Ag43/FGFR1嵌合蛋白疫苗诱导小鼠产生特异性抗体的研究 被引量：2

1

作者 陈少兴 郑少萍 +3 位作者 郭峻莉 王才春 黄风迎 郑少江 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期438-440,445,共4页

目的了解Antigen43/成纤维细胞生长因子1型受体(Ag43/FGFR1)重组嵌合蛋白作为疫苗能否诱导小鼠产生抗自身FGFR1抗体。方法利用重组的Ag43/FGFR1嵌合蛋白作为疫苗免疫BALB/c小鼠,分别用Westernblot、酶联免疫吸附实验(ELISA)和酶联免疫... 目的了解Antigen43/成纤维细胞生长因子1型受体(Ag43/FGFR1)重组嵌合蛋白作为疫苗能否诱导小鼠产生抗自身FGFR1抗体。方法利用重组的Ag43/FGFR1嵌合蛋白作为疫苗免疫BALB/c小鼠,分别用Westernblot、酶联免疫吸附实验(ELISA)和酶联免疫斑点实验(ELISPOT)方法检测小鼠血清中产生的抗体及其亚型和脾脏中分泌抗FGFR1抗体的特异B淋巴细胞情况。结果Western blot和ELISA检测发现,Ag43/FGFR1蛋白免疫组可以有效诱导产生抗自身FGFR1抗体,而小鼠FGFR1自身蛋白对照组、Ag43蛋白对照组、生理盐水对照组均未发现抗自身FGFR1抗体。ELISPOT检测发现,与各对照组相比,Ag43/FGFR1蛋白免疫组分泌抗自身FGFR1抗体的B淋巴细胞数目明显增多(均P<0.01)。ELISA检测发现主要抗体亚型IgG1和IgG2b明显升高。结论Ag43/FGFR1重组嵌合蛋白质疫苗免疫小鼠能够诱导产生抗小鼠FGFR1的自身抗体,可以考虑应用于抗肿瘤血管生成研究。 展开更多

关键词 成纤维细胞生长因子1型受体 Ag43基因 疫苗 自身抗体

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FGF21/β-klotho/FGFR1通路在2型糖尿病局灶性脑缺血模型大鼠脑损伤中的作用机制研究 被引量：2

2

作者 何阳 李其富 +1 位作者 黎昌炫 陈瑞鹏 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期9-15,共7页

目的研究在2型糖尿病(T2DM)局灶性脑缺血模型大鼠脑损伤中成纤维细胞生长因子21(FGF21)/β-klotho/成纤维细胞生长因子1型受体(FGFR1)通路的作用。方法 SD大鼠采用高脂饲养结合腹腔链脲佐菌素(STZ)注射建立T2DM大鼠模型,采用线栓法建立... 目的研究在2型糖尿病(T2DM)局灶性脑缺血模型大鼠脑损伤中成纤维细胞生长因子21(FGF21)/β-klotho/成纤维细胞生长因子1型受体(FGFR1)通路的作用。方法 SD大鼠采用高脂饲养结合腹腔链脲佐菌素(STZ)注射建立T2DM大鼠模型,采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,实验分为正常对照组(Control组)、单纯脑缺血组(MCAO组)、T2DM脑缺血组(T2DM+MCAO组)、T2DM脑缺血FGFR1抑制剂PD173074干预组(PD173074组)及T2DM脑缺血FGFR1激动剂PF05231023干预组(PF05231023组),每组12只,PD173074组、PF05231023组分别于MCAO术前30 min尾静脉注射PD173074 5 mg/kg、PF05231023 5 mg/kg。MCAO 24 h后进行神经功能缺损评分,随后处死大鼠取脑组织标本。采用原位末端标记法(TUNEL)检测脑组织神经细胞凋亡,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脑组织FGF21、β-klotho、FGFR1 mRNA表达,免疫印迹(Western blot)检测脑组织FGF21、β-klotho、FGFR1蛋白及血小板内皮细胞粘附分子(CD31)、内皮素-1(ET-1)及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达。结果与Control组比较,MCAO组和T2DM+MCAO组大鼠神经功能缺损评分、神经细胞凋亡率、FGF21、β-klotho、FGFR1 mRNA及蛋白水平、CD31、ET-1、VEGF蛋白水平显著增加(P<0.05);与T2DM+MCAO组比较,PD173074组大鼠神经功能缺损评分、神经细胞凋亡率、CD31、ET-1、VEGF蛋白水平显著增加,FGF21、β-klotho、FGFR1 mRNA及蛋白水平显著降低(P<0.05),PF05231023组大鼠神经功能缺损评分、神经细胞凋亡率、CD31、ET-1、VEGF蛋白水平显著降低(P<0.05),FGF21、β-klotho、FGFR1 mRNA及蛋白水平显著增加(P<0.05)。结论 FGF21/β-klotho/FGFR1通路激活可能在T2DM局灶性脑缺血模型大鼠中发挥重要保护作用。 展开更多

关键词 2型糖尿病 局灶性脑缺血 成纤维细胞生长因子21/β-klotho/成纤维细胞生长因子1型受体通路

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小鼠真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1的构建及表达 被引量：1

3

作者 郭峻莉 翁志宏 郑少江 《海南医学院学报》 CAS 2010年第10期1245-1247,1252,共4页

目的:通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1,并检测其在CHO细胞中的表达。方法:通过PCR扩增FGFR1的全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,经限制内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,... 目的:通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1,并检测其在CHO细胞中的表达。方法:通过PCR扩增FGFR1的全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,经限制内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体包裹转染CHO细胞,Western blot检测FGFR1目的蛋白的表达。结果:经酶切和测序鉴定证实本实验构建的重组表达质粒正确,该质粒在体外转染CHO细胞后可表达FGFR1目的蛋白。结论:成功构建的pcDNA3.1(+)-FGFR1重组质粒能在体外表达FGFR1目的蛋白。 展开更多

关键词 碱性成纤维细胞生长因子1型受体(FGFR1) 真核表达质粒 基因工程

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FGFR2基因多态性与乳腺癌相关性

4

作者 孙姗姗 姜永冬 庞达 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2011年第5期361-363,共3页

成纤维细胞生长因子2型受体（FGFR2）在细胞的增殖、分化中起重要作用，其基因具有遗传多态性。近年研究表明，这种多态性与乳腺癌的发病风险以及临床病理因素具有相关性。

关键词 乳腺肿瘤 成纤维细胞生长因子2型受体 基因多态性

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fgfr3基因敲除载体的构建及中靶ES细胞的筛选与鉴定

5

作者 苏楠 宋维威 +5 位作者 王建民 宋瑞华 刘志君 苟元彬 杜晓兰 陈林 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期331-336,共6页

目的构建成纤维细胞生长因子3型受体(nbroblast growth factor receptor-3,FGFR3)基因敲除载体,并对中靶ES细胞进行筛选与鉴定,为最终建立FGFR3条件性敲除小鼠模型或FGFR3功能减低小鼠,研究FGFR3在小鼠骨骼等器官发育、损伤修复过程中... 目的构建成纤维细胞生长因子3型受体(nbroblast growth factor receptor-3,FGFR3)基因敲除载体,并对中靶ES细胞进行筛选与鉴定,为最终建立FGFR3条件性敲除小鼠模型或FGFR3功能减低小鼠,研究FGFR3在小鼠骨骼等器官发育、损伤修复过程中的作用打下基础。方法在分析小鼠fgfr3基因组DNA序列结构的基础上,设计并构建了针对小鼠fgfr3外显子9、10的条件性基因敲除载体,采用电穿孔法转染ES细胞,用G418与Gancyclovir对电转的ES细胞进行正负筛选,最后对ES细胞克隆做Southern与PCR鉴定。结果对ES细胞正负筛选后共挑取180个克隆；用5′端探针进行Southern杂交鉴定后发现2株阳性克隆；经PCR检测发现这两株克隆fgfr3的8号内含子内的LoxP序列丢失。结论得到两株fgfr3基因中只含有neo基因的ES细胞克隆,fgfr3的表达是降低的,可用来建立FGFR3功能降低的小鼠。 展开更多

关键词 成纤维细胞生长因子3型受体 条件性敲除 同源重组 Cre蛋白 ES细胞

原文传递

真核表达质粒pcDNA3.1a-FGFR1构建及意义

6

作者 王笑 严金川 龚杰 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2011年第4期333-336,共4页

目的:构建真核表达质粒pcDNA3.1a-FGFR1。方法:通过PCR扩增FGFR1目的片段,双酶切纯化PCR产物及pcDNA3.1a,将扩增的FGFR1基因片段插入pcDNA3.1a线性质粒,即构建成pcDNA3.1a-FGFR1真核表达质粒,将质粒转化感受态DH5α菌株,筛选阳性克隆行... 目的:构建真核表达质粒pcDNA3.1a-FGFR1。方法:通过PCR扩增FGFR1目的片段,双酶切纯化PCR产物及pcDNA3.1a,将扩增的FGFR1基因片段插入pcDNA3.1a线性质粒,即构建成pcDNA3.1a-FGFR1真核表达质粒,将质粒转化感受态DH5α菌株,筛选阳性克隆行双酶切鉴定及测序鉴定。结果:酶切及测序结果表明pcD-NA3.1a-FGFR1真核表达质粒构建成功。结论:pcDNA3.1a-FGFR1真核表达质粒构建成功,为下一步对心血管疾病研究奠定了一定的实验基础。 展开更多

关键词 碱性成纤维细胞生长因子1型受体 pcDNA3.1a载体 真核表达质粒 心血管疾病

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FGFR2、THBS1和THBS4在胃癌组织中的表达及临床意义 被引量：7

7

作者 周潇 黄婷婷 邱红 《中国癌症防治杂志》 CAS 2017年第5期368-372,共5页

目的探讨成纤维细胞生长因子2型受体(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)、凝血酶敏感蛋白家族(thrombospondins,THBS)成员THBS1和THBS4在胃癌组织中的表达及临床意义,并分析FGFR2与THBS1、THBS4的相关性。方法采用免疫组化SAB... 目的探讨成纤维细胞生长因子2型受体(fibroblast growth factor receptor 2,FGFR2)、凝血酶敏感蛋白家族(thrombospondins,THBS)成员THBS1和THBS4在胃癌组织中的表达及临床意义,并分析FGFR2与THBS1、THBS4的相关性。方法采用免疫组化SABC法检测胃癌组织中FGFR2、THBS1和THBS4的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果 FGFR2、THBS1和THBS4在胃癌组织中的高表达率分别为68.67%、57.83%和62.65%,三者在胃癌组织中的表达均高于癌旁正常组织(P<0.001)。FGFR2表达与肿瘤浸润深度(P=0.003)和临床分期(P=0.009)密切相关,而与患者年龄、性别、肿块大小、分化程度及淋巴结转移无相关性(P>0.05);THBS1表达与患者的临床病理特征均无相关性(P>0.05);THBS4表达与患者肿瘤分化程度相关,高或中分化肿瘤组织THBS4的表达明显高于低分化肿瘤组织(P=0.001)。相关性分析显示FGFR2与THBS1表达呈正相关(r=0.229,P=0.037),与THBS4表达呈负相关(r=-0.213,P=0.045)。结论 FGFR2、THBS1与THBS4在胃癌组织中高表达,FGFR2可能正向调控THBS1表达,而负向调控THBS4表达,其作用可能是FGFR2信号通路参与胃癌侵袭转移的分子机制之一。 展开更多

关键词 胃肿瘤 成纤维细胞生长因子2型受体 THBS1 THBS4

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Ag43/FGFR-1嵌合蛋白疫苗抗小鼠纤维肉瘤血管生成的实验研究 被引量：4

8

作者 郭峻莉 郑少江 +1 位作者 郑少萍 罗志飞 《海南医学院学报》 CAS 2009年第5期403-406,共4页

目的:利用Antigen43(Ag43)/成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)重组嵌合蛋白作为疫苗,了解其是否具有抑制小鼠肿瘤生长的作用,并初步探讨其作用机理。方法:40只BALB/c雌性小鼠接种Meth A细胞后第7天,随机分为Ag43/FGFR-1蛋白免疫组(AF... 目的:利用Antigen43(Ag43)/成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)重组嵌合蛋白作为疫苗,了解其是否具有抑制小鼠肿瘤生长的作用,并初步探讨其作用机理。方法:40只BALB/c雌性小鼠接种Meth A细胞后第7天,随机分为Ag43/FGFR-1蛋白免疫组(AF组)、Ag43蛋白免疫组(Ag43组)、FGFR-1蛋白免疫组(FGFR-1组)和生理盐水对照组(NS组)4组,每组10只,观察免疫治疗后的荷瘤小鼠肿瘤体积和生存曲线,分别用免疫组织化学方法检测肿瘤组织微血管密度(MVD),免疫印迹(W est-ern blot)方法检测抗自身FGFR-1的抗体,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测分泌抗自身FGFR-1抗体的B淋巴细胞的数量。结果:Ag43/FGFR-1组与FGFR-1蛋白、Ag43蛋白、生理盐水对照组肿瘤组织MVD计数分别为11.9±2.3、59.6±3.8、60.6±1.2和61.9±3.4(P<0.01);与对照组相比,Ag43/FGFR-1组肿瘤体积明显变小(P<0.01),存活时间明显延长(P<0.01),血清中发现含有抗自身FGFR-1的抗体且发现小鼠脾脏中分泌抗自身FGFR-1抗体的B淋巴细胞数目明显增多(P(0.01)。结论:Ag43/FGFR-1蛋白质疫苗能够诱导荷瘤鼠产生特异性免疫反应,从而抑制肿瘤血管生成和肿瘤的生长。 展开更多

关键词 成纤维细胞生长因子I型受体 Ag43基因 蛋白质疫苗 肿瘤血管生成

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鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体胞外段原核表达载体的构建及表达鉴定 被引量：2

9

作者 郑少江 黄凤迎 +2 位作者 郑少萍 王伟 吴人亮 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期433-435,439,共4页

目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT-PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD-NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒p... 目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT-PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD-NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经过琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠埃希菌,用RT-PCR和免疫印迹方法鉴定是否能够正确表达,同时利用Ni-NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30-FGFR-1正确,并在大肠埃希菌中正确表达。经纯化后,进行SDS-PAGE电泳显示得到1条分子量约40 ku的蛋白质条带。结论成功构建鸡FGFR-1胞外段原核表达载体并获得重组活性蛋白。 展开更多

关键词 成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体 肿瘤血管生成 原核表达 基因重组

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FGFR1在尖锐湿疣中的表达及其临床意义 被引量：1

10

作者 徐斌 郭峻莉 《中国热带医学》 CAS 2010年第9期1101-1102,共2页

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子I型受体(FGFR1)在尖锐湿疣(CA)中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化SP法分别检测FGFR1在33例尖锐湿疣和10例正常人皮肤组织中的表达情况。结果正常对照包皮组织中FGFR1无或仅有弱的表达,CA皮损组织... 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子I型受体(FGFR1)在尖锐湿疣(CA)中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化SP法分别检测FGFR1在33例尖锐湿疣和10例正常人皮肤组织中的表达情况。结果正常对照包皮组织中FGFR1无或仅有弱的表达,CA皮损组织则呈强阳性表达,两组间比较有极显著统计学意义(P<0.001)。结论 FGFR1在尖锐湿疣组织中过度表达,提示其可能在促真皮毛细血管生成和表皮细胞增殖中发挥重要作用。 展开更多

关键词 成纤维细胞生长因子I型受体 尖锐湿疣 免疫组织化学

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FGFR1在乳腺浸润性小叶癌中的表达及意义 被引量：1

11

作者 张弦 丁莉利 +2 位作者 陈明净 牟联军 罗志飞 《中国热带医学》 CAS 2015年第1期96-98,共3页

目的探讨FGFR1在乳腺浸润性小叶癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学染色检测FGFR1在45例乳腺浸润性小叶癌、40例乳腺浸润性导管癌中的表达,比较FGFR1在浸润性小叶癌和浸润性导管癌中表达的差异,分析浸润性小叶癌FGFR1的表达与临床... 目的探讨FGFR1在乳腺浸润性小叶癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学染色检测FGFR1在45例乳腺浸润性小叶癌、40例乳腺浸润性导管癌中的表达,比较FGFR1在浸润性小叶癌和浸润性导管癌中表达的差异,分析浸润性小叶癌FGFR1的表达与临床病理参数的关系。结果 FGFR1在乳腺癌癌旁组织中均阴性表达。浸润性小叶癌FGFR1的阳性表达率比浸润性导管癌高(P=0.048),其染色强度也比浸润性导管癌强(P=0.044)。FGFR1的表达强度与乳腺浸润性小叶癌的肿块大小(P=0.021)和TNM分期相关(P=0.041)。结论初步推测FGFR1的过表达参与乳腺浸润性小叶癌的发生、发展。 展开更多

关键词 乳腺 小叶癌 成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体

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FGFR1在乳腺浸润性小叶癌中的表达及其与脉管生成的关系 被引量：1

12

作者 丁莉利 郑少江 +3 位作者 陈明净 牟联军 张弦 罗志飞 《海南医学院学报》 CAS 2014年第7期905-907,912,共4页

目的:探讨成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR1)在乳腺浸润性小叶癌中的表达情况和对血管及淋巴管生成的影响。方法:采用免疫组织化学染色检测FGFR1在45例乳腺浸润性小叶癌、40例乳腺浸润性导管癌中的表达,同时采用CD34和D2-40双标免疫组... 目的:探讨成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR1)在乳腺浸润性小叶癌中的表达情况和对血管及淋巴管生成的影响。方法:采用免疫组织化学染色检测FGFR1在45例乳腺浸润性小叶癌、40例乳腺浸润性导管癌中的表达,同时采用CD34和D2-40双标免疫组织化学染色分别标记血管和淋巴管,检测乳腺浸润性小叶癌的微血管密度和微淋巴管密度。结果:乳腺浸润性小叶癌的RGRR1表达阳性率比乳腺浸润性导管癌高,其染色强度也比乳腺浸润性导管癌强,差异均具有统计学意义(P<0.05);FGFR1在乳腺浸润性小叶癌中的阳性表达与微血管密度相关(P<0.05),而与微淋巴管密度无关(P>0.05)。结论:初步推测FGFR1的过表达与乳腺浸润性小叶癌的发生有关,FGFR1的过表达能促进癌组织中的血管生成。 展开更多

关键词 乳腺 小叶癌 成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR1)

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小鼠原核表达载体pQE30/FGFR-1的构建及表达鉴定

13

作者 郑少江 郑少萍 +3 位作者 吴人亮 焦嫦亮 赵霞 姜虹 《中国热带医学》 CAS 2006年第10期1762-1764,共3页

目的构建小鼠FGFR-1胞外段基因重组原核表达载体pQE30/FGFR-1,并在大肠杆菌JM109中表达。方法利用RT-PCR技术,从胚肝中扩增出小鼠的FGFR-1胞外段基因的cDNA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外... 目的构建小鼠FGFR-1胞外段基因重组原核表达载体pQE30/FGFR-1,并在大肠杆菌JM109中表达。方法利用RT-PCR技术,从胚肝中扩增出小鼠的FGFR-1胞外段基因的cDNA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠杆菌,用RT-PCR和免疫印迹方法鉴定,同时利用Ni-NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30-FGFR-1正确,并在大肠杆菌中正确表达。经纯化后,进行SDS-PAGE电泳显示得到1条分子量约40kDa的蛋白质条带。结论成功构建小鼠原核表达载体pQE30/FGFR-1并在大肠杆菌中有效表达,纯化后获得具有活性的重组蛋白质。 展开更多

关键词 成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体 基因重组 原核表达

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