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CDK5在肝细胞癌中的异常表达 被引量:4
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作者 董贾中 杨玉秀 +1 位作者 白杨秋 张立达 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第10期1010-1015,共6页
目的:研究周期素依赖性激酶5(cyclin-dependent kinase5,CDK5)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展中的异常表达.方法:应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测CDK5mRNA的表达水平;免疫组织化学技术检测CDK5蛋白在正常肝组... 目的:研究周期素依赖性激酶5(cyclin-dependent kinase5,CDK5)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展中的异常表达.方法:应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测CDK5mRNA的表达水平;免疫组织化学技术检测CDK5蛋白在正常肝组织、肝硬化和HCC组织中的表达;分析CDK5与临床病理学特征的关系.结果:CDK5mRNA在HCC中呈上调表达,阳性表达率在正常肝组织、肝硬化和HCC组织中分别为35.3%、64.3%、89.7%;正常肝组织与HCC组织有显著差异(P<0.05),肝硬化组织与HCC组织也有显著差异(P<0.01).CDK5蛋白在HCC中高表达,阳性表达率在人正常肝组织、肝硬化和HCC组织之间分别为29.4%,64.3%,89.7%,三组之间差异有统计学意义(χ2=58.095,P<0.01).HCC组织中CDK5蛋白表达强度与肿瘤的病理学分级显著相关(χ2=19.330,P<0.01).结论:CDK5在HCC中上调表达,他的异常表达在HCC的发生发展过程中发挥重要的作用,且与肿瘤的分化程度相关. 展开更多
关键词 反转录聚合酶链式反应 免疫组织化学 肝细胞癌 周期素依赖性激酶5 高表达
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亚麻LusiCesA1上调基因表达研究 被引量:3
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作者 吴建忠 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期44-51,共8页
研究通过克隆亚麻纤维素合成酶Lusi Ces A1基因,利用抑制差减杂交(SSH)技术,以DIANE Lusi Ces A1基因敲除RNA为Tester,常规RNA为Driver,构建亚麻纤维素合成酶c DNA文库,逆向斑点杂交验证阳性克隆,筛选差异表达克隆,鉴定出Lusi Ces A1上... 研究通过克隆亚麻纤维素合成酶Lusi Ces A1基因,利用抑制差减杂交(SSH)技术,以DIANE Lusi Ces A1基因敲除RNA为Tester,常规RNA为Driver,构建亚麻纤维素合成酶c DNA文库,逆向斑点杂交验证阳性克隆,筛选差异表达克隆,鉴定出Lusi Ces A1上调表达增强基因122个,其中95个与已知功能基因同源,其余27个未知同源序列推断为亚麻纤维素合成途径新基因。Lusi Ces A1是亚麻纤维素合成途径关键酶基因,通过其上调表达作用机理分析,挖掘纤维合成过程上调表达基因,可改良亚麻品种。 展开更多
关键词 亚麻 LusiCesA1 上调表达 差减杂交
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FXR1基因过表达对卵巢癌细胞生物学行为影响的初步研究 被引量:2
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作者 阳志军 俸艳英 +1 位作者 张玮 李力 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期413-418,共6页
背景与目的:前期研究显示,FXR1基因是从卵巢上皮癌cDNA文库中筛选到的相关抗原基因,FXR1抗原蛋白的自身抗体可用于早期卵巢癌的诊断。本研究的目的是分析上调上皮性卵巢癌相关抗原基因FXR1表达对卵巢癌细胞系HO8910生物学行为的影响。方... 背景与目的:前期研究显示,FXR1基因是从卵巢上皮癌cDNA文库中筛选到的相关抗原基因,FXR1抗原蛋白的自身抗体可用于早期卵巢癌的诊断。本研究的目的是分析上调上皮性卵巢癌相关抗原基因FXR1表达对卵巢癌细胞系HO8910生物学行为的影响。方法:采用半定量RT-PCR法检测在不同卵巢组织中,FXR1 mRNA的表达,并分析其与临床病理的关系。RT-PCR扩增FXR1 CDS,构建FXR1真核表达载体,脂质体介导下转染HO8910细胞,经G418筛选获得稳定转染株,检测转染后细胞相应生物学行为。结果:FXR1 mRNA在卵巢癌组织中的相对表达水平比卵巢良性肿瘤组织及正常卵巢组织均增高(P<0.05);FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期和高分化癌组织中FXR1 mRNA相对表达水平低于Ⅲ期和中-低分化组织(P<0.05);成功构建了FXR1基因的真核表达载体,并稳定转染了HO8910细胞。生长曲线显示上调FXR1基因表达可促进细胞的生长;克隆形成实验显示上调FXR1基因表达可促进细胞增殖。基质黏附实验显示,上调FXR1基因表达可加强细胞对基质的黏附能力,流式细胞周期检测亦发现与对照(80%)相比,转染FXR1基因后G1期细胞(67.1%)比例明显减少,这说明转染FXR1后细胞的增殖更旺盛。同时发现FXR1对细胞侵袭、迁移的能力无明显影响。结论:上调FXR1基因表达可能有促进卵巢癌细胞的生长、增殖、加强细胞对基质黏附能力的作用。 展开更多
关键词 FXR1上调表达 上皮性卵巢癌细胞 生物学功能
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热胁迫下茄子叶片cDNA-SSH文库的构建及其相关基因分析 被引量:1
4
作者 杨洋 田时炳 +5 位作者 王永清 罗章勇 王之劲 谢树章 何叶 冯雨实 《中国农学通报》 CSCD 2014年第28期105-110,共6页
通过获得热胁迫下茄子热应激表达功能基因,可为创制茄子耐热性品种提供研究基础。笔者采用抑制性消减杂交的方法构建了茄子耐热品系896的热胁迫基因上调表达文库,并对文库的部分序列进行了实时荧光定量PCR表达验证分析。构建文库信息分... 通过获得热胁迫下茄子热应激表达功能基因,可为创制茄子耐热性品种提供研究基础。笔者采用抑制性消减杂交的方法构建了茄子耐热品系896的热胁迫基因上调表达文库,并对文库的部分序列进行了实时荧光定量PCR表达验证分析。构建文库信息分析表明,茄子受热胁迫后大量因子参与到代谢过程的调控中,主要参与糖类、脂类、能量及氨基酸代谢途径,体内的激素调控表现为生长抑制调控。获得文库中编码小分子热激蛋白的YP16,编码碳酸酐酶的YP61以及编码钙依赖蛋白激酶的YP248在茄子叶片受热胁迫后均上调表达。 展开更多
关键词 茄子 热胁迫 抑制性消减杂交cDNA文库 上调表达 基因
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鸭肠炎病毒感染诱导鸭胚成纤维细胞γ干扰素上调表达及初步机制的研究 被引量:1
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作者 李思琪 尹海畅 +3 位作者 赵丽丽 王怡平 金建丽 陈洪岩 《实验动物与比较医学》 CAS 2018年第2期86-90,共5页
目的探讨鸭肠炎病毒(DEV)诱导鸭胚成纤维细胞(DEF)中γ干扰素(IFNγ)的表达情况及初步机制。方法分别提取感染DEV后24h、36h、48h、60h的DEF总RNA,反转录成cDNA,使用特异性引物,运用荧光定量PCR方法 ,检测IFNγ及几个相关干扰素刺激基因... 目的探讨鸭肠炎病毒(DEV)诱导鸭胚成纤维细胞(DEF)中γ干扰素(IFNγ)的表达情况及初步机制。方法分别提取感染DEV后24h、36h、48h、60h的DEF总RNA,反转录成cDNA,使用特异性引物,运用荧光定量PCR方法 ,检测IFNγ及几个相关干扰素刺激基因(ISGs)mRNA水平的变化。结果感染DEV的细胞相对于未感染的细胞,IFNγ的mRNA在24 h、36 h、48 h、60 h均显著上调,且相关ISGs包括抗黏液病毒基因(Mx)、DEAD框蛋白50(DDX50,是一种ATP依赖的RNA解旋酶)、2'-5'寡腺苷酸合成酶L(OASL)等基因的mRNA表达水平也均显著上调。结论 DEV感染DEF能够诱导IFNγ产生及相关ISGs表达的上调。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒(DEV) 鸭胚成纤维细胞(DEF) γ干扰素(IFNγ) 干扰素刺激基因(ISGs) 上调表达
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柑橘属SAUR基因家族的全基因组鉴定及表达分析 被引量:13
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作者 王福生 余洪 +4 位作者 胡洲 管德龙 张盼 朱世平 赵晓春 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期23-40,共18页
分析SAUR(Small auxin up-regulated RNA)基因家族在不同柑橘基因组中的数量、连锁群分布、基因结构、系统进化、基因表达模式等,从香橼、柚、莽山野橘和克里曼丁橘等基因组中分别鉴定到69、62、58和70个SAUR基因。SAUR在基因组上分布不... 分析SAUR(Small auxin up-regulated RNA)基因家族在不同柑橘基因组中的数量、连锁群分布、基因结构、系统进化、基因表达模式等,从香橼、柚、莽山野橘和克里曼丁橘等基因组中分别鉴定到69、62、58和70个SAUR基因。SAUR在基因组上分布不均,呈现明显的串联重复现象,基因家族成员的差异可能是由于串联重复和染色体大片段复制引起。大多数柑橘SAUR基因不含内含子,含有SAUR特有的4个保守motif。系统进化树分析显示,来源于拟南芥、水稻、番茄、马铃薯和柑橘的629个SAUR基因分为9组,每一组都含有5个物种的家族成员,并且同一个物种的SAUR基因具有较近的遗传距离。顺式元件分析表明,CclSAUR基因家族成员的上游序列含有光响应、转录因子结合、激素响应、伤害响应、低温响应、玉米素代谢和类黄酮生物合成相关的元件。q RT-PCR分析结果显示,大多数CclSAUR都能响应外源IAA和低温处理。 展开更多
关键词 柑橘属 SAUR基因家族 基因表达 全基因组鉴定
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PUMA基因在胃癌组织及细胞中的表达 被引量:7
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作者 陈鑫 张尤历 +3 位作者 乌慧玲 孔梅 邵长江 宋永站 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第12期1227-1231,共5页
目的:研究p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)基因的四种剪接体(PUMA-α,-β,-γ及-δ)在胃癌组织及细胞中的表达特点.方法:应用生物信息学分析PUMA基因四种剪接体的结构特点;同时利用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃癌组织、癌旁... 目的:研究p53正向细胞凋亡调控因子(PUMA)基因的四种剪接体(PUMA-α,-β,-γ及-δ)在胃癌组织及细胞中的表达特点.方法:应用生物信息学分析PUMA基因四种剪接体的结构特点;同时利用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃癌组织、癌旁组织及不同胃癌细胞系BGC-823和SGC-7901细胞中四种剪接体的mRNA表达水平.结果:PUMA-α和-β在癌旁组织中表达阳性,但在癌组织中表达难以检测,差异显著(t=9.492,15.875,均P<0.05);PUMA-γ和-δ在癌旁及癌组织中均可见表达,且在癌旁组织中的表达量显著高于癌组织(t=4.823,4.056,P<0.05).PUMA-α,-γ及-δ在胃癌不同分化程度的细胞系BGC-823(低分化)及SGC-7901(中分化)中均有表达,但两细胞系间无统计学差异.而PUMA-β在BGC-823中的表达明显高于SGC-7901细胞(t=8.710,P<0.05).结论:PUMA四种剪接体在胃癌组织中的表达下调,与癌的发生呈负相关;PUMA-β的表达还可能与细胞的分化程度有关. 展开更多
关键词 p53正向细胞凋亡调控因子 胃癌 细胞凋亡 表达
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万乃洛韦治疗老年带状疱疹患者的效果分析及机制研究 被引量:6
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作者 陈玉华 《海南医学院学报》 CAS 2015年第9期1284-1286,共3页
目的:研究万乃洛韦治疗带状疱疹患者的效果及机制,为临床治疗提供参考。方法 :对我院80例带状疱疹病毒患者接受万乃洛韦治疗前后进行分析,检测治疗前后患者血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、NFκB、CD4及CD8等蛋白的表达情况。以同期同年龄... 目的:研究万乃洛韦治疗带状疱疹患者的效果及机制,为临床治疗提供参考。方法 :对我院80例带状疱疹病毒患者接受万乃洛韦治疗前后进行分析,检测治疗前后患者血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、NFκB、CD4及CD8等蛋白的表达情况。以同期同年龄段健康体检者为对照组。结果:治疗后患者血清TNF-α、NFκB、CD4及CD8蛋白的表达水平较治疗前均明显增高(P<0.01)。结论:万乃洛韦治疗带状疱疹患者主要通过上调TNF-α、NFκB、CD4及CD8蛋白表达发挥作用。 展开更多
关键词 万乃洛韦 带状疱疹 肿瘤坏死因子 上调表达
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AEG-1基因在NSCLC中的表达及其临床病理意义 被引量:2
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作者 高建华 曹华 +2 位作者 李萱 虞春华 宋晓东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1833-1836,共4页
目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中星型胶质细胞上调基因1(AEG-1)的表达及其临床意义。方法:选取本院心胸外科手术切除治疗的83例NSCLC患者的术后癌组织标本及20例癌旁组织标本进行研究,采用免疫组化染色法检测两组AEG-1蛋白的表达水... 目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中星型胶质细胞上调基因1(AEG-1)的表达及其临床意义。方法:选取本院心胸外科手术切除治疗的83例NSCLC患者的术后癌组织标本及20例癌旁组织标本进行研究,采用免疫组化染色法检测两组AEG-1蛋白的表达水平,并分析AEG-1蛋白与NSCLC患者的临床病理学关系。结果:AEG-1 NSCLC组织中的AEG-1蛋白高表达46例(55.42%)显著高于癌旁组织的2例(10.00%)(P<0.05);NSCLC组织中的AEG-1蛋白高表达与患者的T分期、N分期及发生远处转移具有显著的相关性(P<0.05),与患者年龄、性别、分化程度关系不显著(P>0.05)。AEG-1高表达NSCLC患者的中位生存时间15.0个月显著低于AEG-1低表达患者的19.0个月(log-rankχ2=4.119,P<0.05)。结论:NSCLC组织中AEG-1基因表达上调,并且与患者的临床分期及远处转移有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 星型胶质细胞上调基因1 基因表达 免疫组化
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lncRNAs在肿瘤中的研究进展 被引量:1
10
作者 任惠文 张有为 王翔 《继续医学教育》 2016年第6期73-75,共3页
一直以来,人们一直在努力寻找肿瘤的治疗靶点,对长链非编码RNA(lnc RNAs)的研究可能为更好地研究肿瘤提供了良好的机遇。越来越多的研究证明lnc RNAs在肿瘤发生、发展、转移、基因调节中有重要作用。文章简单综述了几种lnc RNAs在肿瘤... 一直以来,人们一直在努力寻找肿瘤的治疗靶点,对长链非编码RNA(lnc RNAs)的研究可能为更好地研究肿瘤提供了良好的机遇。越来越多的研究证明lnc RNAs在肿瘤发生、发展、转移、基因调节中有重要作用。文章简单综述了几种lnc RNAs在肿瘤中的可能作用机制及临床应用,以期为肿瘤防治的研究提供理论基础。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 肿瘤 HOX转录反义RNA 肺腺癌转移相关转录子1 肝癌高表达转录本 前列腺癌基因表达标记1
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一个亚洲棉MYB家族新基因的克隆及特征分析 被引量:14
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作者 杨召恩 杨作仁 +3 位作者 刘坤 刘传亮 张朝军 李付广 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期195-204,共10页
【目的】克隆亚洲棉MYB家族的一个新基因(GaMYB2),研究其表达模式,分析其预期编码蛋白。【方法】利用RT-PCR和RACE技术克隆亚洲棉MYB2的cDNA序列全长;应用生物信息学软件分析该基因及预期编码蛋白的特征;采用实时荧光定量PCR技术对该基... 【目的】克隆亚洲棉MYB家族的一个新基因(GaMYB2),研究其表达模式,分析其预期编码蛋白。【方法】利用RT-PCR和RACE技术克隆亚洲棉MYB2的cDNA序列全长;应用生物信息学软件分析该基因及预期编码蛋白的特征;采用实时荧光定量PCR技术对该基因的组织特异性和PEG6000模拟干旱胁迫处理下的表达模式进行分析。【结果】从亚洲棉(Gossypium arboreum L.)中克隆了MYB家族的一个新基因MYB2,该基因全长1 117 bp,ORF全长840 bp,编码279个氨基酸,含有MYB保守域,氨基酸的BALSTP分析表明GaMYB2氨基酸序列与已报道的水稻(BAA23338.1)、小麦(AAT37168.1)等的序列有40.50%到68.20%的相似性。亚细胞定位表明该基因在细胞核中表达,实时荧光定量PCR结果表明该基因在根和花中的表达量较高,并且响应17%的PEG6000模拟干旱胁迫处理,上调表达。【结论】GaMYB2是亚洲棉MYB家族的一个新基因,并认为该基因可能在棉花调控干旱胁迫的生理适应过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 亚洲棉 GaMYB2 干旱模拟 上调表达
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陆地棉干旱胁迫响应基因GhGR的克隆及特征分析 被引量:14
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作者 宋贵方 樊伟丽 +4 位作者 王俊娟 王德龙 王帅 周凯 叶武威 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1644-1652,共9页
【目的】克隆陆地棉干旱胁迫谷胱甘肽还原酶基因(GhGR),并对其序列进行生物信息学分析和表达分析。【方法】利用RACE和RT-PCR技术克隆陆地棉谷胱甘肽还原酶基因的全长序列,应用生物信息学软件对获得的基因序列及编码的蛋白序列进行分析... 【目的】克隆陆地棉干旱胁迫谷胱甘肽还原酶基因(GhGR),并对其序列进行生物信息学分析和表达分析。【方法】利用RACE和RT-PCR技术克隆陆地棉谷胱甘肽还原酶基因的全长序列,应用生物信息学软件对获得的基因序列及编码的蛋白序列进行分析;通过基因枪转化和实时荧光定量PCR表达对该基因表达部位和表达模式进行分析。【结果】从陆地棉(Gossypium hirsutum L.)中克隆了谷胱甘肽还原酶基因GhGR,cDNA全长1 035 bp,其中,ORF为792 bp,编码263个氨基酸。氨基酸序列比对和同源性分析显示该基因与杨树(XP_002299276.1)、蓖麻(XP_002518118.1)、葡萄(CAN74593.1)同源性最高,分别为90%、91%和91%。系统发育树结果显示,GhGR与葡萄中该蛋白的亲缘关系最近。基因枪转化和实时荧光定量PCR分析表明GhGR定位于洋葱的细胞膜和细胞核膜,并且其表达量受干旱胁迫诱导上调表达。【结论】从陆地棉克隆得到谷胱甘肽还原酶基因GhGR,初步认为该基因对干旱胁迫有一定响应。 展开更多
关键词 陆地棉 GhGR 氧化胁迫 干旱胁迫 上调表达
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热诱导颊癌细胞凋亡过程中Bax基因表达及mR-NA的动态变化(英文) 被引量:1
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作者 何永文 边莉 梁薪华 《中国临床康复》 CAS CSCD 2003年第26期3584-3585,共2页
目的:探讨热诱导颊癌细胞凋亡过程中Bax基因蛋白及mRNA表达的动态变化,及其在细胞凋亡过程中的作用。方法:43℃水浴40min加热BcaCD885细胞,0,3,6,12,24,48h后收获细胞,采用流式细胞仪DNA蛋白质分析技术、RT-PCR技术检测诱导颊癌细胞凋... 目的:探讨热诱导颊癌细胞凋亡过程中Bax基因蛋白及mRNA表达的动态变化,及其在细胞凋亡过程中的作用。方法:43℃水浴40min加热BcaCD885细胞,0,3,6,12,24,48h后收获细胞,采用流式细胞仪DNA蛋白质分析技术、RT-PCR技术检测诱导颊癌细胞凋亡过程中的凋亡率、Bax蛋白及mRNA表达水平。结果:43℃水浴40min后,凋亡率、Bax蛋白及mRNA表达明显升高,与对照组相比,有显著的差异性(P<0.05)。结论:高温作为一种外来刺激信号通过上调bax基因的表达,诱导BcaCD885细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 颊癌 热诱导 细胞凋亡 BAX 基因表达
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