牦牛白细胞介素2(IL2)基因cDNA的分子克隆和表达研究(英文) 被引量：3

1

作者 付满良 李惠 +4 位作者 武梅 王丽焕 吴凯源 宁健可 高荣 《四川动物》 CSCD 北大核心 2005年第4期507-512,共6页

目的克隆牦牛免疫基因并研究其免疫特性。方法以伴刀豆球蛋白A(Con A)激活的体外培养的牦牛血液淋巴细胞,提取激活淋巴细胞的总RNA,用RT-PCR方法,从中克隆出白细胞介素2 cDNA,连接到T载体上测序,并亚克隆到pGEX4T-1表达质粒,在大肠杆菌... 目的克隆牦牛免疫基因并研究其免疫特性。方法以伴刀豆球蛋白A(Con A)激活的体外培养的牦牛血液淋巴细胞,提取激活淋巴细胞的总RNA,用RT-PCR方法,从中克隆出白细胞介素2 cDNA,连接到T载体上测序,并亚克隆到pGEX4T-1表达质粒,在大肠杆菌进行了重组表达,纯化融合表达YIL2产物,MTT比色法测定其体外刺激牦牛血液淋巴母细胞增殖的免疫活性。结果YIL2 cDNA序列分析显示:在其编码区442位点的一个碱基发生突变(由C突变为T),从而导致终止密码子(TAA)出现,使YIL2蛋白表达提前终止,与其它牛IL2蛋白相比少了8个氨基酸。MTT比色法测定结果表明重组牦牛IL2蛋白体外能显著促进牦牛淋巴母细胞的增殖。结论本实验成功克隆了牦牛IL2基因,其原核表达产物具有显著的免疫活性,这为研制新型免疫增强剂来提高牦牛对各种疾病的抵抗力,增强牦牛疫苗的免疫保护率奠定了基础。 展开更多

关键词 牦牛 白细胞介素2基因 克隆 原核表达 生物活性

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重组绵羊白细胞介素2基因的分泌性表达及表达产物的提取

2

作者 刘艳环 苗利光 +2 位作者 陈立志 刘晓颖 张洪涛 《特产研究》 2002年第4期23-24,共2页

将构建的绵羊白细胞介素2基因表达菌株(PMPOIL2)接种在营养肉汤培养基上,培养20h,分别收集菌体及上清液。菌体超声裂解;上清液中的蛋白质分别用MgCl2、(NH4)2SO4、NaCl沉积。用抗Pilin-IL2血清检测菌体裂解物及上清沉淀物,结果上清沉淀... 将构建的绵羊白细胞介素2基因表达菌株(PMPOIL2)接种在营养肉汤培养基上,培养20h,分别收集菌体及上清液。菌体超声裂解;上清液中的蛋白质分别用MgCl2、(NH4)2SO4、NaCl沉积。用抗Pilin-IL2血清检测菌体裂解物及上清沉淀物,结果上清沉淀物中有凝集抗原,而菌体中没有,并且(NH4)2SO4沉积的效果最好。 展开更多

关键词 绵羊 白细胞介素2基因 分泌性表达 表达产物

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奶牛白细胞介素2基因的克隆及序列分析

3

作者 盖仁华 平丽 李广兴 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第11期17-21,共5页

根据GenBank发表的奶牛白细胞介素2(IL-2)基因序列,设计一对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增奶牛IL-2基因,琼脂糖电泳显示扩增出的片段约为477bp。回收片段,克隆入pMD18-T载体,经菌落PCR、酶切及重组质粒PCR鉴定,测序结果显示,克隆的奶牛... 根据GenBank发表的奶牛白细胞介素2(IL-2)基因序列,设计一对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增奶牛IL-2基因,琼脂糖电泳显示扩增出的片段约为477bp。回收片段,克隆入pMD18-T载体,经菌落PCR、酶切及重组质粒PCR鉴定,测序结果显示,克隆的奶牛IL-2基因与GenBank发表的奶牛IL-2基因序列同源性为98.7%。该序列与水牛和山羊的IL-2基因序列同源性最大,在95%以上;氨基酸和抗原性比较分析显示,奶牛的IL-2与山羊及水牛的IL-2在这两方面有较高的同源性。 展开更多

关键词 白细胞介素2基因 克隆 序列分析 奶牛

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鸡传染性喉气管炎病毒gD基因与ChIL-2重组禽痘病毒的构建及其免疫效力试验 被引量：4

4

作者 杨明凡 张素梅 +2 位作者 陈红英 魏战勇 崔保安 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1768-1772,共5页

将鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD基因和鸡白细胞介素2(ChIL-2)基因通过同源重组法重组禽痘病毒转移载体,构建含ILTV gD基因和ChIL-2基因的重组禽痘病毒转移载体rFPV-IL2-ILTV-gD,蓝色蚀斑纯化法纯化重组病毒,用IFA检测重组病毒中ILTV g... 将鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gD基因和鸡白细胞介素2(ChIL-2)基因通过同源重组法重组禽痘病毒转移载体,构建含ILTV gD基因和ChIL-2基因的重组禽痘病毒转移载体rFPV-IL2-ILTV-gD,蓝色蚀斑纯化法纯化重组病毒,用IFA检测重组病毒中ILTV gD基因的表达和用ELISA试剂盒检测ChIL-2的表达。重组病毒rFPV-IL2-ILTV-gD免疫试验鸡,间接ELISA测定血清中ILTV抗体效价,动物试验用构建的ILTV强毒以滴鼻方式攻击各组试验鸡,结果表明,外源基因在重组禽痘病毒中得到了稳定表达;ELISA检测结果表明在免疫7 d后能够检测到血清抗体,免疫21 d后血清抗体达到高峰,此后便开始逐渐下降,符合疫苗免疫的消长规律;攻毒后每组鸡的发病情况可以看出重组病毒rFPV-IL2-ILTV-gD组和疫苗对照组对ILTV强毒攻击的保护率分别为96%和92%,而空白对照组为8%。说明构建的重组病毒rFPV-IL2-ILTV-gD免疫效力稍优于弱毒疫苗,能够较好的保护免疫鸡群。 展开更多

关键词 鸡传染性喉气管炎病毒gD基因 鸡白细胞介素2基因 重组禽痘病毒 免疫效力

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猪白细胞介素2与融合白细胞介素4/6基因共表达的免疫效应研究 被引量：2

5

作者 杨璐一 肖永乐 +5 位作者 万小平 罗公明 王晔 陈义辉 孙文魁 高荣 《四川动物》 CSCD 北大核心 2014年第2期167-173,共7页

目的构建猪融合白细胞介素4/6与猪白细胞介素2基因的共表达载体,研究其共表达对小鼠免疫的协同效应。方法以2A自剪接技术首次构建猪融合白细胞介素4/6与白细胞介素2基因的共表达重组质粒,以壳聚糖纳米材料包裹制成纳米颗粒,进行体外转染... 目的构建猪融合白细胞介素4/6与猪白细胞介素2基因的共表达载体,研究其共表达对小鼠免疫的协同效应。方法以2A自剪接技术首次构建猪融合白细胞介素4/6与白细胞介素2基因的共表达重组质粒,以壳聚糖纳米材料包裹制成纳米颗粒,进行体外转染HEK293细胞,提取总RNA进行RT-PCR分析,最后肌肉注射小鼠进行体内实验并分析。结果成功构建了重组共表达质粒VRIL4/6-2;壳聚糖包裹后转染HEK293细胞,48 h后收集细胞,RT-PCR检测显示目的基因能够在HEK293细胞中高效地转录与表达。小鼠接种实验结果表明,实验组血清中的IgG和IgG2a的含量比对照组显著增加,并且VRIL4/6-2-CS接种组的小鼠体液免疫水平明显增高(P<0.05);VRIL4/6-2实验组的CD4+淋巴细胞显著多于其它实验组(P<0.05);实验组IL-2、IL-4、IL-6、IL-23基因的表达水平明显高于对照组(P<0.05),实验组小鼠外周血白细胞、血小板和血红蛋白的含量均显著高于对照组(P<0.05)。结论 VRIL4/6-2共表达质粒能够更好的增强动物体液免疫和细胞免疫机能,可作为提高动物体液免疫和细胞免疫的经济高效安全新型免疫调节剂,具有潜在的重要应用前景。 展开更多

关键词 猪融合白细胞介素4 6基因 猪白细胞介素2基因 共表达 免疫 小鼠

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将IL-2基因构建到叶绿体转化载体并转入烟草 被引量：2

6

作者 黄益洪 刘蔼民 +5 位作者 汤日圣 张大栋 童红玉 朱鑫泉 沙钟瑞 吴光南 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期379-383,共5页

以人白细胞介素2（IL-2）基因为目的基因，烟草accD和ORF184同源序列为侧翼引导序列构建成烟草叶绿体转化载体pAIL。以火烟草NC89为转化受体，通过基因枪方法对烟草叶片进行轰击转化。轰击参数为：每枪0．6μm的金粉300～500μg，轰击距... 以人白细胞介素2（IL-2）基因为目的基因，烟草accD和ORF184同源序列为侧翼引导序列构建成烟草叶绿体转化载体pAIL。以火烟草NC89为转化受体，通过基因枪方法对烟草叶片进行轰击转化。轰击参数为：每枪0．6μm的金粉300～500μg，轰击距离6cm，真空度9．48×10^4Pa。在500mg/L的壮观霉素筛选眶下，经约30d的筛选分化，逐渐产牛绿色的抗壮观霉素芽或愈伤，目前已获得31株（丛）抗性芽及8块抗性愈伤。用IL-2基因的PCR引物对4株较大的小苗进行检测，初步证明3株为转基因植株。 展开更多

关键词 烟草 叶绿体转化 壮观霉素 人白细胞介素2基因

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腐蹄病节瘤拟杆菌纤毛蛋白与绵羊白细胞介素-2融合基因表达载体的构建及表达 被引量：1

7

作者 王克坚 Om Dhungyel +5 位作者 余兴龙 冯书章 赵宝华 JR Egerton 朱平 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期131-133,共3页

根据腐蹄病节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因 (Pili基因 )序列 ,在 Pili基因 6 19bp Ehe 酶切位点上插入绵羊白细胞介素 - 2基因 (Ovi IL- 2基因 ) ,构建了 Pili基因与 Ovi IL- 2基因的融合基因表达载体。先用 Eco R 、Bam H 双酶切p Bluescript-... 根据腐蹄病节瘤拟杆菌纤毛蛋白基因 (Pili基因 )序列 ,在 Pili基因 6 19bp Ehe 酶切位点上插入绵羊白细胞介素 - 2基因 (Ovi IL- 2基因 ) ,构建了 Pili基因与 Ovi IL- 2基因的融合基因表达载体。先用 Eco R 、Bam H 双酶切p Bluescript- Ovi IL - 2重组质粒 ,获得两端具有 Eco R 、Bam H 位点的 Ovi IL - 2基因片段 ,用 Klenow补平后 ,与经Ehe 酶切后的重组质粒 PME2 90 - Pili进行平端连接 ;转化 JM10 5感受态细胞 ,筛选阳性克隆 ,分别用 Bam H 、Eco R 、Xba 、Bgl 、Pvu 等进行酶切鉴定。然后将阳性重组质粒转染 BL - 2 1表达宿主感受态细胞 ,用 0 .1m ol/ L Mg Cl2沉淀法和超声波裂解法提取 BL- 2 1表达 Pili基因与 Ovi IL- 2基因融合基因表达蛋白。对流免疫电泳对重组融合蛋白的特异性分析证明 ,融合蛋白主要在宿主菌体中表达 ;SDS- PAGE电泳结果表明 ,重组融合蛋白分子大小约为 330 0 0 ,表达产物的量约占菌体的 5 .49%。 展开更多

关键词 腐蹄病 节瘤拟杆菌 纤毛蛋白基因 绵羊白细胞介素2基因 基因工程疫苗 免疫

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鸭白细胞介素2全基因组结构分析

8

作者 王金勇 齐静 +3 位作者 方杰 颜焰 申会刚 周继勇 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期15-19,共5页

依据鸡白细胞介素2(chIL-2)全基因组序列设计引物探针,以简易基因组抽提法获得的鸭外周血单核细胞基因组DNA为模板,用长距离聚合酶链式反应(LD-PCR)扩增出鸭白细胞介素2(duIL-2)全基因片段。经序列测定,得到的duIL-2基因组DNA序列全长为... 依据鸡白细胞介素2(chIL-2)全基因组序列设计引物探针,以简易基因组抽提法获得的鸭外周血单核细胞基因组DNA为模板,用长距离聚合酶链式反应(LD-PCR)扩增出鸭白细胞介素2(duIL-2)全基因片段。经序列测定,得到的duIL-2基因组DNA序列全长为3528bp。运用生物信息学方法对duIL-2的基因、启动子结构和cDNA序列编码的成熟蛋白进行系统分析,结果表明,duIL-2基因具有典型的4个外显子和3个内含子结构,和已知禽类及哺乳类同系物基因总体结构具有明显的相似性。鸭和鸡及其他哺乳动物IL-2基因的启动子序列具有显著的保守性,都具有AP-1、NF-AT、CD28RE、OCT、TATAbox转录起始因子结合位点和预测的转录起始位点。duIL-2cDNA序列编码的成熟蛋白进化分析表明,鸭和鹅的亲缘关系最近,和哺乳动物的亲缘关系较远,显示出明显的种属差异。 展开更多

关键词 鸭 白细胞介素2基因组 启动子 进化分析

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黄曲霉毒素B_1对肉鸭生长、肝组织结构及免疫相关基因表达的影响 被引量：15

9

作者 吕武兴 贺建华 +3 位作者 宋洪国 刘敏敏 金雪丽 李俊波 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期812-818,共7页

本试验旨在研究饲粮黄曲霉毒素B1(AFB1)对肉鸭生产性能、肝组织结构及免疫相关基因白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)表达的影响。试验选用1日龄健康双鬼头肉鸭240羽,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10羽。试验期4周(28 d),对照... 本试验旨在研究饲粮黄曲霉毒素B1(AFB1)对肉鸭生产性能、肝组织结构及免疫相关基因白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)表达的影响。试验选用1日龄健康双鬼头肉鸭240羽,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10羽。试验期4周(28 d),对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组饲喂在基础饲粮中分别添加50、100和150μg/kg AFB1纯品的试验饲粮,记录采食量和增重数据,计算生产性能;试验结束时屠宰,取肝脏样品,分别进行切片及实时荧光定量PCR检测分析。结果表明:1)饲粮中添加不同水平AFB1极显著降低了肉鸭的平均日增重和平均日采食量(P<0.01),与对照组相比,3个试验组肉鸭末重分别下降了14.67%(P<0.01)、30.38%(P<0.01)和31.83%(P<0.01),且100、150μg/kg AFB1还极显著增加了料重比(P<0.01),显著增加了死亡率(P<0.05);2)随着AFB1添加水平的增加,肉鸭肝脏组织病变程度逐渐增加,肝脏中IL-2和IFN-γ基因mRNA表达水平呈现不同程度的降低,其中100、150μg/kg AFB1极显著下调了IFN-γ基因mRNA的表达水平(P<0.01)。由此可见,饲粮中添加AFB1可导致肉鸭生产性能下降和肝脏组织结构损伤,并通过下调肝脏中IL-2和IFN-γ基因的表达,改变肉鸭机体的免疫水平。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 生产性能 肝组织 白细胞介素-2基因 干扰素-γ基因 肉鸭

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鸡白细胞介素-6-2嵌合基因的融合表达及其表达产物活性的研究 被引量：4

10

作者 张书阳 谢彩华 +7 位作者 闫若潜 吴志明 赵明军 赵雪丽 刘梅芬 杨晓璐 张代宝 张林海 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期974-980,共7页

为研制具有鸡白细胞介素-6、2(ChIL-6,ChIL-2)协同免疫增强作用的鸡基因工程复合免疫增强剂,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法将ChIL-6和ChIL-2基因构建成ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因;对嵌合基因进行原核表达,采用自行创新的专利纯化方... 为研制具有鸡白细胞介素-6、2(ChIL-6,ChIL-2)协同免疫增强作用的鸡基因工程复合免疫增强剂,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法将ChIL-6和ChIL-2基因构建成ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因;对嵌合基因进行原核表达,采用自行创新的专利纯化方法对表达的rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白(重组融合蛋白)进行纯化。采用间接ELISA方法检测重组融合蛋白分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体的特异性免疫反应活性,采用MTS法检测重组融合蛋白体外促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞的增殖活性。结果显示,成功构建了ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因及其重组表达质粒rpQE-30-ChIL-6-linker-ChIL-2,表达的重组融合蛋白的分子质量约为40ku,纯化后的纯度在96%以上。该重组融合蛋白可分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体发生特异性免疫反应,并具有显著的促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞增殖活性,其活性优于任一重组蛋白对照。本研究结果初步证明了rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在对鸡免疫细胞的增殖作用方面与rChIL-6和rChIL-2蛋白的作用相似,为进一步研究rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在鸡体内的活性奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡 白细胞介素-6基因 白细胞介素-2基因 嵌合基因 融合表达 活性

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影响农杆菌介导白细胞介素-2基因转化番茄的因素研究 被引量：4

11

作者 葛艳辉 崔继哲 +1 位作者 于丽杰 宋文华 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期470-474,共5页

利用农杆菌介导法将白细胞介素-2基因(il-2)导入番茄中,对影响其转化的因素进行了分析。结果表明:农杆菌菌种(EHA105和C58C1)、外植体类型(子叶和下胚轴)、带有不同筛选标记(Kanr、PPTr、Hygr)的载体质粒几个因素对芽诱导分化及转化均... 利用农杆菌介导法将白细胞介素-2基因(il-2)导入番茄中,对影响其转化的因素进行了分析。结果表明:农杆菌菌种(EHA105和C58C1)、外植体类型(子叶和下胚轴)、带有不同筛选标记(Kanr、PPTr、Hygr)的载体质粒几个因素对芽诱导分化及转化均有影响。实验共接种转化2018个子叶和下胚轴外植体,获得了47株抗性再生株,对其进行il-2的PCR扩增检测,有44株呈阳性。PCR-Southern杂交证实PCR结果可靠,显示il-2基因已导入到番茄中。 展开更多

关键词 白细胞介素-2基因(il-2) 农杆菌介导法 番茄 遗传转化

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改组猪IL-2基因与CpG序列对猪伪狂犬病灭活疫苗免疫应答的影响 被引量：5

12

作者 苏丹 李栋 +10 位作者 程驰 章欢 杨霄 赵钟钟 陈茜 陈建林 章华兵 万小平 蔡林 李江凌 高荣 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期767-771,共5页

将改组的猪白细胞介素-2基因(VRIL2S)与重组CpG(VR1C)质粒经离子交联法制备的壳聚糖纳米颗粒(CNP)包裹后(CNP-VRIL2S-VR1C),肌肉注射给已接种猪伪狂犬病灭活疫苗的免疫猪,接种后第7、14、28、42和56d采集静脉血检测猪的免疫应答变化,并... 将改组的猪白细胞介素-2基因(VRIL2S)与重组CpG(VR1C)质粒经离子交联法制备的壳聚糖纳米颗粒(CNP)包裹后(CNP-VRIL2S-VR1C),肌肉注射给已接种猪伪狂犬病灭活疫苗的免疫猪,接种后第7、14、28、42和56d采集静脉血检测猪的免疫应答变化,并测定血清免疫球蛋白和白细胞介素含量。结果显示,接种组猪血清中IL-2、IL-6、IL-4以及特异性抗体和免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的含量显著高于空质粒疫苗对照组,同时外周血液的淋巴细胞和单核细胞数量也较对照组显著增加(P<0.05)。结果表明,CNP-VRIL2S-VR1C能持久显著提高猪对伪狂犬病灭活疫苗的体液免疫和细胞免疫水平,具有被研制为高效安全的分子免疫增强剂的潜力。 展开更多

关键词 猪 改组猪白细胞介素-2基因 重组CpG序列 壳聚糖纳米颗粒 猪伪狂犬病灭活疫苗

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高邮麻鸭白细胞介素-2基因的克隆与序列分析 被引量：4

13

作者 陈诚 佘步宏 +2 位作者 任春芝 陶建平 许金俊 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第28期15670-15672,共3页

[目的]对高邮麻鸭白细胞介素-2(CIL-2)基因进行克隆和序列分析。[方法]以高邮麻鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,根据已发表的鸭IL-2基因cDNA序列设计并合成1对引物,应用两步RT-PCR技术扩增出IL-2基因的特异性片段。将扩增片段插入pG... [目的]对高邮麻鸭白细胞介素-2(CIL-2)基因进行克隆和序列分析。[方法]以高邮麻鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,根据已发表的鸭IL-2基因cDNA序列设计并合成1对引物,应用两步RT-PCR技术扩增出IL-2基因的特异性片段。将扩增片段插入pGEM-T-easy载体,并进行测序分析和结果验证。[结果]阳性克隆所含插入片段的DNA序列全长为433bp,与预期大小一致,含有1个423bp大小的开放性阅读框,共编码141个氨基酸的前体蛋白,N端21个氨基酸形成信号肽,成熟蛋白为120个氨基酸,分子量约为13.66kD,含1个糖基化位点。该序列与绿头鸭、绍兴鸭、固始鸭相应序列的同源性均为99.8%,与广州白鸭的同源性为99.3%,存在少量核苷酸差异。[结论]高邮麻鸭IL-2编码区基因相对高度保守,为其用于临床疾病治疗提供了一定参考。 展开更多

关键词 高邮麻鸭 白细胞介素-2基因 克隆 序列分析

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重组人血管内皮抑制素与白细胞介素-2对卵巢癌作用的实验研究 被引量：3

14

作者 于燕 张晓娜 +2 位作者 亓健 王晓燕 毕春晖 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第14期1322-1324,共3页

目的研究重组人血管内皮抑制素与白细胞介素-2治疗卵巢癌的疗效。方法将80只卵巢癌裸鼠模型随机分为4组阴性对照组、阳性对照组及实验A、B组,每组各20只。阴性对照组未作特殊处理;阳性对照组予以尾静脉注射10 mg·kg^(-1)重组人血... 目的研究重组人血管内皮抑制素与白细胞介素-2治疗卵巢癌的疗效。方法将80只卵巢癌裸鼠模型随机分为4组阴性对照组、阳性对照组及实验A、B组,每组各20只。阴性对照组未作特殊处理;阳性对照组予以尾静脉注射10 mg·kg^(-1)重组人血管内皮抑制素注射液,qd;实验A组予以肌内注射白细胞介素-2 1.0×10~6U·d^(-1),qd;实验B组予以转染白细胞介素-2基因的羊水干细胞,尾静脉注射0.2 m L微泡化,qd。4组疗程均为7周。每隔3 d测量一次肿瘤体积,末次处理后5 d剖取瘤块测体积、重量,计算抑瘤率。用TUNEL检测肿瘤细胞凋亡情况。结果 4组的肿瘤体积随时间逐渐增加,阴性对照组增加趋势明显高于阳性对照组和实验A、B组(P<0.05),但阳性对照组和实验A、B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,阳性对照组和实验B组的肿瘤重量分别为(878.3±30.5),(902.4±34.6)mg明显低于阴性对照组和实验A组的肿瘤重量(1554.7±45.3),(1484.6±41.4)mg(P<0.05),且阳性对照组的肿瘤重量和实验B组比较、阴性对照组的肿瘤重量和实验A组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。阳性对照组和实验B组的抑瘤率和肿瘤凋亡细胞数均明显高于阴性对照组和实验A组(P<0.05),且阳性对照组和实验B组的抑瘤率和肿瘤凋亡细胞数比较、阴性对照组的抑瘤率和肿瘤凋亡细胞数和实验A组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论转染白细胞介素-2基因的羊水干细胞可以抑制卵巢癌实体瘤的生长,促进肿瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 羊水干细胞靶向治疗 白细胞介素-2基因 卵巢癌

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鸭白细胞介素-2基因在毕赤酵母中的表达 被引量：2

15

作者 张欣 崔敏 +5 位作者 罗满林 贺东生 黄毓茂 房红莹 陈钜豪 马魁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期229-232,共4页

根据GenBank中登录的鸭IL-2基因序列设计并合成了1对特异性引物,以经ConA诱导的广州鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出长度为360 bp的目的基因片段,并将该基因克隆到pMD18-T载体上。酶切鉴定、PCR鉴定及序列测定结... 根据GenBank中登录的鸭IL-2基因序列设计并合成了1对特异性引物,以经ConA诱导的广州鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出长度为360 bp的目的基因片段,并将该基因克隆到pMD18-T载体上。酶切鉴定、PCR鉴定及序列测定结果表明,获得了鸭IL-2成熟蛋白基因的完整克隆。测序结果表明,该成熟蛋白基因由360个核苷酸组成,共编码119个氨基酸。克隆的鸭IL-2基因与GenBank上序列号为AY173028及AF294322的鸭IL-2基因的同源性高达99.4%。将目的基因克隆至真核表达载体pPICZαC上,构建了重组质粒pPICZαC-DuIL-2。酵母转化子经甲醇诱导发酵分泌表达了鸭IL-2基因。SDS-PAGE分析证实,鸭IL-2基因在毕赤酵母(Pichia pastoris)中表达成功,表达的重组蛋白的分子质量约为14.3 ku。 展开更多

关键词 鸭 白细胞介素-2基因 毕赤酵母 表达

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突变型人白细胞介素-2基因在大肠杆菌中的表达

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作者 左爱军 梁东春 +2 位作者 刘新宇 郭刚 张镜宇 《天津医药》 CAS 北大核心 2005年第11期719-721,共3页

目的:建立突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因大肠杆菌表达系统,为rhIL-2的生产及临床应用奠定基础。方法:自人胎盘组织中提取总RNA,逆转录PCR(RT-PCR)扩增突变型人IL-2基因cDNA,通过对下游引物的设计将编码125位半胱氨酸(C125)的密码子... 目的:建立突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因大肠杆菌表达系统,为rhIL-2的生产及临床应用奠定基础。方法:自人胎盘组织中提取总RNA,逆转录PCR(RT-PCR)扩增突变型人IL-2基因cDNA,通过对下游引物的设计将编码125位半胱氨酸(C125)的密码子TGT更改为编码丝氨酸的密码子TCT。构建表达型重组质粒pBV-IL-2熏温度诱导表达,表达产物行SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)及WesternBlot鉴定。结果:DNA序列分析证实,重组质粒pBV-IL-2含有突变型人IL-2编码序列及正确的开放读码框架。SDS-PAGE显示,诱导表达碎菌后的沉淀中有分子质量大小约为16.5ku的外源蛋白产生,经Western印迹(WesternBlot)证明为rhIL-2。结论:成功构建了突变型人白细胞介素-2大肠杆菌表达系统,表达产物主要以包涵体的形式存在于碎菌后的沉淀中。 展开更多

关键词 突变 白细胞介素2 大肠杆菌 基因表达 白细胞介素-2基因 大肠杆菌表达系统 突变型 WESTERNBLOT SDS-PAGE 人白细胞介素-2

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鸭白细胞介素-2基因的克隆表达和单克隆抗体的制备 被引量：1

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作者 刘瑞 韩先干 +4 位作者 范红结 王少辉 刘海文 丁铲 于圣青 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1262-1267,共6页

为研制鸭IL-2单克隆抗体,运用RT-PCR技术从樱桃谷鸭脾淋巴细胞中扩增鸭IL-2基因,将其克隆至原核表达载体pCold TF DNA中,进行诱导表达。用纯化的IL-2重组蛋白免疫BALB/c小鼠,融合后筛选抗鸭IL-2的阳性杂交瘤细胞株。通过间接ELISA法测... 为研制鸭IL-2单克隆抗体,运用RT-PCR技术从樱桃谷鸭脾淋巴细胞中扩增鸭IL-2基因,将其克隆至原核表达载体pCold TF DNA中,进行诱导表达。用纯化的IL-2重组蛋白免疫BALB/c小鼠,融合后筛选抗鸭IL-2的阳性杂交瘤细胞株。通过间接ELISA法测定腹水效价、Western-blot法检测其免疫反应性,并鉴定抗体的亚类。测序结果显示,去除信号肽后的鸭IL-2基因,其编码区全长为363bp,编码120个氨基酸;SDS-PAGE检测结果表明,获得了可溶性的65ku的IL-2融合蛋白;免疫小鼠后获得3株抗鸭IL-2的阳性杂交瘤细胞株,腹水效价均达到1∶512 000以上,为IgG2b亚类。Western-blot结果表明,制备的单克隆抗体具有良好的免疫反应性。上述结果表明,成功制备了抗鸭IL-2的单克隆抗体,为进一步建立鸭IL-2的检测方法奠定了基础。 展开更多

关键词 鸭 白细胞介素-2基因 克隆 表达 单克隆抗体

原文传递

传染病总论

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《传染病网络动态》 2006年第7期43-44,共2页

郑州市1990-2004年肠道传染病的流行趋势；白细胞介素-2基因多态性研究进展（综述）；一类有迁移的传染病模型的稳定性；3种抗病毒药对家兔外周血血红蛋白和网织红细胞的影响；抗病毒药物耐药及耐药机制研究进展；白细胞介素-2受体及其... 郑州市1990-2004年肠道传染病的流行趋势；白细胞介素-2基因多态性研究进展（综述）；一类有迁移的传染病模型的稳定性；3种抗病毒药对家兔外周血血红蛋白和网织红细胞的影响；抗病毒药物耐药及耐药机制研究进展；白细胞介素-2受体及其功能研究进展（综述）；多金属氧酸盐抗病毒药物研究（综述）；干扰素-τ的研究进展（综述）。 展开更多

关键词 肠道传染病 白细胞介素-2基因 白细胞介素-2受体 抗病毒药物 功能研究进展 多金属氧酸盐 多态性研究 传染病模型 网织红细胞 流行趋势

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IL-2基因转导对卵巢癌细胞化疗药物敏感性的影响

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作者 张震宇 郎景和 《现代妇产科进展》 CSCD 2002年第3期171-172,共2页

目的:探讨IL-2基因转导能否改变卵巢癌细胞对化疗药物的敏感性。方法:用MTT法测定导入人IL-2基因的卵巢癌细胞对化学治疗药物顺铂、阿霉素、泰素及足叶乙甙治疗的敏感性及IC_50,以导入新霉素基因的卵巢癌细胞系及野生型卵巢癌细胞系为... 目的:探讨IL-2基因转导能否改变卵巢癌细胞对化疗药物的敏感性。方法:用MTT法测定导入人IL-2基因的卵巢癌细胞对化学治疗药物顺铂、阿霉素、泰素及足叶乙甙治疗的敏感性及IC_50,以导入新霉素基因的卵巢癌细胞系及野生型卵巢癌细胞系为对照。结果:IL-2基因转移使SKOV3细胞对上述化疗药物治疗的敏感性有所提高,但仅对VP-16治疗敏感性的提高差异有显著性（P<0.05）。结论:IL-2基因导入SKOV3细胞没有降低其对实验药物治疗的敏感性。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 白细胞介素-2基因 药物疗法 基因转导

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犬和北极狐白细胞介素-2基因的克隆及序列分析

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作者 易立 张海玲 +5 位作者 程世鹏 闫喜军 柴秀丽 罗国良 王建科 赵建军 《经济动物学报》 CAS 2008年第1期18-20,共3页

为了给制备犬和狐白细胞介素-2相关免疫治疗剂、免疫增强剂提供材料,并且为构建插入犬和狐白细胞介素-2基因表达盒的新型基因工程疫苗提供物质基础,从犬、北极狐两种犬科动物基因组中克隆白细胞介素-2,经测序验证扩增片断长度为580 bp,... 为了给制备犬和狐白细胞介素-2相关免疫治疗剂、免疫增强剂提供材料,并且为构建插入犬和狐白细胞介素-2基因表达盒的新型基因工程疫苗提供物质基础,从犬、北极狐两种犬科动物基因组中克隆白细胞介素-2,经测序验证扩增片断长度为580 bp,包含全部编码序列和两侧非翻译区。序列分析表明犬与狐核苷酸序列同源性都超过99%,氨基酸序列完全一致。 展开更多

关键词 犬 北极狐 白细胞介素-2基因 克隆

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