黄曲霉毒素B_1对肉鸭生长、肝组织结构及免疫相关基因表达的影响 被引量：15

1

作者 吕武兴 贺建华 +3 位作者 宋洪国 刘敏敏 金雪丽 李俊波 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期812-818,共7页

本试验旨在研究饲粮黄曲霉毒素B1(AFB1)对肉鸭生产性能、肝组织结构及免疫相关基因白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)表达的影响。试验选用1日龄健康双鬼头肉鸭240羽,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10羽。试验期4周(28 d),对照... 本试验旨在研究饲粮黄曲霉毒素B1(AFB1)对肉鸭生产性能、肝组织结构及免疫相关基因白细胞介素-2(IL-2)和干扰素-γ(IFN-γ)表达的影响。试验选用1日龄健康双鬼头肉鸭240羽,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10羽。试验期4周(28 d),对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组饲喂在基础饲粮中分别添加50、100和150μg/kg AFB1纯品的试验饲粮,记录采食量和增重数据,计算生产性能;试验结束时屠宰,取肝脏样品,分别进行切片及实时荧光定量PCR检测分析。结果表明:1)饲粮中添加不同水平AFB1极显著降低了肉鸭的平均日增重和平均日采食量(P<0.01),与对照组相比,3个试验组肉鸭末重分别下降了14.67%(P<0.01)、30.38%(P<0.01)和31.83%(P<0.01),且100、150μg/kg AFB1还极显著增加了料重比(P<0.01),显著增加了死亡率(P<0.05);2)随着AFB1添加水平的增加,肉鸭肝脏组织病变程度逐渐增加,肝脏中IL-2和IFN-γ基因mRNA表达水平呈现不同程度的降低,其中100、150μg/kg AFB1极显著下调了IFN-γ基因mRNA的表达水平(P<0.01)。由此可见,饲粮中添加AFB1可导致肉鸭生产性能下降和肝脏组织结构损伤,并通过下调肝脏中IL-2和IFN-γ基因的表达,改变肉鸭机体的免疫水平。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 生产性能 肝组织 白细胞介素-2基因 干扰素-γ基因 肉鸭

下载PDF 职称材料

鸡白细胞介素-6-2嵌合基因的融合表达及其表达产物活性的研究 被引量：4

2

作者 张书阳 谢彩华 +7 位作者 闫若潜 吴志明 赵明军 赵雪丽 刘梅芬 杨晓璐 张代宝 张林海 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期974-980,共7页

为研制具有鸡白细胞介素-6、2(ChIL-6,ChIL-2)协同免疫增强作用的鸡基因工程复合免疫增强剂,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法将ChIL-6和ChIL-2基因构建成ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因;对嵌合基因进行原核表达,采用自行创新的专利纯化方... 为研制具有鸡白细胞介素-6、2(ChIL-6,ChIL-2)协同免疫增强作用的鸡基因工程复合免疫增强剂,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法将ChIL-6和ChIL-2基因构建成ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因;对嵌合基因进行原核表达,采用自行创新的专利纯化方法对表达的rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白(重组融合蛋白)进行纯化。采用间接ELISA方法检测重组融合蛋白分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体的特异性免疫反应活性,采用MTS法检测重组融合蛋白体外促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞的增殖活性。结果显示,成功构建了ChIL-6-linker-ChIL-2嵌合基因及其重组表达质粒rpQE-30-ChIL-6-linker-ChIL-2,表达的重组融合蛋白的分子质量约为40ku,纯化后的纯度在96%以上。该重组融合蛋白可分别与抗ChIL-6、抗ChIL-2单克隆抗体发生特异性免疫反应,并具有显著的促鸡外周血T淋巴细胞和脾淋巴细胞增殖活性,其活性优于任一重组蛋白对照。本研究结果初步证明了rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在对鸡免疫细胞的增殖作用方面与rChIL-6和rChIL-2蛋白的作用相似,为进一步研究rChIL-6-linker-ChIL-2蛋白在鸡体内的活性奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡 白细胞介素-6基因 白细胞介素-2基因 嵌合基因 融合表达 活性

原文传递

高邮麻鸭白细胞介素-2基因的克隆与序列分析 被引量：4

3

作者 陈诚 佘步宏 +2 位作者 任春芝 陶建平 许金俊 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第28期15670-15672,共3页

[目的]对高邮麻鸭白细胞介素-2(CIL-2)基因进行克隆和序列分析。[方法]以高邮麻鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,根据已发表的鸭IL-2基因cDNA序列设计并合成1对引物,应用两步RT-PCR技术扩增出IL-2基因的特异性片段。将扩增片段插入pG... [目的]对高邮麻鸭白细胞介素-2(CIL-2)基因进行克隆和序列分析。[方法]以高邮麻鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,根据已发表的鸭IL-2基因cDNA序列设计并合成1对引物,应用两步RT-PCR技术扩增出IL-2基因的特异性片段。将扩增片段插入pGEM-T-easy载体,并进行测序分析和结果验证。[结果]阳性克隆所含插入片段的DNA序列全长为433bp,与预期大小一致,含有1个423bp大小的开放性阅读框,共编码141个氨基酸的前体蛋白,N端21个氨基酸形成信号肽,成熟蛋白为120个氨基酸,分子量约为13.66kD,含1个糖基化位点。该序列与绿头鸭、绍兴鸭、固始鸭相应序列的同源性均为99.8%,与广州白鸭的同源性为99.3%,存在少量核苷酸差异。[结论]高邮麻鸭IL-2编码区基因相对高度保守,为其用于临床疾病治疗提供了一定参考。 展开更多

关键词 高邮麻鸭 白细胞介素-2基因 克隆 序列分析

下载PDF 职称材料

重组人血管内皮抑制素与白细胞介素-2对卵巢癌作用的实验研究 被引量：3

4

作者 于燕 张晓娜 +2 位作者 亓健 王晓燕 毕春晖 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第14期1322-1324,共3页

目的研究重组人血管内皮抑制素与白细胞介素-2治疗卵巢癌的疗效。方法将80只卵巢癌裸鼠模型随机分为4组阴性对照组、阳性对照组及实验A、B组,每组各20只。阴性对照组未作特殊处理;阳性对照组予以尾静脉注射10 mg·kg^(-1)重组人血... 目的研究重组人血管内皮抑制素与白细胞介素-2治疗卵巢癌的疗效。方法将80只卵巢癌裸鼠模型随机分为4组阴性对照组、阳性对照组及实验A、B组,每组各20只。阴性对照组未作特殊处理;阳性对照组予以尾静脉注射10 mg·kg^(-1)重组人血管内皮抑制素注射液,qd;实验A组予以肌内注射白细胞介素-2 1.0×10~6U·d^(-1),qd;实验B组予以转染白细胞介素-2基因的羊水干细胞,尾静脉注射0.2 m L微泡化,qd。4组疗程均为7周。每隔3 d测量一次肿瘤体积,末次处理后5 d剖取瘤块测体积、重量,计算抑瘤率。用TUNEL检测肿瘤细胞凋亡情况。结果 4组的肿瘤体积随时间逐渐增加,阴性对照组增加趋势明显高于阳性对照组和实验A、B组(P<0.05),但阳性对照组和实验A、B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,阳性对照组和实验B组的肿瘤重量分别为(878.3±30.5),(902.4±34.6)mg明显低于阴性对照组和实验A组的肿瘤重量(1554.7±45.3),(1484.6±41.4)mg(P<0.05),且阳性对照组的肿瘤重量和实验B组比较、阴性对照组的肿瘤重量和实验A组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。阳性对照组和实验B组的抑瘤率和肿瘤凋亡细胞数均明显高于阴性对照组和实验A组(P<0.05),且阳性对照组和实验B组的抑瘤率和肿瘤凋亡细胞数比较、阴性对照组的抑瘤率和肿瘤凋亡细胞数和实验A组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论转染白细胞介素-2基因的羊水干细胞可以抑制卵巢癌实体瘤的生长,促进肿瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 羊水干细胞靶向治疗 白细胞介素-2基因 卵巢癌

原文传递

鸭白细胞介素-2基因在毕赤酵母中的表达 被引量：2

5

作者 张欣 崔敏 +5 位作者 罗满林 贺东生 黄毓茂 房红莹 陈钜豪 马魁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期229-232,共4页

根据GenBank中登录的鸭IL-2基因序列设计并合成了1对特异性引物,以经ConA诱导的广州鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出长度为360 bp的目的基因片段,并将该基因克隆到pMD18-T载体上。酶切鉴定、PCR鉴定及序列测定结... 根据GenBank中登录的鸭IL-2基因序列设计并合成了1对特异性引物,以经ConA诱导的广州鸭外周血淋巴细胞提取的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出长度为360 bp的目的基因片段,并将该基因克隆到pMD18-T载体上。酶切鉴定、PCR鉴定及序列测定结果表明,获得了鸭IL-2成熟蛋白基因的完整克隆。测序结果表明,该成熟蛋白基因由360个核苷酸组成,共编码119个氨基酸。克隆的鸭IL-2基因与GenBank上序列号为AY173028及AF294322的鸭IL-2基因的同源性高达99.4%。将目的基因克隆至真核表达载体pPICZαC上,构建了重组质粒pPICZαC-DuIL-2。酵母转化子经甲醇诱导发酵分泌表达了鸭IL-2基因。SDS-PAGE分析证实,鸭IL-2基因在毕赤酵母(Pichia pastoris)中表达成功,表达的重组蛋白的分子质量约为14.3 ku。 展开更多

关键词 鸭 白细胞介素-2基因 毕赤酵母 表达

下载PDF 职称材料

突变型人白细胞介素-2基因在大肠杆菌中的表达

6

作者 左爱军 梁东春 +2 位作者 刘新宇 郭刚 张镜宇 《天津医药》 CAS 北大核心 2005年第11期719-721,共3页

目的:建立突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因大肠杆菌表达系统,为rhIL-2的生产及临床应用奠定基础。方法:自人胎盘组织中提取总RNA,逆转录PCR(RT-PCR)扩增突变型人IL-2基因cDNA,通过对下游引物的设计将编码125位半胱氨酸(C125)的密码子... 目的:建立突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因大肠杆菌表达系统,为rhIL-2的生产及临床应用奠定基础。方法:自人胎盘组织中提取总RNA,逆转录PCR(RT-PCR)扩增突变型人IL-2基因cDNA,通过对下游引物的设计将编码125位半胱氨酸(C125)的密码子TGT更改为编码丝氨酸的密码子TCT。构建表达型重组质粒pBV-IL-2熏温度诱导表达,表达产物行SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)及WesternBlot鉴定。结果:DNA序列分析证实,重组质粒pBV-IL-2含有突变型人IL-2编码序列及正确的开放读码框架。SDS-PAGE显示,诱导表达碎菌后的沉淀中有分子质量大小约为16.5ku的外源蛋白产生,经Western印迹(WesternBlot)证明为rhIL-2。结论:成功构建了突变型人白细胞介素-2大肠杆菌表达系统,表达产物主要以包涵体的形式存在于碎菌后的沉淀中。 展开更多

关键词 突变 白细胞介素2 大肠杆菌 基因表达 白细胞介素-2基因 大肠杆菌表达系统 突变型 WESTERNBLOT SDS-PAGE 人白细胞介素-2

下载PDF 职称材料

传染病总论

7

《传染病网络动态》 2006年第7期43-44,共2页

郑州市1990-2004年肠道传染病的流行趋势；白细胞介素-2基因多态性研究进展（综述）；一类有迁移的传染病模型的稳定性；3种抗病毒药对家兔外周血血红蛋白和网织红细胞的影响；抗病毒药物耐药及耐药机制研究进展；白细胞介素-2受体及其... 郑州市1990-2004年肠道传染病的流行趋势；白细胞介素-2基因多态性研究进展（综述）；一类有迁移的传染病模型的稳定性；3种抗病毒药对家兔外周血血红蛋白和网织红细胞的影响；抗病毒药物耐药及耐药机制研究进展；白细胞介素-2受体及其功能研究进展（综述）；多金属氧酸盐抗病毒药物研究（综述）；干扰素-τ的研究进展（综述）。 展开更多

关键词 肠道传染病 白细胞介素-2基因 白细胞介素-2受体 抗病毒药物 功能研究进展 多金属氧酸盐 多态性研究 传染病模型 网织红细胞 流行趋势

下载PDF 职称材料

鸭白细胞介素-2基因的克隆表达和单克隆抗体的制备 被引量：1

8

作者 刘瑞 韩先干 +4 位作者 范红结 王少辉 刘海文 丁铲 于圣青 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1262-1267,共6页

为研制鸭IL-2单克隆抗体,运用RT-PCR技术从樱桃谷鸭脾淋巴细胞中扩增鸭IL-2基因,将其克隆至原核表达载体pCold TF DNA中,进行诱导表达。用纯化的IL-2重组蛋白免疫BALB/c小鼠,融合后筛选抗鸭IL-2的阳性杂交瘤细胞株。通过间接ELISA法测... 为研制鸭IL-2单克隆抗体,运用RT-PCR技术从樱桃谷鸭脾淋巴细胞中扩增鸭IL-2基因,将其克隆至原核表达载体pCold TF DNA中,进行诱导表达。用纯化的IL-2重组蛋白免疫BALB/c小鼠,融合后筛选抗鸭IL-2的阳性杂交瘤细胞株。通过间接ELISA法测定腹水效价、Western-blot法检测其免疫反应性,并鉴定抗体的亚类。测序结果显示,去除信号肽后的鸭IL-2基因,其编码区全长为363bp,编码120个氨基酸;SDS-PAGE检测结果表明,获得了可溶性的65ku的IL-2融合蛋白;免疫小鼠后获得3株抗鸭IL-2的阳性杂交瘤细胞株,腹水效价均达到1∶512 000以上,为IgG2b亚类。Western-blot结果表明,制备的单克隆抗体具有良好的免疫反应性。上述结果表明,成功制备了抗鸭IL-2的单克隆抗体,为进一步建立鸭IL-2的检测方法奠定了基础。 展开更多

关键词 鸭 白细胞介素-2基因 克隆 表达 单克隆抗体

原文传递

IL-2基因转导对卵巢癌细胞化疗药物敏感性的影响

9

作者 张震宇 郎景和 《现代妇产科进展》 CSCD 2002年第3期171-172,共2页

目的:探讨IL-2基因转导能否改变卵巢癌细胞对化疗药物的敏感性。方法:用MTT法测定导入人IL-2基因的卵巢癌细胞对化学治疗药物顺铂、阿霉素、泰素及足叶乙甙治疗的敏感性及IC_50,以导入新霉素基因的卵巢癌细胞系及野生型卵巢癌细胞系为... 目的:探讨IL-2基因转导能否改变卵巢癌细胞对化疗药物的敏感性。方法:用MTT法测定导入人IL-2基因的卵巢癌细胞对化学治疗药物顺铂、阿霉素、泰素及足叶乙甙治疗的敏感性及IC_50,以导入新霉素基因的卵巢癌细胞系及野生型卵巢癌细胞系为对照。结果:IL-2基因转移使SKOV3细胞对上述化疗药物治疗的敏感性有所提高,但仅对VP-16治疗敏感性的提高差异有显著性（P<0.05）。结论:IL-2基因导入SKOV3细胞没有降低其对实验药物治疗的敏感性。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 白细胞介素-2基因 药物疗法 基因转导

下载PDF 职称材料

犬和北极狐白细胞介素-2基因的克隆及序列分析

10

作者 易立 张海玲 +5 位作者 程世鹏 闫喜军 柴秀丽 罗国良 王建科 赵建军 《经济动物学报》 CAS 2008年第1期18-20,共3页

为了给制备犬和狐白细胞介素-2相关免疫治疗剂、免疫增强剂提供材料,并且为构建插入犬和狐白细胞介素-2基因表达盒的新型基因工程疫苗提供物质基础,从犬、北极狐两种犬科动物基因组中克隆白细胞介素-2,经测序验证扩增片断长度为580 bp,... 为了给制备犬和狐白细胞介素-2相关免疫治疗剂、免疫增强剂提供材料,并且为构建插入犬和狐白细胞介素-2基因表达盒的新型基因工程疫苗提供物质基础,从犬、北极狐两种犬科动物基因组中克隆白细胞介素-2,经测序验证扩增片断长度为580 bp,包含全部编码序列和两侧非翻译区。序列分析表明犬与狐核苷酸序列同源性都超过99%,氨基酸序列完全一致。 展开更多

关键词 犬 北极狐 白细胞介素-2基因 克隆

下载PDF 职称材料

汉族人群白细胞介素-2基因多态性与鼻咽癌风险的关系

11

作者 杜冰 文彬 木尔扯尔 《西部医学》 2010年第7期1188-1190,共3页

目的研究四川汉族人群白细胞介素-2基因(IL-2)-330T/G及+114G/T基因多态性与鼻咽癌风险的关系。方法采用病例对照研究方法,PCR-RFLP检测180例汉族人和150例鼻咽癌患者IL-2-330T/G、+114G/T的多态性分布及与鼻咽癌风险的关系。结果病例... 目的研究四川汉族人群白细胞介素-2基因(IL-2)-330T/G及+114G/T基因多态性与鼻咽癌风险的关系。方法采用病例对照研究方法,PCR-RFLP检测180例汉族人和150例鼻咽癌患者IL-2-330T/G、+114G/T的多态性分布及与鼻咽癌风险的关系。结果病例组和对照组两多态性位点基因型频率分布无显著性差异(P>0.05),两多态性位点未增加个体患鼻咽癌的风险(P>0.05)。结论 IL-2-330T/G、+114G/T多态性与鼻咽癌易感性无关。 展开更多

关键词 鼻咽癌 白细胞介素-2基因 遗传多态性

下载PDF 职称材料

改组猪IL-2基因与CpG序列对猪伪狂犬病灭活疫苗免疫应答的影响 被引量：5

12

作者 苏丹 李栋 +10 位作者 程驰 章欢 杨霄 赵钟钟 陈茜 陈建林 章华兵 万小平 蔡林 李江凌 高荣 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期767-771,共5页

将改组的猪白细胞介素-2基因(VRIL2S)与重组CpG(VR1C)质粒经离子交联法制备的壳聚糖纳米颗粒(CNP)包裹后(CNP-VRIL2S-VR1C),肌肉注射给已接种猪伪狂犬病灭活疫苗的免疫猪,接种后第7、14、28、42和56d采集静脉血检测猪的免疫应答变化,并... 将改组的猪白细胞介素-2基因(VRIL2S)与重组CpG(VR1C)质粒经离子交联法制备的壳聚糖纳米颗粒(CNP)包裹后(CNP-VRIL2S-VR1C),肌肉注射给已接种猪伪狂犬病灭活疫苗的免疫猪,接种后第7、14、28、42和56d采集静脉血检测猪的免疫应答变化,并测定血清免疫球蛋白和白细胞介素含量。结果显示,接种组猪血清中IL-2、IL-6、IL-4以及特异性抗体和免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的含量显著高于空质粒疫苗对照组,同时外周血液的淋巴细胞和单核细胞数量也较对照组显著增加(P<0.05)。结果表明,CNP-VRIL2S-VR1C能持久显著提高猪对伪狂犬病灭活疫苗的体液免疫和细胞免疫水平,具有被研制为高效安全的分子免疫增强剂的潜力。 展开更多

关键词 猪 改组猪白细胞介素-2基因 重组CpG序列 壳聚糖纳米颗粒 猪伪狂犬病灭活疫苗

下载PDF 职称材料

影响农杆菌介导白细胞介素-2基因转化番茄的因素研究 被引量：4

13

作者 葛艳辉 崔继哲 +1 位作者 于丽杰 宋文华 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期470-474,共5页

利用农杆菌介导法将白细胞介素-2基因(il-2)导入番茄中,对影响其转化的因素进行了分析。结果表明:农杆菌菌种(EHA105和C58C1)、外植体类型(子叶和下胚轴)、带有不同筛选标记(Kanr、PPTr、Hygr)的载体质粒几个因素对芽诱导分化及转化均... 利用农杆菌介导法将白细胞介素-2基因(il-2)导入番茄中,对影响其转化的因素进行了分析。结果表明:农杆菌菌种(EHA105和C58C1)、外植体类型(子叶和下胚轴)、带有不同筛选标记(Kanr、PPTr、Hygr)的载体质粒几个因素对芽诱导分化及转化均有影响。实验共接种转化2018个子叶和下胚轴外植体,获得了47株抗性再生株,对其进行il-2的PCR扩增检测,有44株呈阳性。PCR-Southern杂交证实PCR结果可靠,显示il-2基因已导入到番茄中。 展开更多

关键词 白细胞介素-2基因(il-2) 农杆菌介导法 番茄 遗传转化

下载PDF 职称材料