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淫羊藿苷通过上调Runx2促进踝关节骨折大鼠骨重建及抑制破骨细胞形成 被引量:2
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作者 郑国洪 孙斌 +1 位作者 王洁琼 杨正明 《广州中医药大学学报》 CAS 2023年第2期444-449,共6页
【目的】观察淫羊藿苷对踝关节骨折大鼠的治疗作用及机制。【方法】取55只SD大鼠,建立踝关节骨折模型。将成功造模的全部50只大鼠随机分为模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组及阳性药组,每组10只。淫羊藿苷低、中、高剂量组分别给予腹腔... 【目的】观察淫羊藿苷对踝关节骨折大鼠的治疗作用及机制。【方法】取55只SD大鼠,建立踝关节骨折模型。将成功造模的全部50只大鼠随机分为模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组及阳性药组,每组10只。淫羊藿苷低、中、高剂量组分别给予腹腔注射淫羊藿苷30、60、120 mg/kg,阳性药组给予腹腔注射复方骨肽注射液0.4 mL/kg,模型组给予腹腔注射等体积生理盐水,每日1次,连续给药4周。给药结束后,进行Micro-CT活体扫描及生物力学测试,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法检测骨痂组织破骨细胞数量,苏木素-伊红(HE)染色法观察骨痂组织病理学变化,采用Western Blot法检测骨痂组织Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达量。【结果】与模型组比较,淫羊藿苷低、中、高剂量组和阳性药组干预2、4周后骨小梁数量(Tb.N)、最大载荷、刚度、骨体积分数(BV/TV)值及骨痂组织Runx2蛋白表达量升高,骨痂组织破骨细胞数量减少(P<0.05),淫羊藿苷各剂量组作用效果呈剂量依赖性;但淫羊藿苷各剂量组干预2、4周后Tb.N、最大载荷、刚度、BV/TV值及骨痂组织Runx2蛋白表达量均低于同期阳性药组,骨痂组织破骨细胞数高于阳性药组(均P<0.05)。【结论】淫羊藿苷可促进踝关节骨折创伤大鼠骨重建,抑制破骨细胞形成,提高生物力学性能,其作用机制可能与上调Runx2蛋白表达有关;但其作用效果不及复方骨肽注射液。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 踝关节骨折 骨重建 复方骨肽注射液 runt相关转录因子2(runx2) 破骨细胞 大鼠
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骨质疏松性椎体压缩性骨折患者血清BMP-2,Runx2水平对术后骨折延迟愈合的预测价值
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作者 王金龙 冯大军 周全 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第6期836-842,共7页
目的探讨骨质疏松性椎体压缩性骨折(Osteoporotic vertebral compressibility fracture,OVCF)患者血清骨形态发生蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、核心结合因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)水平对术后骨... 目的探讨骨质疏松性椎体压缩性骨折(Osteoporotic vertebral compressibility fracture,OVCF)患者血清骨形态发生蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)、核心结合因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)水平对术后骨折延迟愈合的预测价值。方法选取2020年1月-2023年4月徐州医科大学附属淮安医院骨科收治的260例OVCF患者为研究对象,均采用经皮椎体成形术(Percutaneous vertebroplasty,PVP)或椎体后凸成形术(Percutanous kyphoplasty,PKP)治疗,根据术后3个月骨折愈合情况分延迟愈合组、正常愈合组。分析OVCF患者术后骨折延迟愈合的影响因素及血清BMP-2,Runx2水平对术后骨折延迟愈合的预测价值。绘制决策曲线和临床影响曲线,评价血清BMP-2,Runx2水平对术后骨折延迟愈合的价值。结果260例患者术后无失访,22例出现骨折延迟愈合,发生率为8.46%(22/260)。延迟愈合组年龄、吸烟比率、合并糖尿病比率、合并甲状腺疾病比率、有椎体裂隙征比率大于正常愈合组,骨密度T值、术前和术后3个月血清BMP-2,Runx2水平小于正常愈合组,差异有统计学意义(P<0.05)。合并糖尿病、有椎体裂隙征是OVCF患者术后骨折延迟愈合的独立危险因素,骨密度T值、BMP-2,Runx2是OVCF患者术后骨折延迟愈合的独立保护因素(P<0.05)。BMP-2,Runx2联合预测OVCF患者术后骨折延迟愈合对应AUC值为0.856。阈值在0.10~0.63范围内,BMP-2,Runx2联合评估模型评估OVCF患者术后骨折延迟愈合的净受益率优于单独检测。在阈值概率为0.26时,被该模型划分入高风险的人数与真阳性人数基本达成一致。结论OVCF患者血清BMP-2,Runx2水平降低,二者联合检测对术后骨折延迟愈合具有较高的预测效能。 展开更多
关键词 骨质疏松性椎体压缩性骨折 骨形态发生蛋白-2 核心结合因子2 术后骨折延迟愈合
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跑台运动对去卵巢大鼠骨组织中OPG、RANKL和RUNX2 mRNA表达的影响 被引量:6
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作者 王强 杨民 王剑 《中国骨伤》 CAS 2013年第11期940-943,共4页
目的:观察去卵巢大鼠经跑台运动后其骨组织中OPG、RANKL和RUNX2 mRNA表达变化,探讨力学刺激防治绝经后骨质疏松的作用机制。方法:健康3月龄雌性SD大鼠30只,体重(270±10)g,按随机方法平均分为假手术组、去卵巢组和跑台运动组,每组1... 目的:观察去卵巢大鼠经跑台运动后其骨组织中OPG、RANKL和RUNX2 mRNA表达变化,探讨力学刺激防治绝经后骨质疏松的作用机制。方法:健康3月龄雌性SD大鼠30只,体重(270±10)g,按随机方法平均分为假手术组、去卵巢组和跑台运动组,每组10只。假手术组仅在术中牵动卵巢并不行卵巢切除,其余两组均行卵巢切除术。假手术组和去卵巢组大鼠正常饲养;跑台运动组大鼠在术后1周开始在动物跑台上运动,跑速为18 m/min,每次45 min,1次/d,6 d/周,共训练11周。12周后处死所有动物,取左侧股骨头,脱钙后石腊切片,用倒置相差显微镜观察其组织学变化;取右股骨头提总RNA,实时PCR法检测OPG、RANKL和RUNX2的mRNA表达情况。结果:去卵巢组骨小梁稀疏,骨细胞少,跑台运动组骨小梁粗壮增厚。去卵巢组骨组织中OPG的mRNA表达为(0.131±0.080),RNAKL的mRNA表达为(8.013±3.550),RUNX2的mRNA表达为(3.245±5.090)。跑台运动组其骨组织中OPG的mRNA表达为(0.566±0.260),RANKL的mRNA表达为(5.232±3.670),RUNX2的mRNA表达为(2.753±3.680)。和去卵巢组比较,跑台运动组的OPG的mRNA表达升高,差异有统计学意义;而RANKL和RUNX2的表达下降,差异无统计学意义。结论:力学刺激能通过促进去卵巢大鼠骨组织中OPG的表达而发挥其抗绝经后骨质疏松的效果,这对今后研究绝经后骨质疏松症的治疗提供了新的思路。 展开更多
关键词 运动 骨保护素 核因子κB受体活化因子配基 核心转录因子 骨质疏松 绝经后
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miR-30a-5p通过靶向Runx2基因抑制成骨细胞分化 被引量:5
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作者 王如然 黄胜男 +8 位作者 曹戬 许华颖 李宏燕 黄浩然 赵杉 王玉红 冯艳华 徐国营 韩兵 《生物技术通讯》 CAS 2020年第2期142-147,共6页
目的:构建绝经后骨质疏松大鼠模型,分析miR-30a-5p在成骨细胞分化中的功能。方法:将SD大鼠分为雌激素组、假手术组和模型组;取胫骨组织进行miRNA测序并差异表达分析;检测miR-30a-5p在各组大鼠骨中的表达含量;通过qRT-PCR检测miR-30a-5p... 目的:构建绝经后骨质疏松大鼠模型,分析miR-30a-5p在成骨细胞分化中的功能。方法:将SD大鼠分为雌激素组、假手术组和模型组;取胫骨组织进行miRNA测序并差异表达分析;检测miR-30a-5p在各组大鼠骨中的表达含量;通过qRT-PCR检测miR-30a-5p表达对成骨分化标记相关蛋白胶原Ⅰ、骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)表达的影响,同时检测对碱性磷酸酶(ALP)活性的影响;双萤光素酶报告基因检测miR-30a-5p对RUNT相关转录因子2(Runx2)的靶向调控作用。结果:miRNA测序分析结果显示,相对于假手术组、雌激素组,模型组有33种共同miRNA表达上调,选取miR-30a-5p作为本研究对象;qRT-PCR进一步验证miR-30a-5p在模型组骨组织中高表达;miR-30a-5p靶向抑制Runx2的表达,且能够抑制OCN、OPN和胶原Ⅰ的表达,降低ALP活性;而同时过表达Runx2后,OCN、OPN和胶原Ⅰ的表达升高,ALP活性增加,Runx2过表达部分缓解miR-30a-5p对成骨细胞分化的抑制作用。结论:miR-30a-5p在骨质疏松大鼠骨组织中表达上调,并能够靶向抑制Runx2的表达,从而抑制成骨细胞分化,促进骨质疏松进展,为骨质疏松症的诊断提供新的生物标志物。 展开更多
关键词 miR-30a-5p runt相关转录因子2(runx2) 成骨分化 骨质疏松
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人参-三七-川芎提取物对高糖诱导小鼠血管老化后α-SMA和Runx2蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 胡艳红 方靖漪 +5 位作者 王雪 杨静 修成奎 王佳丽 刘奕清 雷燕 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期21-29,共9页
目的:为了研究人参-三七-川芎提取物(GNC)对高糖诱导小鼠血管老化后α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达的调控作用,阐明GNC延缓血管老化的保护作用机制。方法:C57BL/6小鼠,130只,雄性,随机分为正常组和高糖... 目的:为了研究人参-三七-川芎提取物(GNC)对高糖诱导小鼠血管老化后α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达的调控作用,阐明GNC延缓血管老化的保护作用机制。方法:C57BL/6小鼠,130只,雄性,随机分为正常组和高糖组。高糖组腹腔注射链脲佐菌素(STZ),造模成功后,喂食高脂饲料7个月,之后再次随机分为模型组,GNC低、高剂量组(0.819,1.638 g·kg^-1)及二甲双胍组(150 mg·kg^-1)。灌胃给药,每天1次,连续9周。取材前7 d,新购一批4周龄雄性C57BL/6小鼠正常喂养1周,为青年组。观察小鼠一般情况,实验结束后分别用苏木素-伊红(HE)染色结合透射电镜(TEM)观察小鼠颈总动脉形态学变化,马松(Masson)染色观察小鼠颈总动脉纤维化,免疫组化检测小鼠颈总动脉中基质金属蛋白酶-2(MMP-2),周期蛋白依赖激酶抑制因子2A(p16),周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21),α-SMA与Runx2蛋白表达。结果:HE,TEM,Masson 3个实验结果显示:与青年组比较,正常组小鼠颈总动脉中内外膜厚度、超微结构和血管壁中胶原和弹性纤维的相对含量几乎无变化;与正常组比较,模型组小鼠颈总动脉内膜不光滑,内皮细胞几乎完全脱落,胞质裂解,内弹性膜变薄、断裂、甚至脱离,可见增生的胶原纤维潜入中膜,中外膜增生明显且排列紊乱(P<0.01),血管平滑肌细胞变形、突起、分叉增多、甚至碎裂,并可见局灶性坏死,细胞内空泡和溶酶体等大量增多,并可见明显的自噬泡。血管壁中外膜胶原和弹性纤维的相对含量增加明显(P<0.01);与模型组比较,各给药组以上病理情况均有所改善(P<0.01)。免疫组化结果显示:与正常组比较,模型组小鼠颈总动脉MMP-2,p16,p21,Runx2高表达(P<0.01),α-SMA低表达(P<0.01);与模型组比较,各给药组各蛋白表达趋于正常(P<0.05,P<0.01)。结论:高糖能够诱导小鼠颈总动脉血管老化,改变α-SMA,Runx2蛋白表达。GNC可通 展开更多
关键词 血管老化 α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) runt相关转录因子-2(runx2) 高糖 人参-三七-川芎提取物 颈总动脉
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蚊母草提取物通过抑制Runx2活性抗乳腺癌破骨性骨转移作用 被引量:1
6
作者 刘盛玲 吕红 +5 位作者 田会茹 姜思琴 袁萍 傅蔚然 高书亮 付剑江 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期81-87,共7页
目的:研究蚊母草提取物(EVP)的抗乳腺癌破骨性骨转移作用。方法:采用左心室注射肿瘤细胞法建立裸鼠骨转移模型,通过巢式聚合酶链式反应(PCR)检测裸鼠骨髓组织中人细胞角蛋白-19(Ck-19)基因表达量确定肿瘤细胞的骨转移程度及EVP的抑制作... 目的:研究蚊母草提取物(EVP)的抗乳腺癌破骨性骨转移作用。方法:采用左心室注射肿瘤细胞法建立裸鼠骨转移模型,通过巢式聚合酶链式反应(PCR)检测裸鼠骨髓组织中人细胞角蛋白-19(Ck-19)基因表达量确定肿瘤细胞的骨转移程度及EVP的抑制作用;采用多核细胞计数法及组织蛋白酶K(Cathepsin K)分泌量检测法,确定小鼠破骨细胞前体骨髓巨噬细胞(BMMs)的活性,并观察EVP(40、80、160 g·L^(-1))的抑制作用;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)观察EVP对BMMs细胞内核转录因子-κB受体活化因子(RANK)、Runt相关转录因子2(Runx2)、磷酸化Runx2(p-Runx2)及其下游蛋白基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响;采用明胶酶谱法检测EVP对基质金属蛋白酶(MMPs)水解明胶活性的影响。结果:与空白组比较,裸鼠给予EVP 5.5、11、22 g·kg^(-1),其骨髓组织中人Ck-19水平明显降低(P<0.05),提示EVP具有抗骨转移作用;体外实验显示,与空白组比较,可溶性核转录因子-κB受体活化因子配基(sRANKL)可诱导BMMs分化为多核细胞(P<0.05),EVP(40、80、160 g·L^(-1))可显著抑制上述sRANKL诱导的多核细胞形成(P<0.01)。与空白组比较,sRANKL可显著增加BMMs的Cathepsin K分泌(P<0.01);与sRANKL组比较,EVP组Cathepsin K分泌量明显下调(P<0.05)。Western blot显示,与空白组比较,sRANKL可显著增加BMMs细胞RANK表达(P<0.01);与sRANKL组比较,EVP组(40、160 g·L^(-1))BMMs细胞表达RANK蛋白明显降低(P<0.05)。与空白组比较,sRANKL可明显增加BMMs细胞p-Runx2和MMP-9表达(P<0.05);与sRANKL组比较,EVP组(40、160 g·L^(-1))BMMs细胞表达的p-Runx2和MMP-9蛋白明显降低(P<0.05)。明胶酶谱显示,与空白组比较,sRANKL可明显增加pro-MMP-9、pro-MMP-2及64 kDa MMP-2水平(P<0.05);与sRANKL组比较,EVP组pro-MMP-9、64 kDa MMP-2水平明显降低(P<0.05),且160 g·L^(-1)EVP处理可明显降低pro-MMP-2水平(P<0.05)。结论:蚊母草提取物可抑制肿瘤细胞诱导的破骨性� 展开更多
关键词 蚊母草 破骨性骨转移 乳腺癌 runt相关转录因子2(runx2) 核转录因子-κB受体活化因子
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DMP1、Runx2在小鼠下颌第一磨牙萌出过程中的免疫学定位 被引量:2
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作者 华芳 葛久禹 《口腔医学》 CAS 2012年第12期709-711,共3页
目的研究小鼠下颌第一磨牙萌出过程中牙本质基质蛋白1(DMP1)和Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达,并探索其表达与牙萌出之间的关系。方法分离出生后1 d至14 d小鼠的下颌骨,连续切片,偶氮卡红苯胺蓝染色显示磨牙萌出过程骨胶原形成情况,切... 目的研究小鼠下颌第一磨牙萌出过程中牙本质基质蛋白1(DMP1)和Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达,并探索其表达与牙萌出之间的关系。方法分离出生后1 d至14 d小鼠的下颌骨,连续切片,偶氮卡红苯胺蓝染色显示磨牙萌出过程骨胶原形成情况,切片原位杂交法分析DMP1及RUNX2 mRNA在牙齿及周围组织的表达与分布,免疫组化法显示DMP1和RUNX2蛋白的表达与分布。结果冠方骨组织中骨胶原形成在P5 d出现高峰,以后呈逐渐减少的趋势;根方骨胶原形成在整个萌出过程中一直呈活跃状态,在P9 d出现高峰。DMP1表达越丰富,骨胶原形成越多,成骨活动越活跃。结论下颌第一磨牙萌出过程中,根方成骨活动一直很活跃,DMP1的表达与根方成骨活动参与了小鼠第一磨牙的萌出过程。 展开更多
关键词 牙萌出 牙本质基质蛋白1 runt相关转录因子2 B C小鼠
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低氧条件下RUNX2对小鼠乳腺癌4T1细胞凋亡的影响 被引量:2
8
作者 林妘 徐双 钱程 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期373-379,共7页
目的:探讨Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)在低氧环境下对小鼠乳腺癌4T1细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:Real-time PCR和Western blotting分别检测低氧条件对4T1细胞内RUNX1、RUNX2、RUNX3 mRNA和RUNX... 目的:探讨Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)在低氧环境下对小鼠乳腺癌4T1细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:Real-time PCR和Western blotting分别检测低氧条件对4T1细胞内RUNX1、RUNX2、RUNX3 mRNA和RUNX2蛋白表达的影响;采用小干扰RNA技术与真核重组质粒DNA过表达技术降低或者提高4T1细胞RUNX2的表达,免疫共沉淀法检测4T1细胞中RUNX2与其他蛋白之间的相互结合情况,流式细胞术检测常氧/低氧条件下干扰/过表达RUNX2对4T1细胞凋亡的影响。结果:低氧条件下4T1细胞中RUNX1和RUNX2 mRNA的表达水平上调(P<0.05),RUNX2的蛋白表达量明显增加;转染RUNX2-siRNA-1415和真核表达载体pc DNA3.1(-)-RUNX2可使4T1细胞内RUNX2水平明显降低或升高;在常氧或低氧条件下,沉默RUNX2 mRNA的表达均导致小鼠乳腺癌4T1细胞凋亡率上升[常氧:(12.83±0.24)%vs(9.3±0.55)%,P<0.05;低氧:(19.77±0.59)%vs(15.13±0.32)%,P<0.05],而过表达RUNX2均导致4T1细胞凋亡率下降[常氧:(9.97±0.27)%vs(14.07±0.80)%,P<0.05;低氧:(22.43±1.02)%vs(34.93±0.71)%,P<0.05]。在低氧条件下,缺氧诱导因子-1α(hypoxia induced factor-1α,HIF-1α)与RUNX2的表达上升,RUNX2能与HIF-1α形成复合物。结论:在肿瘤低氧微环境中,RUNX2高表达于小鼠乳腺癌4T1细胞中,高表达的RUNX2可能是通过与HIF-1α的相互作用而抑制肿瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 runt相关转录因子2 RNA干扰 低氧环境 细胞凋亡
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miRNA-130b-3p促进血管钙化的机制研究
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作者 苏佳敏 赵虔 陈元利 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2022年第9期1264-1270,共7页
为了确定miRNA-130b-3p在血管钙化中的作用,文章通过使用维生素D_(3)(VD_(3))诱导野生型(WT)雄鼠中膜钙化,收集小鼠全主动脉和肾脏分析钙化进程、miRNA-130b-3p以及成骨转录因子的表达,并在体外向人主动脉平滑肌细胞(human aortic smoot... 为了确定miRNA-130b-3p在血管钙化中的作用,文章通过使用维生素D_(3)(VD_(3))诱导野生型(WT)雄鼠中膜钙化,收集小鼠全主动脉和肾脏分析钙化进程、miRNA-130b-3p以及成骨转录因子的表达,并在体外向人主动脉平滑肌细胞(human aortic smooth muscle cells,HASMCs)转染miRNA-130b-3p mimic和antagomir,使用高磷酸盐(3.0 mmol/L)诱导钙化,通过Western Blot、实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、免疫荧光来确定相关基因表达变化。从WT小鼠分离主动脉并剪成5 mm小段,转染miRNA-130b-3p分析钙化水平,通过流式细胞荧光分选技术(fluorescence activated cell sorting,FACS)分析钙化时HASMCs凋亡。结果发现,miRNA-130b-3p在钙化时表达显著上升并且miRNA-130b-3p的表达与钙化进程显著相关,当过表达时miRNA-130b-3p促进钙化,相反的抑制miRNA-130b-3p则可以抑制钙化,进一步发现miRNA-130b-3p通过介导重组人骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP2)通路和Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达来影响钙化,并且通过促进细胞凋亡来进一步影响钙化。结果表明miRNA-130b-3p作为钙化上游信号促进血管钙化。 展开更多
关键词 miRNA-130b-3p 钙化 人主动脉平滑肌细胞(HASMCs) runt相关转录因子2(runx2) 凋亡
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Prohibitins, novel vitamin K2 target factors in osteoblast
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作者 Tatsuya Uebi Makoto Umeda +3 位作者 Naoya Maekawa Satoshi Karasawa Hiroshi Handa Takeshi Imai 《Journal of Biosciences and Medicines》 2013年第3期1-4,共4页
Vitamin K2 (VK2, menaquinone) is a drug for osteoporosis. VK2 acts as a cofactor for γ-glutamyl carboxylase, which catalyzes the carboxylation of specific glutamic acid residues (γ-carboxylation) of substrate protei... Vitamin K2 (VK2, menaquinone) is a drug for osteoporosis. VK2 acts as a cofactor for γ-glutamyl carboxylase, which catalyzes the carboxylation of specific glutamic acid residues (γ-carboxylation) of substrate proteins. Here we demonstrate that VK2 also regulate osteoblastgenic marker gene expression. Using VK2-immobilzed nanobeads new target proteins were purified and identified from osteoblastic cell line. They are prohibitin 1 and 2 (PHB1 & 2), respectively. To confirm the PHBs function on VK2-dependent transcription, PHB1 & 2 were knock-down and osteocalcin gene 2 transcriptions were analyzed, indicating that PHBs regulate VK2-dependent transcription. Taken together PHBs are VK2 target proteins for osteoblastgenic transcription. 展开更多
关键词 VITAMIN K2 PROHIBITIN OSTEOBLAST runt-related transcription factor 2 (runx2)
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碱性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响 被引量:1
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作者 张胜雷 徐金升 +4 位作者 杨硕 白亚玲 张俊霞 崔立文 俞啟遥 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期398-402,共5页
目的:探讨碱性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及可能机制。方法:将21只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭组(甲基纤维素灌胃)、钙化组(甲基纤维素加骨化三醇灌胃)、碱干预组(甲基纤维素及骨化三醇灌胃... 目的:探讨碱性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及可能机制。方法:将21只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭组(甲基纤维素灌胃)、钙化组(甲基纤维素加骨化三醇灌胃)、碱干预组(甲基纤维素及骨化三醇灌胃及5%碳酸氢钠腹腔注射)。采用von Kossa染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测大鼠胸主动脉钙化情况;免疫组织化学方法检测胸主动脉Runx2表达。体外采用组织块贴壁法培养原代大鼠胸主动脉平滑肌细胞,利用10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠制备血管平滑肌细胞钙化模型。使用HCl和NaHCO3调节培养基pH值。细胞随机分为3组:正常对照组(pH 7.4)、钙化组(10mmol/Lβ-甘油磷酸钠+pH7.4)、碱干预组(10mmol/Lβ-甘油磷酸钠+pH 7.7),共培养12d。采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况,RT-PCR和Western Blot法检测Runt相关转录因子-2(runt-related transcription factor 2,Runx2)的表达。结果:体内实验中,成功制备了慢性肾衰竭血管钙化的大鼠模型,与钙化组相比,给予碳酸氢钠干预后,大鼠血管钙盐沉积均明显增加(P<0.05);免疫组织化学结果显示碱性环境可明显升高Runx2表达(P<0.05)。体外实验中,与正常对照组相比,钙化组钙盐沉积明显增加(P<0.05);与钙化组相比,碱干预组钙盐沉积明显增加(P<0.05)。RT-PCR和Western Blot显示,与正常对照组相比,钙化组Runx2表达明显增加(P<0.05);与钙化组相比,碱干预组Runx2表达明显增加(P<0.05)。结论:碱性环境可能通过促进类骨表型转化进而促进慢性肾衰竭大鼠血管钙化。 展开更多
关键词 碱性环境 慢性肾衰竭 血管平滑肌细胞 钙化 runt相关转录因子-2
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新生儿颅骨锁骨发育不全一例的RUNX2基因突变检测并文献复习 被引量:1
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作者 李蕊 康文清 +1 位作者 金娟 郭静 《中国临床新医学》 2019年第3期302-304,共3页
目的报告颅骨锁骨发育不全(CCD)患儿1例的RUNX2基因突变检测情况。方法患儿临床查体后进行临床及影像学检查,明确诊断为CCD。提取患者全血基因组DNA送第三方检测机构(金域医学检验中心),通过高通量基因测序检测患儿RUNX2基因型。结果患... 目的报告颅骨锁骨发育不全(CCD)患儿1例的RUNX2基因突变检测情况。方法患儿临床查体后进行临床及影像学检查,明确诊断为CCD。提取患者全血基因组DNA送第三方检测机构(金域医学检验中心),通过高通量基因测序检测患儿RUNX2基因型。结果患者RUNX2基因型为c.201dupG p.(Gln68fs)。结论成功发现了RUNX2基因的致病突变,补充了国内外CCD致病基因的突变位点数据库。 展开更多
关键词 颅骨锁骨发育不全 runx2 突变
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低强度脉冲超声促进MC3T3-E1成骨分化的机制研究
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作者 易雪婷 张俊 《生物医学工程与临床》 CAS 2021年第6期663-668,共6页
目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)促进成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的机制研究。方法采用LIPUS辐照小鼠MC3T3-E1成骨细胞系(30 mW/cm^(2)、1.5 MHz、25 min/d)。在光学显微镜下观察24 h后成骨细胞形态,通过镁离子探针Mag-Fluo-4 AM染色,实时... 目的探讨低强度脉冲超声(LIPUS)促进成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的机制研究。方法采用LIPUS辐照小鼠MC3T3-E1成骨细胞系(30 mW/cm^(2)、1.5 MHz、25 min/d)。在光学显微镜下观察24 h后成骨细胞形态,通过镁离子探针Mag-Fluo-4 AM染色,实时观察LIPUS干预对成骨细胞镁离子内流的影响。通过碱性磷酸酶(ALP)染色及茜素红染色检测LIPUS对成骨细胞矿化能力的影响。通过实时定量-聚合酶链式反应(PCR)检测LIPUS对ALP和RUNT相关转录因子2(RUNX2)相对表达量的影响。结果经过LIPUS辐照25 min/d后,小鼠成骨细胞胞浆饱满,细胞间彼此连接增多,细胞密度相比对照组提高。相比对照组,LIPUS处理后小鼠成骨细胞中镁离子探针阳性细胞面积增加[(16.81±3.70)%vs(4.94±1.85)%],差异具有显著统计学意义(P<0.01)。相比只使用成骨诱导液的对照组,连续LIPUS刺激的实验组显著增加了ALP阳性细胞面积[(51.80±3.60)%vs(11.38±2.33)%],差异具有显著统计学意义(P<0.01)。此外,与对照组相比,LIPUS刺激显著增加了矿化结节阳性的细胞面积[(39.24±7.57)%vs(1.54±0.41)%],差异具有显著统计学意义(P<0.01)。表明LIPUS干预可以显著增强成骨细胞ALP表达及矿化能力。实时定量-PCR结果显示,LIPUS刺激后,成骨细胞ALP表达增加(2.79±0.48)倍,相比阴性对照组显著增加(P<0.01);LIPUS组RUNX2表达增加(18.22±1.35)倍,相比阴性对照组显著增加(P<0.01)。结论LIPUS促进镁离子内流,上调成骨相关标志物ALP、RUNX2表达量,从而促进成骨细胞矿化及钙沉积。 展开更多
关键词 低强度脉冲超声(LIPUS) 镁离子(Mg^(2+)) runt相关转录因子2(runx2) 碱性磷酸酶(ALP)
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Runx2在白藜芦醇诱导的小鼠BMSCs中的表达及生物信息学分析
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作者 黄燕 霍静 +3 位作者 裴晋红 栗学清 汪军梅 宋丽华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1006-1012,共7页
为探讨成骨分化的主要调节因子Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)在白藜芦醇(resveratrol,RSVL)诱导小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)向成骨细胞分化中的作用,以及以Runx2... 为探讨成骨分化的主要调节因子Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)在白藜芦醇(resveratrol,RSVL)诱导小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)向成骨细胞分化中的作用,以及以Runx2为研究起点,通过生物信息学分析方法以表明白藜芦醇诱导BMSCs向成骨分化的可能机制。本研究用不同浓度的RSVL(10-9mol/L-10-7mol/L)作用小鼠骨髓间充质干细胞8 d。实时逆转录-聚合酶链反应及Western印记法检测Runx2的mRNA和蛋白质表达水平。生物信息学方法分析及预测鼠Runx2蛋白的性质及特征。结果表明,与对照组相比,10-9mol/L、10-8mol/L、10-7mol/L白藜芦醇诱导Runx2的mRNA表达水平分别增加6%(P> 0. 05)、30%(P<0. 01)、49%(P<0. 01);与对照组相比,10-9mol/L、10-8mol/L、10-7mol/L白藜芦醇诱导Runx2蛋白表达水平分别增加12%(P> 0. 05)、72%(P <0. 01)、94%(P <0. 01)。由此可见,白藜芦醇可显著上调BMSCs中Runx2的mRNA和蛋白质表达水平(P<0. 01),且10-7mol/L的白藜芦醇诱导作用最强。生物信息学预测得知,Runx2属于碱性不稳定蛋白质;二级结构中无规卷曲占主导;存在102个潜在的磷酸化位点、97个潜在O-糖基化位点和8个N-糖基化位点;Runx2具有利于蛋白质间相互作用的结构特点;P1启动子区潜在的转录因子结合位点共28处。疏松的结构特征、丰富的修饰位点及多种转录因子结合位点为探讨白藜芦醇诱导BMSCs的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 runt相关转录因子2 白藜芦醇 骨髓间充质干细胞 成骨分化
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骨肉瘤中RUNX2基因拷贝数扩增及其蛋白过表达的研究 被引量:2
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作者 赵林如 郑红 +5 位作者 杨吉龙 田蔚 潘毅 王国文 廖智超 陈可欣 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期398-402,共5页
目的:通过微阵列-比较基因组杂交(aCGH)和免疫组织化学技术(IHC),检测RUNX2基因在骨肉瘤组织中的拷贝数变化及蛋白表达情况,探讨RUNX2基因在骨肉瘤的发生、发展和预后中的作用。方法:应用aCGH检测10例新鲜骨肉瘤组织样本RUNX2的基因拷... 目的:通过微阵列-比较基因组杂交(aCGH)和免疫组织化学技术(IHC),检测RUNX2基因在骨肉瘤组织中的拷贝数变化及蛋白表达情况,探讨RUNX2基因在骨肉瘤的发生、发展和预后中的作用。方法:应用aCGH检测10例新鲜骨肉瘤组织样本RUNX2的基因拷贝数变化;同时,运用免疫组织化学技术检测59例福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)骨肉瘤组织中RUNX2蛋白表达水平。结果:10例骨肉瘤样本中发现3例(30%)RUNX2基因扩增;RUNX2蛋白在59例骨肉瘤组织中的阳性表达率为50.8%(30/59)。RUNX2蛋白的表达水平与患者的临床病理特征和生存率无相关性,差异无统计学意义(P>0.05)。Kaplan-Meire单因素生存分析显示pTNM分期、病理诊断、复发、转移和综合治疗对患者的无病生存率有显著影响,性别、pTNM分期、新辅助化疗和疾病转移对患者的总生存率有显著影响,均有统计学意义(P<0.05),但Cox模型多因素生存分析显示这些因素均不能作为生存率独立的预测因素。结论:RUNX2基因扩增、蛋白过表达以及蛋白的表达与骨肉瘤患者的临床特征和预后无相关性提示RUNX2基因扩增及其蛋白的过度表达可能是骨肉瘤发病的早期事件。 展开更多
关键词 骨肉瘤 runx2 微阵列比较基因组杂交 基因扩增
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Runx3对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及侵袭的影响 被引量:3
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作者 刘俊斌 吴卫红 靳君华 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第3期383-386,共4页
目的探讨siRNA干扰Runx3对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法以人肝癌Hep G2细胞为研究对象,构建Runx3-siRNA,转染入细胞。将细胞分为对照组、脂质体组、NC-siRNA组和Runx3-siRNA组。用RT-PCR法检测Runx3 mRNA表达,用We... 目的探讨siRNA干扰Runx3对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法以人肝癌Hep G2细胞为研究对象,构建Runx3-siRNA,转染入细胞。将细胞分为对照组、脂质体组、NC-siRNA组和Runx3-siRNA组。用RT-PCR法检测Runx3 mRNA表达,用Western blot检测Runx3蛋白表达。用MTT法、流式细胞法和Transwell小室法观察Runx3对Hep G2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。结果 Runx3-siRNA可抑制Hep G2细胞的增殖(P<0.05);Runx3-siRNA可促进Hep G2细胞凋亡(P<0.05);Runx3-siRNA可抑制Hep G2细胞的侵袭(P<0.05)。结论Runx3基因在肝癌的发生发展中发挥一定的促进作用,有可能成为肝癌治疗的新靶点。 展开更多
关键词 runt相关转录因子3 HEPG2细胞 增殖 凋亡 侵袭
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补肾、健脾、活血中药复方对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达影响的比较研究 被引量:6
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作者 王剑 郑洪新 +2 位作者 张锦萍 刘研 刘瑞辉 《成都中医药大学学报》 2011年第4期54-58,共5页
目的:观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制及补肾中药复方的疗效机理,并与健脾、活血中药复方比较。方法:肌注地塞米松复制GIOP大鼠模型,实验设正常组、模型空白组、补肾中药复方组、... 目的:观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制及补肾中药复方的疗效机理,并与健脾、活血中药复方比较。方法:肌注地塞米松复制GIOP大鼠模型,实验设正常组、模型空白组、补肾中药复方组、健脾中药复方组、活血中药复方组、骨疏康颗粒阳性对照组。造模及灌胃给药9周。应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,实时定量RT-PCR及Western Blot检测肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达。结果:(1)股骨骨密度:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾中药复方组明显升高(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组明显升高(P<0.05),健脾中药复方组和活血中药复方组虽有升高趋势,但无统计学意义(P>0.05)。(2)肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显升高(P<0.01);与模型空白组比较,补肾中药复方组明显下调(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组明显下调(P<0.05),健脾中药复方组和活血中药复方组虽有所降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论:肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达升高可能是GIOP的发病机制之一;补肾中药复方可能通过下调肾组织Runx2mRNA及蛋白表达,有效防治GIOP,其作用优于健脾、活血中药复方。 展开更多
关键词 糖皮质激素性骨质疏松症 补肾中药复方 健脾中药复方 活血中药复方 runt相关转录因子2(核心结合因子α1)
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转化生长因子β1对大鼠髓核细胞凋亡影响的实验研究
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作者 刘汝银 岳宗进 +2 位作者 彭晓艳 王新立 冯仲锴 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期156-161,共6页
目的 :探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对大鼠髓核细胞凋亡的影响以及其作用机制。方法:采用序贯酶消化法分离培养SD大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs),实验用第3代培养的NPCs,分为6组:A组,空白... 目的 :探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对大鼠髓核细胞凋亡的影响以及其作用机制。方法:采用序贯酶消化法分离培养SD大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs),实验用第3代培养的NPCs,分为6组:A组,空白对照组,用DMEM培养基常规培养,不加任何处理;B组,用含有终浓度为20ng/ml肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的DMEM培养基培养;C组,用含有终浓度为50ng/ml TNF-α的DMEM培养基培养;D组,用含有终浓度为100ng/ml TNF-α的DMEM培养基培养;E组,用同时含有终浓度为100ng/ml TNF-α和10ng/ml TGF-β1的DMEM培养基培养;F组,在E组培养基的基础上加TGF-β1/smad通路抑制剂SB431542(设置终浓度为10μmol/L)进行培养。培养12h后,Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞增殖活性,逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RTPCR)检测各组细胞中基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinases 3,MMP3)、凋亡相关蛋白(bcl-2-associated x protein,Bax)、蛋白聚糖(ACAN)、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)m RNA相对表达量,Western blot检测各组细胞中MMP3、Bax、ACAN、CollagenⅡ、磷酸化的smad3蛋白(phosphorylate drosophila mothers against decapentaplegic protein 3,p-smad3)和Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)蛋白表达量。结果 :与A组相比,不同剂量的TNF-α(B^D组)均能够促进MMP3(B^D组依次为0.652+0.015、0.899+0.018、1.026+0.023)和Bax(B^D组依次为0.725+0.058、0.928+0.018和1.138+0.019)的表达,诱导髓核细胞的凋亡,并且呈现剂量依赖性关系。与D组相比,E组MMP3(0.568+0.015)和Bax(0.626+0.024)表达下调,ACAN(1.056+0.014)、CollagenⅡ(1.098+0.032)、p-smad3和Runx2表达量增高,差异有统计意义(P<0.05)。与E组相比,F组MMP3(1.015+0.015)和Bax(1.126+0.024)表达上调,ACAN(0.314+0.023)、CollagenⅡ(0.299+0.0.19)、p-smad3和Runx2表达量下降,差异有统计意义(P<0.05)。结论 :TGF-β1可能是通过激活smad/Runx2通� 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 信号转导蛋白smad/runt相关转录因子 肿瘤坏死因子Α 髓核细胞 凋亡 大鼠
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