为了探究KAP1.1基因(keratin-associated protein 1-1)潜在的生物学功能,利用分子生物学软件对绵羊KAP1.1基因编码蛋白进行了生物信息学分析。结果表明,该基因共编码182个氨基酸,为一可溶性不稳定蛋白。分子量为18788.45 u,等电点为6.0...为了探究KAP1.1基因(keratin-associated protein 1-1)潜在的生物学功能,利用分子生物学软件对绵羊KAP1.1基因编码蛋白进行了生物信息学分析。结果表明,该基因共编码182个氨基酸,为一可溶性不稳定蛋白。分子量为18788.45 u,等电点为6.03。另预测得知该蛋白含有6个磷酸化位点,无糖基化位点,不含有跨膜区和信号肽,推测其不是一个分泌型蛋白。亚细胞定位绵羊KAP1.1蛋白主要在线粒体和细胞核中发挥生物学功能,二级、三级结构显示,无规则卷曲是构成该蛋白的主要结构元件。物种间同源性分析显示,绵羊KAP1.1蛋白氨基酸组成与牛的相似度最高(85.9%)。展开更多
试验通过提取绒山羊皮肤总RNA,克隆角蛋白辅助蛋白1.1(keratin-associated protein 1.1,KAP1.1)基因,构建重组真核表达载体pEGFP-N3-KAP1.1,利用脂质体介导法将重组质粒转入内蒙古绒山羊体外培养的成纤维细胞中,研究该基因在真核细胞中...试验通过提取绒山羊皮肤总RNA,克隆角蛋白辅助蛋白1.1(keratin-associated protein 1.1,KAP1.1)基因,构建重组真核表达载体pEGFP-N3-KAP1.1,利用脂质体介导法将重组质粒转入内蒙古绒山羊体外培养的成纤维细胞中,研究该基因在真核细胞中的时空表达、亚细胞定位及表达规律。结果显示,2.0μg重组质粒和6.0μL脂质体的比例为适合本试验的最优化方案,KAP1.1基因能在内蒙古绒山羊成纤维细胞中成功表达,并在转染后48h转染率达到峰值,该基因在真核体外培养细胞中细胞核、细胞质和细胞膜上均有表达,但以细胞核表达量最强。展开更多
文摘为了探究KAP1.1基因(keratin-associated protein 1-1)潜在的生物学功能,利用分子生物学软件对绵羊KAP1.1基因编码蛋白进行了生物信息学分析。结果表明,该基因共编码182个氨基酸,为一可溶性不稳定蛋白。分子量为18788.45 u,等电点为6.03。另预测得知该蛋白含有6个磷酸化位点,无糖基化位点,不含有跨膜区和信号肽,推测其不是一个分泌型蛋白。亚细胞定位绵羊KAP1.1蛋白主要在线粒体和细胞核中发挥生物学功能,二级、三级结构显示,无规则卷曲是构成该蛋白的主要结构元件。物种间同源性分析显示,绵羊KAP1.1蛋白氨基酸组成与牛的相似度最高(85.9%)。
文摘试验通过提取绒山羊皮肤总RNA,克隆角蛋白辅助蛋白1.1(keratin-associated protein 1.1,KAP1.1)基因,构建重组真核表达载体pEGFP-N3-KAP1.1,利用脂质体介导法将重组质粒转入内蒙古绒山羊体外培养的成纤维细胞中,研究该基因在真核细胞中的时空表达、亚细胞定位及表达规律。结果显示,2.0μg重组质粒和6.0μL脂质体的比例为适合本试验的最优化方案,KAP1.1基因能在内蒙古绒山羊成纤维细胞中成功表达,并在转染后48h转染率达到峰值,该基因在真核体外培养细胞中细胞核、细胞质和细胞膜上均有表达,但以细胞核表达量最强。
