滑膜间充质干细胞修复软骨损伤研究进展 被引量：1

1

作者 郭子瑊 毛兴佳 +8 位作者 王泽华 冯腾达 高英杰 尹志文 田最 刘洋 葛子钢 傅攀峰 向川 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第11期2238-2247,共10页

软骨损伤是一种最为常见,患病率极高的一种疾患,并很有可能最终发展为骨关节炎,造成人民和社会的经济负担。由于传统软骨损伤的治疗方法多存在价格昂贵,疗效欠佳且难以持久等缺点,基于间充质干细胞(MSCs)的软骨组织再生移植成为目前软... 软骨损伤是一种最为常见,患病率极高的一种疾患,并很有可能最终发展为骨关节炎,造成人民和社会的经济负担。由于传统软骨损伤的治疗方法多存在价格昂贵,疗效欠佳且难以持久等缺点,基于间充质干细胞(MSCs)的软骨组织再生移植成为目前软骨损伤治疗方法的研究热点。滑膜是滑膜关节的重要组成部分,具有很高的特异性。以往的研究表明,滑膜是一种有少量细胞层厚的结构,主要由成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)组成,并通过细胞与细胞的接触形成一层覆盖在关节腔上的滑膜和滑液。近年来研究结果显示,滑膜中也存在滑膜间充质干细胞(SMSCs),作为MSCs重要组成部分,因其强大的成软骨分化能力和增殖能力,逐渐成为软骨损伤修复的热点种子细胞。本文就最近SMSCs的来源、分离和鉴定及其在软骨损伤修复中的研究作综述,并对近20年SMSCs修复软骨损伤相关研究进行可视化分析,旨在阐明SMSCs目前研究现状和预测未来研究热点和方向。 展开更多

关键词 软骨损伤 组织再生 滑膜间充质干细胞

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壳聚糖-明胶支架／滑膜干细胞的相容性 被引量：7

2

作者 鲁小云 郭常安 阎作勤 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1026-1028,共3页

目的检测壳聚糖-明胶支架与人滑膜干细胞（SMSCs）的相容性。方法接种滑膜干细胞于壳聚糖-明胶支架上，于第3、7和10天进行扫描电镜观察和噻唑蓝（MTT）分析。结果扫描电镜显示支架上有大量滑膜干细胞生长，且细胞形态与对照组无明显差... 目的检测壳聚糖-明胶支架与人滑膜干细胞（SMSCs）的相容性。方法接种滑膜干细胞于壳聚糖-明胶支架上，于第3、7和10天进行扫描电镜观察和噻唑蓝（MTT）分析。结果扫描电镜显示支架上有大量滑膜干细胞生长，且细胞形态与对照组无明显差异，MTr分析显示支架组的A值关系为10d（1．43±0．11）≥7d（1．35±0．08）〉3d（0．43±0．08），且第7、10天组的A值明显大于同期对照组（0．64±0．15、0．59±0．13）（P〈0．05）。结论壳聚糖-明胶支架与滑膜干细胞的相容性良好。 展开更多

关键词 滑膜干细胞 壳聚糖-明胶支架 组织工程 关节软骨

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长链非编码RNA DANCR促滑膜间充质干细胞向软骨细胞分化作用的研究进展 被引量：6

3

作者 杨超 张雷 +1 位作者 周利武 赵建宁 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第8期892-896,共5页

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度大于200 nt,不具有翻译成蛋白质能力的RNA。lncRNA DANCR是一种近年来在肝细胞癌中发现的特异性高表达的长链非编码RNA,具有高度调控细胞分化的作用。最新研究表明,lncRNA DA... 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度大于200 nt,不具有翻译成蛋白质能力的RNA。lncRNA DANCR是一种近年来在肝细胞癌中发现的特异性高表达的长链非编码RNA,具有高度调控细胞分化的作用。最新研究表明,lncRNA DANCR在关节软骨损伤修复中也起着重要的调控作用,并有望成为促进滑膜间充质干细胞(synovium-derived mesenchymal stem cells,SMSCs)向软骨细胞增殖和分化的关键调控位点。文中就近年来DANCR促进SMSCs向软骨细胞增殖和分化过程中的作用及未来可能的研究热点进行综述。 展开更多

关键词 长链非编码RNA DANCR 滑膜间充质干细胞

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滑膜间充质干细胞体内外成骨特性的实验研究 被引量：4

4

作者 郑伟伟 杨民 +1 位作者 武成 苏显林 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期102-109,共8页

目的探讨大鼠滑膜间充质干细胞(synovium-derived mesenchymal stem cells,SMSCs)生物学特性及诱导成骨的可行性,评估SMSCs复合羟基磷灰石/壳聚糖/聚乳酸(hydroxylapatite/chitosan/poly L-latic acid,HA/CS/PLLA)支架材料在体内异位成... 目的探讨大鼠滑膜间充质干细胞(synovium-derived mesenchymal stem cells,SMSCs)生物学特性及诱导成骨的可行性,评估SMSCs复合羟基磷灰石/壳聚糖/聚乳酸(hydroxylapatite/chitosan/poly L-latic acid,HA/CS/PLLA)支架材料在体内异位成骨能力。方法采用酶消化法和贴壁法分离培养SMSCs,并利用流式细胞仪检测细胞表型,SMSCs成脂及成骨诱导后分别行油红O染色、ALP染色和茜素红染色鉴定。取第3代SMSCs,成骨诱导1、7、14、21、28 d后,采用实时荧光定量PCR检测骨钙素(osteocalcin,OCN)、Ⅰ型胶原、ALP以及Runx-2m RNA表达情况;成骨诱导后1、3、5、7、9、11 d,采用ELISA法检测ALP活性;成骨诱导后7、14、21、28 d,采用茜素红S法检测钙盐沉积;以正常培养SMSCs作为对照组。体内实验:取SD大鼠24只,随机分为实验组和对照组(n=12);取第3代SMSCs接种于HA/CS/PLLA支架材料,体外复合培养72 h后植入实验组大鼠右下肢肌袋,对照组大鼠植入单纯HA/CS/PLLA支架材料;术后4、8周通过X线片及组织学观察分析SMSCs体内成骨情况。结果提纯后SMSCs CD147、CD90、CD105、CD44表达超过95%,而CD117、CD34、CD14、CD45表达低于10%;油红O染色可见红色脂滴形成,茜素红染色可见红色钙化灶,ALP染色可见细胞质呈咖啡样深染。实时荧光定量PCR检测示,SMSCs成骨诱导7 d,Ⅰ型胶原、ALP、Runx-2 m RNA表达显著增加,诱导14 d OCN m RNA表达显著增加。成骨诱导后5、7、9、11 d ALP活性明显高于对照组,7 d时达峰值(P<0.05)。成骨诱导14 d,钙含量显著增加,且随诱导时间延长钙含量逐渐增加(P<0.05),且均高于对照组(P<0.05)。体内实验术后4、8周影像学和组织学观测结果显示,两组均可见新生骨形成,但实验组成骨量明显多于对照组(P<0.05)。结论 SMSCs在体内、体外均可诱导成骨,可成为骨组织工程的种子细胞。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 成骨诱导 茜素红 ALP 新骨形成 大鼠

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滑膜间充质干细胞的生物学特性及其在软骨组织工程中应用的研究进展 被引量：3

5

作者 袁洋 王思涵 +1 位作者 郭小凯 刘畅 《海南医学》 CAS 2015年第2期214-217,共4页

滑膜间充质干细胞(Synovium-derived mesenchymal stem cells,SMCSs)的增殖能力强,分离方法简便,具有多向分化潜能。其中SMSCs的成软骨分化能力尤为突出,被广泛应用于软骨缺损修复的实验中,因此SMSCs可能成为软骨组织工程领域中新的种... 滑膜间充质干细胞(Synovium-derived mesenchymal stem cells,SMCSs)的增殖能力强,分离方法简便,具有多向分化潜能。其中SMSCs的成软骨分化能力尤为突出,被广泛应用于软骨缺损修复的实验中,因此SMSCs可能成为软骨组织工程领域中新的种子细胞,为关节软骨疾病治疗提供了新的可能性。本文对SMSCs的组织来源、生物学特性以及在软骨组织工程中的应用展开综述。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 种子细胞 软骨组织工程

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滑膜间充质干细胞在五种不同趋化因素作用下迁移的研究 被引量：3

6

作者 潘建锋 郭常安 +2 位作者 沈剑锋 刘嘉 阎作勤 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1013-1015,共3页

目的观察血清、转化生长因子（TGF）-β3、血小板衍生生长闪子（PDGF）-AB、骨形态发生蛋白（BMP）-2、成纤维细胞生长因子（FGF）对兔滑膜间充质干细胞（SMSCs）迁移的影响。方法选取含浓度0．1％、0．5％、1．0％、2．0％、5．0％、10... 目的观察血清、转化生长因子（TGF）-β3、血小板衍生生长闪子（PDGF）-AB、骨形态发生蛋白（BMP）-2、成纤维细胞生长因子（FGF）对兔滑膜间充质干细胞（SMSCs）迁移的影响。方法选取含浓度0．1％、0．5％、1．0％、2．0％、5．0％、10．0％、20．0％血清以及含50μg/LTGF-β3、PDGF—AB、BMP-2、FGF的低糖DMEM作用于兔SMSCs，Transwell小室检测其迁移能力。结果 血清、TGF-β3、PDGF—AB、BMP-2、FGF均可趋化兔SMSCs迁移，血清浓度为5．0％时趋化作用较其他浓度组明显，每×100倍视野下迁移细胞数为（169．00±21．74）个，4种因子中PDGF—AB趋化作用较TGF—β3、BMP-2、FGF明显（219．83±11．29比84．50±10．33、146．67±17．91、99．37±12．27）。结论兔SMSCs可在TGF-β3、PDGF—AB、BMP-2、FGF作用下迁移，其中PDGF—AB趋化最明显，可用于促进SMSCs迁移归巢，进行软骨原位冉生的修复研究。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 细胞因子 趋化 迁移

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关节软骨细胞与CD105阳性滑膜间充质干细胞共培养并促进其成软骨分化 被引量：2

7

作者 张松 王鹏程 胡海清 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期408-413,共6页

目的使用Transwell小室将大鼠关节软骨细胞(ACC)和CD105阳性滑膜间充质干细胞(CD105+SMSC)进行间接共培养,研究共培养体系下CD105+SMSC成软骨分化的能力和伴随的炎症反应情况。方法在体外分离培养大鼠SMSC,通过形态学观察和成骨、成脂... 目的使用Transwell小室将大鼠关节软骨细胞(ACC)和CD105阳性滑膜间充质干细胞(CD105+SMSC)进行间接共培养,研究共培养体系下CD105+SMSC成软骨分化的能力和伴随的炎症反应情况。方法在体外分离培养大鼠SMSC,通过形态学观察和成骨、成脂、成软骨三系分化鉴定。使用磁珠分选方法(MACS)筛选出表面标记为CD105阳性的细胞,并用免疫荧光和流式细胞学方法鉴定。体外分离培养大鼠ACC,用形态学观察及甲苯胺蓝染色鉴定。ACC按一定比例(4∶1,2∶1,1∶1,1∶2,1∶4)与CD105+SMSC在Transwell小室中间接共培养,另设单独培养的CD105+SMSC作阴性对照,CD105+SMSC+成软骨诱导培养液(chondrogenic culture medium,CCM)作阳性对照。在培养的第14天提取各组CD105+SMSC总RNA,使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测二型胶原(Col2A1),蛋白聚糖(aggrecan)、性别决定区Y框蛋白9(SOX-9)、转化生长因子-β3(TGF-β3)等相应的成软骨指标表达,检测聚蛋白多糖酶-5(ADAMTS-5)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、Runt相关转录因子-2(RUNX-2)等炎症指标的表达。结果分离培养后的SMSC可进行成骨、成脂、成软骨三系分化。MACS分选后可见免疫荧光和流式细胞学鉴定均提示CD105阳性。与软骨细胞间接共培养14 d后,Real-time PCR检测结果示,与阴性对照组相比,2∶1和1∶1实验组的各成软骨指标较阴性对照组上升,ADAMTS-5和RUNX-2炎症指标无明显改变,MMP-3和MMP-13指标显著下降。结论与ACC间接共培养可以促进CD105+SMSC向成软骨方向分化,并能够在一定程度上降低其分化过程中的炎症反应。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 磁珠分选 成软骨分化 间接共培养

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TNF-α诱导滑膜MSCsMSCs与BMSCs凋亡的比较研究

8

作者 欧阳毅 王鹏 +7 位作者 宋斌 侯景义 陈仲 邓海权 沈慧勇 吴燕峰 李卫平 杨睿 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期473-478,共6页

目的通过比较TNF-α诱导滑膜MSCs（synovium-derived MSCs,SMSCs）与BMSCs凋亡,探讨SMSCs的抗凋亡能力。方法取患者自愿捐赠的滑膜组织及骨髓,分别采用组织贴壁法和密度梯度离心法分离培养SMSCs和BMSCs并传代,取第3-5代细胞行细胞免疫... 目的通过比较TNF-α诱导滑膜MSCs（synovium-derived MSCs,SMSCs）与BMSCs凋亡,探讨SMSCs的抗凋亡能力。方法取患者自愿捐赠的滑膜组织及骨髓,分别采用组织贴壁法和密度梯度离心法分离培养SMSCs和BMSCs并传代,取第3-5代细胞行细胞免疫表型及三系分化鉴定后进行实验。实验分为4组,其中SMSCs、BMSCs凋亡诱导组（SMSCs、BMSCs实验组）用20 ng/m L TNF-α和10μg/m L放线菌酮对细胞进行凋亡诱导,其对应对照组以正常培养基培养。倒置相差显微镜下观察凋亡诱导细胞形态变化;培养24 h取各组细胞,采用细胞计数试剂盒8及流式细胞术检测细胞存活率及凋亡率,Western blot法检测细胞半胱氨酶天冬氨酶蛋白酶降解产物8、3（Cleaved Caspase-8、3）的表达。结果经细胞表型及三系分化鉴定培养获得的细胞均符合MSCs鉴定标准。倒置相差显微镜观察示,随凋亡诱导培养时间延长,两实验组细胞形态及生长均较对应的对照组差。培养24 h,两对照组细胞存活率均为100%,未见细胞凋亡;SMSCs、BMSCs实验组细胞存活率分别降至60.13%±8.63%及46.55%±10.54%,均显著低于对照组（P〈0.05）,SMSCs实验组细胞存活率显著高于BMSCs实验组（t=3.152,P=0.006）。SMSCs和BMSCs对照组细胞凋亡率分别为1.12%±0.24%和1.35%±0.31%,两实验组分别增高至36.54%±8.63%及53.77%±11.52%,均显著高于对照组（P〈0.05）,且SMSCs实验组细胞凋亡率显著低于BMSCs实验组（t=3.785,P=0.001）。两对照组细胞Cleaved Caspase-8、3蛋白几乎不表达,且SMSCs实验组和BMSCs组细胞Cleaved Caspase-8、3蛋白明显高表达;其中BMSCs实验组明显高于SMSCs实验组（t=13.870,P=0.000;t=7.309,P=0.000）。结论经TNF-α诱导培养,SMSCs凋亡明显少于BMSCs,具有更强的抗凋亡能力。 展开更多

关键词 滑膜MSCs BMSCS TNF-Α 细胞凋亡

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CD105-生物素-亲和素促进滑膜干细胞黏附和筛选

9

作者 范文帅 陈晨 +3 位作者 李朔 潘建锋 阎作勤 郭常安 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1107-1110,共4页

目的 观察CD105-生物素-亲和素系统促进滑膜间充质干细胞的黏附和CD105阳性细胞的筛选,探讨软骨形成的效果.方法 酶消化获取滑膜干细胞,应用流式细胞仪检测细胞表面CD29、CD34、CD44、CD45、CD90、CD105的表达.分3组（A：未处理＋干细... 目的 观察CD105-生物素-亲和素系统促进滑膜间充质干细胞的黏附和CD105阳性细胞的筛选,探讨软骨形成的效果.方法 酶消化获取滑膜干细胞,应用流式细胞仪检测细胞表面CD29、CD34、CD44、CD45、CD90、CD105的表达.分3组（A：未处理＋干细胞;B：亲和素化＋生物素化干细胞;C：亲和素化＋ CD105-生物素化干细胞）,通过细胞吸光度值和显微镜下随机视野计数分别测定不同时间点细胞黏附数量;免疫荧光检测CD105阳性细胞的筛选.成软骨诱导3周后,通过苏木素-伊红（HE）染色、阿尔新蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光观察3组软骨形成.结果 滑膜干细胞贴壁生长,呈星形或梭形;CD29、CD44、CD90阳性表达,CD34、CD45阴性表达,CD105阳性率约为42％.C组和B组早期黏附细胞数量增加,与A组比较在1、2h差异有统计学意义（P＜0.05）,B组虽然多于C组,但差异无统计学意义（P＞0.05）.免疫荧光显示C组黏附的CD105阳性细胞在1、2h均明显高于B组和A组.软骨诱导培养后,3组均合成了蛋白聚糖和Ⅱ型胶原,但是C组软骨特异性细胞外基质最多.结论 CD105-生物素-亲和素系统既增加了滑膜干细胞的黏附,又筛选了CD105阳性细胞,更好的促进了软骨形成. 展开更多

关键词 CD105 生物素-亲和素 滑膜间充质干细胞 软骨组织工程

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滑膜间充质干细胞及其在组织工程中的应用 被引量：10

10

作者 赵文君 邢国胜 于顺禄 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1504-1507,共4页

目的对滑膜间充质干细胞(synovium-derived mesenchymal stem cells,SMSCs)的研究进展及在组织工程中的应用进行综述。方法查阅近年SMSCs相关文献,从分离培养方法、基本特性及在组织工程中的应用三方面进行综述。结果 SMSCs具有分离方... 目的对滑膜间充质干细胞(synovium-derived mesenchymal stem cells,SMSCs)的研究进展及在组织工程中的应用进行综述。方法查阅近年SMSCs相关文献,从分离培养方法、基本特性及在组织工程中的应用三方面进行综述。结果 SMSCs具有分离方法简便、增殖能力及多分化能力较强的特点,已有研究将其应用于软骨、肌腱、韧带及骨组织工程领域。结论 SMSCs是MSCs家族的新成员,可能会成为组织工程领域新的种子细胞,还需要进一步深入研究。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 组织工程 种子细胞

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晚期骨关节炎患者膝关节滑膜间充质干细胞的体外成骨分化 被引量：9

11

作者 芮云峰 林禹丞 +1 位作者 陈辉 王宸 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第45期7840-7846,共7页

背景:间充质干细胞是组织工程中常用的种子细胞,而来源于人膝关节滑膜组织的间充质干细胞能否作为骨组织修复与再生中合适的种子细胞还需要进一步验证。目的:观察晚期骨关节炎患者膝关节滑膜组织来源的间充质干细胞体外向成骨细胞定向... 背景:间充质干细胞是组织工程中常用的种子细胞,而来源于人膝关节滑膜组织的间充质干细胞能否作为骨组织修复与再生中合适的种子细胞还需要进一步验证。目的:观察晚期骨关节炎患者膝关节滑膜组织来源的间充质干细胞体外向成骨细胞定向分化的潜能,对所诱导细胞的成骨特性进行鉴定。方法:无菌条件下从行全膝关节置换的晚期骨关节炎患者膝关节腔内获取滑膜组织,Ⅰ型胶原酶消化分离获得有核细胞。以最适密度接种(200个有核细胞/cm2),挑选单细胞克隆,筛选出滑膜间充质干细胞。基础培养基培养,传至第3代时改换为含地塞米松、β-甘油磷酸钠和抗坏血酸的成骨诱导培养基诱导培养。结果与结论:体外分离培养的滑膜间充质干细胞早期可形成葵花样细胞集落,克隆样生长。传代至第3代,细胞呈成纤维细胞样生长,形态均一。滑膜间充质干细胞成骨诱导后呈典型的"铺路石样"成骨细胞形态,诱导至第7天碱性磷酸酶染色呈强阳性,碱性磷酸酶活性表达也在诱导7 d时达最高峰;诱导21 d茜素红染色可见大量钙结节形成;同时反转录PCR检测到Ⅰ型胶原、Runx2、骨结合蛋白和骨桥蛋白的表达在诱导后增加,21 d时表达最高。从晚期骨关节炎患者膝关节滑膜组织分离获得的滑膜间充质干细胞,在体外可成功诱导分化为成骨细胞,所诱导生成的细胞具有典型的成骨细胞特性。提示滑膜间充质干细胞有望成为骨组织工程理想的种子细胞来源,在骨组织的再生修复中发挥重要作用。 展开更多

关键词 干细胞 干细胞培养与分化 滑膜组织 间充质干细胞 滑膜干细胞 膝关节 骨关节炎 成骨诱导分化 成骨细胞 国家自然科学基金 干细胞图片文章

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一种新的种子细胞——滑膜间充质干细胞

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作者 常利民 曹德君 董佳生 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2007年第5期292-295,共4页

滑膜间充质干细胞作为一种新的间充质干细胞在组织工程中有着广阔的应用前景。滑膜间充质干细胞能够分化为软骨、骨、脂肪、骨骼肌，具有取材方便，供区并发症少等优点。因此，滑膜间充质干细胞是软骨、骨、脂肪及骨骼肌的种子细胞的理... 滑膜间充质干细胞作为一种新的间充质干细胞在组织工程中有着广阔的应用前景。滑膜间充质干细胞能够分化为软骨、骨、脂肪、骨骼肌，具有取材方便，供区并发症少等优点。因此，滑膜间充质干细胞是软骨、骨、脂肪及骨骼肌的种子细胞的理想来源。介绍了滑膜间充质干细胞的分离、获取以及其生物学特性，并对其在组织工程中应用的研究进展做一回顾。 展开更多

关键词 滑膜间充质干细胞 种子细胞 组织工程

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