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不同营养支持途径对烧伤大鼠肠粘膜上皮细胞周期的影响 被引量：13
1
作者 王凤君 汪仕良 +2 位作者 赵云 尤忠义 王裴 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 2002年第4期203-206,共4页
目的　探讨肠道喂养及静脉营养对烧伤早期肠粘膜上皮细胞周期的影响。　方法　 6 6只烧伤大鼠随机分为肠道喂养组 (EF组 )及静脉营养组 (PN组 ) ,分别采用灌喂和颈外静脉输入方法给予等氮、等热卡的营养液。每组设伤后 6、12、2 4、4 8... 目的　探讨肠道喂养及静脉营养对烧伤早期肠粘膜上皮细胞周期的影响。　方法　 6 6只烧伤大鼠随机分为肠道喂养组 (EF组 )及静脉营养组 (PN组 ) ,分别采用灌喂和颈外静脉输入方法给予等氮、等热卡的营养液。每组设伤后 6、12、2 4、4 8、72h 5个观察时相点 ,每时相点 6只大鼠 ,并设正常对照 (6只 )。采用流式细胞技术进行空、回肠粘膜上皮细胞周期分析 ,以Westernblot法检测肠粘膜细胞周期蛋白D1、E及细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK) 2、4的表达。　结果　 (1)肠粘膜上皮G0 /G1期细胞百分比的变化 :在空肠粘膜 ,伤后 72h时EF组明显低于PN组 (P <0 .0 5 ) ;在回肠粘膜 ,6、12、4 8、72h时EF组与PN组比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;(2 )伤后 4 8、72h时EF组S期细胞百分比均显著高于PN组 (P <0 .0 5～ 0 .0 1) ;(3)肠粘膜细胞周期蛋白D1表达的变化 :与对照值比较 ,EF组在伤后 2 4h及PN组在伤后 4 8h明显增高 (P <0 .0 5 ) ,72h时EF组显著高于PN组 (P <0 .0 5 ) ;(4)EF组肠粘膜细胞周期蛋白E的表达在伤后 72h显著高于对照值和PN组 (P <0 .0 5 ) ;(5 )PN、EF组肠粘膜CDK2的表达与对照值比较以及PN、EF两组间比较 ,差异均无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ,EF组CDK4的表达在 72h明显增高 (P <0 .0 5 )。　结论? 展开更多
关键词 营养支持途径 烧伤 肠营养 细胞周期 细胞周期蛋白类 细胞周期蛋白质依赖激酶类 肠粘膜上皮细胞 动物实验
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电化学治疗对宫颈癌细胞系细胞周期及CDK、cyclin表达的影响 被引量：10
2
作者 张玮 黎丹戎 +2 位作者 唐步坚 蒋志峰 李力 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2010年第7期502-505,509,共5页
目的:探讨不同电化学治疗剂量对肿瘤细胞生长周期的影响、细胞周期变化特点及对宫颈癌细胞系CDK和cyclin表达的影响。方法:用体外实验方法,用不同电化学剂量处理宫颈癌细胞系后分别用流式细胞仪和RT-PCR测定细胞周期分布及细胞CDK和cycl... 目的:探讨不同电化学治疗剂量对肿瘤细胞生长周期的影响、细胞周期变化特点及对宫颈癌细胞系CDK和cyclin表达的影响。方法:用体外实验方法,用不同电化学剂量处理宫颈癌细胞系后分别用流式细胞仪和RT-PCR测定细胞周期分布及细胞CDK和cyclin mRNA的表达。结果:(1)不同电化学治疗剂量组合作用后S期细胞所占比例均低于空白组,差异有统计学意义(P<0.01),但G1细胞所占比例均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.01)。G2期细胞所占比例与空白对照的差异无统计学意义(P>0.05);(2)(5V,10C)、(10V,10C)处理组cyclin D1表达阴性;(5V,5C)、(10V,5C)处理组cyclinD1表达阳性。各电化学剂量处理组CDK4、CDK1、cyclin B1表达均阳性;(3)不同电化学治疗剂量组合作用后各基因表达与G2期比例无明显相关,但cyclinD1基因表达与G1期呈负相关,与S期呈正相关。CDK1基因表达与G1期呈正相关,与S期呈负相关。结论:电化学治疗能通过调节肿瘤细胞CDK和cyclin基因的表达影响其细胞周期各时相的分布。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 细胞系 电化学治疗 细胞周期 周期素依赖性蛋白激酶 细胞周期蛋白
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Cyclin/CDK——复制前复合物途径对细胞周期的调控 被引量：6
3
作者 文川 万伍卿 《医学综述》 2007年第18期1373-1375,共3页
细胞周期蛋白(cyclin),细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK),复制前复合物(Pre-RC)是细胞周期调控的重要分子,三者形成cyclin/CDK-Pre-RC调控途径,在细胞周期中相互作用,共同完成对细胞周期的精密调控。通过对这一途径的阐释,将会推动临床研究... 细胞周期蛋白(cyclin),细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK),复制前复合物(Pre-RC)是细胞周期调控的重要分子,三者形成cyclin/CDK-Pre-RC调控途径,在细胞周期中相互作用,共同完成对细胞周期的精密调控。通过对这一途径的阐释,将会推动临床研究并开拓出更广阔的应用空间。 展开更多
关键词 细胞周期 细胞周期调控 细胞周期蛋白 细胞周期依赖性蛋白激酶 复制前复合物
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人参皂苷-Rh2诱导肿瘤细胞凋亡信号转导通路研究进展 被引量：8
4
作者 周琳 黄景嘉 罗志勇 《生命科学》 CSCD 北大核心 2010年第5期421-425,共5页
人参皂苷-Rh2诱导肿瘤细胞凋亡机制复杂,且不同机制间相互联系。它主要通过调节细胞周期蛋白依赖性激酶复合物特异性信号传递引发细胞周期阻滞诱导细胞凋亡,或通过调控细胞信号转导通路,如ROS、Ca2+、PKC、JNK介导的线粒体信号通路和TRA... 人参皂苷-Rh2诱导肿瘤细胞凋亡机制复杂,且不同机制间相互联系。它主要通过调节细胞周期蛋白依赖性激酶复合物特异性信号传递引发细胞周期阻滞诱导细胞凋亡,或通过调控细胞信号转导通路,如ROS、Ca2+、PKC、JNK介导的线粒体信号通路和TRAIL-R1(DR4)介导的死亡受体信号通路等诱导肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 人参皂苷-Rh2 肿瘤 周期蛋白依赖性激酶 信号转导通路 细胞凋亡
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健骨颗粒含药血清对大鼠成骨细胞G_1期调节蛋白的影响 被引量：7
5
作者 吴银生 林燕萍 +3 位作者 卢天祥 林煜 黄云梅 黄美雅 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期966-969,共4页
目的探讨健骨颗粒含药血清对成骨细胞G_1期调节蛋白的影响。方法采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以生理盐水大鼠血清为对照,运用流式细胞术检测成骨细胞增殖周期,免疫细胞化学法、RT-PCR法检测成骨细胞G_1期调节... 目的探讨健骨颗粒含药血清对成骨细胞G_1期调节蛋白的影响。方法采用酶消化法培养SD大鼠成骨细胞,健骨颗粒含药血清干预,以生理盐水大鼠血清为对照,运用流式细胞术检测成骨细胞增殖周期,免疫细胞化学法、RT-PCR法检测成骨细胞G_1期调节蛋白细胞周期蛋白(Cyclin)D1、CDK4、P21表达。结果 20%健骨颗粒含药血清能推进成骨细胞增殖周期进程,促进其增殖;成骨细胞核中存在Cyclin D1、CDK4、P21等蛋白表达;与生理盐水血清比较,健骨颗粒含药血清干预24、48、72 h均能提高成骨细胞CyclinD1、CDK4蛋白及mRNA表达(P<0.05或P<0.01),而降低P21表达(P<0.05,P<0.01)。结论健骨颗粒含药血清能从mRNA及蛋白层面上提高体外培养成骨细胞Cyclin D1、CDK4表达,抑制负性调节因子p21的表达,调节G_1期调节蛋白,促进成骨细胞增殖。 展开更多
关键词 成骨细胞 细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白质依赖激酶 癌基因蛋白P21 健骨颗粒
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Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响 被引量：7
6
作者 王超 刘玉 +3 位作者 安然 赵京山 孙佳欢 李爱英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期376-381,共6页
目的观察Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及细胞周期的影响。方法组织贴块法培养大鼠VSMC细胞,采用TNF-α诱导其增殖,加入不同浓度的Roscovitine预处理15 h,将细胞分为:对照组、TNF-α组、Roscovitine 5、10、15... 目的观察Roscovitine对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及细胞周期的影响。方法组织贴块法培养大鼠VSMC细胞,采用TNF-α诱导其增殖,加入不同浓度的Roscovitine预处理15 h,将细胞分为:对照组、TNF-α组、Roscovitine 5、10、15、30μmol·L^(-1)组。MTT比色法检测细胞增殖活性;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA);流式细胞仪检测细胞周期;荧光定量RT-PCR及Western blot检测细胞周期蛋白(Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4、CDK5)、细胞周期抑制蛋白(p53、p21、p27)的表达。结果 Roscovitine能抑制VSMC增殖;抑制细胞周期从G_0/G_1期向S期转化。与TNF-α组比较,Roscovitine 5、10、15、30μmol·L^(-1)组能降低细胞周期蛋白Cyclin A、Cyclin B、Cyclin D、Cyclin E蛋白表达,降低细胞周期蛋白依赖激酶CDK4、CDK5蛋白表达,升高细胞周期抑制蛋白p53、p21、p27蛋白表达(P<0.05)。结论 Roscovitine可抑制大鼠VSMC细胞周期进程及增殖活性。 展开更多
关键词 ROSCOVITINE 血管平滑肌细胞 增殖 细胞周期 细胞周期蛋白 细胞周期蛋白依赖性激酶 细胞周期抑制蛋白
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F10基因沉默及过表达对绒癌细胞系JAR细胞周期的影响 被引量：7
7
作者 杨金娣 庞战军 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期351-355,共5页
目的探讨F10基因功能与部分细胞周期蛋白表达的关系。方法选择已建立并筛选的F10基因沉默、稳定过表达绒癌细胞系JAR,以未处理JAR细胞为对照组,采用流式细胞仪检测细胞周期,Western blotting及免疫荧光细胞化学技术检测细胞周期蛋白(cyc... 目的探讨F10基因功能与部分细胞周期蛋白表达的关系。方法选择已建立并筛选的F10基因沉默、稳定过表达绒癌细胞系JAR,以未处理JAR细胞为对照组,采用流式细胞仪检测细胞周期,Western blotting及免疫荧光细胞化学技术检测细胞周期蛋白(cyclin)和细胞周期蛋白依赖激酶(CDKs)的表达水平差异。结果流式细胞仪检测细胞周期显示,F10过表达组的JAR细胞细胞周期较沉默组及未处理组缩短。Western blotting检测结果显示,在F10沉默组、未处理组及F10过表达组的JAR细胞中cyclinA2、cyclinB1、cyclinD1、cyclinE、CDK2、CDK6、CDK7表达递增,过表达组及沉默组的蛋白表达水平与未处理组相比较差异有统计学意义(P<0.05),CDK4除外。免疫荧光细胞技术实验结果与Western-Blot检测结果基本一致。结论 F10基因通过上调细胞周期蛋白cyclinA2、cyclinB1、cyclinD1、cyclinE、CDK2、CDK6、CDK7的表达,加快细胞周期进程,促进细胞增殖,从而参与调节绒癌细胞的侵袭与转移。 展开更多
关键词 绒癌 F10基因 细胞周期蛋白 CDKS JAR细胞系
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葛根粗提物和葛根素对小细胞肺癌H446细胞肿瘤相关蛋白表达水平的影响 被引量：4
8
作者 张蕾 李娟 +3 位作者 余增丽 何岭 陈萍萍 韩萍 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第6期20-22,共3页
目的探讨葛根粗提物(CP)及葛根素(SP)对人小细胞肺癌H446细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Fas、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK2)、CDK4和p27蛋白表达水平的影响。方法应用免疫组化法检测空白对照组(CO组)、CP组及SP组H... 目的探讨葛根粗提物(CP)及葛根素(SP)对人小细胞肺癌H446细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Fas、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK2)、CDK4和p27蛋白表达水平的影响。方法应用免疫组化法检测空白对照组(CO组)、CP组及SP组H446细胞中PCNA、Fas及CDK2表达水平,流式细胞仪检测三组CyclinD1、CDK4和p27蛋白表达水平。结果CP组PCNA、CDK2、CDK4表达水平显著低于CO组(P均<0.05),CyclinD1表达水平显著低于CO组和SP组(P均<0.05),Fas和p27蛋白表达水平显著高于CO组和SP组(P均<0.05);SP组CDK2、CDK4、CyclinD1表达水平显著低于CO组(P均<0.05),Fas和p27蛋白表达水平显著高于CO组(P均(0.05)。结论CP及SP可能抑制H446细胞的增殖,促进其凋亡;CP较SP作用显著。 展开更多
关键词 葛根粗提物 葛根素 增殖细胞核抗原 Fas 细胞周期蛋白 细胞周期蛋白依赖激酶 p27
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小麦条锈菌PsCdc2基因的克隆及在条锈菌侵染小麦后的转录表达分析 被引量：4
9
作者 代西维 郭军 +5 位作者 陈玥颖 段迎辉 夏宁 魏国荣 黄丽丽 康振生 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期174-181,共8页
【目的】克隆小麦条锈菌细胞分裂基因PsCdc2,分析该基因在条锈菌接种小麦后不同时间点的表达特征。【方法】利用PCR和RT-PCR技术克隆PsCdc2的cDNA序列和基因组序列,采用生物信息学技术预测分析该基因编码蛋白的保守结构域及基本特性,对... 【目的】克隆小麦条锈菌细胞分裂基因PsCdc2,分析该基因在条锈菌接种小麦后不同时间点的表达特征。【方法】利用PCR和RT-PCR技术克隆PsCdc2的cDNA序列和基因组序列,采用生物信息学技术预测分析该基因编码蛋白的保守结构域及基本特性,对该蛋白进行系统发育分析,构建进化树;运用实时荧光定量RT-PCR技术,以PsCdc2在夏孢子时期的表达情况为对照,分析该基因在亲和及非亲和互作中不同时间点的表达特征。【结果】PsCdc2基因组序列长2279 bp,由11个外显子和10个内含子构成,开放阅读框为885 bp,编码294个氨基酸,分子量为33.14 kDa,等电点为6.26。编码蛋白含两个保守的激酶特征位点,一个跨膜螺旋区域。PsCdc2基因编码蛋白与小麦秆锈菌、新型隐球菌、玉米瘤黑粉菌等多种真菌的Cdc2高度相似,其中与小麦秆锈菌的Cdc2亲缘关系最近,序列相似性达73.1%。实时荧光定量RT-PCR结果表明,在亲和组合中,该基因在条锈菌接种小麦的前期上调表达,其中接种后12 h时表达量最高,约为夏孢子中表达量的1.62倍,接种后24-268 h,基因表达基本呈下调趋势,其中96 h基因表达量最低,仅为夏孢子时期的0.07倍。在非亲和组合中,该基因表达基本呈下调趋势,在接种后各个时间点的表达量均低于在夏孢子中的表达量,其中接种后12 h时表达量最高,但仅为夏孢子中表达量的0.34倍;接种后96 h表达量最低,为夏孢子中表达量的0.02倍。【结论】PsCdc2可能通过调控条锈菌的细胞周期循环参与了侵染前期初生菌丝生长和吸器母细胞的形成,与条锈菌的致病性相关。本文首次报道了小麦条锈菌的Cdc2基因,为进一步揭示条锈菌细胞周期调控的本质及研究开发靶向Cdc2的新型农药,以及实现对小麦条锈病的新型药剂防治提供了理论基础。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白依赖性激酶 细胞分裂基因2 进化树 实时定量PCR
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预先服用灵芝孢子降低维甲酸诱导的孕鼠胚胎神经管畸形发生率 被引量：6
10
作者 张伟 曾园山 +2 位作者 熊轶 陈穗君 钟志强 《中西医结合学报》 CAS 2006年第4期368-373,共6页
目的探讨预先服用灵芝孢子能否降低维甲酸诱导的胚胎神经管畸形的发生率。方法将胚胎(embryo,E)0d孕鼠随机分为正常对照组、溶剂组、模型组和灵芝孢子组,每组5只。灵芝孢子组孕鼠于E0d起即给予胃饲灵芝孢子溶液,溶剂组孕鼠胃饲等量溶剂... 目的探讨预先服用灵芝孢子能否降低维甲酸诱导的胚胎神经管畸形的发生率。方法将胚胎(embryo,E)0d孕鼠随机分为正常对照组、溶剂组、模型组和灵芝孢子组,每组5只。灵芝孢子组孕鼠于E0d起即给予胃饲灵芝孢子溶液,溶剂组孕鼠胃饲等量溶剂。至E7.75d时,模型组和灵芝孢子组孕鼠一次性胃饲全反式维甲酸。E10.5d时取孕鼠胚胎,计算神经管畸形发生率及测量胚胎顶臀距。采用免疫荧光组织化学染色和流式细胞术检测胚胎神经管神经上皮细胞巢蛋白的表达及细胞周期分布,采用DNA定量荧光染色及RT-PCR技术检测胚胎神经管细胞周期素依赖性蛋白激酶2(cyclin-dependentkinase2,Cdk2)和Cdk4mRNA的转录水平。结果孕鼠胚胎神经管畸形发生率模型组为79.41%,灵芝孢子组为21.67%;顶臀距模型组为(3.62±1.27)mm,灵芝孢子组为(5.84±0.92)mm。胚胎神经管神经上皮细胞巢蛋白表达阳性率模型组为32.44%,灵芝孢子组为77.65%。模型组孕鼠胚胎神经管神经上皮细胞G0/G1期比例为82.80%,灵芝孢子组为53.74%。灵芝孢子组Cdk4mRNA转录水平高于正常对照组和溶剂组,但未检测到Cdk2mRNA。结论预先服用灵芝孢子能够降低维甲酸诱导的孕鼠胚胎神经管畸形的发生率。 展开更多
关键词 神经管畸形 灵芝孢子 维甲酸 巢蛋白 细胞周期素依赖性蛋白激酶
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细胞周期蛋白依赖性激酶11在乳腺癌组织中的表达及临床意义 被引量：6
11
作者 周玉冰 殷德涛 +5 位作者 李朵璐 韩超 李峰 安琪 张晓坚 阚全程 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期639-642,共4页
目的检测细胞周期蛋白依赖性激酶11（CDK11）在乳腺癌组织中的表达，探讨CDK11的表达在乳腺癌病情评估、预后判断中的临床意义。方法Westernblot方法检测BT-474、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468乳腺癌细胞株及HBL-100永生化的正常乳腺... 目的检测细胞周期蛋白依赖性激酶11（CDK11）在乳腺癌组织中的表达，探讨CDK11的表达在乳腺癌病情评估、预后判断中的临床意义。方法Westernblot方法检测BT-474、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468乳腺癌细胞株及HBL-100永生化的正常乳腺细胞中CDK11的表达，应用细胞免疫荧光技术检测MCF-7和MDA—MB-468细胞中CDK11的表达及亚细胞定位。应用Westernblot方法检测18例乳腺癌组织标本及对应的癌旁组织标本中CDK11的表达。应用商品化的乳腺癌组织芯片，免疫组织化学技术检测组织芯片中每个组织中CDK11的表达，并分析CDK11的表达水平与肿瘤病理分级、TNM分期等临床病理特征及患者生存时间的关系，探讨CDK11的临床意义。结果CDK11在BT-474、MCF-7、MDA—MB-231和MDA．MB-468细胞中的相对表达强度分别为0．95±0．03、0．83±0．02、0．39±0．07和0．91±0．03，均明显高于永生化的正常乳腺细胞的0．07±0．01（P〈0．01）。细胞免疫荧光染色结果显示CDK11在MCF-7和MDA—MB-468细胞中的表达主要定位于细胞核，在细胞质中有少量表达。组织芯片检测结果显示，CDK11在乳腺癌组织中的表达水平显著高于对应的正常乳腺组织（3．56分比2．56分，P〈0．01），病理学分级Ⅲ级乳腺癌组织中CDK11的表达水平高于Ⅱ级乳腺癌组织（3．50分比2．59分，P〈0．05）。CDK11高表达（≥4分）的乳腺癌患者的生存时间小于CDK11低表达（≤3分）的患者（P〉0．05）。此外，TNMⅢ期乳腺癌组织中CDK11的表达水平高于TNM11期乳腺癌组织（3．25分比2．92分，P〉0．05），死亡患者乳腺癌组织中CDK11的表达水平高于存活患者（3．57分比2．97分，P〉0．05），但差异无统计学意义。结论CDK11在乳腺癌组织中高表达，并与乳腺癌患者的临床病理特征及预后相关。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白依赖性激酶11 乳腺癌 组织芯片 生存时间
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细胞周期蛋白在精子发生过程中的作用 被引量：5
12
作者 蔡滨 孙大林 +1 位作者 邓伟民 金保方 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期168-171,共4页
精子发生是一个复杂而又精确的生殖细胞分化的过程,它经历了精原细胞有丝分裂、精母细胞减数分裂和精子形成3个阶段。这一过程受许多因素的调控,其中细胞周期蛋白的调节起着决定性作用。细胞周期蛋白通过与相应的细胞周期蛋白依赖激酶... 精子发生是一个复杂而又精确的生殖细胞分化的过程,它经历了精原细胞有丝分裂、精母细胞减数分裂和精子形成3个阶段。这一过程受许多因素的调控,其中细胞周期蛋白的调节起着决定性作用。细胞周期蛋白通过与相应的细胞周期蛋白依赖激酶结合形成具有蛋白激酶活性的异源二聚体复合物,磷酸化多种蛋白,推动细胞周期各时相的有序进行。近年来研究发现,细胞周期蛋白A、B、D、E在精子发生的调控中扮演着重要角色,本文综述了这4种细胞周期蛋白在调控精子发生中的作用。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白 细胞周期蛋白依赖激酶 精子发生
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Intermedin预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤修复过程中细胞周期蛋白表达的影响 被引量：4
13
作者 褚宇东 李荣山 +1 位作者 乔晞 孙秀丽 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期541-545,共5页
目的观察Intermedin（IMD）预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）修复过程中细胞周期蛋白（cyclin）D1、cyclinE以及其依赖性激酶（CDKs）表达的影响，从而探讨IMD在这一过程中促进肾组织再生修复的作用机制。方法健康雄性Wistar大鼠... 目的观察Intermedin（IMD）预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）修复过程中细胞周期蛋白（cyclin）D1、cyclinE以及其依赖性激酶（CDKs）表达的影响，从而探讨IMD在这一过程中促进肾组织再生修复的作用机制。方法健康雄性Wistar大鼠共144只，体质量180-220g，随机分为对照组、IRI组、转空质粒组、转IMD组，每组36只。IRI组切除右肾后钝性分离左侧腹主动脉及肾动脉；转空质粒组、转IMD组大鼠切除右肾后，在六氟化硫微泡（声诺维）介导下将空质粒及IMD质粒转染入左肾；1周后分别制作肾脏IRI模型。每组于再灌注第1、2、3、4、7、14天时各取6只留取肾组织标本。检测各组肾组织中cyclinD1与CDK4，cyclinE与CDK2的表达。统计学处理采用单因素方差分析和t检验。结果IRI组cyclinD1、cyclinE以及CDK4．CDK2于再灌注后第1、2、3、4、7天表达逐渐增高，第7天时到达最高峰，第14天时仍有少量表达，与对照组比较差异有统计学意义（F值=54．92，69．60，61．28，77．38，P均〈0．05）。转IMD组上述指标在第1天即开始显著增高，第2、3、4、7天呈进行性下降，至第14天时恢复正常，与IRI组相比差异具有统计学意义（F值=54．92，69．60，61．28，77．38，P均〈0．05）；转空质粒组与IRI组以上指标差异无统计学意义。结论IMD预处理在大鼠肾脏缺血再灌注损伤后早期能使cvclinDl、cyclinE以及CDK4、CDK2的表达明显上调，这一机制可能促进细胞周期进展从而加快肾组织再生修复。 展开更多
关键词 再灌注损伤 细胞周期蛋白类 细胞周期蛋白质依赖激酶类 再生 肾脏 INTERMEDIN
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周期蛋白依赖性激酶2对小鼠神经母细胞瘤免疫微环境的影响
14
作者 许雅丽 李笃妙 +1 位作者 吴强 林俊山 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期379-387,共9页
目的探讨周期蛋白依赖性激酶(CDK2)对小鼠神经母细胞瘤免疫微环境的影响。方法评估CDK2抑制剂PF-07104091对皮下MYCN阴性神经母细胞瘤细胞SH-EP在C57BL/6N WT小鼠体内肿瘤生长的影响。评估CDK2稳定敲低MYCN的阴性神经母细胞瘤细胞在C57B... 目的探讨周期蛋白依赖性激酶(CDK2)对小鼠神经母细胞瘤免疫微环境的影响。方法评估CDK2抑制剂PF-07104091对皮下MYCN阴性神经母细胞瘤细胞SH-EP在C57BL/6N WT小鼠体内肿瘤生长的影响。评估CDK2稳定敲低MYCN的阴性神经母细胞瘤细胞在C57BL/6N WT小鼠体内的成瘤能力。评估CDK2抑制剂或者敲低CDK2对MYCN阴性神经母细胞瘤细胞增殖水平和凋亡水平的影响。探索CDK2抑制剂或者敲低CDK2是否影响MYCN阴性神经母细胞瘤免疫微环境。结果PF-07104091显著抑制MYCN阴性神经母细胞瘤生长并增加小鼠总生存率。CDK2敲低能够显著抑制肿瘤生长并增加小鼠总生存率。CDK2抑制剂或者敲低CDK2并不影响MYCN阴性神经母细胞瘤细胞的增殖水平和凋亡水平。CDK2抑制剂或者敲低CDK2的MYCN阴性神经母细胞瘤中观察到的CD3+T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞和DC细胞的比例显著升高。CDK2抑制剂处理或者敲低CDK2后,MYCN阴性神经母细胞瘤中IFN-γ的水平上升,并且IFN-γ通路中的关键基因IFNB1、STAT1、TLR3、DDX58、CCL17、TAP1、TX2表达上调。腹腔注射或不注射CDK2抑制剂PF-07104091并不影响IFNGR1^(-/-)小鼠的生长速度和生存率。敲低与未敲低CDK2的MYCN阴性神经母细胞瘤在IFNGR1^(-/-)小鼠身上生长肿瘤的速度相似并且生存率相似。结论CDK2通过IFN-γ通路影响肿瘤免疫微环境中CD3+T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞和DC细胞的比例。 展开更多
关键词 周期蛋白依赖性激酶 神经母细胞瘤 肿瘤免疫微环境 干扰素
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CDK4/6对急性白血病细胞增殖及凋亡的影响 被引量：4
15
作者 周俊 单慧蓉 +4 位作者 王小龙 华明军 冯占荣 曹江 徐开林 《江苏医药》 CAS 2017年第17期1209-1212,共4页
目的探讨细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4/6对急性白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法用CDK4/6抑制剂PD0332991 0.01、0.1、1、10和20μmol/L处理急性白血病细胞U937及RS4;11,24、48h后CCK-8法检测细胞增殖情况。U937细胞(实验U组)和RS4;1... 目的探讨细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4/6对急性白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法用CDK4/6抑制剂PD0332991 0.01、0.1、1、10和20μmol/L处理急性白血病细胞U937及RS4;11,24、48h后CCK-8法检测细胞增殖情况。U937细胞(实验U组)和RS4;11细胞(实验R组)分别加入PD0332991 1μmol/L和5μmol/L;另取正常细胞为对照组(对照U组、对照R组)。流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,实时定量PCR检测Bax、Bcl-2、X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、CDK2、CDK6、Caspase-3mRNA表达。结果处理24h和48h后,U937和RS4;11细胞增殖率随药物浓度的增加而降低(P<0.05),且48h后细胞增殖率下降更明显(P<0.05)。与相应的对照组相比,实验U组和实验R组细胞凋亡率增加(P<0.05);G0/G1期细胞增加,而S期和G2/M期细胞减少(P<0.05);处理24h后Bax、Caspase-3mRNA表达升高,而Bcl-2、XIAP、CDK2、CDK6mRNA表达减少(P<0.05)。结论抑制CDK4/6的表达能减少急性白血病细胞增殖及促进细胞凋亡;其机制可能与Bax和Caspase-3表达上调以及Bcl-2、XIAP、CDK2、CDK6表达下调有关。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白依赖性激酶 急性白血病 增殖 凋亡
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类黄酮CDKs抑制剂的合成及其抗肿瘤活性的研究(Ⅰ) 被引量：4
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作者 李艳玲 方浩 徐文方 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期20-22,共3页
目的寻找活性更好的类黄酮细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)抑制剂。方法利用查尔酮路线合成了9个类黄酮。结果目标化合物的结构经IR、1HNMR、质谱确证,并测定了化合物对CDK1的抑制活性以及对HCT116的体外抗肿瘤活性。结论有5个化合物对CDK... 目的寻找活性更好的类黄酮细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)抑制剂。方法利用查尔酮路线合成了9个类黄酮。结果目标化合物的结构经IR、1HNMR、质谱确证,并测定了化合物对CDK1的抑制活性以及对HCT116的体外抗肿瘤活性。结论有5个化合物对CDKs的抑制活性高于对照Flavopiridol,所有化合物对HCT116均显示较强的抑制活性。 展开更多
关键词 查尔酮 类黄酮 细胞同期蛋白依赖性激酶 CDKs抑制活性 抗肿瘤活性
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周期素依赖激酶抑制剂对大鼠局灶性脑梗死后胶质增生的影响 被引量：3
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作者 张梁 毛善英 +1 位作者 王伟 阮旭中 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期236-238,共3页
目的　通过抑制细胞周期素依赖激酶 (cyclin dependentkinase ,CDKs) ,对星形胶。质细胞增殖进行干预 ,以探讨其对胶质增生的影响。方法　建立大鼠大脑中动脉阻塞 (middlecerebralarteryocclusion ,MCAO)再灌流模型 ,随机分为脑缺血对... 目的　通过抑制细胞周期素依赖激酶 (cyclin dependentkinase ,CDKs) ,对星形胶。质细胞增殖进行干预 ,以探讨其对胶质增生的影响。方法　建立大鼠大脑中动脉阻塞 (middlecerebralarteryocclusion ,MCAO)再灌流模型 ,随机分为脑缺血对照组和干预组 (分别于再灌流后第 3天、第 5天腹腔注射CDKs抑制剂 ) ,应用免疫印迹和免疫组织化学方法检测各组MCAO后第 4周损伤侧皮层胶质纤维酸性蛋白 (glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP)的表达 ;并通过HE染色对皮层中风囊体积进行测定 ,观察CDKs抑制剂对胶质增生的影响。结果　MCAO后第 4周 ,皮层可形成明显的中风囊 ,并且在胶质瘢痕附近存在密集、活化的星形胶质细胞 ;损伤侧皮层GFAP蛋白的表达明显增强。经给予CDKs抑制剂处理后 ,可明显缩小中风囊体积 (P <0 0 5 ) ,并部分抑制了GFAP蛋白的表达 (P <0 0 5 )以及星形胶质细胞的过度增殖。结论　通过对细胞周期蛋白的调控 ,可部分抑制胶质增生 ,从而有可能为神经再生和功能重建提供更有利的生存环境。 展开更多
关键词 周期素依赖激酶抑制剂 大鼠 局灶性脑梗死 胶质增生 细胞周期
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褪黑素通过下调细胞周期蛋白及其激酶的表达抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖 被引量：4
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作者 刘立峰 潘玉涛 +4 位作者 陈涤 李侠 刘养洲 普星宇 李增春 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期131-135,共5页
目的探讨高浓度褪黑素抑制人骨肉瘤细胞系MG-63细胞增殖的潜在机制。方法在体外培养的MG-63细胞中,外源性加入4 mmol/L浓度褪黑素,分别用Western blotting和实时PCR方法检测高浓度褪黑素对细胞周期蛋白(cyclins)及其依赖性激酶(CDK)蛋白... 目的探讨高浓度褪黑素抑制人骨肉瘤细胞系MG-63细胞增殖的潜在机制。方法在体外培养的MG-63细胞中,外源性加入4 mmol/L浓度褪黑素,分别用Western blotting和实时PCR方法检测高浓度褪黑素对细胞周期蛋白(cyclins)及其依赖性激酶(CDK)蛋白和m RNA水平表达的影响。结果 Western blotting和实时PCR检测结果显示,4 mmol/L浓度的褪黑素以时间依赖性方式显著地下调了与细胞周期G_1期进展有关的cyclin D1和CDK4蛋白和m RNA表达水平,与细胞周期G_2/M期进展有关的cyclin B1和CDK1蛋白和m RNA表达水平,但与G_1/S期转变和S期进展有关的cyclin E、CDK2和cyclin A蛋白和m RNA表达水平没有变化。结论褪黑素以时间依赖性方式,通过诱导细胞周期停滞抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖,这种抑制效应与cyclin D1和CDK4及cyclin B1和CDK1的表达下调有关。 展开更多
关键词 褪黑素 骨肉瘤 细胞周期蛋白 细胞周期蛋白依赖性激酶
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沉默INK4基因座中反义非编码RNA对人宫颈癌细胞株HeLa增殖的影响及其机制 被引量：4
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作者 梅奇华 杨鸿雁 +3 位作者 时黔宇 李琼 王卓 赵鸿 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第35期12-14,共3页
目的观察沉默INK4基因座中反义非编码RNA(ANRILA)对人宫颈癌细胞株He La增殖的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期He La细胞分为观察组和对照组,分别ANRIL-siRNA、对照siRNA乱序。转染24、48 h时采用CCK-8法观察两组细胞增殖情况(结果... 目的观察沉默INK4基因座中反义非编码RNA(ANRILA)对人宫颈癌细胞株He La增殖的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期He La细胞分为观察组和对照组,分别ANRIL-siRNA、对照siRNA乱序。转染24、48 h时采用CCK-8法观察两组细胞增殖情况(结果以OD450表示)。转染48 h时采用荧光定量PCR法检测两组细胞ANRIL、p21、周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)mRNA相对表达量,采用CHIP实验观察两组细胞p21基因H3K27位点三甲基化状态。结果转染24 h观察组、对照组OD450分别为0.55±0.08、0.84±0.11,转染72 h观察组、对照组OD450分别为1.21±0.12、1.82±0.14。转染24、72 h观察组OD450均低于对照组(P<0.05)。转染48 h观察组ANRIL及CDK6、CDK2 mRNA相对表达量低于对照组(P均<0.05),p21 mRNA相对表达量高于对照组(P均<0.05)。转染48 h两组细胞p21基因H3K27位点三甲基化水平观察组、对照组分别为1.19±0.08、5.62±0.21,观察组低于对照组(P<0.05)。结论沉默ANRIL可抑制宫颈癌He La细胞的增殖。其机制是沉默ANRIL可以降低宫颈癌He La细胞p21基因H3K27位点三甲基化水平,促进p21mRNA表达,抑制CDK6、CDK2 mRNA表达,从而抑制宫颈癌He La细胞增殖。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 宫颈癌 长链非编码RNA INK4基因座中反义非编码RNA 细胞增殖 p21基因 周期蛋白依赖性激酶 甲基化
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3D-QSAR和分子对接研究吲哚咔唑类细胞周期蛋白激酶抑制剂的选择性 被引量：3
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作者 孙倪悦 陆涛 +3 位作者 陈亚东 郝兰虎 许岩 李瑞君 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第4期645-654,共10页
细胞周期蛋白激酶(cyclin-dependent kinases,CDKs)是近年来治疗肿瘤的重要靶标.由于大多数激酶ATP结合位点的保守性,CDK选择性激酶抑制剂的开发成为当前的研发难点和热点.针对吲哚咔唑类CDK抑制剂,我们采用比较分子力场分析方法(CoMFA... 细胞周期蛋白激酶(cyclin-dependent kinases,CDKs)是近年来治疗肿瘤的重要靶标.由于大多数激酶ATP结合位点的保守性,CDK选择性激酶抑制剂的开发成为当前的研发难点和热点.针对吲哚咔唑类CDK抑制剂,我们采用比较分子力场分析方法(CoMFA)建立了CDK2-QSAR(quantitative structure-activity relationship)和CDK4-QSSR(quantitative structure-selectivity relationship)模型.所建模型的交叉验证系数q2分别为0.722和0.703;非交叉验证系数r2分别为0.977和0.946,表明其具有较好的预测能力.同时,用分子对接的方法分析了这类化合物与CDK4同源模建结构的作用模式,根据这两个模型发现,吲哚咔唑类化合物的R5和R6位长链取代对CDK4的选择性具有一定的影响,而且结合其作用模式比较合理地解释了这类抑制剂的选择性原因,这对CDKs的选择性研究具有一定的指导意义. 展开更多
关键词 细胞周期蛋白激酶 吲哚咔唑衍生物 3D-QSAR 3D-QSSR 比较分子力场分析方法 分子对接
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