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嗜水气单胞菌和河弧菌二联疫苗对鲫的免疫效果 被引量:14
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作者 李爱华 吴玉深 +1 位作者 蔡桃珍 卢全章 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期52-56,共5页
在采用正交试验设计优化了 Aeromonas hydrophila和 Vibrio fluvialis二联全菌疫苗制备工艺的基础上 ,研究了采用该工艺所制备的疫苗对鲫的免疫保护效果。结果表明注射免疫鲫4周后 ,抗 A.hydrophila和 V.fluvialis血清凝集效价分别为 :1... 在采用正交试验设计优化了 Aeromonas hydrophila和 Vibrio fluvialis二联全菌疫苗制备工艺的基础上 ,研究了采用该工艺所制备的疫苗对鲫的免疫保护效果。结果表明注射免疫鲫4周后 ,抗 A.hydrophila和 V.fluvialis血清凝集效价分别为 :1∶ 4— 1∶ 3 2和 1∶ 2— 1∶ 1 6 ,平均都为 1∶ 1 0 ,但对攻毒均具有有效的保护作用。浸泡免疫、高渗浸泡免疫或加多糖浸泡免疫在免疫 4周后 ,对 A.hydrophila攻毒均无保护作用 ;然而 ,加多糖浸泡免疫对 V.fluvialis攻毒可产生有效的保护。免疫扩散试验表明 ,在煮沸并经超声波处理后的 A.hydrophila或V.fluvialis菌液中均存在两种优势抗原。 展开更多
关键词 二联疫苗 嗜水气单胞菌 河弧菌 鲫鱼 免疫效果
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应用荧光抗体技术检测牙鲆体内的河流弧菌 被引量:22
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作者 鄢庆枇 邹文政 +2 位作者 纪荣兴 庄峙厦 王小如 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期16-19,共4页
用灭活的河流弧菌(Vibrio fluvialis)抗原,注射免疫实验兔,制得凝集价为1∶5 120的抗血清。用试管凝集法检测了抗血清的特异性,再用免疫吸附法去除交叉反应,从而得到高效价、高特异性的抗河流弧菌血清。用所制备的抗血清在实验室中建立... 用灭活的河流弧菌(Vibrio fluvialis)抗原,注射免疫实验兔,制得凝集价为1∶5 120的抗血清。用试管凝集法检测了抗血清的特异性,再用免疫吸附法去除交叉反应,从而得到高效价、高特异性的抗河流弧菌血清。用所制备的抗血清在实验室中建立起河流弧菌荧光抗体检测技术(FAT),在荧光显微镜下可清楚地看到被标记的病原菌,整个检测过程只需3h。用河流弧菌感染牙鲆(Paralichthys olivaceus),24 h后,用FAT测定牙鲆的血液、肾脏和肝脏中的河流弧菌,在血液中河流弧菌的检出率最高,其次是肾脏,肝脏的检出率最低。以上结果表明:荧光抗体技术可以快速、灵敏、准确地检测出牙鲆体内的河流弧菌。 展开更多
关键词 荧光抗体检测技术 牙鲆(Paralichthys olivaceus) 河流弧菌(vibrio fluvialis)
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美国红鱼“腐皮病”病原的初步研究 被引量:16
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作者 纪荣兴 胡石柳 +1 位作者 邹文政 张坤宁 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期1-4,共4页
从有典型'腐皮病'症状的美国红鱼 (Sciaenops ocellatus)中分离到一株优势菌.人工感染菌液浓度为 10 8 CFU/mL时,可致健康美国红鱼出现与自然发病相似的症状,且 100%死亡,确认该分离菌为美国红鱼'腐皮病'的致病菌.该菌... 从有典型'腐皮病'症状的美国红鱼 (Sciaenops ocellatus)中分离到一株优势菌.人工感染菌液浓度为 10 8 CFU/mL时,可致健康美国红鱼出现与自然发病相似的症状,且 100%死亡,确认该分离菌为美国红鱼'腐皮病'的致病菌.该菌的主要生理生化特征为革兰氏染色阴性, 0/129(150 μ g)敏感, TCBS上生长呈黄色,氧化酶阳性,伏-普二试验阴性,葡萄糖产酸不产气,蔗糖发酵阳性,甘露糖发酵阳性,阿拉伯糖发酵阳性,肌醇阴性,赖氨酸阴性,精氨酸阳性,鸟氨酸阴性,硝酸盐还原阳性,七叶灵水解阴性, ONPG阳性,有动力,在盐度 0~ 60生长, 80和 100不生长, 30~ 40 ℃生长, 4 ℃、45 ℃不生长,鉴定该菌为河流弧菌( Vibrio fluvialis).药敏试验表明,该菌对多粘菌素 B、四环素、痢特灵敏感;对卡那霉素、链霉素、复方新诺明、呋喃妥咽、庆大霉素、菌必治不敏感;对氯霉素、青霉素、氨苄青霉素、氟哌酸、环丙沙星、利福平中度敏感. 展开更多
关键词 美国红鱼 腐皮病 病原 河流弧菌 药敏试验 生理生化特性
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点带石斑鱼溃烂病病原菌的分离与鉴定 被引量:11
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作者 王雪惠 耿绪云 +2 位作者 李翔 董学旺 孙金生 《天津农学院学报》 CAS 2012年第3期19-25,共7页
溃烂病是我国北方海水工厂化养殖点带石斑鱼的主要病害之一。作者连续3 a对天津地区的养殖点带石斑鱼溃烂病进行了流行病学调查,并从患病鱼病灶分离到7株致病菌,采用生理生化和分子生物学相结合的方法对7株致病菌进行了鉴定,结果表明,1... 溃烂病是我国北方海水工厂化养殖点带石斑鱼的主要病害之一。作者连续3 a对天津地区的养殖点带石斑鱼溃烂病进行了流行病学调查,并从患病鱼病灶分离到7株致病菌,采用生理生化和分子生物学相结合的方法对7株致病菌进行了鉴定,结果表明,1株为杀鲑气单胞菌,5株为哈维氏弧菌,1株为河流弧菌。在连续3 a的调查中,每年都分离到哈维氏弧菌,表明哈维氏弧菌是天津地区海水工厂化养殖点带石斑鱼溃烂病的主要条件致病菌,而杀鲑气单胞菌和河流弧菌是次要条件致病菌。研究结果将为控制石斑鱼溃烂病在海水工厂化养殖中的爆发和流行奠定基础。 展开更多
关键词 点带石斑鱼 溃烂病 细菌鉴定 杀鲑气单胞菌 哈维氏弧菌 河流弧菌
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斑节对虾病原菌河流弧菌(Ⅰ型)的研究 被引量:11
5
作者 张朝霞 苏永全 +2 位作者 王军 鄢庆枇 马梁 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第z1期208-213,共6页
从患“红体综合症”的斑节对虾 (Penaeusmonodon)体内分离到一株细菌 6 10 1号 ,回归感染证实了其致病性 ,经形态观察以及生理生化特性检测 ,鉴定为河流弧菌 (Ⅰ型 ) .提取河流弧菌 6 10 1号胞外产物 ,分析其酶成分 ,定量检测了胞外产... 从患“红体综合症”的斑节对虾 (Penaeusmonodon)体内分离到一株细菌 6 10 1号 ,回归感染证实了其致病性 ,经形态观察以及生理生化特性检测 ,鉴定为河流弧菌 (Ⅰ型 ) .提取河流弧菌 6 10 1号胞外产物 ,分析其酶成分 ,定量检测了胞外产物中蛋白酶、酸性磷酸酯酶和碱性磷酸酯酶的活性 ,将提取的河流弧菌 6 10 1号胞外产物对健康斑节对虾进行致死试验 ,证实其胞外产物所具有的毒性甚于该菌的菌悬液 .电镜观察致死对虾肝组织细胞严重受损 ,从细胞病理方面进一步证实了病原菌胞外产物的致病性 . 展开更多
关键词 虾病 河流弧菌 胞外产物 斑节对虾(Penaeus monodon)
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PCR结合变性高效液相色谱快速检测水产品中河流弧菌 被引量:9
6
作者 曹际娟 赵昕 +3 位作者 孙哲平 于珂 徐君怡 郑秋月 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第11期2187-2189,共3页
目的:应用PCR结合变性高效液相色谱技术实现水产品中河流弧菌的快速鉴定。方法:利用河流弧菌的toxR基因序列设计引物,并对该方法进行特异性、精密度和实际应用等方面的考察。结果:用该方法未检测到河流弧菌的近源种及其他细菌的阳性吸收... 目的:应用PCR结合变性高效液相色谱技术实现水产品中河流弧菌的快速鉴定。方法:利用河流弧菌的toxR基因序列设计引物,并对该方法进行特异性、精密度和实际应用等方面的考察。结果:用该方法未检测到河流弧菌的近源种及其他细菌的阳性吸收峰,表现出了很好的特异性。结论:用PCR结合变性高效液相色谱检测河流弧菌,不仅特异性好、灵敏度高,且方法简便、快速。 展开更多
关键词 PCR—DHPLC 河流弧菌 toxR基因 检测
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海洋中分离的河流弧菌致病能力的研究 被引量:9
7
作者 马骢 郝秀红 +4 位作者 付凯飞 蒋学兵 陈昌国 马学斌 郭建巍 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期734-737,共4页
目的研究从海水中分离出的河流弧菌的致病性。方法毒力实验组:22只二级昆明小鼠随机分为4组:实验组腹腔注射河流弧菌,2个阳性对照组分别腹腔注射标准金黄色葡萄球菌和标准大肠埃希菌,阴性对照组腹腔注射无菌生理盐水;伤口感染实验:22只... 目的研究从海水中分离出的河流弧菌的致病性。方法毒力实验组:22只二级昆明小鼠随机分为4组:实验组腹腔注射河流弧菌,2个阳性对照组分别腹腔注射标准金黄色葡萄球菌和标准大肠埃希菌,阴性对照组腹腔注射无菌生理盐水;伤口感染实验:22只SPF小鼠,腿部致伤后随机分为4组:实验组(浸泡含有河流弧菌的人工海水)和2个阳性对照组(分别含有标准金黄色葡萄球菌、标准大肠埃希菌),阴性对照组(浸泡无菌人工海水);观察小鼠一般状况,血常规、血培养、脏器细菌培养,伤口分泌物培养,3 d后活杀小鼠,取脏器和伤肢进行病理检查。结果毒力实验:实验组7只鼠中5只鼠腹腔注射细菌悬液12 h血培养阳性,2只鼠24 h血培养持续阳性;伤口感染实验:伤口感染阳性率为100.0%,病理学检查伤肢横纹肌组织有大量中性粒细胞浸润,蜂窝织炎形成。结论自海水中分离出的河流弧菌在106CFU/ml时,具有感染能力,可致鼠伤口感染和败血症。 展开更多
关键词 毒力实验 海水浸泡 创伤动物 河流弧菌
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一起由河流弧菌和副溶血性弧菌引起的食物中毒调查分析 被引量:8
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作者 毛书奇 胡群雄 +2 位作者 叶鸿雁 张幼萍 王雪英 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第17期2160-2161,2164,共3页
目的报告一起因交叉污染所致河流弧菌和副溶血性弧菌食物中毒的流行病学调查。方法通过现场流行病学和实验室检测分析事件发生的原因。结果共有720人就餐,出现食物中毒共24人,罹患率为3.33%(24/720),对44份可疑食物样品和24份肛拭样本... 目的报告一起因交叉污染所致河流弧菌和副溶血性弧菌食物中毒的流行病学调查。方法通过现场流行病学和实验室检测分析事件发生的原因。结果共有720人就餐,出现食物中毒共24人,罹患率为3.33%(24/720),对44份可疑食物样品和24份肛拭样本检测发现,其中检出河流弧菌阳性2例,检出率为8.33%,检出副溶血性弧菌阳性12例,检出率为50.00%。结合患者临床表现、疾病潜伏期、流行病学特点及现场卫生状况,确定此次食物中毒病原体为河流弧菌和副溶血性弧菌。中毒原因是食用了被河流弧菌和副溶血性弧菌污染的食物,食物污染是食堂晚餐食品加工过程中交叉污染所致。结论此次暴发事件是食用被河流弧菌和副溶血性弧菌污染的食物引起。河流弧菌作为本地区首次被检出的一种致病弧菌,应引起足够重视。 展开更多
关键词 食物中毒 副溶血性弧菌 河流弧菌
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河流弧菌-Ⅱ(Vibrio fluvialis-Ⅱ)噬菌体-VP_8的分离与研究 被引量:8
9
作者 宁淑香 聂丽平 +2 位作者 陆敏 曹文伟 丁明进 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期20-21,31,共3页
1996年夏季,从皱纹盘鲍脓疱病发病区采集海水样品46份,以皱纹盘鲍脓疱病病原菌河流弧菌-Ⅱ(Vibriofluvialis-Ⅱ)为指示菌,从这些样品中分离纯化到多株噬菌体,并对其中VP8进行了电子显微镜观察及生物学特性研究。其头部20面体的直... 1996年夏季,从皱纹盘鲍脓疱病发病区采集海水样品46份,以皱纹盘鲍脓疱病病原菌河流弧菌-Ⅱ(Vibriofluvialis-Ⅱ)为指示菌,从这些样品中分离纯化到多株噬菌体,并对其中VP8进行了电子显微镜观察及生物学特性研究。其头部20面体的直径约57nm;尾鞘宽为18nm,长的33nm;尾轴宽约7nm,长约58nm;从形态上看属于BradlcyA型。 展开更多
关键词 河流弧菌 噬菌体 皱纹盘鲍脓疱病 生物防治
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基于toxR基因的河流弧菌PCR快速检测方法的建立 被引量:7
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作者 文万侥 谢珍玉 +3 位作者 徐先栋 张新中 张世秀 周永灿 《水产科学》 CAS 北大核心 2009年第10期575-578,共4页
基于河流弧菌的toxR基因设计了6对引物,分别为F1、F2、F3、F4、F5、F6。以标准河流弧菌HL01、HL02、HL03、HL04做梯度PCR检测。试验结果表明,仅F2和F4能获得分子量分别为332 bp和358 bp的目的条带。利用其他27株非河流弧菌进行PCR特异... 基于河流弧菌的toxR基因设计了6对引物,分别为F1、F2、F3、F4、F5、F6。以标准河流弧菌HL01、HL02、HL03、HL04做梯度PCR检测。试验结果表明,仅F2和F4能获得分子量分别为332 bp和358 bp的目的条带。利用其他27株非河流弧菌进行PCR特异性检测,结果表明,引物F2和F4的特异性较强,但F2和F4这两对引物的灵敏度也有一定的差异,F2的灵敏为9.3×103cfu/ml,F4的灵敏度为9.3×102cfu/ml。 展开更多
关键词 河流弧菌 toxR基因 PCR
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50味中药及其复方与抗生素对河流弧菌的体外抑菌作用 被引量:7
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作者 徐晓津 李秀华 +7 位作者 马一帆 何俊 李慧耀 祁欣 张蕉南 王云才 赵玲敏 鄢庆枇 《热带生物学报》 2019年第4期343-351,共9页
用牛津杯法选择大黄、黄柏、黄连等50种单味中药进行河流弧菌、金黄色葡萄球菌体外抑菌试验,并以抗菌活性较好的药物组成二联、三联复方,药物质量浓度分别为60和240 mg·mL^-1,进行中药复方抗菌活性研究,同时用抗生素进行河流弧菌... 用牛津杯法选择大黄、黄柏、黄连等50种单味中药进行河流弧菌、金黄色葡萄球菌体外抑菌试验,并以抗菌活性较好的药物组成二联、三联复方,药物质量浓度分别为60和240 mg·mL^-1,进行中药复方抗菌活性研究,同时用抗生素进行河流弧菌药敏试验。目的是筛选出对河流弧菌敏感的中草药、抗生素及其复方。结果表明,黄连、诃子等单方对河流弧菌抑菌作用明显,为极敏感;在60 mg·mL^-1低药物浓度时,黄柏、黄连组成的复方对河流弧菌抑菌作用为极敏感;在240 mg·mL^-1药物浓度时,黄柏、黄连等组成的9个复方中药对河流弧菌抑菌作用属极敏感,黄连、板蓝根、黄柏等4个复方中药对河流弧菌的抑菌作用明显,为极敏感。河流弧菌对恩诺沙星、盐酸多西环素、氟苯尼考、土霉素及甲氧苄啶/磺胺甲噁唑5种药物高度敏感。部分中药对河流弧菌抑制作用不明显,黄连、板蓝根、黄柏等4个三联复方中药药效最强。可组成多种三联复方中药或中西药联用复方,均有良好的抑制作用。 展开更多
关键词 中药 抗生素 河流弧菌 抑菌作用
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河流弧菌(Vibrio fluvialis)对牙鲆(Paralichthys olivaceus)粘液的趋化和粘附作用 被引量:7
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作者 鄢庆枇 邹文政 +1 位作者 纪荣兴 义家波 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期362-367,共6页
采用生长曲线法测定了河流弧菌在牙鲆表皮、鳃和肠粘液中的生长情况,结果表明,河流弧菌在3种粘液中都能生长,生长前期符合Logistic模型,然后进入Gompertz模型,在鳃粘液中的生长量高于肠粘液和表皮粘液。采用毛细管法研究了河流弧菌对牙... 采用生长曲线法测定了河流弧菌在牙鲆表皮、鳃和肠粘液中的生长情况,结果表明,河流弧菌在3种粘液中都能生长,生长前期符合Logistic模型,然后进入Gompertz模型,在鳃粘液中的生长量高于肠粘液和表皮粘液。采用毛细管法研究了河流弧菌对牙鲆3种粘液的趋化作用,结果表明,河流弧菌对牙鲆3种粘液具有较强的趋化应答,在粘液总蛋白含量相同的情况下,河流弧菌对牙鲆鳃粘液的趋化应答显著强于对表皮粘液的趋化应答(P<0.05),而对肠粘液的趋化应答极显著低于对鳃粘液和表皮粘液的趋化应答(P<0.01)。采用3H-TdR示踪法进行了河流弧菌对牙鲆3种粘液的粘附作用研究,结果表明,河流弧菌对牙鲆表皮粘液和鳃粘液的粘附率较高,而对肠粘液的粘附率较低,特别是孵育30、60和90min时河流弧菌对牙鲆表皮粘液和鳃粘液的粘附率显著高于对肠粘液的粘附率(P<0.05)。这些结果表明,河流弧菌能够在牙鲆粘液,尤其是鳃粘液中生长和定植,有利于其进一步感染、致病。 展开更多
关键词 河流弧菌 牙鲆 粘液 趋化作用 粘附作用
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河弧菌Ⅵ型分泌系统组成、功能及调控研究进展
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作者 韩雨 冀赛森 +3 位作者 程倩 黄元铭 段然 梁未丽 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期571-577,共7页
Ⅵ型分泌系统(TypeⅥSecretion System,T6SS)是细菌中新发现的一种以直接接触方式释放毒性效应蛋白杀死真核“捕食者”或原核“竞争对手”的蛋白分泌装置,被喻为细菌的“分子武器”,在细菌环境适应性、致病性和基因的水平转移等方面都... Ⅵ型分泌系统(TypeⅥSecretion System,T6SS)是细菌中新发现的一种以直接接触方式释放毒性效应蛋白杀死真核“捕食者”或原核“竞争对手”的蛋白分泌装置,被喻为细菌的“分子武器”,在细菌环境适应性、致病性和基因的水平转移等方面都发挥重要作用。约25%的革兰氏阴性细菌基因组中存在T6SS编码基因簇,存在广泛,越来越多的研究支持T6SS是细菌间生态位竞争的关键因素。T6SS发挥生物学功能的效应蛋白具有高度多样性,并不具有保守的特征序列,涉及的调控机制复杂,因此是T6SS研究领域的热点和难点。河弧菌(V.fluvialis)作为一种新发的食源性病原菌,T6SS的数量、组成和生理功能具有独特性,与其广泛的环境适应性及致病性有关。本文综述了河弧菌T6SS的组成结构、功能活性及调控机制等。 展开更多
关键词 Ⅵ型分泌系统 河弧菌 效应蛋白 弧菌属
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临床分离河流弧菌毒力及药敏表型特征分析 被引量:7
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作者 周妍妍 闫东辉 苏建荣 《临床和实验医学杂志》 2016年第5期492-495,共4页
目的了解临床分离的河流弧菌的毒力及耐药特征。方法收集2015年北京友谊医院4~10月肠道门诊分离到的河流弧菌及河流弧菌感染相关资料。微量肉汤稀释法检测河流弧菌对15种抗生素的耐药性;PCR检测河流弧菌的毒力基因vfh、hupO、vfp与及种... 目的了解临床分离的河流弧菌的毒力及耐药特征。方法收集2015年北京友谊医院4~10月肠道门诊分离到的河流弧菌及河流弧菌感染相关资料。微量肉汤稀释法检测河流弧菌对15种抗生素的耐药性;PCR检测河流弧菌的毒力基因vfh、hupO、vfp与及种属特异基因toxR。结果河流弧菌在细菌性腹泻中所占比率为5.3%(9/169)。河流弧菌除了对氨苄西林的耐药率为11.1%(1/9)外,其他15种抗生素均100%敏感。菌株携带率toxR及vfh为100%;而hopO的携带率为77.8%(7/9);vfp的携带率为44.4%(4/9)。结论研究中的河流弧菌对多种抗生素敏感,未发现多耐药株;导致腹泻的河流弧菌主要携带vfh和hopO。加强北京地区河流弧菌的耐药和毒力监测,有利于防控河流弧菌的感染和暴发流行。 展开更多
关键词 河流弧菌 毒力基因 抗药性
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海洋细菌Vibrio fluvialis的分离鉴定、产琼胶酶条件优化及酶的分离纯化 被引量:4
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作者 李驰 李春生 +3 位作者 杨贤庆 戚勃 赵永强 王悦齐 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期35-42,共8页
利用琼胶酶生产琼胶寡糖具有良好的应用前景,然而目前产琼胶酶菌株的性状不稳定、酶活力低等因素限制了琼胶酶的工业化应用。从龙须菜表面筛选出1株具有高琼胶酶活力的菌株A8,利用VITEK 2 GN微生物鉴定系统和16S rRNA基因序列分析,分别... 利用琼胶酶生产琼胶寡糖具有良好的应用前景,然而目前产琼胶酶菌株的性状不稳定、酶活力低等因素限制了琼胶酶的工业化应用。从龙须菜表面筛选出1株具有高琼胶酶活力的菌株A8,利用VITEK 2 GN微生物鉴定系统和16S rRNA基因序列分析,分别进行生理生化和分子生物学鉴定,确定该菌为Vibrio fluvialis A8。通过单因素试验和正交试验确定该菌的最适产酶培养基为:在人工海水中添加2 g/L琼脂、3 g/L半乳糖、3 g/L酵母浸粉、5 g/L Na Cl;最适培养条件为:接种量2%、温度20℃、p H 7.0。优化后发酵液琼胶酶的活力为21.80U/m L,是优化前的4.05倍。Pearson相关性分析表明,菌株生长对其产酶有正相关影响(P<0.01)。采用(NH4)2SO4分级沉淀和DEAE阴离子交换层析对琼胶酶进行分离纯化,琼胶酶的纯化倍数为3.26,比活力为141.52 U/mg,回收率为15.21%。SDS-PAGE凝胶电泳分析显示,琼胶酶的分子质量约为37 k Da。 展开更多
关键词 琼胶酶 vibrio fluvialis 分离 鉴定 纯化
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群体感应调控子AphA对河弧菌Ⅵ型分泌系统VflT6SS2的调控研究
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作者 程倩 韩雨 +4 位作者 黄元铭 冀赛森 李杰 刁保卫 梁未丽 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期566-573,共8页
目的研究河弧菌群体感应调控子AphA对Ⅵ型分泌系统VflT6SS2功能活性的调控机制。方法采用Western Blot检测河弧菌野生株、aphA缺失株(ΔaphA)和aphA回补株中VflT6SS2标志性组件溶血素共调节蛋白(Hcp)的表达和分泌。采用实时荧光定量PCR... 目的研究河弧菌群体感应调控子AphA对Ⅵ型分泌系统VflT6SS2功能活性的调控机制。方法采用Western Blot检测河弧菌野生株、aphA缺失株(ΔaphA)和aphA回补株中VflT6SS2标志性组件溶血素共调节蛋白(Hcp)的表达和分泌。采用实时荧光定量PCR和启动子-lux融合冷光系统检测野生株和ΔaphA中VflT6SS2核心基因簇和附属基因簇代表基因tssB2、hcp(tssD2)和vgrG(tssI2)以及群体感应调控子HapR的mRNA相对表达量和启动子活性。采用定点突变实验结合启动子活性测定确定AphA在tssD2b启动子区的调控结合位点;采用电泳迁移率位移测定(EMSA)确定AphA与hapR启动子的结合。结果ΔaphA中tssB2、hcp(tssD2)、vgrG(tssI2)和hapR的mRNA相对表达量及Hcp蛋白的表达分泌明显高于野生株。VflT6SS2核心基因簇、tssD2a、tssI2a和hapR的启动子活性在ΔaphA中均高于野生株,而tssD2b启动子活性则低于野生株。tssD2a和tssD2b的启动子序列分析显示-335 bp~-229 bp区差异较大,在tssD2b中该区域存在2个潜在AphA结合位点,将其中的保守位点ATG替换为CGA,tssD2b启动子活性明显降低。EMSA结果显示,AphA与hapR启动子直接结合。结论AphA在转录水平直接抑制hapR的表达,间接参与对VflT6SS2核心基因簇和附属基因簇的调控。AphA对tssD2a和tssD2b呈现相反的调控模式,AphA可直接与tssD2b启动子区(-335 bp~-229 bp)结合正向调控tssD2b的表达。 展开更多
关键词 河弧菌 群体感应调控子 Ⅵ型分泌系统 转录调控
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河流弧菌对牙鲆表皮粘液的趋化作用 被引量:5
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作者 邹文政 纪荣兴 +1 位作者 义家波 鄢庆枇 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期318-325,共8页
病原菌对粘液的趋化作用在其对粘液层定植过程中起着重要作用,趋化作用是病原菌的毒力机制之一。为了解病原性河流弧菌对牙鲆表皮粘液的趋化作用,本文采用改良的毛细管法研究了细菌浓度、孵育时间、孵育温度、pH、NaCl浓度、碳水化合物... 病原菌对粘液的趋化作用在其对粘液层定植过程中起着重要作用,趋化作用是病原菌的毒力机制之一。为了解病原性河流弧菌对牙鲆表皮粘液的趋化作用,本文采用改良的毛细管法研究了细菌浓度、孵育时间、孵育温度、pH、NaCl浓度、碳水化合物等对河流弧菌趋化作用的影响。试验结果表明,在较低浓度下,河流弧菌对牙鲆表皮粘液的趋化量随着菌浓度的升高而增大;在室温下河流弧菌的趋化量随着孵育时间的延长而增加,60 min趋于饱和;孵育温度在4-15℃范围内趋化作用随温度升高而增强,15℃时达最大值;pH为8时细菌的趋化性最强;NaCl浓度超过0.8%,河流弧菌的趋化性随着浓度升高而显著减弱(P〈0.05);8种碳水化合物中甘露醇、乳糖、甘露糖能够极显著地促进河流弧菌对牙鲆表皮粘液的趋化作用(P〈0.01)。以上结果说明,牙鲆表皮粘液对河流弧菌有较强的趋化作用,该趋化作用受环境因子的影响较大;本文所揭示的河流弧菌趋化特性将对养殖牙鲆疾病防治提供有价值的参考。 展开更多
关键词 河流弧菌 牙鲆 表皮粘液 趋化作用
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病原性河流弧菌对青石斑鱼体表黏液黏附特性的研究 被引量:5
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作者 王晓露 邹文政 +2 位作者 鄢庆枇 郭国军 陈强 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期441-447,共7页
采用3H-TdR同位素示踪法研究了河流弧菌对不同处理后的青石斑鱼表皮黏液的黏附作用。结果显示:青石斑鱼表皮黏液经40、60和80℃热处理10min后河流弧菌的黏附率出现显著性升高,而100℃处理10min则能极显著降低河流弧菌的黏附作用;蛋白酶... 采用3H-TdR同位素示踪法研究了河流弧菌对不同处理后的青石斑鱼表皮黏液的黏附作用。结果显示:青石斑鱼表皮黏液经40、60和80℃热处理10min后河流弧菌的黏附率出现显著性升高,而100℃处理10min则能极显著降低河流弧菌的黏附作用;蛋白酶K和胰蛋白酶处理黏液对河流弧菌的黏附作用没有显著影响,高碘酸处理则能极显著提高河流弧菌的黏附率;8种碳水化合物中的葡萄糖、甘露糖、甘露醇、麦芽糖能极显著促进河流弧菌的黏附作用,乳糖、果糖及蔗糖能显著性促进河流弧菌的黏附作用;半乳糖则没有显著性影响;高浓度的细胞表面提取物能显著抑制河流弧菌的黏附作用,但较低浓度的细胞表面提取物反而有一定的促进作用;青石斑鱼表皮黏液经Sephadex G-100分离得到3个洗脱峰,河流弧菌对第1个洗脱峰的黏附作用最强。研究结果表明,病原性河流弧菌对青石斑鱼表皮黏液有较强的黏附作用;青石斑鱼表皮黏液中存在特异性黏附受体;黏液中的主要黏附受体是热稳定性较高、耐蛋白酶K和胰蛋白酶的大分子物质。 展开更多
关键词 河流弧菌 青石斑鱼 表皮黏液 黏附作用
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河弧菌研究概况 被引量:5
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作者 梁璞 阚飙 梁未丽 《疾病监测》 CAS 2013年第9期775-780,共6页
河弧菌(Vibrio fluvialis)被认为是新发的食源性致病菌,能够引起腹泻暴发流行,对全球公共卫生安全造成潜在危险,尤其在发展中国家的沿海地区和卫生条件差的区域。经过30多年的研究和探索,人们对河弧菌及其致病性和感染的流行病学特征有... 河弧菌(Vibrio fluvialis)被认为是新发的食源性致病菌,能够引起腹泻暴发流行,对全球公共卫生安全造成潜在危险,尤其在发展中国家的沿海地区和卫生条件差的区域。经过30多年的研究和探索,人们对河弧菌及其致病性和感染的流行病学特征有了一定的了解和认识,本研究就河弧菌的发现、病原学特征,致病性、流行病学特征,临床表现等相关研究进展做一综述。 展开更多
关键词 河弧菌 毒力 致病性 耐药
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分析和比较3种弧菌培养基的筛选性能 被引量:1
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作者 梁苏育 袁峰 《中国卫生标准管理》 2021年第23期120-123,共4页
目的分析和比较TCBS平板、mCPC平板和弧菌筛选显色平板等3种弧菌培养基的筛选性能,为快速准确确定致病性弧菌、提高检验质量提供可靠保证。方法通过将13株标准菌株,还有其中4株弧菌标准菌株的混合菌接种在TCBS平板、mCPC平板和弧菌筛选... 目的分析和比较TCBS平板、mCPC平板和弧菌筛选显色平板等3种弧菌培养基的筛选性能,为快速准确确定致病性弧菌、提高检验质量提供可靠保证。方法通过将13株标准菌株,还有其中4株弧菌标准菌株的混合菌接种在TCBS平板、mCPC平板和弧菌筛选显色平板等3种弧菌培养基上培养,以及创伤弧菌和河流弧菌在弧菌筛选显色平板上再一次培养,观察它们的生长效果。结果 TCBS平板对致病性弧菌的选择范围很广,选择效率较高,是非特异性的,容易出现假阴阳性;mCPC平板对创伤弧菌的选择性最强,并且菌落典型单一,纯度高;弧菌筛选显色平板对副溶血性弧菌和溶藻弧菌的选择性强,活力强的创伤弧菌和河流弧菌才能在上面生长,它有较高的特异性,根据菌落颜色不同容易辨别。结论 TCBS平板适合样品中致病性弧菌的初步分离或者致病性弧菌含量较低的样品的分离;mCPC平板适合样品中创伤弧菌的分离,也适合样品中创伤弧菌菌株的纯化;弧菌筛选显色平板适合样品中副溶血性弧菌的分离,亦适合获取样品中活力强的创伤弧菌和河流弧菌。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 创伤弧菌 溶藻弧菌 河流弧菌 TCBS平板 mCPC平板 弧菌筛选显色平板
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