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幼畜超数排卵及体外胚胎生产技术在青海高原地区的应用研究 被引量:12
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作者 马世科 乔海生 +4 位作者 马利青 蔡其刚 关宏 闫风祥 郑立 《青海畜牧兽医杂志》 2015年第2期13-14,共2页
以6~7周陶赛特羔羊为超排对象,高原型藏羊为受体,首次在青海省开展JIVET技术应用试验。结果:羔羊超排采集卵母细胞27.16枚/只,体外受精率91.38%,卵裂率47.41%,胚胎移植怀孕率16.66%,产下5只纯种陶塞特羔羊,表明试验取得成功,综合分析... 以6~7周陶赛特羔羊为超排对象,高原型藏羊为受体,首次在青海省开展JIVET技术应用试验。结果:羔羊超排采集卵母细胞27.16枚/只,体外受精率91.38%,卵裂率47.41%,胚胎移植怀孕率16.66%,产下5只纯种陶塞特羔羊,表明试验取得成功,综合分析认为青海高寒牧区绵羊营养水平对JVET技术的应用具有重要的影响。 展开更多
关键词 青海高原地区 羔羊超数排卵 体外胚胎生产 高原型藏羊
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羊活体采卵及体外胚胎生产技术研究进展 被引量:1
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作者 马文奎 陈倩茹 +1 位作者 张鲁 刘国世 《黑龙江动物繁殖》 2024年第2期12-18,共7页
近年来,集约化养羊业发展迅速,对具有优良性状的羊需求量逐年增加。高效的繁殖技术为羊群体的扩大提供了重要技术基础,特别是超数排卵-胚胎移植技术已经在羊的繁育中得到了高效应用,同时以羊的活体采卵技术、体外胚胎生产技术、幼畜超... 近年来,集约化养羊业发展迅速,对具有优良性状的羊需求量逐年增加。高效的繁殖技术为羊群体的扩大提供了重要技术基础,特别是超数排卵-胚胎移植技术已经在羊的繁育中得到了高效应用,同时以羊的活体采卵技术、体外胚胎生产技术、幼畜超数排卵胚胎和移植技术等为核心的技术体系也取得了重要进展。活体采卵是指从活体家畜体内回收卵母细胞的技术,是羊体外胚胎生产的重要前提环节。文章对近年来羊体外胚胎生产的发展历程、相关技术应用现状及前景进行综述,以期为羊活体采卵、体外受精和胚胎移植技术的进一步完善提供参考。 展开更多
关键词 同期发情 超数排卵 体外受精 活体采卵 体外胚胎生产
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体外胚胎生产技术在国内肉羊快繁中的应用分析 被引量:2
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作者 岳媛 乌日嘎 +7 位作者 仇春娟 崔健 范利宏 包梅荣 汪立芹 安磊 张家新 田见晖 《黑龙江动物繁殖》 2023年第1期50-54,共5页
为了进一步提升活体采卵和体外受精技术(OPU-IVF)在肉羊商业化快繁的作用,明确今后研发方向和商业化模式,本研究以国内代表性体外胚胎工厂化生产基地为对象,对2019—2021年基地肉羊体外胚胎生产的部分数据和应用效果及其与高校、科研院... 为了进一步提升活体采卵和体外受精技术(OPU-IVF)在肉羊商业化快繁的作用,明确今后研发方向和商业化模式,本研究以国内代表性体外胚胎工厂化生产基地为对象,对2019—2021年基地肉羊体外胚胎生产的部分数据和应用效果及其与高校、科研院所的产学研合作情况进行了分析与总结。结果表明:2019—2021年黑头萨福克、黑头杜泊等优质品种肉羊胚胎生产规模持续扩大,生产效率明显提升;不同品种之间的采卵效率、卵子受精后的发育效率差异明显;腹腔镜法的整体效率比手术法更具优势,并可缩短采卵间隔,从而提高体外胚胎生产效率。以上结果说明,通过技术研发,近年来国内肉羊体外胚胎生产规模和技术水平发展迅速,使我国在国际上率先实现了肉羊OPU-IVF技术的大规模商业应用。 展开更多
关键词 体外胚胎生产 肉羊 活体采卵-体外受精 快繁 胚胎移植
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肉羊体外胚胎生产技术规模化应用中品种的影响
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作者 陈莹 陈大勇 +9 位作者 乌日嘎 仇春娟 范利宏 包梅荣 岳媛 梁红艳 张家新 田见晖 安磊 汪立芹 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2451-2459,共9页
旨在分析品种因素对OPU-IVEP商业化快繁效率的影响。本研究以经品种鉴定的健康8月龄至3周岁黑头萨福克、黑头杜泊、德克赛尔肉用种母羊为试验供体,在内蒙古赛诺种羊科技有限公司,采用OPU技术获取卵母细胞并进行体外胚胎工厂化生产或经... 旨在分析品种因素对OPU-IVEP商业化快繁效率的影响。本研究以经品种鉴定的健康8月龄至3周岁黑头萨福克、黑头杜泊、德克赛尔肉用种母羊为试验供体,在内蒙古赛诺种羊科技有限公司,采用OPU技术获取卵母细胞并进行体外胚胎工厂化生产或经腹腔镜输精和手术冲胚获得体内胚胎,进行胚胎移植,记录卵母细胞回收、胚胎发育以及移植妊娠的相关数据,进行统计分析。比较不同品种在体外胚胎规模化生产中卵母细胞回收效率、卵母细胞体外受精和胚胎发育能力、胚胎移植妊娠和产羔效率等方面的差异;同时,还比较了不同品种体内、外胚胎生产技术的应用效果。结果表明:1)3个品种间卵母细胞回收率差异极显著(P<0.01),黑头杜泊回收效率最高;2)3个品种的体外受精卵裂率无显著差异(P>0.05),但德克赛尔羊的囊胚发育率极显著高于其他两个品种(P<0.01);3)无论体内胚胎还是体外胚胎生产移植,各品种间胚胎移植受胎率和平均产羔数均无显著差异(P>0.05),且各品种内,体内胚胎和体外胚胎移植的平均受胎率和产羔率均无显著差异(P>0.05)。综上所述,在工厂化、规模化应用绵羊体外胚胎生产技术过程中,不同品种间卵泡发育、回收卵母细胞数、囊胚发育率等存在差异,平均卵泡数和平均回收卵母细胞最少的德克塞尔羊的囊胚发育率最高;移植后受胎和产羔情况在不同品种间无显著差异,体内胚胎和体外胚胎单次生产获得的后代数也无显著差异,但OPU-IVEP的供体利用率远大于MOET。 展开更多
关键词 品种 肉羊 体外胚胎生产 胚胎移植 规模化 应用
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纳米颗粒在配子及胚胎生物技术中的应用研究进展
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作者 海桂萍 李俊 +4 位作者 刘倩 刘昱成 万鹏程 阿布力孜·吾斯曼 傅祥伟 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期64-70,共7页
辅助生殖技术(ART)在不孕不育诊治、濒危物种保存、良种家畜快速高效扩繁中具有重要应用价值。ART已常规开展并在世界范围内应用,但该技术面临着效率低下等挑战。非生理状态下的培养和保存可致配子和胚胎处于氧化应激状态,越来越多的研... 辅助生殖技术(ART)在不孕不育诊治、濒危物种保存、良种家畜快速高效扩繁中具有重要应用价值。ART已常规开展并在世界范围内应用,但该技术面临着效率低下等挑战。非生理状态下的培养和保存可致配子和胚胎处于氧化应激状态,越来越多的研究表明氧化应激是影响精子获能、损伤卵母细胞及胚胎发育能力的主要因素。近年来,创新性使用纳米颗粒(NPs)的相关技术和方案有效降低了配子氧化应激水平,提高了胚胎生物技术的效率。本文系统分析了NPs进入细胞的方式、分布及影响因素,深入探讨了NPs的作用机理,归纳NPs在配子、体外胚胎生产、低温保存中的应用,以期为ART总体效率的提高提供新方法和理论依据。 展开更多
关键词 纳米颗粒 配子 胚胎 体外胚胎生产 低温保存 氧化应激
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牛活体采卵和体外胚胎生产技术的应用现状和展望 被引量:5
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作者 邱金龙 史延 +1 位作者 李爽 张坤 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期557-565,604,共10页
活体采卵(ovum pick-up,OPU)结合体外胚胎生产(in vitro embryo production,IVP)技术能显著提高牛的繁殖效率,对奶牛和肉牛的良种扩繁具有重要意义。近年来,OPU/IVP技术在世界范围内迅速推广,逐步取代体内胚胎生产技术成为胚胎移植的主... 活体采卵(ovum pick-up,OPU)结合体外胚胎生产(in vitro embryo production,IVP)技术能显著提高牛的繁殖效率,对奶牛和肉牛的良种扩繁具有重要意义。近年来,OPU/IVP技术在世界范围内迅速推广,逐步取代体内胚胎生产技术成为胚胎移植的主要技术手段。但是,因其整体效率低下、操作技术难度较大等,该技术体系在我国尚处于起步阶段,是制约我国奶牛和肉牛遗传改良的重要因素。本文从OPU/IVP的发展现状入手,阐述了OPU/IVP技术的进展情况,并针对该技术在良种扩繁等方面的应用前景提出展望,旨在为完善我国OPU/IVP技术体系和提高牛繁殖生产效率提供参考,从而促进养牛业的发展。 展开更多
关键词 奶牛 肉牛 活体采卵 体外胚胎生产 良种扩繁
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羊体外胚胎高效生产技术研究现状 被引量:1
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作者 齐雅天 房晓欢 李俊杰 《黑龙江动物繁殖》 2023年第2期7-12,共6页
体外胚胎生产技术作为胚胎工程技术的基础,在提高繁殖潜力、加速良种繁育等多方面具有重要意义,包括卵母细胞采集、体外成熟、体外受精、体外胚胎培养等技术。文章主要介绍羊体外胚胎高效生产技术研究现状,分析卵母细胞体外成熟、体外... 体外胚胎生产技术作为胚胎工程技术的基础,在提高繁殖潜力、加速良种繁育等多方面具有重要意义,包括卵母细胞采集、体外成熟、体外受精、体外胚胎培养等技术。文章主要介绍羊体外胚胎高效生产技术研究现状,分析卵母细胞体外成熟、体外受精、体外胚胎培养影响因素,并提出了羊卵泡的预测标记、卵母细胞新型质检手段、模拟羊体内环境的培养体系,以期为羊卵母细胞体外培养技术的研究及在胚胎高效生产中的应用提供参考。 展开更多
关键词 绵羊 山羊 卵母细胞 体外胚胎生产技术 胚胎移植
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褪黑素在绵羊体外胚胎生产技术中的应用研究进展 被引量:1
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作者 冯肖艺 刘昱成 +2 位作者 王晶晶 赵学明 万鹏程 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期77-81,共5页
绵羊体外胚胎生产技术对于优良绵羊品种扩繁、绵羊新品种创制具有重要意义。然而,与体内胚胎相比,体外生产的绵羊胚胎发育潜力低、胚胎质量差,并且体外生产的绵羊胚胎冷冻效果不理想,这些都严重限制了该技术的产业化应用。褪黑素是一种... 绵羊体外胚胎生产技术对于优良绵羊品种扩繁、绵羊新品种创制具有重要意义。然而,与体内胚胎相比,体外生产的绵羊胚胎发育潜力低、胚胎质量差,并且体外生产的绵羊胚胎冷冻效果不理想,这些都严重限制了该技术的产业化应用。褪黑素是一种由松果体合成并分泌的物质,作为一种有效的抗氧化剂,可以减少氧化应激,在绵羊体外卵母细胞和体外胚胎的发育等方面起到非常重要的作用。本文介绍了褪黑素的功能和作用机制,并对褪黑素在绵羊体外胚胎生产技术中的应用进行阐述,旨在为褪黑素的进一步研究提供参考依据。 展开更多
关键词 褪黑素 绵羊 卵母细胞 体外胚胎生产 冷冻保存
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荷斯坦奶牛与和牛活体采卵-体外受精(OPU/IVF)体系的建立及应用 被引量:1
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作者 周璇 苏日娜 +8 位作者 李秀男 白苏友拉图 乌达巴拉 杨燕燕 乌日罕 何亭漪 乌吉斯古楞 王标 何牧仁 《畜牧与饲料科学》 2023年第3期1-6,共6页
[目的]研究牛活体采卵-体外受精(ovum pick-up and in vitro fertilization,OPU/IVF)体系,建立高效的牛体外胚胎生产系统。[方法]以从屠宰场采集的健康牛新鲜卵巢为试验材料,进行卵母细胞体外成熟、体外受精、体外胚胎培养相关条件的摸... [目的]研究牛活体采卵-体外受精(ovum pick-up and in vitro fertilization,OPU/IVF)体系,建立高效的牛体外胚胎生产系统。[方法]以从屠宰场采集的健康牛新鲜卵巢为试验材料,进行卵母细胞体外成熟、体外受精、体外胚胎培养相关条件的摸索,重点考查体外胚胎培养液中添加瘦素(leptin)对囊胚率的影响。选取13~15月龄健康荷斯坦奶牛及和牛各10头作为供体,进行活体采卵、卵母细胞体外成熟、体外胚胎生产,记录可用卵数及可用囊胚数,统计卵裂率、囊胚率;2个品种牛的体外冷冻胚胎解冻后,以荷斯坦奶牛为受体进行胚胎移植,移植后45 d统计妊娠率。[结果]添加30 U/mL的leptin可以显著(P<0.05)提高屠宰场来源牛体外胚胎的囊胚率。随机选择供体牛活体采卵,平均每头荷斯坦奶牛获得可用卵7.5枚,平均每头和牛获得可用卵8.1枚;荷斯坦奶牛及和牛的卵裂率分别为84.00%、82.71%,二者差异不显著(P>0.05)。体外培养条件下,平均每头荷斯坦奶牛获得可用囊胚4.3枚,平均每头和牛获得可用囊胚3.7枚;荷斯坦奶牛的囊胚率(57.33%)显著(P<0.05)高于和牛(45.68%)。体外胚胎解冻后移植,荷斯坦奶牛胚胎组的妊娠率为54.17%,和牛胚胎组的妊娠率为55.79%,二者差异不显著(P>0.05)。[结论]该研究建立的OPU/IVF体系可以有效提高优质母牛的利用效率,降低生产成本,为牛体外胚胎生产系统的优化提供了参考。 展开更多
关键词 荷斯坦奶牛 和牛 活体采卵-体外受精 体外胚胎生产
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西门塔尔牛体外胚胎生产效率分析
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作者 孙伟 赵勇超 +10 位作者 吕和 王超 王茂俊 王飞飞 刘涛 郭雅欣 杜贺阳 包向男 吴蒙 曹贵方 李喜和 《草食家畜》 2023年第2期14-19,26,共7页
【目的】文章旨在分析西门塔尔牛活体采卵-体外受精(OPU-IVF)体外胚胎生产效率的影响因素,为提高西门塔尔牛体外胚胎生产效率、优化西门塔尔牛体外胚胎生产流程提供生产依据。【方法】本实验以未经激素处理的西门塔尔牛卵丘卵母细胞复合... 【目的】文章旨在分析西门塔尔牛活体采卵-体外受精(OPU-IVF)体外胚胎生产效率的影响因素,为提高西门塔尔牛体外胚胎生产效率、优化西门塔尔牛体外胚胎生产流程提供生产依据。【方法】本实验以未经激素处理的西门塔尔牛卵丘卵母细胞复合体(COCs)、进口肉牛冻精为实验材料,通过卵母细胞活体采集(OPU)、体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)、早期胚胎体外培养(IVC)等技术手段,对体外受精后第7 d囊胚率进行统计分析。【结果】不同公牛精液对囊胚发育有影响,不同供体母牛对囊胚发育率影响显著。【结论】相同卵母细胞利用率水平的供体母牛,回收COCs体外受精后,囊胚率与冻精有关(P<0.05);不同卵母细胞利用率水平的供体母牛,回收COCs体外受精后,囊胚率随卵母细胞利用率升高而升高(P<0.05)。 展开更多
关键词 西门塔尔牛 体外胚胎生产 活体采卵-体外受精技术
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基础成熟液和卵巢保存温度对牛体外胚胎发育的影响 被引量:2
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作者 黄承俊 赵刚 +2 位作者 李宁 杜学海 张文军 《现代畜牧兽医》 2022年第8期16-18,共3页
试验旨在研究试剂A应用于牛基础成熟液时的体外胚胎发育效果以及牛卵巢常温保存的可行性。试验分为两部分,试验1为对比试剂B与试剂A作为牛基础成熟液对体外胚胎发育的影响,试验2为对比常温(23℃)与37℃保存卵巢对体外胚胎发育的影响,分... 试验旨在研究试剂A应用于牛基础成熟液时的体外胚胎发育效果以及牛卵巢常温保存的可行性。试验分为两部分,试验1为对比试剂B与试剂A作为牛基础成熟液对体外胚胎发育的影响,试验2为对比常温(23℃)与37℃保存卵巢对体外胚胎发育的影响,分别测定两对比条件下获得的卵母细胞数、卵裂率、囊胚率。结果显示:试剂A的囊胚率达到了19.04%,显著低于试剂B(P<0.05)。卵巢常温(23℃)保存时,其囊胚率可达21.75%,显著低于37℃保存条件下(P<0.05)。研究表明,试剂A可用于牛体外胚胎生产体系的建立,但效果与试剂B存在一定差距;卵巢可在常温条件下保存,但其效果亦不如37℃保存条件。 展开更多
关键词 体外胚胎生产 体外成熟 卵巢保存温度
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杜泊羊体外胚胎生产效率的影响因素 被引量:3
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作者 陈大勇 汪立芹 +3 位作者 范利宏 仇春娟 李俊龙 黄俊成 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期63-67,共5页
为了将绵羊体外胚胎发育技术应用于生产,采用活体采卵-体外受精的方法,对准备淘汰的杜泊羊进行外源激素处理,并对可能影响体外胚胎发育及移植后受胎效率如FSH剂量、公羊个体、获取卵母细胞方式等因素进行研究,结果发现:(1)每只供体注射F... 为了将绵羊体外胚胎发育技术应用于生产,采用活体采卵-体外受精的方法,对准备淘汰的杜泊羊进行外源激素处理,并对可能影响体外胚胎发育及移植后受胎效率如FSH剂量、公羊个体、获取卵母细胞方式等因素进行研究,结果发现:(1)每只供体注射FSH 240IU或420IU剂量对获得卵母细胞数、胚胎数及体外受精卵裂率没有明显影响(P>0.05);(2)不同公羊个体对卵母细胞体外受精效率有显著影响,但胚胎移植后受胎率没有明显影响(P>0.05);(3)活体采卵与屠宰场采卵方式相比,对卵母细胞的回收没有影响(12.24vs 13.84,P>0.05),但活体采集卵母细胞受精后的平均胚胎数显著低于后者(7.50vs 11.17,P<0.05),卵裂率极显著低于屠宰场采卵方式(60.92%vs 81.75%,P<0.01);(4)上述几组试验对受胎率都没有影响(P>0.05)。由此可见,供体使用240IU的FSH,选择受精效率好的公羊,能显著提高杜泊羊体外胚胎生产效率;离体采集卵母细胞体外发育效率高于活体采卵。 展开更多
关键词 杜泊羊 体外胚胎生产 卵母细胞 卵裂率 受胎率
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牛胚胎发育早期MnSOD,Glut-1,Hsp70,IGF-Ⅱ,IFN-t基因表达差异的研究 被引量:2
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作者 孙美玉 陈静波 +3 位作者 毋状元 郑新宝 董红 霍飞 《草食家畜》 2011年第1期39-43,共5页
目的:研究体外受精生产的牛胚胎在发育早期各个阶段MnSOD,Glut-1,Hsp70,IGF-Ⅱ,IFN-t基因的表达差异,阐明体外培养胚胎发育阻滞和胎儿发育异常的分子机理和胚胎阻滞有关的目的基因,为完善体外培养系统、提高IVP胚胎质量和确保IVP后代正... 目的:研究体外受精生产的牛胚胎在发育早期各个阶段MnSOD,Glut-1,Hsp70,IGF-Ⅱ,IFN-t基因的表达差异,阐明体外培养胚胎发育阻滞和胎儿发育异常的分子机理和胚胎阻滞有关的目的基因,为完善体外培养系统、提高IVP胚胎质量和确保IVP后代正常发育提供理论依据。方法:提取体外生产的不同阶段牛胚胎总RNA,以β-actin基因为内对照,用半定量RT-PCR技术检测胚胎发育各时期MnSOD,Glut-1,Hsp70,IGF-Ⅱ,IFN-t基因在mRNA水平的表达情况。结果:在卵母细胞中,MnSOD及IFN-t基因呈高表达,Glut-1、Hsp70及IGF-Ⅱ呈低表达;在8-16细胞、桑葚胚及囊胚中,MnSOD及IGF-Ⅱ基因呈高表达,而Glut-1、Hsp70及IFN-t基因则呈低表达。 展开更多
关键词 体外胚胎 发育早期 基因表达调控
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牛活体采卵研究进展及其应用前景 被引量:1
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作者 蓝康澍 田欣 +1 位作者 蓝昕蕊 王勇胜 《动物医学进展》 北大核心 2022年第10期105-111,共7页
活体采卵(ovum pick-up,OPU)是一种使用非手术方法从供体母牛中获得卵母细胞的方法,能够在对供体损伤较小的情况下获得较多的优质卵母细胞,现已在各繁殖育种技术中得到广泛应用,但活体采卵仍存在效率较为低下、影响因素多、操作技术及... 活体采卵(ovum pick-up,OPU)是一种使用非手术方法从供体母牛中获得卵母细胞的方法,能够在对供体损伤较小的情况下获得较多的优质卵母细胞,现已在各繁殖育种技术中得到广泛应用,但活体采卵仍存在效率较为低下、影响因素多、操作技术及设备要求较高等问题。论文介绍了牛活体采卵发展历史,并对活体采卵的3种方法(盲采法、内窥镜法和超声波法)的操作及研究进展和活体采卵的影响因素进行了综述,最后分析了活体采卵在体外胚胎生产和体细胞核移植等技术的应用前景,旨在为活体采卵技术发展完善及在繁殖育种中的进一步推广和应用提供参考。 展开更多
关键词 体外胚胎生产 体细胞核移植 活体采卵
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OPU技术应用对牛产业的推动作用 被引量:1
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作者 鄂志强 金敬栋 高青山 《农业技术与装备》 2020年第8期149-150,共2页
活体采卵(Ovum Pick-up, OPU)可以通过供体母牛生产遗传基因稳定、来源清晰卵母细胞,再通过体外胚胎生产(IVP)可生产出具有明确系谱的优质胚胎。现在活体采卵已经成为牛辅助繁殖的关键步骤。可应用在肉牛、奶牛以及地方良种牛群扩繁和... 活体采卵(Ovum Pick-up, OPU)可以通过供体母牛生产遗传基因稳定、来源清晰卵母细胞,再通过体外胚胎生产(IVP)可生产出具有明确系谱的优质胚胎。现在活体采卵已经成为牛辅助繁殖的关键步骤。可应用在肉牛、奶牛以及地方良种牛群扩繁和遗传改良中。文章综述论了OPU的应用现状、对牛产业化生产的影响以及技术前景,为OPU技术应用在生产实践中提供参考。 展开更多
关键词 活体采卵 体外胚胎生产
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青春期前山羊卵母细胞体外生产胚胎的研究进展
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作者 张春香 任有蛇 +1 位作者 曹宁贤 岳文斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第4期153-157,共5页
青春期前卵母细胞的来源广泛,作为体外胚胎生产的试验材料,国外这方面的研究报道较多。作者就青春期前山羊卵母细胞体外成熟、成熟后细胞质中细胞器的变化情况、体外受精技术和胚胎体外培养等方面研究情况作一综述,供研究者参考。
关键词 卵母细胞 体外胚胎 青春期前 山羊
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精子介导法生产转基因牦牛杂种胚胎的研究
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作者 字向东 梁冠男 陈绍威 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期168-173,共6页
研究外源DNA转染对牦牛精子体外受精(IVF)、早期胚胎发育以及绿色荧光蛋白(GFP)基因在早期胚胎表达的影响。用构建融合人乳铁蛋白基因绿色荧光蛋白表达载体(pAcGFP1-hLF)转染的牦牛精子IVF黄牛卵母细胞,生产的胚胎在荧光显微镜下观察GF... 研究外源DNA转染对牦牛精子体外受精(IVF)、早期胚胎发育以及绿色荧光蛋白(GFP)基因在早期胚胎表达的影响。用构建融合人乳铁蛋白基因绿色荧光蛋白表达载体(pAcGFP1-hLF)转染的牦牛精子IVF黄牛卵母细胞,生产的胚胎在荧光显微镜下观察GFP表达情况。结果显示,用环形质粒、线性质粒pAcGFP1-hLF转染的精子及未转染精子IVF后的卵裂率分别为56.4%、54.8%和61.0%,线性转染的囊胚率显著低于环形转染(17.7%与35.7%)。环形质粒转染的精子用DNaseⅠ消化、不消化及未转染的精子IVF后卵裂率分别为44.8%、55.2%和56.3%,囊胚率分别为33.3%、33.3%和30.2%。未经DNaseⅠ消化洗涤的环形质粒组GFP胚胎阳性率显著高于线性质粒组(99.3%与76.6%);DNaseⅠ消化组GFP胚胎阳性率极显著低于不消化组(25.4%与99.3%)。结果表明,用环形质粒DNA转染牦牛精子不会影响其受精及早期胚胎发育能力,但DNaseⅠ消化洗涤显著降低GFP胚胎阳性率。 展开更多
关键词 牦牛 精子介导基因转移 胚胎体外生产 绿色荧光蛋白
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