期刊文献+
共找到89篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
苹果和葡萄果实蛋白激酶特性分析 被引量:2
1
作者 梁小娥 张大鹏 贾文锁 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 2000年第3期257-262,共6页
以组蛋白Ⅲ S作苹果和葡萄果肉蛋白激酶制剂底物时 ,反应体系中加EGTA可抑制蛋白激酶活性 ,而加Ca2 +可激活蛋白激酶的活性 ,表明苹果和葡萄果实中有依赖钙的蛋白激酶存在。而且 ,葡萄果实微粒体蛋白激酶呈热稳定性 ,苹果果实微粒体蛋... 以组蛋白Ⅲ S作苹果和葡萄果肉蛋白激酶制剂底物时 ,反应体系中加EGTA可抑制蛋白激酶活性 ,而加Ca2 +可激活蛋白激酶的活性 ,表明苹果和葡萄果实中有依赖钙的蛋白激酶存在。而且 ,葡萄果实微粒体蛋白激酶呈热稳定性 ,苹果果实微粒体蛋白激酶对热敏感。以髓鞘碱性蛋白 (MBP)作底物 ,在苹果和葡萄果实微粒体中都检测出很高的蛋白激酶活性 ,并且不依赖于钙 ,说明苹果和葡萄果实中可能有分裂原激活的蛋白激酶 (MAP激酶 )的存在。苹果和葡萄果实MAP激酶的活性都表现出对二价阳离子Mg2 +或Mn2 +的依赖 。 展开更多
关键词 苹果 葡萄 果实发育 蛋白激酶 蛋白质磷 酸化
下载PDF
荔枝CDPK基因家族鉴定及其在霜疫病胁迫下的表达分析 被引量:1
2
作者 刘海伦 严倩 +4 位作者 姜永华 史发超 陈洁珍 蔡长河 欧良喜 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期442-456,共15页
【目的】鉴定荔枝(Litchi chinensis Sonn.)钙依赖蛋白激酶(CDPK)基因家族,并分析其在不同组织和荔枝霜疫病胁迫下的表达模式。【方法】基于荔枝基因组数据,利用生物信息学方法鉴定CDPK家族基因,并对其序列特征、基因结构、启动子顺式... 【目的】鉴定荔枝(Litchi chinensis Sonn.)钙依赖蛋白激酶(CDPK)基因家族,并分析其在不同组织和荔枝霜疫病胁迫下的表达模式。【方法】基于荔枝基因组数据,利用生物信息学方法鉴定CDPK家族基因,并对其序列特征、基因结构、启动子顺式作用元件、染色体定位和进化关系等进行分析。依赖276份荔枝种质材料,筛选高抗霜疫病的优良荔枝品种。另外,通过RNA-Seq和qRT-PCR方法检测高抗病荔枝品种中LcCDPK基因家族成员在荔枝霜疫病胁迫处理下的表达模式。【结果】从276份荔枝自然群体材料中鉴定到荔枝高抗霜疫病品种裕荣1号(YR1)。从荔枝基因组中共鉴定出19个LcCDPK基因家族成员,分布于11条染色体上。根据保守结构域和系统发育分析将其分为4个亚家族。基因结构分析表明,LcCDPKs外显子数量为7~19。蛋白结构分析发现,所有LcCDPK蛋白均具有1~4个EF-hand结构域。顺式作用元件分析表明,LcCDPKs成员拥有大量的生物和非生物胁迫响应元件。组织表达分析发现,LcCDPK基因在荔枝不同组织存在组织特异性。另外,表达分析发现在高抗霜疫病荔枝裕荣1号(YR1)中,LcCDPK5、LcCDPK17和LcCDPK19在霜疫病胁迫后急剧上调表达,LcCDPK3和LcCDPK8急剧下调表达。【结论】裕荣1号(YR1)是一种高抗霜疫病的荔枝品种。荔枝基因组中共鉴定出19个CDPK基因家族成员,具有明显的组织特异性,LcCDPK5、LcCDPK17、LcCDPK19、LcCDPK3和LcCDPK8可能在荔枝抗霜疫病过程中发挥重要作用。研究结果为进一步探究荔枝CDPK基因家族提供了参考。 展开更多
关键词 荔枝 钙依赖蛋白激酶(CDPK) 荔枝霜疫病 表达分析
下载PDF
蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因克隆与表达分析 被引量:1
3
作者 王莹 王晓宇 +4 位作者 孙德慧 霍红雁 刘海臣 徐惠 张继星 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2023年第2期85-92,共8页
为探讨蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因(RcCDPK29)在蓖麻耐盐中的作用,以蓖麻叶片为材料,设计特异性引物,克隆蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因(RcCDPK29),并对所得序列进行生物信息学分析。结果表明,蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因(RcCDPK29)序列全长1590... 为探讨蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因(RcCDPK29)在蓖麻耐盐中的作用,以蓖麻叶片为材料,设计特异性引物,克隆蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因(RcCDPK29),并对所得序列进行生物信息学分析。结果表明,蓖麻钙依赖蛋白激酶29基因(RcCDPK29)序列全长1590 bp;编码528个氨基酸;蛋白分子量为59.74 ku;等电点(pI)值6.21;是典型的非跨膜蛋白;亲水性数值为负值,属于亲水性蛋白;RcCDPK29蛋白α-螺旋占比最高有228个;RcCDPK29与拟南芥CDPK(SMTL ID:3q5i.1)相似度为40.41%,具有较高可信度(>30%)。将木薯、麻枫树、巴西橡胶树、柑橘、石榴、毛果杨与蓖麻RcCDPK29氨基酸序列进行同源性比对。其中,与麻枫树的同源性最高,为82.29%。RcCDPK29蛋白包含1个Ser/Thr蛋白激酶催化结构域和4个与Ca^(2+)结合的EF-hand型结构域。通过qRT-PCR技术,分析RcCDPK29在不同水平盐胁迫下蓖麻不同组织中的表达,结果表明,RcCDPK29基因主要在茎中表达,盐处理12 h表达量最高。随着盐处理时间的延长,RcCDPK29基因根的表达量逐渐下降,分别在2,8,24 h达到最低,与0 h差异显著;叶的表达量在2 h的表达量最低且与0 h相比差异显著。根据RcCDPK29全长设计带有SmaⅠ和XbaⅠ酶切位点的引物扩增出序列全长,用SmaⅠ和XbaⅠ进行双酶切后与表达载体pCG-3300连接。成功构建了CRcCDPK29的表达载体。因此,RcCDPK29在蓖麻受到盐胁迫时起重要作用。 展开更多
关键词 蓖麻 钙依赖蛋白激酶 基因克隆 生物信息学分析 表达载体
下载PDF
高温胁迫下玉米钙依赖蛋白激酶基因的表达及功能 被引量:4
4
作者 张宇萍 杨少玉 +1 位作者 胡秀丽 杨浩 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2021年第2期227-233,256,共8页
利用多种生物信息学手段从玉米基因组鉴定CDPKs家族基因,并从染色体定位、表达水平、功能聚类、功能预测分析及利用实时荧光定量PCR方法分析高温胁迫下该家族基因的表达水平。结果表明,ZmCDPKs包含32个家族成员,分布在9条染色体上,相对... 利用多种生物信息学手段从玉米基因组鉴定CDPKs家族基因,并从染色体定位、表达水平、功能聚类、功能预测分析及利用实时荧光定量PCR方法分析高温胁迫下该家族基因的表达水平。结果表明,ZmCDPKs包含32个家族成员,分布在9条染色体上,相对分子质量13.6~62.9 kD,将玉米、拟南芥和水稻序列比对分析,得出形成了4个明显的分支的结论,暗示着它们在功能上存在着差异。从ZmCDPKs家族中筛选出ZmCDPK6基因响应高温胁迫,通过RNA-seq数据分析,推测ZmCDPK6在果皮和胚根中高度表达,并且还受到盐胁迫和低温胁迫诱导表达。 展开更多
关键词 玉米 钙依赖蛋白激酶 高温胁迫 生物信息学
下载PDF
花生AhCDPK32基因克隆及表达载体的构建 被引量:3
5
作者 张青云 孙全喜 +6 位作者 唐月异 王秀贞 吴琪 王云云 曹广英 祁雪 王传堂 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1171-1178,共8页
利用RT-PCR方法,从花生品种"汕油21"成熟种子中克隆了钙依赖蛋白激酶(camcium-dependent protein kinase,CDPK)基因Ah CDPK32,该序列包含1 617 bp开放阅读框,共编码538个氨基酸。核苷酸序列在NCBI中进行Blast比较,结果显示与... 利用RT-PCR方法,从花生品种"汕油21"成熟种子中克隆了钙依赖蛋白激酶(camcium-dependent protein kinase,CDPK)基因Ah CDPK32,该序列包含1 617 bp开放阅读框,共编码538个氨基酸。核苷酸序列在NCBI中进行Blast比较,结果显示与大豆Gm CDPK32(Gen Bank登录号为XM_003554131)基因同源性为87%。生物信息学分析结果,预测蛋白质分子量为60.807 k D,蛋白质等电点(PI)为6.96,蛋白质信号肽分析和疏水性分析,表明信号肽剪切可能性小,蛋白质具亲水性。我们构建了该基因超表达载体p CambiaAh CDPK32,为进一步研究该基因的功能提供了理论基础。这是第一次在花生中克隆到CDPK基因的报道。 展开更多
关键词 花生 钙依赖蛋白激酶 进化树 疏水性分析
原文传递
钙依赖性蛋白激酶34在小麦籽粒淀粉合成的功能 被引量:2
6
作者 徐梦军 高天 +2 位作者 王鹏飞 李鸽子 康国章 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期26-33,共8页
钙依赖性蛋白激酶在调控植物发育与物质合成中发挥重要功能。为探讨一个钙依赖性蛋白激酶-TaCPK34在小麦淀粉合成中的功能,利用大麦条纹花叶病介导的基因沉默技术(barley stripe mosaic virus-virus induced gene-silencing,BSMV-VIGS)... 钙依赖性蛋白激酶在调控植物发育与物质合成中发挥重要功能。为探讨一个钙依赖性蛋白激酶-TaCPK34在小麦淀粉合成中的功能,利用大麦条纹花叶病介导的基因沉默技术(barley stripe mosaic virus-virus induced gene-silencing,BSMV-VIGS)将该基因沉默,并在田间条件下测定灌浆期间沉默植株籽粒内TaCPK34基因的表达量及成熟籽粒的淀粉性状。结果表明,在花后15 d、20 d、26 d和30 d,BSMV-VIGS-TaCPK34沉默植株中TaCPK34基因表达量受到显著抑制(63.8%~97.8%); BSMV-VIGS-TaCPK34沉默植株成熟籽粒淀粉含量、千粒重、粒长和粒宽均显著降低(降幅分别为6.0%、7.1%、4.4%和11.0%);扫描电镜观察发现BSMVVIGS-TaCPK34沉默植株成熟籽粒内淀粉粒排列疏松且数量减少。这些研究结果表明TaCPK34在小麦籽粒灌浆期间对籽粒淀粉的合成有重要影响。 展开更多
关键词 小麦 淀粉合成 钙依赖性蛋白激酶 大麦条纹花叶病介导的基因沉默
原文传递
刚地弓形虫CDPK1蛋白结构与抗原表位的生物信息学分析
7
作者 殷荷 党甜甜 +4 位作者 李佳铭 李光琪 田婷婷 吴赓 赵志军 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第9期1009-1013,1019,共6页
目的对刚地弓形虫钙依赖性蛋白激酶1(Toxoplasma gondii Calcium-dependent protein kinases1,TgCDPK1)的蛋白结构及抗原表位进行分析,为弓形虫病疫苗的研制提供参考依据。方法在NCBI数据库中检索TgCDPK1蛋白的氨基酸序列,分别采用ProtP... 目的对刚地弓形虫钙依赖性蛋白激酶1(Toxoplasma gondii Calcium-dependent protein kinases1,TgCDPK1)的蛋白结构及抗原表位进行分析,为弓形虫病疫苗的研制提供参考依据。方法在NCBI数据库中检索TgCDPK1蛋白的氨基酸序列,分别采用ProtParam、ProtScale、MotifyScan、TMHMM 2.0、SMART、SOPMA、Phyre2、IEDB、PSORT、STRING、PREDICTED ANTIGENIC PEPTIDES及SYFPEITHI在线分析网站预测TgCDPK1蛋白的氨基酸组成、理化性质、蛋白翻译后修饰位点、结构域、功能域、二级结构、三级结构、互作蛋白、抗原决定簇、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位等。结果TgCDPK1蛋白由582个氨基酸组成,其分子式是C_(2898)H_(4573)N_(785)O_(888)S_(25),分子质量单位(Mr)为65.42142×10^(3),理论等电点为6.04,不稳定指数为36.980,脂溶性指数为79.91;该蛋白存在36个蛋白翻译后修饰位点;不含跨膜结构域,但含4个EF-手钙结合域及1个蛋白激酶结构域;蛋白二级结构中52.96%为α-螺旋,14.00%为延长链,7.90%为β-转角,35.05%为无规则卷曲;共含24个抗原决定簇,平均抗原倾向指数为1.0237;TgCDPK1蛋白抗原表位分布广泛,含有8个B细胞抗原表位、14个CTL细胞表位和12个Th细胞表位。结论TgCDPK1蛋白含有多种抗原表位,免疫原性高,可作为弓形虫病疫苗研制的候选蛋白。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 钙依赖性蛋白激酶1 生物信息学分析 免疫原性
原文传递
玉米ZmRBOHD1和ZmCDPK32的蛋白相互作用研究
8
作者 李洁 初智霖 +1 位作者 李小蒙 周晓今 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期629-636,共8页
为探索玉米呼吸爆发氧化酶(RBOH)与钙依赖型蛋白激酶(CDPK)协同调控花粉管极性生长的机制,通过蛋白保守结构域分析获得14个ZmRBOH家族基因,且利用转录组数据分析了ZmRBOH的时空表达模式.结果显示,ZmRBOHD1和ZmRBOHD2在玉米成熟花粉中特... 为探索玉米呼吸爆发氧化酶(RBOH)与钙依赖型蛋白激酶(CDPK)协同调控花粉管极性生长的机制,通过蛋白保守结构域分析获得14个ZmRBOH家族基因,且利用转录组数据分析了ZmRBOH的时空表达模式.结果显示,ZmRBOHD1和ZmRBOHD2在玉米成熟花粉中特异表达.选择花粉特异表达的ZmRBOHD1和功能已知的花粉管极性生长调节因子ZmCDPK32开展蛋白相互作用研究,结论有如下2点:1)通过瞬时表达ZmRBOHD1-GFP融合蛋白证明ZmRBOHD1定位于细胞膜;2)利用酵母双杂交和双分子荧光互补技术证实ZmRBOHD1可以和ZmCDPK32相互作用,并且生物信息学分析发现ZmRBOHD1具有潜在的CDPK磷酸化靶点.结果表明,ZmCDPK32可能通过与ZmRBOHD1的相互作用协同调控玉米花粉管发育,这为深入探究花粉管极性生长的分子机制奠定了基础. 展开更多
关键词 玉米 呼吸爆发氧化酶 钙依赖型蛋白激酶 酵母双杂交 双分子荧光互补
下载PDF
刚地弓形虫钙依赖蛋白激酶9对小鼠Ana-1巨噬细胞功能的影响
9
作者 马群山 刘欣超 +5 位作者 孙晓妮 王帅 徐立新 宋小凯 严若峰 李祥瑞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期731-739,共9页
本试验旨在探究刚地弓形虫钙依赖蛋白激酶9(CDPK9)对小鼠Ana-1巨噬细胞活性及功能的影响。利用激光共聚焦技术验证CDPK9与Ana-1巨噬细胞的结合情况;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度CDPK9处理24h对Ana-1巨噬... 本试验旨在探究刚地弓形虫钙依赖蛋白激酶9(CDPK9)对小鼠Ana-1巨噬细胞活性及功能的影响。利用激光共聚焦技术验证CDPK9与Ana-1巨噬细胞的结合情况;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度CDPK9处理24h对Ana-1巨噬细胞增殖活性的影响;利用流式细胞术检测不同浓度CDPK9处理48h对Ana-1巨噬细胞凋亡及吞噬功能的影响;采用总一氧化氮试剂盒检测不同浓度CDPK9处理48h对Ana-1巨噬细胞NO分泌量的影响;利用细胞因子ELISA试剂盒检测不同浓度CDPK9处理48h对Ana-1巨噬细胞TNF-α、TGF-β1、IL-10、IL-1β分泌的影响。结果如下:CDPK9能够与Ana-1巨噬细胞结合。CDPK9对Ana-1巨噬细胞增殖具有抑制作用,较高浓度时抑制作用明显。CDPK9能够显著提高Ana-1巨噬细胞的凋亡比例,同时促进其吞噬能力。CDPK9上调了Ana-1巨噬细胞NO产量。细胞因子IL-1β和TNF-α的表达量上升,而TGF-β1和IL-10的表达量有所下降。CDPK9能够与巨噬细胞结合并通过多种途径影响其活性及免疫功能。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 钙依赖蛋白激酶9 巨噬细胞 流式细胞术 细胞因子
下载PDF
植物中钙依赖蛋白激酶的研究进展 被引量:23
10
作者 麻浩 王爽 周亚丽 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期565-572,共8页
钙是植物必需的大量元素之一,同时钙离子(Ca^(2+))是细胞信号转导的第二信使。钙依赖蛋白激酶(calcium-dependent protein kinase,CDPK)作为Ca^(2+)的感受器普遍存在于植物和部分原生动物中,是植物特有的一类丝氨酸/苏氨酸型蛋白激酶,... 钙是植物必需的大量元素之一,同时钙离子(Ca^(2+))是细胞信号转导的第二信使。钙依赖蛋白激酶(calcium-dependent protein kinase,CDPK)作为Ca^(2+)的感受器普遍存在于植物和部分原生动物中,是植物特有的一类丝氨酸/苏氨酸型蛋白激酶,参与了多种Ca^(2+)介导的信号通路,在植物发育信号和逆境信号转导中具有重要作用。本文概述了钙依赖蛋白激酶在植物体内的分布、结构、底物、功能以及大豆CDPK的研究进展,旨在为今后培育抗逆植物品种提供参考依据。 展开更多
关键词 植物 钙依赖蛋白激酶 发育信号 逆境信号 研究进展
下载PDF
钙依赖蛋白激酶(CDPKs)介导植物信号转导的分子基础 被引量:9
11
作者 王娇娇 韩胜芳 +3 位作者 李小娟 谷俊涛 路文静 肖凯 《草业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期241-250,共10页
钙依赖蛋白激酶(CDPKs)是生长发育信号和逆境信号诱发的钙信号的重要信号传递体,在调控植物信号转导途径中下游基因的表达、生化代谢、离子和水分跨膜运输等生物学过程中具有重要作用。本研究对植物种属CDPK的结构特点、CDPK在植株体内... 钙依赖蛋白激酶(CDPKs)是生长发育信号和逆境信号诱发的钙信号的重要信号传递体,在调控植物信号转导途径中下游基因的表达、生化代谢、离子和水分跨膜运输等生物学过程中具有重要作用。本研究对植物种属CDPK的结构特点、CDPK在植株体内的分布特征、CDPK生理生化特性及生化反应调控特性、CDPK在信号转导中的作用,以及CDPK在植株体内的生物学功能进行了概述。旨在为今后牧草作物CDPK的鉴定及其介导的信号转导机制的研究提供参考依据。 展开更多
关键词 钙依赖蛋白激酶(CDPKs) 结构 钙信号 信号转导 生物学功能
下载PDF
番茄钙依赖性蛋白激酶基因LeCPK2在热(光)胁迫中的功能鉴定 被引量:9
12
作者 畅文军 付桂 +2 位作者 陈鑫 朱家红 张治礼 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期338-345,共8页
钙依赖性蛋白激酶(calcium-dependent protein kinases,CDPKs or CPKs)作为一类钙感知蛋白在植物的生长发育和胁迫应答中起着重要的作用。LeCPK2(GenBank accession No.:GQ205414)是我们从番茄中分离的第3个CDPK基因,前期研究表明LeCPK... 钙依赖性蛋白激酶(calcium-dependent protein kinases,CDPKs or CPKs)作为一类钙感知蛋白在植物的生长发育和胁迫应答中起着重要的作用。LeCPK2(GenBank accession No.:GQ205414)是我们从番茄中分离的第3个CDPK基因,前期研究表明LeCPK2可能在植物热胁迫应答中发挥作用。为了进一步研究其在热胁迫中的功能,我们通过电子克隆的方法分离了LeCPK2的启动子序列,并通过LeCPK2过表达烟草分析其在高温胁迫中的潜在的功能。生物信息学分析显示,LeCPK2启动子中包含5个热响应元件,和前期试验结果一致。野生型植株在受到热胁迫后,对光更为敏感,强光照下植株叶片发生萎蔫,而强光本身不会对未受热胁迫的健康植株造成伤害。LeCPK2转基因植株热、光胁迫后不会出现受害表型。以上研究表明,LeCPK2在植物的热胁迫应答中发挥重要作用,能够有效保护植株免受高温胁迫的损害,是一个优秀的耐热(光)基因。本研究将为揭示番茄LeCPK2遗传功能及对其开发利用奠定基础。 展开更多
关键词 钙依赖性蛋白激酶 启动子 热胁迫 强光 番茄(Solanum lycopersicum)
下载PDF
油菜钙依赖蛋白激酶BnCDPK1的克隆和表达分析 被引量:10
13
作者 张秋平 文李 +4 位作者 王峰 廖志强 李慧 刘睿洋 官春云 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1320-1326,共7页
根据转录组测序获得的钙依赖蛋白激酶基因的EST序列设计特异引物,利用RT-PCR和RACE技术从油菜中克隆获得Bn CDPK1基因全长序列,NCBI登录号为KF740477,其c DNA和g DNA全长分别为2115 bp和2857 bp,含有11个内含子和12个外显子。生物信息... 根据转录组测序获得的钙依赖蛋白激酶基因的EST序列设计特异引物,利用RT-PCR和RACE技术从油菜中克隆获得Bn CDPK1基因全长序列,NCBI登录号为KF740477,其c DNA和g DNA全长分别为2115 bp和2857 bp,含有11个内含子和12个外显子。生物信息学分析表明其开放阅读框为1581 bp,编码527个氨基酸,具有CDPKs家族典型的特征,含有1个激酶区域和4个钙离子手型结构域,与拟南芥At CDPK28同源性最高,属于第Ⅳ亚家族。Bn CDPK1在油菜的根、茎、叶、花、种子中均有表达,但表达丰度存在差异,叶片中表达量最高,其次为茎、根和种子,花中的表达量最低;在高抗和高感油菜品种中,菌核菌胁迫均能够诱导Bn CDPK1上调表达,但是高抗品种比高感品种反应更迅速,表达量更高。接种前、接种后12 h、接种后24 h,高抗品种的表达量相比高感品种分别提高1.4倍、4倍和3倍,推测其可能参与油菜的生长发育以及油菜对菌核菌侵染的应答和防御反应。 展开更多
关键词 油菜 钙依赖蛋白激酶 基因克隆 基因表达 抗病
下载PDF
水稻钙依赖型蛋白激酶OsCPK9基因RNAi表达载体的构建及遗传转化 被引量:9
14
作者 韦淑亚 张莹莹 +6 位作者 赵旭东 刘小东 罗青晨 卫秋慧 陈鹏 何光源 杨广笑 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期581-588,共8页
水稻钙依赖型蛋白激酶(CDPKs)是一个响应逆境胁迫并在植物发育过程中起重要作用的蛋白激酶。我们采用RT-PCR从水稻品种日本晴(Oryza sativa L.cv.Nipponbare)中克隆了OsCPK9基因靠近翻译起始位点下游的一段280 bp的特异基因片段。将该... 水稻钙依赖型蛋白激酶(CDPKs)是一个响应逆境胁迫并在植物发育过程中起重要作用的蛋白激酶。我们采用RT-PCR从水稻品种日本晴(Oryza sativa L.cv.Nipponbare)中克隆了OsCPK9基因靠近翻译起始位点下游的一段280 bp的特异基因片段。将该片段以正、反向分别连接到来源于小麦TAK14基因的548 bp内含子片段(NCBI accession number:AF325198)两侧,从而获得pSK-OsCPK9-RNAi的中间表达载体。进而将其克隆到植物双元表达载体pCAMBIA1301中,构建shRNAi表达载体pCAMBIA-OsCPK9-RNAi。经酶切和测序鉴定正确后,利用农杆菌介导转化水稻。通过抗性筛选和标记基因hyg和gus进行PCR鉴定,筛选到20株转基因水稻植株,实时荧光定量PCR分析显示,部分转基因植株OsCPK9的表达受到显著抑制。 展开更多
关键词 OsCPK9 水稻 RNAI CDPK 遗传转化
下载PDF
大花杓兰钙依赖蛋白激酶基因克隆及植物表达载体构建 被引量:9
15
作者 付亚娟 侯荟玲 +3 位作者 乔洁 耿晓进 王聪艳 侯晓强 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1613-1620,共8页
RT-PCR结合RACE技术,克隆到1个全长2079 bp的大花杓兰钙依赖蛋白激酶基因CmCDPK,cDNA为1491 bp,编码496个氨基酸。CmCDPK是1个具有CDPKs典型的Ser/Thr蛋白激酶保守结构域、含1个跨膜结构域、无信号肽、稳定的亲水性蛋白。CmCDPK二级结... RT-PCR结合RACE技术,克隆到1个全长2079 bp的大花杓兰钙依赖蛋白激酶基因CmCDPK,cDNA为1491 bp,编码496个氨基酸。CmCDPK是1个具有CDPKs典型的Ser/Thr蛋白激酶保守结构域、含1个跨膜结构域、无信号肽、稳定的亲水性蛋白。CmCDPK二级结构主要由α-螺旋和无规卷曲构成。相对于其他植物CDPKs,CmCDPK与小兰屿蝴蝶兰和铁皮石斛的亲缘关系更近。通过DNA重组技术将CmCDPK片段克隆到pBI121质粒上。PCR、酶切及DNA测序的结果表明,重组质粒pBI-CmCDPK包含1个1491 bp的CmCDPK片段,且核苷酸序列及插入方向完全正确。本研究首次克隆了大花杓兰CmCDPK基因,并成功构建了植物过表达载体pBI-CmCDPK,为CmCDPK基因在烟草中实现遗传转化和功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 大花杓兰 钙依赖蛋白激酶 RT-PCR RACE 植物表达载体
下载PDF
玉米根尖质膜的受钙激活蛋白激酶的特性 被引量:3
16
作者 陈武 陈珈 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第2期166-170,共5页
以生长3-4d的玉米(ZeamaysL.)根尖为材料,用两相法得到高纯度的质膜,鉴定了质膜上存在一受钙激活的蛋白激酶。该类激酶主要位于质膜内侧;钙的半激活浓度为50μmol/L;外源钙调素对激酶没有明显的活化作用;钙调素拮抗剂三氟拉嗪... 以生长3-4d的玉米(ZeamaysL.)根尖为材料,用两相法得到高纯度的质膜,鉴定了质膜上存在一受钙激活的蛋白激酶。该类激酶主要位于质膜内侧;钙的半激活浓度为50μmol/L;外源钙调素对激酶没有明显的活化作用;钙调素拮抗剂三氟拉嗪(TFP)可明显抑制激酶活性,半抑制浓度为75μmol/L;该类激酶对外源底物组蛋白ⅢS型有较高的特异性。结果显示此激酶属于钙依赖钙调素不依赖蛋白激酶。质膜上33kD和58kD两种蛋白可能是这种钙依赖蛋白激酶的内源底物。 展开更多
关键词 玉米 质膜 钙依赖蛋白激酶
下载PDF
雨生红球藻钙依赖蛋白激酶(CDPK)家族鉴定与表达分析 被引量:1
17
作者 李亚男 张豪杰 +7 位作者 梁梦静 罗涛 李旺宁 张春辉 季春丽 李润植 薛金爱 崔红利 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期300-312,共13页
【目的】钙依赖蛋白激酶(CDPK或CPK)广泛参与植物生长发育和环境胁迫响应。为探究CDPK基因在雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)生长发育及虾青素积累中的功能,对HpCDPK基因家族进行鉴定和表达分析。【方法】利用生物信息学方法鉴定... 【目的】钙依赖蛋白激酶(CDPK或CPK)广泛参与植物生长发育和环境胁迫响应。为探究CDPK基因在雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)生长发育及虾青素积累中的功能,对HpCDPK基因家族进行鉴定和表达分析。【方法】利用生物信息学方法鉴定雨生红球藻HpCDPK基因家族成员,分析其编码蛋白的理化特性、系统进化、保守基序和功能结构域,以及缺氮等胁迫条件下HpCDPK成员基因的表达谱。【结果】结果表明,共鉴定7个HpCDPK基因家族成员,所有HpCDPK蛋白都含有典型EF-hand基序和蛋白激酶结构域。系统发育分析表明,这些HpCDPK与来自莱茵衣藻的CrCDPK聚为一类,与高等植物拟南芥的AtCDPK分开,暗示在进化过程中发生了种属特异性的基因复制事件。转录组数据分析表明,HpCDPK基因表达受到多种胁迫诱导,其中HpCDPK7基因转录水平在缺氮条件下上调最为明显。此外,HpCDPK与类胡萝卜素合成相关基因的表达相关性分析结果显示,HpCDPK与多个类胡萝卜素合成相关基因表达密切关联,特别是HpCDPK2与虾青素合成关键基因(BKT和BCH)的表达显著正相关(P<0.05)。【结论】本研究鉴定了7个HpCDPK基因,HpCDPK7基因在缺氮条件下的表达上调最为明显,HpCDPK2可能在类胡萝卜素及虾青素合成积累中发挥重要调控作用。研究结果为后续深入解析HpCDPK介导雨生红球藻胁迫响应和类胡萝卜素合成积累的功能及分子机制提供参考依据。 展开更多
关键词 雨生红球藻 钙依赖性蛋白激酶 序列分析 表达模式 非生物逆境
下载PDF
CDPK20基因表达及其对山药块茎膨大调控作用研究 被引量:6
18
作者 王金鑫 季祥 +4 位作者 高圆丽 张艳芳 邵盈 邢丽南 霍秀文 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期189-196,共8页
为探讨钙依赖性蛋白激酶(CDPK)在山药块茎淀粉及内源激素合成中的作用,该研究以‘毕克齐’和‘大和长芋’山药为试验材料,测定了块茎的淀粉、糖、内源激素含量等指标并进行相关性分析;采用RT-PCR技术克隆了钙依赖性蛋白激酶基因(CDPK20)... 为探讨钙依赖性蛋白激酶(CDPK)在山药块茎淀粉及内源激素合成中的作用,该研究以‘毕克齐’和‘大和长芋’山药为试验材料,测定了块茎的淀粉、糖、内源激素含量等指标并进行相关性分析;采用RT-PCR技术克隆了钙依赖性蛋白激酶基因(CDPK20),并进行生物信息学分析,构建CDPK∶GFP融合载体,对CDPK蛋白进行亚细胞定位,实时荧光定量PCR对CDPK20在山药块茎不同发育时期的表达进行分析。结果表明:(1)CDPK20基因开放阅读框长为1047 bp,共编码348个氨基酸。(2)CDPK20蛋白定位于细胞核和细胞膜。(3)CDPK20的表达量在块茎种植后的105~165 d呈现先升后降的趋势。(4)CDPK酶活性与淀粉含量呈极显著正相关,与可溶性总糖含量和还原糖呈显著负相关,与ABA呈极显著负相关,与ZR呈极显著正相关。研究表明,CDPK参与块茎中的淀粉和糖代谢及植物内源激素ABA、ZR的合成。 展开更多
关键词 山药块茎 钙依赖性蛋白激酶 基因表达分析 相关性分析
下载PDF
山药块茎膨大期DoCDPK1基因生物信息学及低温胁迫下的表达分析
19
作者 高晶晶 张艳芳 +3 位作者 邢丽南 葛明然 季祥 霍秀文 《中国瓜菜》 CAS 北大核心 2024年第7期42-51,共10页
钙依赖性蛋白激酶(CDPK)在植物的生长发育及逆境胁迫方面发挥着重要作用。以大和长芋和毕克齐山药为试验材料,克隆钙依赖性蛋白激酶基因DoCDPK1,并对其进行生物信息学分析,为DoCDPK1基因的功能研究奠定基础。采用生物信息学方法分析DoCD... 钙依赖性蛋白激酶(CDPK)在植物的生长发育及逆境胁迫方面发挥着重要作用。以大和长芋和毕克齐山药为试验材料,克隆钙依赖性蛋白激酶基因DoCDPK1,并对其进行生物信息学分析,为DoCDPK1基因的功能研究奠定基础。采用生物信息学方法分析DoCDPK1基因结构,构建瞬时表达载体,对DoCDPK1蛋白进行亚细胞定位;采用qRT-PCR分析DoCDPK1基因在不同山药品种的不同发育阶段及低温胁迫处理下的表达模式。结果表明(:1)DoCDPK1基因序列长度为2023 bp,编码521个氨基酸。(2)DoCDPK1与几内亚薯蓣CDPK蛋白序列的一致性为97%,且DoCDPK1存在STKc_CAMK结构域。(3)瞬时表达分析表明,DoCDPK1蛋白定位于细胞核与细胞膜。(4)大和长芋山药中的CDPK活性更高,DoCDPK1可能参与调控山药块茎膨大后期的生长发育。(5)经4℃低温胁迫后,CDPK活性降低,DoCDPK1表达量上调,且表达水平在不同时间处理下存在差异。综上所述,DoCDPK1可能参与调控山药块茎膨大后期的生长发育及低温胁迫响应过程。 展开更多
关键词 山药 钙依赖性蛋白激酶 亚细胞定位 低温胁迫 基因表达量
下载PDF
钙/钙调素依赖性蛋白激酶在植物中的生理调节作用 被引量:5
20
作者 胡德文 何之常 史红梅 《武汉植物学研究》 CSCD 1999年第A09期89-98,共10页
关键词 钙调素 蛋白激酶 信号转导 植物生理
下载PDF
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部