醛固酮对培养的大鼠血管平滑肌细胞蛋白合成和胶原合成的影响 被引量：6

1

作者 万国华 马淑平 +3 位作者 田大海 黄希正 潘秀峰 唐朝枢 《高血压杂志》 CSCD 1997年第3期178-181,共4页

探讨醛固酮（Ａｌｄ）对血管平滑肌细胞蛋白合成、胶原合成及分泌的影响。方法将培养的乳鼠ＶＳＭＣ分成１７组：正常对照组；Ａｌｄ１０－７组；安体舒通（Ｓｐｉ）１０－７ｍｏｌ／Ｌ组；血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）１０－７ｍｏｌ／Ｌ... 探讨醛固酮（Ａｌｄ）对血管平滑肌细胞蛋白合成、胶原合成及分泌的影响。方法将培养的乳鼠ＶＳＭＣ分成１７组：正常对照组；Ａｌｄ１０－７组；安体舒通（Ｓｐｉ）１０－７ｍｏｌ／Ｌ组；血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）１０－７ｍｏｌ／Ｌ组；碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）１０ｎｇ／Ｌ组；上述浓度的ＡｎｇⅡ和ｂＦＧＦ分别加入不同浓度的Ａｌｄ和Ｓｐｉ（１０－９，１０－８，１０－７ｍｏｌ／Ｌ）组成不同浓度的配伍组。观察３Ｈ－亮氨酸和３Ｈ－脯氨酸参入的影响，以计算对蛋白质和胶原合成的情况。结果Ａｌｄ明显增加ＶＳＭＣ的３Ｈ－脯氨酸参入，并加强ＡｎｇⅡ及ｂＦＧＦ剌激的３Ｈ亮氨酸和或３Ｈ－脯氨酸的参入及胶原分泌。Ｓｐｉ抑制ＶＳＭＣ的３Ｈ－亮氨酸和或３Ｈ－脯氨酸的参入并抑制ＡｎｇⅡ及ｂＦＧＦ的３Ｈ－亮氨酸和３Ｈ－脯氨酸的参入和胶原的分泌。结论Ａｌｄ作为局部因子，通过旁分泌或自分泌参与ＶＳＭＣ的蛋白合成、胶原合成和分泌。 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞 醛固酮 螺旋内酯 蛋白合成

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肝星状细胞和肝细胞合成及分泌胶原的比较研究 被引量：6

2

作者 钟敏章 郭传勇 +1 位作者 王炳芳 申振宇 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2003年第2期122-124,共3页

目的　为了明确肝细胞 (hepatocyte ,HC)和星状细胞 (hepaticstellatecell,HSC)在肝纤维化胶原合成和分泌中的作用。方法　本文在分离培养大鼠HC和SHC的基础上 ,用H L 脯氨酸掺入法和胶原酶消化法分析体外培养的HC和HSC胶原合成和分泌... 目的　为了明确肝细胞 (hepatocyte ,HC)和星状细胞 (hepaticstellatecell,HSC)在肝纤维化胶原合成和分泌中的作用。方法　本文在分离培养大鼠HC和SHC的基础上 ,用H L 脯氨酸掺入法和胶原酶消化法分析体外培养的HC和HSC胶原合成和分泌功能。结果　发现HC和HSC合成胶原的能力相似 (P >0 .0 5 ) ,而HSC分泌胶原能力较强 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。结论　HSC在肝脏胶原合成和分泌中可能起主要作用 ,但HC的作用也不容忽视。 展开更多

关键词 肝星状细胞 肝细胞合成 分泌胶原 比较研究

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虾青素对人源增生性瘢痕成纤维细胞的作用及机制研究 被引量：5

3

作者 葛海辉 陈志鹏 +1 位作者 李强 高海文 《中国美容医学》 CAS 2019年第1期97-99,共3页

目的:探讨虾青素对人源增生性瘢痕成纤维细胞的作用以及机制研究。方法:体外培养人源增生性瘢痕成纤维细胞分别加入0、10、50、100μmol/L浓度的虾青素作用24h,MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;ELISA法检测细胞中... 目的:探讨虾青素对人源增生性瘢痕成纤维细胞的作用以及机制研究。方法:体外培养人源增生性瘢痕成纤维细胞分别加入0、10、50、100μmol/L浓度的虾青素作用24h,MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;ELISA法检测细胞中的TIMP-1、MMP-1、COL-I及COL-Ⅲ的浓度;Western-blotting检测Bcl-2、α-SMA、TGF-β1及Bax等蛋白的表达。结果:不同浓度的虾青素使人源增生性瘢痕成纤维细胞活力降低而凋亡率增加;促凋亡蛋白Bax表达上调,抑制凋亡蛋白Bcl-2表达下调,同时抑制α-SMA、TGF-β1的表达及TIMP-1、MMP-1、COL-I、COL-Ⅲ合成。结论:虾青素能诱导人源增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡并抑制HSF细胞增殖、转化,减少胶原分泌,促进胶原酶解,继而有效改善增生性瘢痕的发生与发展。 展开更多

关键词 虾青素 人源增生性瘢痕成纤维细胞 细胞增殖 细胞凋亡 胶原合成

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加参方对TGF-β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及分化的实验研究 被引量：4

4

作者 于瑞 崔琳 +5 位作者 王幼平 李彬 王新陆 谢世阳 高原 朱明军 《世界科学技术-中医药现代化》 2015年第11期2260-2266,共7页

目的:研究加参方对转化生长因子β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及分化的影响,同时对其机制进行初步探讨。方法:出生1-3天的SD大鼠,无菌条件下取出心脏,胰酶消化心肌组织,分... 目的:研究加参方对转化生长因子β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及分化的影响,同时对其机制进行初步探讨。方法:出生1-3天的SD大鼠,无菌条件下取出心脏,胰酶消化心肌组织,分离心肌成纤维细胞(Cardiac Fibroblasts,CFs)。采用10 ng·m L-1浓度的TGF-β1诱导CFs,0.25 mg·m L-1浓度的加参方药液作用于CFs 24 h。采用CCK-8计数法检测加参方对CFs细胞增殖的影响;免疫荧光法检测加参方对CFsα-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth Muscle Actin,α-SMA)及Ⅰ型胶原的影响;羟脯氨酸测定法检测加参方对CFs胶原分泌的影响;实时荧光定量PCR(Real Time-PCR,RT-PCR)检测加参方对CFs Smad2、Smad3 m RNA表达的影响;蛋白印迹法(Western blot)检测加参方对CFs磷酸化Smad2、磷酸化Smad3(Phosphorylated-Smad2/3,P-Smad2/3)蛋白表达的影响。结果:与模型组相比,加参方可明显抑制CFs的细胞增殖(P<0.05),降低α-SMA及Ⅰ型胶原的表达量(P<0.05),减少CFs的胶原分泌(P<0.05)。同时,加参方组Smad2、Smad3 m RNA较模型组明显下调(P<0.05),P-Smad2、P-Smad3蛋白表达量也明显下降(P<0.05)。结论:加参方对TGF-β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞的细胞增殖、胶原分泌及向肌成纤维细胞的分化具有抑制作用,这可能与加参方抑制TGF-β1/Smads信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 加参方 心肌成纤维细胞 TGF-Β1 细胞增殖 胶原含量 TGF-β1/Smads信号通路

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美花石斛化学成分及其护肤活性研究 被引量：2

5

作者 颜莎 马瑞婧 +3 位作者 杨柳 李金玉 杨晓蓓 胡江苗 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期615-620,共6页

本文研究美花石斛(Dendrobium loddigesii)的化学成分及其护肤活性。采用色谱法从美花石斛粗提物中分离得到12个化合物,利用波谱学方法分别鉴定为拖鞋状石斛素(1)、2,4,7-三羟基-9,10-二氢菲(2)、3,6,9-三羟基-3,4-二氢蒽-1(2H)-酮(3)、... 本文研究美花石斛(Dendrobium loddigesii)的化学成分及其护肤活性。采用色谱法从美花石斛粗提物中分离得到12个化合物,利用波谱学方法分别鉴定为拖鞋状石斛素(1)、2,4,7-三羟基-9,10-二氢菲(2)、3,6,9-三羟基-3,4-二氢蒽-1(2H)-酮(3)、3,5′-二甲氧基-3′,4,9′-三羟基-7′,9-环氧-8,8′-木酚素(4)、5-(4-羟基-3-甲氧基苯乙基)-2-(4-羟基-3-甲氧基苯基)苯并二氢呋喃-3,7-二醇(5)、5-(4′′-羟基-3′′-甲氧基苯乙基)-2-(4′-羟基-5′-甲氧基苯基)-7-甲氧基苯并二氢吡喃-3-醇(6)、丁香脂素(7)、异香草醛(8)、松柏醛(9)、2-甲氧基-5-羟甲基苯酚(10)、二氢松柏醇(11)、4-羟基-3-甲氧基苯乙醇(12)。其中化合物3～5、7～12为首次从美花石斛中分离得到;化合物1、2、6(100μg/mL)有一定的自由基清除活性(>80%);化合物2(10μg/mL)有一定促胶原蛋白分泌活性(>20%)。结果显示从美花石斛的茎中分离得到了12个化合物,3个表现出良好的护肤活性。 展开更多

关键词 兰科 美花石斛 DPPH自由基清除 酪氨酸酶抑制活性 胶原蛋白分泌

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明胶降解物对大鼠真皮成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响 被引量：2

6

作者 许方婧伟 李潮 《中国微创外科杂志》 CSCD 2007年第8期815-817,共3页

目的 探讨组织工程心瓣膜常用人工基质材料--明胶发生降解后的产物对大鼠真皮成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响. 方法 利用酶组合技术制备明胶降解物（gelatin hydrolysate, GH）,采用超滤的方法分离出低分子量明胶降解物组分（g... 目的 探讨组织工程心瓣膜常用人工基质材料--明胶发生降解后的产物对大鼠真皮成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响. 方法 利用酶组合技术制备明胶降解物（gelatin hydrolysate, GH）,采用超滤的方法分离出低分子量明胶降解物组分（gelatin hydrolysate fraction, GHF）,用于5只SD大鼠真皮成纤维细胞的体外培养.采用CCK-8活细胞计数试剂盒（Cell Counting Kit-8）检测细胞的增殖情况,ELISA试剂盒检测细胞I型胶原蛋白的分泌情况. 结果 ①GHF对细胞增殖作用的浓度效应：在0.125～1.0 mg/ml浓度范围内,GHF对细胞的促增殖作用呈现先增强后减弱的趋势,在0.25 mg/ml时,细胞增殖率最大,达到（47.54±16.35）%;②GH与GHF对细胞增殖影响比较：GH与GHF均具有促进细胞增殖的作用,且在浓度为0.25 mg/ml时,促细胞增殖作用无显著差异[（27.04±15.21）% vs （39.22±15.55）%, P=0.177];③GH与GHF对细胞分泌Ⅰ型胶原蛋白影响比较：GHF组第3天时Ⅰ型胶原分泌量为（28.06±5.60）pg/105,与空白对照的（18.24±4.52）pg/105相比,有显著差异（P=0.006）,而GH组直至第6天时Ⅰ型胶原蛋白分泌量,与空白对照相比,无统计学意义（P=0.103）. 结论 分子量大小不同的明胶降解物GH与GHF均具有促进大鼠真皮成纤维细胞增殖的作用,且分子量较小的GHF还具有促进细胞I型胶原分泌的功能. 展开更多

关键词 明胶降解物 真皮成纤维细胞 细胞增殖 胶原分泌

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Ski在细胞增殖、转化、胶原分泌和炎性反应中的调节作用 被引量：1

7

作者 李平 周元国 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第11期1793-1798,共6页

ski是病毒癌基因v-ski的细胞内同源物,其蛋白产物Ski参与了造血细胞增殖、肌肉再生、骨和神经系统发育和突触投射以及组织创伤愈合、纤维化、肿瘤发生及增殖等多种生理病理过程。Ski作为一个多功能的转录调节因子,参与了多种分子信号的... ski是病毒癌基因v-ski的细胞内同源物,其蛋白产物Ski参与了造血细胞增殖、肌肉再生、骨和神经系统发育和突触投射以及组织创伤愈合、纤维化、肿瘤发生及增殖等多种生理病理过程。Ski作为一个多功能的转录调节因子,参与了多种分子信号的调节。该文将对Ski在细胞增殖、转化、胶原分泌和炎性反应中的调节作用及机制进行综述。 展开更多

关键词 SKI 增殖 细胞转化 胶原分泌 炎症

原文传递

角质形成细胞源TGF-β_1对成纤维细胞的作用 被引量：1

8

作者 厉孟 张琳西 +1 位作者 夏炜 郭树忠 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2006年第6期467-469,共3页

目的研究正常角质形成细胞分泌的TGF-β1对正常成纤维细胞生物学行为的影响。方法采用免疫组化方法检测角质形成细胞分泌TGF-β1,以不同浓度TGF-β1抗体阻断角质形成细胞条件培养液中的TGF-β1,观察阻断前后角质形成细胞条件培养液对正... 目的研究正常角质形成细胞分泌的TGF-β1对正常成纤维细胞生物学行为的影响。方法采用免疫组化方法检测角质形成细胞分泌TGF-β1,以不同浓度TGF-β1抗体阻断角质形成细胞条件培养液中的TGF-β1,观察阻断前后角质形成细胞条件培养液对正常成纤维细胞增殖,胶原分泌的影响。结果细胞玻片可见大量染色阳性角质形成细胞,经TGF-β1抗体阻断后的角质形成细胞条件培养液,对成纤维细胞的促增殖作用明显减弱,胶原分泌减少。结论正常角质形成细胞分泌大量TGF-β1,可促进成纤维细胞增殖,促进胶原分泌。 展开更多

关键词 角质形成细胞 TGF-β1 成纤维细胞 细胞增殖 胶原分泌

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退火处理不同管径TiO2纳米管表面成纤维细胞的生物学行为 被引量：1

9

作者 李红彩 马壮 郭有玲 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第22期3504-3509,共6页

背景:前期研究发现不同管径钛纳米管对植体表面细胞的黏附和生长影响不同。目的:分析退火处理不同管径TiO2纳米管对成纤维细胞生物学行为的影响。方法:在5 V和20 V电压下分别采用阳极氧化方法在抛光纯钛表面制备TiO2纳米管,并行退火处... 背景:前期研究发现不同管径钛纳米管对植体表面细胞的黏附和生长影响不同。目的:分析退火处理不同管径TiO2纳米管对成纤维细胞生物学行为的影响。方法:在5 V和20 V电压下分别采用阳极氧化方法在抛光纯钛表面制备TiO2纳米管,并行退火处理。将纯钛试样分为6组:抛光纯钛组、5 V纳米管组、20 V纳米管组、退火处理抛光纯钛组、退火处理5 V纳米管组、退火处理20V纳米管组,利用场发射扫描电镜观察试样表面形貌。各组试样表面接种成纤维细胞,采用胞核染色计数方法分析培养60,120 min时试样表面细胞的黏附数,利用扫描电镜观察培养1 d时的细胞形态,MTT法检测培养1,3,5 d后试样表面细胞的增殖情况,天狼星红苦味酸染色法分析培养3 d时细胞的胶原纤维分泌情况。结果与结论:①退火处理对钛表面TiO2纳米管形貌及管径无明显影响;②5,20 V纳米管组表面的细胞黏附数量少于抛光纯钛组;退火处理增加了抛光纯钛表面的成纤维细胞黏附数量,减少了5,20V纳米管表面的细胞黏附数量;③退火处理增强了抛光纯钛表面成纤维细胞的活性,降低了5,20 V纳米管表面的细胞活性;④5,20V纳米管组表面的细胞增殖活性低于抛光纯钛组;退火处理提高了抛光纯钛表面的细胞增殖活性,减少了5,20V纳米管表面的细胞增殖活性;⑤5,20V纳米管组表面细胞的胶原纤维分泌量高于抛光纯钛组;退火处理提高了抛光纯钛表面的细胞胶原分泌量,减少了5,20V纳米管表面的细胞胶原分泌量;⑥结果表明,TiO2纳米管不同程度地抑制成纤维细胞的黏附、伸展和增殖,退火处理可增强这种抑制作用;TiO2纳米管不同程度增强成纤维细胞的胶原分泌功能,退火处理抑制了这种增强效果。 展开更多

关键词 TiO2 纳米管 退火 成纤维细胞 细胞黏附 细胞增殖 细胞伸展 胶原分泌

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THEM4与高糖诱导的人胚肾上皮细胞胶原分泌的关系 被引量：1

10

作者 陈宁 杨永辉 +3 位作者 安晓颖 朱桂云 康丽菲 郝军 《河北医科大学学报》 CAS 2017年第12期1434-1438,共5页

目的探讨硫酯酶超家族成员4(thioesterase superfamily member 4,THEM4)在高糖刺激的人胚肾上皮细胞(human embryo kidney epithelial cells,HKC)内的表达以及与胶原分泌的关系。方法体外培养HKC,分别给予高糖(30mmol/L)刺激0、6、12、2... 目的探讨硫酯酶超家族成员4(thioesterase superfamily member 4,THEM4)在高糖刺激的人胚肾上皮细胞(human embryo kidney epithelial cells,HKC)内的表达以及与胶原分泌的关系。方法体外培养HKC,分别给予高糖(30mmol/L)刺激0、6、12、24和48h后,收集细胞。提取RNA,Real-time PCR检测THEM4mRNA的表达;提取总蛋白,Western blot检测THEM4、phospho-Akt(Ser 473)、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达;免疫细胞荧光检测THEM4蛋白表达和定位;ELISA方法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原(collagenⅠ,ColⅠ)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,ColⅢ)分泌情况。结果(1)高糖培养HKC内THEM4表达明显降低,伴随phospho-Akt(Ser 473)、TGF-β1和α-SMA表达上调;THEM4与TGF-β1和α-SMA表达呈负相关(分别为:y=-5.100 9x+1.178,R^2=0.971 1;y=-3.803 3x+1.408,R^2=0.893 9)。(2)高糖可刺激HKC分泌ColⅠ、ColⅢ。结论高糖诱导的HKC胶原的分泌可能是通过抑制THEM4表达,上调phospho-Akt(Ser 473)、TGF-β1和α-SMA蛋白表达而实现的。 展开更多

关键词 肾小管 上皮细胞 胶原分泌 硫酸酶超家族成员4

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角质形成细胞源IL-1α对成纤维细胞增殖及胶原分泌的影响 被引量：1

11

作者 厉孟 张琳西 +1 位作者 夏炜 郭树忠 《中国美容医学》 CAS 2006年第12期1337-1339,I0002,共4页

目的:研究角质形成细胞分泌的IL-1α对成纤维细胞生物学行为的影响。方法:组织块法培养成纤维细胞,消化法培养角质形成细胞,采用免疫组化方法检测角质形成细胞分泌的IL-1α;成纤维细胞中加入含不同浓度IL-1α抗体(0.04μg/ml,0.2μg/ml,... 目的:研究角质形成细胞分泌的IL-1α对成纤维细胞生物学行为的影响。方法:组织块法培养成纤维细胞,消化法培养角质形成细胞,采用免疫组化方法检测角质形成细胞分泌的IL-1α;成纤维细胞中加入含不同浓度IL-1α抗体(0.04μg/ml,0.2μg/ml,1μg/ml)的角质形成细胞条件培养液为实验组,含DMEM的条件培养液为对照组,采用Cellcountingkit-8、放免法测定成纤维细胞增殖、胶原合成。结果:细胞爬片可见大量染色阳性角质形成细胞,细胞增殖测定,各实验组吸光度(A)值与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);随抗体浓度增高,A值减小,0.2μg/ml及1μg/ml浓度组与0.04μg/ml浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.01);胶原分泌浓度测定,各实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);随抗体浓度及胶原浓度增高,0.2μg/ml及1μg/ml浓度组与0.04μg/ml浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:正常角质形成细胞分泌大量IL-1α,可促进成纤维细胞增殖,抑制胶原分泌。 展开更多

关键词 角质形成细胞 IL-1Α 成纤维细胞 细胞增殖 胶原分泌

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Syndecan-1对大鼠心肌成纤维细胞生物学行为影响 被引量：1

12

作者 雷娟 薛声能 +3 位作者 欧冰 黄波水 陈颖 伍卫 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1704-1707,共4页

目的评估syndecan-1(Sdc1)对大鼠心肌成纤维细胞生物学行为的影响,为心肌梗死(MI)后心室重构的防治提供依据。方法体外分离培养SD大鼠乳鼠心肌成纤维细胞,分别转染Sdc1 siRNA质粒和Sdc1高表达质粒,并设立空白对照组、无关序列和空载质... 目的评估syndecan-1(Sdc1)对大鼠心肌成纤维细胞生物学行为的影响,为心肌梗死(MI)后心室重构的防治提供依据。方法体外分离培养SD大鼠乳鼠心肌成纤维细胞,分别转染Sdc1 siRNA质粒和Sdc1高表达质粒,并设立空白对照组、无关序列和空载质粒作为阴性对照。采用流式细胞术检测细胞增殖,CCK-8法检测细胞活力,酶联免疫法(ELISA)检测胶原(羟脯氨酸)分泌能力及Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移能力。结果Sdc1 siRNA组心肌成纤维细胞S期比例、增殖指数、细胞活力、胶原(羟脯氨酸)分泌量和迁移细胞数分别为(8.36±0.23)%、(13.2±0.5)%、(1.72±0.12)、(1162.3±60.4)pg/mL和170个/孔,明显高于空白对照和阴性对照组(P<0.01);Sdc1高表达质粒组心肌成纤维细胞S期比例、增殖指数、细胞活力、胶原(羟脯氨酸)分泌量和迁移细胞数分别为(6.48±0.22)%、(10.8±0.6)%、(1.30±0.11)、(346.8±52.1)pg/mL和50个/孔,明显低于空白对照和空载质粒组(P<0.01)。结论 Sdc1能够抑制心肌成纤维细胞的增殖、活力、迁移和分泌能力。 展开更多

关键词 SYNDECAN-1 细胞增殖 细胞迁移 胶原分泌 生物学行为

原文传递

高盐对乳鼠心脏成纤维细胞增殖与胶原分泌的影响及相关机制

13

作者 刘娟 商黔惠 +1 位作者 李璐 赵宇 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期135-140,共6页

目的观察高盐对乳鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖及胶原分泌的影响,并分析其可能的相关机制。方法胰酶、Ⅱ型胶原酶两步消化法消化分离乳鼠心肌组织,通过差速贴壁法收集、培养乳鼠CFs。CFs传至第4代去血清同步化24 h,分为对照组(培养基Na+... 目的观察高盐对乳鼠心脏成纤维细胞(CFs)增殖及胶原分泌的影响,并分析其可能的相关机制。方法胰酶、Ⅱ型胶原酶两步消化法消化分离乳鼠心肌组织,通过差速贴壁法收集、培养乳鼠CFs。CFs传至第4代去血清同步化24 h,分为对照组(培养基Na+终浓度139 mmol/L)、高盐组(培养基Na^+终浓度146、149、152、155、158、161、164、167、170、173和176 mmol/L),培养24、48、72和96 h后,CCK-8检测CFs增殖情况。选择增殖作用最为明显的Na+浓度和作用时间,以Na^+139 mmol/L为对照进行后续实验,高盐组(培养基Na^+终浓度161 mmol/L),甘露醇组(甘露醇浓度为29.334 mg/ml),其中甘露醇组与高盐组渗透压相同。CCK-8检测渗透压对CFs增殖的影响。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CFs培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达。Western印迹检测CFs中转化生长因子(TGF)-β1、p-smad3及smad7蛋白的表达情况。结果CCK-8结果显示,Na+146~176 mmol/L作用48、72 h可促进乳鼠CFs增殖(Na+161 mmol/L作用48 h最明显);检测渗透压对CFs增殖显示,高盐组(Na+161 mmol/L)细胞发生增殖明显,而甘露醇组细胞较对照组(Na+139 mmol/L)并无增殖差异;ELISA结果显示,高盐组中Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达均增加(P<0.05),甘露醇组胶原Ⅰ和胶原Ⅲ表达较对照组比无差异(P>0.05)。Western印迹结果显示,高盐组TGF-β1和p-smad3蛋白表达较对照组和甘露醇组明显增多(P<0.05),smad7蛋白表达明显减少(P<0.05);甘露醇组TGF-β1、p-smad3、smad7蛋白表达与对照组比较无差异(P>0.05)。结论高盐可诱导乳鼠CFs发生增殖,且能够促使Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原分泌增加,且与渗透压改变无关,其机制可能与TGF-β1/smads表达异常相关。 展开更多

关键词 高盐 乳鼠心脏成纤维细胞 细胞增殖 胶原分泌 转化生长因子β1 p-smad3 SMAD7

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银杏叶提取物对大鼠真皮FB增殖及胶原蛋白分泌的影响

14

作者 汪凡 昌仁操 杜鹏 《湖北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2009年第3期315-318,共4页

原代培养大鼠真皮成纤维细胞(Fibroblast,FB)传代培养后,以不同浓度的银杏叶提取物(EGb761,20、50、100 mg/L)对其生长进行干预,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物干预后24、48、72 h时FB细胞活力变化,碱水解法测定药物干预后3、6 d时培养... 原代培养大鼠真皮成纤维细胞(Fibroblast,FB)传代培养后,以不同浓度的银杏叶提取物(EGb761,20、50、100 mg/L)对其生长进行干预,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物干预后24、48、72 h时FB细胞活力变化,碱水解法测定药物干预后3、6 d时培养液中羟脯氨酸含量变化,以分别反映EGb761对大鼠真皮FB增殖及胶原蛋白分泌的影响.研究表明EGB761在一定范围内能促进大鼠真皮FB增殖及及胶原蛋白分泌,且呈一定的剂量、时间相关性. 展开更多

关键词 银杏叶提取物 成纤维细胞 细胞增殖 胶原蛋白分泌

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牡丹皮对AGEs诱导的系膜细胞增殖及基底膜增厚的影响 被引量：20

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作者 张明华 封亮 +2 位作者 顾俊菲 蒋俊 贾晓斌 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期478-482,共5页

目的:探讨牡丹皮对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导的系膜细胞增生及基底膜增厚的影响。方法:建立AGEs诱导的肾小球系膜细胞(MC)损伤模型,设置空白组[牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA),200 mg·... 目的:探讨牡丹皮对晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导的系膜细胞增生及基底膜增厚的影响。方法:建立AGEs诱导的肾小球系膜细胞(MC)损伤模型,设置空白组[牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA),200 mg·L-1],模型组(AGEs,200 mg·L-1),氨基胍(aminoguanidine,AG)阳性组(10 mmol·L-1),牡丹皮高、中、低剂量组(2×10-4,1×10-4,0.5×10-4g·mL-1)。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察牡丹皮对损伤的MC的增殖影响;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定细胞上清液中纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和Ⅳ胶原蛋白(typeⅣcollagen secretion,ColⅣ)的含量;采用Western blotting观察FN的表达;Real-time PCR检测ColⅣ的mRNA表达水平。结果:牡丹皮能抑制AGEs刺激的MC增殖以及FN和ColⅣ分泌;Western blotting表明牡丹皮下调MC分泌的FN表达;Real-time PCR结果说明牡丹皮对AGEs刺激下的MC分泌ColⅣ的mRNA表达有下调作用。结论:牡丹皮对AGEs培养条件下的MC具有一定的保护作用,牡丹皮能明显抑制基质中ColⅣ及FN的合成与分泌,抑制基底膜增厚,为糖尿病肾病的治疗提供实验依据。 展开更多

关键词 牡丹皮 晚期糖基化产物 系膜细胞 基底膜增厚 纤维连接蛋白 IV胶原蛋白

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罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽对小鼠成骨细胞增殖与Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响 被引量：1

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作者 宋芹 颜军 +2 位作者 郭晓强 姚倩 郁小兵 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期130-132,共3页

目的研究不同分子量的罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽对体外培养新生小鼠颅骨MC3T3-E1细胞增殖与Ⅰ型胶原蛋白分泌及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法采用WST-8法测定胶原蛋白多肽对小鼠成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖的影响,ELISA法检测胶原蛋... 目的研究不同分子量的罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽对体外培养新生小鼠颅骨MC3T3-E1细胞增殖与Ⅰ型胶原蛋白分泌及Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法采用WST-8法测定胶原蛋白多肽对小鼠成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖的影响,ELISA法检测胶原蛋白多肽对MC3T3-E1细胞Ⅰ型胶原蛋白分泌的影响,采用real-time PCR分析不同分子量的胶原蛋白多肽对Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达的影响。结果胶原蛋白多肽能促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.01)、促进MC3T3-E1细胞Ⅰ型胶原蛋白的分泌和Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽能有效促进MC3T3-E1细胞增殖与Ⅰ型胶原蛋白分泌,分子量较小的多肽(917.3Da)作用更加明显。 展开更多

关键词 罗非鱼 鱼鳞胶原蛋白多肽 MC3T3-E1细胞 增殖 Ⅰ型胶原蛋白分泌 MRNA表达

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角质形成细胞条件培养液对成纤维细胞增殖与胶原分泌影响的研究 被引量：1

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作者 厉孟 张琳西 +2 位作者 胡强 李丹 郭树忠 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期751-753,共3页

目的探讨正常的角质形成细胞对成纤维细胞生物学行为的影响。方法组织块法培养成纤维细胞,分别加入12.5%、25%与50%浓度的角质形成细胞条件培养液为实验组,加入不含血清DMEM为对照组,采用MTT、羟脯氨酸比色法测定成纤维细胞增殖、胶原合... 目的探讨正常的角质形成细胞对成纤维细胞生物学行为的影响。方法组织块法培养成纤维细胞,分别加入12.5%、25%与50%浓度的角质形成细胞条件培养液为实验组,加入不含血清DMEM为对照组,采用MTT、羟脯氨酸比色法测定成纤维细胞增殖、胶原合成;以流式细胞仪测定50%浓度角质形成细胞条件培养液组及对照组成纤维细胞生长周期。结果细胞增殖测定,各实验组吸光度(A)值与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);随浓度增高,A值增加,25%及50%浓度组与12.5%浓度组比较,差异有统计学意义(P<0.01);25%及50%浓度组间比较,差异无统计学意义(P>0.01)。胶原合成测定中,各实验组A值与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.01);各实验组组间比较,差异无统计学意义(P>0.01)。细胞周期测定见,50%浓度组可明显促进成纤维细胞通过G1/S及S/G2限制点,S期及G2/M期细胞与对照组相比明显增多,G0/G1期细胞与对照组相比明显减少,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论正常角质形成细胞的上清液可促进成纤维细胞的增殖,但对其胶原分泌影响不明显。 展开更多

关键词 角质形成细胞 成纤维细胞 细胞增殖 胶原分泌

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低频电磁场对人胚腱细胞生长分泌的影响及机制探讨 被引量：11

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作者 康庆林 蒋祖言 田万成 《中华物理医学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期11-13,共3页

目的阐明低频电磁场促进人胚腱细胞增殖及分泌胶原的机制。方法将传代培养的人胚腱细胞分为对照组、刺激１日组、刺激３日组及刺激５日组，在电磁场刺激的不同时相点，分别测定细胞ＤＮＡ含量、ｃＡＭＰ水平及胶原分泌量。结果在低频电... 目的阐明低频电磁场促进人胚腱细胞增殖及分泌胶原的机制。方法将传代培养的人胚腱细胞分为对照组、刺激１日组、刺激３日组及刺激５日组，在电磁场刺激的不同时相点，分别测定细胞ＤＮＡ含量、ｃＡＭＰ水平及胶原分泌量。结果在低频电磁场作用早期（１～３日），细胞ｃＡＭＰ水平与ＤＮＡ合成均呈明显升高（Ｐ＜０．０５），细胞内信使物质合成及细胞增殖加快，但胶原分泌无变化，而在电磁场作用晚期（３～５日），当ｃＡＭＰ水平及ＤＮＡ合成都不再改变时，腱细胞分泌胶原量显著增加（Ｐ＜０．０１）。结论低频电磁场可能通过作用于ｃＡＭＰ蛋白激酶Ａ信号转导系统，从而调控人胚腱细胞增殖及胶原分泌。提示临床应用电磁场促进肌腱愈合宜从早期开始，并且需要刺激足够长的时间。 展开更多

关键词 分裂球 低频电磁场 肌腱愈合 人胚胎 腱细胞

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