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LncRNA TMPO-AS1调节miR-340-5p/RUNX1轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
1
作者 许汉兵 韩建涛 张成鹏 《河北医药》 CAS 2024年第2期165-170,共6页
目的探讨长链非编码RNA TMPO反义RNA1(LncRNA TMPO-AS1)调控miR-340-5p/RUNT相关转录因子1(RUNX1)轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法qRT-PCR检测人正常结肠上皮细胞HCoEpiC、人CRC细胞SW480、HCT116、LOVO、HT-29中TMP... 目的探讨长链非编码RNA TMPO反义RNA1(LncRNA TMPO-AS1)调控miR-340-5p/RUNT相关转录因子1(RUNX1)轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法qRT-PCR检测人正常结肠上皮细胞HCoEpiC、人CRC细胞SW480、HCT116、LOVO、HT-29中TMPO-AS1、miR-340-5p、RUNX1表达;将HCT116细胞随机分为:si-ctrl组、si-TMPO-AS1组、mimics NC组、miR-340-5p组、si-TMPO-AS1+anti-miR-ctrl组、si-TMPO-AS1+anti-miR-340-5p组;qRT-PCR检测6组HCT116细胞TMPO-AS1、miR-340-5p、RUNX1水平;CCK-8法检测HCT116细胞活力;EDU法检测HCT116细胞增殖;Transwell检测HCT116细胞迁移和侵袭;western blot检测HCT116细胞RUNX1、PCNA、MMP-2表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证TMPO-AS1和miR-340-5p、miR-340-5p和RUNX1的关系。结果与HCoEpiC细胞比较,不同CRC细胞中TMPO-AS1、RUNX1表达显著性升高,miR-424-5p表达显著性降低(P<0.05),且HCT116细胞变化结果更显著,后续实验选择HCT116细胞。与si-ctrl组比较,si-TMPO-AS1组HCT116细胞TMPO-AS1、RUNX1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、RUNX1、PCNA、MMP-2蛋白水平均显著性降低,miR-340-5p mRNA水平显著性升高(P<0.05);与mimics NC组比较,miR-340-5p组HCT116细胞RUNX1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、RUNX1、PCNA、MMP-2蛋白水平均显著性降低,miR-340-5p mRNA水平显著性升高(P<0.05);与si-TMPO-AS1+anti-miR-ctrl组比较,si-TMPO-AS1+anti-miR-340-5p组HCT116细胞RUNX1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、RUNX1、PCNA、MMP-2蛋白水平均显著性升高,miR-340-5p mRNA水平显著性降低(P<0.05);TMPO-AS1靶向负调控miR-340-5p表达,miR-340-5p靶向负调控RUNX1表达。结论沉默TMPO-AS1靶向上调miR-340-5p表达,从而下调RUNX1表达,抑制HCT116细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 LncRNA TMPO-AS1 miR-340-5p runx1 结直肠癌细胞
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miR-30a-5p通过靶向Runx2基因抑制成骨细胞分化 被引量：5
2
作者 王如然 黄胜男 +8 位作者 曹戬 许华颖 李宏燕 黄浩然 赵杉 王玉红 冯艳华 徐国营 韩兵 《生物技术通讯》 CAS 2020年第2期142-147,共6页
目的:构建绝经后骨质疏松大鼠模型,分析miR-30a-5p在成骨细胞分化中的功能。方法:将SD大鼠分为雌激素组、假手术组和模型组;取胫骨组织进行miRNA测序并差异表达分析;检测miR-30a-5p在各组大鼠骨中的表达含量;通过qRT-PCR检测miR-30a-5p... 目的:构建绝经后骨质疏松大鼠模型,分析miR-30a-5p在成骨细胞分化中的功能。方法:将SD大鼠分为雌激素组、假手术组和模型组;取胫骨组织进行miRNA测序并差异表达分析;检测miR-30a-5p在各组大鼠骨中的表达含量;通过qRT-PCR检测miR-30a-5p表达对成骨分化标记相关蛋白胶原Ⅰ、骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)表达的影响,同时检测对碱性磷酸酶(ALP)活性的影响;双萤光素酶报告基因检测miR-30a-5p对RUNT相关转录因子2(Runx2)的靶向调控作用。结果:miRNA测序分析结果显示,相对于假手术组、雌激素组,模型组有33种共同miRNA表达上调,选取miR-30a-5p作为本研究对象;qRT-PCR进一步验证miR-30a-5p在模型组骨组织中高表达;miR-30a-5p靶向抑制Runx2的表达,且能够抑制OCN、OPN和胶原Ⅰ的表达,降低ALP活性;而同时过表达Runx2后,OCN、OPN和胶原Ⅰ的表达升高,ALP活性增加,Runx2过表达部分缓解miR-30a-5p对成骨细胞分化的抑制作用。结论:miR-30a-5p在骨质疏松大鼠骨组织中表达上调,并能够靶向抑制Runx2的表达,从而抑制成骨细胞分化,促进骨质疏松进展,为骨质疏松症的诊断提供新的生物标志物。 展开更多
关键词 miR-30a-5p runt相关转录因子2(runx2) 成骨分化 骨质疏松
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Runx3对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及侵袭的影响 被引量：3
3
作者 刘俊斌 吴卫红 靳君华 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第3期383-386,共4页
目的探讨siRNA干扰Runx3对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法以人肝癌Hep G2细胞为研究对象,构建Runx3-siRNA,转染入细胞。将细胞分为对照组、脂质体组、NC-siRNA组和Runx3-siRNA组。用RT-PCR法检测Runx3 mRNA表达,用We... 目的探讨siRNA干扰Runx3对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法以人肝癌Hep G2细胞为研究对象,构建Runx3-siRNA,转染入细胞。将细胞分为对照组、脂质体组、NC-siRNA组和Runx3-siRNA组。用RT-PCR法检测Runx3 mRNA表达,用Western blot检测Runx3蛋白表达。用MTT法、流式细胞法和Transwell小室法观察Runx3对Hep G2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。结果 Runx3-siRNA可抑制Hep G2细胞的增殖(P<0.05);Runx3-siRNA可促进Hep G2细胞凋亡(P<0.05);Runx3-siRNA可抑制Hep G2细胞的侵袭(P<0.05)。结论Runx3基因在肝癌的发生发展中发挥一定的促进作用,有可能成为肝癌治疗的新靶点。 展开更多
关键词 runt相关转录因子3 HEPG2细胞 增殖 凋亡 侵袭
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骨肉瘤中RUNX2基因拷贝数扩增及其蛋白过表达的研究 被引量：2
4
作者 赵林如 郑红 +5 位作者 杨吉龙 田蔚 潘毅 王国文 廖智超 陈可欣 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期398-402,共5页
目的:通过微阵列-比较基因组杂交(aCGH)和免疫组织化学技术(IHC),检测RUNX2基因在骨肉瘤组织中的拷贝数变化及蛋白表达情况,探讨RUNX2基因在骨肉瘤的发生、发展和预后中的作用。方法:应用aCGH检测10例新鲜骨肉瘤组织样本RUNX2的基因拷... 目的:通过微阵列-比较基因组杂交(aCGH)和免疫组织化学技术(IHC),检测RUNX2基因在骨肉瘤组织中的拷贝数变化及蛋白表达情况,探讨RUNX2基因在骨肉瘤的发生、发展和预后中的作用。方法:应用aCGH检测10例新鲜骨肉瘤组织样本RUNX2的基因拷贝数变化;同时,运用免疫组织化学技术检测59例福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)骨肉瘤组织中RUNX2蛋白表达水平。结果:10例骨肉瘤样本中发现3例(30%)RUNX2基因扩增;RUNX2蛋白在59例骨肉瘤组织中的阳性表达率为50.8%(30/59)。RUNX2蛋白的表达水平与患者的临床病理特征和生存率无相关性,差异无统计学意义(P>0.05)。Kaplan-Meire单因素生存分析显示pTNM分期、病理诊断、复发、转移和综合治疗对患者的无病生存率有显著影响,性别、pTNM分期、新辅助化疗和疾病转移对患者的总生存率有显著影响,均有统计学意义(P<0.05),但Cox模型多因素生存分析显示这些因素均不能作为生存率独立的预测因素。结论:RUNX2基因扩增、蛋白过表达以及蛋白的表达与骨肉瘤患者的临床特征和预后无相关性提示RUNX2基因扩增及其蛋白的过度表达可能是骨肉瘤发病的早期事件。 展开更多
关键词 骨肉瘤 runx2 微阵列比较基因组杂交 基因扩增
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miRNA-130b-3p促进血管钙化的机制研究
5
作者 苏佳敏 赵虔 陈元利 《合肥工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2022年第9期1264-1270,共7页
为了确定miRNA-130b-3p在血管钙化中的作用,文章通过使用维生素D_(3)(VD_(3))诱导野生型(WT)雄鼠中膜钙化,收集小鼠全主动脉和肾脏分析钙化进程、miRNA-130b-3p以及成骨转录因子的表达,并在体外向人主动脉平滑肌细胞(human aortic smoot... 为了确定miRNA-130b-3p在血管钙化中的作用,文章通过使用维生素D_(3)(VD_(3))诱导野生型(WT)雄鼠中膜钙化,收集小鼠全主动脉和肾脏分析钙化进程、miRNA-130b-3p以及成骨转录因子的表达,并在体外向人主动脉平滑肌细胞(human aortic smooth muscle cells,HASMCs)转染miRNA-130b-3p mimic和antagomir,使用高磷酸盐(3.0 mmol/L)诱导钙化,通过Western Blot、实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、免疫荧光来确定相关基因表达变化。从WT小鼠分离主动脉并剪成5 mm小段,转染miRNA-130b-3p分析钙化水平,通过流式细胞荧光分选技术(fluorescence activated cell sorting,FACS)分析钙化时HASMCs凋亡。结果发现,miRNA-130b-3p在钙化时表达显著上升并且miRNA-130b-3p的表达与钙化进程显著相关,当过表达时miRNA-130b-3p促进钙化,相反的抑制miRNA-130b-3p则可以抑制钙化,进一步发现miRNA-130b-3p通过介导重组人骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP2)通路和Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达来影响钙化,并且通过促进细胞凋亡来进一步影响钙化。结果表明miRNA-130b-3p作为钙化上游信号促进血管钙化。 展开更多
关键词 miRNA-130b-3p 钙化 人主动脉平滑肌细胞(HASMCs) runt相关转录因子2(runx2) 凋亡
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碱性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响 被引量：1
6
作者 张胜雷 徐金升 +4 位作者 杨硕 白亚玲 张俊霞 崔立文 俞啟遥 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期398-402,共5页
目的:探讨碱性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及可能机制。方法:将21只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭组(甲基纤维素灌胃)、钙化组(甲基纤维素加骨化三醇灌胃)、碱干预组(甲基纤维素及骨化三醇灌胃... 目的:探讨碱性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及可能机制。方法:将21只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组(甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭组(甲基纤维素灌胃)、钙化组(甲基纤维素加骨化三醇灌胃)、碱干预组(甲基纤维素及骨化三醇灌胃及5%碳酸氢钠腹腔注射)。采用von Kossa染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测大鼠胸主动脉钙化情况;免疫组织化学方法检测胸主动脉Runx2表达。体外采用组织块贴壁法培养原代大鼠胸主动脉平滑肌细胞,利用10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠制备血管平滑肌细胞钙化模型。使用HCl和NaHCO3调节培养基pH值。细胞随机分为3组:正常对照组(pH 7.4)、钙化组(10mmol/Lβ-甘油磷酸钠+pH7.4)、碱干预组(10mmol/Lβ-甘油磷酸钠+pH 7.7),共培养12d。采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况,RT-PCR和Western Blot法检测Runt相关转录因子-2(runt-related transcription factor 2,Runx2)的表达。结果:体内实验中,成功制备了慢性肾衰竭血管钙化的大鼠模型,与钙化组相比,给予碳酸氢钠干预后,大鼠血管钙盐沉积均明显增加(P<0.05);免疫组织化学结果显示碱性环境可明显升高Runx2表达(P<0.05)。体外实验中,与正常对照组相比,钙化组钙盐沉积明显增加(P<0.05);与钙化组相比,碱干预组钙盐沉积明显增加(P<0.05)。RT-PCR和Western Blot显示,与正常对照组相比,钙化组Runx2表达明显增加(P<0.05);与钙化组相比,碱干预组Runx2表达明显增加(P<0.05)。结论:碱性环境可能通过促进类骨表型转化进而促进慢性肾衰竭大鼠血管钙化。 展开更多
关键词 碱性环境 慢性肾衰竭 血管平滑肌细胞 钙化 runt相关转录因子-2
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补肾、健脾、活血中药复方对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达影响的比较研究 被引量：6
7
作者 王剑 郑洪新 +2 位作者 张锦萍 刘研 刘瑞辉 《成都中医药大学学报》 2011年第4期54-58,共5页
目的:观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制及补肾中药复方的疗效机理,并与健脾、活血中药复方比较。方法:肌注地塞米松复制GIOP大鼠模型,实验设正常组、模型空白组、补肾中药复方组、... 目的:观察糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)大鼠肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达,探讨GIOP的发病机制及补肾中药复方的疗效机理,并与健脾、活血中药复方比较。方法:肌注地塞米松复制GIOP大鼠模型,实验设正常组、模型空白组、补肾中药复方组、健脾中药复方组、活血中药复方组、骨疏康颗粒阳性对照组。造模及灌胃给药9周。应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,实时定量RT-PCR及Western Blot检测肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达。结果:(1)股骨骨密度:与正常组比较,模型空白组明显降低(P<0.01);与模型空白组比较,补肾中药复方组明显升高(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组明显升高(P<0.05),健脾中药复方组和活血中药复方组虽有升高趋势,但无统计学意义(P>0.05)。(2)肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显升高(P<0.01);与模型空白组比较,补肾中药复方组明显下调(P<0.01),骨疏康颗粒阳性对照组明显下调(P<0.05),健脾中药复方组和活血中药复方组虽有所降低,但无统计学意义(P>0.05)。结论:肾组织Runx2 mRNA及蛋白表达升高可能是GIOP的发病机制之一;补肾中药复方可能通过下调肾组织Runx2mRNA及蛋白表达,有效防治GIOP,其作用优于健脾、活血中药复方。 展开更多
关键词 糖皮质激素性骨质疏松症 补肾中药复方 健脾中药复方 活血中药复方 runt相关转录因子2(核心结合因子α1)
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DMP1、Runx2在小鼠下颌第一磨牙萌出过程中的免疫学定位 被引量：2
8
作者 华芳 葛久禹 《口腔医学》 CAS 2012年第12期709-711,共3页
目的研究小鼠下颌第一磨牙萌出过程中牙本质基质蛋白1(DMP1)和Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达,并探索其表达与牙萌出之间的关系。方法分离出生后1 d至14 d小鼠的下颌骨,连续切片,偶氮卡红苯胺蓝染色显示磨牙萌出过程骨胶原形成情况,切... 目的研究小鼠下颌第一磨牙萌出过程中牙本质基质蛋白1(DMP1)和Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达,并探索其表达与牙萌出之间的关系。方法分离出生后1 d至14 d小鼠的下颌骨,连续切片,偶氮卡红苯胺蓝染色显示磨牙萌出过程骨胶原形成情况,切片原位杂交法分析DMP1及RUNX2 mRNA在牙齿及周围组织的表达与分布,免疫组化法显示DMP1和RUNX2蛋白的表达与分布。结果冠方骨组织中骨胶原形成在P5 d出现高峰,以后呈逐渐减少的趋势;根方骨胶原形成在整个萌出过程中一直呈活跃状态,在P9 d出现高峰。DMP1表达越丰富,骨胶原形成越多,成骨活动越活跃。结论下颌第一磨牙萌出过程中,根方成骨活动一直很活跃,DMP1的表达与根方成骨活动参与了小鼠第一磨牙的萌出过程。 展开更多
关键词 牙萌出 牙本质基质蛋白1 runt相关转录因子2 B C小鼠
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转化生长因子β1对大鼠髓核细胞凋亡影响的实验研究
9
作者 刘汝银 岳宗进 +2 位作者 彭晓艳 王新立 冯仲锴 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期156-161,共6页
目的 :探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对大鼠髓核细胞凋亡的影响以及其作用机制。方法:采用序贯酶消化法分离培养SD大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs),实验用第3代培养的NPCs,分为6组:A组,空白... 目的 :探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对大鼠髓核细胞凋亡的影响以及其作用机制。方法:采用序贯酶消化法分离培养SD大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs),实验用第3代培养的NPCs,分为6组:A组,空白对照组,用DMEM培养基常规培养,不加任何处理;B组,用含有终浓度为20ng/ml肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的DMEM培养基培养;C组,用含有终浓度为50ng/ml TNF-α的DMEM培养基培养;D组,用含有终浓度为100ng/ml TNF-α的DMEM培养基培养;E组,用同时含有终浓度为100ng/ml TNF-α和10ng/ml TGF-β1的DMEM培养基培养;F组,在E组培养基的基础上加TGF-β1/smad通路抑制剂SB431542(设置终浓度为10μmol/L)进行培养。培养12h后,Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞增殖活性,逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RTPCR)检测各组细胞中基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinases 3,MMP3)、凋亡相关蛋白(bcl-2-associated x protein,Bax)、蛋白聚糖(ACAN)、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)m RNA相对表达量,Western blot检测各组细胞中MMP3、Bax、ACAN、CollagenⅡ、磷酸化的smad3蛋白(phosphorylate drosophila mothers against decapentaplegic protein 3,p-smad3)和Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)蛋白表达量。结果 :与A组相比,不同剂量的TNF-α(B^D组)均能够促进MMP3(B^D组依次为0.652+0.015、0.899+0.018、1.026+0.023)和Bax(B^D组依次为0.725+0.058、0.928+0.018和1.138+0.019)的表达,诱导髓核细胞的凋亡,并且呈现剂量依赖性关系。与D组相比,E组MMP3(0.568+0.015)和Bax(0.626+0.024)表达下调,ACAN(1.056+0.014)、CollagenⅡ(1.098+0.032)、p-smad3和Runx2表达量增高,差异有统计意义(P<0.05)。与E组相比,F组MMP3(1.015+0.015)和Bax(1.126+0.024)表达上调,ACAN(0.314+0.023)、CollagenⅡ(0.299+0.0.19)、p-smad3和Runx2表达量下降,差异有统计意义(P<0.05)。结论 :TGF-β1可能是通过激活smad/Runx2通� 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 信号转导蛋白smad/runt相关转录因子 肿瘤坏死因子Α 髓核细胞 凋亡 大鼠
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