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咪达唑仑调控miR-875-5p/STAG2轴对食管癌细胞增殖及凋亡的影响 被引量:1
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作者 刘梦诗 崔光锐 +1 位作者 邱坚 廖微微 《河北医学》 CAS 2022年第10期1585-1591,共7页
目的:探讨咪达唑仑(MID)调控miR-875-5p/基质抗原2(STAG2)轴对食管癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:用不同浓度的MID(0,10,20,30,40μmoL/L)处理食管癌Eca109细胞24h,通过CCK-8法筛选适宜的MID浓度;采用高通量miRNA转录组学对30μmoL/L处... 目的:探讨咪达唑仑(MID)调控miR-875-5p/基质抗原2(STAG2)轴对食管癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:用不同浓度的MID(0,10,20,30,40μmoL/L)处理食管癌Eca109细胞24h,通过CCK-8法筛选适宜的MID浓度;采用高通量miRNA转录组学对30μmoL/L处理的Eca109细胞中差异表达的miRNA进行筛选;流式细胞术检测Eca109细胞凋亡及细胞周期;qRT-PCR检测miR-875-5p及STAG2 mRNA表达水平;双荧光素酶实验验证miR-875-5p与STAG2的关系;将miR-875-5p模拟物(miR-875-5p mimics)转染于Eca109细胞并用30μmoL/L MID干预,观察细胞存活率、凋亡率、细胞周期的变化;Western blot检测STAG2蛋白表达;体内异种移植瘤实验检测MID及miR-875-5p对裸鼠体内移植瘤生长的影响。结果:选用30μmoL/L MID用于后续研究;在30μmoL/L处理的Eca109细胞中筛选出显著性下调的miRNA中有miR-875-5p;30μmoL/L MID干预或下调miR-875-5p表达均能够使Eca109细胞增殖能力、miR-875-5p表达、S期细胞比例降低,细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例增加(P<0.05);miR-875-5p和STAG2存在靶向负向调控关系;上调miR-875-5p表达可逆转MID对Eca109细胞增殖、凋亡及细胞周期的作用,同时还可逆转MID对裸鼠体内移植瘤生长的抑制作用。结论:MID通过下调miR-875-5p水平靶向促进STAG2表达,从而抑制Eca109细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 食管癌 miR-875-5p 基质抗原2 细胞增殖 细胞凋亡
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miR-1290在乳腺癌组织中表达及对乳腺癌细胞生物学行为的影响 被引量:2
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作者 付倩 崔利民 +1 位作者 娄雅楠 李军涛 《中华实用诊断与治疗杂志》 2021年第8期760-763,共4页
目的观察miR-1290在乳腺癌组织中表达情况,探讨其对乳腺癌细胞增殖、凋亡及骨髓基质抗原2(stromal antigen 2,STAG2)表达的影响。方法取120例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测miR-1290相对表达量。对数生长期MC... 目的观察miR-1290在乳腺癌组织中表达情况,探讨其对乳腺癌细胞增殖、凋亡及骨髓基质抗原2(stromal antigen 2,STAG2)表达的影响。方法取120例乳腺癌患者的癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测miR-1290相对表达量。对数生长期MCF-7细胞,随机分为对照组、模拟物对照组、模拟物组、抑制物对照组和抑制物组,对照组加入含LipofectamineTM 2000的完全培养液,模拟物对照组、模拟物组、抑制物对照组和抑制物组分别转染miR-1290模拟物阴性对照、miR-1290模拟物、miR-1290抑制物阴性对照和miR-1290抑制物。采用CCK-8法检测细胞相对活力,采用TUNEL法检测细胞凋亡率,采用Western blot法检测细胞STAG2蛋白相对表达量。结果乳腺癌组织miR-1290相对表达量(3.84±0.76)高于癌旁组织(1.06±0.18)(P<0.05)。模拟物组细胞miR-1290相对表达量(4.83±0.25)和细胞相对活力[(124.71±2.74)%]高于对照组[2.67±0.16、(100.00±1.15)%]和模拟物对照组[2.72±0.18、(101.32±2.18)%](P<0.05),细胞凋亡率[(3.25±0.48)%]和STAG2蛋白相对表达量(0.58±0.04)低于对照组[(6.72±0.74)%、0.74±0.08]和模拟物对照组[(7.04±0.69)%、0.72±0.06](P<0.05);抑制物组细胞miR-1290相对表达量(1.31±0.12)和细胞相对活力[(78.82±2.02)%]低于对照组和抑制物对照组[2.59±0.17、(98.65±1.83)%](P<0.05),细胞凋亡率[(34.17±1.16)%]和STAG2蛋白相对表达量(1.12±0.07)高于对照组和抑制物对照组[(6.69±0.67)%、0.81±0.05](P<0.05)。结论miR-1290在乳腺癌组织中表达上调,可能通过调控STAG2的表达促进乳腺癌细胞增殖,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 乳腺癌 miR-1290 增殖 凋亡 骨髓基质细胞抗原2
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STAG2基因在人膀胱癌细胞系5637侵袭迁移和凋亡过程中的作用 被引量:2
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作者 王翰 唐爱发 《深圳中西医结合杂志》 2016年第24期1-4,F0003,共5页
目的:研究Stromal antigen 2(STAG2)基因在膀胱癌中的表达,并探讨STAG2基因在膀胱癌细胞侵袭迁移及凋亡过程中的作用。方法:采用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)和蛋白印迹法(Western Blotting)分析STAG2在膀胱癌细胞表达特点;... 目的:研究Stromal antigen 2(STAG2)基因在膀胱癌中的表达,并探讨STAG2基因在膀胱癌细胞侵袭迁移及凋亡过程中的作用。方法:采用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)和蛋白印迹法(Western Blotting)分析STAG2在膀胱癌细胞表达特点;利用慢病毒技术过表达STAG2基因转染膀胱癌细胞并使用嘌呤霉素筛选稳定转染细胞株;细胞划痕实验和Transwell实验观察STAG2过表达对膀胱癌细胞迁移和侵袭功能的影响;流式细胞仪检测STAG2基因过表达对膀胱癌细胞的凋亡影响,Western Blotting检测下游分子E-cadherin、Vimentin表达水平。结果:在膀胱癌细胞系5637中STAG2表达远低于正常膀胱上皮细胞;慢病毒过表达效率达到80%以上;STAG2过表达后膀胱癌细胞划痕愈合速度变慢;穿过Transwell小室的细胞数明显变少;膀胱癌细胞凋亡数明显增加,下游分子E-cadherin表达升高、Vimentin表达下降。结论:STAG2可能是一个新的肿瘤抑制基因,在膀胱癌细胞侵袭迁移和细胞凋亡中起着重要。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 骨髓基质细胞抗原2 侵袭 细胞凋亡
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肿瘤相关蛋白表达水平对胃肠间质瘤预后判断的意义 被引量:2
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作者 姜晶 金美善 +4 位作者 马洪喜 所剑 王银萍 何亮 曹雪源 《中华普外科手术学杂志(电子版)》 2013年第2期40-43,共4页
目的观察Ki-67、p53、表皮生长因子受体(EGFR)和环氧化物酶2(COX-2)在胃肠间质瘤(GIST)中的表达,分析其对预后的预测作用。方法采用免疫组织化学SP法检测96例GIST中Ki-67、p53、EGFR和COX-2的表达,多因素分析其蛋白表达水平以及NIH风险... 目的观察Ki-67、p53、表皮生长因子受体(EGFR)和环氧化物酶2(COX-2)在胃肠间质瘤(GIST)中的表达,分析其对预后的预测作用。方法采用免疫组织化学SP法检测96例GIST中Ki-67、p53、EGFR和COX-2的表达,多因素分析其蛋白表达水平以及NIH风险分级和GIST预后的关系。结果 GIST中Ki-67阳性表达与肿瘤大小、核分裂、NIH风险分级显著相关(χ2=13.34,P<0.001;χ2=20.31,P<0.001;χ2=18.81,P<0.001)。p53表达和核分裂、NIH风险分级明显关联(χ2=4.91,P=0.03;χ2=5.80;P=0.02)。Ki-67的阳性表达与不良预后显著相关(χ2=10.44,P=0.006),而p53、EGFR、COX-2表达与生存无关(χ2=4.744,χ2=1.271,χ2=1.679;P>0.05)。多因素分析表明,Ki-67表达水平可作为判断GIST预后的独立危险因素(RR=15.78,95%CI:4.25~59.37)。同时,伊马替尼辅助治疗可明显降低中高危GIST患者的术后复发率,延长生存期(中位生存时间:52vs.37个月,χ2=7.618,P=0.006)。结论 Ki-67蛋白表达水平可以作为独立因素判断GIST患者的预后。 展开更多
关键词 胃肠道间质肿瘤 KI-67抗原 肿瘤抑制蛋白质P53 受体 表皮生长因子 环氧化酶2 预后
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miR-875-5p靶向基质抗原2对宫颈癌细胞迁移及侵袭行为的影响 被引量:1
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作者 何德娇 梁华 +3 位作者 欧阳晓飞 凌娜 李小丽 梁轶岚 《中国性科学》 2021年第11期89-93,共5页
目的探讨miR-875-5p与基质抗原2(STAG2)的靶向关系,并分析两者对宫颈癌HeLa 229细胞侵袭及迁移的影响。方法选取2018年10月至2020年10月武汉大学人民医院收治的120例宫颈癌患者作为研究对象,留取其组织标本作为宫颈癌组。另选取同期武... 目的探讨miR-875-5p与基质抗原2(STAG2)的靶向关系,并分析两者对宫颈癌HeLa 229细胞侵袭及迁移的影响。方法选取2018年10月至2020年10月武汉大学人民医院收治的120例宫颈癌患者作为研究对象,留取其组织标本作为宫颈癌组。另选取同期武汉大学人民医院收治的120例子宫肌瘤患者,留取其宫颈组织标准本作为对照组。体外培养HeLa 229细胞,分为空白对照组(NG组)、阴性转染组(inhibitor-NC组)、抑制miR-875-5p表达组(miR-875-5p-inhibitor组)、共转染组(miR-875-5p-inhibitor+STAG2-siRNA组)。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(qRT-PCR)检测组织及各组HeLa 229细胞中miR-875-5p、STAG2 mRNA水平;划痕实验、Transwell实验分别检测各组HeLa 229细胞迁移、侵袭能力;免疫印迹法法检测STAG2蛋白及侵袭迁移相关蛋白[E-钙粘附蛋白(E-cadherin)、N-钙粘附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)]表达情况;采用TargetScan数据库预测miR-875-5p与STAG2靶向关系并用双荧光素酶报告基因实验验证。结果与对照组比较,宫颈癌组miR-875-5p水平升高,STAG2 mRNA水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与NG组、inhibitor-NC组比较,miR-875-5p-inhibitor组HeLa 229细胞miR-875-5p水平、划痕愈合率、侵袭细胞数、N-Cadherin、Vimentin蛋白表达均降低,STAG2 mRNA及其蛋白水平、E-Cadherin蛋白表达均升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论抑制miR-875-5p可能靶向上调STAG2表达,抑制宫颈癌HeLa 229细胞迁移及侵袭,其有望成为宫颈癌新的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 miR-875-5p 基质抗原2 宫颈癌细胞 迁移 侵袭
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胃肠道间质瘤中Ki一67、cyclinD1和bcl-2的表达与危险度及预后的关系
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作者 王刚平 郭文君 +1 位作者 王洪远 刘西林 《中国临床实用医学》 2009年第12期17-18,共2页
目的探讨胃肠道间质瘤(GIST)中Ki-67增殖指数(u)、cyclinDl和bcl-2的表达与危险度及预后的关系。方法对76例确诊的GIST应用免疫组化SP法检测Ki--67、cyclinD1和bcl-2的表达,分析与危险度和预后的关系。结果危险度极低、低、中和高... 目的探讨胃肠道间质瘤(GIST)中Ki-67增殖指数(u)、cyclinDl和bcl-2的表达与危险度及预后的关系。方法对76例确诊的GIST应用免疫组化SP法检测Ki--67、cyclinD1和bcl-2的表达,分析与危险度和预后的关系。结果危险度极低、低、中和高度分别为10、23、18和25例;随访61例,其中42例健在,12例死于GIST,7例死于其他原因。Ki-67LI〉5%与核分裂象〉5/50HPF、肿瘤直径〉5cm及危险度中高有关(P〈0.05);cyclinD1和bcl-2的阳性表达与核分裂象、肿瘤大小无关而与中高危组相关(P〈0.05)。结论Ki-67、cyclinD1和bcl-2在GIST中、高危险度组高表达,可作为预测危险度和预后有用的指标,Ki-67LI可作为独立指标。 展开更多
关键词 胃肠道问质瘤 KI-67抗原 CYCLIN D1 bcl-2 危险度 预后
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骨髓基质抗原蛋白2靶向微泡的制备及小鼠肿瘤新生血管超声分子成像研究 被引量:6
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作者 郑海荣 严飞 钱明 《中华核医学与分子影像杂志》 CSCD 北大核心 2012年第1期22-28,共7页
目的研究制备针对骨髓基质抗原蛋白2(BST2)的TMBs造影剂(BST2-TMBs),通过超声分子成像技术对小鼠肿瘤血管内皮细胞进行检测,为肿瘤的发生、发展及早期诊断提供实验依据。方法将抗BST2的抗体通过生物素一亲和素桥接的方式连接于微... 目的研究制备针对骨髓基质抗原蛋白2(BST2)的TMBs造影剂(BST2-TMBs),通过超声分子成像技术对小鼠肿瘤血管内皮细胞进行检测,为肿瘤的发生、发展及早期诊断提供实验依据。方法将抗BST2的抗体通过生物素一亲和素桥接的方式连接于微泡(MBs)表面,获得BST2-TMBs,在光学显微镜下观察TMBs的形态,用粒径分析仪测定其粒径及其分布;通过体外细胞黏附实验研究TMBs与血管内皮细胞的结合性能,并对小鼠前列腺癌肿瘤血管内皮细胞行超声分子成像,用免疫组织化学染色分析BST2在肿瘤血管内皮细胞的表达。采用SPSS19.0软件行统计学分析,对独立样本行t检验。结果制备的BST2-TMBs的平均粒径为1.61μm,其中95%的微泡在1-5μm之间。BST2-TMBs能够与血管内皮细胞结合,平均每个视野有(165±25)个TMBs结合在内皮细胞表面,远高于非靶向微泡(IgG-MBs)对照组的(10±3)个微泡(t=10.662,P〈0.01)。黏附的TMBs能够明显增强内皮细胞的超声信号强度,TMBs为27.93±5.14(灰度值),非靶向微泡为3.61±1.67(灰度值)(t=7.239,P〈0.01)。小鼠在体肿瘤超声分子成像表明:BST2-TMBs处理组在微泡注射7min时信号强度(扣除微泡击碎后的信号强度)为38.79±0.29(灰度值),能保持47.65%的微泡注射30s时的信号强度(灰度值81.40±0.37),而IgG-MBs处理组在微泡注射7min时的信号强度(扣除微泡击碎后的信号强度)是9.46±0.17(灰度值),仅能保持11.39%的微泡注射30S时的信号强度(灰度值83.01±0.60)。相比之下,TMBs在肿瘤部位的超声信号强度较非靶向微泡提高4.27倍(t=65.587,P〈0.01)。免疫组织化学证实BST2蛋白在小鼠前列腺癌肿瘤血管内皮细胞上有表达。结论BST2-TMBs可以用于小鼠前列腺癌血管内皮细胞的超声分子成像,这为肿瘤的发生发� 展开更多
关键词 靶向微泡 骨髓基质抗原蛋白2 新生血管化 超声检查 小鼠
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胃肠间质瘤组织中Ki-67、COX-2、VEGF表达的意义 被引量:3
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作者 芦淑娟 关佳楠 《热带医学杂志》 CAS 2017年第4期483-486,F0002,共5页
目的探讨增殖细胞核抗原(Ki-67)、环氧合酶-2(COX-2)及血管内皮生长因子(VEGF)在胃肠间质瘤(GIST)组织中的表达,并分析其在GIST的作用及相关性。方法采用免疫组化学S-P法对62例GIST患者手术切除组织中的Ki-67、COX-2及VEGF表达情况进行... 目的探讨增殖细胞核抗原(Ki-67)、环氧合酶-2(COX-2)及血管内皮生长因子(VEGF)在胃肠间质瘤(GIST)组织中的表达,并分析其在GIST的作用及相关性。方法采用免疫组化学S-P法对62例GIST患者手术切除组织中的Ki-67、COX-2及VEGF表达情况进行检测,分析三者的表达与GIST临床病理特征的相关性。结果 Ki-67、COX-2及VEGF在GIST组织中的阳性表达率分别为64.52%、61.29%、66.13%,Ki-67、COX-2及VEGF的表达与患者的性别、年龄、肿瘤部位及肿瘤大小等病理特征无关(P>0.05),而不同风险分级条件下三者阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。Ki-67与VEGF、Ki-67与COX-2、COX-2与VEGF均存在正向相关性(r=0.461、0.452、0.367,P均<0.05)。结论 Ki-67、COX-2及VEGF的表达与风险分级相关,提示Ki-67、COX-2及VEGF可能参与到GIST的发生、发展过程。 展开更多
关键词 胃肠间质瘤 增殖细胞核抗原 环氧合酶-2 血管内皮生长因子
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骨髓基质细胞抗原2敲低促进创伤性颅脑损伤大鼠神经功能的恢复 被引量:2
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作者 胡艇 张赛 《武警后勤学院学报(医学版)》 CAS 2019年第3期18-21,34,共5页
【目的】探索骨髓基质细胞抗原2(bone marrow stromal cell antigen 2,Bst2)对颅脑创伤的影响。【方法】将大鼠随机分为假手术组,创伤性颅脑损伤(Traumatic brain injury,TBI)组,TBI+Bst2 siRNA组。其中TBI+Bst2 siRNA组在损伤后同时原... 【目的】探索骨髓基质细胞抗原2(bone marrow stromal cell antigen 2,Bst2)对颅脑创伤的影响。【方法】将大鼠随机分为假手术组,创伤性颅脑损伤(Traumatic brain injury,TBI)组,TBI+Bst2 siRNA组。其中TBI+Bst2 siRNA组在损伤后同时原位注射Bst2 siRNA。通过改良大鼠神经功能缺损评分,伊文思蓝通透性,脑干湿比重比较Bst2敲低对TBI损伤大鼠的影响。通过免疫印迹检测水通道蛋白-4(aquaporin 4,AQP4),基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein,MMP9),组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,tPA),肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,Tnf-α),表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,Egfr)表达水平的变化。【结果】Bst2 siRNA降低了TBI大鼠神经功能损伤评分,降低了伊文思蓝通透性,降低了脑水肿;免疫印迹结果显示Bst2敲低后Aqp4,Mmp9,tPA,Tnf-α和Egfr的表达水平降低。【结论】Bst2敲低通过降低Aqp4,Mmp9,tPA,Tnf-α和Egfr的蛋白水平减轻了脑水肿,改善了血脑屏障通透性和神经功能。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞抗原2 创伤性颅脑损伤 脑保护 脑水肿 血脑屏障
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RNA聚合酶2延长因子相关因子2通过调节骨髓基质抗原2的表达调控前列腺癌细胞的增殖与迁移 被引量:1
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作者 王凯臣 梁婷婷 +1 位作者 王永坤 王尧 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期1532-1534,共3页
目的 观察雄激素应答基因RNA聚合酶2延长因子相关因子2(EAF2)对骨髓基质抗原2(BST2)的调节能力,以及EAF2通过BST2调节前列腺癌细胞增殖和迁移的能力。方法 以Lipofectamine 2000试剂转染针对EAF2和非特异性对照组的小干扰RNA(siRN... 目的 观察雄激素应答基因RNA聚合酶2延长因子相关因子2(EAF2)对骨髓基质抗原2(BST2)的调节能力,以及EAF2通过BST2调节前列腺癌细胞增殖和迁移的能力。方法 以Lipofectamine 2000试剂转染针对EAF2和非特异性对照组的小干扰RNA(siRNA,分别为100 pmol),干扰前列腺癌细胞C4-2中EAF2的表达,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测细胞内BST2的mRNA和蛋白水平表达变化;采用质粒转染的方法在293T细胞中过表达EAF2后检测BST2蛋白水平的变化,明确EAF2对BST2表达的影响;采用溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记法和Transwell小室法计算并检测干扰BST2表达后对前列腺癌细胞C4-2增殖能力和迁移能力的影响,明确BST2对前列腺癌细胞增殖和迁移的调节能力。结果 干扰EAF2表达后细胞内BST2 mRNA的表达明显升高,说明EAF2可以调节BST2的转录水平,进一步检测干扰EAF2表达后,BST2的蛋白水平表达明显升高,进一步干扰BST2表达后,检测到前列腺癌细胞的增殖比例由(22.09±1.08)%下降至(12.25±1.32)%(P=0.001)。同时,迁移细胞的数量从(50.50±3.80)%下降至(24.25±1.42)%(P=0.001)。结论 在前列腺癌细胞中,EAF2可以在转录和蛋白水平调节BST2的表达,BST2具有调节前列腺癌细胞增殖和迁移的能力。 展开更多
关键词 前列腺癌 RNA聚合酶2延长因子相关因子2 骨髓基质抗原2
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BST-2在pSS患者唇腺、外周血淋巴细胞中的表达及增殖作用 被引量:1
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作者 张硕 高尔涵 +3 位作者 达林泰 巴格那 杨文博 孙明启 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第5期544-547,共4页
目的探讨原发性舍格伦综合征(pSS)患者唇腺及外周血B淋巴细胞中骨髓基质细胞抗原2(BST-2)的表达情况及其在pSS中的作用。方法将2017年9月至2018年3月在内蒙古自治区人民医院接受治疗的40例pSS患者作为pSS组;将同期体检的30例健康者作为... 目的探讨原发性舍格伦综合征(pSS)患者唇腺及外周血B淋巴细胞中骨髓基质细胞抗原2(BST-2)的表达情况及其在pSS中的作用。方法将2017年9月至2018年3月在内蒙古自治区人民医院接受治疗的40例pSS患者作为pSS组;将同期体检的30例健康者作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测纳入研究者的唇腺组织及外周血B淋巴细胞中BST-2的表达水平。免疫组织化学法检测唇腺组织内BST-2的表达情况,并分析BST-2对淋巴细胞增殖的影响。结果pSS组的外周血B淋巴细胞和唇腺组织中BST-2的表达水平明显高于对照组(P<0.05);pSS患者唇腺组织中浸润的局灶性淋巴细胞和少数周围导管上皮内BST-2表达量较高,而在对照组中仅在导管上皮细胞内存在散在性少量表达。连续切片的pSS患者唇腺组织染色显示,pSS患者的唇腺组织内CD19染色阳性细胞和BST-2阳性细胞基本一致。结论pSS患者唇腺组织和外周血B淋巴细胞BST-2水平明显增高;BST-2通过对腺体内B淋巴细胞的浸润及增殖,参与pSS的发病及进展。 展开更多
关键词 唇腺组织 CD19 B淋巴细胞 骨髓基质细胞抗原2 舍格伦综合征
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骨髓基质细胞抗原2抑制乙肝病毒复制与释放 被引量:1
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作者 朱素菲 贺巧 +3 位作者 胡琴 黄英 陈维贤 李月 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第17期1709-1714,共6页
目的研究骨髓基质细胞抗原2(bone marrow stromal antigen 2,BST-2)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制与释放的影响。方法以不同浓度干扰素处理人肝癌细胞株Hep G2.2.15,Western blot和荧光定量PCR检测BST-2蛋白水平和RNA水平... 目的研究骨髓基质细胞抗原2(bone marrow stromal antigen 2,BST-2)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)复制与释放的影响。方法以不同浓度干扰素处理人肝癌细胞株Hep G2.2.15,Western blot和荧光定量PCR检测BST-2蛋白水平和RNA水平;分别用构建的BST-2真核表达质粒p CDNA3.1-BST2-FLAG和BST-2拮抗蛋白HIV Vpu真核表达质粒,转染Hep G2.2.15细胞,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养液乙肝病毒表面抗原(HBs Ag)和乙肝病毒e抗原(HBe Ag),荧光定量PCR检测HBV mRNA,Southern blot检测HBV DNA。结果转染p CDNA3.1-BST2-FLAG后,HBV mRNA降低26%,细胞内HBV DNA降低31%,细胞培养液中HBV DNA降低33%(P<0.05),细胞培养液中HBs Ag下降至82%,HBe Ag下降至77%(P<0.05);加入Vpu蛋白后,BST-2的抑制作用受到对抗,HBV mRNA恢复至92%,细胞内HBV DNA恢复至93%,细胞培养液中HBV DNA升至98%,细胞培养液中HBs Ag恢复至102%,HBe Ag恢复至99%,HBV复制与释放明显增强。结论 BST-2对HBV复制与释放具有抑制作用,该抑制作用可被HIV Vpu蛋白拮抗。 展开更多
关键词 乙肝病毒 BST-2 干扰素
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束缚蛋白抗HIV机制 被引量:1
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作者 肖占沛 郭宏雄 羊海涛 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期528-531,共4页
束缚蛋白(tetherin)是一种具有特殊功能的蛋白质,它可抑制包膜病毒从感染细胞中释放。研究发现,人的束缚蛋白可将新生的HIV-1病毒颗粒固定在细胞表面,同时,它还可以减小HIV-1子代病毒的传染性。本文将主要从分子结构、抗HIV-1病毒的作... 束缚蛋白(tetherin)是一种具有特殊功能的蛋白质,它可抑制包膜病毒从感染细胞中释放。研究发现,人的束缚蛋白可将新生的HIV-1病毒颗粒固定在细胞表面,同时,它还可以减小HIV-1子代病毒的传染性。本文将主要从分子结构、抗HIV-1病毒的作用机制和在HIV传播中的作用三方面来阐述束缚蛋白抗病毒作用的最新研究进展。 展开更多
关键词 束缚蛋白 HIV 骨髓基质细胞抗原2
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新型功能蛋白BST2研究进展 被引量:1
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作者 王瑞红 史国利 +2 位作者 程浩 范炜 路浩 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第2期81-84,共4页
BST2是一种新发现的免疫应答因子,对囊膜病毒具有天然免疫作用。二聚体化的BST2一端固定于细胞的细胞膜上,另一端与病毒相结合,这种结构上的特点是其阻止病毒出细胞膜的关键。研究显示,病毒在与BST2的对峙中产生了抑制作用,例如Nef、Env... BST2是一种新发现的免疫应答因子,对囊膜病毒具有天然免疫作用。二聚体化的BST2一端固定于细胞的细胞膜上,另一端与病毒相结合,这种结构上的特点是其阻止病毒出细胞膜的关键。研究显示,病毒在与BST2的对峙中产生了抑制作用,例如Nef、Env、Vpu、nsP1和K5等蛋白都具有对BST2的拮抗功能。而近期也发现BST2还具有许多新的功能,尤其是协助人巨细胞病毒(HCMV)入侵细胞,更是引起了广泛关注。论文结合国际上最新的BST2研究进展,从结构特点、功能特点、拮抗机制和应用前景等方面进行了深入探讨。 展开更多
关键词 BST2 病毒 抑制
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胶质母细胞瘤骨髓基质细胞抗原2基因的表达及其与非CpG岛DNA甲基化和预后的关系
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作者 董冀晨 殷安安 +2 位作者 孙建亮 李剑 王凯 《肿瘤研究与临床》 CAS 2020年第7期462-466,共5页
目的探讨骨髓基质细胞抗原2(BST2)基因在胶质母细胞瘤(GBM)中的表达水平及其与DNA甲基化水平和患者预后的关系。方法共纳入3组GBM样本[美国癌症基因组图谱(TCGA)数据库(35例)、基因表达综合(GEO)数据库中GSE22891队列(50例)、中国脑胶... 目的探讨骨髓基质细胞抗原2(BST2)基因在胶质母细胞瘤(GBM)中的表达水平及其与DNA甲基化水平和患者预后的关系。方法共纳入3组GBM样本[美国癌症基因组图谱(TCGA)数据库(35例)、基因表达综合(GEO)数据库中GSE22891队列(50例)、中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库(105例)]及非肿瘤对照脑组织(NTB)(TCGA数据库10例、GSE22891队列6例、CGGA数据库5例用于基因表达水平比较,GSE63347队列25例、GSE22891队列4例以及CGGA数据库8例用于甲基化数据比较)。利用公共数据库中GBM基因表达芯片和DNA甲基化芯片数据,通过GBM与NTB间BST2基因表达水平比较、生存分析、生物信息学分析等,获得BST2基因在GBM中的表达状态以及其与非CpG岛DNA甲基化、GBM分子亚型[CpG岛甲基化表型(G-CIMP),非G-CIMP的前神经元型、神经元型、经典型和间质型]、患者总生存(OS)时间以及功能基因表达谱之间的关系。结果与NTB样本比较,BST2 mRNA在GBM中呈高表达状态(mRNA表达数据采用Z-score标准化)(TCGA数据库比GSE63347队列:-0.97±1.14比-2.32±0.21,t=3.74,P<0.05;GSE22891队列:9.03±1.28比7.18±0.22,t=3.42,P<0.05;CGGA数据库:-0.43±1.11比-0.62±0.35,t=2.09,P<0.05)。TCGA数据库中,BST2 mRNA在不同肿瘤分子亚型中均高表达(G-CIMP为-1.96±0.94,非G-CIMP的前神经元型为-1.74±0.88,神经元型为-0.83±0.98,经典型为-0.71±1.18,间质型为-0.55±1.01),与NTB样本(-2.32±0.21)比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);BST2 mRNA在神经元型、经典型及间质型肿瘤之间表达差异均无统计学意义(均P>0.05),但均高于G-CIMP和非G-CIMP的前神经元型(均P<0.05)。BST2非CpG岛DNA甲基化水平与其mRNA表达负相关(TCGA数据库:r=-0.30,P<0.05;GSE22891队列:r=-0.54,P<0.05;CGGA数据库:r=-0.29,P>0.05)。生存分析表明,非G-CIMP且非前神经元型患者的BST2 mRNA表达水平与OS呈负相关(HR=1.18,95%CI 1.00~1.39,P<0.05),而在G-CIMP及前神经元型的亚组中,BST2 mRNA表� 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 膜糖蛋白类 DNA甲基化 分子分型 骨髓基质细胞抗原2
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STAG2基因的特点及其在膀胱癌中的研究进展
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作者 王翰 钟建华 唐爱发 《医学综述》 2017年第3期470-473,共4页
骨髓基质细胞抗原2(STAG2)是一种最早在骨髓基质细胞中发现并广泛存在于正常细胞中的基因。到目前为止,STAG2基因在膀胱癌中的突变率约为11%,且STAG2基因表达缺失在低分期、低分级的膀胱癌中更为常见,是形成染色体非整倍体的主要原因。... 骨髓基质细胞抗原2(STAG2)是一种最早在骨髓基质细胞中发现并广泛存在于正常细胞中的基因。到目前为止,STAG2基因在膀胱癌中的突变率约为11%,且STAG2基因表达缺失在低分期、低分级的膀胱癌中更为常见,是形成染色体非整倍体的主要原因。另外,STAG2基因的表达缺失与膀胱癌预后不良也有密切关系。深入研究STAG2基因对了解膀胱癌的发生、发展有重要意义,可为临床上膀胱癌的诊断和治疗提供一种新途径。 展开更多
关键词 膀胱癌 骨髓基质细胞抗原2 非整倍体
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猪骨髓基质抗原2基因的克隆、表达及生物学活性研究
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作者 张廷虹 赵协 +2 位作者 曹广明 张振杰 常维山 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期548-553,共6页
研究目的是克隆猪骨髓基质抗原2(Bone marrow stromal antigen-2,BST-2)基因并进行真核表达,获得具有抗病毒活性的重组BST-2蛋白。研究通过RT-PCR从猪瘟弱毒疫苗和聚肌胞(Poly I:C)刺激的猪肾细胞(PK-15)中扩增出猪BST-2cDNA,克隆至真... 研究目的是克隆猪骨髓基质抗原2(Bone marrow stromal antigen-2,BST-2)基因并进行真核表达,获得具有抗病毒活性的重组BST-2蛋白。研究通过RT-PCR从猪瘟弱毒疫苗和聚肌胞(Poly I:C)刺激的猪肾细胞(PK-15)中扩增出猪BST-2cDNA,克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,构建重组表达质粒pcDNA-BST-2,转染HEK293T细胞,纯化BST-2蛋白并经Bradford法定量,Western blot检测,研究BST-2抗病毒生物学活性。酶切鉴定和核酸序列测定证实pcDNA-BST-2真核表达质粒构建成功,转染HEK293T细胞后,经间接免疫荧光能够检测到绿色荧光。生物学活性测定重组BST-2蛋白具有一定的抗水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)、H9禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)及猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,PRRSV)的活性。结果表明,重组BST-2具有一定抗病毒生物功能,为进一步研究重组BST-2蛋白的活性以及BST-2抗病毒药物研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪骨髓基质抗原2 真核表达 生物活性 抗病毒活性
原文传递
山羊BST-2基因的表达及其亚细胞定位
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作者 张莉 刘腾 +6 位作者 缪秋红 唐井玉 朱杰 董丹丹 陈宗艳 王桂军 刘光清 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期702-706,共5页
将山羊的BST-2基因(Capra hircus bone marrow stromal antigen 2 gene)分别克隆至原核表达载体p GEX-4T-1和真核表达载体p3×Flag-CMV-14中,获得了重组表达质粒p GEX-BST-2和p3×Flag-BST-2。将重组质粒p GEX-BST-2转化至E.col... 将山羊的BST-2基因(Capra hircus bone marrow stromal antigen 2 gene)分别克隆至原核表达载体p GEX-4T-1和真核表达载体p3×Flag-CMV-14中,获得了重组表达质粒p GEX-BST-2和p3×Flag-BST-2。将重组质粒p GEX-BST-2转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE及Western blot结果显示,诱导表达的重组蛋白分子量约为42 ku,与预期蛋白一致。利用脂质体介导转染法将重组质粒p3×Flag-BST-2转染Vero细胞,经激光共聚焦显微镜检测,结果显示,BST-2蛋白在细胞中可以良好表达,并主要定位于细胞膜上。 展开更多
关键词 BST-2基因 原核表达 真核表达 亚细胞定位 山羊
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