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嗜热脂肪土芽孢杆菌普鲁兰酶基因的异源表达及重组酶性质 被引量：7
1
作者 肖亚朋 沈微 +2 位作者 李婷霖 陈献忠 樊游 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期30-36,共7页
用PCR方法扩增得到嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)XQ3506的普鲁兰酶编码基因Gs P,在大肠杆菌中进行异源表达。在没有外源信号肽的条件下,重组酶部分分泌到周质中,少量分泌到培养液中。重组酶表观分子量约为81 k Da... 用PCR方法扩增得到嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)XQ3506的普鲁兰酶编码基因Gs P,在大肠杆菌中进行异源表达。在没有外源信号肽的条件下,重组酶部分分泌到周质中,少量分泌到培养液中。重组酶表观分子量约为81 k Da,纯酶比活力为38.2 U/mg。重组酶最适温度为60℃,能短时耐受70℃高温;重组酶最适pH6.5,在pH5.5~7.5的范围内具有较好的稳定性;重组酶Km值为0.086μmol/L,Vmax为0.083μmol/min;K+和Mg^(2+)对重组酶有激活作用,而Ca^(2+)则有抑制作用。重组酶水解普鲁兰糖产物为单一麦芽三糖,对直链淀粉未发现降解作用,是一种I型普鲁兰酶。重组酶Gs P在直链淀粉、抗性淀粉生产和粉丝酶法生产工艺中有一定的应用前景。 展开更多
关键词 嗜热脂肪土芽孢杆菌 异源表达 I型普鲁兰酶 蛋白纯化 酶学性质
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嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1的5L发酵罐发酵条件初探 被引量：2
2
作者 张慧 李活孙 +1 位作者 邱宏端 林新坚 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期408-411,共4页
优化嗜热脂肪芽孢杆菌CHB1的5 L发酵罐发酵条件。通过单因素法优化发酵罐的通气量、转速、温度、pH等参数,并测定CHB1在5 L发酵罐中的生长曲线。结果表明,最佳发酵条件为:转速180 r/min、通气量6 L/min、发酵温度58℃、接种量4%,发酵过... 优化嗜热脂肪芽孢杆菌CHB1的5 L发酵罐发酵条件。通过单因素法优化发酵罐的通气量、转速、温度、pH等参数,并测定CHB1在5 L发酵罐中的生长曲线。结果表明,最佳发酵条件为:转速180 r/min、通气量6 L/min、发酵温度58℃、接种量4%,发酵过程自动流加乙酸控制pH值为8.0,培养21 h。采用自动流加乙酸控制pH值的方法,效果显著,控制pH值为8.0时,发酵效果最好,细胞生物量高达6.07×108cfu/mL,约是不控制pH值发酵的对照组(3.5×108cfu/mL)的2倍。 展开更多
关键词 嗜热脂肪土芽孢杆菌 发酵罐 优化
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嗜热脂肪土芽孢杆菌木聚糖酶基因的合成及其在大肠杆菌中的表达(英文) 被引量：1
3
作者 张志刚 裴小琼 吴中柳 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期271-275,共5页
来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的木聚糖内切酶XT6在工业上有着重要的应用,已经成功应用于工业规模的生产试验.本文作者在合成XT6基因全序列的同时对其密码子进行了优化,且构建重组质粒在大肠杆菌中高表达.通过优化表达条件,功能正常的XT6基因... 来自嗜热脂肪土芽孢杆菌的木聚糖内切酶XT6在工业上有着重要的应用,已经成功应用于工业规模的生产试验.本文作者在合成XT6基因全序列的同时对其密码子进行了优化,且构建重组质粒在大肠杆菌中高表达.通过优化表达条件,功能正常的XT6基因在大肠杆菌中成功过量表达,蛋白表达量占细胞中总蛋白的65%.重组表达的木聚糖内切酶XT6特性和天然酶相似,以桦木木聚糖为底物测定细胞提取物中木聚糖酶活性,最大活性高达3030U/mL.本文首次报道了来自嗜热脂肪土芽孢杆菌中木聚糖酶基因全序列的合成和在大肠杆菌中成功过量表达. 展开更多
关键词 嗜热脂肪土芽孢杆菌 木聚糖酶 全基因合成 密码子优化 表达
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应用响应面法优化嗜热脂肪土芽孢杆菌培养基 被引量：1
4
作者 李活孙 陈济琛 +1 位作者 邱宏端 林新坚 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期66-69,共4页
目的:筛选并优化嗜热脂肪芽孢杆菌CHB1液体发酵培养基。方法:通过Plackett-Burman试验和响应面分析方法,确定培养基的主要影响因素和最佳浓度。结果:利用SAS软件进行分析,确定对响应值影响最大的3个因素为豆粕、酵母粉、K2HPO4。最佳培... 目的:筛选并优化嗜热脂肪芽孢杆菌CHB1液体发酵培养基。方法:通过Plackett-Burman试验和响应面分析方法,确定培养基的主要影响因素和最佳浓度。结果:利用SAS软件进行分析,确定对响应值影响最大的3个因素为豆粕、酵母粉、K2HPO4。最佳培养基组成为0.51%、豆粕浓度为0.425%、K2HPO4浓度为0.994%。根据模型预测得到的理论最大菌数为2.94×108cfu。在初始条件下实验,菌数为2.40×108cfu,在优化的最佳培养基条件下,实际的菌数为3.06×108cfu。菌数比优化前提高了27.3%。试验值与预测值的误差为4.08%。结论:实验值与模型预测值拟合良好。 展开更多
关键词 嗜热脂肪土芽孢杆菌 培养基优化 PLACKETT-BURMAN设计 响应面分析法
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一种中性普鲁兰酶的高效表达及重组酶在粉丝制作中的应用 被引量：1
5
作者 王婕 朱新文 +4 位作者 德青美朵 姚雁 沈微 陈献忠 樊游 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期122-127,共6页
为获得适合粉丝制作工艺的普鲁兰酶,研究了嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)普鲁兰酶基因GsP在不同枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)宿主菌中的表达及重组酶的应用效果。分别以淀粉酶基因缺失的枯草芽孢杆菌1A717和... 为获得适合粉丝制作工艺的普鲁兰酶,研究了嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)普鲁兰酶基因GsP在不同枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)宿主菌中的表达及重组酶的应用效果。分别以淀粉酶基因缺失的枯草芽孢杆菌1A717和蛋白酶基因缺失的菌株WB600为宿主菌,构建了表达GsP的重组菌,酶活检测和SDS-PAGE分析表明,两种重组菌产生的普鲁兰酶均为胞外酶,分别命名为GsP1a和GsPwb。两种重组酶分别用于粉丝制作,以GsP1a处理的芡糊制作的粉丝成品断条率接近于0,由GsPwb处理的芡糊制作的粉丝断条率高于前者,这可能与宿主菌WB600在发酵过程中产生的α-淀粉酶有关。该研究表明,中性普鲁兰酶是粉丝制作中明矾的理想替代物,酶液中α-淀粉酶活性的去除有利于其应用性能的提升。 展开更多
关键词 普鲁兰酶 嗜热脂肪土芽孢杆菌 马铃薯粉丝
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辽河高凝油微生物采油菌剂研究及应用评价 被引量：10
6
作者 王小通 向龙斌 张艺馨 《岩性油气藏》 CSCD 北大核心 2017年第5期162-168,共7页
针对高凝油含蜡高、凝固点高、流动性差及开采难度大的问题,选用铜绿假单胞菌配合嗜热脂肪地芽孢杆菌和嗜热脱氮地芽孢杆菌,采用四组分分析法和饱和烃气相色谱法等方法开展了微生物提高高凝油采收率菌剂研究和应用评价。结果表明:菌种... 针对高凝油含蜡高、凝固点高、流动性差及开采难度大的问题,选用铜绿假单胞菌配合嗜热脂肪地芽孢杆菌和嗜热脱氮地芽孢杆菌,采用四组分分析法和饱和烃气相色谱法等方法开展了微生物提高高凝油采收率菌剂研究和应用评价。结果表明:菌种对原油四组分存在选择性降解,降解率为23.0%~42.3%,同时菌种可以将高凝油中长碳链饱和烃降解为短碳链烃类,w(nC_(21))/w(nC_(22))值和w(nC_(21)+nC_(22))/w(nC_(28)+nC_(29))值增大0.33~0.57;铜绿假单胞菌发酵液表面张力从72.21 mN/m降低至26.81 mN/m;嗜热脂肪地芽孢杆菌与嗜热脱氮地芽孢杆菌2种芽孢杆菌乳化高凝油的E24值分别为70.6%和82.3%;基于嗜热脂肪地芽孢杆菌、嗜热脱氮地芽孢杆菌和铜绿假单胞菌3种细菌性能设计的兼容本源微生物的复合微生物采油菌剂可使高凝油黏度降低63.86%,凝固点降低6℃。物理模拟驱油实验表明:该微生物复合菌剂可在中渗(200 mD)及低渗(50 mD)条件下使高凝油采收率提高6.46%~8.48%。6口油井的微生物吞吐采油试验证明该微生物复合菌剂性能稳定,可使高凝油采收率大幅提高,具有良好的工业应用前景。 展开更多
关键词 高凝油 微生物采油技术 嗜热脂肪地芽孢杆菌 嗜热脱氮地芽孢杆菌 铜绿假单胞菌
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一株嗜热脂肪地芽孢杆菌的驱油性能及机理 被引量：11
7
作者 曹嫣镔 刘涛 +3 位作者 李彩风 胡婧 巴燕 吴昕宇 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1060-1064,共5页
针对油藏高温条件下微生物数量较少,驱油机理不够明确的特点,对胜利油田不同区块微生物进行筛选.得到一株能够乳化分散原油的细菌,经鉴定为嗜热脂肪地芽孢杆菌,能够耐受60℃以上的高温并能有效生长代谢,代谢产物主要由糖类、脂类和蛋白... 针对油藏高温条件下微生物数量较少,驱油机理不够明确的特点,对胜利油田不同区块微生物进行筛选.得到一株能够乳化分散原油的细菌,经鉴定为嗜热脂肪地芽孢杆菌,能够耐受60℃以上的高温并能有效生长代谢,代谢产物主要由糖类、脂类和蛋白质组成.利用该菌的培养液、培养后代谢产物及培养后的菌体分别进行驱油实验,结果表明3种不同的驱替液均能够提高驱替效率,其中培养液能够提高驱替效率11.8%,其他两种驱替液提高驱替效率分别为4.5%和3%.培养液和培养后菌体驱替时岩心压力升高0.5 MPa以上,而培养后代谢产物驱替过程中压力变化不明显,但是代谢产物能够乳化剥离原油,同样达到提高驱替效率的作用.岩心驱替结束后对岩心内剩余油测定表明,从入口到出口呈现逐渐升高的趋势,证明微生物驱替时不断"推移"、"驱赶"原油的过程.综合实验结果,该菌株具备进一步现场实际微生物驱油应用的潜力. 展开更多
关键词 微生物驱油 嗜热脂肪地芽孢杆菌 乳化 驱油机理 驱替实验
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嗜热解烃菌DM-2产生的生物乳化剂 被引量：9
8
作者 李国强 纪凯华 +3 位作者 李佳斌 刘云 梁凤来 马挺 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期585-591,共7页
【目的】生物乳化剂是一类由微生物代谢产生的大分子生物表面活性物质,从胜利油田中1区N3块地层环境中筛选到一株能产生一种生物乳化剂的嗜热解烃菌DM-2,经鉴定为嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus),研究其产生的生物... 【目的】生物乳化剂是一类由微生物代谢产生的大分子生物表面活性物质,从胜利油田中1区N3块地层环境中筛选到一株能产生一种生物乳化剂的嗜热解烃菌DM-2,经鉴定为嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus),研究其产生的生物乳化剂的化学组成和理化性质。【方法】采用化学显色、红外光谱、高效液相色谱和氨基酸自动分析等方法确定乳化剂的化学组成;根据乳化剂在不同条件下的乳化指数(EI-24)确定其理化性质。【结果】菌株DM-2产生的乳化剂主要由多糖(71.4%,质量比)和蛋白(27.75%,质量比)组成,对柴油、苯、二甲苯和煤油等石油烃均有很好的乳化效果。理化性质分析显示它是一种耐高温、耐盐、耐酸碱的高效乳化剂。【结论】菌株DM-2产生的乳化剂是一种新型的生物乳化剂,在石油开采、原油集输、油罐清洗和石油污染治理等领域具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 生物乳化剂 嗜热脂肪地芽孢杆菌 解烃菌 嗜热菌 理化性质
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高温快速堆肥处理屠宰废弃物效果研究 被引量：7
9
作者 何秀红 罗学刚 +1 位作者 贾文甫 焦扬 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期171-177,182,共8页
实验以屠宰废弃物为堆肥原料,在60℃高温下,通过添加不同质量浓度（0、0.25%、0.5%、0.75%、1%）的嗜热脂肪地芽孢杆菌,采用自制呼吸瓶发酵7.5 h和堆肥呼吸仪发酵10 h 2种模式,研究高温快速堆肥处理屠宰废弃物的效果。结果表明：在10 h... 实验以屠宰废弃物为堆肥原料,在60℃高温下,通过添加不同质量浓度（0、0.25%、0.5%、0.75%、1%）的嗜热脂肪地芽孢杆菌,采用自制呼吸瓶发酵7.5 h和堆肥呼吸仪发酵10 h 2种模式,研究高温快速堆肥处理屠宰废弃物的效果。结果表明：在10 h内,2种堆肥模式温度的变化经历60℃上升到69℃的升温期、63～69℃的高温期、69℃下降到61℃的降温期,最后接近环境温度60℃,快速达到常温堆肥30～60 d左右的效果;堆肥过程中含水率的变化范围从44%下降到39.22%;碳氮比（C/N）的变化范围从20.53下降到14.66;O2含量最低为4.5%;CO2的含量最高为980 cm^3/m^3;pH的变化范围从9.78上升到10.18;EC的变化范围从2.89降到1.06;1%加菌组腐熟效果最佳,与对照组相比,种子发芽指数（GI）提高24%、终点C/N与起始C/N之比（T值）降低10.2%、腐殖质在465 nm和665 nm的吸光度比值（E4/E6）降低13.2%。该研究结果可为养殖和屠宰废弃物规模化利用制备有机肥提供一定的参考。 展开更多
关键词 屠宰废弃物 高温 快速 堆肥 资源化 嗜热脂肪地芽孢杆菌
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嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1生长特性与培养条件研究 被引量：7
10
作者 任香芸 陈济琛 +2 位作者 蔡海松 林新坚 邱宏端 《生物技术》 CAS CSCD 2007年第2期65-68,共4页
目的：研究嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1的生长特性与培养条件。方法：以菌体生长量为主要评价指标,利用单因子试验与正交试验相结合的方法对影响CHB1生长的主要因素进行分析。结果：CHB1最低和最高生长温度分别为45℃和74℃,最佳培养温度为6... 目的：研究嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1的生长特性与培养条件。方法：以菌体生长量为主要评价指标,利用单因子试验与正交试验相结合的方法对影响CHB1生长的主要因素进行分析。结果：CHB1最低和最高生长温度分别为45℃和74℃,最佳培养温度为60℃;最低和最高起始生长pH值分别为6.5和9.0,最适起始pH为8.0;菌体生长到达对数期的时间为15-18h;接种量2%,装液量40mL,转速180r/min。结论：CHB1为高温菌,生长pH范围偏碱性,条件优化后总菌体浓度可达1.1×10^9CFU/mL。 展开更多
关键词 嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1 生长特性 培养条件
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嗜热脂肪地芽孢杆菌NAD激酶克隆表达及酶学性质研究 被引量：6
11
作者 侯堃 李红梅 侯立琪 《工业微生物》 CAS CSCD 2014年第6期39-44,共6页
NAD激酶能催化NAD生成NADP。本研究采用PCR技术从嗜热脂肪地芽孢杆菌基因组中获得NAD激酶基因,以pET30a(+)为表达载体、E coli BL21(DE3)为宿主菌,实现其在大肠杆菌中异源表达,并进行酶学性质研究。结果显示,嗜热脂肪地芽孢杆菌中NAD激... NAD激酶能催化NAD生成NADP。本研究采用PCR技术从嗜热脂肪地芽孢杆菌基因组中获得NAD激酶基因,以pET30a(+)为表达载体、E coli BL21(DE3)为宿主菌,实现其在大肠杆菌中异源表达,并进行酶学性质研究。结果显示,嗜热脂肪地芽孢杆菌中NAD激酶编码基因大小为816 bp,酶分子量大约为35 kD。酶学性质分析表明,来源于嗜热脂肪地芽孢杆菌的NAD激酶最适反应温度和pH分别为35℃、pH 7.5,在35℃中保温2 h后仍能保持80%左右的活性。Mn^(2+)、Ca^(2+)对该酶有较强的激活作用,在最适反应条件下该酶的比活力为4.43 U/mg。动力学性质分析结果显示NAD激酶对底物NAD催化的K_m和K_(max)分别为1.46 mmol/L和0.25μmol/(L·min)。NAD激酶在大肠杆菌的异源表达为以NAD为底物生物合成NADP提供了更多生物资源。 展开更多
关键词 嗜热脂肪地芽孢杆菌 NAD激酶 克隆表达 酶学性质
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三种DNA指纹图谱技术在菌株分型中的应用 被引量：5
12
作者 刘毅 姚粟 +4 位作者 李辉 刘洋 刘勇 刘波 程池 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期81-86,共6页
旨在通过ERIC-PCR、BOX-PCR、RAPD等技术对4株地芽孢杆菌属菌株进行DNA指纹图谱分析,找到一种适合于地芽孢杆菌属尤其是嗜热脂肪地芽孢杆菌的菌株分型方法。4株地芽孢杆菌属菌株呈现出4种不同的指纹图谱,其中ERIC-PCR的方法获得的条带... 旨在通过ERIC-PCR、BOX-PCR、RAPD等技术对4株地芽孢杆菌属菌株进行DNA指纹图谱分析,找到一种适合于地芽孢杆菌属尤其是嗜热脂肪地芽孢杆菌的菌株分型方法。4株地芽孢杆菌属菌株呈现出4种不同的指纹图谱,其中ERIC-PCR的方法获得的条带较为清晰,实验方法较为简便快捷,且能相对较好地区分不同株系;BOX-PCR的方法得到的条带相对较少,不能很好地区分同一种菌的不同株系;RAPD的方法获得的条带相对较多,区分性更高,但同时也增加了一部分工作量和成本。3种菌株分型技术均能有效的区分地芽孢杆菌属菌株,其中ERIC-PCR是一种最有效最便捷区分嗜热脂肪地芽孢杆菌不同株系的方法。 展开更多
关键词 菌株分型 ERIC-PCR BOX-PCR RAPD 嗜热脂肪地芽孢杆菌
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嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1发酵培养基的优化 被引量：4
13
作者 任香芸 蔡海松 +2 位作者 林新坚 邱宏端 陈济琛 《福建农业学报》 CAS 2007年第1期54-57,共4页
以菌体生长量和pH值作为培养基优化的指标,对嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1发酵培养基成分进行了筛选与优化。结果表明,不同碳氮源对发酵液菌数影响相差较大,最佳培养基配比为:牛肉膏、大豆蛋白胨、NaCl、K2HPO4和KH2PO4;最佳摇瓶发酵配方为:... 以菌体生长量和pH值作为培养基优化的指标,对嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1发酵培养基成分进行了筛选与优化。结果表明,不同碳氮源对发酵液菌数影响相差较大,最佳培养基配比为:牛肉膏、大豆蛋白胨、NaCl、K2HPO4和KH2PO4;最佳摇瓶发酵配方为:牛肉膏0.5%,大豆蛋白胨0.9%,NaCl 0.2%,K2HPO4∶KH2PO4为0.1%∶0.075%,该培养基中培养CHB1比在发酵基础培养基中培养菌量提高10倍以上。 展开更多
关键词 嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1 发酵培养基 优化
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嗜热脂肪地芽孢杆菌的芽孢在4种溶液中的D值比较研究
14
作者 王似锦 褚婧 马仕洪 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期131-134,153,共5页
将嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus,ATCC7953)的芽孢悬浮于不同的溶液中,采用残存曲线法测定121℃下的耐受性(D值)并进行比较。结果表明,嗜热脂肪地芽孢杆菌的芽孢在纯化水、胰酪大豆胨(TSB)液体培养基、5%葡萄糖注... 将嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus,ATCC7953)的芽孢悬浮于不同的溶液中,采用残存曲线法测定121℃下的耐受性(D值)并进行比较。结果表明,嗜热脂肪地芽孢杆菌的芽孢在纯化水、胰酪大豆胨(TSB)液体培养基、5%葡萄糖注射液和碳酸氢钠注射液中的D值分别为3.26、3.61、0.97和2.94 min。芽孢在不同介质中所表现出的耐受性不同,因此在灭菌工艺验证过程中进行生物学确认时,选择芽孢和生物指示剂应考虑芽孢在不同溶液中耐受性的差异,应根据所测定的不同D值计算初始的芽孢接种量,以得到准确的生物杀灭力,使灭菌工艺的热力学杀灭效果保持足够的冗余,从而提供足够的无菌保证水平。 展开更多
关键词 生物指示剂 嗜热脂肪地芽孢杆菌 芽孢 残存曲线法 耐热性 D值
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嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1固体发酵工艺 被引量：3
15
作者 陈济琛 任香芸 +1 位作者 蔡海松 林新坚 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期2478-2483,共6页
以菌量为指标,以麸皮、豆粕为基本发酵原料,通过单因素试验与正交试验,对嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1固体发酵培养基与培养条件进行优化。结果表明,CHB1最佳固体发酵工艺为:250mL三角瓶中装麸皮11.3g,豆粕3.7g,pH8.0磷酸缓冲液润湿混匀,含水... 以菌量为指标,以麸皮、豆粕为基本发酵原料,通过单因素试验与正交试验,对嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1固体发酵培养基与培养条件进行优化。结果表明,CHB1最佳固体发酵工艺为:250mL三角瓶中装麸皮11.3g,豆粕3.7g,pH8.0磷酸缓冲液润湿混匀,含水量50%,接种量15%(V/m),55℃,培养24h,菌量达8.12×108CFU·g-1,比优化前提高8倍以上。通过对CHB1固体发酵工艺的优化,可实现CHB1高密度培养,降低CHB1生产成本,提高其在堆肥化中的作用效果。 展开更多
关键词 嗜热脂肪土芽孢杆菌CHB1 固体发酵 菌量 工艺优化
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环介导等温扩增技术快速检测食品中的耐热芽孢菌 被引量：1
16
作者 窦明理 霍贵成 《食品科技》 CAS 北大核心 2012年第12期320-323,326,共5页
针对食品中的好热黄无氧芽孢菌、嗜热脂肪地芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌等耐热芽孢菌,以spo0A基因部分序列为靶基因,设计了一套引物,能够同时对这3种菌进行环介导等温扩增(LAMP)检测,扩增只需要60min。该法快速并具有良好的特异性,灵敏度可... 针对食品中的好热黄无氧芽孢菌、嗜热脂肪地芽孢杆菌和凝结芽孢杆菌等耐热芽孢菌,以spo0A基因部分序列为靶基因,设计了一套引物,能够同时对这3种菌进行环介导等温扩增(LAMP)检测,扩增只需要60min。该法快速并具有良好的特异性,灵敏度可达到8cfu/mL,是普通PCR的10倍。DNaseI的使用与LAMP结合,可有效降解死菌游离DNA,消除其影响。结果表明,该方法用于奶粉及罐头制品中耐热芽孢菌的检测,具有灵敏度高、特异性强、检测速度快等优点,在食品微生物检测中拥有广阔的前景。 展开更多
关键词 好热黄无氧芽孢菌 嗜热脂肪地芽孢杆菌 凝结芽孢杆菌 spo0A基因 环介导等温扩增技术 DNASEI
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地衣芽孢杆菌A1在斑点叉尾鮰肠道的定植 被引量：1
17
作者 张洪玉 王海波 +4 位作者 赵明军 焦丽亭 胡鲲 杨先乐 夏磊 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1136-1143,共8页
为研究地衣芽孢杆菌A1(Bacillus Licheniformis, Bli)在斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)肠道的定植规律,通过每周更换100%的循环水量以减少水体中的芽孢杆菌对实验的干扰,通过Co60 辐照灭菌杀灭饲料中的芽孢杆菌以消除其对实验的干扰... 为研究地衣芽孢杆菌A1(Bacillus Licheniformis, Bli)在斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)肠道的定植规律,通过每周更换100%的循环水量以减少水体中的芽孢杆菌对实验的干扰,通过Co60 辐照灭菌杀灭饲料中的芽孢杆菌以消除其对实验的干扰。采用52℃高温选择性培养肠道Bli,研究外源Bli 在肠道内的消长规律。使用嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)的芽孢作为惰性对照,通过洗涤肠壁去除非黏附菌,研究Bli 对肠粘膜的黏附。使用灭菌处理的肠内容物体外培养Bli,研究其在肠道的增殖潜能。结果显示,每周100%换水量使水体Bli 含量<1 cfu/mL。辐照灭菌使饲料Bli 含量由1.4×10^4 cfu/g 降至检出限以下。停止外源Bli 摄入后,在持续投喂无菌饲料的情况下, Bli 在斑点叉尾鮰肠内容物中的含量可维持3.3×10^2 cfu/g 左右至少42 天;在禁食情况下, 14 天后肠内容物中便无Bli 检出。Bli 对肠粘膜的黏附能力弱于惰性对照,但Bli 可以在肠内容物中生长至2.0×10^7 cfu/g。以上结果提示:在持续喂食情况下,地衣芽孢杆菌可以在斑点叉尾鮰肠道内长期定植,而禁食情况不能定植。其原因是由于地衣芽孢杆菌不能有效黏附于肠粘膜,但可以在肠内容物中增殖。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 斑点叉尾鮰 定植 细胞黏附 肠道微生物 嗜热脂肪地芽孢杆菌 Co60辐照灭菌
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嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1 Hsp33基因的克隆及结构分析 被引量：1
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作者 高丽梅 高金秀 +2 位作者 梁蔓蔓 刘妍 姚淑敏 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第11期155-159,共5页
以嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)GL-1为研究对象,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得该菌株的热休克蛋白33(Hsp 33)基因,通过ExPASy、SOPMA、Pymol等在线软件对其进行生物信息学分析。同时,考察热胁迫处理对嗜热脂... 以嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)GL-1为研究对象,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增获得该菌株的热休克蛋白33(Hsp 33)基因,通过ExPASy、SOPMA、Pymol等在线软件对其进行生物信息学分析。同时,考察热胁迫处理对嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1生长的影响,并利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)研究菌株在热胁迫中Hsp33基因的表达情况。结果表明,通过PCR扩增得到碱基长度为876 bp的Hsp33基因,该基因与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)1vzy的Hsp33基因序列相似性达到99%,其表达的蛋白质结构与Bacillus subtilis 1vzy的Hsp33蛋白具有相似的核心结构域,二者除C-末端稍有不同外,具有相同的β-折叠和α-螺旋,无卷曲螺旋。热胁迫对嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1生长具有影响,当菌株受到热胁迫时,Hsp33基因表达量增加,说明在受到热胁迫时,Hsp33蛋白作出了应激反应。 展开更多
关键词 嗜热脂肪土芽孢杆菌GL-1 热休克蛋白33 克隆 热激 结构分析
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嗜热微生物促进剩余污泥减量降解工艺优化 被引量：1
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作者 李成涛 崔倩 +2 位作者 陈娜 潘国军 赵蔚柠 《陕西科技大学学报》 CAS 2019年第4期23-28,34,共7页
以剩余污泥减量为目标,以淀粉酶和蛋白酶的活性为指标,考察了不同温度、转速及接种量下嗜热脂肪地芽孢杆菌的产酶特性.同时在最适条件下,将嗜热脂肪地芽孢杆菌接种入剩余污泥中进行降解减量,测定剩余污泥TSS、VSS、SCOD、氨氮、蛋白质... 以剩余污泥减量为目标,以淀粉酶和蛋白酶的活性为指标,考察了不同温度、转速及接种量下嗜热脂肪地芽孢杆菌的产酶特性.同时在最适条件下,将嗜热脂肪地芽孢杆菌接种入剩余污泥中进行降解减量,测定剩余污泥TSS、VSS、SCOD、氨氮、蛋白质的含量变化.结果表明,在55℃、120rpm、接种量12%的培养条件下,蛋白酶和淀粉酶活性最高,为5.64U/mL和0.051U/mL.在此培养条件下,接种嗜热脂肪地芽孢杆菌的剩余污泥的TSS溶解率达到了65.71%,较之对照的TSS溶解率高15.86%,而VSS的溶解率达到了58.18%,较对照要高16.51%;接种嗜热脂肪地芽孢杆菌处理的剩余污泥的SCOD的含量达到了3073mg/L,利于后续的厌氧生化处理;接种后污泥蛋白质含量变化呈现动态平衡,氨氮含量呈先升高后降低趋势,以上这些表明嗜热脂肪地芽孢杆菌的加入可促进剩余污泥的降解. 展开更多
关键词 嗜热脂肪地芽孢杆菌 酶活性 剩余污泥 降解 污泥减量
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牛奶中抗生素残留检测试剂盒的优化 被引量：1
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作者 陈芊汝 朱昱兴 +3 位作者 寇玲赟 李昀 陶文靖 王莹 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2021年第4期273-279,共7页
为了降低牛奶抗生素残留快速检测试剂盒的制作成本,提高试剂盒检测效率,本文通过添加表面活性剂和固体介质优化了嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)的液体发酵方法,通过添加芽孢激活剂缩短了试剂盒的检测时间。试验... 为了降低牛奶抗生素残留快速检测试剂盒的制作成本,提高试剂盒检测效率,本文通过添加表面活性剂和固体介质优化了嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)的液体发酵方法,通过添加芽孢激活剂缩短了试剂盒的检测时间。试验结果显示,添加7.5 g/L聚乙二醇(Polyethylene glycol-6000,PEG-6000)和3 g/L脱脂棉可显著提高嗜热脂肪地芽孢杆菌的芽孢产率和产量。葡萄糖、甘氨酸和次黄嘌呤的添加可明显缩短试剂盒的检测时间。当甘氨酸和次黄嘌呤的添加比例为1∶2时,试剂盒的检测时间可缩短到155 min。在检测温度65℃、加样量80μL条件下,试剂盒响应时间最短,可低至150 min。该结果明显优于三种市售试剂盒,且检测灵敏度符合国家标准要求,可用于牧场、乳品厂和食品卫生监管部门对牛奶中抗生素残留的快速检测。 展开更多
关键词 牛奶 抗生素 嗜热脂肪地芽孢杆菌 液体发酵 快速检测
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