肿瘤细胞内pH值改变与肿瘤多药耐药的关系 被引量：13

1

作者 芦颖 李庆华 庞天翔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1128-1130,共3页

细胞内pH值(pHi)增高是许多耐药肿瘤的共同特点,其结果引起肿瘤细胞对化疗药物的敏感性下降,降低药物疗效。通过对pHi的调节,可纠正细胞内碱化,逆转肿瘤耐药。Na+-H+交换蛋白(Na+/H+exchanger,NHE)抑制剂可通过抑制NHE的活性调节pHi,为... 细胞内pH值(pHi)增高是许多耐药肿瘤的共同特点,其结果引起肿瘤细胞对化疗药物的敏感性下降,降低药物疗效。通过对pHi的调节,可纠正细胞内碱化,逆转肿瘤耐药。Na+-H+交换蛋白(Na+/H+exchanger,NHE)抑制剂可通过抑制NHE的活性调节pHi,为肿瘤的治疗提供了新的思路和手段。 展开更多

关键词 细胞内Ph值 多药耐药 P-糖蛋白 ^^na^+-h^+交换蛋白

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细胞内酸化对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响 被引量：2

2

作者 边肖海 霍静 郑曙民 《长治医学院学报》 2005年第2期81-83,共3页

目的:本实验从细胞酸化角度来探索宫颈癌细胞凋亡的情况,为临床治疗宫颈癌提供新思路。方法:使用EIPA(Na+/H+交换器的特异性抑制剂)抑制Hela细胞中的Na+/H+交换器的作用,通过细胞形态学、DNAladder以及流式细胞检测胞内pH值和DNA亚二倍... 目的:本实验从细胞酸化角度来探索宫颈癌细胞凋亡的情况,为临床治疗宫颈癌提供新思路。方法:使用EIPA(Na+/H+交换器的特异性抑制剂)抑制Hela细胞中的Na+/H+交换器的作用,通过细胞形态学、DNAladder以及流式细胞检测胞内pH值和DNA亚二倍体的方法来研究Hela细胞凋亡的情况。结果:宫颈癌Hela细胞对EIPA产生了剂量依赖性的细胞酸化和凋亡。结论:提示了细胞酸化可能是宫颈癌Hela细胞发生凋亡的一个上游事件,胞内pH值的降低可以引起Hela细胞凋亡。 展开更多

关键词 细胞凋亡 细胞内Ph值 ^^na^+/h^+交换器 胞内酸化

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阿米洛利抑制NHE-1减轻低氧性肺动脉平滑肌细胞增殖 被引量：1

3

作者 刘毅 董明清 +3 位作者 牛雯 张博 罗颖 李志超 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期462-466,共5页

目的:研究Na+/H+交换抑制剂阿米洛利对低氧刺激的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响,以及Na+/H+交换体-1(NHE-1)活性和表达的变化。方法:常氧(21%O2)或低氧(2%O2)条件下培养PASMCs,并分别给予浓度为1.653、3.125、6.25、12.5、25... 目的:研究Na+/H+交换抑制剂阿米洛利对低氧刺激的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响,以及Na+/H+交换体-1(NHE-1)活性和表达的变化。方法:常氧(21%O2)或低氧(2%O2)条件下培养PASMCs,并分别给予浓度为1.653、3.125、6.25、12.5、25和50μmol/L等不同浓度的阿米洛利,培养24h,采用MTT比色实验和免疫组化检测PCNA阳性细胞率的方法反映细胞增殖情况,同时采用激光共聚焦检测细胞内pH以反映Na+/H+交换体-1活性,RT-PCR法检测Na+/H+交换体-1mRNA的表达量。结果:低氧培养的PASMCs细胞内pH升高,NHE-1mRNA的表达增多,而阿米洛利可以降低细胞内pH,减少NHE-1mRNA的表达量。同时低氧较常氧培养MTT光吸收值较常氧培养明显升高。PCNA阳性细胞率明显增高,而给予阿米洛利时上述两个指标随药物浓度增加而逐渐下降。结论:低氧可以激活PASMCs细胞膜上的E-1,增加其mRNA水平表达量,使细胞内碱化,促进细胞增殖,而Na+/H+交换抑制剂阿米洛利可以抑制其活性,减少mRNA水平的表达,导致细胞内酸化,从而抑制细胞增殖,并且此抑制作用在3.125～50μmol/L浓度范围内呈现明显的浓度依赖性。 展开更多

关键词 阿米洛利 ^^na^+/h^+交换体-1 低氧 肺动脉平滑肌细胞

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NHE-1特异性抑制剂DMA逆转HL-60/ADM细胞多药耐药的实验研究 被引量：3

4

作者 常城 孔佩艳 +6 位作者 陈幸华 彭贤贵 刘林 刘红 曾东风 梁雪 王庆余 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期328-331,共4页

目的探讨钠/氢交换器-1(Na+/H+exchanger-1,NHE-1)特异性抑制剂二甲基氨氯吡咪(dimethyl amilo-ride,DMA)是否能在体外逆转耐药细胞株HL-60/ADM的多药耐药及其可能机制。方法以阿霉素诱导产生多药耐药(multidrug resistance,MDR)的HL-60... 目的探讨钠/氢交换器-1(Na+/H+exchanger-1,NHE-1)特异性抑制剂二甲基氨氯吡咪(dimethyl amilo-ride,DMA)是否能在体外逆转耐药细胞株HL-60/ADM的多药耐药及其可能机制。方法以阿霉素诱导产生多药耐药(multidrug resistance,MDR)的HL-60/ADM细胞株为研究对象,用MTT法检测化疗药物敏感性,流式细胞仪检测细胞内柔红霉素积累量,RT-PCR法检测mrp、bcl-2、bax mRNA表达,免疫细胞化学法检测细胞膜多药耐药相关蛋白(MRP)表达,TUNEL法检测原位细胞凋亡。结果与50μmol/L DMA共同培养24h后,HL-60/ADM细胞对ADM、MIT、VCR、HAR4种化疗药物的IC50值分别由(839.5±45.2)、(321.2±28.9)、(70.5±15.5)、(65.2±20.7)ng/ml降低至(180.5±38.9)、(76.4±12.0)、(30.2±7.5)、(31.7±7.2)ng/ml;分别与50、100μmol/LDMA共培养24h后,HL-60/ADM细胞内DNR积累量荧光强度由作用前的33.56升高到48.74和70.10,细胞内mrp mRNA表达量、MRP蛋白表达量及bcl-2mRNA表达量明显降低,bax mRNA表达量明显升高;与100μmol/L DMA共同培养24h后,5μg/ml ADM作用下的HL-60/ADM细胞凋亡率明显增高。结论DMA可逆转HL-60/ADM细胞的MDR,其机制可能与下调MRP表达及促进bcl-2/bax凋亡途径有关。 展开更多

关键词 二甲基氨氯吡咪 钠/氢交换蛋白-1 hL-60/ADM 多药耐药 逆转

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Na^＋-H^＋交换体1反义基因磁性纳米微粒对SGC-7901胃癌细胞形态学的影响 被引量：1

5

作者 刘海峰 陈刚 +1 位作者 滕小春 汪兴伟 《中华消化外科杂志》 CAS CSCD 2007年第4期299-302,共4页

目的探讨Na^＋-H^＋交换体1（Na^＋-H^＋exchanger1,NHE1）反义基因磁性纳米微粒对SGC-7901胃癌细胞形态学的影响。方法构建NHE1反义基因真核表达载体和NHE1反义基因磁性纳米微粒,将NHE1反义基因转染至SGC-7901胃癌细胞中,从光镜、电镜... 目的探讨Na^＋-H^＋交换体1（Na^＋-H^＋exchanger1,NHE1）反义基因磁性纳米微粒对SGC-7901胃癌细胞形态学的影响。方法构建NHE1反义基因真核表达载体和NHE1反义基因磁性纳米微粒,将NHE1反义基因转染至SGC-7901胃癌细胞中,从光镜、电镜水平观察转染与未转染细胞形态学的变化。结果氧化铁磁性纳米颗粒成功地将NHE1反义基因转染至SGC-7901胃癌细胞中。与亲本细胞相比,光镜下NHE1反义基因转染的SGC-7901胃癌细胞胞体增大,胞质丰富,核大小相对一致,核质比和核分裂象减少,异型性减少。透射电镜下细胞线粒体数量增多、体积增大,并可见髓鞘样变,粗面内质网、高尔基体较发达,内质网扩张,核偏向一侧,极性增强。结论NHE1反义基因磁性纳米微粒能使SGC-7901胃癌细胞发生形态学及超微结构的变化,有促进SGC-7901胃癌细胞分化的作用。 展开更多

关键词 ^^na^+-h^+交换体1 磁性纳米微粒 反义基因治疗 胃肿瘤

原文传递

Na^+/H^+交换器-1在新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞损伤中的作用 被引量：1

6

作者 陈亮 董文斌 +4 位作者 李清平 邓存良 陈枫 雷小平 熊涛 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第18期1412-1414,共3页

目的探讨Na+/H+交换器-1(NHE1)在新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)损伤中的作用。方法以HK-2为研究对象,以200 mL/L新生儿窒息后血清作为攻击因素处理HK-2细胞。首先将实验分为2组:对照组和窒息组,通过免疫组织化学方法... 目的探讨Na+/H+交换器-1(NHE1)在新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)损伤中的作用。方法以HK-2为研究对象,以200 mL/L新生儿窒息后血清作为攻击因素处理HK-2细胞。首先将实验分为2组:对照组和窒息组,通过免疫组织化学方法检测其HK-2细胞在损伤前后胞内NHE1的表达;再分为3组:对照组、窒息组和5-N-乙基-N-异丙基-阿米洛利(EIPA)干预组(每组8个复孔)。倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HK-2细胞活力,生物化学法检测细胞培养液中LDH漏出率变化。结果与对照组比较,窒息组细胞内和细胞膜上NHE1表达明显增加;与对照组比较,窒息组细胞形态发生改变;窒息组细胞的活细胞数量较对照组明显降低;LDH漏出率明显升高,差异具有显著性意义(Pa=0);与窒息组细胞比较,EIPA干预组细胞形态明显得到改善,活细胞数量明显增加,LDH漏出率降低,差异具有显著性意义(Pa=0)。结论新生儿窒息后血清诱导HK-2细胞NHE1的表达增强可能是导致HK-2损伤的重要机制之一,通过抑制NHE1活性可使细胞损伤减轻,活性增强。 展开更多

关键词 ^^na^+/h^+交换器-1 窒息 血清 肾小管上皮细胞 肾损伤 婴儿 新生

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钠-氢交换蛋白1小干扰RNA对抗霉素A诱导人肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤的保护机制 被引量：2

7

作者 洪权 吴镝 +4 位作者 冯哲 张雪光 汪杨 吕杨 陈香美 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期560-565,共6页

目的通过构建钠-氢交换蛋白1（NHE-1）小干扰RNA（siRNA）抑制肾小管上皮细胞NHE-1的表达，探讨其对细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法根据人NHE-1全长基因序列设计并合成NHE-1-siRNA，转染人肾小管上皮细胞系（HKC），以无关siRN... 目的通过构建钠-氢交换蛋白1（NHE-1）小干扰RNA（siRNA）抑制肾小管上皮细胞NHE-1的表达，探讨其对细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法根据人NHE-1全长基因序列设计并合成NHE-1-siRNA，转染人肾小管上皮细胞系（HKC），以无关siRNA转染组作为对照。利用10μmol／L抗霉素A诱导细胞来模拟缺血缺氧环境。用RT—PCR、Western印迹法检测NHE-1的表达。用BCECF／AM、Fluo-3／AM和SBFI-AM标记HKC，通过激光共聚焦显微镜分别检测其细胞内pHi、Ca^2＋和Na^＋浓度的变化。用Hoechst 33342染色技术及AnnexinV／PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况。利用荧光探针JC-1检测细胞线粒体膜电位的变化。结果特异性NHE-1-siRNA能有效抑制HKC的NHE-1表达，与无关siRNA转染组相比，NHE-1-siRNA转染组NHE-1 mRNA和蛋白表达水平明显下调（均P〈0．05）。抗霉素A刺激后，2组细胞NHE-1 mRNA及蛋白表达水平显著上调，而NHE-1-siRNA转染组低于无关siRNA转染组；同时NHE-1-siRNA转染组细胞凋亡率（8．9％±2．9％）明显低于抗霉素A处理组（18．8％±3．2％）和抗霉素A＋无关siRNA转染组（17．4％±3．6％）（均P〈0．05）；NHE-1-siRNA转染组线粒体膜电位明显增高；与无关siRNA转染组相比较，NHE-1-siRNA转染组经抗霉素A处理后，细胞内钠离子、氢离子及钙离子增高的幅度较低（P〈0．05）。结论NHE-1-siRNA可抑制肾小管上皮细胞内NHE-1的表达，对抗霉素A诱导肾小管上皮细胞的缺血再灌性损伤有一定的保护作用。其机制可能通过抑制NHE-1表达，延缓细胞内Na^＋的积聚，减轻细胞内钙离子的超载，抑制损伤细胞的线粒体膜电位下降，减少细胞的凋亡。 展开更多

关键词 钠氢交换子1 缺血 再灌注损伤 肾小管上皮细胞 细胞凋亡

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siRNA沉默NHE1基因对MHCC97-H肝癌细胞侵袭迁移的影响 被引量：2

8

作者 孙伟 王德盛 +6 位作者 杨薛康 周亮 张勇 苟泽鹏 祝普利 张福琴 窦科峰 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第23期2437-2442,共6页

目的:探讨RNA干扰沉默NHE1基因后对人肝癌细胞株MHCC97-H细胞侵袭迁移的影响.方法:应用NHE1基因小干扰RNA(small interferingRNA,siRNA)转染人肝癌细胞株MHCC97-H细胞,同时设立空白对照组和无关对照组.转染成功后采用RT-PCR和Westernblo... 目的:探讨RNA干扰沉默NHE1基因后对人肝癌细胞株MHCC97-H细胞侵袭迁移的影响.方法:应用NHE1基因小干扰RNA(small interferingRNA,siRNA)转染人肝癌细胞株MHCC97-H细胞,同时设立空白对照组和无关对照组.转染成功后采用RT-PCR和Westernblot分别从基因和蛋白水平检测RNA干扰沉默NHE1基因的效果.MTT法测定转染后三组细胞的增殖状况,Transwell小室检测沉默NHE1基因对MHCC97-H细胞侵袭、转移能力的影响,进一步采用免疫荧光观察其对MHCC97-H细胞骨架和伪足的影响.结果:与两对照组比较,转染NHE1-siRNA组NHE1mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);细胞侵袭、迁移实验结果显示,NHE1-siRNA组穿透人工基底膜的细胞数(34.1±5.2,120.2±12.8)较空白对照组(56.9±6.1,235.2±16.8)和转染无关对照组(57.2±6.1,231.9±14.7)均明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05),而空白对照组与无关对照组比较差异无统计学意义;MTT结果显示,转染后48h和72h三组细胞间增殖活性差异无统计学意义;NHE1基因沉默后与两对照组相比,MHCC97-H细胞膜伪足形成减少,细胞内肌动蛋白网排列紊乱.结论:siRNA沉默NHE1基因后可能通过影响MHCC97-H细胞骨架的重组和伪足的形成,从而抑制MHCC97-H细胞的侵袭和迁移能力. 展开更多

关键词 肝癌 钠氢交换蛋白1 Rna干扰 细胞骨架

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NHE-1反义基因对胃癌细胞的酸化作用及其意义 被引量：2

9

作者 滕小春 刘海峰 +3 位作者 房殿春 杨仕明 王国安 陈刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期240-242,共3页

目的探讨Na+-H+交换泵-1(Na+-H+exchanger1,NHE-1)反义基因转染对人胃癌细胞内pH值(intracellu-larpH,pHi)的调节作用及其在肿瘤基因治疗中的价值。方法构建人NHE-1基因反义真核表达载体,采用脂质体法将其转染至SGC-7901胃癌细胞中,采... 目的探讨Na+-H+交换泵-1(Na+-H+exchanger1,NHE-1)反义基因转染对人胃癌细胞内pH值(intracellu-larpH,pHi)的调节作用及其在肿瘤基因治疗中的价值。方法构建人NHE-1基因反义真核表达载体,采用脂质体法将其转染至SGC-7901胃癌细胞中,采用荧光探针检测转染前后细胞内pH值的变化以及对细胞增殖和凋亡的影响。结果转染反义基因的细胞pHi明显降低,增殖能力降低,细胞凋亡率增加。结论NHE-1基因的表达在肿瘤细胞pHi及增殖和凋亡调节中起重要作用。 展开更多

关键词 NhE1基因 真核表达载体 反义基因治疗 胃癌

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卡立泊来德对离体肺缺血再灌注损伤的初步实验研究

10

作者 周荣华 陈果 +5 位作者 蒲江涛 陈艳芳 刘馨烛 张艳菊 龙村 刘斌 《中国体外循环杂志》 2007年第2期110-113,共4页

目的研究选择性钠/氢离子(Na+/H+)交换阻断剂卡立泊来德(Cariporide)对离体大鼠肺缺血/再灌注损伤的防治效果。方法建立离体大鼠肺缺血再灌注损伤模型。18只SD成年大鼠随机分为3组,每组6只:对照组:采用含5%羟乙基淀粉的KHHB(Krebs-Hense... 目的研究选择性钠/氢离子(Na+/H+)交换阻断剂卡立泊来德(Cariporide)对离体大鼠肺缺血/再灌注损伤的防治效果。方法建立离体大鼠肺缺血再灌注损伤模型。18只SD成年大鼠随机分为3组,每组6只:对照组:采用含5%羟乙基淀粉的KHHB(Krebs-Henseleit hydroxyethylamylopectine buffer)灌注液持续平衡灌注、通气120 min;缺血再灌注组:平衡30 min后,缺血60 min、再灌注30 min;Cariporide组:平衡15 min,给予Cariporide预处理15 min,缺血60 min、再灌注30 min。持续监测并记录肺动脉压(PAP);留取再灌注末灌注液,测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;再灌注结束,测肺湿/干重比(W/D);光、电镜观察肺病理学改变。结果缺血再灌注组PAP、MDA含量、SOD活性和W/D较对照组明显升高(P<0.05),SOD活性显著下降(P<0.05)。Cariporide能明显减少PAP、MDA和W/D的增加,提高SOD活性(P<0.05),显微、超微结构证实Caripo-ride组肺血管内皮及肺泡上皮的病理变化明显减轻。结论Cariporide能降低离体大鼠肺缺血再灌注损伤。 展开更多

关键词 ^^na^+/h^+交换 卡立伯来德 肺 缺血再灌注损伤

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钠氢交换泵抑制剂的神经保护作用

11

作者 张三妹 李光来 《国际脑血管病杂志》 2008年第1期48-51,共4页

Na^＋-H^＋交换泵（NHE）是一种在脑内普遍存在的蛋白，生理和病理条件下参与调节pH。研究显示，Na^＋-H^＋’交换泵抑制剂对缺血再灌注动物模型的脑损伤有显著的保护作用。Na^＋-H^＋交换泵抑制剂可能通过抑制Na^＋-H^＋交换，防止细胞... Na^＋-H^＋交换泵（NHE）是一种在脑内普遍存在的蛋白，生理和病理条件下参与调节pH。研究显示，Na^＋-H^＋’交换泵抑制剂对缺血再灌注动物模型的脑损伤有显著的保护作用。Na^＋-H^＋交换泵抑制剂可能通过抑制Na^＋-H^＋交换，防止细胞内Ca^2＋超负荷和其他相关作用，对缺血性脑损伤起保护作用。 展开更多

关键词 ^^na^+-h^+交换泵 阿米洛利 脑缺血 再灌注损伤

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Na^+-H^+交换体1反义基因磁性纳米微粒体内靶向治疗胃癌的实验研究

12

作者 刘海峰 陈刚 +2 位作者 滕小春 汪兴伟 张爽 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2009年第1期52-56,共5页

目的探讨Na+-H+交换体1(NHE1)反义基因磁性纳米微粒体内靶向治疗胃癌的可行性。方法构建NHE1反义基因真核表达载体和NHE1反义基因磁性纳米微粒,以氧化铁磁性纳米颗粒为基因转染载体,将NHE1反义基因导入SGC-7901胃癌细胞中,获得稳定表达N... 目的探讨Na+-H+交换体1(NHE1)反义基因磁性纳米微粒体内靶向治疗胃癌的可行性。方法构建NHE1反义基因真核表达载体和NHE1反义基因磁性纳米微粒,以氧化铁磁性纳米颗粒为基因转染载体,将NHE1反义基因导入SGC-7901胃癌细胞中,获得稳定表达NHE1反义基因的7901-AS细胞。研究转染细胞形态学变化及体外生长情况。建立裸鼠胃癌移植瘤模型后,进行体内靶向定位实验,观察抑瘤率。结果7901-AS细胞在光镜、电镜下的肿瘤细胞形态恶性程度降低,出现显著生长抑制现象,细胞增殖指数降低,凋亡指数明显增高(P<0.01)。实验组肿瘤组织铁含量为(79.38±8.64)μg/g,显著高于对照组[(38.13±9.37)μg/g,P<0.01]。NHE1反义基因磁性纳米微粒+磁场组抑瘤率为32.83%,高于NHE1反义基因磁性纳米微粒组1.51%和磁场组0.75%。NHE1反义基因磁性纳米微粒+磁场组裸鼠瘤体质量为(1.78±0.30)g,显著低于生理盐水对照组[(2.65±0.42)g,P<0.01]、NHE1反义基因磁性纳米微粒组[(2.61±0.49)g,P<0.05]和磁场组[(2.63±0.51)g,P<0.05]。结论利用多聚赖氨酸修饰的氧化铁纳米颗粒为基因载体,完成了NHE1反义基因对SGC-7901胃癌细胞株的转染,NHE1反义基因对SGC-7901胃癌细胞株的恶性行为有明显的抑制作用。在磁场作用下成功实现了NHE1反义基因在裸鼠体内针对肿瘤的磁靶向定位,并产生了显著的抑制作用。初步证明了磁性纳米材料体内靶向基因治疗胃癌的可行性,为肿瘤治疗提出了一个新的探索方向。 展开更多

关键词 ^^na^+-h^+交换体1 磁性纳米微粒 反义基因 靶向治疗 胃癌

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钠氢交换体1对糖尿病db／db小鼠心脏钙蛋白酶和糖原合成酶激酶-3β的调节作用 被引量：1

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作者 李彩蓉 甘受益 +2 位作者 黄凌萍 余辉 蒋学俊 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 2017年第10期638-643,共6页

目的 探讨钠氢交换体1（NHE1）抑制剂卡立泊来德（CAR）对2型糖尿病db/db小鼠心脏钙蛋白酶（Calpain）和糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）蛋白的调节作用.方法 选取7周龄雄性C57BL/KS db/db小鼠和野生型（WT）小鼠各16只,采用随机数字表法... 目的 探讨钠氢交换体1（NHE1）抑制剂卡立泊来德（CAR）对2型糖尿病db/db小鼠心脏钙蛋白酶（Calpain）和糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）蛋白的调节作用.方法 选取7周龄雄性C57BL/KS db/db小鼠和野生型（WT）小鼠各16只,采用随机数字表法分为4组：对照组（WT）、CAR组（WT＋CAR）、模型组（db/db）和CAR干预组（db/db＋CAR）.10周后行血流动力学检查,测定空腹血糖（FPG）、甘油三酯（TG）和胆固醇（TC）及胰岛素,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;观察心肌病理改变,测定心肌组织氧化/硝化应激反应;RT-PCR测定心肌组织磷酸烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶p22phox和gp91phox亚基、转化生长因子β1（TGF-β1）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9 （MMP-9）的mRNA水平.Western blotting检测心肌组织中钙蛋白酶1和2（Calpain-1和2）、钙调磷酸酶（CaN）、蛋白激酶B（AKT）和糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）蛋白的表达;并测定心肌Calpain和CaN酶的活性.两两比较采用t检验,组间比较采用单因素方差分析.结果（1）与db/db组比较,CAR＋db/db组小鼠FPG、TC、TG和HOMA-IR有下降趋势（t=1.213-2.112,P〉0.05）.（2）与WT组比较,db/db组心肌胶原含量、TGF-β1和MMP-2 mRNA水平明显增加,MMP-9 mRNA水平明显下降（t=3.695-4.905,P〈0.05）,而CAR干预后可逆转上述指标的改变（t=2.491-2.925,P〈0.05）.（3）CAR＋db/db组小鼠±dp/dtmax绝对值增大,LVEDP下降（t=2.865-6.404,P〈0.05）,并且小鼠心肌损伤情况明显改善.（4）与db/db组比较,CAR干预能明显改善db/db小鼠心脏组织中氧化/硝化应激,两组相比较有统计学差异（t=2.519-4.845,P〈0.05）.（5）与db/db组比较,CAR能降低db/db小鼠心肌Calpain、CaN酶活性和蛋白含量（t=2.634-3.253,P〈0.05）,还能上调p-AKT和p-GSK-3β蛋白表达（t=2.827,4.090,P〈0.05）.结论 CAR能改善db/db小鼠心脏损伤,其机制可能与CAR改善高糖高脂和胰 展开更多

关键词 糖尿病心肌病 钠氢交换体1 卡立泊来德 钙蛋白酶 糖原合成酶激酶-3Β

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糖基化终末产物对大鼠平滑肌细胞钠/氢交换蛋白1活性的影响 被引量：1

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作者 吴树金 刘立英 +4 位作者 周寿红 宋涛 陈庚容 黄宁江 唐蜜蜜 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期337-340,共4页

目的观察糖基化终末产物对大鼠血管平滑肌细胞钠/氢交换蛋白1活性的影响。方法采用组织贴块法原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞。用体外制备的外源性糖基化终末产物和血管平滑肌细胞共孵育24h,利用BCECF通过荧光分光光度计检测细胞上钠/... 目的观察糖基化终末产物对大鼠血管平滑肌细胞钠/氢交换蛋白1活性的影响。方法采用组织贴块法原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞。用体外制备的外源性糖基化终末产物和血管平滑肌细胞共孵育24h,利用BCECF通过荧光分光光度计检测细胞上钠/氢交换蛋白1活性。结果不同浓度糖基化终末产物(1、5和10mg/L)与血管平滑肌细胞共孵24h后,能显著增强钠/氢交换蛋白1的活性,分别使钠/氢交换蛋白1的活性从0.66±0.05升高至0.71±0.03、0.80±0.07和0.88±0.06(P<0.05或P<0.01),使钠/氢交换蛋白1 mRNA表达从0.77±0.07分别升高至0.88±0.08、1.23±0.06和1.33±0.08(P<0.05或P<0.01);预先使用糖基化终末产物受体阻断剂5 mg/L,钠/氢交换蛋白1活性比糖基化终末产物处理组明显降低(0.68±0.04比0.90±0.05,P<0.05);使用不同浓度的丝裂原活化蛋白激酶阻断剂PD98059(1、10和25μmol/L),使钠/氢交换蛋白1活性从0.94±0.05分别降至0.86±0.06、0.74±0.05和0.66±0.07(P<0.05或P<0.01)。结论外源性糖基化终末产物能诱导血管平滑肌细胞上钠/氢交换蛋白1活化,其机制可能与糖基化终末产物激活糖基化终末产物受体,引起丝裂原活化蛋白激酶信号通路活化有关。 展开更多

关键词 糖基化终未产物 钠/氢交换蛋白1 平滑肌细胞 丝裂原活化蛋白激酶

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钠氢交换蛋白1抑制剂对严重烧伤后多脏器损伤大鼠的保护作用研究 被引量：1

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作者 李文鹏 赵高炀 +1 位作者 杨薛康 马腾 《海军医学杂志》 2017年第1期14-17,共4页

目的探讨钠氢交换蛋白1(NHE1)抑制剂对严重烧伤后全身多脏器功能损伤大鼠的保护作用,并探讨其潜在的机制。方法常规方法建立30%体表面积烫伤的大鼠模型。用NHE1抑制剂(卡立泊来德)干预后,通过观察组织病理学及炎症因子的改变来探讨NHE1... 目的探讨钠氢交换蛋白1(NHE1)抑制剂对严重烧伤后全身多脏器功能损伤大鼠的保护作用,并探讨其潜在的机制。方法常规方法建立30%体表面积烫伤的大鼠模型。用NHE1抑制剂(卡立泊来德)干预后,通过观察组织病理学及炎症因子的改变来探讨NHE1在烧伤后多脏器损伤时所起的作用。结果 NHE1在烧伤后大量表达,而NHE1的抑制剂可显著减轻烧伤后心脏、肺脏、肾脏及小肠的损伤。同时NHE1抑制剂也可以降低肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、髓过氧化物酶(MPO)水平。结论 NHE1抑制剂显著减轻烧伤后大鼠多脏器损伤,其部分机制可能是抑制了组织的炎症反应。 展开更多

关键词 烧伤 多脏器损伤 钠氢交换蛋白1 炎症 大鼠

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Na^+/H^+交换体阻滞剂对糖尿病鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护机制

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作者 吴伟 潘晓黎 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期189-192,共4页

目的探讨Na+/H+交换体(NHE)阻滞剂抗糖尿病心肌细胞内钙超载和抗细胞挛缩作用。方法利用培养的糖尿病鼠心肌细胞进行缺氧/复氧处理,模拟心肌缺血/再灌注(I/R)损伤,动态监测单个心肌细胞在缺氧/复氧时Ca2+浓度的变化和NHE阻滞剂阿米洛利(... 目的探讨Na+/H+交换体(NHE)阻滞剂抗糖尿病心肌细胞内钙超载和抗细胞挛缩作用。方法利用培养的糖尿病鼠心肌细胞进行缺氧/复氧处理,模拟心肌缺血/再灌注(I/R)损伤,动态监测单个心肌细胞在缺氧/复氧时Ca2+浓度的变化和NHE阻滞剂阿米洛利(EIPA)对其细胞面积和细胞生存的影响。结果动物模型显示EIPA可以减轻再灌注心肌细胞损伤。在复氧前给予以常规剂量EIPA,虽能有效拮抗细胞挛缩,但不能阻止细胞内钙超载,故未能显著提高心肌细胞的存活率。在复氧前给予大剂量的EIPA或在缺氧/复氧全程常规剂量EIPA给药均能有效地抑制缺氧期和复氧期Ca2+浓度的上升,防止糖尿病鼠细胞内钙超载,同时拮抗细胞挛缩,显著提高细胞的存活率。结论在缺氧前或复氧前给予常规剂量或增大剂量的EIPA均能有效地拮抗心肌细胞挛缩,发挥其对心肌细胞的保护作用。 展开更多

关键词 钠氢交换体 抑制剂 缺氧/复氧损伤 心肌细胞 鼠

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钠氢交换体-1敲降对缺氧巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1水平及胆固醇外排的影响

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作者 莫显刚 张莉 +4 位作者 张落超 洪伟 王兰 代陆军 文前军 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期909-914,共6页

目的探讨钠氢交换体-1（NHE1）基因敲降对缺氧状态下巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）蛋白水平及胆固醇外流的影响。方法感染表达特异靶向NHE1基因短发夹RNA慢病毒（siNHE1）或表达乱码RNA慢病毒（siNC）的RAW264．7细胞缺氧... 目的探讨钠氢交换体-1（NHE1）基因敲降对缺氧状态下巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）蛋白水平及胆固醇外流的影响。方法感染表达特异靶向NHE1基因短发夹RNA慢病毒（siNHE1）或表达乱码RNA慢病毒（siNC）的RAW264．7细胞缺氧24h，实时定量PCR（qRT-PCR）及免疫印迹（Western blot）检测NHE1 mRNA及蛋白表达水平，用sNARF-1、Fluo-4NW及Suc-LLVY-aminoluciferin分别检测NHE1活性、细胞内钙离子浓度（[Ca^2＋]，）及钙蛋白酶（calpain）活性；免疫印迹检测缺氧状态下ABCA1蛋白水平，高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量及^3H-胆固醇法检测胆固醇外流。结果缺氧相对于常氧上调NHE1 mRNA、蛋白水平表达及活性2．48倍、1．28倍和61．96％（P〈0．05），升高[Ca^2＋]．及calpain活性4．51倍和2．41倍（P〈0．05），而siNHE1降低缺氧细胞NHE1 mRNA、蛋白表达及活性84．95％、60．75％和66．44％（P〈0．05），降低[Ca^2＋]。及calpain活性59．23％和54．66％（P〈0．05）。缺氧使ABCA1蛋白水平降低61．67％（P〈0．05），siNHE1使缺氧细胞ABCA1蛋白水平升高56．52％。缺氧使细胞内总胆固醇及胆固醇酯含量增加74．57％和101．81％（均P〈0．05），而siNHE1降低总胆固醇及胆固醇酯34．24％及49．66％（均P〈0．05）。缺氧降低胆固醇外流34．79％，而缺氧条件下siNHE1使胆固醇外流率升高37．80％。结论NHE1可能通过[Ca^2＋]。／calpain通路在缺氧诱导ABCA1蛋白水平降低及胆固醇外流异常发挥重要作用。 展开更多

关键词 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 钠氢交换体-1 胆固醇

原文传递

钠氢交换体1在氯化锂-匹罗卡品点燃癫痫大鼠模型海马组织内的表达 被引量：6

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作者 彭爽 吴旭玲 +4 位作者 于云莉 董楝 徐祖才 叶兰 冯占辉 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第1期16-21,共6页

目的 检测钠氢交换体1(NHE1)在氯化锂-匹罗卡品点燃癫痫大鼠模型海马组织中的表达。方法 选取雄性SD大鼠90只,其中45只采用腹腔注射氯化锂-匹罗卡品构建癫痫模型作为模型组,45只采用腹腔注射生理盐水组作为对照组;取模型组和对照组大鼠... 目的 检测钠氢交换体1(NHE1)在氯化锂-匹罗卡品点燃癫痫大鼠模型海马组织中的表达。方法 选取雄性SD大鼠90只,其中45只采用腹腔注射氯化锂-匹罗卡品构建癫痫模型作为模型组,45只采用腹腔注射生理盐水组作为对照组;取模型组和对照组大鼠各36只,采用蛋白印迹(Western blot)法检测造模后第1、3、7、14、30及60天时2组大鼠海马组织匀浆中NHE1蛋白的定量表达;取模型组和对照组大鼠各3只,采用免疫组织化学分析造模后第14天时2组大鼠海马组织NHE1的蛋白表达;取模型组和对照组大鼠各6只,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测造模后第14天2组大鼠海马组织NHE1 m RNA的的表达特点。结果造模后第1、3、7、14、30及60天时,模型组大鼠海马组织匀浆中NHE1蛋白表达较对照组增高(P<0.05),且模型组大鼠海马组织NHE1蛋白表达从第1天开始增高、第14天时达到高峰、第30天和第60天逐渐下降(P<0.05);造模后第14天时,模型组大鼠海马组织不同亚区NHE1阳性表达较对照组相应区域增强,且NHE1m RNA水平也高于对照组(P<0.05)。结论 氯化锂-匹罗卡品点燃模型癫痫大鼠海马组织中NHE1表达随时间呈动态变化,且在第14天表达最高,提示NHE1可能与癫痫的发生发展过程密切相关。 展开更多

关键词 大鼠 海马 钠氢交换体1 癫痫模型 氯化锂-匹罗卡品

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Fas和FasL在Na^+/H^+交换器-1抑制诱导缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡中的作用 被引量：2

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作者 陆俊羽 姚伟 +3 位作者 钱桂生 吴国明 陈维中 李淑平 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期515-518,F0005,共5页

目的探讨Fas、FasL在Na+/H+交换器1(NHE1)抑制所诱导的缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)凋亡中的作用。方法将转染NHE1特异性核酶基因的大鼠PASMCs置于缺氧条件下(O2的体积分数低于1%)培养。缺氧培养2、6、12、24和48h后用原位末端标记... 目的探讨Fas、FasL在Na+/H+交换器1(NHE1)抑制所诱导的缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)凋亡中的作用。方法将转染NHE1特异性核酶基因的大鼠PASMCs置于缺氧条件下(O2的体积分数低于1%)培养。缺氧培养2、6、12、24和48h后用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况;半定量逆转录聚合酶链反应(sqRTPCR)方法检测细胞内fas和fasLmRNA表达变化;免疫细胞化学法检测细胞内Fas和FasL蛋白表达变化。结果转染NHE1特异性核酶基因的大鼠PASMCs在缺氧培养时,其细胞凋亡率随缺氧时间的延长而逐渐升高,但细胞内fas、fasLmRNA及Fas、FasL蛋白表达与对照组细胞比较差异均无显著性。结论Fas/FasL死亡通路可能不参与NHE1抑制而诱导缺氧大鼠PASMCs凋亡的调控。 展开更多

关键词 ^^na^+/h^+交换器-1 FAS/FASL 细胞凋亡 基因表达 蛋门表达 平滑肌 血管 ^^na^+/h^+交换器 平滑肌细胞凋亡 FASL蛋白

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生姜对大鼠脑缺血再灌注脑组织NHE1和HIF-1α蛋白水平的影响 被引量：4

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作者 张留超 牛美兰 +4 位作者 王鹏 张振香 李萌萌 焦佳伟 何雄文 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第5期41-44,I0017,I0018,共6页

目的研究生姜压榨汁对脑缺血再灌注大鼠脑组织缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF1α)蛋白和Na^+/H^+交换蛋白1型(Na^+/H^+exchanger protein 1,NHE1)表达水平的影响。方法通过线栓法构建大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,... 目的研究生姜压榨汁对脑缺血再灌注大鼠脑组织缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF1α)蛋白和Na^+/H^+交换蛋白1型(Na^+/H^+exchanger protein 1,NHE1)表达水平的影响。方法通过线栓法构建大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,造模成功的大鼠随机分为模型组(MCAO)、生姜压榨汁高(H)、中(M)和低(L)剂量组,另设假手术组(CLT)为对照,各组大鼠经灌胃给药5 d,神经功能评分后,病理组织检查大脑病变情况,干湿重法测大脑含水量,免疫荧光法检测NHE1蛋白在脑组织中的表达,Western Blot法研究HIF-1α蛋白和NHE1蛋白水平。结果与CTL组比较,MCAO组大鼠出现明显的神经功能障碍,病理检测结果显示脑组织出现明显的梗死灶,脑组织含水量明显升高,NHE1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与MCAO组相比,生姜H、M剂量组能明显改善MCAO大鼠神经病学症状,显著缩小脑梗死面积,降低脑组织含水量,并降低NHE1蛋白和HIF-1α蛋白表达水平(P<0.05)。结论生姜对脑缺血再灌注大鼠脑组织可能发挥保护作用。 展开更多

关键词 缺血性脑卒中 生姜 ^^na^+/h^+交换蛋白1型 缺氧诱导因子1Α

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