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葡萄球菌肠毒素B基因的膜片电极支撑双层类脂膜核酸传感器的研究 被引量:2
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作者 刘楠 高志贤 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期638-642,共5页
本研究用膜片电极支撑双层类脂膜(BLMs)核酸传感器,检测葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因。BLMs在膜片钳尖端形成后,传感器的检测电流大小和施加的电压成正比。通过在BLMs上固定针对SEB基因特异的直链十二烷烃链(0~273.65μg/L)修饰的单链寡... 本研究用膜片电极支撑双层类脂膜(BLMs)核酸传感器,检测葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因。BLMs在膜片钳尖端形成后,传感器的检测电流大小和施加的电压成正比。通过在BLMs上固定针对SEB基因特异的直链十二烷烃链(0~273.65μg/L)修饰的单链寡核苷酸(C12-ssDNA)探针与膜片钳系统一同构建成膜片电极支撑BLMs核酸传感器。电流大小与探针的浓度呈正相关,线性回归方程I=5.49+2.94C;相关系数r=0.9962。SEB基因浓度在20~5000μg/L范围时,检测的电流信号与SEB基因浓度的自然对数呈负相关,线性回归方程I=1103.26-103.62lnC,相关系数r=0.9977;同时,核酸传感器有很好的特异性,与不产SEB的金葡菌属、其它食物中毒菌的基因组DNA和空白对照组反应无明显电信号响应。应用原子力显微镜对BLMs表面微观结构、ssDNA固定于BLMs上和BLMs上杂交洗脱后的表面微观结构进行观察。本研究构建的膜片电极支撑BLMs核酸传感器为SEB基因的检测提供了一种快速、灵敏、特异性强的方法。 展开更多
关键词 生物传感器 双层类脂膜 膜片钳 原子力显微镜
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Study of Oligonucleotide Fixation on Bilayer Lipid Membranes by Patch-clamp Pipette Support
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作者 Nan Liu Zhixian Gao Huanying Zhou Yonghong He Mingxiang Yue 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第A03期324-326,共3页
One kind of novel BLMs was fabricated by patch-clamp pipette technology characterized in considerably sensitive to changes of electrochemical parameters.Detectiye currents and voltage presented linear relationship whe... One kind of novel BLMs was fabricated by patch-clamp pipette technology characterized in considerably sensitive to changes of electrochemical parameters.Detectiye currents and voltage presented linear relationship when BLMs was formed and it could be confirmed by Gramicidin method.Ion current was increased by dihexyl (C_ (12)) modified ssDNA fixed on the BLMs and also indicated linear relationship to ssDNA's concentration due to the interaction of (C_ 12)-ssDNA and BLMs.Further more,the regression equations were different from BLMs fixed with ssDNA probe and a blank control BLM in the same experimental conditions.The ssDNA probe was successfully fixed on patch-clamp pipette supported-BLMs.Based on our studies,a biosensor with reactive element of patch-clamp pipette-supported BLMs has been established. 展开更多
关键词 bilayer lipid membranes patch-clamp pipette OLIGONUCLEOTIDE
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膜片电极支撑双层脂膜的构建和寡核苷酸探针的固定
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作者 刘楠 周焕英 +3 位作者 高志贤 岳明祥 陈伍忠 安改红 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 2006年第4期243-246,共4页
目的对双层脂膜(Bilayer lipid membranes,BLMs)在膜片电极上的构建和十二烷基修饰的寡核苷酸(Oligonucleotide)探针在BLMs上的固定技术进行研究。方法利用膜片钳放大器系统对细胞膜上离子通道跨膜电流变化极其灵敏的特点,构建一... 目的对双层脂膜(Bilayer lipid membranes,BLMs)在膜片电极上的构建和十二烷基修饰的寡核苷酸(Oligonucleotide)探针在BLMs上的固定技术进行研究。方法利用膜片钳放大器系统对细胞膜上离子通道跨膜电流变化极其灵敏的特点,构建一种新型BLMs。调节膜片钳放大器。施加一系列电压后对不同浓度的寡核苷酸探针在BLMs上进行固定。结果双层脂膜在膜片电极上稳定构建,成膜完全稳定之后,拟合直线方程为:I(pA)=7.2153+0.0054V(mV),r=0.9908(P〈0.01),由短杆菌肽法确认了膜的形成。寡核苷酸探针质量浓度在0~273.65ng·mL^-1范围变化时,与跨膜电流呈线性关系,拟合直线方程为:I(pA):5.4853+2.9382C(ng·mL^-1),r=0.9962。施加0~180mV阶跃电压于固定有寡核苷酸探针的BINs上,拟合直线方程为:I(pA)=9.3954+15.2364V(mV),r=0.9977(P〈0.01)。结论膜片电极支撑双层脂膜成功构建并确证,寡核苷酸探针可以在膜片电极支撑双层脂膜上固定,对施加于膜上的一系列电压响应迅速,灵敏度高,稳定性和重复性良好,为构建以膜片电极支撑BLMs的生物传感器监测环境污染物奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 双层类脂膜 膜片电极 寡核苷酸
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全自动膜片钳放大器快电容补偿技术改进 被引量:2
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作者 叶燚 胡刚 瞿安连 《上海生物医学工程》 CAS 2006年第2期98-101,共4页
介绍了膜片钳放大器中快电容产生的机理,根据新的快电容电气模型设计出相应的补偿硬件电路和软件算法,并通过计算机实现自动补偿。实验结果表明,该补偿技术能够快速有效的消除快电容瞬态电流,提高实验的操作效率和数据准确性。
关键词 膜片钳 快电容 微电极 mDAC
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膜片钳系统的噪声分析 被引量:7
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作者 周专 康华光 《中国生物医学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1992年第2期128-137,共10页
本文对膜片钳记录系统的背景噪声作了较全面的分析。系统噪声包括电子仪器噪声、封接噪声和电极噪声。仪器噪声有高频噪声等四种分量。作者提出了细胞膜与电极的封接阻抗的T型网络等效模型,分析指出,高阻(GΩ量级)封接的1/f噪声不可忽... 本文对膜片钳记录系统的背景噪声作了较全面的分析。系统噪声包括电子仪器噪声、封接噪声和电极噪声。仪器噪声有高频噪声等四种分量。作者提出了细胞膜与电极的封接阻抗的T型网络等效模型,分析指出,高阻(GΩ量级)封接的1/f噪声不可忽视。电极噪声有电极电阻噪声等三种分量,涂敷硅酮树脂(Sylgard)可以有效地降低电极噪声。 展开更多
关键词 膜片钳 噪声分析 电极 电容
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通过膜片钳玻璃微电极内插管进行胞内透析 被引量:6
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作者 李国华 李之望 +2 位作者 王士端 魏劲波 郑先科 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期179-182,共4页
本文介绍了一种膜片钳微电极内插管进行胞内透析的方法。利用通用的微电极夹持器在其抽吸负压的侧管上方钻一斜孔直通夹持器中央管腔。插入由微量移液管头拉制成的细管 (外径约 0 1mm) ,后者与Ag AgCl电极一起伸出夹持器口端。通过相... 本文介绍了一种膜片钳微电极内插管进行胞内透析的方法。利用通用的微电极夹持器在其抽吸负压的侧管上方钻一斜孔直通夹持器中央管腔。插入由微量移液管头拉制成的细管 (外径约 0 1mm) ,后者与Ag AgCl电极一起伸出夹持器口端。通过相连的注射器 ,可以很方便地进行电极内液置换及胞内药物透析。此法和二次钳压技术及国外介绍的微插管电极内液置换法相比 ,更加简便易行 。 展开更多
关键词 膜片钳 微插管 微电极夹持器 电极内液置换 胞内透析
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一种对玻璃微吸管电极抛光的装置及使用方法
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作者 刘智飞 周文 +1 位作者 曾晓荣 杨艳 《泸州医学院学报》 2002年第1期80-82,共3页
目的 :对玻璃微电极尖端进行热抛光处理 ,以提高膜片钳实验中高阻抗封接的质量和成功率。方法 :用双相可控硅增加电流方法 ,完成低电压高电流输出 ;利用普通显微镜加以改造 ,在同一平面内观察电极尖端和电热丝情况。结果 :直流输出电压 ... 目的 :对玻璃微电极尖端进行热抛光处理 ,以提高膜片钳实验中高阻抗封接的质量和成功率。方法 :用双相可控硅增加电流方法 ,完成低电压高电流输出 ;利用普通显微镜加以改造 ,在同一平面内观察电极尖端和电热丝情况。结果 :直流输出电压 6V ;直流输出电流 0~ 2 0A ;4 0× (物距 1cm)物镜 ;光镜和扫描电镜观察电极尖端平整、光滑。结论 :利用简单的双相可控硅增流技术和对普通生物显微镜的改造 ,可以制做出用于玻璃微电极尖端热抛光的装置。 展开更多
关键词 细胞膜片钳 玻璃微电极 热抛光 玻璃微吸管电极抛光
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膜片电极支撑自组装双层脂膜中短杆菌肽离子通道的形成
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作者 何永红 周焕英 +2 位作者 高志贤 晁福寰 房彦军 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1243-1246,共4页
通过一个两步程序在膜片电极尖端形成自组装双层脂膜:(1)膜片电极尖端沾取成膜液;(2)将吸附成膜液的尖端浸入电解液中,排除尖端多余的成膜液,通过电学方法监测双层脂膜的形成。将短杆菌肽通道蛋白分散在成膜液和电解质溶液中,在制备膜... 通过一个两步程序在膜片电极尖端形成自组装双层脂膜:(1)膜片电极尖端沾取成膜液;(2)将吸附成膜液的尖端浸入电解液中,排除尖端多余的成膜液,通过电学方法监测双层脂膜的形成。将短杆菌肽通道蛋白分散在成膜液和电解质溶液中,在制备膜片电极支撑双层脂膜过程中,短杆菌肽重组到双层脂膜中形成离子通道,对通道的一般特性进行了研究,并观察到通道开放和关闭的现象。 展开更多
关键词 双层脂膜 膜片钳 膜片电极支撑双层脂膜 离子通道 短杆菌肽 自组装 电极 膜片 支撑 电解质溶液
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