪器跟踪测定资料,使用不同扩增时期的荧光数值资料计算起始模板数、分析误差,并根据仪器的荧光信号测定误差随机对资料加入误差后,分析结果的误差与研究误差的分布。结果使用指数扩增期内后期的5个资料点分析,可以获得当前仪器误差水平下,相对误差最小的结果。使用的资料点一旦包含有一个线性扩增期资料,结果的误差即显著增加。该文亦给出了一般性最后一次指数扩增循环的判定方法。结论免标准曲线的定量PCR方法将成为今后定量PCR的主要技术手段。 展开更多

关键词 荧光定量pcr 实时定量pcr pcr动力学模型 免标准曲线定量

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