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烟草CryIB抗虫基因的遗传转化研究 被引量：1
1
作者 韦健琳 秦新民 《广西梧州师范高等专科学校学报》 2000年第3期75-76,共2页
改造后的抗虫基因 Cry IB用杆菌介导的方法转入烟草 ,转基因植株经 PCR和 DNA分子杂交检测 ,结果证实 :抗虫基因已整合到烟草基因组中。
关键词 烟草 抗虫基因 遗传转化 CryIB 杆菌介导
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导入β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的转基因可育油菜及其抗菌核病的研究 被引量：67
2
作者 蓝海燕 王长海 +4 位作者 张丽华 刘桂珍 王岚兰 陈正华 田颖川 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期142-146,共5页
利用农杆菌转化法,将组成型表达β1,3葡聚糖酶及几丁质酶基因的双价植物表达载体pBLGC转化优质甘蓝型油菜品种H165,并得到了抗卡那霉素(Kanamycin,Kan)的再生植株。我们对所得到的抗Kan的再生苗进行了初步分子生物学检测,结果表明,在K15... 利用农杆菌转化法,将组成型表达β1,3葡聚糖酶及几丁质酶基因的双价植物表达载体pBLGC转化优质甘蓝型油菜品种H165,并得到了抗卡那霉素(Kanamycin,Kan)的再生植株。我们对所得到的抗Kan的再生苗进行了初步分子生物学检测,结果表明,在K15(Kan15mg/L)培养基上的绿苗中有30%为PCR阳性植株,而在K25(Kan10mg/L)培养基上的绿苗有53%的阳性率。对部分PCR阳性的转基因植株进行了点杂交分析,结果均表现出较强的杂交信号,这初步说明外源基因已整合到油菜基因组中。转基因植株的活体接种油菜菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorium)试验表明,部分转基因植株比对照显示较强抗病性。 展开更多
关键词 几丁质酶基因 转基因油菜 抗菌核病 农杆菌介导
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农杆菌介导的苏云金杆菌抗虫基因cryIA(b)和cryIA(c)在水稻中的遗传转化及蛋白表达 被引量：70
3
作者 项友斌 梁竹青 +4 位作者 高明尉 舒庆尧 叶恭银 成雄鹰 I.Altosaar 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期494-500,共7页
通过农杆菌介导法用含有抗潮霉素和 Ｇ Ｕ Ｓ 基因的双元载体将杀虫结晶蛋白基因ｃｒｙ Ｉ Ａ（ ｂ） 和ｃｒｙ Ｉ Ａ（ｃ） 导入到籼、粳稻幼穗愈伤组织中，然后经过在含有不同浓度潮霉素的培养基上进行数次筛选，获得一批 Ｂｔ 转基... 通过农杆菌介导法用含有抗潮霉素和 Ｇ Ｕ Ｓ 基因的双元载体将杀虫结晶蛋白基因ｃｒｙ Ｉ Ａ（ ｂ） 和ｃｒｙ Ｉ Ａ（ｃ） 导入到籼、粳稻幼穗愈伤组织中，然后经过在含有不同浓度潮霉素的培养基上进行数次筛选，获得一批 Ｂｔ 转基因株。经 Ｐ Ｃ Ｒ、 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交及 Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹分析证实此二基因已整合进水稻中，饲虫试验结果表明，转基因株具有１００ ％ 杀虫率。 展开更多
关键词 水稻 农杆菌介导 杀虫基因 杀虫蛋白表达 转基因
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由农杆菌介导将白叶枯病抗性基因Xa21转入我国的5个水稻品种 被引量：27
4
作者 翟文学 李晓兵 +7 位作者 田文忠 周永力 潘学彪 曹守云 赵显峰 赵彬 章琦 朱立煌 《中国科学（C辑）》 CSCD 2000年第2期200-206,共7页
利用农杆菌介导的转化系统将已克隆的Ｘａ２１基因转入我国５个水稻主栽品种， 获得了 １１０个独立的转基因系．转基因植株的 ＰＣＲ和 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析揭示 Ｘａ２１基因已整 合到受体基因组．已整合的Ｘａ２１基因能稳定遗传，... 利用农杆菌介导的转化系统将已克隆的Ｘａ２１基因转入我国５个水稻主栽品种， 获得了 １１０个独立的转基因系．转基因植株的 ＰＣＲ和 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析揭示 Ｘａ２１基因已整 合到受体基因组．已整合的Ｘａ２１基因能稳定遗传，单拷贝整合的转化体在自交Ｔ_１代呈 现抗感３：１的分离．接种实验表明转基因Ｔ_０植株和Ｘａ２１－ＰＣＲ阳性Ｔ_１植株对由叶枯病 的高度抗性．经过筛选的Ｘａ２１纯合的具有优良品质的抗性转基因系可以作为品种直接 种植，或者用于杂交稻育种。 展开更多
关键词 转化 水稻 Xa21农杆菌介导 白叶枯病抗性基因
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甘蓝下胚轴的高效再生和农杆菌介导B.t.基因转化甘蓝 被引量：44
5
作者 卫志明 黄健秋 +5 位作者 徐淑平 薛红卫 钟仲贤 顾桢祥 徐悌惟 李贤 《上海农业学报》 CSCD 1998年第2期11-18,共8页
分别对取材时间和培养基组成进行研究，建立了甘蓝下胚轴外植体的高效再生系统，当选取6～7d苗龄的下胚轴，将其置于MSB＋BA2．5mg／L＋ZT1mg／L＋IBA0．1mg／L的芽分化培养基中，并于培养基中附加AgNO37．5mg／L时，最高的芽分化频率... 分别对取材时间和培养基组成进行研究，建立了甘蓝下胚轴外植体的高效再生系统，当选取6～7d苗龄的下胚轴，将其置于MSB＋BA2．5mg／L＋ZT1mg／L＋IBA0．1mg／L的芽分化培养基中，并于培养基中附加AgNO37．5mg／L时，最高的芽分化频率，“夏光甘蓝”母本“103”可达81．67％，父本“60天早椰菜”可达78．56％。在此基础上，我们对影响转化频率的不同因素，即：抑制农杆菌生长的抗生素种类及其浓度、预培养的有无及感染时的浓度、下胚轴外植体与农杆菌的感染时间和共培养时间、筛选时抗生素的加入时间进行了探讨。共获得100余株卡那霉素抗性植株，全部移栽成活，生长良好。对转基因植株总DNA进行Southernblotting分析，证明nptⅡ基因已整合到甘蓝植株细胞基因组中。 展开更多
关键词 甘蓝 下胚轴 再生 农杆菌介导 基因转化 基因
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农杆菌介导的牡丹江8号高效转基因体系的建立 被引量：39
6
作者 林拥军 陈浩 +4 位作者 曹应龙 吴昌银 文静 李亚芳 华红霞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期294-300,共7页
粳稻品种牡丹江 8号具有繁殖周期短、对多个白叶枯病和稻瘟病生理小种感病或高度感病的优点 ,因此 ,是水稻抗白叶枯病和抗稻瘟病基因克隆研究中候选基因功能验证的一个理想受体。本试验通过对农杆菌侵染参数的优化 ,建立了农杆菌介导的... 粳稻品种牡丹江 8号具有繁殖周期短、对多个白叶枯病和稻瘟病生理小种感病或高度感病的优点 ,因此 ,是水稻抗白叶枯病和抗稻瘟病基因克隆研究中候选基因功能验证的一个理想受体。本试验通过对农杆菌侵染参数的优化 ,建立了农杆菌介导的牡丹江 8号高效转基因操作体系。在 3次重复试验中 ,该转基因操作体系抗性愈伤转化率分别为 6 7.5 %、 75 .8%和 70 .0 % ,抗性植株转化率分别为 36 .2 %、 4 2 .1%和 37.9% ,具有较高的转基因效率和转基因稳定性 ; 展开更多
关键词 水稻 农杆菌介导 遗传转化 转基因体系 牡丹江8号
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农杆菌介导法将β-1,3-葡聚糖酶基因导入油菜的研究初报 被引量：35
7
作者 蓝海燕 王长海 +1 位作者 陈正华 田颖川 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期6-10,共5页
将克隆的烟草 β-1 ,3 -葡聚糖酶基因插入双子叶植物高效表达载体 p Bin4 3 8中 ,构建了植物表达载体 p BLG。利用农杆菌介导法 ,将此抗真菌基因导入甘蓝型双低油菜品种 H1 65中 ,得到了抗卡那霉素的再生植株 ,并探讨了影响油菜分化的... 将克隆的烟草 β-1 ,3 -葡聚糖酶基因插入双子叶植物高效表达载体 p Bin4 3 8中 ,构建了植物表达载体 p BLG。利用农杆菌介导法 ,将此抗真菌基因导入甘蓝型双低油菜品种 H1 65中 ,得到了抗卡那霉素的再生植株 ,并探讨了影响油菜分化的几个要素。结果表明 :乙酰丁香酮及硝酸银等物质对油菜分化及绿苗的形成具有重要作用 ;油菜对卡那霉素十分敏感 ,提高卡那霉素浓度有可能将一部分转化体淘汰。对 8株再生植株进行了 PCR检测 ,其中 4株表现为阳性。进一步的点杂交分析表明 ,有 3株表现出较强的杂交信号 。 展开更多
关键词 β1 3-葡聚糖酶 基因 农杆菌介导 抗真菌病 油菜
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根癌农杆菌介导半夏凝集素基因pBIXPTA对百合的转化 被引量：43
8
作者 唐东芹 钱虹妹 +1 位作者 唐克轩 黄丹枫 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2004年第2期135-137,167,共4页
以百合花丝诱导的胚性愈伤组织为基因转化的受体材料,利用根癌农杆菌介导法将pBIXPTA基因导入百合。组织化学法检测转化后共培养3d的组织块,GUS瞬时表达率可达60%,选择培养20d的组织中约有1%检测到GUS基因的稳定表达。菌液浓度OD600值为... 以百合花丝诱导的胚性愈伤组织为基因转化的受体材料,利用根癌农杆菌介导法将pBIXPTA基因导入百合。组织化学法检测转化后共培养3d的组织块,GUS瞬时表达率可达60%,选择培养20d的组织中约有1%检测到GUS基因的稳定表达。菌液浓度OD600值为0.8左右时侵染效果较好,同时于附加100μmol/L的AS可提高转化效率。PCR分子检测转基因植株部分呈现阳性,初步证明外源基因已整合到百合基因组中。 展开更多
关键词 根癌农杆菌介导 半夏凝集素基因 pBIXPTA 百合 基因转化 抗虫性
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农杆菌介导的马铃薯试管薯遗传转化体系的优化及反义class Ⅰ patatin基因的导入(英文) 被引量：49
9
作者 司怀军 谢从华 柳俊 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期801-805,共5页
用两个马铃薯栽培品种“鄂马铃薯 3号”和“甘农薯 2号”的试管薯为供体材料 ,建立了一种农杆菌介导的简单、快速和高效的遗传转化系统。在含有 75mg L卡那霉素的选择培养基上 ,2～ 3周可产生抗性芽 ,4～ 5周获得完整的转基因植株。筛... 用两个马铃薯栽培品种“鄂马铃薯 3号”和“甘农薯 2号”的试管薯为供体材料 ,建立了一种农杆菌介导的简单、快速和高效的遗传转化系统。在含有 75mg L卡那霉素的选择培养基上 ,2～ 3周可产生抗性芽 ,4～ 5周获得完整的转基因植株。筛选出了试管薯遗传转化的优化条件 ,特别是在再生培养基中加入 2mg L玉米素 ,两个品种的转化频率分别高达 4 5 .5 %和 4 3.9%。周期短 (4～ 5周 )、一步培养和转化频率高 ,使该转化体系能够广泛用于马铃薯转基因的研究。用含有反义classⅠpatatin基因的表达载体pBSAP转化两个品种 ,共获得 12 0株卡那霉素抗性植株。PCR、PCR Southern和Northern杂交分析证明 ,此反义基因已整合到马铃薯基因组中并在转基因植株中正常转录。反义基因的表达导致部分转基因植株的试管结薯株率和单株结薯数降低。结果表明 ,该classⅠpatatin基因可能参与了块茎形成的调控。 展开更多
关键词 农杆菌介导 马铃薯 试管薯 遗传转化体系
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甘蔗根癌农杆菌介导转化海藻糖合酶基因获得抗渗透胁迫能力增强植株 被引量：42
10
作者 王自章 张树珍 +1 位作者 杨本鹏 李杨瑞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期140-146,共7页
由双拷贝CaMV35S启动子驱动担子菌灰树花 (Grifolafrondosa)的海藻糖合酶基因 (TSase)构建植物表达载体 pBBBT ,通过三亲交配法将 pBBBT导入根癌农杆菌EHA10 5菌株 ,经根癌农杆菌介导转化甘蔗 (Saccha rumhybrid)栽培品种 ,以增强甘蔗... 由双拷贝CaMV35S启动子驱动担子菌灰树花 (Grifolafrondosa)的海藻糖合酶基因 (TSase)构建植物表达载体 pBBBT ,通过三亲交配法将 pBBBT导入根癌农杆菌EHA10 5菌株 ,经根癌农杆菌介导转化甘蔗 (Saccha rumhybrid)栽培品种 ,以增强甘蔗的抗旱能力。结果表明 ,甘蔗胚性愈伤组织对EHA10 5菌株敏感 ,甘蔗外植体开始大量形成胚性愈伤组织时是感染的适宜时期 ,用膦丝菌素 (PPT)筛选 ,抗性植株发生频率平均为 4 .5 %。经PCR及dot Southern检测证明 ,TSase已经整合到甘蔗基因组中。部分转化植株根叶畸形、株型异常、生长缓慢。移栽到含PEG80 0 0 17.4 % (w/v)的MS培养基后 。 展开更多
关键词 甘蔗 根癌 农杆菌介导转化 海藻糖合酶基因 抗渗透胁迫能力 增强植株
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Waxy基因的RNA沉默使转基因小麦种子中直链淀粉含量下降(英文) 被引量：41
11
作者 李加瑞 赵伟 +4 位作者 李全梓 叶兴国 安宝燕 李祥 张宪省 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期846-854,共9页
通过RNAi策略转化小麦,以降低小麦种子中直链淀粉的含量。小麦中直链淀粉合成的关键酶是颗粒结合型淀粉合成酶(GranuleboundstarchsynthaseI,GBSSI,即WAXY蛋白),通过RTPCR方法从小麦种子中分离出Waxy基因。Southern杂交分析表明,在基因... 通过RNAi策略转化小麦,以降低小麦种子中直链淀粉的含量。小麦中直链淀粉合成的关键酶是颗粒结合型淀粉合成酶(GranuleboundstarchsynthaseI,GBSSI,即WAXY蛋白),通过RTPCR方法从小麦种子中分离出Waxy基因。Southern杂交分析表明,在基因组中存在3个Waxy基因。Northern杂交分析显示出在授粉后的小麦种子中检测到WaxymRNA。利用RNA沉默策略,将Waxy编码区683bp的正向和反向片段以及150bp内含子,连接于表达载体pCAMBIA3300中玉米ubi1启动子下游。以扬麦10号授粉后15d的幼胚为外植体,利用农杆菌介导的方法进行转化。通过PCR、RTPCR和叶片离体褪绿实验鉴定出4株转基因植株。小麦胚乳I2KI染色和直链淀粉含量测定表明这4株转基因植株直链淀粉含量明显下降。研究结果表明Waxy基因的RNA沉默使转基因小麦种子直链淀粉的含量下降。 展开更多
关键词 小麦 WAXY RNA干涉 农杆菌介导的转化 直链淀粉
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抗菌肽MB_(39)基因导入‘皇家嘎啦’苹果及其四倍体植株的培育 被引量：31
12
作者 刘庆忠 赵红军 +2 位作者 刘鹏 Mong Rengong FreddiA.Hammerschlag 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期392-398,共7页
采用农杆菌介导法 ,将抗菌肽MB39基因转入‘皇家嘎啦’苹果 ,获得了 7个转基因株系。通过秋水仙素诱变染色体组工程育种技术 ,由转化体叶片获得了 2 0个四倍体植株。经PCR检测和SouthernBlotting杂交证明 ,抗菌肽MB39基因已经整合到皇... 采用农杆菌介导法 ,将抗菌肽MB39基因转入‘皇家嘎啦’苹果 ,获得了 7个转基因株系。通过秋水仙素诱变染色体组工程育种技术 ,由转化体叶片获得了 2 0个四倍体植株。经PCR检测和SouthernBlotting杂交证明 ,抗菌肽MB39基因已经整合到皇家嘎啦苹果的染色体组中。转基因株系TR 1、TR 3提高了对火疫病的抗性。采用流式细胞技术 (FlowCytometry) 展开更多
关键词 抗菌肽MB39 转基因 四倍体 秋水仙素 皇家嘎啦苹果 农杆菌介导
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根癌农杆菌介导TA29-Barnase基因转化甘蓝型油菜的研究 被引量：41
13
作者 何业华 熊兴华 +8 位作者 官春云 李栒 林良斌 陈社员 刘忠松 李文彬 钟军 刘春林 周小云 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期615-620,共6页
经比较影响农杆菌介导Barnase嵌合基因转化甘蓝型油菜的各种因素后 ,建立了高效稳定的转基因实验体系。按该体系 ,甘蓝型油菜“湘油 15”子叶柄预培养 2 0h ,OD60 0 为 0 5农杆菌菌液感染后共培养 3d ,在MS +2mg·L-1AgNO3 +4 5mg&... 经比较影响农杆菌介导Barnase嵌合基因转化甘蓝型油菜的各种因素后 ,建立了高效稳定的转基因实验体系。按该体系 ,甘蓝型油菜“湘油 15”子叶柄预培养 2 0h ,OD60 0 为 0 5农杆菌菌液感染后共培养 3d ,在MS +2mg·L-1AgNO3 +4 5mg·L-1BA +10mg·L-1Km +30 0mg·L-1Carb培养基上进行选择 ,转化率为 8 8% ,PCR检测和Southern杂交检测证明外源基因已整合了甘蓝型油菜基因组中。 展开更多
关键词 根癌农杆菌介导 TA29-Barnase基因 基因转化 甘蓝型油菜 雄性不育
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农杆菌介导法获得小麦转基因植株的研究 被引量：37
14
作者 黄益洪 周淼平 +3 位作者 叶兴国 唐克轩 程红梅 陆维忠 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期510-515,共6页
从 gus基因的瞬时表达入手 ,利用不同种类的农杆菌菌株感染小麦不同基因型和同一基因型的不同外植体 ,研究了农杆菌菌系、小麦基因型和外植体对转化效率的影响。从中优选出了对小麦愈伤组织感染力比较强的农杆菌菌系 AGL 0和 MOG10 1,... 从 gus基因的瞬时表达入手 ,利用不同种类的农杆菌菌株感染小麦不同基因型和同一基因型的不同外植体 ,研究了农杆菌菌系、小麦基因型和外植体对转化效率的影响。从中优选出了对小麦愈伤组织感染力比较强的农杆菌菌系 AGL 0和 MOG10 1,以及高敏感受体基因型 Alondra和扬麦 15 8等。实验结果还表明 ,预培养 10～ 15天的幼胚愈伤组织具有较高的瞬时表达率和再生能力 ,是较好的转化受体。对愈伤组织与农杆菌共培养后的筛选程序进行了摸索 ,获得了 70多个 PPT(Phosphinothricin)抗性植株 ,经 PCR等分子检测分析 ,证明部分植株实现了外源基因的成功转化 ,为进一步的研究工作打下了基础。 展开更多
关键词 农杆菌介导法 小麦 转基因植株 基因转化 GUS 瞬时表达 PPT
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通过农杆菌介导法将哈兹木霉几丁质酶ThEn-42基因导入核桃 被引量：36
15
作者 汤浩茹 Wallbraun M +2 位作者 任正隆 Reustle G.M Krczal G 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期12-18,共7页
通过根癌农杆菌C58C1ATHVRifR 介导法 ,利用烟草花叶病毒 35S双启动子和苜蓿花叶病毒引导序列控制下的含抗新霉素磷酸转移酶基因 (nptⅡ )和哈兹木霉几丁质酶基因(ThEn 4 2 )的质粒pBin19ESR为载体 ,对 3个核桃体细胞胚系进行遗传转化 ... 通过根癌农杆菌C58C1ATHVRifR 介导法 ,利用烟草花叶病毒 35S双启动子和苜蓿花叶病毒引导序列控制下的含抗新霉素磷酸转移酶基因 (nptⅡ )和哈兹木霉几丁质酶基因(ThEn 4 2 )的质粒pBin19ESR为载体 ,对 3个核桃体细胞胚系进行遗传转化 ,结果获得 4 1个抗卡那霉素的体细胞胚系。经PCR和复式PCR检测 ,4 1个转化系均含有nptⅡ基因 ,其中 38个转化系含有ThEn 4 2基因。Southern杂交分析表明 ,ThEn 4 2基因已被整合到核桃体的基因组中。几丁质酶活性检测结果表明 ,转化的体细胞胚系的几丁质酶活性比对照高几十至几千倍。 展开更多
关键词 核桃 几丁质酶 转基因 体细胞胚 农杆菌介导
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影响农杆菌介导的大豆基因转化因素的研究 被引量：35
16
作者 赵桂兰 刘艳芝 +3 位作者 李俊波 徐洪志 刘莉 尹爱平 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期84-88,共5页
通过农杆菌介导法用含NPT -Ⅱ和Barnase基因导入到大豆幼胚 ,大豆子叶节中 ,然后经过含Kan的筛选培养基中连续筛选 ,获得一批Barnase转基因植株。经PCR扩增结果 ,证实此基因已整合到大豆中 ,在当代植株中生物学特性观察。花粉粒不育率在... 通过农杆菌介导法用含NPT -Ⅱ和Barnase基因导入到大豆幼胚 ,大豆子叶节中 ,然后经过含Kan的筛选培养基中连续筛选 ,获得一批Barnase转基因植株。经PCR扩增结果 ,证实此基因已整合到大豆中 ,在当代植株中生物学特性观察。花粉粒不育率在 98%。 展开更多
关键词 大豆 农杆菌介导法 Barnase基因 基因转化 雄性不育 基因型 选择压
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木本果树遗传转化研究进展 被引量：24
17
作者 曾黎辉 吕柳新 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期191-198,共8页
从遗传转化方法和影响遗传转化的因素两方面综述了木本果树遗传转化技术近年来的进展。木本果树遗传转化方法主要有农杆菌介导法和基因枪法;影响转化的因素主要从受体与再生系统、选择标记基因与转化细胞的筛选、培养方法与培养条件等... 从遗传转化方法和影响遗传转化的因素两方面综述了木本果树遗传转化技术近年来的进展。木本果树遗传转化方法主要有农杆菌介导法和基因枪法;影响转化的因素主要从受体与再生系统、选择标记基因与转化细胞的筛选、培养方法与培养条件等方面进行论述。文章还归纳了导入目的基因并获得再生植株的木本果树种类,并对木本果树基因工程进展及展望进行了讨论。 展开更多
关键词 木本果树 遗传转化 基因工程 农杆菌介导 基因枪法 受体 再生系统 再生植株
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转移拟南芥CBF1基因引起水稻植株脯氨酸含量提高 被引量：33
18
作者 金建凤 高强 +1 位作者 陈勇 王君晖 《细胞生物学杂志》 CSCD 2005年第1期73-76,共4页
　　利用农杆菌介导的转基因技术,成功地将拟南芥抗冻转录激活因子基因CBF1转入粳稻中花11中,并获得了T1代转基因植株。CBF1基因及筛选基因HPT(潮霉素抗性基因)均在T1代中检测到,呈现单位点的孟德尔式遗传。常温和低温处理之后,T1代植... 　　利用农杆菌介导的转基因技术,成功地将拟南芥抗冻转录激活因子基因CBF1转入粳稻中花11中,并获得了T1代转基因植株。CBF1基因及筛选基因HPT(潮霉素抗性基因)均在T1代中检测到,呈现单位点的孟德尔式遗传。常温和低温处理之后,T1代植株体内的脯氨酸含量均比野生型明显提高,同时,耐低温表型也在T1-1株系中出现。 展开更多
关键词 脯氨酸含量 转基因植株 水稻 潮霉素 株系 农杆菌介导 低温处理 HPT 转录激活因子 体内
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铁蛋白基因的水稻转化及其功能初步分析 被引量：36
19
作者 徐晓晖 郭泽建 +2 位作者 程志强 黎军英 李德葆 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期49-54,共6页
铁蛋白是与铁离子结合的一种铁贮藏蛋白,用来调节细胞内的自由铁离子浓度。本研究利用农杆菌介导的转化方法将豌豆铁蛋白(peaferritin,Fer)基因转化到水稻秀水11品种中。经对转基因水稻(T0代)进行了PCR检测,及Southern杂交分析,结果表明... 铁蛋白是与铁离子结合的一种铁贮藏蛋白,用来调节细胞内的自由铁离子浓度。本研究利用农杆菌介导的转化方法将豌豆铁蛋白(peaferritin,Fer)基因转化到水稻秀水11品种中。经对转基因水稻(T0代)进行了PCR检测,及Southern杂交分析,结果表明,Fer基因已整合到水稻基因组中。通过测定光合作用过程中最大光化学量子产量(Fv/Fm值)分析了由百草枯处理引起的水稻叶片的氧化损害。结果表明,转Fer基因的叶片呈现出不同程度的抗百草枯氧化的能力。用水稻稻瘟病菌接种水稻叶片,发现转Fer基因植株可以减少或延缓病原菌侵染后活性氧的产生。另外,对不同组织中的铁含量测定结果表明,转Fer基因水稻的种子和叶片组织中铁的含量明显提高。这些结果说明Fer在水稻中已表达,增加了转基因植株中铁的贮藏量,同时减少了体内的游离铁从而也减轻了转基因植株的氧化损伤。 展开更多
关键词 水稻 铁蛋白 氧化损害 转基因 农杆菌介导 抗氧化作用
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农杆菌介导的小麦遗传转化条件的研究 被引量：26
20
作者 刘庆法 唐克轩 +3 位作者 叶建明 郝峥嵘 何艺园 沈大棱 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期569-572,共4页
利用来自小麦花药、幼胚愈伤组织和带有GUS基因的Ti质粒，对农杆菌转化小麦的条件进行了初步研究，证实适当浓度的乙酰丁香酮是诱发T－DNA转移的必需条件，其最低有效浓度为50μmol／L．在20～35℃，pH5．2～6．8条件下，均可有效诱导T... 利用来自小麦花药、幼胚愈伤组织和带有GUS基因的Ti质粒，对农杆菌转化小麦的条件进行了初步研究，证实适当浓度的乙酰丁香酮是诱发T－DNA转移的必需条件，其最低有效浓度为50μmol／L．在20～35℃，pH5．2～6．8条件下，均可有效诱导T－DNA的转移．农杆菌菌液密度以108ml－1细胞为宜，添加适当的表面活性剂有促进T－DNA转化的作用．对4种小麦材料的研究证明，T－DNA的转移效率常因受体材料基因型的不同而有很大差异；愈伤组织的活力与T－DNA转移的效率有密切关系．显微观察发现，胚状体细胞比非胚状体细胞群更容易发生转化． 展开更多
关键词 小麦 农杆菌介导 基因转化 遗传转化条件
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