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TaqMan实时定量RT-PCR检测轮状病毒G4型
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作者 陈继军 韩跃武 +2 位作者 胡广宏 白慕群 周旭 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第11期1260-1263,共4页
目的应用基于TaqMan探针的实时定量RT-PCR检测轮状病毒(Rotavirus,RV)G4型VP7基因。方法从G1、G2、G3和G4型轮状病毒Vero细胞培养物中提取病毒总RNA,分别进行RT-PCR和实时定量RT-PCR,检测引物及探针的特异性;构建含轮状病毒G4型VP7基因... 目的应用基于TaqMan探针的实时定量RT-PCR检测轮状病毒(Rotavirus,RV)G4型VP7基因。方法从G1、G2、G3和G4型轮状病毒Vero细胞培养物中提取病毒总RNA,分别进行RT-PCR和实时定量RT-PCR,检测引物及探针的特异性;构建含轮状病毒G4型VP7基因的质粒,制备RNA参考品,绘制实时定量RT-PCR标准曲线;验证实时定量RT-PCR的灵敏度和精密性;对5个轮状病毒G4型培养物及G1、G2和G3型各3个病毒培养物进行检测,分析其实际应用性。结果以轮状病毒G4型VP7基因引物和探针只能从G4型轮状病毒总RNA中扩增出目的基因或检测到荧光信号的扩增,未在G1、G2、G3型轮状病毒总RNA中扩增出目的基因或检测到荧光信号的扩增;在2.34×107~2.34×103拷贝/μl范围内,反应扩增效率大于90%,R2大于0.98;该方法可检出100数量级的RNA样品,且试验内及试验间变异系数分别小于2.5%和4%;用建立的实时定量RT-PCR只检出5个轮状病毒G4型样品,而G1、G2、G3型样品均未检出。结论 TaqMan实时定量RT-PCR是一种灵敏度较高、特异性和精密性良好的定量检测轮状病毒G4型的方法。 展开更多
关键词 轮状病毒属 g4 实时定量RT-PCR TAQMAN探针
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脑梗塞痴呆病人血清乙酰胆碱酯酶G_4同工酶活性测定及其意义的研究 被引量:4
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作者 申敬顺 雷征霖 +2 位作者 刘喜珍 王旭 孙晓培 《脑与神经疾病杂志》 2001年第1期28-29,共2页
目的 :探讨胆碱能变化与脑血管痴呆临床特征的关系 ,并为寻找防治对策提供依据。方法 :本研究采用聚丙稀酰胺凝胶 (PAA)电泳法对脑梗塞及脑梗塞痴呆病人进行血清乙酰胆碱酯酶 (Ach E)活性研究 ,使用光密度计测定G4型 Ach E活性。结果 :... 目的 :探讨胆碱能变化与脑血管痴呆临床特征的关系 ,并为寻找防治对策提供依据。方法 :本研究采用聚丙稀酰胺凝胶 (PAA)电泳法对脑梗塞及脑梗塞痴呆病人进行血清乙酰胆碱酯酶 (Ach E)活性研究 ,使用光密度计测定G4型 Ach E活性。结果 :确认出两种 Ach E同工酶 ,其中以 G4型 Ach E为主 ,皮质梗塞组 Ach E活性较正常对照组有显著降低。结论 :脑血管性痴呆 Ach 展开更多
关键词 脑梗塞 脑血管性痴呆 血清 乙酰胆碱酯酶 g4同工酶
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LM2500+G4型燃气轮机在分布式能源系统中的应用 被引量:6
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作者 景倩 《华电技术》 CAS 2013年第12期14-15,35,共3页
介绍了LM2500+G4型燃气轮发动机的结构改进和性能优化,论述了先进的干式低排放技术,分析了热电冷联产系统在节能环保方面的优点,分析结果表明,发展以天然气为燃料的热电冷联产系统是非常必要的。
关键词 LM2500+g4燃气轮机 热电冷联产 干式低排放技术 节能环保
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G4型髓母细胞瘤患儿预后影响因素及生存状况分析
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作者 武跃芳 孙艳玲 +3 位作者 武万水 杜淑旭 李苗 孙黎明 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期686-691,共6页
目的探讨儿童G 4型髓母细胞瘤(MB)患者的生存状况及其预后影响因素。方法回顾性分析2016年5月至2020年8月儿科收治的G4型MB患儿(随访至2022年8月)的临床资料,采用Kaplan-Meier法计算总体生存(OS)率和无进展生存(PFS)率,采用Log-rank检... 目的探讨儿童G 4型髓母细胞瘤(MB)患者的生存状况及其预后影响因素。方法回顾性分析2016年5月至2020年8月儿科收治的G4型MB患儿(随访至2022年8月)的临床资料,采用Kaplan-Meier法计算总体生存(OS)率和无进展生存(PFS)率,采用Log-rank检验比较组间生存率差异,采用Cox回归模型分析影响预后的因素。结果纳入145例G4型MB患儿,男106例、女39例,中位确诊年龄7.5(5.7~9.6)岁。M0期91例,M+期54例(M1期1例、M2期12例、M3期41例);病理分型为经典型127例、促纤维增生/结节型(DN)8例、大细胞/间变型(LC/A)8例、广泛结节型(EN)1例、未分型1例。中位随访时间为47.9(36.5~59.3)月,复发37例。患儿5年OS率和PFS率分别为(80.8±3.4)%和(55.4±4.7)%。Cox回归分析结果提示M+期、MYCN扩增、Chr12 p+变异是影响预后的独立危险因素(P<0.05)。结论M+期、MYCN扩增的G4型MB患儿预后相对较差。Chr12 p+可能与患儿预后相关,但仍有待更大样本的临床研究进行证实。 展开更多
关键词 g4髓母细胞瘤 预后 影响因素 儿童
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出租车上的三种IC卡计价器
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作者 张建新 《城市公共交通》 1997年第5期25-26,共2页
关键词 出租汽车业 IC卡计价器 QSJ-g4计价器 SJQ-08计价器 SJQ-06计价器 经营管理
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GⅡ-4型诺如病毒体外结合唾液HBGAs受体的检测与分析 被引量:8
6
作者 张绪富 戴迎春 +2 位作者 夏仁飞 周迎春 吕志平 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期560-562,共3页
目的建立诺如病毒(Norovirus,NoV)结合唾液HBGAs受体的实验方法、验证2株GⅡ-4型NoV毒株与我国人群唾液HBGAs的结合方式。方法收集健康志愿者唾液标本,采用凝集抑制实验法检测唾液中HBGAs血型物质,用EIA法检测NoV VLPs、阳性毒株与HBGA... 目的建立诺如病毒(Norovirus,NoV)结合唾液HBGAs受体的实验方法、验证2株GⅡ-4型NoV毒株与我国人群唾液HBGAs的结合方式。方法收集健康志愿者唾液标本,采用凝集抑制实验法检测唾液中HBGAs血型物质,用EIA法检测NoV VLPs、阳性毒株与HBGAs的结合情况。结果63份标本检出O型21例(占33.3%),B型14例(占22.2%),A型和非分泌型各13例(分别占20.6%),AB型2例(占3.2%)。rVA387、2株GⅡ-4型毒株均能结合分泌型,与非分泌型唾液不反应。结论本研究成功建立了NoV结合唾液HBGAs受体的实验方法,通过NoV毒株与HBGAs相互作用的研究有助于了解NoV的宿主适应特性及病毒进化和流行规律;同时为筛选防治我国人群的抗NoV药物提供技术平台。 展开更多
关键词 诺如病毒 HBgAs受体 gⅡ-4 结合方式
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GⅡ.4 Sydney[P31]型诺如病毒GZ19株进化及其受体结合特征分析
7
作者 王金冬 马亚林 段招军 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期531-536,544,共7页
目的分析我国GⅡ.4型诺如病毒(norovirus,NoV)GZ19株的进化特征,并明确其结合组织血型抗原(histoblood group antigens,HBGAs)受体的能力和方式。方法根据GZ19株中的ORF2区序列,构建进化树,并分析其在HBGAs结合位点(HBGA binding sites,... 目的分析我国GⅡ.4型诺如病毒(norovirus,NoV)GZ19株的进化特征,并明确其结合组织血型抗原(histoblood group antigens,HBGAs)受体的能力和方式。方法根据GZ19株中的ORF2区序列,构建进化树,并分析其在HBGAs结合位点(HBGA binding sites,HBSs)和关键阻断表位的氨基酸序列。采用原核表达系统表达P颗粒并进行纯化,获得的蛋白经SDS-PAGE和间接ELISA法鉴定后,采用唾液结合试验和寡糖结合试验分析P颗粒的糖结合特征。结果GZ19株属于GⅡ.4 Sydney[P31]谱系,其受体结合位点和阻断表位的氨基酸序列相对保守,与近5年其他GⅡ.4Sydney[P31]毒株具有较高的同源性,而与GⅡ.4 Sydney 2012原型株和GⅡ.4 Sydney[P16]株的差异较大。P颗粒仅与A、B、O、AB分泌型唾液和H-di寡糖结合。结论GZ19株代表目前GⅡ.4 Sydney[P31]NoV的进化方向,P颗粒的成功表达及其与HBGAs受体的结合特征分析,为研究我国GⅡ.4 NoVs的流行进化规律及疫苗开发奠定了基础。 展开更多
关键词 诺如病毒 gⅡ.4 P颗粒 人类组织血抗原
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贵州省2011年急性胃肠炎诺如病毒的哨点监测及其基因特征分析 被引量:1
8
作者 阎岩 吴悦 +2 位作者 郭军 田克诚 王定明 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期51-55,共5页
为了解贵州省2011年诺如病毒的基因型,监测了2011年5月至12月于贵州省人民医院就诊的急性胃肠炎病例,收集粪便标本,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)初步鉴定,并对阳性株的VP1基因区克隆及测序。检测标本70份,GⅠ型... 为了解贵州省2011年诺如病毒的基因型,监测了2011年5月至12月于贵州省人民医院就诊的急性胃肠炎病例,收集粪便标本,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)初步鉴定,并对阳性株的VP1基因区克隆及测序。检测标本70份,GⅠ型诺如病毒阳性1株,阳性率1.43%,GⅡ型诺如病毒阳性34株,阳性率48.57%,获得7份GⅡ型诺如病毒VP1基因序列,3株为GⅡ.4亚型,为新型变异株(GⅡ4 2011),与GⅡ4 2006b变异株的亲缘关系最近,有1个氨基酸位发生了回复突变;4株为GⅡ.3亚型,分为2个基因簇,1簇与2008~2009年韩国株(HM635118)及上海株(GU991355)的亲缘关系最近,1簇与2010年日本株(AB629943)及2007年印度株(EU921389)等的亲缘关系最近,有4个氨基酸位点易发生回复突变。 展开更多
关键词 诺如病毒 g4 gⅡ3 VP1基因 贵州
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1G—4型灭茬机使用技术要点
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作者 丛维军 侯春华 《吉林农村机械化》 1992年第6期13-14,共2页
关键词 灭茬机 1g-4 使用
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实时逆转录环介导等温扩增检测GⅡ.4型诺如病毒的研究 被引量:3
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作者 赵剑虹 张登城 +3 位作者 高艳 焦洋 张士尧 李书明 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第8期945-948,960,共5页
目的建立快速检测诺如病毒GⅡ.4型的实时逆转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP)。方法选取GⅡ.4型诺如病毒的ORF1与ORF2接头处较为保守的基因序列设计RT-LAMP引物并进行筛选,优化反应条件,分析方法的灵敏度、分析特异性和稳定性,采用优化... 目的建立快速检测诺如病毒GⅡ.4型的实时逆转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP)。方法选取GⅡ.4型诺如病毒的ORF1与ORF2接头处较为保守的基因序列设计RT-LAMP引物并进行筛选,优化反应条件,分析方法的灵敏度、分析特异性和稳定性,采用优化的方法检测40例临床病毒性腹泻样本,结果与实时荧光逆转录PCR(RT-PCR)比较。结果该研究建立的诺如病毒GⅡ.4型RT-LAMP的最佳反应温度为65℃;该方法检测GⅠ型和GⅡ非诺如病毒4型、轮状病毒、札如病毒、星状病毒、腺病毒、CA16、EV71、CA6和CA10等常见10种其他腹泻病毒的结果为阴性;该方法对诺如病毒GⅡ.4型的检测能力与实时荧光RT-PCR相当;与实时荧光RT-PCR相比,该研究建立的RT-LAMP法检测诺如病毒GⅡ.4型阳性样本和诺如病毒阴性样本的符合率为100%。结论该研究建立的诺如病毒GⅡ.4型RT-LAMP快速检测方法灵敏度高,特异性好,为建立诺如病毒其他基因型的RT-LAMP检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 诺如病毒gⅡ.4 实时逆转录环介导等温扩增 检测
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基于中和表位的GⅡ.4型重组诺如病毒VP1蛋白病毒样颗粒抗原含量检测方法的建立及验证 被引量:1
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作者 唐芳 韩子泊 +5 位作者 侯俊伟 杜丽芳 栗子谦 靳玉琴 雷泽华 李启明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第11期1257-1262,共6页
目的建立基于中和表位的GⅡ.4型重组诺如病毒(Norovirus,NoV)VP1蛋白病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)抗原含量检测方法,并进行验证,以用于重组NoV疫苗质量控制。方法应用ELISA和HBGA-VLP阻断试验筛选中和性单克隆抗体,并筛选配对抗... 目的建立基于中和表位的GⅡ.4型重组诺如病毒(Norovirus,NoV)VP1蛋白病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)抗原含量检测方法,并进行验证,以用于重组NoV疫苗质量控制。方法应用ELISA和HBGA-VLP阻断试验筛选中和性单克隆抗体,并筛选配对抗体,分别作为包被抗体和检测抗体,建立GⅡ.4型重组NoV VP1蛋白VLP双抗夹心ELISA抗原定量检测方法。确定方法的线性检测范围,并对方法的专属性、准确性和精密性进行验证。结果27株GⅡ.4 VLP特异性ELISA检测阳性的杂交瘤细胞克隆中,有12株GⅡ.4型阻断抗体检测呈阳性,选择具有GⅡ.4型阻断活性的特异性单抗2H7-C5和2E6-B3作为双抗夹心抗体对,用于建立GⅡ.4型重组NoV VP1蛋白VLP双抗夹心ELISA抗原定量检测方法。该方法的线性测定范围为15.63~250 ng/mL,标准曲线R2均>0.98;准确性验证的加标回收率在72.23%~134.03%之间;重复性验证的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为7.06%,中间精密性验证的RSD分别为8.04%和9.14%。结论建立了基于中和表位的GⅡ.4型重组NoV VP1蛋白VLP抗原含量检测方法,该方法专属性、准确性、精密性良好,可用于GⅡ.4型重组NoV VP1蛋白VLP定量检测,为GⅡ.4抗原相关疫苗研发中质量控制和检定提供了技术支持。 展开更多
关键词 gⅡ.4诺如病毒 VP1蛋白 病毒样颗粒 中和表位 酶联免疫吸附测定
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G4-73型离心风机叶片翼型失速特性的数值研究 
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作者 王松岭 张磊 +1 位作者 刘哲 吴正人 《热力发电》 CAS 北大核心 2011年第2期19-23,共5页
由于电站常用的G4-73型离心风机在气流掠过翼型时流速较低,雷诺数与航空翼型的差异较大,因此有必要对G4-73型离心风机翼型失速性能进行研究。对翼型附近网格采用局部加密,运用FLUENT软件对不同冲角下气流的流动情况进行了数值模拟,发现... 由于电站常用的G4-73型离心风机在气流掠过翼型时流速较低,雷诺数与航空翼型的差异较大,因此有必要对G4-73型离心风机翼型失速性能进行研究。对翼型附近网格采用局部加密,运用FLUENT软件对不同冲角下气流的流动情况进行了数值模拟,发现风机叶片翼型失速发生在非工作面。通过分析冲角与分离点位置的关系,以及由失速区域的流动情况得出:为保证风机安全运行,冲角应小于-20°;大冲角的情况下,处于翼型吸力面在X方向上相对翼型总弦长C的位置X/C=0.5处的漩涡最强烈,此漩涡将危及风机的安全运行。 展开更多
关键词 g4-73离心风机 叶片 失速 边界层分离 数值模拟 冲角
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G4—73型通风机应用性能缺陷与改造
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作者 吴吉南 王国华 《安全》 2003年第3期16-19,共4页
投入运行不久的G4—73—11№25D主要通风机,发现其性能有重大缺陷,实际性能只有理论性能的37%~25%,严重制约着矿井生产发展,被迫进行一系列改造实践。其中,改造风机进风口衔接方式,性能提高8%~10%;更换配套电机,提高转速,性能提... 投入运行不久的G4—73—11№25D主要通风机,发现其性能有重大缺陷,实际性能只有理论性能的37%~25%,严重制约着矿井生产发展,被迫进行一系列改造实践。其中,改造风机进风口衔接方式,性能提高8%~10%;更换配套电机,提高转速,性能提高20%左右。 展开更多
关键词 g4—73通风机 应用性能 缺陷 改造 煤矿
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导致发动机拉缸的责任分析
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作者 蔡康新 《汽车维护与修理》 2004年第2期52-52,共1页
某国有大型企业一辆EQ1108G16D4型汽车,配置康明斯6BT5.9涡轮增压型发动机,在一次常规维护中,仅换了一组活塞环,没过几天便出现发动机动力不如维护前,同时有耗机油现象。据初步分析可能是在装配过程中错将活塞环装成对口,导致动... 某国有大型企业一辆EQ1108G16D4型汽车,配置康明斯6BT5.9涡轮增压型发动机,在一次常规维护中,仅换了一组活塞环,没过几天便出现发动机动力不如维护前,同时有耗机油现象。据初步分析可能是在装配过程中错将活塞环装成对口,导致动力下降和烧机油现象的产生。 展开更多
关键词 EQ1108g16D4汽车 发动机 拉缸 气缸 6BT5.9涡轮增压发动机 维护 活塞环
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新天下磐英新推两款升级版本主板
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《新视窗》 2003年第1期45-45,共1页
关键词 主板 AC972.2芯片 磐英4g4E+ 磐英4P4E+ CPU
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