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胆固醇7α-羟化酶基因多态性与小儿血脂的关系 被引量:2
1
作者 王程强 汪春红 张妍 《海南医学院学报》 CAS 2008年第1期6-8,11,共4页
目的:探讨胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)基因多态性与湖北儿童血脂水平的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)对216例健康儿童CYP7A1基因的A-204C基因座进行Eco31I酶切多态性分析... 目的:探讨胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)基因多态性与湖北儿童血脂水平的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)对216例健康儿童CYP7A1基因的A-204C基因座进行Eco31I酶切多态性分析,血脂测定在全自动化分析仪上进行。结果:研究人群中CYP7A1基因的3型频率分别为:AA型6.0%,AC型26.4%、CC型67.6%。AA基因型在LDL-C,TC,Lp(a)水平上均低于其他基因型,并且其差异具有显著性。CC基因型在HDL-C水平上均高于其他基因型,并且其差异具有显著性。3型在ApoA上两两之间均存在显著性差异,而在TG中无显著性差异。结论:CC基因型在研究人群中所占的比例最高,AA基因型所占的比例最小。CYP7A1的基因多态性与儿童的血脂水平存在密切的关系。 展开更多
关键词 胆固醇7α-羟化酶基因 单核苷酸多态性 血脂 儿童
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用非同位素PCR-SSCP方法检测p53基因第4外显子多态性 被引量:1
2
作者 陈艺华 张素娟 +3 位作者 董敬朋 李春德 蔡俊杰 陆药丹 《第一军医大学学报》 CSCD 1994年第2期105-107,共3页
本研究通过对比不同凝胶组成成分及电泳条件,建立了非同位素PCR-SSCP方法以检测p53基因第4外显子第72密码子的多态性。对35例正常组织DNA的研究结果显示,p53基因这位点的杂合率和纯合率分别为48.6%(CC... 本研究通过对比不同凝胶组成成分及电泳条件,建立了非同位素PCR-SSCP方法以检测p53基因第4外显子第72密码子的多态性。对35例正常组织DNA的研究结果显示,p53基因这位点的杂合率和纯合率分别为48.6%(CCC/CGC),45.7%(CGC/CGC)和5.7%(CCC/CCC).本法简单、快速,能有效地检测基因多态性,并可进一步应用于对肿瘤细胞p53基因杂合性缺失的分析。 展开更多
关键词 P53 基因 多态性 单链构型 PCR
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p53蛋白表达和基因突变在所谓肺硬化性血管瘤组织中的意义 被引量:9
3
作者 齐凤杰 张秀伟 +1 位作者 张永兴 王恩华 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第2期147-151,共5页
背景与目的所谓肺硬化性血管瘤(socalledpulmonarysclerosinghemangioma,PSH)是一种至今不能肯定其来源及性质的少见肺肿瘤。虽然目前普遍认为PSH是一种良性肿瘤,但却发现有少数PSH可发生浸润和转移。p53蛋白表达和基因突变是反映肿瘤... 背景与目的所谓肺硬化性血管瘤(socalledpulmonarysclerosinghemangioma,PSH)是一种至今不能肯定其来源及性质的少见肺肿瘤。虽然目前普遍认为PSH是一种良性肿瘤,但却发现有少数PSH可发生浸润和转移。p53蛋白表达和基因突变是反映肿瘤生物学行为的有用指标。本研究的目的是检测PSH组织中p53基因突变及p53蛋白的表达情况及其意义。方法应用免疫组化SP法、激光捕获显微切割(lasercapturemicrodissection,LCM)技术、单链构象多态性(singlestrandedconformationpolymorphism,SSCP)及DNA测序分析方法(5~8外显子)检测19例PSH中多角形细胞和表面立方细胞的p53蛋白表达和基因突变情况。结果19例PSH组织中p53蛋白阳性表达率为21.1%(4/19),SSCP及测序分析检测p53基因突变率分别为26.3%(5/19)和42.1%(8/19)。p53蛋白阳性表达的4例PSH组织,测序分析显示3例标本有突变发生,2例为错义突变,1例同时发生错义突变和移码突变;而p53蛋白阴性表达的15例PSH组织中,5例标本经测序证实亦发生了突变,4例为移码突变,1例为错义突变。在有突变的8例PSH组织中,单一多角形细胞突变5例,单一立方细胞突变2例,多角形细胞和立方细胞同时突变1例。结论PSH组织p53蛋白阳性表达并不能完全反映p53基因突变的真实情况;p53基因突变或蛋白表达异常均可发生在PSH组织中的两种不同的细胞内;p53基因的高突变率提示PSH可能具有潜在的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 所谓肺硬化性血管瘤 p53 基因突变 免疫组化 激光捕获显微切割(LCM) 单链构象多态性(sscp) 基因测序
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分离自冬虫夏草可培养真菌的多样性研究 被引量:48
4
作者 张永杰 孙炳达 +3 位作者 张姝 旺姆 刘杏忠 巩文峰 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期518-527,共10页
冬虫夏草是生长于青藏高原的一种名贵中药材。天然冬虫夏草及其微环境中生活着多种真菌。作者使用常规分离培养方法对冬虫夏草的真菌区系进行研究。从天然冬虫夏草的子座、菌核和菌膜3个部位共分离到572个真菌菌株,并根据形态特征将大... 冬虫夏草是生长于青藏高原的一种名贵中药材。天然冬虫夏草及其微环境中生活着多种真菌。作者使用常规分离培养方法对冬虫夏草的真菌区系进行研究。从天然冬虫夏草的子座、菌核和菌膜3个部位共分离到572个真菌菌株,并根据形态特征将大部分菌株鉴定到37个不同的属。这些菌株经SSCP(single-strand conformation polymorphism)分析后,再根据nrDNAITS序列的相似性(以97%为阈值)共区分出92种不同的分类单元(operational taxonomic unit,OTU)。其中,属于子囊菌的菌株数及OTU数均比接合菌和担子菌多。从菌膜分离的菌株数及OTU数都明显多于子座和菌核。分离自子座的优势真菌是产黄青霉Penicillium chrysogenum,而分离自菌核和菌膜的优势真菌均为玫红假裸囊菌Pseudogymnoascus roseus。尚未最终鉴定的部分真菌可能为新的真菌物种。 展开更多
关键词 冬虫夏草 真菌区系 形态鉴定 分子鉴定 分类单元 单链构象多态性
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ABR处理大豆蛋白废水的效能及微生物群落动态分析 被引量:16
5
作者 鲍立新 李建政 +2 位作者 昌盛 黄晓飞 任南琪 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第8期2206-2213,共8页
为考察厌氧折流板反应器(ABR)处理大豆蛋白生产废水的效能及其运行特征,采用有效容积为28 L的四格室ABR,通过为期100 d的运行,研究了基于进水COD浓度提高的有机负荷(OLR)改变对其处理效能的影响,并以真细菌的通用引物SRV3-2P和BSF8/20,... 为考察厌氧折流板反应器(ABR)处理大豆蛋白生产废水的效能及其运行特征,采用有效容积为28 L的四格室ABR,通过为期100 d的运行,研究了基于进水COD浓度提高的有机负荷(OLR)改变对其处理效能的影响,并以真细菌的通用引物SRV3-2P和BSF8/20,通过单链构象多态性(SSCP)和UPGMA群落聚类分析,对反应器运行过程中微生物菌落结构的动态变化进行了研究.结果表明,以啤酒厂二沉池排放的好氧剩余污泥为种泥,在污泥接种量MLVSS为18.0 g.L-1、进水COD浓度2 000mg.L-1、HRT 39.5 h(、35±1)℃等条件下,可在31 d内成功启动ABR并达到初步稳定运行,COD去除率达到96%左右;ABR具有较强的抗OLR冲击能力,当OLR由1.2 kg.(m3.d)-1逐步提高到6.0 kg.(m3.d)-1时,ABR仍能实现安全稳定运行,其COD去除率可以稳定在98%左右;OLR的改变,对ABR内微生物群落的结构以及不同微生物类群在各格室中的分布具有显著影响,随着OLR的逐步提高,ABR各格室微生物的遗传距离逐渐拉大,特异性随之增加,表现出显著的生物相分离特征. 展开更多
关键词 大豆蛋白废水 厌氧处理 厌氧折流板反应器(ABR) 有机负荷 微生物群落 单链构象多态性(sscp)
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猪食道口线虫ITS-1和ITS-2rDNA的PCR-SSCP分析 被引量:13
6
作者 林瑞庆 张新高 +4 位作者 胡友兰 李国清 翁亚彪 宋慧群 朱兴全 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期323-326,331,共5页
以采自我国不同地区猪体的食道口线虫虫株为研究对象,PCR扩增出ITS-1和ITS-2序列片段,然后采用单链构象多态性(SSCP)方法分析PCR产物,对不同地区食道口线虫进行分子鉴定。所有样品经SSCP分析显示两种带型,第一种为有齿食道口线虫带型,... 以采自我国不同地区猪体的食道口线虫虫株为研究对象,PCR扩增出ITS-1和ITS-2序列片段,然后采用单链构象多态性(SSCP)方法分析PCR产物,对不同地区食道口线虫进行分子鉴定。所有样品经SSCP分析显示两种带型,第一种为有齿食道口线虫带型,另一种为未定种食道口线虫带型。代表性样品的测序结果表明,未定种食道口线虫带型的样品为四棘食道口线虫。本研究在国际上首次报道了中国猪四棘食道口线虫的ITS序列,并建立了区分有齿食道口线虫和四棘食道口线虫的PCR-SSCP方法,从而为食道口线虫的分子生物学的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 食道口线虫 ITS-1 ITS-2 单链构象多态性(sscp)
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Characteristics of the microbial community in rhizosphere of Camptotheca acuminata cultured with exotic invasive plant Eupatorium adenophorum 被引量:6
7
作者 ZU YuanGang1, GAO ChongYang1, WANG WenJie1, YANG FengJian1, LIU Ying1, WANG Min1 & ZHAO YangGuo2 1 Key Laboratory of Forest Plant Ecology, Ministry of Education, Northeast Forestry University, Harbin 150040, China 2 School of Municipal and Environmental Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2007年第1期22-30,共9页
The traditional culture-dependent plate counting and culture-independent small-subunit-ribosomal RNA gene-targeted molecular techniques, Single-Strand Conformation Polymorphism (SSCP) and ter-minal Restriction Fragmen... The traditional culture-dependent plate counting and culture-independent small-subunit-ribosomal RNA gene-targeted molecular techniques, Single-Strand Conformation Polymorphism (SSCP) and ter-minal Restriction Fragment Length Polymorphism (tRFLP) combined with 16S rDNA clone library were adopted to investigate the impacts of secretion from Camptotheca acuminata (abbreviated to Ca) roots on the quantities and structure of eukaryotic microbes and bacteria in the rhizosphere, and the possi-bility that Ca controls exotic invasive plant Eupatorium adenophorum (Ea). The counting results indi-cated that the number of bacteria increased in turn in rhizospheres of Ea, Ca-Ea mixed culture and Ca, while that of eukaryotic microbes decreased. PCR-SSCP profiles showed eukaryotic microbial bands (corresponding to biodiversity) in rhizosphere of Ea were more complex than those of Ca and CE. Meristolohmannia sp., Termitomyces sp. and Rhodophyllus sp. were the dominant populations in the rhizosphere of Ca. Bacterial terminal restriction fragments (TRFs) profiles showed no difference among three kinds of rhizospheres, and the sequences of the 16S rDNA clone library from Ca rhizospheres were distributed in 10 known phyla, in which phylum Proteobacteria were the absolute dominant group and accounted for 24.71% of the cloned sequences (δ-Proteobacteria accounted for up to 17.65%), and phyla Acidobacteria and Bacteroidetes accounted for 16.47% and 10.59% of the cloned sequences, respectively. In addition, high performance liquid chromatography detected a trace amount of camp-tothecin and hydroxycamptothecin in the rhizospheric soil of Ca and CE, but examined neither camp-tothecin nor hydroxycamptothecin in rhizospheric soil of Ea. Therefore, invasion and diffusion of Ea evidently depended on distinguishing the eukaryotic community structure, but not on that of the bac-terial pattern. Ca was able to alter the eukaryotic community structure of invasive Ea by secreting camptothecin and hydroxycamptothecin into rhizospheres, and may bene 展开更多
关键词 Camptotheca acuminata rhizospheric MICROBE EUPATORIUM adenophorum single-strand conformation polymorphism (sscp) terminal Restriction Fragment Length polymorphism (tRFLP) 16S rDNA CLONE library
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宁夏地区葡萄卷叶伴随病毒遗传变异的PCR-SSCP分析 被引量:5
8
作者 李文学 吕苗苗 +3 位作者 胡丽杰 闫思远 孙牧笛 顾沛雯 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1-10,共10页
宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄卷叶病病株率较高,严重影响了酿酒葡萄产业的健康发展,但有关其病原葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaVs)的遗传变异情况则鲜有报道.利用RT-PCR技术对宁夏酿酒葡萄不同种植区的7个主栽... 宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄卷叶病病株率较高,严重影响了酿酒葡萄产业的健康发展,但有关其病原葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaVs)的遗传变异情况则鲜有报道.利用RT-PCR技术对宁夏酿酒葡萄不同种植区的7个主栽品种的GLRaV-1和GLRaV-3进行分子检测,利用SSCP技术对扩增片段进行遗传变异分析.试验结果共获得8个GLRaV-1和13个GLRaV-3的阳性样本.8个GLRaV-1分离物基于CP基因分析差异明显,可分为3类;13个GLRaV-3分离物基于RdRp基因分析差异明显,可分为3类,而基于CP和HSP70基因分析可分为2类.说明宁夏酿酒葡萄不同种植区、不同品种的GLRaV-1和GLRaV-3种群分子特性存在差异且遗传变异明显.这有助于宁夏地区酿酒葡萄GLRaVs流行学调查和分子诊断分析,为该病害的防控提供理论依据. 展开更多
关键词 葡萄卷叶伴随病毒 遗传变异 RT-PCR检测 sscp 宁夏贺兰山东麓
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鲤鱼多态性EST标记的筛选与特性分析 被引量:5
9
作者 王春艳 俞小牧 童金苟 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期207-212,共6页
表达序列标签(Expressed sequence tag,EST)标记在基因组作图和分子标记辅助育种研究中具有重要价值。筛选和开发可用于遗传作图的鲤鱼多态性EST标记,对研究鲤鱼的基因组结构、遗传多样性研究和遗传育种有重要意义。本研究根据GenBank... 表达序列标签(Expressed sequence tag,EST)标记在基因组作图和分子标记辅助育种研究中具有重要价值。筛选和开发可用于遗传作图的鲤鱼多态性EST标记,对研究鲤鱼的基因组结构、遗传多样性研究和遗传育种有重要意义。本研究根据GenBank数据库中鲤鱼EST序列设计了67对EST引物,有47对在鲤鱼基因组DNA中成功扩增得到稳定的特异性条带,经单链构象多态性(SSCP)分析,12对(25.5%)引物扩增的EST在1个鲤鱼回交家系中具有多态性,其中6个为鲤鱼功能基因,5个与斑马鱼(Danio rerio)功能基因具较高相似性,1个与斑点叉尾(Ictaluruspunctatus)功能基因具较高相似性。这些多态性的EST在鲤鱼二倍体家系和单倍体群体中的等位基因分离均符合孟德尔规律(1∶1或3∶1),单倍体中的SSCP条带数目为二倍体的二分之一。选用其中4对多态性的EST引物对洞庭湖鲤鱼进行初步群体遗传分析,结果显示基因多样性(H)为0.437,远低于微卫星标记所揭示的该群体基因多样性(接近于1)。结果表明,多态性的EST-SSCP标记尽管遗传变异性较低,但是作为来源于编码区的Ⅰ型遗传标记,在遗传作图和种群遗传适应性等研究中有较好的应用潜力。 展开更多
关键词 鲤鱼 EST标记 遗传图谱 单链构象多态性(sscp)
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2种电泳在淋巴瘤TCR-γ基因重排研究中的应用 被引量:2
10
作者 韩西群 贺莉 +1 位作者 朱梅刚 赵彤 《实用癌症杂志》 2004年第2期113-116,共4页
目的 探讨不同电泳方法在淋巴瘤T细胞受体γ(TCR γ)基因重排研究中的应用及其意义。方法 在聚合酶链式反应 (PCR )中采用T细胞受体γ基因重排通用引物 ,对 3 0例T细胞淋巴瘤和 3 0例B细胞淋巴瘤组织扩增 ,并采用琼脂糖凝胶电泳和单... 目的 探讨不同电泳方法在淋巴瘤T细胞受体γ(TCR γ)基因重排研究中的应用及其意义。方法 在聚合酶链式反应 (PCR )中采用T细胞受体γ基因重排通用引物 ,对 3 0例T细胞淋巴瘤和 3 0例B细胞淋巴瘤组织扩增 ,并采用琼脂糖凝胶电泳和单链构型多态性分析实验对扩增产物进行研究。结果  2 9例T细胞淋巴瘤扩增产物在琼脂糖电泳中为阳性 ,其中 2 7例在SSCP分析实验中为阳性。 16例B细胞淋巴瘤在琼脂糖电泳中为阳性 ,其中 3例在SSCP分析实验中阳性。所有在琼脂糖电泳中阴性的PCR产物在SSCP分析实验中也为阴性。在琼脂糖电泳中真阳性与假阳性条带有差异。结论 在TCR γ基因重排扩增产物分析中 ,琼脂糖凝胶电泳可能产生假阳性结果 ,但无假阴性 ;琼脂糖凝胶电泳中的假阳性可在SSCP实验中排除。 2种电泳方法同时应用 ,可以减少工作量 。 展开更多
关键词 淋巴瘤 T细胞受体Γ 基因重排 聚合酶链式反应 琼脂糖凝胶电泳 单链构型多态性
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抗孕激素药物敏感性与孕激素受体基因多态性关系的研究 被引量:1
11
作者 冯文华 韩维田 +5 位作者 姜淼 李学付 关长吉 王迎春 冯文霄 李建新 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期404-408,共5页
目的:研究孕激素受体基因多态性与抗孕激素药物敏感性的关系。方法:辽宁省部分地区因非意愿妊娠要求药物流产孕妇185例,根据对药物的临床反应情况将其分成正常完全流产组、敏感组、不全流产组及失败组并进行血清激素水平测定;采用PCR-S... 目的:研究孕激素受体基因多态性与抗孕激素药物敏感性的关系。方法:辽宁省部分地区因非意愿妊娠要求药物流产孕妇185例,根据对药物的临床反应情况将其分成正常完全流产组、敏感组、不全流产组及失败组并进行血清激素水平测定;采用PCR-SSCP方法筛查孕激素受体基因上具有遗传学意义的3个单核苷酸多态性位点(G1031C Ser344Thr;G1978T Leu660Val;C2310T His770His)在各组中的分布情况。结果:PCR扩增的DNA片段经变性成单链,并进行电泳后,各组显示的条带完全一致,说明3个SNP位点在各组中的分布不存在差异。结论:这3个孕激素受体基因的SNP位点在所调查的辽宁省女性中对于抗孕激素药物反应敏感性的影响没有统计学意义。 展开更多
关键词 抗孕激素制剂 孕激素受体基因 单核苷酸多态性位点(SNP) 单链构象多态性(sscp)
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生活污水人工渠自净过程及原生动物演替 被引量:1
12
作者 赵阳国 任南琪 王爱杰 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期870-873,共4页
为探讨小城镇生活污水人工渠自净的可行性及原生动物的响应过程,采用传统的生化分析方法并结合最新的基因指纹技术,对哈尔滨双城市居民生活污水水体自净过程中的水质变化以及相应的指示性原生动物的动态演替进行分析.结果表明,化学需氧... 为探讨小城镇生活污水人工渠自净的可行性及原生动物的响应过程,采用传统的生化分析方法并结合最新的基因指纹技术,对哈尔滨双城市居民生活污水水体自净过程中的水质变化以及相应的指示性原生动物的动态演替进行分析.结果表明,化学需氧量(COD)为140 mg/L的生活污水,经由约9 km的人工渠,通过沉降、化学分解、生物代谢等作用,降至40 mg/L以下,碱度逐渐从1000 mg/L下降至250 mg/L,pH从7.3上升至8.0;总磷含量由2.0 mg/L逐渐降低至1.3 mg/L.在整个过程中的原生动物种类较少,主要有草履虫属、四膜虫属和鞭毛虫属.鞭毛虫属一直是优势原生动物,草履虫属和四膜虫属在寡污带出现,最后消失.居民生活污水在人工渠中通过较长的自净流程(≥9 km)达到排放的要求,注入松花江支流拉林河. 展开更多
关键词 生活污水 水体自净 单链构象多态性(sscp) 原生动物
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我国部分地区蜱中莱姆病螺旋体的检测与基因分型研究 被引量:8
13
作者 王宏伟 何静 +6 位作者 褚宸一 张泮河 吴晓明 黄海楠 高燕 蒋宝贵 曹务春 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第2期81-85,共5页
目的对我国部分地区的多种蜱类进行莱姆病螺旋体的检测和基因分型。方法选择我国黑龙江、吉林和浙江省部分林区为调查点,采集当地蜱类,用巢式PCR法进行检测,阳性产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析和单链构象多态性(SSCP)分析,确... 目的对我国部分地区的多种蜱类进行莱姆病螺旋体的检测和基因分型。方法选择我国黑龙江、吉林和浙江省部分林区为调查点,采集当地蜱类,用巢式PCR法进行检测,阳性产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析和单链构象多态性(SSCP)分析,确定莱姆病螺旋体的基因型。结果共检测蜱512只,阳性126只,阳性率24.61%。其中吉林全沟硬蜱带菌率为37.00%,黑龙江全沟硬蜱带菌率为20.87%,浙江长角血蜱带菌率为28.07%。RFLP分析表明,蜱中莱姆病螺旋体包括B.garinii和B.afzelii两种基因型。SSCP分析显示为7种亚型,其中B.garinii分为5个亚型,B.afzelii分为2个亚型。发现有3只蜱同时感染不同基因(亚)型莱姆病螺旋体。结论证实B.garinii和B.afzelii基因型为我国莱姆病螺旋体的优势基因型,并在我国蜱中发现莱姆病螺旋体不同基因(亚)型的混合感染。 展开更多
关键词 莱姆病螺旋体 基因型 限制性片段长度多态性 单链构象多态性
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The effect of decreasing alkalinity on microbial community dynamics in a sulfate-reducing bioreactor as analyzed by PCR-SSCP 被引量:4
14
作者 REN Nanqi1, ZHAO Yangguo1, WANG Aijie1, GAO Chongyang2, SHANG Huaixiang1, LIU Yiwei1 & WAN Chunli1 1. School of Environmental and Municipal Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 150090, China 2. Key Laboratory of Forest Plant Ecology, Ministry of Education, Northeast Forestry University, Harbin 150040, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2006年第4期370-378,共9页
PCR-single-strand conformation polymorphism (SSCP) and Southern blotting tech-niques were adopted to investigate microbial community dynamics in a sulfate-reducing bioreactor caused by decreasing influent alkalinity. ... PCR-single-strand conformation polymorphism (SSCP) and Southern blotting tech-niques were adopted to investigate microbial community dynamics in a sulfate-reducing bioreactor caused by decreasing influent alkalinity. Experimental results indicated that the sulfate-removal rate approached 87% in 25 d under the conditions of influent alkalinity of 4000 mg/L (as CaCO3) and sul-fate-loading rate of 4.8 g/(L·d), which indicated that the bioreactor started up successfully. The analy-sis of microbial community structure in this stage showed that Lactococcus sp., Anaerofilum sp. and Kluyvera sp. were dominant populations. It was found that when influent alkalinity reduced to 1000 mg/L, sulfate-removal rate decreased rapidly to 35% in 3 d. Then influent alkalinity was increased to 3000 mg/L, the sulfate-removal rate rose to 55%. Under these conditions, the populations of Dysgo-nomonas sp., Sporobacte sp., Obesumbacterium sp. and Clostridium sp. got to rich, which predomi-nated in the community together with Lactococcus sp., Anaerofilum sp. and Kluyvera sp. However, when the alkalinity was decreased to 1500 mg/L, the sulfate-removal rate rose to and kept stable at 70% and populations of Dysgonomonas sp., Sporobacter sp. and Obesumbacterium sp. died out, while some strains of Desulfovibrio sp. and Clostridium sp. increased in concentration. In order to determine the minimum alkalinity value that the system could tolerate, the influent alkalinity was de-creased from 1500 to 400 mg/L secondly. This resulted in the sulfate-removal rate, pH value and ef-fluent alkalinity dropping quickly. The amount of Petrotoga sp., Prevotella sp., Kluyvera sp. and Neisseria sp. reduced obviously. The result data from Southern blotting indicated that the amount of sulfate-reducing bacteria (SRBs) decreased with influent alkalinity dropping. Analysis of the microbial community structure and diversity showed that the SRBs populations were very abundant in the in-oculated activated sludge and the alkalinity decrease caused the reduction of the p 展开更多
关键词 alkalinity community dynamics PCR-single-strand conformation polymorphism (sscp) Southern blotting sulfate-reducing BACTERIUM (SRB) fermentative acidogenic BACTERIUM (FAB).
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中国家驴TYRP1基因第二内含子多态性分析
15
作者 马晓君 苏咏梅 +3 位作者 朱文进 王茂晗 陈芝媛 赵涵 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第6期110-114,共5页
为了探究TYRP1基因对中国家驴毛色的影响,试验采集410只不同毛色中国家驴的血液样本,采用聚合酶链式反应及单链构象多态性(polymerase chain reaction and single-strand conformation polymorphism, PCR-SSCP)方法检测中国家驴TYRP1基... 为了探究TYRP1基因对中国家驴毛色的影响,试验采集410只不同毛色中国家驴的血液样本,采用聚合酶链式反应及单链构象多态性(polymerase chain reaction and single-strand conformation polymorphism, PCR-SSCP)方法检测中国家驴TYRP1基因第二内含子中的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)位点,对不同毛色中国家驴个体进行基因分型,并计算基因型频率和等位基因频率,分析TYRP1基因第二内含子多态性与中国家驴不同毛色之间的关系。结果表明:在中国家驴TYRP1基因第二内含子中检测到1个SNP位点(g.1 702A→G),该位点存在AA、AG、GG三种基因型;乌头、黑三粉、青三粉、灰三粉、白色和白化家驴的优势等位基因均为A。乌头、黑三粉和青三粉均为AA基因型频率最高,GG基因型频率最低;灰三粉为AA基因型频率最高,AG基因型频率最低(0)。在乌头、黑三粉、青三粉、灰三粉家驴中,AA基因型频率为灰三粉最高,然后依次为青三粉、黑三粉和乌头;以黑毛色为主色调的家驴(乌头、黑三粉、青三粉)GG基因型频率低于以灰毛色为主色调的家驴(灰三粉),有白毛混杂的黑三粉和青三粉的GG基因型频率低于纯黑的乌头。样本中的白色家驴和白化家驴各有2头,其基因型均为AA纯合子。说明随着中国家驴黑色被毛比例的增加,TYRP1基因g.1 702A→G位点的AA基因型频率逐渐降低,推测该位点可能与中国家驴毛色性状有关。 展开更多
关键词 中国家驴 酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)基因 第二内含子 聚合酶链式反应及单链构象多态性(PCR-sscp) 毛色
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自发性心室颤动的基因基础和分子机制 被引量:2
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作者 张丹梅 韩勇 +2 位作者 贾静 陕海丽 张建荣 《临床心电学杂志》 2003年第3期176-178,共3页
目的 通过研究心脏钠离子通道基因SCN5A的突变来了解是否离子通道的失常能够引起自发性心室颤动 (IVF) ,以帮助IVF的基因诊断和合理治疗。方法 我们用单链构型多态性 (SSCP)和DNA序列分析法对伴有IVF的六个小家系和两个散发的病人的血... 目的 通过研究心脏钠离子通道基因SCN5A的突变来了解是否离子通道的失常能够引起自发性心室颤动 (IVF) ,以帮助IVF的基因诊断和合理治疗。方法 我们用单链构型多态性 (SSCP)和DNA序列分析法对伴有IVF的六个小家系和两个散发的病人的血样 ,在已知离子通道基因 ,包括心脏钠离子通道基因SCN5A上进行了识别突变的研究。并通过测试突变通道和正常通道在卵母细胞中的电生理活动来判定突变对IVF发生机制的影响。结果 我们已经在三个IVF家族中从SCN5A密码范围内识别了一个错义突变和一个读码突变。电生理研究显示含有错义突变的钠离子通道比正常通道从静止中恢复的更快 ,而读码突变使钠离子通道失去功能。结论 我们的工作显示了伴有RBBB和ST段抬高的IVF是一种明显的综合症 。 展开更多
关键词 自发性心室颤动 分子机制 钠离子通道基因 DNA序列 电生理 SCN5A基因 单链构型多态性
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牛FSHR基因第10外显子单核苷酸多态性及其与双胎性状的关系 被引量:32
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作者 雷雪芹 陈宏 +3 位作者 袁志发 徐廷生 雷初朝 孙维斌 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期34-37,共4页
以秦川牛和荷斯坦奶牛的双胎母牛和单胎母牛为实验材料 ,以牛的FSHR基因的第 10个外显子作为标记牛双胎性状的候选基因 ,用SNP法进行了多态检测 .结果发现 ,在秦川牛的双胎母牛中突变率 6 0 % (6 10 ) ,而在单胎母牛中突变率为 2 0 % (... 以秦川牛和荷斯坦奶牛的双胎母牛和单胎母牛为实验材料 ,以牛的FSHR基因的第 10个外显子作为标记牛双胎性状的候选基因 ,用SNP法进行了多态检测 .结果发现 ,在秦川牛的双胎母牛中突变率 6 0 % (6 10 ) ,而在单胎母牛中突变率为 2 0 % (2 10 ) ;在荷斯坦奶牛中 ,双胎母牛突变率为31 2 5 % (5 16 ) ,单胎母牛突变率为 6 6 7% (1 15 ) ;由此可见双胎牛和单胎牛二者之间FSHR基因的第 10个外显子的突变率差异明显 .这表明 ,选择FSHR基因的第 10个外显子有可能作为双胎性状的候选基因 .序列分析发现 ,在FSHR基因的第 15 0 6位碱基发生了突变 (T→C) ,但氨基酸没有发生变化 . 展开更多
关键词 FSHR基因 第10外显子 单核苷酸多态性 双胎性状
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猪LPL基因多态性及其部分DNA片段的测序 被引量:17
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作者 吴珍芳 熊远著 +2 位作者 邓昌彦 蒋思文 I.HARBITZ 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期461-465,共5页
脂蛋白脂肪酶(Lipoproteinlipase,LPL) 是影响动物脂肪沉积的关键酶之一。本文利用PCRSSCP法,对猪的LPL基因进行了多态性分析,发现其5’端区域存在DNA 多态性。脂肪型猪种梅山猪和通城猪表现... 脂蛋白脂肪酶(Lipoproteinlipase,LPL) 是影响动物脂肪沉积的关键酶之一。本文利用PCRSSCP法,对猪的LPL基因进行了多态性分析,发现其5’端区域存在DNA 多态性。脂肪型猪种梅山猪和通城猪表现出3种等位基因型(AA、AB、BB) ,其等位基因A和B的频率分别为0.76、0 .24 和0.77、0 .23 ;而瘦肉型猪种长白猪和大白猪表现出另外不同的3 种等位基因型( CC、CD、DD),其等位基因C和D 的频率分别为0.76 、0 .24 和0.72、0.28 。测序结果表明具四种等位基因纯合子的DNA 片段之间存在5 处碱基突变,分别表示为等位基因AATCCT,BATTCT,CGCCCT和DGCCGC,其中等位基因D 第+ 32 处发生T/C 的突变导致亮氨酸到脯氨酸的改变(Leu→Pro) 。 展开更多
关键词 LPL 脂蛋白脂肪酶 基因多态性 DNA
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SSCP技术分析不同废水处理系统中微生物群落结构 被引量:16
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作者 赵阳国 王爱杰 +1 位作者 任南琪 赵焱 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第7期1429-1433,共5页
为研究不同废水处理系统中微生物群落结构以及认识群落结构与系统处理效能的关系,采用单链构象多态性技术(SSCP)分别对稳定运行的脱氮除磷反应器(N),中药废水处理反应器(P),啤酒废水处理反应器(W),糖蜜废水发酵制氢反应器(H)以及硫酸盐... 为研究不同废水处理系统中微生物群落结构以及认识群落结构与系统处理效能的关系,采用单链构象多态性技术(SSCP)分别对稳定运行的脱氮除磷反应器(N),中药废水处理反应器(P),啤酒废水处理反应器(W),糖蜜废水发酵制氢反应器(H)以及硫酸盐还原反应器(S)等5种废水处理系统中的微生物群落结构进行了解析.结果表明,处理同种废水且状态均一的反应器中微生物群落结构相似性最大;微生物种群多样性与废水中的有机质复杂性成正相关,中药废水由于含有较复杂的有机质成分,种群多样性最高,而人工配水的处理系统由于营养成分单一,种群多样性较低;与模式群落中微生物SSCP条带比较显示,某些功能微生物类群在整个系统中相对数量并非占优势,发酵产氢菌Ethanologenbacteriumsp.在状态良好的制氢反应器中相对含量仅占5%,而脱硫弧菌Desulfovibriosp.在硫酸盐还原反应器中的相对比例小于1.5%.SSCP指纹图谱技术能够揭示不同处理系统中微生物群落结构的差别,并对这些工艺中的部分功能微生物进行监测,进而为提高反应器的运行效果提供有益的指导. 展开更多
关键词 废水处理系统 微生物群落结构 群落多样性 单链构象多态性技术
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生物陶粒与生物活性炭上微生物群落结构的PCR-SSCP技术解析 被引量:13
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作者 刘小琳 刘文君 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第4期924-928,共5页
采用PCR-SSCP(单链构象多态性)技术,以16S rRNA基因的V4-V5区为靶对象,分析用于饮用水处理的生物陶粒和生物活性炭上的微生物群落结构.对生物陶粒和生物活性炭上的微生物分别进行超声波洗脱、R2A和LB平板培养后提取基因组DNA.结果表明,... 采用PCR-SSCP(单链构象多态性)技术,以16S rRNA基因的V4-V5区为靶对象,分析用于饮用水处理的生物陶粒和生物活性炭上的微生物群落结构.对生物陶粒和生物活性炭上的微生物分别进行超声波洗脱、R2A和LB平板培养后提取基因组DNA.结果表明,除生物活性炭超声波洗脱不能提取到DNA外,其他处理均能提取到大小在10 kb以上的基因组DNA,但所提取的量有较大差异.以提取的DNA为模板分别进行PCR,均能扩增到408 bp的基因片段.这些片段经λ核酸外切酶消化处理后进行SSCP电泳.结果显示,超声波洗脱、R2A和LB培养对试验结果影响不明显.生物陶粒的微生物基因扩增片段SSCP图谱相同,且只出现1条带.测序后与基因组数据库对比,结果显示其与uncultured Pseudomonas sp.clone FTL201 16S rDNA(GenBank登录号AF509293.1)片段同源性为92%.生物活性炭的微生物基因扩增片段SSCP图谱也相同,但有2条带.测序对比的结果表明,这2个基因片段与Bacillus sp.JH19 16S rDNA(GenBank登录号DQ232748.1)片段和Bacterium VA-S-11 16S rDNA(GenBank登录号AY395279.1)片段的同源性分别为100%和99%. 展开更多
关键词 生物陶粒 生物活性炭 微生物群落 群落结构 单链构象多态性
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