固醇调节元件结合蛋白1c的研究进展 被引量：15

1

作者 童国玉 李果 《国外医学（内分泌学分册）》 2002年第5期328-331,共4页

固醇调节元件结合蛋白 1c(SREBP 1c)是一种重要的核转录因子 ,它主要调控脂肪合成和葡萄糖代谢相关酶基因的表达。SREBP 1c不但受到胰岛素 葡萄糖和瘦素等多种激素和营养物的调控 ,而且介导胰岛素对多种基因表达的调控。最近研究发现 ,... 固醇调节元件结合蛋白 1c(SREBP 1c)是一种重要的核转录因子 ,它主要调控脂肪合成和葡萄糖代谢相关酶基因的表达。SREBP 1c不但受到胰岛素 葡萄糖和瘦素等多种激素和营养物的调控 ,而且介导胰岛素对多种基因表达的调控。最近研究发现 ,SREBP 1c的过度表达与肝脏和胰岛等非脂肪组织的脂质积聚相关。实验研究提示 ,干预SREBP 1c的不适当表达可能是预防和治疗 展开更多

关键词 研究进展 固醇调节元件结合蛋白-1C 胰岛素 瘦素 非脂肪组织 脂质积聚 2型糖尿病

下载PDF 职称材料

中医治疗脂肪肝的思路和方法 被引量：10

2

作者 李慧 徐慧媛 《中国临床医生杂志》 2012年第3期73-75,共3页

脂肪肝又称脂肪性肝病，是各种原因导致肝细胞内脂质积聚过多、肝细胞脂变的一类疾病。脂变的肝细胞功能下降或缺失，进而影响人类健康。近年来随着人们生活习惯和饮食结构的变化，加之工作紧张、运动减少、检测手段的普及，脂肪肝的诊... 脂肪肝又称脂肪性肝病，是各种原因导致肝细胞内脂质积聚过多、肝细胞脂变的一类疾病。脂变的肝细胞功能下降或缺失，进而影响人类健康。近年来随着人们生活习惯和饮食结构的变化，加之工作紧张、运动减少、检测手段的普及，脂肪肝的诊断率不断提高，且有明显年轻化的趋势。 展开更多

关键词 脂肪肝 中医治疗 脂肪性肝病 肝细胞脂变 肝细胞功能 脂质积聚 人类健康 饮食结构

下载PDF 职称材料

萝卜硫素通过调控OGG1基因抑制动脉粥样硬化相关巨噬细胞脂质积聚的研究

3

作者 张一铭 王国华 唐黎明 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期985-989,共5页

目的探讨萝卜硫素对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞脂质积聚的影响和作用机制。方法将细胞分为对照组、ox-LDL组(100 μg·mL^(-1)-ox-LDL)、萝卜硫素低剂量组(100μg·mL^(-1)-ox-LDL+5μmol·L^(-1)萝卜硫素)、... 目的探讨萝卜硫素对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞脂质积聚的影响和作用机制。方法将细胞分为对照组、ox-LDL组(100 μg·mL^(-1)-ox-LDL)、萝卜硫素低剂量组(100μg·mL^(-1)-ox-LDL+5μmol·L^(-1)萝卜硫素)、萝卜硫素高剂量组(100μg·mL^(-1)-ox-LDL+10μmol·L^(-1)萝卜硫素)si-OGG1组(100μg·mL^(-1)ox-LDL+10μmol·L^(-1)萝卜硫素+转染si-OGG1)。以蛋白质印迹法检测各组细胞蛋白表达水平,以酶联免疫吸附测定法检测各组细胞炎性因子及8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达水平,以氧化酶法检测细胞内胆固醇水平,以探针法检测活性氧(ROS)水平,以流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果对照组、ox-LDL组、萝卜硫素低剂量组、萝卜硫素高剂量组、si-OGG1组的8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶1(OGG1)蛋白相对表达水平分别为0.80±0.03、0.26±0.02、0.43±0.03、0.68±0.05和0.29±0.04,8-OHdG水平分别为(3.02±0.16)、(23.02±1.07)、(18.28±1.40)、(13.05±1.42)和(17.39±1.53)ng·mL^(-1),总胆固醇含量分别为(0.08±0.01)、(0.39±0.01)、(0.28±0.01)、(0.17±0.02)和(0.30±0.02)mmol·g^(-1),ROS水平分别为1.66±0.10、8.23±0.78、5.41±0.15、3.27±0.24和7.01±0.41,细胞凋亡率分别为(3.64±0.31)%、(21.72±2.70)%、(16.60±1.18)%、(10.04±0.52)%和(16.07±1.46)%。对照组的上述指标与ox-LDL组比较,萝卜硫素低、高剂量组的上述指标与ox-LDL组比较,si-OGG1组的上述指标与萝卜硫素高剂量组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论萝卜硫素可能通过上调OGG1表达抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞脂质积聚。 展开更多

关键词 萝卜硫素 动脉粥样硬化 巨噬细胞 脂质积聚 8-羟基脱氧鸟苷

原文传递

血清TNF-α升高对糖尿病肾脏脂质积聚的影响研究 被引量：6

4

作者 张松 朱琳 +1 位作者 郝军 郑书深 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1161-1165,共5页

目的明确糖尿病小鼠血清TNF-α升高与肾脏脂质代谢的关系。方法 CD1小鼠按体重腹腔注射链脲佐菌素(150 mg·kg-1),72 h后空腹血糖大于16.7 mmol·L-1者确定为1型糖尿病模型,饲养1个月后,采用ELISA方法检测血清中TNF-α水平,免... 目的明确糖尿病小鼠血清TNF-α升高与肾脏脂质代谢的关系。方法 CD1小鼠按体重腹腔注射链脲佐菌素(150 mg·kg-1),72 h后空腹血糖大于16.7 mmol·L-1者确定为1型糖尿病模型,饲养1个月后,采用ELISA方法检测血清中TNF-α水平,免疫组织化学和Western blot方法检测SREBP-1和ADRP的表达。结果与正常对照小鼠相比,糖尿病小鼠血清TNF-α水平明显升高,为正常对照小鼠的7.73倍。SREBP-1和ADRP主要表达于肾小管上皮细胞,糖尿病小鼠肾脏SREBP-1前体片段、成熟片段和ADRP表达明显高于正常对照小鼠,分别是对照组的2.31倍、1.74倍和1.72倍。小鼠血清TNF-α水平和肾脏ADRP表达的相关性分析证实二者间存在正相关,相关系数为0.914。结论糖尿病小鼠血清TNF-α升高可能是导致肾脏脂质积聚的因素之一。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子A 糖尿病 肾小管上皮细胞 脂质积聚 脂肪分化相关蛋白 固醇调节元件结合蛋白-1

下载PDF 职称材料

黄芪多糖和水蛭素联合干预对巨噬细胞脂质积聚的影响及其机制 被引量：1

5

作者 潘杨 张蕾 +5 位作者 李梦杰 郭帅杰 郭家娟 刘红旭 刘卫红 周明学 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2023年第12期1029-1036,共8页

[目的]明确黄芪多糖和水蛭素联合干预对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞内脂质积聚、线粒体膜电位和细胞凋亡相关蛋白的影响。[方法]采用100 mg/L ox-LDL孵育RAW264.7细胞24 h建立泡沫细胞模型,采用优化浓度的黄芪多糖和水蛭... [目的]明确黄芪多糖和水蛭素联合干预对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞内脂质积聚、线粒体膜电位和细胞凋亡相关蛋白的影响。[方法]采用100 mg/L ox-LDL孵育RAW264.7细胞24 h建立泡沫细胞模型,采用优化浓度的黄芪多糖和水蛭素联合干预,设立对照组、模型组、黄芪多糖组、水蛭素组和二者联合干预组。采用油红O染色和氧化酶法检测ox-LDL诱导的巨噬细胞内胆固醇含量,流式细胞仪检测巨噬细胞早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率,激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位的变化,Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2及促凋亡蛋白Caspase-3和Bax的表达水平。[结果]与水蛭素组、黄芪多糖组相比,黄芪多糖和水蛭素联合干预组细胞内胆固醇含量降低更明显(P<0.05)。与模型组相比,黄芪多糖+水蛭素联合干预组可显著降低ox-LDL诱导的巨噬细胞早期凋亡率和总凋亡率(P<0.01)、上调巨噬细胞线粒体膜电位(P<0.01),并显著降低Caspase-3和Bax蛋白表达量,升高Bcl-2蛋白表达量(P<0.05)。[结论]黄芪多糖和水蛭素联合干预可降低巨噬细胞内脂质积聚,且优于单独用药干预,两者联合干预可降低ox-LDL诱导的巨噬细胞凋亡率,其作用机制可能与调控线粒体膜电位和改善促凋亡蛋白Caspase-3、Bax以及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 黄芪多糖 水蛭素 脂质积聚 巨噬细胞 细胞凋亡

下载PDF 职称材料

维拉帕米对前体脂肪细胞3T3-L1分化及脂质积聚的影响 被引量：5

6

作者 刘石 郭锡熔 +4 位作者 潘晓勤 费莉 郭梅 秦锐 陈荣华 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期318-320,F006,共4页

目的:观察钙离子通道阻滞剂盐酸维拉帕米对3T3鄄L1前体脂肪细胞分化及脂质积聚的影响。方法:体外培养3T3鄄L1前体脂肪细胞,在常规诱导分化方案基础上加用维拉帕米(终浓度30μmol/L),采用油红O染色各分化时段脂肪细胞,计数含脂滴脂肪细... 目的:观察钙离子通道阻滞剂盐酸维拉帕米对3T3鄄L1前体脂肪细胞分化及脂质积聚的影响。方法:体外培养3T3鄄L1前体脂肪细胞,在常规诱导分化方案基础上加用维拉帕米(终浓度30μmol/L),采用油红O染色各分化时段脂肪细胞,计数含脂滴脂肪细胞数。结果:维拉帕米干预后,脂肪细胞分化速度低于正常对照,虽未影响脂滴出现的时间(第4天),但含脂滴脂肪细胞数均显著低于同期正常对照(P<0.001)。结论:维拉帕米具有抑制脂肪细胞分化及脂质积聚的作用。 展开更多

关键词 维拉帕米 3T3-L1前体脂肪细胞 分化 脂质积聚

下载PDF 职称材料

CD36对炎症因子TNF-α和IL-6诱发HepG2细胞胞内脂质聚集的影响 被引量：4

7

作者 韦莉 吴俊 +2 位作者 赵蕾 陈压西 杨萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期1833-1838,共6页

目的探讨炎症因子是否通过上调脂肪酸转运导致HepG2细胞脂质积聚及脂毒性。方法分别给予HepG2细胞肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α组:0. 04 mmol/L软脂酸+25 ng/mL TNF-α)和白介素-6 (interleukin-6,IL-6组:0. 04 mmol/... 目的探讨炎症因子是否通过上调脂肪酸转运导致HepG2细胞脂质积聚及脂毒性。方法分别给予HepG2细胞肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α组:0. 04 mmol/L软脂酸+25 ng/mL TNF-α)和白介素-6 (interleukin-6,IL-6组:0. 04 mmol/L软脂酸+20 ng/mL IL-6)刺激处理24 h,酶法检测HepG2细胞内的甘油三酯(triglycercide,TG)水平,ELISA检测细胞内游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量。利用荧光标记的软脂酸,动态监测细胞对外源性脂肪酸的摄取速率。然后利用小RNA干扰技术,构建低表达脂肪酸转运酶(cluster of differentiation,CD36)的HepG2细胞(CD36 KD HepG2)和对照细胞(NC HepG2)模型,检测CD36低表达时细胞对脂肪酸的摄取速率变化,并检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)及过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)的含量。结果炎症因子能够刺激HepG2细胞TG及FFA的累积,其中TNF-α处理组及IL-6处理组的FFA含量及TG含量都明显增加(P <0. 05),并且能够引起HepG2细胞对脂肪酸的摄取增加(P <0. 05)。抑制HepG2细胞中CD36表达,可以减轻胞内脂质积聚(P <0. 05),削弱炎症状态下HepG2细胞对脂肪酸的摄取(P <0. 05),并且能够显著降低细胞内ROS及H_2O_2含量(P <0. 05)。结论在肝脏细胞中,抑制CD36的表达能够减少炎症因子TNF-α和IL-6引起的脂肪酸摄取增加,减轻脂质积聚,改善细胞脂毒性;提示CD36可作为脂肪肝等代谢性疾病的潜在治疗靶点。 展开更多

关键词 HEPG2细胞 炎症 CD36 脂质积聚

下载PDF 职称材料

蒜氨酸通过激活自噬改善HepG2细胞脂质的积聚

8

作者 李天娇 刘禹含 +3 位作者 张彤 杨傲雪 李应华 程碧君 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2023年第4期33-38,共6页

研究蒜氨酸对棕榈酸诱导的HepG2细胞脂质积聚的影响,并探讨蒜氨酸的作用机制与自噬的关系。利用CCK8法测定细胞活性,采用尼罗红染色法观察细胞内脂质堆积情况,并使用ELISA试剂盒法检测甘油三酯和总胆固醇含量,采用WesternBlot测定自噬... 研究蒜氨酸对棕榈酸诱导的HepG2细胞脂质积聚的影响,并探讨蒜氨酸的作用机制与自噬的关系。利用CCK8法测定细胞活性,采用尼罗红染色法观察细胞内脂质堆积情况,并使用ELISA试剂盒法检测甘油三酯和总胆固醇含量,采用WesternBlot测定自噬标志蛋白含量。结果显示,与空白组相比,阳性对照组中HepG2细胞的总胆固醇和甘油三酯含量显著增加,分别增加约1.69和1.36倍;而在蒜氨酸在40~160μmol/L浓度范围作用下,细胞脂滴减少,总胆固醇和甘油三酯显著降低,且呈现剂量依赖性,在160μmol/L浓度的蒜氨酸作用下总胆固醇和甘油三酯含量均极显著下降,分别降低了37.52%和33.33%。同时,蒜氨酸在80~160μmol/L浓度范围内显著增加自噬标志蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比例,分别增加了23.87%和66.13%。因此得出,蒜氨酸改善了棕榈酸诱导的HepG2细胞脂质积聚,并可能通过激活细胞自噬的活性起到改善细胞脂质积聚的作用。 展开更多

关键词 蒜氨酸 棕榈酸 脂质积聚 自噬

下载PDF 职称材料

MRTF-A在动脉粥样硬化病变中的研究进展

9

作者 李红 方五旺 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2023年第10期916-920,共5页

动脉粥样硬化是心血管事件发生的重要因素。相关流行病学调查显示,近几年中国动脉粥样硬化性心血管疾病负担快速而显著增加,给国家公共卫生问题带来重大挑战。心肌素相关转录因子A(MRTF-A)在动脉粥样硬化发展进程中发挥着重要作用,包括... 动脉粥样硬化是心血管事件发生的重要因素。相关流行病学调查显示,近几年中国动脉粥样硬化性心血管疾病负担快速而显著增加,给国家公共卫生问题带来重大挑战。心肌素相关转录因子A(MRTF-A)在动脉粥样硬化发展进程中发挥着重要作用,包括参与炎症反应、促进粥样硬化进程中脂质积聚及促进血管平滑肌细胞表型转化等,探索MRTF-A在动脉粥样硬化病变中的研究进展对于寻找新的治疗靶点具有重要意义。文章就MRTF-A在动脉粥样硬化病变过程中的作用进行综述,可为冠状动脉粥样硬化的靶向治疗提供参考。 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 心肌素相关转录因子A 炎症反应 脂质积聚 血管平滑肌细胞表型转化

下载PDF 职称材料

炎症状态下阿托伐他汀对HepG2细胞氧化应激和脂质积聚的影响 被引量：2

10

作者 肖亚运 吴为 +3 位作者 周晓倩 陈压西 阮雄中 赵蕾 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期802-805,共4页

目的研究阿托伐他汀在炎症状态下对人肝癌细胞株Hep G2细胞氧化应激和脂质积聚的影响。方法将普通Hep G2细胞分为为3组:正常组、模型组[用100 ng·m L^(-1)肿瘤坏死因子(TNF-α)处理]及实验组(用100 ng·m L^(-1)TNF-α+10μmol... 目的研究阿托伐他汀在炎症状态下对人肝癌细胞株Hep G2细胞氧化应激和脂质积聚的影响。方法将普通Hep G2细胞分为为3组:正常组、模型组[用100 ng·m L^(-1)肿瘤坏死因子(TNF-α)处理]及实验组(用100 ng·m L^(-1)TNF-α+10μmol·L^(-1)阿托伐他汀处理),3组同时负荷100μg·m L^(-1)低密度脂蛋白(LDL),处理时间24 h。用油红O染色测定细胞内脂质含量;以荧光定量聚合酶链式反应和免疫印迹法分别检测Hep G2细胞脂肪酸合酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)的基因和SREBP1蛋白表达;以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针染色检测Hep G2细胞内活性氧化产物(ROS)的含量;以比色法检测Hep G2细胞过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)的含量。结果正常组与模型组SREBP1蛋白灰度值分别为1.01±0.001,1.61±0.34,这2组的SREBP1 mRNA水平分别为1.01±0.16,3.61±0.39,这2组的FAS的mRNA水平分别是1.03±0.32,1.99±0.36,这2组的ACC的mRNA水平分别是0.95±0.29,2.37±0.52。与正常组相比,模型组的细胞FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组相比,实验组的Hep G2FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白灰度值分别是2.95±0.92,3.99±1.16,2.85±0.91,2.94±0.65,实验组的Hep G2 FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。表明在炎症状态下,阿托伐他汀进一步加重了Hep G2细胞内脂质的沉积。正常组、模型组与实验组的细胞ROS含量(以荧光强度代表)分别为1.00±0.20,1.77±0.25,3.20±0.53;正常组、模型组与实验组的H2O2含量分别为(2.30±0.31),(4.32±0.77),(5.31±0.75)nmol·mg^(-1);这2组的MDA含量分别为(0.78±0.22),(1.86±0.23),(3.43±1.15)nmol·mg^(-1),与正常组比较,模型组差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,实验组差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在炎症状态下,� 展开更多

关键词 阿托伐他汀 炎症应激 脂质积聚 人肝癌细胞株

原文传递

荷叶生物碱对脂肪变性HepG2细胞脂质积聚的影响 被引量：2

11

作者 樊洁敏 孙静悦 +1 位作者 李婷婷 蒋益虹 《食品与营养科学》 2021年第2期72-79,共9页

本文以油酸诱导HepG2细胞脂肪变性构建非酒精脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)体外细胞模型,通过测定细胞存活率、胞内TG含量、胞内脂滴油红O染色情况和脂质代谢相关基因mRNA表达研究荷叶生物碱提取物(Lotus leaf extra... 本文以油酸诱导HepG2细胞脂肪变性构建非酒精脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)体外细胞模型,通过测定细胞存活率、胞内TG含量、胞内脂滴油红O染色情况和脂质代谢相关基因mRNA表达研究荷叶生物碱提取物(Lotus leaf extract, LLE)对NAFLD脂质积聚的影响。结果显示,LLE对脂肪变性HepG2细胞的IC50为73.77 &#181;g/mL,在无细胞毒性的浓度下,LLE可明显降低脂肪变性HepG2细胞中甘油三酯(Triglyceride, TG)含量和脂滴积聚程度,且高浓度作用更为明显。进一步研究发现,LLE对脂肪变性HepG2细胞中SREBP-1c和ACCα的mRNA表达影响不大,但能显著上调脂肪变性HepG2中PPARα、CPT-1和ACOX1的mRNA表达水平(p 5)。综上,LLE可抑制脂肪变性HepG2细胞增殖,降低细胞中TG含量和脂滴积聚,且该作用与TG的β-氧化分解有关。 展开更多

关键词 荷叶生物碱 脂质积聚 HEPG2细胞 非酒精性脂肪肝

下载PDF 职称材料

棕榈酸上调FAT/CD36表达致HepG2细胞脂质积聚的机制研究 被引量：2

12

作者 谢云霞 赵蕾 +2 位作者 张艳艳 陈压西 阮雄中 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第13期1308-1313,共6页

目的观察脂肪酸转位酶FAT/CD36在棕榈酸诱导的HepG2细胞内脂质积聚中的作用,并探讨其分子机制。方法 HepG2细胞分对照组和棕榈酸组,用Western blot、双荧光素酶报告基因、荧光定量PCR、多聚核糖体分析检测棕榈酸对CD36表达、启动子活性... 目的观察脂肪酸转位酶FAT/CD36在棕榈酸诱导的HepG2细胞内脂质积聚中的作用,并探讨其分子机制。方法 HepG2细胞分对照组和棕榈酸组,用Western blot、双荧光素酶报告基因、荧光定量PCR、多聚核糖体分析检测棕榈酸对CD36表达、启动子活性和蛋白翻译效率的影响;油红O染色和FFA定量测定反映细胞内脂质含量;荧光显微镜实时观察细胞对FFA的动态摄入。然后将小干扰RNA转染到HepG2细胞,构建低表达CD36的HepG2细胞和阴性对照HepG2。用油红O染色,FFA定量和荧光显微镜观测棕榈酸负荷的转染细胞内脂质积聚和FFA摄取。结果棕榈酸能促进HepG2细胞CD36的表达,增强其启动子活性,增加蛋白翻译效率;棕榈酸组细胞内脂滴增多,FFA含量(240.17±19.83)ng/mg明显高于对照组(144.60±53.52)ng/mg(P<0.05),脂肪酸摄取速度也明显快于对照组;低表达CD36的HepG2细胞中CD36的mRNA和蛋白含量仅为阴性对照细胞的58%和50%。低表达CD36的HepG2细胞内脂滴明显少于阴性对照,FFA水平(98.38±14.18)ng/mg较阴性对照组(240.17±21.12)ng/mg明显减低(P<0.05),细胞对FFA的摄取也减慢。结论棕榈酸在转录和翻译水平促进HepG2的CD36表达,导致细胞内脂质积聚。 展开更多

关键词 棕榈酸 CD36 脂质积聚 HEPG2

下载PDF 职称材料

TNF-α促进HepG2肝细胞脂质积聚及其机制的初步研究 被引量：2

13

作者 陈书梅 杨淑敏 +6 位作者 张文龙 吕琼 叶鹏 高茹菲 梅玫 汪志红 李启富 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1088-1092,共5页

目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是否能够促进肝细胞脂质积聚,并对其机制进行初步探讨。方法将HepG2肝细胞分为空白对照组、单纯TNF-α组(TNF-α2ng/mL或20ng/mL)、软脂酸组(软脂酸0.08mmol/L或0.2mmol/L)及... 目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是否能够促进肝细胞脂质积聚,并对其机制进行初步探讨。方法将HepG2肝细胞分为空白对照组、单纯TNF-α组(TNF-α2ng/mL或20ng/mL)、软脂酸组(软脂酸0.08mmol/L或0.2mmol/L)及联合组(TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L、TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L),处理24h,应用化学酶促-比色法定量检测细胞内TG含量。进一步选取TNF-α20ng/mL和软脂酸0.08mmol/L,通过油红O染色观察HepG2细胞内脂质积聚情况;实时荧光定量PCR和Western blot检测HepG2细胞SREBP-1、FAS、ACCα的表达水平。结果①单纯TNF-α组TG含量[TNF-α2ng/mL组(0.344±0.093)μg/μg、TNF-α20ng/mL组(0.329±0.068)μg/μg]分别较空白对照组[(0.192±0.048)μg/μg]显著升高(P<0.05);联合组[TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L组(0.451±0.096)μg/μg、TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L组(0.821±0.257)μg/μg、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L组(1.032±0.286)μg/μg、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L组(2.134±1.049)μg/μg]分别较软脂酸组[软脂酸0.08mmol/L组(0.247±0.069)μg/μg、软脂酸0.2mmol/L组(0.341±0.031)μg/μg]显著升高(P<0.05);②油红O染色进一步显示,TNF-α促进肝细胞内脂质积聚。③实时荧光定量PCR和Western blot检测结果显示单纯TNF-α组与空白对照组相比,HepG2细胞SREBP-1、FAS、ACCα的表达均增加(P<0.05);联合组与软脂酸组相比,肝细胞内SREBP-1、FAS、ACCα的表达水平明显上调(P<0.05)。结论TNF-α促进HepG2肝细胞内脂质积聚,增加SREBP-1、FAS、ACCα的表达。 展开更多

关键词 TNF-Α 软脂酸 SREBP-1 HepG-2肝细胞 脂质积聚

下载PDF 职称材料

脂多糖通过mTOR途径抑制肝细胞脂质自噬 被引量：1

14

作者 候正萍 李燕平 +2 位作者 赵蕾 陈压西 阮雄中 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期813-820,共8页

本研究旨在探讨脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)对肝细胞脂质自噬的影响及其机制。体外培养人肝癌细胞株HepG2,用0.1 mmol/L软脂酸(palmitic acid, PA)负荷,分为对照(0μg/mL LPS)组、LPS (10μg/mL)组、LPS+DMSO组、LPS+雷帕霉素(rapa... 本研究旨在探讨脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)对肝细胞脂质自噬的影响及其机制。体外培养人肝癌细胞株HepG2,用0.1 mmol/L软脂酸(palmitic acid, PA)负荷,分为对照(0μg/mL LPS)组、LPS (10μg/mL)组、LPS+DMSO组、LPS+雷帕霉素(rapamycin, RAPA, 10μmol/L)组。油红O染色观察HepG2细胞内脂质积聚情况;自噬双标腺病毒mRFP-GFP-LC3转染细胞后激光共聚焦显微镜观察细胞自噬流;通过氟硼二吡咯BODIPY 493/503荧光染料和溶酶体标记物溶酶体关联膜蛋白1 (lysosomal associated membrane protein 1, LAMP1)进行脂滴和溶酶体的共定位,反映细胞内脂质自噬水平;Western blot检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)、p-mTOR、核糖体S6激酶1 (ribosome protein subunit 6 kinase 1,S6K1)、p-S6K1、LC3II/I、P62蛋白表达。结果显示,与对照组相比,LPS组细胞油红O染色红染脂滴增加,自噬体增加,自噬溶酶体明显降低,LAMP1/BODIPY共定位率降低(P <0.05),p-mTOR/mTOR、p-S6K1/S6K1和LC3II/LC3I比值升高,P62蛋白表达增加(P <0.05)。加入RAPA干预后,与LPS+DMSO组相比,自噬体减少,自噬溶酶体明显增加,LAMP1/BODIPY共定位率升高(P <0.05),肝细胞油红O染色红染脂滴减少(P <0.001)。综上,LPS通过激活mTOR通路抑制HepG2细胞脂质自噬,从而加重细胞内脂质积聚。 展开更多

关键词 脂多糖 肝细胞 脂质自噬 脂质积聚

原文传递

海洋深层水与褐藻糖胶配伍应用抑制HepG2肝细胞脂质积聚调节作用的研究 被引量：1

15

作者 何珊 彭维兵 +2 位作者 周洪雷 刘可春 夏萱 《山东科学》 CAS 2015年第6期11-16,共6页

以Hep G2细胞为模型,研究海洋深层水(deep sea water,DSW)与褐藻糖胶(fucoidan,FPS)配伍应用对Hep G2细胞脂质代谢的调节作用。采用MTT法确定与DSW配伍应用的FPS浓度控制在50μg/m L以内。在这一范围内,随着FPS浓度的增加(分别为5,10,20... 以Hep G2细胞为模型,研究海洋深层水(deep sea water,DSW)与褐藻糖胶(fucoidan,FPS)配伍应用对Hep G2细胞脂质代谢的调节作用。采用MTT法确定与DSW配伍应用的FPS浓度控制在50μg/m L以内。在这一范围内,随着FPS浓度的增加(分别为5,10,20,50μg/m L),Hep G2细胞胞内的脂质含量逐渐降低,呈现明显的剂量依赖关系。而且,DSW与50μg/m L的FPS配伍应用的效果显著优于单用同剂量的DSW或FPS。实验结果表明,DSW与FPS配伍应用对Hep G2细胞脂质代谢具有更好的调节作用,其最佳配伍应用浓度为50μg/m L,这为高脂血症的防治提供了一个新的思路。 展开更多

关键词 海洋深层水 褐藻糖胶 配伍应用 脂质积聚 HEPG2细胞

下载PDF 职称材料

高脂饮食对C57BL/6J小鼠肝脏组织糖异生的影响 被引量：1

16

作者 杜琳敏 赵蕾 +2 位作者 李青 阮雄中 陈压西 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期337-340,共4页

目的:研究高脂饮食对C57BL/6J小鼠肝脏组织糖异生的影响。方法:将8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为普通饮食组和高脂饮食组。饲养14周后处死,收集血清和肝脏组织,ELISA和酶学方法检测血清与肝脏组织中甘油三脂(triglyceride,TG)、游离脂肪... 目的:研究高脂饮食对C57BL/6J小鼠肝脏组织糖异生的影响。方法:将8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为普通饮食组和高脂饮食组。饲养14周后处死,收集血清和肝脏组织,ELISA和酶学方法检测血清与肝脏组织中甘油三脂(triglyceride,TG)、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量,测定血清中胰岛素水平;过碘酸-希夫(periodic acid-Schiff,PAS)染色观察肝细胞糖原颗粒;实时定量PCR和Western blot分别检测肝脏组织糖异生相关的磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate car-boxykinase,PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸激酶(glucose-6-phosphatase,G-6-Pase)的基因和蛋白表达水平;葡萄糖耐量实验评价小鼠胰岛素抵抗程度。结果:饲养14周后,高脂饮食组小鼠体质量较普通饮食组明显增加;与普通饮食组相比,高脂饮食组小鼠血清与肝脏组织中TG、FFA含量明显增加;PAS染色表明高脂饮食组肝脏糖原含量明显增多;基因和蛋白检测结果显示高脂饮食组肝脏组织中糖异生相关的基因、蛋白表达增加;同时空腹血糖及血清胰岛素明显增加;葡萄糖耐量实验异常,血糖峰值延迟。结论:高脂饮食使C57BL/6J小鼠肝脏组织PEPCK、G-6-Pase表达增加,糖异生增加,导致空腹血糖增加,葡萄糖耐量受损。 展开更多

关键词 高脂饮食 肝脏组织 脂质积聚 糖异生

下载PDF 职称材料

未知功能基因JAZF1过表达对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响 被引量：1

17

作者 杨艳 李伶 +3 位作者 杨刚毅 孙滨 卢春敏 苗宗玉 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期595-598,共4页

目的 观察JAZF1基因（Juxtaposed with another zincfinger gene 1）过表达对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢相关基因的影响.方法 采用实时荧光定量PCR（RT-QPCR）法检测JAZF1 mRNA在健康C57BL/6J小鼠多种组织表达分布情况;构建JAZF1真核表达... 目的 观察JAZF1基因（Juxtaposed with another zincfinger gene 1）过表达对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢相关基因的影响.方法 采用实时荧光定量PCR（RT-QPCR）法检测JAZF1 mRNA在健康C57BL/6J小鼠多种组织表达分布情况;构建JAZF1真核表达载体并瞬时转染3T3-L1细胞,RT-QPCR法检测JAZF1、糖脂代谢相关基因mRNA的表达;用Western印迹法测定各组细胞JAZF1蛋白水平;油红O染色比色法检测细胞内脂质积聚的变化.结果 转染48 h后,JAZF1转染组脂肪细胞中,JAZF1 mRNA及蛋白表达明显高于阴性对照和空载组,激素敏感脂肪酶（HSL）mRNA表达水平明显增加（P〈0.05）,脂肪酸合成酶（FAS）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、类固醇调节元件结合蛋白1（SREBP1）mRNA相对表达量明显降低（均P〈0.01）,脂肪细胞甘油三酯酶（ATGL）、葡萄糖转运子1（GLUT1）、GLUT4 mRNA表达并无明显改变;油红O染色显示JAZF1转染组细胞内脂质积聚明显降低（P〈0.05）.结论 JAZFl在C57BL/6J小鼠多种组织均有表达,提示其可能在维持正常生理功能中起着一定作用.3T3-L1细胞过表达JAZF1可减少脂质合成、增加脂解,并可明显改善脂质积聚,可能是肥胖和糖尿病治疗的一个潜在靶点. 展开更多

关键词 JAZF1 3T3-L1细胞 糖代谢 脂代谢 实时荧光定量PCR 脂质积聚

原文传递

炎症对脂肪酸负荷的HepG2细胞FAT/CD36表达的影响 被引量：1

18

作者 殷鹭 赵蕾 +3 位作者 李青 黄爱龙 陈压西 阮雄中 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期341-345,共5页

目的:观察炎症是否干扰脂肪酸负荷的人肝癌细胞系HepG2细胞脂肪酸转运蛋白/CD36(fatty acid transporter/CD36,FAT/CD36)的表达及脂质代谢。方法:分别给予不同浓度软脂酸(0.00、0.04、0.08、0.16、0.32 mmol/L)处理HepG2细胞24 h。采用W... 目的:观察炎症是否干扰脂肪酸负荷的人肝癌细胞系HepG2细胞脂肪酸转运蛋白/CD36(fatty acid transporter/CD36,FAT/CD36)的表达及脂质代谢。方法:分别给予不同浓度软脂酸(0.00、0.04、0.08、0.16、0.32 mmol/L)处理HepG2细胞24 h。采用Western blot和real-time PCR的方法检测HepG2细胞FAT/CD36的蛋白及mRNA的表达水平,再用油红O的方法观察细胞的脂质积聚情况。然后进一步选取0.04 mmol/L的软脂酸联合炎症因子[25 ng/ml的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)或20 ng/ml的白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)]处理HepG2细胞24 h后,观察细胞FAT/CD36的蛋白表达情况,再用油红O和酶法检测细胞内的甘油三酯(triglyceride,TG)水平,ELISA检测细胞内游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)含量。结果:软脂酸呈浓度依赖性上调HepG2细胞FAT/CD36的蛋白(r=0.873,P=0.000)和mRNA表达(r=0.884,P=0.000)及细胞内脂质积聚。炎症因子TNF-α和IL-6能明显刺激脂肪酸负荷的HepG2细胞FAT/CD36的蛋白表达进一步增加(P值分别为0.001和0.000)。油红O染色显示炎症因子TNF-α和IL-6能明显促进HepG2细胞的脂质积聚,胞内TG定量检测也显示炎症因子能促进HepG2细胞的脂质积聚,其中软脂酸联合TNF-α组与对照组及软脂酸组相比,P值分别为0.009和0.037,软脂酸联合IL-6组与对照组及软脂酸组相比,P值均为0.000。胞内FFA定量检测结果与油红O染色和TG检测结果一致,也显示炎症因子能促进HepG2细胞的脂质积聚,其中软脂酸联合TNF-α组与对照组及软脂酸组相比,P值分别为0.001和0.002,软脂酸联合IL-6组与对照组及软脂酸组相比,P值均为0.000。结论:炎症因子可以上调HepG2细胞FAT/CD36的表达并加重细胞内的脂质积聚。 展开更多

关键词 炎症 软脂酸 脂肪酸转运蛋白 CD36 HEPG2细胞 脂质积聚

下载PDF 职称材料

脂毒性与增龄

19

作者 胡淑国 宋光耀 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期939-942,共4页

脂类积聚过多会导致细胞功能障碍（脂毒性）和脂质介导的细胞程序性死亡（脂凋亡）。脂肪储库在中年或早老年之后逐渐下降，并伴有脂肪组织功能失调和重新分布^[1]。衰老与非脂肪组织脂质积聚的生理性增加有关，这可能是随着年龄的增长... 脂类积聚过多会导致细胞功能障碍（脂毒性）和脂质介导的细胞程序性死亡（脂凋亡）。脂肪储库在中年或早老年之后逐渐下降，并伴有脂肪组织功能失调和重新分布^[1]。衰老与非脂肪组织脂质积聚的生理性增加有关，这可能是随着年龄的增长，2型糖尿病、脂肪肝和心血管疾病等慢性病增加的原因。总之，肥胖可能通过其脂毒性作用加速衰老的进程。 展开更多

关键词 脂毒性 非脂肪组织 细胞程序性死亡 增龄 细胞功能障碍 脂质积聚 2型糖尿病 心血管疾病

原文传递

西罗莫司对肿瘤坏死因子α诱导的HepG2细胞脂质积聚的影响

20

作者 李贝贝 陈压西 +1 位作者 阮雄中 赵蕾 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期526-529,共4页

目的研究西罗莫司对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的HepG2细胞脂质积聚的影响。方法将棕榈酸(PA)负荷的HepG2细胞分为3组:对照组[0.2%牛血清白蛋白(BSA)+0.16 mmol·mL^(-1)PA],模型组(0.2%BSA+0.16 mmol·mL^(-1)PA+25 ng·m... 目的研究西罗莫司对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的HepG2细胞脂质积聚的影响。方法将棕榈酸(PA)负荷的HepG2细胞分为3组:对照组[0.2%牛血清白蛋白(BSA)+0.16 mmol·mL^(-1)PA],模型组(0.2%BSA+0.16 mmol·mL^(-1)PA+25 ng·mL^(-1)TNF-α),实验组(0.2%BSA+0.16mmol·mL^(-1)PA+25 ng·mL^(-1)TNF-α+10 ng·mL^(-1)西罗莫司)。各组处理24h后,以油红O染色观察HepG2细胞脂质蓄积情况;以蛋白质印迹法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其下游核糖体蛋白P70S6激酶(P70S6K)总蛋白和磷酸化蛋白水平;以实时荧光定量聚合酶链式反应检测固醇调节原件结合蛋白1(SREBP1)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)mRNA的表达。结果在炎症状态下,西罗莫司可以明显抑制TNF-α诱导的HepG2细胞脂质积聚。同时,西罗莫司降低了TNF-α诱导的磷酸化mTOR(p-mTOR)及磷酸化P70S6K(p-P70S6K)蛋白表达:对照组、模型组及实验组的p-mTOR蛋白相对水平分别为1.00±0.20,3.11±0.60,2.38±0.50;这3组的p-P70S6K蛋白相对水平分别为1.00±0.30,3.67±0.60,1.62±0.50,模型组与对照组相比或者实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。西罗莫司还下调了SREBP1、ACC、FAS的mRNA表达:对照组、模型组及实验组的FAS mRNA相对水平分别是1.04±0.32,2.85±0.90,1.68±0.38;这3组的ACC mRNA相对水平分别是1.04±0.30,3.23±1.33,2.07±0.52;这3组的SREBP1的mRNA相对水平分别是1.01±0.16,3.85±1.30,2.82±0.57,模型组与对照组相比或者实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论西罗莫司通过抑制mTOR信号通路,减轻TNF-α诱导的HepG2细胞脂质积聚。 展开更多

关键词 西罗莫司 非酒精性脂肪性肝炎 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 脂质积聚

原文传递