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腺病毒介导的BDNF及NT3基因对体外培养听神经元的营养作用研究 被引量:6
1
作者 陈谦 汪家政 +3 位作者 刘红 吴燕 刘淑红 范明 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期511-516,共6页
在听力损伤过程中有一大类的损伤是由于各种外界因素对于听神经的损伤而引起的。为了观察脑源性神经营养因子 (BDNF)和神经营养素 -3(NT3)对听神经元的营养作用 ,并研究基因治疗在听神经损伤治疗中的可行性。在体外建立了听神经元的培... 在听力损伤过程中有一大类的损伤是由于各种外界因素对于听神经的损伤而引起的。为了观察脑源性神经营养因子 (BDNF)和神经营养素 -3(NT3)对听神经元的营养作用 ,并研究基因治疗在听神经损伤治疗中的可行性。在体外建立了听神经元的培养系统,利用LacZ重组腺病毒感染培养的听神经元来研究重组腺病毒介导的外源基因的转染效率 ,通过X -Gal染色来显示被感染的阳性细胞 ,在加入100病毒感染复数 (MOI)的Ad -LacZ病毒量时 ,即可达73 %的感染效率。在BDNF和NT3重组腺病毒感染组中 ,通过免疫细胞化学反应证实BDNF和NT3基因可在感染的听神经元中表达 ,同时可有效的促进分散培养的听神经元的存活和轴突生长。这一结果说明BDNF和NT3是听神经元的有效营养因子 ,通过腺病毒的介导外源基因可有效的转染培养的听神经元。 展开更多
关键词 重组腺病毒 BDNF nt3 听神经元
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人淋巴细胞-NT3基因工程细胞的建立及鉴定
2
作者 麻晓峰 陈杰 +2 位作者 徐琳 顾香芳 高下 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2007年第5期394-396,399,I0002,共5页
目的建立能够存活较长时间并稳定表达神经营养素-3(neurotrophin-3,NT3)的人淋巴细胞株,为后续的动物和人体耳蜗内基因转染实验奠定基础。方法从正常人全血中通过Ficoll液提取人淋巴细胞,并在其完全血清培养基中加入白细胞介素-2(IL-2)... 目的建立能够存活较长时间并稳定表达神经营养素-3(neurotrophin-3,NT3)的人淋巴细胞株,为后续的动物和人体耳蜗内基因转染实验奠定基础。方法从正常人全血中通过Ficoll液提取人淋巴细胞,并在其完全血清培养基中加入白细胞介素-2(IL-2)使其良好生长。通过RT-PCR得到人胎肝组织的NT3cDNA,以T4DNA连接酶和真核表达载体pIRES-DsRed2相连接。以阳离子脂质体作为载体,将pIRES-DsRed2-NT3转染人淋巴细胞,进行RT-PCR及Western Blot分析鉴定。结果建立了一种能使体外培养淋巴细胞成活时间延长的新方法,成功转染NT3基因至淋巴细胞中,并能继续存活相对较长时间,Western Blot证明细胞上清液中有NT3,构建了稳定表达NT3的人基因工程淋巴细胞。结论构建重组质粒pIRES-DsRed2-NT3,利用淋巴细胞作为中介宿主,进而表达、分泌NT3,为进一步NT3基因转染致聋动物耳蜗实验奠定了基础,并有可能为人体基因转染治疗耳聋找到很好的中介细胞。 展开更多
关键词 神经营养素-3 基因克隆 淋巴细胞 转染
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Delayed peripheral treatment with neurotrophin-3 improves sensorimotor recovery after central nervous system injury
3
作者 Sotiris G.Kakanos Lawrence D.F.Moon 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2019年第10期1703-1704,共2页
Neurotrophin-3 (NT3) is a growth factor found in many body tissues including the heart, intestines, skin, nervous system and in skeletal muscles including muscle spindles (Murase et al., 1994). NT3 is required for the... Neurotrophin-3 (NT3) is a growth factor found in many body tissues including the heart, intestines, skin, nervous system and in skeletal muscles including muscle spindles (Murase et al., 1994). NT3 is required for the survival, correct connectivity and function of sensory (“proprioceptive”) afferents that innervate muscle spindles;these neurons express receptors for NT3 including tropomyocin receptor kinase C. These proprioceptive afferents are important for normal movement (Boyce and Mendell, 2014) and signals from muscle spindles are important for recovery of limb movement (e.g., after spinal cord lateral hemisection)(Takeoka et al., 2014). The level of NT3 declines in most tissues during postnatal development;its level is low in adult and elderly humans and other mammals (Murase et al., 1994). Elevation of NT3 has been shown to improve outcome in various animal models of neurological disease and injury. For example, many groups have shown that delivery of NT3 directly into the central nervous system promotes recovery after spinal cord injury but this often involved invasive routes or gene therapy (Boyce and Mendell, 2014;Petrosyan et al., 2015;Wang et al., 2018). 展开更多
关键词 neurotrophin-3(nt3) TISSUES including the heart Boyce and Mendell
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阿立哌唑对精神分裂症患者临床症状及血清神经营养因子水平的影响 被引量:55
4
作者 万齐根 占瑾琼 +7 位作者 杨远坚 傅勇辉 熊建文 刘志鹏 闫琨 陈海波 涂亚婷 魏波 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期217-221,共5页
目的探讨阿立哌唑对精神分裂症患者临床症状及神经营养因子水平的影响。方法纳入40例精神分裂症患者和40名正常对照者。患者采用单一阿立哌唑治疗12周,以阳性与阴性症状量表(positive and negative syndrome scale,PANSS)评定治疗前后... 目的探讨阿立哌唑对精神分裂症患者临床症状及神经营养因子水平的影响。方法纳入40例精神分裂症患者和40名正常对照者。患者采用单一阿立哌唑治疗12周,以阳性与阴性症状量表(positive and negative syndrome scale,PANSS)评定治疗前后临床症状,采用Stroop测验(Stroop color-word test,SCWT)、持续操作测验、数字符号编码测验及连线测验A评定患者和对照认知功能,采用酶联免疫吸附技术检测血清神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)及神经营养因子3(neurotrophin 3,NT-3)水平。结果治疗前后患者临床症状、认知功能及血清神经营养因子水平有统计学差异(P<0.01),且治疗前后均低于对照组(P<0.05)。治疗前患者BDNF与PANSS阴性症状分负相关(r=-0.362,P=0.022);NGF与PANSS总分(r=0.332,P=0.037)、阳性症状分(r=0.401,P=0.010)相关;NT-3与阴性症状分(r=-0.376,P=0.017)和SCWT-色词(r=0.332,P=0.037)相关。治疗后,患者BDNF升幅与PANSS总分(r=0.371,P=0.018)、阴性症状分(r=0.345,P=0.029)及一般病理分(r=0.342,P=0.031)减少值相关;NGF升幅与PANSS总分(r=0.437,P=0.005)、阳性症状分(r=0.357,P=0.024)的下降值相关。结论阿立哌唑治疗可改善精神分裂症患者的临床症状和认知功能损害,其机制可能与上调血清BDNF、NGF、NT-3水平有关。 展开更多
关键词 阿立哌唑 精神分裂症 神经生长因子 脑源性神经营养因子 神经营养因子3
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灵芝孢子对大鼠脊神经腹根切断后脊髓运动神经元存活及其NT-3、NOS表达的影响 被引量:16
5
作者 张伟 曾园山 陈穗君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期471-476,共6页
目的探讨灵芝孢子(萌动激活赤灵芝孢子)对大鼠脊髓受损伤运动神经元存活和表达神经营养素_3(NT_3)及一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法对单侧腹根切断后的大鼠胃饲不同剂量的灵芝孢子,计算受损伤运动神经元存活率;用免疫组织化学及原位杂... 目的探讨灵芝孢子(萌动激活赤灵芝孢子)对大鼠脊髓受损伤运动神经元存活和表达神经营养素_3(NT_3)及一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法对单侧腹根切断后的大鼠胃饲不同剂量的灵芝孢子,计算受损伤运动神经元存活率;用免疫组织化学及原位杂交方法检测NT-3的表达;用酶组织化学方法检测NOS的活性。结果腹根切断后35 d,对照组运动神经元存活率为47.32%,灵芝孢子低、中、高剂量组的运动神经元存活率分别为67.11%、72.67%和81.67%;腹根切断后高剂量组存活的运动神经元NT_3和NOS的表达都高于对照组。结论灵芝孢子促进大鼠脊髓前角受损伤的运动神经元存活,其存活率与用药剂量有关;灵芝孢子促进大鼠脊髓存活的运动神经元表达NT-3和NOS。 展开更多
关键词 灵芝孢子 腹根切断 运动神经元 神经营养素-3 一氧化氮合酶 神经元存活 免疫组织化学 原位杂交 大鼠
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白藜芦醇对脑缺血小鼠BDNF及NT-3表达的影响 被引量:10
6
作者 王建平 刘聪 +3 位作者 杨直堂 蒋超 赵源征 许栋乾 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期531-535,共5页
目的探讨白藜芦醇(Resveratrol,Res)预处理对局灶性脑缺血小鼠的神经保护作用。方法将72只SPF级♂昆明小鼠随机分为假手术组、模型组、溶剂治疗组、白藜芦醇预治疗组,每组各18只。线栓法制作小鼠大脑中动脉永久性脑缺血模型(permanent m... 目的探讨白藜芦醇(Resveratrol,Res)预处理对局灶性脑缺血小鼠的神经保护作用。方法将72只SPF级♂昆明小鼠随机分为假手术组、模型组、溶剂治疗组、白藜芦醇预治疗组,每组各18只。线栓法制作小鼠大脑中动脉永久性脑缺血模型(permanent middle cerebral artery occlusion,pM-CAO),免疫组织化学法检测脑组织BDNF及NT-3蛋白的表达,RT-PCR技术检测缺血脑组织中BDNF及NT-3的基因水平,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积的变化,以Zea Longa评分法进行神经功能学评分。结果与模型组及溶剂治疗组相比,白藜芦醇预治疗组梗死区周围BDNF及NT-3的表达水平均明显升高(P<0.01),脑梗死体积明显缩小(P<0.01),且神经功能学评分明显改善(P<0.01)。结论白藜芦醇可增加脑缺血后BDNF及NT-3的表达,减少脑梗死体积,改善神经功能缺损。 展开更多
关键词 白藜芦醇 脑缺血 脑源性神经营养因子 神经营养因子-3 梗死体积 小鼠
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电针对糖尿病大鼠学习记忆障碍及海马NT-3表达的影响 被引量:4
7
作者 马萍 纪中 +1 位作者 于航 楚玉荣 《中国比较医学杂志》 CAS 2008年第8期14-17,I0004,共5页
目的观察电针对糖尿病性认知功能障碍大鼠学习记忆的改善作用,及其对海马神经营养因子-3(NT-3)mRNA和免疫反应阳性细胞表达的影响。方法采用2%链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)构建糖尿病大鼠模型,将模型大鼠随机分为电针组(EA)、对照组(... 目的观察电针对糖尿病性认知功能障碍大鼠学习记忆的改善作用,及其对海马神经营养因子-3(NT-3)mRNA和免疫反应阳性细胞表达的影响。方法采用2%链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)构建糖尿病大鼠模型,将模型大鼠随机分为电针组(EA)、对照组(DM)与正常组(CN)进行比较。电针4周后糖尿病测定血糖水平,并用Morris水迷宫法观察电针对糖尿病大鼠学习记忆的影响,应用RT-PCR和免疫组化方法检测海马NT-3mRNA和免疫反应阳性细胞的表达水平。结果对照组血糖、上台潜伏期高于正常组和电针组(P<0.01),对照组NT-3 mRNA和免疫反应阳性细胞的表达明显低于正常组和电针组(P<0.01);电针组NT-3表达明显高于对照组(P<0.01)。结论电针能在一定程度上降低血糖,促进海马NT-3 mRNA和免疫反应阳性细胞的表达,改善糖尿病认知功能障碍者的学习和认知功能。 展开更多
关键词 电针 血糖 学习记忆 海马 神经营养因子-3
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神经营养因子3促进大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能恢复
8
作者 丛岩 王艳飞 +1 位作者 董文超 于健 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期78-84,共7页
目的:探讨神经营养因子3(NT-3)促进大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能恢复的作用及其机制。方法:将24只SD大鼠,随机分成假手术组(Sham)、大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)组、MCAO/R+NT-3组。应用改良Garcia评分对各组大鼠进行神经功能评分... 目的:探讨神经营养因子3(NT-3)促进大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能恢复的作用及其机制。方法:将24只SD大鼠,随机分成假手术组(Sham)、大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)组、MCAO/R+NT-3组。应用改良Garcia评分对各组大鼠进行神经功能评分。应用Western Blot检测各组脑组织中NT-3和LC3B表达。将新生大鼠皮质来源的神经元分成正常组(Normal)、糖氧剥夺(OGD)组、OGD+NT-3组、OGD+NT-3+PF-06273340(TrkC抑制剂)组、OGD+NT-3+ZSTK474(PI3K抑制剂)组、OGD+NT-3+CCT128930(AKT抑制剂)组。应用Western Blot检测神经元中TrkC、p-PI3K、p-AKT及LC3B的水平。观察Normal组、OGD组、OGD+NT-3组中神经元形态变化并应用自噬体荧光染色剂染色,观察神经元自噬现象。结果:通过动物实验发现,NT-3在缺血再灌注损伤的脑组织中表达增多(P<0.05),且应用外源性NT-3治疗后,改良Garcia评分升高(P<0.05),自噬水平减弱(P<0.05)。通过细胞实验发现,NT-3能够抑制缺血缺氧状态下的神经元自噬并且最大限度的维持神经元形态。应用PF-06273340后p-PI3K、p-AKT表达减少(P<0.05)。应用ZSTK474、CCT128930后,NT-3抑制自噬的作用减弱(P<0.05)。结论:NT-3经PI3K/AKT信号通路抑制自噬以维持神经元存活,从而促进大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能恢复。 展开更多
关键词 神经营养因子3 脑缺血再灌注损伤 自噬 大鼠
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神经营养素3对大鼠急性脊髓损伤后血中一氧化氮合成酶的影响 被引量:3
9
作者 郭树章 任先军 +1 位作者 蒋涛 欧阳忠 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第22期1730-1732,共3页
[目的]探讨NT3(神经营养素3)对脊髓损伤保护作用的机制。[方法]105只SD大鼠随机分为3组:对照组(生理盐水组),实验组(NT3组)和假手术组,每组35只,各分为7个时相点,每个时相点5只大鼠。采用Allen’s法以30gcm力致伤大鼠T8脊髓,经蛛网膜下... [目的]探讨NT3(神经营养素3)对脊髓损伤保护作用的机制。[方法]105只SD大鼠随机分为3组:对照组(生理盐水组),实验组(NT3组)和假手术组,每组35只,各分为7个时相点,每个时相点5只大鼠。采用Allen’s法以30gcm力致伤大鼠T8脊髓,经蛛网膜下腔导管分别于术后0、4、8、12、24h、3、7d各注入NT3溶液200ng与生理盐水组和假手术组对照,于术后4、8、12、24h、3、7、14d自右心室取血用比色法测定血清中的一氧化氮合成酶活性。[结果]大鼠脊髓损伤后一氧化氮合成酶(NOS)升高,术后12h达高峰,实验组NOS水平及升幅明显低于对照组。[结论]NT3能有效抑制NOS在脊髓损伤后的活性,从而减少了NO的生成,这可能是促进大鼠脊髓损伤后运动功能恢复的作用机制之一。 展开更多
关键词 神经营养因子-3 脊髓损伤 一氧化氮合成酶 保护机制
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人神经营养素-3全长基因克隆 被引量:3
10
作者 穆援越 范明 甘思德 《神经科学》 SCIE CAS 1995年第2期73-76,共4页
本文从PCR技术入手,以人基因组DNA为模板扩增出人神经营养素-3(humanneurotrophin-3,hNT-3)全长基因,并对克隆至pUC18质粒中的hNT—3基因做了全序列分析。序列分析结果表明,除hNT—... 本文从PCR技术入手,以人基因组DNA为模板扩增出人神经营养素-3(humanneurotrophin-3,hNT-3)全长基因,并对克隆至pUC18质粒中的hNT—3基因做了全序列分析。序列分析结果表明,除hNT—3中第130位编码prepro-序列-95位Leu密码子的第一个碱基外(C→T),其余序列同文献报道完全一致,改变的碱基并不影响其编码的氨基酸序列。 展开更多
关键词 神经营养素-3 PCR 基因克隆
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NT-3体外转导在小鼠耳蜗螺旋神经节细胞的表达 被引量:1
11
作者 陈晓巍 曹克利 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2002年第5期409-412,F003,共5页
以新一代HSV Amplicon做载体 ,探讨在体外培养的小鼠耳蜗螺旋神经节细胞 (SGNC)中转导神经营养因子 3(NT 3)的表达和对听觉神经系统的神经元发育和存活的影响。实验构建了表达NT 3的HSV Amplicon重组体 ,经过无辅助病毒的包装细胞系包装... 以新一代HSV Amplicon做载体 ,探讨在体外培养的小鼠耳蜗螺旋神经节细胞 (SGNC)中转导神经营养因子 3(NT 3)的表达和对听觉神经系统的神经元发育和存活的影响。实验构建了表达NT 3的HSV Amplicon重组体 ,经过无辅助病毒的包装细胞系包装后 ,感染体外培养的小鼠SGNC。结果显示HSV Amplicon转导的NT 3表达 ,能够刺激SGNC分泌较高水平的NT 3;SGNC的神经突起增长 ;耐受顺铂 (DDP)的毒性作用。其作用的机制可能是抑制Caspase 3前体的活化 ,减少了SGNC进入凋亡。 展开更多
关键词 nt-3 耳蜗 神经营养因子-3 HSV-Amplicon载体 顺铂 螺旋神经节细胞 动物实验 基因表达
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GDNF和NT-3对噪声性毛细胞损伤的防护作用——细胞核形态学观察 被引量:1
12
作者 杨卫平 胡吟燕 +2 位作者 胡博华 郭维 杨伟炎 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1048-1049,共2页
观察胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)和神经营养素 3 (NT 3 )对噪声性毛细胞损伤的防护作用。将GDNF和NT 3缓慢注入内耳 ,以灌注人工外淋巴液动物为对照 ,检测噪声暴露后耳蜗毛细胞核形态、数量的变化。噪声暴露 10天后 ,毛细胞核荧光... 观察胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)和神经营养素 3 (NT 3 )对噪声性毛细胞损伤的防护作用。将GDNF和NT 3缓慢注入内耳 ,以灌注人工外淋巴液动物为对照 ,检测噪声暴露后耳蜗毛细胞核形态、数量的变化。噪声暴露 10天后 ,毛细胞核荧光染色计数发现 ,实验组手术耳和非手术耳耳蜗外毛细胞核肿胀率明显低于对照组 (P <0 0 1)。研究表明 ,GDNF和NT 展开更多
关键词 GDNF nt-3 噪声性细胞损伤 细胞核 形态学 噪声性聋
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神经营养因子-3诱导大鼠脊髓神经干细胞分化为胆碱能神经元的实验研究 被引量:2
13
作者 林森 徐建光 +5 位作者 胡韶楠 徐文东 徐雷 顾玉东 汪洋 周国民 《中华创伤骨科杂志》 CAS CSCD 2007年第6期546-549,共4页
目的 观察神经营养因子-3(NT-3)在体内外能否诱导脊髓源性神经干细胞分化为胆碱能神经元。方法 从孕龄15d的胚胎sD大鼠脊髓组织中分离获得脊髓源性神经干细胞。体外诱导分化研究:实验组在培养脊髓源性神经干细胞时,去除表皮生长因... 目的 观察神经营养因子-3(NT-3)在体内外能否诱导脊髓源性神经干细胞分化为胆碱能神经元。方法 从孕龄15d的胚胎sD大鼠脊髓组织中分离获得脊髓源性神经干细胞。体外诱导分化研究:实验组在培养脊髓源性神经干细胞时,去除表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子加入NT-3进行诱导;对照组则单纯培养脊髓源性神经干细胞。体内诱导分化研究:实验组将去除表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子加入NT-3的脊髓源性神经干细胞混合悬液移植于成年SD大鼠切断胫神经远端,对照组则移植未加NT-3脊髓源性神经干细胞悬液。细胞免疫荧光化学法鉴定分化结果。结果 经NT-3诱导的脊髓源性神经干细胞用细胞免疫荧光化学法鉴定,体内外培养均可检测到胆碱乙酰基转移酶阳性细胞,而对照组则未检测到胆碱乙酰基转移酶阳性细胞。结论 NT-3在体内外均可诱导脊髓源性神经干细胞分化为胆碱能神经元。 展开更多
关键词 脊髓 干细胞 胆碱能神经元 神经营养因子-3
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pIRES2-NGF-NT-3真核表达载体的构建与鉴定 被引量:2
14
作者 栗炳南 李卫东 +2 位作者 林俊堂 丰慧根 原志庆 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期315-322,共8页
构建双基因共表达载体pIRES2-NGF-NT-3并检测其在HEK293细胞中的表达。人神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和神经营养素3(neurotrophin-3,NT-3)是采用直接PCR的方法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取,将人神经生长因子的cDN... 构建双基因共表达载体pIRES2-NGF-NT-3并检测其在HEK293细胞中的表达。人神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和神经营养素3(neurotrophin-3,NT-3)是采用直接PCR的方法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取,将人神经生长因子的cDNA片段插入到pIRES2-EGFP多克隆位点构建成为pIRES2-NGF-EGFP。神经营养素3 cDNA片段通过替换绿色荧光蛋白基因(EGFP)的方式插入到pIRES2-NGFEGFP中构建成为pIRES2-NGF-NT-3双基因共表达载体,将pIRES2-NGF-NT-3用脂质体转染HEK293细胞并采用RT-PCR与Western-blot的方法检测其表达。人神经生长因子和神经营养素3被克隆,通过测序和酶切鉴定的得知与基因库报道序列一致。pIRES2-NGF-NT-3转染HEK293细胞后双基因在mRNA和蛋白水平均得到了表达。人神经生长因子和神经营养素3双基因真核表达载体成功构建,它提供了一个新的表达系统,为进一步研究双基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 人神经生长因子 神经营养素3 真核双表达载体 内部核糖体进入位点
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BDNF ,NT-3对体外培养的胚鼠脊髓AChE和NADPH-d阳性神经元生长发育的影响 被引量:1
15
作者 黄海霞 高建新 +2 位作者 刘克敬 周玉琴 彭海燕 《中国神经科学杂志》 CSCD 2002年第4期673-677,共5页
利用AChE和NADPH d酶组织化学染色法研究了脑源性神经营养因子 (brain derivedneurotrophicfac tor ,BDNF)和神经营养因子 3(neurotrophin 3,NT 3)对离体培养的胚胎大鼠脊髓胆碱能神经元和一氧化氮能神经元生长发育的影响。结果显示 :B... 利用AChE和NADPH d酶组织化学染色法研究了脑源性神经营养因子 (brain derivedneurotrophicfac tor ,BDNF)和神经营养因子 3(neurotrophin 3,NT 3)对离体培养的胚胎大鼠脊髓胆碱能神经元和一氧化氮能神经元生长发育的影响。结果显示 :BDNF处理组和NT 3处理组AChE阳性神经元数和NADPH d阳性神经元数均显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。BDNF组AChE阳性神经元和NADPH d阳性神经元胞体平均直径、每细胞突起数和最长突起长度均显著高于对照组 (P <0 .0 5 )。NT 3组NADPH d阳性神经元的生长发育与对照组无明显差异 ,仅AChE阳性神经元的每细胞突起数和最长突起长度显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,对胞体发育无影响。结果提示 :BDNF ,NT 3促进脊髓神经元的存活和生长发育 ,二者的作用具有选择性和特异性。 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 BDNF 神经营养因子-3 nt-3 脊髓 神经细胞培养 ACHE NADPH-D 组织化学染色法 神经元生长发育
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新生大鼠卵巢体外培养中NT3与LIF对始基卵泡发育的影响 被引量:1
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作者 冯月枝 邱绮 +1 位作者 杨冬梓 张清学 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期535-542,共8页
【目的】研究NT3对早期卵泡存活、发育、激素合成的影响及其可能的作用机制,同时探讨NT3和LIF在早期卵泡启动发育方面是否存在协同或叠加效应。【方法】分离新生4d大鼠卵巢随机分配至新鲜组、基础培养组、NT3组、LIF组和NT3+LIF组,在37... 【目的】研究NT3对早期卵泡存活、发育、激素合成的影响及其可能的作用机制,同时探讨NT3和LIF在早期卵泡启动发育方面是否存在协同或叠加效应。【方法】分离新生4d大鼠卵巢随机分配至新鲜组、基础培养组、NT3组、LIF组和NT3+LIF组,在37℃培养箱中培养14 d,经固定、包埋、切片后进行组织形态学、PCNA免疫组化、TUNEL凋亡分析,RTPCR检测KL m RNA表达及检测培养液中激素水平。【结果】相比新鲜组和基础培养组,NT3组、LIF组、NT3+LIF组中的始基卵泡比例下降,生长卵泡比例升高,同时PCNA蛋白表达显著增加;TUNEL分析显示NT3组、LIF组、NT3+LIF组的凋亡指数均显著降低;NT3、LIF组、NT3+LIF组卵巢中KL m RNA的表达量分别是对照组的(3.38±0.43)倍、(2.02±0.20)倍、(2.07±0.21)倍。【结论】NT3在早期卵泡存活、发育中有促进作用,上调KL基因表达可能是NT3的作用机制之一。NT3和LIF单独或相加均能促进卵泡发育,但两者之间无明显协同或叠加效应。 展开更多
关键词 nt3 LIF 卵泡发育 体外培养 大鼠
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双位酶免疫法测定NT-3cDNA-CHO细胞上清中rNT-3含量
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作者 季爱民 李梅 +1 位作者 张忠义 邹恒琴 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 1999年第6期35-36,共2页
目的:定量测定NT3cDNACHO 细胞培养上清中基因重组NT3 的含量。方法:利用NT3 的MoAb ,建立了双位EIA 法。结果:该法检测限为5 .0pgml ,批内差的变异系数为6 .2 % ~11 .4 % ( ... 目的:定量测定NT3cDNACHO 细胞培养上清中基因重组NT3 的含量。方法:利用NT3 的MoAb ,建立了双位EIA 法。结果:该法检测限为5 .0pgml ,批内差的变异系数为6 .2 % ~11 .4 % ( n = 6) ,批间差变异系数为5 .4 % ~8 .2 % (n = 6) 。4 株阳性细胞培养上清中有高水平的目的产物。结论:该EIA 法简单准确;用该法成功筛选到一最高表达基因重组NT3 的单克隆细胞株。 展开更多
关键词 神经营养蛋白3 单克隆抗体 双位酶免疫测定
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复合神经营养因子-3的静电纺丝高分子材料促进兔骨髓间充质干细胞增殖与分化 被引量:1
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作者 张善强 李永涛 +5 位作者 包鑫 李宇 姚立杰 邓凤春 金海峰 沈雷 《中外医疗》 2018年第4期9-12,19,共5页
目的探讨以静电纺丝技术制备的聚乳酸-羟基乙酸共聚物/-磷酸三钙(PLGA/-TCP)高分子材料与兔骨髓间充质干细胞(r BMSC)的生物相容性,并研究r BMSC在复合神经营养因子-3(NT-3)的PLGA/-TCP支架材料上的增殖与分化情况。方法选取齐齐哈尔医... 目的探讨以静电纺丝技术制备的聚乳酸-羟基乙酸共聚物/-磷酸三钙(PLGA/-TCP)高分子材料与兔骨髓间充质干细胞(r BMSC)的生物相容性,并研究r BMSC在复合神经营养因子-3(NT-3)的PLGA/-TCP支架材料上的增殖与分化情况。方法选取齐齐哈尔医学院解剖学研究室于2016年7月购买的兔骨髓间充质干细胞。在正常条件下,单独培养的r BMSC为对照组;将r BMSC种植在PLGA/-TCP支架材料上为PT组;以100 ng/m L重组NT-3蛋白刺激的PT组为NT-3/PT组,各组均行成骨诱导实验21 d。利用CCK-8实验于成骨诱导第2、7、14、21天检测各组r BMSC增殖情况;ELISA实验检测各组r BMSC的碱性磷酸酶(ALP)、骨形态发生蛋白-1(BMP-1)及核心结合因子a-1(Cbfa-1)等蛋白含量。结果相对于PT组,NT-3/PT组的细胞增殖OD值在2 d(0.392±0.027)、7 d(0.594±0.024)、14 d(0.978±0.089)、21 d(1.124±0.045)均明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);NT-3/PT组的ALP、BMP-1及Cbfa-1等蛋白含量[(1.525±0.352),(1.678±0.102),(1.104±0.076)pg/m L]均高于PT组[(1.154±0.741),(1.321±0.131),(0.852±0.067)pg/m L],差异有统计学意义(P<0.01)。结论复合NT-3的PLGA/-TCP静电纺丝高分子材料有效促进MSC增殖和向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 神经营养因子-3 聚乳酸-羟基乙酸共聚物 -磷酸三钙 骨髓间充质干细胞 静电纺丝
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神经营养因子-3在肺炎链球菌性脑膜炎脑损伤及治疗后表达的动态变化 被引量:1
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作者 李玲 曹广志 何雯 《中华妇幼临床医学杂志(电子版)》 CAS 2010年第5期333-336,共4页
目的探讨神经营养因子(neurotrophin,NT)-3在肺炎链球菌性脑膜炎脑组织及抗生素治疗后的表达变化特点。方法将3周龄SD大鼠46只(雌、雄不限,昆明医学院动物研究所提供),采用(0.15~0.30)mL/100 g 10%水合氯醛腹腔注射麻醉后,建立肺炎链... 目的探讨神经营养因子(neurotrophin,NT)-3在肺炎链球菌性脑膜炎脑组织及抗生素治疗后的表达变化特点。方法将3周龄SD大鼠46只(雌、雄不限,昆明医学院动物研究所提供),采用(0.15~0.30)mL/100 g 10%水合氯醛腹腔注射麻醉后,建立肺炎链球菌性脑膜炎脑损伤模型(n=34)。建模成功后,根据是否接受进一步治疗,随机分成感染组(n=20)、治疗组(n=14)。其余纳入正常对照组(n=12)。各组间大鼠的平均体重和鼠龄比较,差异无显著意义(P>0.05)。①46只大鼠均行脑池穿刺,感染组和治疗组接种50μL肺炎链球菌混悬液,正常对照组接种50μL生理盐水。观察神经营养因子-3在脑组织中的表达。经自然病程,感染组大鼠分别于接种后24 h和第5天处死(24 h感染组,n=8;5 d感染组,n=12)。②将治疗组分为抗生素治疗组(n=8)和抗生素对照组(n=6),前者给予头孢曲松皮下注射治疗3 d后,与正常对照组神经营养因子-3在脑组织中的表达进行比较。后者不做任何处理。③正常对照组于接种生理盐水后24 h(24 h正常对照组,n=6)和5 d(5 d正常对照组,n=6)分别处死。结果在脑皮质和海马中,24 h感染组,与正常对照组比较,神经营养因子-3明显下降(P<0.01),第5天回升(5 d感染组),但仍未达到正常对照组水平(P<0.05)。抗生素治疗组神经营养因子-3蛋白表达水平低于抗生素对照组,差异有显著意义(P<0.05),与5 d感染组比较,差异无显著意义(P>0.05);抗生素对照组与5 d正常对照组神经营养因子-3蛋白的表达比较,差异无显著意义(P>0.05)。结论大鼠罹患肺炎链球菌性脑膜炎时,神经营养因子-3在脑组织中的表达下降。在肺炎链球菌性脑膜炎急性脑损伤中,神经营养因子-3对神经的保护支持作用可能减弱。在肺炎链球菌脑膜炎中,抗生素治疗后,神经营养因子-3在脑组织中的表达仍处于较低水平,在肺炎链球菌性脑膜炎脑损伤中,神经营养因子-3的内� 展开更多
关键词 脑膜炎 肺炎链球菌 神经营养因子-3 抗菌药物 大鼠
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中频电刺激对大鼠咬肌神经营养因子3表达的影响
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作者 刘珍巧 陈青青 王豫蓉 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期604-608,共5页
目的·研究中频电刺激对SD大鼠下颌前伸后咬肌中神经营养因子3(neurotrophin-3,NT-3)表达的影响。方法·将60只雄性SD大鼠随机分为3组:空白对照组、条件对照组(戴用矫治器,不进行中频电刺激)和实验组(进行中频电刺激,同时戴用... 目的·研究中频电刺激对SD大鼠下颌前伸后咬肌中神经营养因子3(neurotrophin-3,NT-3)表达的影响。方法·将60只雄性SD大鼠随机分为3组:空白对照组、条件对照组(戴用矫治器,不进行中频电刺激)和实验组(进行中频电刺激,同时戴用下颌前伸矫治器),每组20只。分别在第3、7、14和21日每组断颈处死5只大鼠,制备咬肌标本,用免疫组织化学染色以及实时荧光定量PCR检测各组大鼠咬肌中NT-3蛋白及mRNA的表达。结果·与空白对照组比较,条件对照组和实验组大鼠咬肌NT-3蛋白及mRNA的表达均呈先升高后降低的趋势;条件对照组第21日 NT-3蛋白及mRNA的表达仍高于空白对照组(均P<0.05),而实验组第21日 NT-3蛋白及mRNA表达已基本恢复至正常水平。结论·中频电刺激能加快功能矫治大鼠神经肌肉改建速率,缩短矫治时间。 展开更多
关键词 中频电刺激 咬肌 神经营养因子3 功能矫治 大鼠
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