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四种前体对胀果甘草细胞悬浮培养生产甘草黄酮的调控效果评价 被引量:18
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作者 杨英 何峰 +3 位作者 季家兴 雷晶 陈雪红 余龙江 《武汉植物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期484-489,共6页
在胀果甘草细胞悬浮体系中加入苯丙氨酸、酪氨酸、肉桂酸和乙酸钠来研究前体对甘草细胞生产甘草黄酮的影响。结果显示,4种前体在合适的浓度下对细胞的生长没有明显的抑制作用,而且均能促进细胞内甘草黄酮的生物合成,但高浓度的肉桂酸对... 在胀果甘草细胞悬浮体系中加入苯丙氨酸、酪氨酸、肉桂酸和乙酸钠来研究前体对甘草细胞生产甘草黄酮的影响。结果显示,4种前体在合适的浓度下对细胞的生长没有明显的抑制作用,而且均能促进细胞内甘草黄酮的生物合成,但高浓度的肉桂酸对细胞的生长有一定的抑制作用。苯丙氨酸的最佳添加浓度为20 mg/L,酪氨酸、肉桂酸、乙酸钠的最佳添加浓度都是5 mg/L。此时,均可使培养体系的甘草黄酮产量高达100 mg/L以上,其中酪氨酸的添加使得产量高达对照的1.43倍。苯丙氨酸、肉桂酸和乙酸钠3种前体的添加时间均以第10天为宜,酪氨酸添加时间以第5天为最佳。而且,在添加苯丙氨酸和乙酸钠后的第3天收获细胞,此时细胞的生物量和甘草黄酮产量最大。此外,苯丙氨酸、乙酸钠的添加可以增加黄酮合成的关键酶之一——苯丙氨酸裂解酶的活性。酪氨酸对苯丙氨酸裂解酶影响不大,而肉桂酸的添加却导致其活性显著降低。 展开更多
关键词 胀果甘草 甘草黄酮 前体 细胞悬浮培养 黄酮生物合成
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菌株JB12影响铅镉胁迫下菊苣黄酮合成的转录组分析 被引量:4
2
作者 金忠民 李春月 +6 位作者 刘本松 刘博 齐欣 解琳 刘丽杰 张艳馥 潘林 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1648-1655,共8页
为探究菌株JB12对菊苣(Cichorium intybus)幼苗铅镉抗性和黄酮生物合成的影响,将菌株JB12接种于铅镉复合(Pb-Cd)浓度为400~40 mg·kg^(-1)的土壤中,测定幼苗生长指标、铅镉含量、抗氧化酶活性、总黄酮含量和黄酮生物合成相关酶活性... 为探究菌株JB12对菊苣(Cichorium intybus)幼苗铅镉抗性和黄酮生物合成的影响,将菌株JB12接种于铅镉复合(Pb-Cd)浓度为400~40 mg·kg^(-1)的土壤中,测定幼苗生长指标、铅镉含量、抗氧化酶活性、总黄酮含量和黄酮生物合成相关酶活性,并对叶片转录组数据进行分析。结果表明,接种菌株JB12后,叶片过氧化氢(H 2O 2)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)及地上部和根部铅镉含量均低于胁迫处理组,植株干重、抗氧化酶活性、总黄酮含量及黄酮生物合成相关酶活性均高于胁迫处理组。对叶片转录组数据和RT-qPCR验证分析表明,苯丙素和黄酮生物合成途径相关基因表达上调可能是菌株JB12提高菊苣幼苗铅镉抗性的重要机制。综上所述,菌株JB12在减少菊苣幼苗铅镉积累的同时,还可以通过增强抗氧化酶活性及调控叶片黄酮生物合成相关基因的表达,提高菊苣幼苗的铅镉抗性和总黄酮的积累。 展开更多
关键词 铅镉胁迫 洋葱伯克霍尔德氏菌 菊苣 转录组 黄酮生物合成
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盐肤木查尔酮异构酶的克隆、表达及特性分析 被引量:7
3
作者 杨晓月 王景 +2 位作者 李晨 任竹梅 马文丽 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期3253-3260,共8页
黄酮类化合物是药用植物盐肤木Rhus chinensis中主要的功能成分,具有多种药理活性,广泛用于疾病治疗和食品保健等领域。查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI,EC 5. 5. 1. 6)是黄酮类化合物生物合成途径的关键酶。该研究通过RTPCR及rapi... 黄酮类化合物是药用植物盐肤木Rhus chinensis中主要的功能成分,具有多种药理活性,广泛用于疾病治疗和食品保健等领域。查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI,EC 5. 5. 1. 6)是黄酮类化合物生物合成途径的关键酶。该研究通过RTPCR及rapid-amplification of c DNA Ends (RACE)技术克隆了盐肤木查尔酮异构酶(命名为Rc CHI)全长c DNA序列共1 058bp,包含738 bp的开放阅读框,编码245个氨基酸。序列分析表明,Rc CHI与其他植物CHI序列相似性在47. 1%~71. 6%,属于Ⅰ型CHI。通过实时荧光定量PCR检测发现盐肤木不同组织总黄酮含量与Rc CHI的mRNA表达呈正相关。进一步构建原核表达载体p GEX-6P-1-RcCHI并转化大肠杆菌BL21,成功获得了重组Rc CHI的高效可溶表达。该研究为利用基因工程菌株进行黄酮类化合物的生物合成奠定了基础。 展开更多
关键词 盐肤木 查尔酮异构酶 分子克隆 表达 黄酮生物合成
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通过转录组测序挖掘三叶青黄酮类物质生物合成的相关基因
4
作者 刘洪旭 邓思珊 +1 位作者 马丽红 阙慧卿 《医药前沿》 2023年第14期12-15,21,共5页
目的:通过转录组测序挖掘三叶青黄酮成分生物合成相关基因。方法:三叶青叶经过Illumina HiSeq 4000高通量测序,获得转录组数据,通过数据组装、拼接及注释,挖掘三叶青黄酮类物质生物合成的相关基因。结果:5个三叶青样品获得111.281Gb数据... 目的:通过转录组测序挖掘三叶青黄酮成分生物合成相关基因。方法:三叶青叶经过Illumina HiSeq 4000高通量测序,获得转录组数据,通过数据组装、拼接及注释,挖掘三叶青黄酮类物质生物合成的相关基因。结果:5个三叶青样品获得111.281Gb数据,使用trinity组装,得到626199个transcripts,获得396496个unigenes,将unigenes与NR、Swiss-prot、STRING、GO、KEGG、Pfam这6个数据库进行对比分析。分析KEGG代谢通路,获得3条与黄酮物质合成的代谢通路。黄酮类物质生物合成的相关基因有:黄酮类31条,异黄酮类2条;黄酮和黄酮醇3条。与三叶青黄酮成分合成相关的酶有:查尔酮合成酶(CHS),查尔酮异构酶(CHI),柚皮素-3-双加氧酶(F3H)等九种酶。结论:首次基于三叶青转录组测序数据,获得三叶青黄酮类成分生物合成的关键酶基因,为后续三叶青基因功能的研究提供数据支持。 展开更多
关键词 三叶青 转录组 黄酮合酶 黄酮生物合成 代谢途径
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含羞草叶片转录组测序及其黄酮合成途径解析
5
作者 毛仁俊 白朕卿 +4 位作者 何志贵 李秋月 吴佳文 陈浩 阎岩 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期611-621,共11页
为了解析含羞草中黄酮类物质的生物合成途径,利用Illumina platform 2000TM测序平台对含羞草叶片进行转录组测序,共获得94182个Unigene,平均长度为695 bp,N50值为1159 bp.共有30243个Uni-gene注释于50个GO功能组中,其中"代谢过程&q... 为了解析含羞草中黄酮类物质的生物合成途径,利用Illumina platform 2000TM测序平台对含羞草叶片进行转录组测序,共获得94182个Unigene,平均长度为695 bp,N50值为1159 bp.共有30243个Uni-gene注释于50个GO功能组中,其中"代谢过程""催化活性"以及"细胞"注释的Unigene数量较多.KEGG通路分析鉴定出49个Unigene注释在黄酮生物合成途径,分别编码查尔酮合成酶(CHS,12个Unigene)、查尔酮异构酶(CHI,4)、黄烷酮-3-羟化酶(F3H,3)、黄烷酮-3'-羟化酶(F3'H,9)、黄烷酮-3',5'-羟化酶(F3',5'H,1)、二氢黄酮醇4-还原酶(DFR,5)、黄酮醇合成酶(FLS,3)以及无色花色素还原酶(LAR,12)基因.从转录组数据库中鉴定出7382个以单核苷酸和三核苷酸为主要类型的SSR标记.随机选出10对SSR引物进行扩增,其中有7对能够扩增出清晰的条带. 展开更多
关键词 含羞草 转录组测序 代谢途径 黄酮生物合成
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红花花青素合成酶基因的克隆及表达分析 被引量:3
6
作者 刘秀明 杨文婷 +6 位作者 赵利旦 董园园 姚娜 王南 官丽莉 李海燕 李校堃 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期766-772,共7页
根据红花转录物测序结果中得到的中间序列,采用RT-PCR和RACE方法从红花花瓣中克隆到1个ANS基因的全长cDNA,该基因全长序列1 226 bp,具有完整的开放阅读框(ORF),共1 050 bp,编码349个氨基酸。生物信息学软件分析显示,该基因编码的蛋白理... 根据红花转录物测序结果中得到的中间序列,采用RT-PCR和RACE方法从红花花瓣中克隆到1个ANS基因的全长cDNA,该基因全长序列1 226 bp,具有完整的开放阅读框(ORF),共1 050 bp,编码349个氨基酸。生物信息学软件分析显示,该基因编码的蛋白理论分子量约为82.27 kDa,等电点为5.09,序列里含有典型的加尾信号序列AATAA和Poly(A)。保守结构域预测表明,该基因编码的蛋白具有典型的ANS蛋白功能结构域,其保守结构域中含有铁离子及2-O-酮戊二酸结合位点。结合其他物种的ANS基因构建系统树表明,红花ANS基因与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其中与芍药的亲缘关系最近。应用实时荧光定量PCR分析表明,ANS基因在红花的初花期和盛花期的表达量最高。 展开更多
关键词 红花 花青素合成 黄酮生物合成 REAL-TIME PCR
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花色素苷生物合成及花色的调控 被引量:30
7
作者 李义龙 肇涛澜 +2 位作者 陈立超 赵亚茹 权太勇 《生命科学》 CSCD 2008年第1期147-152,共6页
近年来,花色研究工作备受关注。对于园艺学来说,要培育出自然界中原本没有的新颖花色,很有必要弄清控制花色形成的各种因素。随着分子生物学技术的迅速发展,对花色形成机制的研究已经深入到分子水平,本文主要介绍了花色素的合成与转运... 近年来,花色研究工作备受关注。对于园艺学来说,要培育出自然界中原本没有的新颖花色,很有必要弄清控制花色形成的各种因素。随着分子生物学技术的迅速发展,对花色形成机制的研究已经深入到分子水平,本文主要介绍了花色素的合成与转运、液泡pH值、辅助色素和金属离子对花色的调控。 展开更多
关键词 花色形成 分子机制 黄酮生物合成 液泡PH值 共色作用 金属离子
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鹤望兰花青素合成酶基因SrANS的克隆及表达分析 被引量:11
8
作者 樊荣辉 黄敏玲 +1 位作者 吴建设 钟淮钦 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1620-1625,共6页
采用RT-PCR和RACE方法从鹤望兰蓝色花瓣中克隆到1个ANS基因(SrANS)。该cDNA全长1 389 bp(GenBank收录号KC484623),具有完整的开放阅读框(ORF),共1 083个碱基,编码361个氨基酸。与其他物种的氨基酸序列都有一定的同源性,其中与鸢尾的ANS... 采用RT-PCR和RACE方法从鹤望兰蓝色花瓣中克隆到1个ANS基因(SrANS)。该cDNA全长1 389 bp(GenBank收录号KC484623),具有完整的开放阅读框(ORF),共1 083个碱基,编码361个氨基酸。与其他物种的氨基酸序列都有一定的同源性,其中与鸢尾的ANS同源性最高,达到74%。系统进化树分析显示,鹤望兰SrANS与红掌蛋白亲缘关系较近。保守结构域预测表明,该基因编码的蛋白具有典型的ANS蛋白功能结构域,其保守结构域中含有铁离子及2-O-酮戊二酸结合位点,属于2OG-FeII_Oxy双加氧酶超家族。应用半定量PCR分析表明,SrANS在蓝色花瓣中高表达,且在花发育的花蕾中期和始花期表达量最高。 展开更多
关键词 鹤望兰 花青素合成 黄酮生物合成 基因克隆
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基于转录组测序的滇山茶花叶呈色机理分析 被引量:11
9
作者 王炜 郑伟 +2 位作者 徐晓丹 陈菁 王谈笑 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1720-1727,共8页
该研究采用Illumina Hi-Seq2500高通量测序技术,对滇山茶的花叶(绿叶区和金叶区)的cDNA进行了转录组测序,分析滇山茶的花叶呈色机理。测序结果得到了228 862条单基因序列,筛选得到了4 851条差异表达基因。2 291条差异表达基因在GO数据... 该研究采用Illumina Hi-Seq2500高通量测序技术,对滇山茶的花叶(绿叶区和金叶区)的cDNA进行了转录组测序,分析滇山茶的花叶呈色机理。测序结果得到了228 862条单基因序列,筛选得到了4 851条差异表达基因。2 291条差异表达基因在GO数据库中有功能注释,1 826条差异表达基因被注释到COG数据库,这些差异表达基因被分为23个主要功能类别,其中大部分基因与滇山茶的生长和代谢有关。1 363条差异表达基因注释到了KEGG数据库,进一步筛选出了差异表达基因注释序列最多的15条代谢通路,其中卟啉和叶绿素代谢途径中的GluRS、δ-ALAD、ALAS基因和类黄酮合成途径中ANS、LAR、CHS基因与滇山茶的花叶形成密切相关。研究表明,滇山茶的花叶呈色是由于叶色相关代谢通路中大量的基因表达量发生变化引起的,并不是由单基因突变所致,病毒诱导的多个代谢途径基因沉默可能是滇山茶花叶呈色的主要原因。该研究丰富了滇山茶的转录组信息,并为滇山茶的彩叶品种培育提供了一定的参考。 展开更多
关键词 滇山茶 叶色 转录组 叶绿素代谢 黄酮生物合成
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水母雪莲红色细胞系类黄酮含量和相关基因表达 被引量:9
10
作者 王亚杰 李厚华 +3 位作者 付婉艺 高艳 王冰洁 李玲 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1225-1234,共10页
水母雪莲为中国传统名贵中药,具有散寒除湿、活血通经、抗炎、镇痛等功效,其主要药用成分为类黄酮化合物。以水母雪莲白色系愈伤组织和经低温、高糖、强光诱导得到的红色系为材料,比较不同细胞系中类黄酮活性成分、结构基因和转录因子... 水母雪莲为中国传统名贵中药,具有散寒除湿、活血通经、抗炎、镇痛等功效,其主要药用成分为类黄酮化合物。以水母雪莲白色系愈伤组织和经低温、高糖、强光诱导得到的红色系为材料,比较不同细胞系中类黄酮活性成分、结构基因和转录因子表达的差异。结果表明,红色系中总黄酮含量为白色系的3.60倍;重要的药用成分为芦丁,其含量达到干重的0.25%,是白色系的2.40倍;红色系中花青苷含量极高,矢车菊素3-O-己糖苷和矢车菊素3-O-琥珀酰己糖苷的含量分别达到干重的0.12%和0.19%;红色系中CHS、F3'H、FNS、FLS、DFR和ANS基因的表达均明显高于白色系;红色系中转录因子MYB、bHLH和WD40的表达也均明显高于白色系,其中MYB的表达量为白色系的19.70倍,说明红色系中转录因子的高水平表达增强了结构基因的表达,进而提高了类黄酮的合成。红色系中bHLH和WD40表达水平相似,而与MYB的表达水平相差很大,推测可能在水母雪莲中bHLH和WD40两种转录因子形成二元复合体后,和MYB共同调控类黄酮合成途径中结构基因的表达。 展开更多
关键词 水母雪莲 转录因子复合体 结构基因 黄酮生物合成 表达分析
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大豆种子颜色遗传调控机制研究进展 被引量:8
11
作者 邱红梅 陈亮 +8 位作者 侯云龙 王新风 陈健 马晓萍 崔正果 张玲 胡金海 王跃强 邱丽娟 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期2299-2313,共15页
大豆种子颜色是重要的形态标记和进化性状,在驯化过程中种皮从黑色逐渐演变成黄、绿、褐及双色,子叶从绿色进化出黄色。深色种子中含有较多的天然色素——花色素,具有药用和营养价值。因此,种子颜色的遗传调控机制研究对进化理论和实际... 大豆种子颜色是重要的形态标记和进化性状,在驯化过程中种皮从黑色逐渐演变成黄、绿、褐及双色,子叶从绿色进化出黄色。深色种子中含有较多的天然色素——花色素,具有药用和营养价值。因此,种子颜色的遗传调控机制研究对进化理论和实际应用均具有重要意义。种子中色素含量及组分构成导致多样的种皮颜色,其分子调控机制复杂。本文主要阐述了控制大豆种子颜色的遗传位点、相关基因与调控机制、类黄酮生物合成途径三方面的研究进展。具体介绍了9个经典遗传位点I、R、T、O、W1、K1、G、D1、D2和相关分子标记,以及位点间的相互作用;23个调控种子颜色的相关基因,与部分基因等位变异的调控机制;相关基因参与的类黄酮生物合成途径和主要代谢产物的生理功能。通过综述归纳了大豆种皮、种脐、子叶颜色的遗传调控研究进展,利用遗传位点、基因、等位基因调控机制及类黄酮代谢途径绘制出调控网路,以期为种子外观品质及花色苷组分遗传改良等研究提供参考。 展开更多
关键词 大豆 种子颜色 遗传调控 相关基因 黄酮生物合成途径
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鹤望兰类黄酮3′,5′-羟化酶基因SrF3′5′H的克隆及表达分析 被引量:6
12
作者 黄敏玲 樊荣辉 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1117-1122,共6页
采用RT-PCR和RACE方法从鹤望兰黄色花萼中克隆到类黄酮生物合成途径关键基因SrF3′5′H。该cDNA全长1 766 bp,具有完整的开放阅读框(ORF),共1 509个碱基,编码503个氨基酸。氨基酸同源性分析表明,SrF3′5′H编码的氨基酸序列与已报道的... 采用RT-PCR和RACE方法从鹤望兰黄色花萼中克隆到类黄酮生物合成途径关键基因SrF3′5′H。该cDNA全长1 766 bp,具有完整的开放阅读框(ORF),共1 509个碱基,编码503个氨基酸。氨基酸同源性分析表明,SrF3′5′H编码的氨基酸序列与已报道的其他植物的F3′5′H蛋白具有很高的同源性。系统进化树分析显示,鹤望兰SrF3′5′H与非洲紫罗兰蛋白亲缘关系较近。应用半定量PCR分析表明,SrF3′5′H在始花期转录水平达到最高,且在蓝色花瓣中表达最高,在黄色花萼中几乎没有表达。 展开更多
关键词 鹤望兰 黄酮3′ 5′-羟化酶 黄酮生物合成 基因克隆
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基于混合测序策略的两品种当归中类黄酮调控基因差异分析 被引量:2
13
作者 徐丽 朱田田 +3 位作者 晋玲 康舒淇 张明惠 王圆圆 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期141-147,共7页
目的:比较2个不同茎叶色当归品种岷归1号与岷归2号转录水平差异。方法:以2种颜色当归的新鲜叶片(带叶柄)和上端茎为材料,采用混合测序策略,应用全长转录组技术构建当归无参全长转录本文库,利用RNA-seq技术对两品种进行差异基因表达分析... 目的:比较2个不同茎叶色当归品种岷归1号与岷归2号转录水平差异。方法:以2种颜色当归的新鲜叶片(带叶柄)和上端茎为材料,采用混合测序策略,应用全长转录组技术构建当归无参全长转录本文库,利用RNA-seq技术对两品种进行差异基因表达分析,再利用公共数据库对差异基因的生物学功能进行注释和精细分类,筛选调控当归茎叶色差异的主要候选基因。结果:当归转录本的测序结果良好,测序数据质量较高,当归全长转录本的34528条序列在非冗余蛋白(NR)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)、SwissProt及KOG数据库中分别注释到33947、33241、29150和22601条。对两品种当归差异表达基因(DEGs)进行精细分类,具有生物学功能和分子功能的705个DGEs可分为11类,主要富集在初级代谢(17.87%)、逆境响应(14.47%)、次级代谢(11.49%)等功能上,与颜色有关的差异表达基因主要集中在类黄酮生物合成途径上。结论:两品种当归茎叶颜色差异的主要原因可能与调控类黄酮的生物合成基因的表达差异有关,可为后续进行功能验证,进一步明确与当归主要药效成分之间的联系奠定基础。 展开更多
关键词 当归 全长转录组 RNA测序技术 黄酮生物合成 差异表达基因
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黑桫椤多器官全长转录组分析及类黄酮生物合成结构基因的挖掘
14
作者 林泓 王桢 +1 位作者 王艇 苏应娟 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期56-65,共10页
黑桫椤(Gymnosphaera podophylla Dalla Torre&Sarnth.)为著名的孑遗蕨类,具有很强的环境适应能力,然而其适应性机制尚不清楚。本研究采用PacBio和Illumina技术对黑桫椤的根、羽轴和羽片进行转录组测序,分别生成12879、14185和1608... 黑桫椤(Gymnosphaera podophylla Dalla Torre&Sarnth.)为著名的孑遗蕨类,具有很强的环境适应能力,然而其适应性机制尚不清楚。本研究采用PacBio和Illumina技术对黑桫椤的根、羽轴和羽片进行转录组测序,分别生成12879、14185和16084个全长unigenes。基因表达分析结果表明,与黑桫椤抗干旱、缺水胁迫和生物胁迫相关的基因表达水平较高。根、羽轴和羽片特异性上调基因均显著富集到KEGG代谢通路中的“苯丙烷生物合成途径”,根和羽轴的器官特异性上调基因还显著富集到“类黄酮生物合成途径”。共有192个全长unigenes被注释为类黄酮生物合成途径所涉及的13个酶结构基因,其中包括112个差异表达基因(DEGs),表明黑桫椤类黄酮生物合成途径较为保守,且存在器官特异性差异表达基因。本文对黑桫椤多器官全长转录组和类黄酮生物合成途径结构基因进行了综合分析,为进一步研究其对环境的适应性提供了丰富的遗传资源。 展开更多
关键词 黑桫椤 黄酮生物合成 全长转录组
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观赏桃黄酮合成酶CHS基因家族分析
15
作者 帅泽宇 徐曼 +1 位作者 屈成 张文斗 《绿色科技》 2024年第14期259-263,共5页
查尔酮合酶(chalcone synthase,CHS)是植物类黄酮生物合成路径中的关键酶,对观赏植物花色的形成具有决定性作用。研究旨在全面分析观赏桃PpCHSs基因家族,探究其在观赏植物花色形成中的分子机制,为育种提供理论支持。通过Uniprot和GDR数... 查尔酮合酶(chalcone synthase,CHS)是植物类黄酮生物合成路径中的关键酶,对观赏植物花色的形成具有决定性作用。研究旨在全面分析观赏桃PpCHSs基因家族,探究其在观赏植物花色形成中的分子机制,为育种提供理论支持。通过Uniprot和GDR数据库获取并比对CHS蛋白序列,使用TBtools进行基因鉴定和染色体共线性分析,MEGA 7.0构建系统发育树,NCBI CDD分析蛋白保守结构域。确认观赏桃中17个CHS同源基因,主要分布在G1染色体。共线性分析显示观赏桃CHS基因与拟南芥存在一对多关系,反映基因家族扩张。系统发生树将基因分为三类,与不同功能特化相关。蛋白结构域分析表明功能上的保守性,揭示了CHS基因家族在观赏桃花色形成中的关键作用,为基因编辑和育种提供理论基础,促进观赏植物产业发展。 展开更多
关键词 查尔酮合酶 黄酮生物合成 基因家族 观赏桃 分子育种
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菊花脑管状花响应蔗糖饲喂的差异基因分析
16
作者 王稳 张鹏 +3 位作者 王志敏 刘根忠 包志龙 马方放 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1297-1310,共14页
为探明蔗糖饲喂对菊花脑花苞总黄酮积累的影响及其机制,以中国特有的菊属野生二倍体物种菊花脑(Chrysanthemum nankingense)为试材,对其离体花苞进行蔗糖饲喂,测定饲喂后0、12、36和60 h管状花和舌状花总黄酮和总酚的动态变化,并对管状... 为探明蔗糖饲喂对菊花脑花苞总黄酮积累的影响及其机制,以中国特有的菊属野生二倍体物种菊花脑(Chrysanthemum nankingense)为试材,对其离体花苞进行蔗糖饲喂,测定饲喂后0、12、36和60 h管状花和舌状花总黄酮和总酚的动态变化,并对管状花进行转录组测序。结果发现:蔗糖饲喂24 h以内菊花脑管状花类黄酮和总酚的含量显著增加,而同类物质在舌状花中变化较为平缓。蔗糖饲喂60h与同时间无蔗糖饲喂相比,转录组分析仅获得3 423个差异表达基因;而与0 h无蔗糖饲喂相比,可获得最多的差异表达基因(9 135个),说明随饲喂时间的增加,管状花在生化层面上对蔗糖的响应程度增加。经KEGG分析,类黄酮生物合成途径被显著富集,32个类黄酮生物合成结构基因具有差异表达。相关性分析表明转录因子MYB、WRKY和MADS-box与类黄酮生物合成结构基因表达具有较强的共表达关系。在上述差异基因中随机挑选9个进行qRT-PCR验证,结果表明转录组数据具有较高的准确性;并对其中2个转录因子的编码基因进行了时空表达分析和蛋白亚细胞定位,为从代谢工程的角度研究菊花脑次生代谢筛选了目标基因。 展开更多
关键词 菊花脑 蔗糖响应 黄酮生物合成 差异表达基因 管状花
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鹤望兰黄烷酮3-羟化酶基因SrF3H的克隆及表达分析 被引量:4
17
作者 樊荣辉 黄敏玲 +1 位作者 钟淮钦 吴建设 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期168-172,共5页
类黄酮3-羟化酶是类黄酮生物合成途径中的关键酶,对花色的形成起重要作用。本研究克隆了鹤望兰类黄酮3-羟化酶基因SrF3H,该cDNA全长1 333 bp(GenBank收录号:KC412257),具有完整的开放阅读框(ORF),共1 122个碱基,编码374个氨基酸。与其... 类黄酮3-羟化酶是类黄酮生物合成途径中的关键酶,对花色的形成起重要作用。本研究克隆了鹤望兰类黄酮3-羟化酶基因SrF3H,该cDNA全长1 333 bp(GenBank收录号:KC412257),具有完整的开放阅读框(ORF),共1 122个碱基,编码374个氨基酸。与其他物种的氨基酸序列都有一定的同源性,其中与高杯花的F3H同源性最高,达到83%。系统进化树分析显示,鹤望兰SrF3H与百合蛋白亲缘关系较近。应用半定量PCR分析表明,SrF3H在蓝色花瓣中表达最高,而在鹤望兰不同花发育阶段差异不明显。研究结果不仅为植物育种提供了重要基因资源,也为剖析鹤望兰花色形成机理奠定基础。 展开更多
关键词 鹤望兰 黄烷酮3-羟化酶 黄酮生物合成 基因克隆
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红芽直立茶紫色叶形成机制的转录组分析 被引量:3
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作者 刘悦 曲浩 +7 位作者 李友勇 段志芬 杨盛美 尚卫琼 矣兵 杨兴荣 孙雪梅 刘本英 《茶叶通讯》 北大核心 2019年第4期409-418,共10页
云南具有丰富的茶树资源,紫芽茶树是其中重要的一种。红芽直立茶具有典型的紫色芽叶,富含花青素,是重要的特异茶树种质资源。本研究通过转录组技术对红芽直立茶的不同叶色进行研究,筛选到8779个差异表达基因,GO和KEGG富集结果显示,差异... 云南具有丰富的茶树资源,紫芽茶树是其中重要的一种。红芽直立茶具有典型的紫色芽叶,富含花青素,是重要的特异茶树种质资源。本研究通过转录组技术对红芽直立茶的不同叶色进行研究,筛选到8779个差异表达基因,GO和KEGG富集结果显示,差异基因涉及到多个色素形成及积累的功能。构建茶叶中类黄酮和类胡萝卜素生物合成两个途径,紫色叶中大量合成黄酮类化合物的关键基因上调,与茶叶紫色的形成密切相关。同时,紫色叶中类胡萝卜素的生物合成受到抑制,紫色叶具有更好的抗衰老能力。本研究将有助于对茶树紫色叶形成机制的认识,为特色茶育种研究奠定基础。 展开更多
关键词 红芽直立茶 紫色叶 转录组 黄酮生物合成 类胡萝卜素生物合成
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花生花斑种皮花青素合成的转录组-代谢组联合分析 被引量:3
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作者 胡梦蝶 李佳伟 +5 位作者 崔顺立 侯名语 杨鑫雷 刘立峰 蒋晓霞 穆国俊 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1732-1745,共14页
花生是重要的油料和经济作物,花生种皮色泽存在较大差异,具有白色、红色、紫色、粉色及花斑类型,花斑种皮花生是其中的独特成员。有关花斑花生种皮花青素合成的分子机制存在深入研究的必要性。本研究以花斑种皮花生VG-02为研究材料,采... 花生是重要的油料和经济作物,花生种皮色泽存在较大差异,具有白色、红色、紫色、粉色及花斑类型,花斑种皮花生是其中的独特成员。有关花斑花生种皮花青素合成的分子机制存在深入研究的必要性。本研究以花斑种皮花生VG-02为研究材料,采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法检测不同发育阶段种皮中花青素的相对含量变化,共检测到12种与种皮颜色相关的代谢物质。在花生种皮着色区(F)与非着色区(B)开花下针(DAF)45 d的F2-B2比较组中差异代谢产物最多,结果表明矢车菊素3-O-半乳糖苷和矢车菊素O-丁香酸含量着色区低于非着色区,差异倍数分别为0.63和2.35;松香花青素O-己糖苷,原花青素A1、A2、B2、B3,矢车菊素,花翠素,花翠素3-O-葡萄糖苷,矢车菊素3-O-半乳糖苷含量着色区高于非着色区,差异倍数1.05~11.55。花翠素和矢车菊素是导致着色区与非着色区颜色差异的主要代谢物。RNA-seq分析表明,1050个差异基因中筛选出与花斑种皮颜色形成高度相关的差异表达基因共27个,包括3个PAL、1个C4H、2个CHS、1个F3H、1个F3′H、2个DFR、2个LAR、2个IAA、4个bHLH和9个MYB,其中上调13个、下调14个。KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)分析表明,与种皮颜色合成相关所富集的代谢通路有苯丙氨酸代谢、苯丙醇生物合成、黄酮和黄酮醇生物合成、类黄酮生物合成、植物激素信号转导以及昼夜节律植物,其中类黄酮生物合成代谢途径是花生种皮花斑形成最直接的代谢途径。对20个差异基因进行qPCR验证,结果表明差异基因qPCR表达趋势与转录组测序结果显著一致。本研究结果对进一步揭示花生花斑种皮花青素合成调控机制具有一定的参考意义。 展开更多
关键词 花生 种皮 花青素 黄酮生物合成代谢途径 RNA-SEQ qPCR
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杜仲愈伤组织转录组分析及其类黄酮合成相关基因的qRT-PCR分析 被引量:2
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作者 张俊娥 邓华锋 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第16期3912-3917,共6页
目的分析光、暗培养的杜仲愈伤组织转录组测序结果,验证杜仲愈伤组织转录组测序结果中与类黄酮合成相关基因的表达水平。方法利用Illumina Hi SeqTM 2500测序平台对光暗培养的2种杜仲愈伤组织进行转录组高通量测序,利用Trinity软件对测... 目的分析光、暗培养的杜仲愈伤组织转录组测序结果,验证杜仲愈伤组织转录组测序结果中与类黄酮合成相关基因的表达水平。方法利用Illumina Hi SeqTM 2500测序平台对光暗培养的2种杜仲愈伤组织进行转录组高通量测序,利用Trinity软件对测序结果进行De novo组装,使用BLAST软件将Unigenes序列与NR、Swiss-Prot、GO、COG、KOG、KEGG、Pfam等数据库比对,利用FPKM值估算基因表达丰度,利用qRT-PCR验证与类黄酮合成相关基因的表达水平。结果杜仲愈伤组织转录组测序共获得13.00 Gbp的clean data。De novo组装后共获得62 030条Unigenes,平均长度为736.40 bp。使用BLAST软件将Unigenes序列与相关数据库比对,共获得25 417条Unigenes的注释结果。其中,25 167条Unigenes注释到Nr。4 794条Unigenes和它们相关的酶(enzyme commission numbers)注释到82条KEGG通路。共获得差异表达基因1 986条。在白光(光强为12 000 lx,16 h光照,8 h黑暗)培养的愈伤组织中,有1 139条基因表达上调,847条基因表达下调。在KEGG富集分析中发现,有7个Unigenes与类黄酮合成相关,其中有6个Unigenes在白光培养的杜仲愈伤组织中上调表达,它们编码的酶分别为查耳酮异构酶(EC 5.5.1.6,chalcone isomerase,CHI),查耳酮合成酶(EC 2.3.1.74,chalcome synthase,CHS),类黄酮3′-羟化酶(EC 1.14.13.21,flavonoid3′-monooxygenase,F3’H),反肉桂酸4-单加氧酶(EC 1.14.13.11,trans-cinnamate 4-monooxygenase,CYP),黄酮醇合成酶(EC 1.14.11.23,flavonol synthase,FLS),莽草酸邻羟基肉桂转移酶(EC 2.3.1.133,shikimate-O-hydroxycinnamoyl transferase,HQT)。1个Unigene下调表达,它编码的酶为无色花青素加氧酶(EC 1.14.11.19,leucocyanidin oxygenase,LDOX)。qRT-PCR分析表明,与类黄酮合成相关的7个Unigenes的表达情况与转录组测序分析结果是一致的。结论白光条件(光强为12 000 lx,16 h光照,8 h黑暗)可以促进类黄酮代谢途径中相关化合物的积累。 展开更多
关键词 杜仲 愈伤组织 转录组高通量测序 黄酮生物合成 实时定量PCR
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