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向大豆导入几丁质酶基因的初步研究 被引量:44
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作者 徐香玲 邹联沛 +1 位作者 刘伟华 李集临 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期101-107,共7页
以根癌农杆菌的Ti质粒为介导,将抗真菌病的几丁质酶基因,导入黑龙江省栽培大豆-东农37号,吉林28号等14个品种。从子叶节和下胚轴诱导出丛生芽,并再生植株,经PCR和DNA分子杂交检测,确认为转化植株。用花粉管通道导... 以根癌农杆菌的Ti质粒为介导,将抗真菌病的几丁质酶基因,导入黑龙江省栽培大豆-东农37号,吉林28号等14个品种。从子叶节和下胚轴诱导出丛生芽,并再生植株,经PCR和DNA分子杂交检测,确认为转化植株。用花粉管通道导入法,直接导入几丁质酶基因,共获223粒种子,经PCR和DNA分子杂交检测的113株大豆幼苗中,有7株呈阳性反应,证明几丁质酶基因已导入并整合到大豆的基因组中。 展开更多
关键词 几丁质酶基因 转基因植株 大豆 基因
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Ti质粒介导的B、t、k-δ内毒素蛋白基因转化大豆的初步研究 被引量:49
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作者 徐香玲 高晶 +1 位作者 刘伟华 李集临 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期6-11,共6页
以Ti质粒为介导,将pKT54B7C5质粒上的B、t、k-δ内毒素蛋白基因导入东北大豆“黑农37”、“黑农39”等品种。采用多种外植体和感染方法,从胚轴和子叶节诱导出丛生芽与再生植株。经卡那霉素筛选和冠瘿碱检测,初步... 以Ti质粒为介导,将pKT54B7C5质粒上的B、t、k-δ内毒素蛋白基因导入东北大豆“黑农37”、“黑农39”等品种。采用多种外植体和感染方法,从胚轴和子叶节诱导出丛生芽与再生植株。经卡那霉素筛选和冠瘿碱检测,初步证明外源基因导入大豆基因组中。共获得81株再生植株,其中成活30株,仅3株结7个荚,得到7粒种子。PCR检测和DNA分子杂交,鉴定这7株再生植株呈阳性反应,证明外源基因已导入并整合到大豆的基因组中。7粒种子均已萌发。 展开更多
关键词 大豆 质粒 内毒素蛋白基因 再生植株
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高效、快速地将外源DNA导入根癌土壤杆菌 被引量:26
3
作者 崔武 刘炜 吴光耀 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期350-355,共6页
室温下用50mmol/LCaCl_2处理根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)以制备感受态细胞,然后经0℃冰浴及28℃热击处理,成功地将Ti质粒中间载体(>10kb)导入了根癌土壤农杆菌中。转化效率每个活细胞可达10^(-4)~10^(-5)转化子或10~6... 室温下用50mmol/LCaCl_2处理根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)以制备感受态细胞,然后经0℃冰浴及28℃热击处理,成功地将Ti质粒中间载体(>10kb)导入了根癌土壤农杆菌中。转化效率每个活细胞可达10^(-4)~10^(-5)转化子或10~6转化子/μgDNA。探讨了该菌细胞生长状态、CaCl_2滚滚浓度、温度、液氮、热击、复苏时间以及感受态细胞于4℃或—20℃(加15%甘油)下保存时间对根癌土壤杆菌转化的影响。 展开更多
关键词 植物基因 转化 ti质粒 根癌土壤杆菌 生物工程
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樱桃根癌土壤杆菌及其对土壤杆菌素84敏感性的研究 被引量:18
4
作者 王慧敏 隋新华 +4 位作者 李健强 戴秀玉 马德钦 王建辉 刘继世 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期381-385,共5页
从山东、河北、辽宁等地樱桃园的樱桃冠瘿瘤和土壤样品中分离到46株根瘤土壤杆菌。经鉴定有4株是Agrobacteriumtumefaciens(原生物型1),其余42株是A.rhizogenes(原生物型2)。这些菌株所诱导的冠瘿瘤中均合成胭脂碱(nopaline),... 从山东、河北、辽宁等地樱桃园的樱桃冠瘿瘤和土壤样品中分离到46株根瘤土壤杆菌。经鉴定有4株是Agrobacteriumtumefaciens(原生物型1),其余42株是A.rhizogenes(原生物型2)。这些菌株所诱导的冠瘿瘤中均合成胭脂碱(nopaline),属胭脂碱型Ti质粒的根癌土壤杆菌,并对放射土壤杆菌K84菌株所产生的土壤杆菌素84敏感。由于K84菌株对含胭脂碱Ti质粒的根癌土壤杆菌有很好的抑制效果,因此,用K84菌株防治樱桃根癌病是有应用前景的. 展开更多
关键词 土壤杆菌 樱桃 根癌病 ti质粒 土壤杆菌素84
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苹果根癌病菌系及生物防治的初步研究 被引量:13
5
作者 孙艳丽 王慧敏 +1 位作者 王建辉 宋秀荣 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期332-336,共5页
从山东莱阳苹果园的苹果冠瘿瘤中分离到 18株根癌土壤杆菌。经过鉴定有 3株是Agrobacterium tumefaciens(原生物 1型 ) ,其余 15株是 A. rhizogenes(原生物 2型 )。这些菌株所诱导的冠瘿瘤中均能合成胭脂碱 ( nopaline) ,属于胭脂碱型 T... 从山东莱阳苹果园的苹果冠瘿瘤中分离到 18株根癌土壤杆菌。经过鉴定有 3株是Agrobacterium tumefaciens(原生物 1型 ) ,其余 15株是 A. rhizogenes(原生物 2型 )。这些菌株所诱导的冠瘿瘤中均能合成胭脂碱 ( nopaline) ,属于胭脂碱型 Ti质粒的根癌土壤杆菌。通过室内平皿检测发现 ,分离到的菌株均对 K84菌株所产生的土壤杆菌素敏感。在温室指示植物向日葵幼苗上 K84和K10 2 展开更多
关键词 苹果根癌病 ti质粒 生物防治
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利用根瘤农杆菌LBA4404 Ti质粒介导高效转化产黄青霉及克隆vgb基因 被引量:7
6
作者 孙传宝 朱春宝 +1 位作者 朱宝泉 许文思 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期87-91,107,共6页
通过根瘤农杆菌 (Agrobacterium tumefaciens) L BA4 4 0 4中 Ti-质粒的介导将含有透明颤菌血红蛋白 (Vitreoscilla Hemoglobin,VHb)基因 vgb和博来霉素 (bleomycin)抗性基因转移到产黄青霉 (Penicilliumchrysogenum)中 ;利用根瘤农杆... 通过根瘤农杆菌 (Agrobacterium tumefaciens) L BA4 4 0 4中 Ti-质粒的介导将含有透明颤菌血红蛋白 (Vitreoscilla Hemoglobin,VHb)基因 vgb和博来霉素 (bleomycin)抗性基因转移到产黄青霉 (Penicilliumchrysogenum)中 ;利用根瘤农杆菌介导转化产黄青霉孢子时需要有乙酰丁香酮诱导 ;转化菌丝体时乙酰丁香酮不是必要的 ,但一定浓度的乙酰丁香酮可提高转化率 ,与原生质体转化法相比可提高转化率 10倍左右。 展开更多
关键词 根瘤农杆菌 ti质粒 产黄青霉 VGB基因 原生质体转化法
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根癌农杆菌对栝楼的遗传转化 被引量:6
7
作者 雷和田 宋经元 +3 位作者 祁建军 张荫麟 杨峻山 郭志刚 《云南植物研究》 CSCD 北大核心 2001年第1期67-71,共5页
用根癌农杆菌侵染栝楼(Trichosanthes kirilowii Maxim.) 无菌苗后,获得其冠瘿组织;栝楼冠瘿组织经除菌后能在无激素的MS培养基上良好生长,并合成冠瘿碱,表明Ti质粒转化成功。栝楼冠瘿组织中最高蛋白含量为130.6mg /g(鲜重)。经SDS-PAG... 用根癌农杆菌侵染栝楼(Trichosanthes kirilowii Maxim.) 无菌苗后,获得其冠瘿组织;栝楼冠瘿组织经除菌后能在无激素的MS培养基上良好生长,并合成冠瘿碱,表明Ti质粒转化成功。栝楼冠瘿组织中最高蛋白含量为130.6mg /g(鲜重)。经SDS-PAGE检测其含有的蛋白种类与栝楼根含有的基本一样。研究表明,利用栝楼冠瘿组织作为培养系统生产天花粉蛋白有很好的开发前景。 展开更多
关键词 栝楼 ti质粒转化 冠瘿组织培养 根癌农杆菌 遗传转化
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影响根癌农杆菌转化效率的因素综述 被引量:6
8
作者 叶文兴 孔令琪 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期142-148,共7页
根癌农杆菌介导转化法是植物基因工程的重要方法,但其转化效率受多种因子的影响,包括化学物质、物理方法、外植体遗传特性等,涉及农杆菌与植物互作的各个阶段。将这些影响因子及其功能进行简要综述,以期为优化农杆菌介导植物遗传转化流... 根癌农杆菌介导转化法是植物基因工程的重要方法,但其转化效率受多种因子的影响,包括化学物质、物理方法、外植体遗传特性等,涉及农杆菌与植物互作的各个阶段。将这些影响因子及其功能进行简要综述,以期为优化农杆菌介导植物遗传转化流程提供帮助。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 ti质粒 T-DNA整合 染色体 转化效率
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双元Ti载体的发展 被引量:4
9
作者 王峰 黄璐圆 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期2397-2401,共5页
双元Ti载体是目前植物基因工程中最重要的植物转化载体。近年来双元Ti载体得到迅速的发展,新的载体不断出现。新发展的双元Ti载体结构优化,适用范围广,易于基因克隆操作,同时提高了植物转化的效率,更便于进行植物基因功能的研究。本文... 双元Ti载体是目前植物基因工程中最重要的植物转化载体。近年来双元Ti载体得到迅速的发展,新的载体不断出现。新发展的双元Ti载体结构优化,适用范围广,易于基因克隆操作,同时提高了植物转化的效率,更便于进行植物基因功能的研究。本文介绍了构建高容量载体、多基因载体、定点整合载体所采用的新策略。 展开更多
关键词 双元载体 根癌农杆菌 ti质粒 植物转化 植物基因工程
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异戊烯基转移酶基因转化胡卢巴的研究 被引量:4
10
作者 黄永红 尤凤丽 +4 位作者 孔若东 王付德 汪清胤 付桂荣 黄永芬 《木本植物研究》 CSCD 北大核心 2000年第4期420-426,共7页
将含有生长素诱导的小分子RNA启动子与异戊烯基转移酶基因的融合基因 ( pSAUR—ipt)的Ti质粒作为供体DNA ,通过花粉管通道法导入胡卢巴中。D1、D2 代植株经Southern杂交检测 ,有杂交带出现 ,获得了转基因胡卢巴。对转基因胡卢巴D3、D4和... 将含有生长素诱导的小分子RNA启动子与异戊烯基转移酶基因的融合基因 ( pSAUR—ipt)的Ti质粒作为供体DNA ,通过花粉管通道法导入胡卢巴中。D1、D2 代植株经Southern杂交检测 ,有杂交带出现 ,获得了转基因胡卢巴。对转基因胡卢巴D3、D4和D5 代进行了生理生化指标及田间性状分析 ,发现转基因胡卢巴与CK相比有植株略矮、分枝数增多、双角数增多等表型变化 ,D4代叶绿素含量、半乳甘露聚糖含量增加 ,D5 代可溶性蛋白和细胞分裂素含量增加 ,它们都与产量呈正相关性。从而证明了 pSAUR—ipt基因已导入胡卢巴中。 展开更多
关键词 胡卢巴 pSAUR-ipt基因 花粉管通道法 基因转化
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转基因辣椒植株再生的研究 被引量:2
11
作者 王慧中 赵培洁 韩献忠 《科技通报》 1994年第1期30-32,共3页
辣椒茎尖及下胚轴切段,能被含Ti质粒pC27的根癌农杆菌感染。该质粒带有一个npt-Ⅱ基因(新霉素磷酸基转移酶Ⅱ基因)以供选择卡那霉素抗性的转化辣椒细胞。卡那霉素抗性绿苗经NPT-Ⅱ酶活性检测及DNA分子杂交试验表明... 辣椒茎尖及下胚轴切段,能被含Ti质粒pC27的根癌农杆菌感染。该质粒带有一个npt-Ⅱ基因(新霉素磷酸基转移酶Ⅱ基因)以供选择卡那霉素抗性的转化辣椒细胞。卡那霉素抗性绿苗经NPT-Ⅱ酶活性检测及DNA分子杂交试验表明,外源基因已导入辣椒细胞,并能在植株上表达出相应的性状。 展开更多
关键词 辣椒 再生 根癌农杆菌 转基因
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果树转基因研究进展 被引量:4
12
作者 王新平 茹慧玲 +3 位作者 孙慧英 王新生 杨兆亮 杨雪瑞 《山西农业科学》 2016年第1期123-125,130,共4页
转基因技术在果树遗传改良方面具有重要意义。目前已报道的转基因方法几乎都能成功得到转基因植株,但不同的方法间转化效率存在很大差异,且对不同的果树而言,同一方法的转化效率也不尽相同。迄今为止,主要的转基因方法有农杆菌介导法和... 转基因技术在果树遗传改良方面具有重要意义。目前已报道的转基因方法几乎都能成功得到转基因植株,但不同的方法间转化效率存在很大差异,且对不同的果树而言,同一方法的转化效率也不尽相同。迄今为止,主要的转基因方法有农杆菌介导法和外源基因直接导入法两大类,且以农杆菌介导法应用最为广泛。文章对这2种方法及取得的成果进行了阐述,并对研究中存在的问题提出了建议和展望,以期为果树品种改良提供依据。 展开更多
关键词 果树 转基因 农杆菌 ti质粒 外源基因
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Roi基因在三种植物中转化与表达的比较研究 被引量:2
13
作者 吴敏 李宝健 《中山大学学报论丛》 1989年第4期1-6,共6页
通过改良的叶圆盘转化法,将Ti质粒上的Roi基因(细胞分裂素合成酶基因)转化入一种单子叶植物花叶芋和二种双子叶植物花椰菜和甘蓝的基因组中。在转化后组织当中以及再生植株的苗中,甚至再生植株的无性繁殖后代中均可测得Nos基因的产物胭... 通过改良的叶圆盘转化法,将Ti质粒上的Roi基因(细胞分裂素合成酶基因)转化入一种单子叶植物花叶芋和二种双子叶植物花椰菜和甘蓝的基因组中。在转化后组织当中以及再生植株的苗中,甚至再生植株的无性繁殖后代中均可测得Nos基因的产物胭脂碱的存在。这表明,Ti质粒上的外源基因已经在以上三种转基因植物中得到稳定的整合和表达,新的性状可以随着细胞分裂而传代。 展开更多
关键词 Roi基因 ti质粒 叶圆盘转化法
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农杆菌介导的药用植物遗传转化 被引量:1
14
作者 张家辉 杨蕊 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第23期6136-6137,6158,共3页
利用根癌农杆菌、发根农杆菌介导药用植物的遗传转化。对转化过程中转化方法及转化后的鉴定、影响植物遗传转化的因素与次生代谢产物以及转基因药用植物的获得等方面进行综述。
关键词 农杆菌 ti质粒 RI质粒 药用植物
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Ti质粒转化胡萝卜细胞的初步研究 被引量:1
15
作者 程玉鹏 邹雪艳 +2 位作者 王茜 李洪泉 董金兰 《哈尔滨师范大学自然科学学报》 CAS 1999年第1期81-85,共5页
本文报道了通过三亲交配将PBI101等Ti质粒从大肠杆菌(E.coliC600)中转移到发根农杆菌(Agrobacteriumrhizogenes)中,并获得转移子,将上述转移子与胡萝卜悬浮细胞混合共培养后得到转化细... 本文报道了通过三亲交配将PBI101等Ti质粒从大肠杆菌(E.coliC600)中转移到发根农杆菌(Agrobacteriumrhizogenes)中,并获得转移子,将上述转移子与胡萝卜悬浮细胞混合共培养后得到转化细胞.转化细胞在没加生长激素和细胞分裂素的情况下能自主生长,并获得愈伤组织. 展开更多
关键词 ti质粒 胡萝卜 悬浮细胞 细胞培养 愈伤组织
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Genetic Transformation of Lycium barbarum L. via A. tumefaciens 被引量:1
16
作者 杜立群 王慧中 +2 位作者 黄发灿 李安生 邵启全 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1994年第3期286-293,共8页
A system for transformation and regeneration of Lycium barbarum L. , an important Chinese medical plant, has been established. Young stem segments from Lycium barbarum L. were infected with Agrobacterium tumefaciens C... A system for transformation and regeneration of Lycium barbarum L. , an important Chinese medical plant, has been established. Young stem segments from Lycium barbarum L. were infected with Agrobacterium tumefaciens C58cl(pGV3850: :ineo1130), and the transformed calli selected from the callus induction medium containing 50 fig/ml kanamycin could regenerate buds on differentiation medium containing 25 μg/ml kanamycin. 30% of the regenerated buds were normal in morphology. The normal buds could develop into whole plantlets after they were transferred to the rooting medium to induce roots. Nopa-line detection, NPT-Ⅱ enzyme activity assay and Southern blotting hybridization indicated that the foreign genes had been integrated into the genome of Lycium barbarum L. and expressed in the plant. In the processes of experiments, it was found that (i) after the pre-processes, the explants which formed callus quickly were easy to transform ; (Ⅱ) the rate of normal regenerated plants from transgenic calli was higher than that from the untransgenic ones. 展开更多
关键词 LYCIUM barbarum L. AGROBACTERIUM TUMEFACIENS ti-plasmid transformation REGENERAtiON system.
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大麦黄矮病毒抗性基因的Ti质粒构建
17
作者 贺晨霞 夏光敏 《山东大学学报(自然科学版)》 CSCD 2000年第3期322-326,共5页
通过酶切、连接、转化等技术 ,将大麦黄矮病毒抗性基因复制酶基因ORF2插入Ti质粒pGA4 82的T DNA区 ,从而提供了新的目的基因转化小麦的农杆菌 /质粒系统 .
关键词 ti质粒 质粒构建 大麦 黄矮病毒抗性基因
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芹菜愈伤组织转化的研究 被引量:1
18
作者 王慧中 杜立群 +1 位作者 李安生 邵启全 《浙江农业大学学报》 CSCD 1992年第1期45-48,共4页
芹菜(Apium graveolens L.)外值体能被含Ti质较载体的根癌农杆菌感染,目前已得到转基因的愈伤组织.该载体带有一个嵌合的npt-Ⅱ(新霉素磷酸转移酶Ⅱ)基因和一个胭脂碱合成酶基因.经胭脂碱测定和DNA分子杂交实验表明,外源的卡那霉素抗性... 芹菜(Apium graveolens L.)外值体能被含Ti质较载体的根癌农杆菌感染,目前已得到转基因的愈伤组织.该载体带有一个嵌合的npt-Ⅱ(新霉素磷酸转移酶Ⅱ)基因和一个胭脂碱合成酶基因.经胭脂碱测定和DNA分子杂交实验表明,外源的卡那霉素抗性基因已导入芹菜细胞. 展开更多
关键词 愈伤组织 芹菜 转化 根癌农杆菌
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TRANSFORMATION OF FOREIGN GENES INTO THE MONOCOTYLEDONOUS PLANT Caladium bicolor MEDIATED BY CONSTRUCTED Ti-PLASMID OF Agrobacterium tumefaciens
19
作者 李宝健 吴敏 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1990年第1期52-55,共4页
In recent years, research that focused on applying 'disarmed' and constructed Tiplasmid of Agrobacterium tumefaciens as a dominant vector for plant genetic engineering has developed quickly. Several vector sys... In recent years, research that focused on applying 'disarmed' and constructed Tiplasmid of Agrobacterium tumefaciens as a dominant vector for plant genetic engineering has developed quickly. Several vector systems have become especially useful in plant transformation, and a great number of foreign genes have been transferred to dicot plants by means of the leaf-disc transformation method along with the Ti-plasmid vector. Most of the transgenic plants, which bear the novel trait, can accomplish complete regeneration, and the characteristics of the new genotype can be transmitted from generation to generation in the plant cells. 展开更多
关键词 ti-plasmid leaf-disc transformation foreign gene expression.
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野生型农杆菌Ti和Ri质粒对马铃薯的双转化研究
20
作者 朱永莉 戴朝曦 《北方园艺》 CAS 北大核心 2007年第9期203-206,共4页
用不同的野生型根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)T37,B6,TFA16YE和发根农杆菌(Agrobacteriu.rhizogenes)TR105,15834,A4对马铃薯普通栽培种品种"甘农薯1号"的块茎圆片、茎段采用两步侵染法和一步侵染法进行了双转化实... 用不同的野生型根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)T37,B6,TFA16YE和发根农杆菌(Agrobacteriu.rhizogenes)TR105,15834,A4对马铃薯普通栽培种品种"甘农薯1号"的块茎圆片、茎段采用两步侵染法和一步侵染法进行了双转化实验。结果表明:两步侵染法效果较好,并得到了分化苗。试验证明,Ti和Ri质粒上的T-DNA可进入同一个受体细胞并进行表达,2种T-DNA上的不同激素在受体细胞中表达可以使受体细胞建立新的激素平衡,从而提高了转化细胞分化苗的能力,可以克服野生型农杆菌难以分化苗的缺点,为今后用野生型质粒作载体以及同时向一个受体细胞中转移多个基因打下了基础;此外不同菌种组合的效果不同,分化植株的形态差异也很大;试验还发现,T-DNA在整合到受体细胞染色体上时,可以引起某些基因发生突变。因此,今后只要用双转化法能使野生型农杆菌双转化的细胞分化出正常植株,则野生型农杆菌就可以作为一种重要的诱变源为育种提供较多的变异。 展开更多
关键词 马铃薯 野生型农杆菌 ti质粒 RI质粒 双转化
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