马蔺NHX基因的克隆与基因表达分析 被引量：17

1

作者 郭强 孟林 +3 位作者 李杉杉 张琳 毛培春 田小霞 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2006-2012,共7页

液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白NHX所特有的液泡Na+区域化功能,在植物耐盐中发挥着极其重要的作用。以马蔺根中总RNA为模板,利用同源克隆方法克隆得到一个NHX基因,命名为IlNHX。序列分析表明该基因的开放阅读框为1 641 bp,编码546个氨基酸,... 液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白NHX所特有的液泡Na+区域化功能,在植物耐盐中发挥着极其重要的作用。以马蔺根中总RNA为模板,利用同源克隆方法克隆得到一个NHX基因,命名为IlNHX。序列分析表明该基因的开放阅读框为1 641 bp,编码546个氨基酸,与已知的植物NHX具有较高的同源性(>70%)。预测其蛋白质分子量为60 k Da,等电点为6.67。实时定量PCR分析表明,随着Na Cl浓度的增加,地上部和根中的Il NHX基因表达水平呈增加趋势,且地上部中的表达量显著高于根部,表明Il NHX基因的表达受到盐的诱导和调节。 展开更多

关键词 马蔺 液泡膜na+/h+逆向转运蛋白 表达 耐盐

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AtNHX5基因过量表达对拟南芥耐盐性的影响 被引量：6

2

作者 安静 侯蕾 +2 位作者 孔祥强 赵彦修 张慧 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1106-1111,共6页

为了研究AtNHX5基因在植物耐盐中的作用,构建了植物过量表达载体pROKⅡ-AtNHX5,并转化拟南芥。结果显示:(1)RT-PCR检测表明,转基因拟南芥中AtNHX5基因的表达大幅提高。(2)对转基因纯合株系进行耐盐性分析显示,AtNHX5过量表达提高了植株... 为了研究AtNHX5基因在植物耐盐中的作用,构建了植物过量表达载体pROKⅡ-AtNHX5,并转化拟南芥。结果显示:(1)RT-PCR检测表明,转基因拟南芥中AtNHX5基因的表达大幅提高。(2)对转基因纯合株系进行耐盐性分析显示,AtNHX5过量表达提高了植株在种子萌发和苗期的耐盐性。(3)转基因植株在盐处理下的干重、鲜重以及地上部分Na+、K+含量均高于野生型对照。在200mmol/L NaCl处理下,以转基因株系a1-4为例,其地上部分单株鲜重、单株干重、K+含量分别是野生型的1.27、1.54、1.16倍,较野生型显著升高。研究表明,过量表达AtNHX5基因促进了盐胁迫下转基因植株对K+的吸收,转基因拟南芥的耐盐性明显提高。 展开更多

关键词 AtNhX5 液泡膜na+/h+逆向转运蛋白 过量表达 耐盐性 拟南芥

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筇竹Na+/H+逆向转运蛋白基因克隆与表达分析 被引量：3

3

作者 李玥 肖如雪 +1 位作者 芮蕊 王澍 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第10期3235-3242,共8页

为明确液泡型Na+/H+逆向转运蛋白在竹类植物耐盐中发挥的重要作用。本研究从筇竹中克隆出液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因,命名为QtNHX1(基因登录号:MT078987),并分析该基因表达特征。结果表明,QtNHX1基因全长为2075 bp,包含1632 bp的开... 为明确液泡型Na+/H+逆向转运蛋白在竹类植物耐盐中发挥的重要作用。本研究从筇竹中克隆出液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因,命名为QtNHX1(基因登录号:MT078987),并分析该基因表达特征。结果表明,QtNHX1基因全长为2075 bp,包含1632 bp的开放阅读框(编码544个氨基酸),其相对分子量为59.43 kD,理论等电点(pI)为8.83。QtNHX1具有10个跨膜区域,且与水稻同源性最高,达到90.59%。另外,QtNHX1基因在在筇竹不同组织器官(竹笋,根,茎,叶)均有表达,说明QtNHX1为组成型表达。筇竹根中QtNHX1基因的表达量最高,在竹笋表达量最低。对筇竹进行不同时间(6,12,24 h)的NaCl胁迫处理,发现QtNHX1基因的表达量随着处理时间的延长而上升,表明QtNHX1基因在调控筇竹耐盐性中发挥着重要作用。 展开更多

关键词 液泡膜na+/h+逆向转运蛋白 筇竹(Qiongzhuea tumidinoda) 钠/钾含量 克隆 基因表达

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过量表达甜菜BvNHX1基因提高拟南芥的耐盐性 被引量：2

4

作者 王鹏 安静 +3 位作者 侯蕾 孔祥强 赵彦修 张慧 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第2期163-168,178,共7页

Na+/H+逆向转运蛋白调节细胞内的离子平衡,在植物耐盐性起重要的作用。为了研究甜菜液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白BvNHX1基因在植物耐盐中的作用,构建了植物表达载体pROKⅡ-BvNHX1转化拟南芥.在含有卡纳霉素的培养基上筛选转化子,并利用Sout... Na+/H+逆向转运蛋白调节细胞内的离子平衡,在植物耐盐性起重要的作用。为了研究甜菜液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白BvNHX1基因在植物耐盐中的作用,构建了植物表达载体pROKⅡ-BvNHX1转化拟南芥.在含有卡纳霉素的培养基上筛选转化子,并利用Southern和Northern杂交技术检测,进一步证实BvNHX1基因已整合到拟南芥基因组并能正常转录。选取纯合转基因株系进行耐盐性分析实验表明,过量表达BvN-HX1基因的拟南芥在种子萌发和苗期都提高了植株耐盐性,盐处理下转基因植株的鲜重、干重以及地上部分Na+、K+含量均高于野生型对照。结果表明过量表达BvNHX1基因提高了转基因拟南芥的耐盐能力。 展开更多

关键词 盐生植物 BvNhX1 液泡膜na+/h+逆向转运蛋白 耐盐性 拟南芥

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过量表达大叶补血草LgNHX1基因对拟南芥耐盐性的影响 被引量：1

5

作者 周玲玲 祝建波 王爱英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期90-95,共6页

利用植物表达载体pCAMBIA1301和农杆菌GV3101将LgNHX1(全长1 656 bp)基因在拟南芥中过量表达。在含30 mg/L潮霉素的培养基上筛选获得LgNHX1的纯合转化子,并对其进行了分子鉴定和耐盐性分析。结果显示,经PCR和RT-PCR鉴定,野生型植株(对照... 利用植物表达载体pCAMBIA1301和农杆菌GV3101将LgNHX1(全长1 656 bp)基因在拟南芥中过量表达。在含30 mg/L潮霉素的培养基上筛选获得LgNHX1的纯合转化子,并对其进行了分子鉴定和耐盐性分析。结果显示,经PCR和RT-PCR鉴定,野生型植株(对照)没有出现扩增条带,而转基因株系有相应的扩增条带,表明LgNHX1的确已经整合到拟南芥的基因组中,并已正常转录。在不同盐浓度处理下,转基因株系生长情况好于野生型对照;转基因植株地上部分和根的干重、鲜重相对高于野生型对照,但差异没有达到显著水平;当盐浓度达到150-200 mmol/L时,两个转基因株系的Na+含量显著高于野生型,K+含量极显著高于野生型。以上结果表明,过量表达LgNHX1基因可能增强了拟南芥将Na+区隔化至液泡的能力,提高了转基因拟南芥的耐盐能力。 展开更多

关键词 LgNhX1基因 液泡膜na+/h+逆向转运蛋白 拟南芥 耐盐性

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一个新的水稻液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因的克隆及表达特征 被引量：11

6

作者 邱生平 周国安 +5 位作者 陆驹飞 黄骥 潘丽娟 王建飞 杨清 张红生 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期119-124,共6页

通过RT-PCR技术从水稻幼苗组织中克隆了一个新的Na+/H+逆向转运蛋白基因OsNHX2,它编码一条长544氨基酸的多肽。OsNHX2与水稻和拟南芥的液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白OsNHX1、AtNHX1氨基酸序列一致性分别为78%和77%。基因结构分析表明OsNHX2... 通过RT-PCR技术从水稻幼苗组织中克隆了一个新的Na+/H+逆向转运蛋白基因OsNHX2,它编码一条长544氨基酸的多肽。OsNHX2与水稻和拟南芥的液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白OsNHX1、AtNHX1氨基酸序列一致性分别为78%和77%。基因结构分析表明OsNHX2与OsNHX1具有类似的外显子和内含子构成,但不同于拟南芥AtNHX1,表明OsNHX2与OsNHX1可能起源于单双子叶植物分化后的水稻染色体复制。半定量RT-PCR方法检测了OsNHX2与OsNHX1在水稻耐盐品种韭菜青与盐敏感品种IR28的地上部与根部的表达。结果表明:耐盐品种韭菜青的OsNHX2与OsNHX1基因在盐胁迫下表达持续增强,而在盐敏感品种IR28的地上部,OsNHX2基因在盐胁迫处理后1h表达增强后立即减弱,根部的表达则基本不变,而IR28地上部与根部OsNHX1则在盐胁迫处理初期表达增强,随后即减弱。研究结果表明水稻两个液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因OsNHX2、OsNHX1在盐敏感程度不同的水稻品种中表达有所不同,液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因的转录调控可能是决定水稻耐盐能力的一个重要因素。 展开更多

关键词 水稻 盐胁迫 ^^液泡膜na^+/h^+逆向转运蛋白基因 基因克隆 表达特性

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液泡膜Na^＋／H^＋逆向转运蛋白与植物耐盐性 被引量：8

7

作者 伍国强 王强龙 +1 位作者 包爱科 王锁民 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2008年第2期13-21,共9页

土壤盐碱化作为一种主要的非生物胁迫因子严重影响着世界范围内的农业生产。植物抵御盐胁迫的有效策略之一是将细胞质中过多的Na+区隔化在液泡,这一过程是由液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白完成的。本文概述了植物液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白的... 土壤盐碱化作为一种主要的非生物胁迫因子严重影响着世界范围内的农业生产。植物抵御盐胁迫的有效策略之一是将细胞质中过多的Na+区隔化在液泡,这一过程是由液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白完成的。本文概述了植物液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白的分子结构、功能、表达调控及其与植物耐盐性的关系等方面的研究进展,并对未来几年该蛋白的主要研究方向作了分析和展望。 展开更多

关键词 盐胁迫 ^^液泡膜na^+/h^+逆向转运蛋白 耐盐性

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液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白研究进展 被引量：2

8

作者 马红萍 包爱科 《安徽农业科学》 CAS 2020年第14期4-8,共5页

土壤盐渍化是造成全世界农作物减产的主要非生物胁迫因素之一,盐渍化土壤中过多的Na^+是使植物生长受到抑制的主要阳离子。植物细胞中的液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白(NHX)是应对盐胁迫的一种重要离子转运蛋白,盐胁迫下NHX可以调控植物体... 土壤盐渍化是造成全世界农作物减产的主要非生物胁迫因素之一,盐渍化土壤中过多的Na^+是使植物生长受到抑制的主要阳离子。植物细胞中的液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白(NHX)是应对盐胁迫的一种重要离子转运蛋白,盐胁迫下NHX可以调控植物体内的离子稳态平衡及细胞内的pH,对提高植物耐盐性具有非常重要的作用。简要概述了近年来液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白的亚细胞定位与结构特点、主要生理功能及其与植物耐盐性关系等方面的研究进展,以期为相关研究提供参考。 展开更多

关键词 ^^液泡膜na^+/h^+逆向转运蛋白 离子稳态 亚细胞定位 结构特点 生理功能 耐盐性

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甜菜液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白BvNHX基因RNAi载体构建及遗传转化

9

作者 伍国强 焦琦 +1 位作者 刘海龙 蔺丽媛 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第18期5953-5961,共9页

液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白介导的Na+区域化在植物适应盐胁迫中起着重要作用。本研究以甜菜(Beta vulgaris L.)叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因BvNHX的靶片段,以中间载体pHANNIBAL和表达载体pART27为基... 液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白介导的Na+区域化在植物适应盐胁迫中起着重要作用。本研究以甜菜(Beta vulgaris L.)叶片总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因BvNHX的靶片段,以中间载体pHANNIBAL和表达载体pART27为基础,采用酶切和连接的方法,构建CaMV 35S启动子驱动的含BvNHX基因片段反向重复序列的RNAi植物表达载体pARB,通过冻融法将其导入根癌农杆菌GV3101,并转入甜菜幼苗获得BvNHX-RNAi转化株系。半定量RT-PCR分析结果表明该干扰载体能特异性地导致转化植株BvNHX基因表达的沉默。这将为解析BvNHX在甜菜体内Na+区域化中的功能及其在甜菜适应盐渍生境中的作用机制提供帮助。 展开更多

关键词 甜菜 ^^液泡膜na^+/h^+逆向转运蛋白 Rna干扰 ^^na^+区域化 盐胁迫

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滨麦LmNHX2基因及响应盐分胁迫的表达分析 被引量：1

10

作者 李中虎 李岚 +2 位作者 武海蒙 朱路英 柏新富 《鲁东大学学报（自然科学版）》 2018年第1期50-55,共6页

液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白(Na^+/H^+antiporter,NHX)基因是植物细胞中一类重要的耐盐基因.本研究在转录组测序的基础上,得到了滨麦液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白2基因(LmNHX2)的cDNA序列,通过生物学软件对该基因编码的蛋白进行分析和预... 液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白(Na^+/H^+antiporter,NHX)基因是植物细胞中一类重要的耐盐基因.本研究在转录组测序的基础上,得到了滨麦液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白2基因(LmNHX2)的cDNA序列,通过生物学软件对该基因编码的蛋白进行分析和预测,并对其响应盐胁迫的表达模式进行了分析.结果显示,LmNHX2的cDNA序列包含1617bp的开放阅读框,编码538个氨基酸.该基因编码的多肽链疏水性氨基酸占多数,具有典型的跨膜蛋白的结构特点.氨基酸序列比对结果表明,LmNHX2蛋白与小麦TaNHX2,长穗偃麦草Te NHX2及大麦Hv NHX1的氨基酸序列高度相似,四者在进化关系上居于同一分支.荧光定量PCR结果显示,LmNHX2的表达受到盐分胁迫的诱导. 展开更多

关键词 滨麦 ^^液泡膜na^+/h^+逆向转运蛋白2 生物信息学分析 表达分析

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农杆菌介导马铃薯转化体系的优化及转基因马铃薯的耐盐性研究 被引量：1

11

作者 王旭达 丰明 +1 位作者 王鹤 张高华 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期49-56,共8页

通过农杆菌介导的方式将獐茅液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因(AlNHX)表达在马铃薯中,并对影响马铃薯转化的几种因素(抗生素浓度、农杆菌菌液浓度、共培养时间等)进行优化。结果表明:最适农杆菌菌液浓度是OD600=0.6,最适侵染时间是5min,... 通过农杆菌介导的方式将獐茅液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因(AlNHX)表达在马铃薯中,并对影响马铃薯转化的几种因素(抗生素浓度、农杆菌菌液浓度、共培养时间等)进行优化。结果表明:最适农杆菌菌液浓度是OD600=0.6,最适侵染时间是5min,最适共培养时间是2d,马铃薯转化中最适头孢霉素浓度是400mg/L;经PCR检测确认的转基因马铃薯植株在含0.7%NaCl的培养基中可以生长,而野生型马铃薯无法在此培养基中正常生长。在盐胁迫条件下,转基因马铃薯的Na^+、K^+含量及K^+/Na^+的比值均高于野生型马铃薯。研究证实马铃薯植物的的耐盐性可以通过农杆菌转化导入獐茅液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因而得到提高。 展开更多

关键词 马铃薯 农杆菌转化 獐茅液泡膜na+/h+逆向转运蛋白基因 盐胁迫 耐盐性

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