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AnnexinⅤ-FITC/PI双标记流式细胞术检测结直肠癌细胞凋亡 被引量：14
1
作者 焦志军 王文红 杨友 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2005年第2期97-99,共3页
目的:探讨化疗药物5氟尿嘧啶(5-FU)诱导肿瘤细胞凋亡的作用特性,同时分析AnnexinⅤ-FITC/PI双标记流式细胞术在检测细胞凋亡中的应用。方法:采用不同浓度的5-FU作用于培养的结直肠癌细胞株colo320,并设不同的时间段,应用流式细胞术和Hoe... 目的:探讨化疗药物5氟尿嘧啶(5-FU)诱导肿瘤细胞凋亡的作用特性,同时分析AnnexinⅤ-FITC/PI双标记流式细胞术在检测细胞凋亡中的应用。方法:采用不同浓度的5-FU作用于培养的结直肠癌细胞株colo320,并设不同的时间段,应用流式细胞术和Hoechst33342荧光染色两种方法观察5-FU诱导肿瘤细胞凋亡的时间、剂量特性。结果:5-FU可以诱导colo320细胞的凋亡,80μg/ml作用4h后AnnenxinⅤ单阳性即开始增多,至12h,AnnenxinⅤ及PI双阳性即坏死细胞也开始增加。随药物浓度的提高,各组凋亡细胞所占比例也随之升高。流式细胞术与荧光染色的结果保持一致。结论:化疗药物5FU诱导肿瘤细胞凋亡作用呈时间、剂量依赖。AnnexinⅤ-FITC/PI双标记流式细胞术可用于检测早期的细胞凋亡事件,简单、灵敏,可作为检测细胞凋亡的首选方法。 展开更多
关键词 annexinV 流式细胞术 细胞凋亡 5-FU
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促性腺激素释放激素类似物对大鼠睾丸间质细胞膜联蛋白5和3β-羟类固醇脱氢酶mRNA表达的影响 被引量：15
2
作者 戈一峰 王大勇 +7 位作者 蒋超 张艳梅 韩雪峰 卢坤刚 崔英霞 黄宇烽 黄祝 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2008年第11期1138-1142,共5页
目的:观察促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,分别用不同终浓度的GnRH激动剂(GnRH-agonist,GnRHa)(10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)和GnRH... 目的:观察促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,分别用不同终浓度的GnRH激动剂(GnRH-agonist,GnRHa)(10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)和GnRH拮抗剂(GnRH-antagonists,GnRHant)(10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L)处理细胞,提取细胞总RNA,反转录,设计特异性引物和Tagman探针,荧光定量PCR检测膜联蛋白5(annexin 5)和3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)mRNA表达的改变。结果:荧光定量PCR结果显示,与未加GnRH类似物的对照组相比,当GnRHa的终浓度为10-5mol/L、10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA分别升高了38.89%和35.29%,均具有统计学意义(P<0.05);当GnRHa的浓度为10-5mol/L时,3β-HSD mRNA也显著升高了46.43%(P<0.01)。同样,与对照组相比,当GnRHant的浓度为10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA下降了45.45%(p<0.05),当GnRHant的浓度为10-6mol/L,10-7mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA也分别显著地降低了63.64%(P<0.01)和50%(P<0.05),其余各组与对照组相比,差异无统计学意义。结论:GnRH类似物能够调控大鼠睾丸间质细胞annexin5和3β-HSD mRNA表达,GnRH类似物可能与睾丸间质细胞上GnRH受体结合后,通过特定的生理机制,进而影响annexin5和3β-HSDmRNA表达,为揭示GnRH类似物调控间质细胞分泌睾酮的作用机制提供了一定的依据,其内在的机制还有待进一步研究。 展开更多
关键词 GNRH类似物 荧光定量PCR 大鼠睾丸间质细胞 膜联蛋白5 3β-羟类固醇脱氢酶
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膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-羟基类固醇脱氢酶表达的影响 被引量：13
3
作者 陶晓倩 王大勇 +6 位作者 柳海燕 林钗英 韩雪峰 时姗姗 崔英霞 戈一峰 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2010年第4期342-346,共5页
目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标... 目的先前研究发现促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)刺激Leydig细胞后,膜联蛋白5(annexin 5)及睾酮水平同时增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在的联系,3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)是间质细胞的标记酶。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌及3β-HSD表达的影响。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,用不同浓度的annexin 5(0、10-10、10-9、10-8mol/L)处理间质细胞24h和用10-9mol/L的annexin 5处理细胞不同时间(6、12、24、36h),收集培养液,用化学发光法测定培养液中的睾酮含量;Western blotting方法分析睾丸间质细胞中3β-HSD的表达变化。结果不同浓度的annexin 5处理间质细胞24h后,与对照组比较,终浓度为10-10mol/L和10-9mol/L时,睾酮水平分别升高了18%[(14.38±0.30)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01)和26%[(15.25±0.47)nmol/Lvs(12.12±0.74)nmol/L](P<0.01);浓度为10-8mol/L时,睾酮水平虽也有升高趋势,但无显著性差异;而Western blotting结果显示,浓度为10-9mol/L时,3β-HSD表达量升高了63%(2.19±1.00vs1.34±0.19,P<0.05),浓度为10-10mol/L和10-8mol/L时,3β-HSD表达量无显著性差异;睾酮分泌与3β-HSD的表达呈显著正相关(r=0.430,P<0.05)。10-9mol/L的an-nexin5处理细胞不同时间,与对照组相比,6h和12h后睾酮的分泌虽有升高,但无统计学意义(P>0.05);24h后睾酮的分泌量显著升高了18%[(12.59±0.41)nmol/Lvs(10.70±0.09)nmol/L](P<0.01);而处理36h后,睾酮分泌量下降了21%[(14.44±1.65)nmol/Lvs(17.46±0.31)nmol/L](P<0.01)。结论在大鼠睾丸间质细胞中,annexin 5对睾酮分泌具有调节功能且呈剂量和时间依赖性;3β-HSD是该调节过程中的关键酶之一。 展开更多
关键词 膜联蛋白5 间质细胞 睾酮 3β-羟基类固醇脱氢酶
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膜联蛋白A5在不同临床分期结肠癌患者中的表达及意义 被引量：13
4
作者 龙军先 高丕尧 +1 位作者 高枫 甘嘉亮 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第13期2013-2015,共3页
目的检测膜联蛋白A5(Annexin A5)在结肠癌患者外周血清中的含量及癌组织中的表达以及临床意义。方法收集81例结肠癌患者外周血清和35例正常人外周血清,采用酶联免疫吸附法测定血清中Annexin A5的含量;取本组结肠癌患者的癌组织81例,运... 目的检测膜联蛋白A5(Annexin A5)在结肠癌患者外周血清中的含量及癌组织中的表达以及临床意义。方法收集81例结肠癌患者外周血清和35例正常人外周血清,采用酶联免疫吸附法测定血清中Annexin A5的含量;取本组结肠癌患者的癌组织81例,运用免疫组织化学法检测Annexin A5在癌组织中的表达情况。结果 TNMⅢ/Ⅳ期的结肠癌患者血清Annexin A5含量高于TNMⅠ/Ⅱ期和正常人,差异有统计学意义(P<0.05),Annexin A5表达与淋巴结转移密切相关(P<0.05)。Annexin A5在结肠癌癌组织中主要表达于肿瘤细胞或间质细胞胞浆,并随结肠癌TNM分期升高其阳性表达率逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。血清Annexin A5含量与结肠癌组织Annexin A5表达相关,其阳性检出率明显高于癌胚抗原阳性检出率(P<0.05)。结论结肠癌患者血清Annexin A5的含量与癌组织Annexin A5表达相关,与结肠癌的分期、转移等临床病理学指标密切关联,具有一定的潜在诊断价值。 展开更多
关键词 膜联蛋白A5 结肠癌 酶联免疫吸附测定法 免疫组织化学法
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膜联蛋白A5过表达对宫颈癌细胞系SiHa细胞凋亡的影响 被引量：9
5
作者 李欣 高福禄 +1 位作者 窦志杰 孙树汉 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期668-670,673,共4页
目的:构建膜联蛋白A5的重组表达质粒,转染宫颈癌细胞使其过表达后检测宫颈癌细胞的凋亡情况。方法:PCR法从pJLA503膜联蛋白A5中获得膜联蛋白A5基因;磷酸钙共沉淀法转染宫颈癌细胞系SiHa细胞,免疫印迹法和免疫组织化学ABC法检测了细胞中... 目的:构建膜联蛋白A5的重组表达质粒,转染宫颈癌细胞使其过表达后检测宫颈癌细胞的凋亡情况。方法:PCR法从pJLA503膜联蛋白A5中获得膜联蛋白A5基因;磷酸钙共沉淀法转染宫颈癌细胞系SiHa细胞,免疫印迹法和免疫组织化学ABC法检测了细胞中膜联蛋白A5蛋白的过表达;对过表达膜联蛋白A5的细胞采用免疫荧光法检测其细胞凋亡情况。结果:重组质粒中膜联蛋白A5基因序列正确;转染重组质粒后的SiHa细胞过表达膜联蛋白A5蛋白;过表达膜联蛋白A5的SiHa细胞凋亡显著增多。结论:膜联蛋白A5可促进宫颈癌细胞系SiHa细胞的凋亡。 展开更多
关键词 膜联蛋白A5 重组质粒 癌 SIHA细胞 凋亡
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膜联蛋白A5低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响 被引量：12
6
作者 王小杰 杨艳杰 +3 位作者 田焕娜 梁秀军 陈龙 李欣 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期487-492,共6页
目的探讨膜联蛋白A5(ANXA5)低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组、转染试剂对照组和空白对照组,采用脂质体转染法将siRNA转染干扰组HeLa细胞,在转染72h后采用RT-PCR和Western blotting检测各组... 目的探讨膜联蛋白A5(ANXA5)低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组、转染试剂对照组和空白对照组,采用脂质体转染法将siRNA转染干扰组HeLa细胞,在转染72h后采用RT-PCR和Western blotting检测各组ANXA5的表达以鉴定抑制效率;细胞划痕实验检测各组HeLa细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组HeLa细胞的侵袭能力;RT-PCR和Western blotting分别检测ANXA5低表达对E-钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA及蛋白表达的影响。结果干扰组ANXA5蛋白及mRNA的表达均明显低于阴性对照组(P<0.05);其表达均被显著抑制,干扰组细胞的迁移及侵袭能力比阴性对照组明显增强(P<0.05),E-cadherin mRNA及蛋白的表达显著低于阴性对照组(P<0.05);干扰组MMP-9mRNA及蛋白的表达均显著高于阴性对照组(P<0.05)。结论靶向ANXA5的siRNA可有效抑制ANXA5的表达,且ANXA5低表达可能通过影响E-cadherin和MMP-9的表达来促进HeLa细胞的迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 膜联蛋白A5 HELA 迁移性 侵袭性 细胞划痕实验 Transwell实验
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促性腺激素释放激素激动剂对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD的表达影响 被引量：9
7
作者 蒋超 韩雪峰 +4 位作者 张艳梅 卢坤刚 黄祝 黄宇烽 姚兵 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第2期107-110,共4页
目的:探讨阿拉瑞林(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞中膜联蛋白V(annexin5)和3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)的表达的影响.方法:建立体外分离、纯化和培养大鼠睾丸间质细胞原代培养技术,采用3β-HSD免疫细胞化学方法对间质细胞进行鉴定,同时用... 目的:探讨阿拉瑞林(GnRHa)对大鼠睾丸间质细胞中膜联蛋白V(annexin5)和3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)的表达的影响.方法:建立体外分离、纯化和培养大鼠睾丸间质细胞原代培养技术,采用3β-HSD免疫细胞化学方法对间质细胞进行鉴定,同时用不同终浓度的GnRHa(分别为1×10-5,1×10-6,1×10-7mol/L)作用于间质细胞24h后,通过Western Blot检测间质细胞中annexin5和3β-HSD的表达变化情况.结果:间质细胞经GnRHa处理后,Western Blot结果显示,与对照组相比,当GnRHa终浓度为1×10-5mol/L时,anenxin5的表达量显著升高了69.2%(P<0.01),3β-HSD的表达量也升高了25.2%(P<0.05);当GnRHa的终浓度为1×10-6mol/L和1×10-7mol/L时,anenxin5的表达量分别升高了61.5%(P<0.05)和16.64%(P>0.05),3β-HSD的表达量则无显著性变化,分别升高了7.7%(P>0.05)和2.22%(P>0.05).结论:GnRHa在原代培养的睾丸间质细胞中,对annexin5,3β-HSD的表达具有调节作用. 展开更多
关键词 促性腺素释放激素 细胞 培养的 大鼠 莱迪希细胞 膜联蛋白A5 3Β-HSD
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去颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5表达的影响 被引量：8
8
作者 王晨阳 侯林 +7 位作者 徐会茹 蒋超 黄祝 崔英霞 戈一峰 黄宇烽 恽时锋 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 2007年第7期700-703,788,共5页
目的:观察切除颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)表达的影响。方法:切除大鼠颌下腺,分别于术后14、28和42 d处死大鼠,Western blotting和免疫组织化学分析大鼠睾丸annexin 5表达及分布的改变。结果:Western blotting结果显示,与对... 目的:观察切除颌下腺对大鼠睾丸膜联蛋白5(annexin 5)表达的影响。方法:切除大鼠颌下腺,分别于术后14、28和42 d处死大鼠,Western blotting和免疫组织化学分析大鼠睾丸annexin 5表达及分布的改变。结果:Western blotting结果显示,与对照组相比,切除颌下腺14 d和28 d后,实验组大鼠睾丸annexin 5的表达分别升高了27.5%和35.2%,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01);切除颌下腺42 d后,实验组大鼠睾丸annexin 5又恢复到与对照组几乎相同的水平。免疫组织化学显示,annexin 5在大鼠睾丸中的分布未见明显改变,但实验组annexin 5免疫组化显色较深,说明annexin 5的表达升高,这与Western blotting的结果基本一致。结论:颌下腺切除影响大鼠睾丸annexin 5的表达,颌下腺切除早期(14、28 d)颌下腺分泌的某些生物活性物质缺乏,而造成睾丸内annexin 5表达的升高。颌下腺切除后期(42 d),机体内因颌下腺切除而缺乏的某些物质在体内又重新得到了补偿,对睾丸annexin 5的影响消除,睾丸annexin 5的表达也恢复到正常水平。其内在具体机制尚待进一步阐明。 展开更多
关键词 颌下腺 睾丸 膜联蛋白5 大鼠
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南蛇藤提取物对人胃癌SGC-7901细胞蛋白组学的影响 被引量：7
9
作者 朱耀东 刘延庆 李平 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期86-90,共5页
目的:探讨南蛇藤提取物(Celastrus orbiculatus extract,COE)在人胃癌细胞中的可能作用靶点。方法:采用细胞活力实验检测COE对细胞生长增殖的抑制作用,计算COE的半数抑制浓度(50%concentration of inhibition,IC50)。蛋白质组学技术寻找... 目的:探讨南蛇藤提取物(Celastrus orbiculatus extract,COE)在人胃癌细胞中的可能作用靶点。方法:采用细胞活力实验检测COE对细胞生长增殖的抑制作用,计算COE的半数抑制浓度(50%concentration of inhibition,IC50)。蛋白质组学技术寻找COE作用前后的差异表达蛋白;并通过蛋白免疫印迹法(Western blot)对部分蛋白进行验证。结果:COE能够抑制SGC-7901细胞的增殖,呈一定的浓度及时间依赖性;其24 h的IC50为70.14 mg·L^(-1)。COE(70 mg·L^(-1))作用SGC-7901细胞24 h后,与空白组比较有9个蛋白质点发生下调,4个蛋白质点发生上调;这些蛋白可能是COE在胃癌细胞中的作用靶点。Western blot验证了COE对热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27),抗增殖蛋白(prohibitin),丝切蛋白(cofilin-1),膜联蛋白A5(annexin A5)表达的影响,与蛋白质组学结果相一致。结论:COE对胃癌细胞具有显著的抑制作用,筛选出的差异表达蛋白为COE的抗肿瘤机制研究提供新的依据。 展开更多
关键词 南蛇藤 胃癌 蛋白质组学 半数抑制浓度 热休克蛋白27 抗增殖蛋白 丝切蛋白 膜联蛋白A5
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膜联蛋白V在孕妇外周血及胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的关系 被引量：7
10
作者 辛虹 王惠兰 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期88-93,共6页
目的探讨膜联蛋白V（annexinV）在孕妇外周血及胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的关系。方法选取2007年12月-2009年12月河北医科大学第二医院产科住院的子痫前期孕妇120例，其中早发型轻度子痫前期孕妇30例（早发轻度组），晚发型... 目的探讨膜联蛋白V（annexinV）在孕妇外周血及胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的关系。方法选取2007年12月-2009年12月河北医科大学第二医院产科住院的子痫前期孕妇120例，其中早发型轻度子痫前期孕妇30例（早发轻度组），晚发型轻度子痫前期孕妇30例（晚发轻度组），早发型重度子痫前期孕妇30例（早发重度组），晚发型重度子痫前期孕妇30例（晚发重度组）；另选同期健康孕妇30例为健康孕妇组。采用蛋白印迹法和免疫组化方法检测孕妇胎盘组织及外周血中的annexinV蛋白表达水平；采用流式细胞仪检测胎盘滋养细胞的凋亡率；采用逆转录（RT）PCR技术测定各组胎盘组织中annexinV mRNA表达水平；并对各组孕妇外周血中的凝血酶原时间（胛）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FiB）进行检测，并计算国际标准化比率（INR）。结果（1）各组胎盘组织及外周血中annexinV蛋白水平：早发轻度组分别为0．54±0．12及0．62±0．17，早发重度组分别为0．47±0．15及0．56±0．24，晚发轻度组分别为0．74±0．23及1．08±0．32，晚发重度组分别为0．68±0．28及0．72±0．21，健康孕妇组分别为1．73±0．35及1．55±0．27。子痫前期各组胎盘组织及外周血中anilexin V水平均低于健康孕妇组，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。但子痫前期各组间分别比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。（2）滋养细胞早期凋亡率、中晚期凋亡率：早发轻度组分别为3．21％、0．86％，早发重度组分别为5．32％、0．72％，晚发轻度组分别为2．43％、0．63％，晚发重度组分别为4．28％、0．48％，健康孕妇组分别为1．05％、0．59％。子痫前期各组胎盘滋养细胞的早期凋亡率增加，与健康孕妇组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）；但子痫前期各组之间分别比� 展开更多
关键词 先兆子痫 膜联蛋白A5 血液凝固 滋养层 细胞凋亡
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稳定型心绞痛合并糖尿病患者膜联蛋白A5与颈动脉IMT及冠状动脉斑块形态的相关性 被引量：7
11
作者 朱艳霞 王竹文 +2 位作者 董希昌 张伟 王元元 《疑难病杂志》 CAS 2018年第9期878-883,共6页
目的 评价稳定型心绞痛合并2型糖尿病患者血膜联蛋白A5(anxA5)水平与颈动脉内膜中层厚度(IMT)、冠状动脉斑块形态的相关性。方法 纳入2015年3月-2017年8月于山东省东营市人民医院心内科接受冠状动脉造影,并随后对冠状动脉靶病变进行... 目的 评价稳定型心绞痛合并2型糖尿病患者血膜联蛋白A5(anxA5)水平与颈动脉内膜中层厚度(IMT)、冠状动脉斑块形态的相关性。方法 纳入2015年3月-2017年8月于山东省东营市人民医院心内科接受冠状动脉造影,并随后对冠状动脉靶病变进行经皮冠状动脉介入治疗的稳定型心绞痛合并2型糖尿病患者203例。通过颈动脉超声检测患者IMT值,并根据IMT界值(0.80 mm)将患者分为IMT正常组(IMT<0.80 mm,n=93)与IMT增厚组(IMT≥0.80 mm,n=110),比较2组患者的临床资料。采用光学相干层析成像(OCT)对患者颈动脉进行检测,采用单变量与多变量分析患者IMT增厚的相关因素。根据受试者工作特性曲线(ROC)计算anxA5诊断IMT增厚的敏感度、特异度、阳性和阴性预测值及最佳临界值。根据最佳临界值将患者分为anxA5正常组(anxA5<1.907 ng/ml,n=99)与anxA5升高组(anxA5≥1.907 ng/ml,n=104),比较2组患者的OCT参数差异。结果 203例患者血清anxA5水平平均为(2.92±1.27)ng/ml,IMT平均为(0.89±0.21)mm。与IMT正常组患者比较,IMT增厚组患者anxA5水平更高(t=7.853,P<0.001)。单变量Logistic回归分析表明,anxA5与IMT增厚显著相关(OR=3.767,95%CI2.776～5.110,P<0.001)。ROC曲线分析表明,anxA5诊断价值为中等,AUC为0.710(0.593～0.809),anxA5的cut-off值为1.907 ng/ml,此时敏感度为72.4%,特异度为65.8%。anxA5正常组与anxA5升高组OCT参数包括斑块类型(钙化、纤维或脂质斑块)、薄帽纤维粥样斑块发生率、覆盖坏死脂质核的最小或平均纤维帽厚度等所占比例比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 稳定型心绞痛合并2型糖尿病患者血清anxA5水平与颈动脉IMT显著相关,血清anxA5与冠状动脉斑块形态无相关性。 展开更多
关键词 膜联蛋白A5 冠状动脉斑块 内膜中层厚度 稳定型心绞痛 糖尿病
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血清ANXA5、SFRP5、STAT6与支气管哮喘患儿1年内再入院的关系分析
12
作者 刘悦欣 张舒晨 《检验医学与临床》 CAS 2024年第10期1377-1380,1386,共5页
目的分析血清膜联蛋白A5(ANXA5)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)、信号转导转录激活因子6(STAT6)与支气管哮喘患儿1年内再入院的关系。方法选取2018年1月至2022年8月该院收治的210例支气管哮喘患儿作为研究对象,根据支气管哮喘患儿1年内... 目的分析血清膜联蛋白A5(ANXA5)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)、信号转导转录激活因子6(STAT6)与支气管哮喘患儿1年内再入院的关系。方法选取2018年1月至2022年8月该院收治的210例支气管哮喘患儿作为研究对象,根据支气管哮喘患儿1年内是否再入院分为再入院组和未再入院组,再入院组30例,未再入院组180例。比较再入院组和未再入院组首次入院时血清ANXA5、SFRP5、STAT6水平,采用多因素Logistic回归分析支气管哮喘患儿1年内再入院的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ANXA5、SFRP5、STAT6对支气管哮喘患儿1年内再入院的预测价值。结果再入院组血清ANXA5、SFRP5水平低于未再入院组,血清STAT6水平高于未再入院组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清ANXA5、SFRP5水平升高是支气管哮喘患儿1年内再入院的保护因素(OR<1,P<0.05),血清STAT6水平升高是支气管哮喘患儿1年内再入院的危险因素(OR>1,P<0.05)。血清ANXA5、SFRP5、STAT6单项预测支气管哮喘患儿1年内再入院的曲线下面积(AUC)均>0.700,且3项联合检测预测的AUC为0.856。结论血清ANXA5、SFRP5、STAT6水平与支气管哮喘患儿1年内再入院密切相关,对预测患儿1年内再入院有一定价值。 展开更多
关键词 支气管哮喘 膜联蛋白A5 分泌型卷曲相关蛋白5 信号转导转录激活因子6 再入院 预测价值
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膜联蛋白A5与宫颈黏膜上皮细胞癌变的关系 被引量：5
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作者 李欣 高福禄 +2 位作者 何晓文 王芳 孙树汉 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期433-435,共3页
目的：确定在宫颈癌细胞系Hela细胞和SiHa细胞中是否有膜联蛋白A5(anxA5)的表达,为研究anxA5的功能及其与宫颈癌的关系奠定基础。方法：培养Hela细胞和SiHa细胞。TRIzol法提取细胞总RNA,RT- PCR法检测anxA5在mRNA水平的表达并将其基因... 目的：确定在宫颈癌细胞系Hela细胞和SiHa细胞中是否有膜联蛋白A5(anxA5)的表达,为研究anxA5的功能及其与宫颈癌的关系奠定基础。方法：培养Hela细胞和SiHa细胞。TRIzol法提取细胞总RNA,RT- PCR法检测anxA5在mRNA水平的表达并将其基因片段连接于T载体,测序仪测序；Western印迹法和免疫细胞化学ABC法检测anxA5的表达。结果：两种宫颈癌细胞的RT-PCR结果和Western印迹法均显示目的条带；免疫细胞化学染色可见胞质和核膜被染成棕黄色；测序并经NCBI的BLAST进行比对,显示为人anxA5。结论：anxA5在宫颈癌细胞系Hela细胞和SiHa细胞的mRNA水平和蛋白质水平均有表达。 展开更多
关键词 膜联蛋白A5 宫颈癌细胞系 HELA细胞 SIHA细胞
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^(99)Tc^m-H-Annexin V动物体内分布及显像 被引量：6
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作者 贾支俊 冯雪凤 +3 位作者 杨翔 华子春 申景涛 郭万华 《中国临床医学影像杂志》 CAS 北大核心 2008年第1期56-58,共3页
目的:探讨99Tcm标记重组改良型人膜联蛋白V(H-Annexin V)在健康小鼠体内的生物分布及在健康家兔体内的动态显像表现。方法:以99Tcm直接标记H-Annexin V,然后测定标记率,并计算其比活度。研究99Tcm-H-Annexin V于1,10,30,60,120和240min... 目的:探讨99Tcm标记重组改良型人膜联蛋白V(H-Annexin V)在健康小鼠体内的生物分布及在健康家兔体内的动态显像表现。方法:以99Tcm直接标记H-Annexin V,然后测定标记率,并计算其比活度。研究99Tcm-H-Annexin V于1,10,30,60,120和240min在健康小鼠体内的生物分布特性;通过SPECT显像,运用感兴趣区(ROI)时间-放射性曲线分析,观察在240min内99Tcm-H-Annexin V在健康家兔体内的动态分布变化。结果:99Tcm-H-Annexin V标记率为(96.80±0.35)%,比活度为(12.30±0.06)TBq/mmol。小鼠血液放射性清除迅速,肾脏排泄较快,其余组织器官放射性均随时间逐渐降低,而脑放射性水平始终最低;家兔各器官放射性均随时间逐渐下降,与同一时间肾、心、肝相比,肺、胃、肌肉放射性呈低水平。结论:99Tcm-H-Annexin V制备方法简便,标记率高,体内稳定性好,具有比较理想并符合实际的动物体内动力学表现。 展开更多
关键词 膜联蛋白A5 同位素标记 锝 动物实验 药代动力学
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老年晚期肝癌患者TACE治疗前后膜联蛋白A5表达变化及其预后价值 被引量：1
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作者 徐路 周武元 +1 位作者 苏展 李德强 《中国医疗设备》 2023年第3期124-130,共7页
目的探讨分析老年晚期肝癌患者经导管肝动脉化疗栓塞术(Transcatheter Arterial Chemoembolization,TACE)治疗前后膜联蛋白A5表达变化及其预后价值。方法选取2020年10月至2021年3月我院收治的84例预行TACE治疗的晚期肝癌患者,随访术后6... 目的探讨分析老年晚期肝癌患者经导管肝动脉化疗栓塞术(Transcatheter Arterial Chemoembolization,TACE)治疗前后膜联蛋白A5表达变化及其预后价值。方法选取2020年10月至2021年3月我院收治的84例预行TACE治疗的晚期肝癌患者,随访术后6个月内患者肿瘤控制情况,将患者分为无进展组(n=30)和进展组(n=54)。分别于术前和术后采用酶联免疫吸附法检测血清膜联蛋白A5水平,比较其变化情况,及其水平变化与患者预后的关系。结果肿瘤最大直径>5 cm患者术前血清膜联蛋白A5水平高于肿瘤最大直径≤5 cm患者,多个癌灶患者术前血清膜联蛋白A5水平高于单个癌灶患者(P<0.05)。Logistics回归分析结果显示,老年晚期肝癌患者肿瘤最大直径>5 cm(OR=1.881,95%CI:1.203~2.941)、癌灶个数≥2个(OR=1.728,95%CI:1.125~2.654)是术前血清膜联蛋白A5水平与升高的重要影响因素(P<0.05)。两组患者术后1 d、7 d时血清膜联蛋白A5水平较术前升高;术后30 d时两组患者血清膜联蛋白A5水平较术前降低(P<0.05),且进展组血清膜联蛋白A5水平高于无进展组(P<0.05);两组患者术前、术后1 d、术后7 d时各时间点血清膜联蛋白A5水平无显著差异(P>0.05)。随访截至2022年3月31日,随访患者生存时间为8~36个月,中位生存时间(26.37±4.58)个月。根据Kaplan-Meier生存曲线结果显示,术前膜联蛋白A5水平高表达患者生存期[(24.26±2.35)个月]低于膜联蛋白A5水平低表达者[(27.64±2.34)个月];术后30 d膜联蛋白A5水平高表达患者生存期[(24.52±2.16)个月]低于膜联蛋白A5水平低表达者[(27.43±2.22)个月],差异具有统计学意义(P<0.05)。肿瘤最大直径>5 cm、多个癌灶、术前膜联蛋白A5、术后30 d膜联蛋白A5水平存在显著差异(P<0.05),提示肿瘤最大直径、癌灶个数、术前膜联蛋白A5水平、术后30 d血清膜联蛋白A5水平与老年晚期肝癌TACE治疗后生存期有关。多因素Cox分析结果显示,肿瘤� 展开更多
关键词 膜联蛋白A5 晚期肝癌 经导管肝动脉化疗栓塞术 无进展期
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大鼠膜联蛋白5的重组表达及其对人精子体外运动功能的影响 被引量：5
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作者 陶晓倩 柳海燕 +3 位作者 时姗姗 韩雪峰 林钗英 姚兵 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期400-404,共5页
目的:先前研究发现促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂对大鼠睾丸间质细胞中膜联蛋白5(annex-in5)的翻译和转录水平都有一定的影响,推测annexin5可能是睾酮分泌调节中的一个信号分子。为研究annexin5在雄性生殖调节中的作用,本研究拟获得... 目的:先前研究发现促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂对大鼠睾丸间质细胞中膜联蛋白5(annex-in5)的翻译和转录水平都有一定的影响,推测annexin5可能是睾酮分泌调节中的一个信号分子。为研究annexin5在雄性生殖调节中的作用,本研究拟获得具有活性的大鼠annexin5重组蛋白,并观察其对人精子运动功能的影响。方法:化学合成法合成大鼠annexin5的编码基因序列,将该基因插入组氨酸标签(HIS)融合表达载体pET28a中,在T7启动子控制下,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达HIS融合蛋白;以亲和层析法纯化表达融合蛋白并用活化部分凝血激酶时间(APTT)交叉试验法验证该蛋白的抗凝血活性。15例供精者的精液标本一式2份,1份加重组蛋白annexin5(终浓度为10-8mol/L),1份做对照,分别处理20和60min,用计算机辅助精液分析系统(CASA)分析精子活力、活动率;处理20min后,做精子爬高试验。结果:合成的目的基因产物长度为974bp,插入序列与annexin5的序列完全一致。在IPTG诱导下,BL21(DE3)重组菌高效表达出相对分子质量为36000的融合蛋白,经纯化获得95%纯度的融合蛋白,纯化蛋白具有很强的抗凝血活性。Annexin5处理20min后精子活动率提高了21%(P<0.05),活力提高了40%(P<0.01),而处理60min后精子活力、活动率与对照组比较均无显著性差异;精子爬高高度与对照组比较具有极显著差异[(37.84±6.35)mmvs(49.5±12.27)mm,P<0.01]。结论:成功构建了大鼠annexin5重组表达载体并在大肠埃希菌中高效表达annexin5蛋白,且该蛋白体外处理精子20min时提高精子的运动能力。 展开更多
关键词 膜联蛋白5 精子 表达 活力 活动率 爬高试验
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Annexin5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌过程中StarD7表达的影响 被引量：4
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作者 靖俊 林钗英 +2 位作者 伊男 伏海燕 姚兵 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第2期123-128,共6页
目的先前研究发现annexin 5刺激大鼠睾丸间质细胞后,3β-羟类固醇脱氢酶(3βbeta-hydroxysteroid dehydro-genase,3β-HSD)及睾酮水平都增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在联系。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾... 目的先前研究发现annexin 5刺激大鼠睾丸间质细胞后,3β-羟类固醇脱氢酶(3βbeta-hydroxysteroid dehydro-genase,3β-HSD)及睾酮水平都增加,推测annexin 5和睾酮之间可能存在某种内在联系。文中旨在研究annexin 5对大鼠睾丸间质细胞睾酮分泌过程中的StarD7(START domain containing 7)表达的影响,探讨annexin 5影响睾酮分泌的机制。方法原代培养大鼠睾丸间质细胞,1nmol/L的annexin 5处理间质细胞24h,分别提取细胞总mRNA和总蛋白。RT-PCR检测StarD7的mRNA表达改变。Western blotting方法分析睾丸间质细胞中StarD7的蛋白表达变化。收取细胞爬片,利用免疫细胞化学的方法对StarD7在睾丸间质细胞中进行定位。结果与对照组相比,在mRNA水平上,加药组StarD7 mRNA的表达增加了44.5%(1.10±0.02 vs 1.59±0.09,P<0.05)。在蛋白水平上,加药组StarD7蛋白的表达增加了44.3%(1.49±0.10 vs 2.15±0.16,P<0.05)。StarD7主要定位在大鼠睾丸间质细胞的胞浆内,加药组的染色强度明显强于对照组。结论 StarD7在基因和蛋白水平均受annexin 5的调控,结合先前发现annexin 5可调控睾丸间质细胞睾酮合成的结果,提示annexin 5调控睾酮合成可能是通过调控StarD7的表达来实现的。 展开更多
关键词 annexin 5 StarD7 睾酮 间质细胞
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膜联蛋白A5对t-PA联合纤溶酶原诱导血-脑屏障通透性的抑制作用
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作者 张锐斌 王鹏 +1 位作者 李飞 张般若 《江苏医药》 CAS 2023年第9期865-868,873,F0002,共6页
目的探讨膜联蛋白A5对组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)联合纤溶酶原诱导血-脑屏障通透性的抑制作用及其可能机制。方法在Transwell细胞小室上培养人脑微血管内皮细胞株HCMEC/D3,加入不同浓度t-PA 80、160和320 nmol/L联合纤溶酶原50 nmol/L... 目的探讨膜联蛋白A5对组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)联合纤溶酶原诱导血-脑屏障通透性的抑制作用及其可能机制。方法在Transwell细胞小室上培养人脑微血管内皮细胞株HCMEC/D3,加入不同浓度t-PA 80、160和320 nmol/L联合纤溶酶原50 nmol/L作用6、12和24 h,同时设对照组,观察细胞模型通透性和细胞活力。随后再加入不同浓度膜联蛋白A550、100、200和500 nmol/L,观察细胞模型通透性的变化,并采用Western blot法检测紧密连接蛋白1(ZO-1)的蛋白表达。结果与对照组相比,t-PA 160 nmol/L+纤溶酶原50 nmol/L组和t-PA 320 nmol/L+纤溶酶原50 nmol/L组细胞模型通透性均呈时间依赖性的增加(P<0.05或P<0.01),并且作用24 h后细胞活力降低(P<0.01)。与t-PA 160 nmol/L+纤溶酶原50 nmol/L组相比,t-PA 160 nmol/L+纤溶酶原50 nmol/L+膜联蛋白A5100 nmol/L组和t-PA 160 nmol/L+纤溶酶原50 nmol/L+膜联蛋白A5200 nmol/L组细胞模型通透性降低(P<0.05或P<0.01)。t-PA 160 nmol/L+纤溶酶原50 nmol/L组ZO-1蛋白表达低于对照组(P<0.01);而t-PA 160 nmol/L+纤溶酶原50 nmol/L+膜联蛋白A5100 nmol/L组ZO-1蛋白表达高于t-PA 160 nmol/L+纤溶酶原50 nmol/L组(P<0.01)。结论膜联蛋白A5能够抑制t-PA联合纤溶酶原诱导血-脑屏障通透性的增加;其机制可能与上调内皮细胞间ZO-1的表达有关。 展开更多
关键词 膜联蛋白A5 组织型纤溶酶原激活剂 血-脑屏障
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Annexin A5基因沉默对Hep-2细胞凋亡的影响 被引量：4
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作者 刘杨 周晓芳 +2 位作者 文劲松 邓世山 刘海 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期326-329,共4页
目的 探索annexinA5基因及其表达沉默后对人喉癌Hep-2细胞凋亡的影响.方法 培养人喉癌细胞Hep-2,经Lip2000转染特异siRNA片段沉默annexin A5基因;TRlzol法提取细胞总RNA;RT-PCR法检测annexinA5在mRNA水平的表达是否降低;Western blot法... 目的 探索annexinA5基因及其表达沉默后对人喉癌Hep-2细胞凋亡的影响.方法 培养人喉癌细胞Hep-2,经Lip2000转染特异siRNA片段沉默annexin A5基因;TRlzol法提取细胞总RNA;RT-PCR法检测annexinA5在mRNA水平的表达是否降低;Western blot法检测annexin A5的蛋白表达是否下降;经流式细胞仪AnnexinV-FITC法检测annexin A5基因沉默后的人喉癌Hep-2细胞的凋亡情况.采用SPSS 13.0软件对数据进行单因素方差分析.结果 特异siRNA片段成功转入Hep-2细胞;RT-PCR结果显示实验siRNA组、阴性siRNA组、脂质体组及空白细胞组的相对灰度值为0.70±0.03、1.18±0.05、1.17±0.06及1.23±0.07;经统计学分析表明实验组annexin A5在mRNA水平的灰度明显弱于阴性siRNA组（t=-14.77）、脂质体组（t=-13.23）及空白细胞组（t=-12.99）,P值均＜0.05;Western blot结果显示实验siRNA组、阴性siRNA组、脂质体组及空白细胞组的相对灰度值为1.21±0.03、3.88±0.06、3.87±0.02及3.95±0.08;统计学分析表明annexin A5的蛋白的相对灰度值明显弱于阴性siRNA组（t=-70.34）、脂质体组（t=-150.62）及空白细胞组（t=-56.32）,P值均＜0.05;AnnexinV-FITC法结果当annexin A5基因沉默后,人喉癌细胞Hep-2凋亡率实验siRNA组、阴性siRNA组、脂质体组及空白细胞组分别为4.43％±0.12％、13.67％±0.22％、13.66％±0.12％及13.35％±0.13％,实验组细胞凋亡率较阴性siRNA组（t=-62.50）、脂质体组（t=-14.16）及空白细胞组（t=-11.47）明显降低,P值均＜0.05.结论 在人喉癌Hep-2细胞中,annexin A5可能促进凋亡,有可能成为喉癌诊断、治疗及预后的新的生物靶标. 展开更多
关键词 膜联蛋白A5 基因沉默 细胞凋亡 喉肿瘤
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Annexin A5在相关疾病中作用机制的研究进展 被引量：4
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作者 高丕尧 高枫 甘嘉亮 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第1期104-107,共4页
Annexin A5(膜联蛋白A5)是Ca2+依赖的磷脂结合蛋白家族的一名成员,它存在于组织细胞中,因为其具有的独特结构而参加多种细胞内、外的抗凝,促凋亡等重要功能。并且Annexin A5与系统性红斑狼疮、肿瘤等多种疾病的发病机制有着一定关联性。
关键词 膜联蛋白A5 疾病 机制
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